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过氧化氢诱导乳鼠心肌细胞凋亡及半胱天冬酶-3抑制剂的作用

程何祥;张荣庆;马颖艳;贾国良;李飞;胡涛;汝磊生

摘要: 目的观察外源性羟自由基对心肌细胞凋亡的诱导作用,并探讨其可能的信号转导通路. 方法①利用培养的第2代心肌细胞,随机分成4组,在终浓度为10-4 mol*L-1,10-3 mol*L-1的过氧化氢[一组加半胱天冬酶-3 (caspase-3)的抑制剂(DEVD-FMK) 10 μmol*L-1]无血清条件下培养24 h. 观察各组心肌细胞存活率,TUNEL法检测凋亡,透射电镜观察细胞超微结构,流式细胞仪检测细胞的凋亡率. 结果①外源性羟自由基对心肌细胞生长具有明显抑制作用. ②低浓度过氧化氢(100 μmol*L-1)可诱导培养的心肌细胞发生凋亡,心肌细胞呈现特征性超微结构变化,TUNEL检测呈现黄绿色荧光,流式细胞仪PI染色法呈现典型的亚二倍体峰. 高浓度时则主要致使心肌细胞坏死. ③ caspase-3抑制剂(DEVD-FMK)可阻断外源性OH-对心肌细胞生长的抑制作用,降低心肌细胞的凋亡率. 结论低浓度羟自由基能诱导心肌细胞凋亡,其信号转导通路包括caspase-3途径.

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