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Uqcrfs1文献资料
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大鼠Uqcrfs1重组质粒的构建及其在HEK293T细胞中的表达
目的:构建大鼠Uqcrfs1的重组质粒并检测其在人胚胎肾293T细胞中的表达.方法:应用RT-PCR方法从大鼠肾脏组织总RNA中扩增出编码Uqcrfs1的cDNA,克隆至pUM-T载体并测序,然后亚克隆至真核表达载体pcDNA3.1/V5-His,酶切鉴定及测序正确后以磷酸钙共沉淀法瞬时转染HEK 293T细胞,使用RT-PCR、Western Blot方法检测重组质粒在转录及蛋白水平的表达.结果:测序结果证实PCR扩增得到编码Uqcrfs1的cDNA序列正确;磷酸钙共沉淀法转染HEK 293T细胞后,在基因转录与蛋白表达水平,结果达到预期.结论:成功构建大鼠Uqcrfs1的重组质粒,该重组质粒可在HEK 293T中过表达.
