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人HMGB1诱导单核细胞分泌TNF-α的规律

别良峰;程晓东;苏明权;岳乔红;于文彬;郝晓柯

摘要: 目的: 探讨人高迁移率族蛋白1(HMGB1)诱导人单核细胞TNF-α的分泌规律和HMGB1在脓毒症中的作用. 方法: HMGB1的剂量效应组分别用含有0.1, 1.0, 10, 20和50 mg*L-1 HMGB1的培养基孵育与人单核巨噬细胞系THP1,共培养6 h,用双抗体夹心ELISA法测其上清中的TNF-α含量,采用流式细胞技术观察细胞的凋亡. HMGB1的时间效应组以含有20 mg*L-1 HMGB1的培养基、对照组以不含HMGB1的培养基、另外以含有20 mg*L-1 HMGB1和100 mg*L-1脂肪多糖(lipopolysaccharide, LPS)的混合组的培养基分别培养THP1细胞0, 2, 4, 6, 8, 10, 12和24 h,同上留取离心后的培养液上清,用双抗体夹心ELISA法测其上清中的TNF-α含量. 结果: 将HMGB1加入到单核细胞培养液中能明显刺激其TNF-α的分泌. 在0.1~50 mg*L-1范围内,HMGB1诱导THP1的TNF-α分泌增加,呈显著剂量依赖性关系,50 mg*L-1 HMGB1能明显诱导THP1细胞的凋亡;HMGB1组和HMGB1与LPS的混合组THP1的TNF-α分泌在0~24 h间呈双相性规律. 结论: 人HMGB1能诱导人单核细胞的TNF-α分泌与凋亡,初步证实HMGB1在脓毒症的发生、发展中发挥重要作用.

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