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重组效率文献资料
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高温促进含第1类整合子宿主菌的重组效率
目的 探讨高温对大肠杆菌BL21 (DE3)宿主中第1类整合子重组效率的影响.方法 用pUC19为载体构建高表达整合酶的重组质粒pUCINT,随后在pACYC184载体的不同位置分别插入整合子以及氨基糖苷腺苷转移酶(aadA2)基因盒,该重组质粒命名为pACINAD,将这2种相容的重组质粒转化大肠杆菌BL21 (DE3),将20株此菌株随机分成2组,每组各10株,分别在41 ℃和37 ℃培养24h后用荧光定量聚合酶链反应(PCR)测定发生重组反应的整合子的拷贝数和总的整合子的拷贝数,前者与后者的比值即为重组效率.结果 在41℃大肠杆菌BL21(DE3)宿主中所测得的重组效率为(1.8±0.5)×10-3,在37℃的重组效率为(1.8±0.5)×10-4.41 ℃组明显高于37℃组,差异具有统计学意义(t=9.266,P＜0.01).结论 高温可显著提高由整合酶介导的aadA2基因盒的重组效率.
