Vasostatin基因重组腺病毒载体的构建及其对胰腺癌生长的抑制作用

目的以复制缺陷型腺病毒为载体,构建vasostatin基因重组腺病毒,并观察其对胰腺癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用.方法以人肌肉cDNA文库为模板应用PCR的方法扩增出vasostatin的DNA片断,定向插入腺病毒穿梭质粒pshuttle-CMV经酶切、测序鉴定正确后,电穿孔法将重组穿梭质粒转化E. coli BJ5183-AdEasy-1感受态细菌,行细菌内同源重组.将抗性筛选和酶切鉴定正确的重组质粒pAd-CMV-vasostatin转染293细胞进行包装.病毒扩增纯化后,病毒感染人胰腺癌细胞,RT-PCR和Western印迹法检测vasostatin的表达状况.复制人胰腺癌裸鼠移植瘤模型,瘤内注射107pfu pAd-CMV-vasostatin、108pfu pAd-CMV-LacZ及PBS,观察移植瘤的生长曲线及瘤重.结果PCR产物电泳后可见长度为560bp左右的目的条带;酶切及测序鉴定表明穿梭质粒pshuttle-CMV中插入了vasostatin的DNA片断;卡那霉素抗性筛选及Pac Ⅰ酶切鉴定证实腺病毒重组质粒pAd-CMV-vasostatin构建成功;转染293细胞7天后观察到细胞病理学效应出现.PCR鉴定表明重组腺病毒中含有vasostatin片断.RT-PCR和Western印迹法证实vasostatin mRNA及蛋白的表达.治疗后3周pAd-CMV-vasostatin组移植瘤的体积及瘤重均显著小于pAd-CMV-LacZ组及PBS组.结论含有vasostatin基因的重组腺病毒构建成功,并可显著抑制人胰腺癌裸鼠移植瘤的生长.

拓扑替康促人卵巢癌顺铂耐药细胞株凋亡机制的初步研究

目的探讨拓扑替康(TPT)对人卵巢癌顺铂耐药细胞株A2780/DDP和COC1/DDP的杀伤和诱导凋亡活性及其作用机制.方法用MTT比色法测定TPT对人卵巢癌顺铂耐药细胞株A2780/DDP和COC1/DDP的杀伤效应;透射电镜和DNA凝胶电泳研究TPT对靶细胞的凋亡诱导活性;Western blot检测凋亡相关蛋白bcl-2和bax的表达.结果TPT对A2780/DDP和COC1/DDP细胞均有较强的体外杀伤作用,其IC50值分别为102.91 ng/ml和111.75 ng/ml;TPT能诱导A2780/DDP和COC1/DDP细胞产生凋亡,DNA凝胶电泳呈现典型的凋亡梯度,透射电镜观察到细胞核染色质固缩、边集,胞质浓缩,出现空泡等典型的凋亡超微结构改变;TPT不影响bcl-2蛋白表达,却能上调bax蛋白表达,增大bax/bcl-2比值,且呈剂量依赖性.结论TPT对人卵巢癌顺铂耐药细胞株A2780/DDP和COC1/DDP均有明显的杀伤和促凋亡作用,其机制可能与bax基因表达上调而提高bax/bcl-2比值有关.

MDR1短发夹RNA表达质粒的构建及其功能的初步研究

目的构建在哺乳动物细胞中表达MDR1短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)的表达质粒,并初步探讨其对耐药肝癌细胞MDR1 mRNA的抑制作用及抗肿瘤药物耐药性的影响.方法根据Genbank中MDR1 mRNA设计的两条多聚核苷酸序列,退火形成双链DNA,再与经双酶切后的载体PGE-1连接,构建pshRNA-MDR1重组质粒,在脂质体的介导下转染肝癌细胞株BEL-7402/ADM,RT-PCR分析MDR1 mRNA的表达,MTT法检测阿霉素对细胞的半数抑制浓度(IC50).结果PCR和DNA测序证实了表达质粒构建成功,并能明显地抑制BEL-7402/ADM MDR1 mRNA的表达,对阿霉素的耐药指数降低了17.5倍(299.2/17.1).结论构建的pshRNA-MDR1表达质粒能有效地抑制转染细胞MDR1 mRNA,从而提高肿瘤细胞的药物敏感性.

HCV C 蛋白调控肝门部胆管癌细胞中NF-κB活性的研究

目的探讨HCV C蛋白在肝门部胆管癌细胞中对核转录因子κB(NF-κB)调控作用.方法利用稳定表达HCV C蛋白的QBC939细胞株(QBC939 HCV C+),通过NF-κB报道基因分析法、凝胶迁移率分析(EMSA)检测HCV C蛋白增强肝门部胆管癌细胞NF-κB的DNA结合活性和反式激活活性.RT-PCR、Western blot检测HCV C蛋白对核转录因子κB抑制蛋白α(IκBα)mRNA及p50、p65、IκBα蛋白表达及IκBα蛋白磷酸化的影响.结果①EMSA结果显示QBC939HCV C+细胞系中NF-κB相对信号密度明显比QBC939细胞高.②将pNF-κB-lun表达质粒转染稳定表达HCV C蛋白胆管癌细胞系中,通过单光子检测仪检测荧光素酶活性,结果显示QBC939HCV C+细胞中活化NF-κB为12.8倍,而QBC939细胞中NF-κB为2.6倍.③RT-PCR显示IκBα mRNA在QBC939 HCV C+细胞和QBC939细胞中的表达无明显差异;Western blot结果显示稳定表达HCV C蛋白的QBC939 HCV C+细胞株的胞核中的p50、p65蛋白高水平表达,而未转染HCV C蛋白的QBC939细胞仅检测出极低水平的p50、p65蛋白.在QBC939HCV C+细胞胞浆中IκBα蛋白低水平表达,QBC939细胞高水平表达,但IκBα蛋白磷酸化水平则相反.结论HCV C蛋白通过增加IκBα降解激活的NF-κB在肝门部胆管癌的发生中起重要作用.

BNX小鼠人胃癌原位移植模型的建立及其生物学特性的观察

目的应用T、B、NK细胞联合免疫缺陷的BNX小鼠建立人胃癌原位移植高转移模型.方法将MKN-45细胞株接种至BNX小鼠皮下,成瘤后将肿瘤组织剪成小块通过手术移植至BNX小鼠的胃壁,观察肿瘤生长与转移情况,8周后对动物进行解剖.结果胃壁原位移植瘤浸润破坏胃壁各层组织结构,并直接扩散至周围脏器.肿瘤的移植成功率为100%(23/23),表现出很高的侵袭和转移特性:原位肿瘤平均体积2837.07±1044.04 mm3,局部和远处淋巴结转移率达83%(19/23),肝转移率为83%(19/23),肺转移率为65%(15/23),膈转移率为39%(9/23),发生腹腔种植与腹水的动物为35%(8/23),此外,还有个别脾转移.结论通过T、B、NK细胞联合免疫缺陷的BNX小鼠建立人胃癌原位移植模型可以更好地模拟人胃癌侵袭与转移本身的自然过程,对人胃癌防治及其转移机理的研究提供一个更为理想的模型.

胃癌细胞MKN28(p53-/-)对NSAIDs诱导凋亡敏感性的研究

目的1.明确非甾体消炎药(NSAIDs)能否诱导p53基因突变的胃癌细胞MKN28凋亡.2.明确NSAIDs对MKN28细胞凋亡相关基因bcl-2、bax表达的调控.方法1.通过MTT比色法检测NSAIDs对细胞生长活力的影响.2.应用丫啶橙染色、Annexin-Ⅴ/PI双染色、共聚焦显微镜、流式细胞术检测细胞凋亡.3.应用RT-PCR(逆转录-聚合酶链反应)方法检测bcl-2、bax基因水平的改变.结果1.NSAIDs药物吲哚美辛(Indo)和阿斯匹林(Asp)对胃癌细胞株MKN28均有生长抑制作用,且呈时间/浓度依赖性增强.2.在Indo 800μmol/L、Asp8 mmol/L作用48～96 h后,MKN28细胞凋亡数量稍有增多,但不具有统计学意义.3.随着药物作用时间的延长,MKN28细胞的bcl-2基因mRNA表达逐渐减弱,bax基因表达逐渐增强.结论1.NSAIDs可抑制MKN28胃癌细胞株增殖.2.NSAIDs不能诱导p53基因突变的MKN28胃癌细胞株发生显著的凋亡,提示p53基因突变可能阻断了NSAIDs诱导的细胞凋亡.3.NSAIDs可使MKN28细胞凋亡相关基因bcl-2和bax的水平呈现促进凋亡倾向的改变.

腹腔应用拓扑替康治疗人卵巢癌裸小鼠网膜移植瘤疗效观察

目的拓扑替康(TPT)静脉治疗卵巢癌疗效确切,但严重的血液学毒性反应限制了其应用.本文旨在通过体内实验探讨腹腔应用TPT治疗人卵巢癌的可行性.方法构建人卵巢癌SKOV3ipl裸小鼠网膜移植瘤模型,随机分为8组(10只/组),实验组分别腹腔注射TPT(1.5 mg/kg×2,3.0 mg/kg×2,6.0 mg/kg×2或10.0 mg/kg×1),或静脉注射TPT(6.0mg/kg×2或10.0 mg/kg×1);对照组分别腹腔注射顺铂(7.5 mg/kg)或等体积生理盐水.计算给药各组抑瘤率;用流式细胞仪评价用药后细胞周期和凋亡的改变.结果TPT疗效优于顺铂,且呈剂量与途径依赖性,其中腹腔化疗优于静脉化疗(P＜0.05),以腹腔单次大剂量TPT(10.0 mg/kg)冲击治疗效果佳,抑瘤率达70.4%,明显优于其他各组(P＜0.05),且裸小鼠耐受性好.TPT作用于SKOV3ipl细胞周期的各个时相,与给药浓度相关.TPT诱导细胞凋亡,且凋亡的程度与拓扑替康疗效呈正相关.结论TPT腹腔化疗治疗人卵巢癌体内实验安全可行,为其临床应用打下了基础.

HAb18G/CD147刺激人肝癌细胞分泌基质金属蛋白酶的机制探讨

目的探讨HAb18G/CD147诱导肝癌细胞基质金属蛋白酶(MMP)分泌和活化的机制.方法应用明胶酶谱分析方法观察HAb18G/CD147分子及其细胞内、外片段高表达对人SMMC-7721肝癌细胞分泌MMP(MMP-2和MMP-9)及其活化的影响,以及细胞内Ca2+信号调控在此过程的作用.结果HAb18G/CD147分子的高表达明显诱导MMP-2和MMP-9的分泌和活化,分泌总量升高(30.45±3.41)%(P＜0.01),而细胞内、外各片段的表达均不能有效刺激MMP的分泌与活化.细胞内Ca2+库释放诱导剂Thapsigargin(Tg)在未转染7721细胞可有效诱导MMP-2和MMP-9的分泌与活化,较对照组升高(58.63±31.04)%(P＜0.05),其诱导作用可受到细胞内Ca2+调节抑制剂S-亚硝基-乙酰青霉胺(S-nitroso-N-acetylpenicillamine,SNAP)的明显抑制,而HAb18G/CD147的高表达则抑制了以上细胞内Ca2+信号通路对MMP分泌和活化的调节作用,使转染的T7721细胞MMP的分泌与活化始终处于高水平稳定状态.结论全长的HAb18G/CD147分子可通过抑制细胞内Ca2+信号调控通路诱导肝癌细胞稳定高表达和活化MMP.

氟尿嘧啶代谢酶与胃肠道肿瘤化疗敏感性关系的探讨

目的探讨氟尿嘧啶类药物代谢酶--胸苷酸合成酶(TS)、胸苷磷酸化酶(TP)和二氢嘧啶脱氢酶(DPD)表达水平与人胃肠道肿瘤细胞化疗敏感性的关系.方法MTT法分析7株人胃肠道肿瘤细胞对5-FU和FdUrd的敏感性(半数抑制浓度,IC50),RT-PCR检测3种药物代谢酶mRNA的表达,ELISA测定DPD和TP蛋白含量.结果5-FU与FdUrd对肿瘤细胞的IC50值分别为1.28～12.26μmol/L和5.02～24.21 μmol/L,DPD mRNA水平和蛋白含量与5-FU的化疗敏感性呈负相关,TSmRNA水平与FdUrd敏感性呈负相关;DPD的mRNA和蛋白表达水平之间显著相关,但TP没有相关性.结论DPD和TS表达水平分别可以作为5-FU与FdUrd化疗敏感性的预测指标.

As2O3诱导白血病细胞凋亡过程中Ca2+的变化及其调节

目的研究Ca2+在As2O3诱导白血病细胞系NB4、K562、HL-60凋亡中的作用,及抗氧化剂NAC、NDMS、CAT和Cae+清除剂Quin 2对As2O3引起的Ca2+变化的调控作用.方法细胞内Ca2+用Fluo-3AM标记,并用流式细胞仪检测.结果0.6 μmol/L As2O3作用72 h能诱导NB4发生44.9%的凋亡,提高其浓度至2.7和8.1 μmol/L,也能诱导K562和HL-60分别发生58.3%和62.3%凋亡.As2O3能不同程度降低NB4和HL-60细胞内Ca2+水平,对K562细胞内Ca2+水平影响不大.抗氧化剂NAC、NDMS、CAT和Ca2+清除剂Quin 2对As2O3引起的NB4细胞Ca2+水平下降显示出抑制作用,对HL-60细胞内Ca2+水平下降无明显抑制作用.结论Ca2+水平下降在As2O3诱导的不同白血病细胞凋亡作用过程起着不同的作用.抗氧化剂NAC、NDMS、CAT和Ca2+清除剂Quin 2可不同程度地抑制As2O3诱导的NB4细胞凋亡时细胞内Ca2+水平下降.

uPA、uPAR与胃癌分期和预后

目的研究尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)及其受体(uPAR)与胃癌分期和预后的关系.方法采用ELISA检测胃癌患者血浆、肿瘤、瘤旁和转移组织中uPA和uPAR,与正常对照组血浆和组织比较.采用免疫组化方法检测肿瘤组织中p53、nm23和CEA表达.结果对照组血浆uPA和uPAR分别是0.65±0.21 ng/ml和0.71±0.22 ng/ml,胃组织中uPA和uPAR为0.71±0.33 ng/ml和0.88±0.42 ng/ml;而胃癌患者血浆uPA和uPAR分别是1.98±0.41 ng/ml和2.39±0.32ng/ml,癌组织uPA和uPAR是2.12±0.44 ng/ml和2.68±0.40 ng/ml,胃癌组血浆和肿瘤组织中uPA和uPAR均明显高于对照组,P＜0.05.uPA和uPAR在癌旁组织中为1.14±0.32 ng/ml和1.30±0.41 ng/ml,在癌转移灶中明显增高,分别是3.63±0.77 ng/ml和4.04±0.87 ng/ml.血浆uPA和uPAR在低分化腺癌分别是2.57±0.38 ng/ml和3.38±0.47 ng/ml比较其他病理类型(乳头状、管状和黏液腺癌)1.74±0.63 ng/ml和2.06±0.43 ng/ml明显升高,P＜0.05.血浆uPA和uPAR在Ⅰ期胃癌接近正常对照值,为0.90±0.21 ng/ml和0.99±0.34 ng/ml,Ⅱ-Ⅳ期有递增趋势,Ⅳ期为2.78±0.27ng/ml和3.12±0.31 ng/ml,Ⅱ-Ⅳ期与Ⅰ期比较P＜0.05.本组38例胃癌随访:Ⅰ-Ⅱ期5年生存率73.33%,Ⅲ期为52.63%,Ⅳ期为0%.p53、nm23和CEA与分期无关.结论uPA和uPAR随着胃癌分期进展有递增趋势,uPA和uPAR与胃癌浸润转移、病理分类和预后密切相关.

桥本病与甲状腺癌并存的临床分析

目的探讨桥本病与甲状腺癌并存的临床病理特点及外科治疗经验.方法对1986年1月～2003年12月44例桥本病与甲状腺癌并存患者临床病理特征进行分析.结果桥本病与甲状腺癌并存发生率为16.9%,其中1995年以前桥本病与甲状腺癌并存患者6例,占同期手术治疗的桥本病57例的10.5%,1995年以后为38例,占同期桥本病204例的18.6%(P＜0.01).全组乳头状癌31例(70.5%),滤泡状癌9例(20.5%),混合性癌3例,粘膜相关淋巴瘤1例.隐灶癌14例,占32%.术前B超9例提示有钙化(20.5%),15例行同位素扫描7例(46.7%)为冷结节,19例行血TGA、MCA测定10例(52.6%)升高.全组中双侧甲状腺癌5例(11.4%),有5例(11.4%)出现一侧或双侧颈淋巴结转移.手术方式主要为一侧或双侧甲状腺全切除或次全切除.结论桥本病与甲状腺癌并存发生率较高,其发病率近年来有明显增高趋势.临床治疗桥本病时应警惕并存甲状腺癌特别是隐灶癌的可能性.术中应警惕双侧甲状腺癌及淋巴结转移.

肿瘤患者放、化疗后外周血淋巴细胞损伤和免疫功能改变的研究

目的观察肿瘤患者放、化疗后外周血淋巴细胞损伤和免疫功能改变,并分析两者之间的关系.方法30例肿瘤患者分成放射治疗组(放疗组)和化学药物治疗组(化疗组),分别在放疗前后,化疗前后测定外周血双核淋巴细胞微核率(‰)、T淋巴细胞转化率(%)及血清免疫球蛋白(IgG,IgA,IgM),并进行对比分析.双核淋巴细胞微核率(MNR)用细胞松驰素B(CB)法测定,T淋巴细胞转化率(TLTR)及免疫球蛋白(IgG,IgA,IgM),均用常规方法测定.结果放疗组和化疗组在放、化疗后外周血双核淋巴细胞微核率显著性升高,而T淋巴细胞转化率和血清免疫球蛋白(IgG,IgA,IgM)均显著性降低.结论放、化疗后,两组患者的外周血双核淋巴细胞微核率(‰)与T淋巴细胞转化率(%)呈负相关关系.

Cyclin D2在人脑胶质瘤的亚细胞表达及意义

目的研究细胞周期素D2(cyclin D2)在人脑胶质瘤中的亚细胞表达.方法采用免疫组化方法检测52例人脑胶质瘤及8例正常人脑组织中cyclin D2蛋白和增殖细胞核抗原(PCNA)的表达.结果正常人脑组织中无cyclin D2表达,而在胶质瘤细胞胞核和胞浆中均发现cyclin D2的阳性表达,并随肿瘤恶性程度增高而表达增强.其中11例(21.2%)出现胞核染色,高恶性度胶质瘤(Ⅲ～Ⅳ级)与低度恶性胶质瘤(Ⅰ～Ⅱ级)标记指数与阳性率无显著性差异(P＞0.05);胞浆染色阳性率为42.3%(22/52),低、高恶性度组标记指数间差异显著(P＜0.05),各相邻级别之间无显著差异(P＞0.05).二元相关性检验显示cyclin D2胞浆染色标记指数与PCNA标记指数呈正性相关(r=0.478,P＜0.01).结论人脑胶质瘤细胞胞核和胞浆中均存在cyclin D2的表达,其中胞浆表达与肿瘤细胞的增殖活性密切相关,提示其可能在肿瘤细胞细胞质中发挥重要正性调控作用.

氩离子激光的光学特性对离体人膀胱癌与膀胱组织的鉴别诊断

目的研究4个波长(476.5,488,496.5,514.5 nm)的Ar+激光及其线偏振激光辐照人膀胱癌与人正常膀胱组织的光学特性参数的差异.方法实验采用了双积分球系统和光辐射测量技术的基本原理以及运用生物组织的光学模型.结果人膀胱癌和正常膀胱组织对4个波长中的任一波长的Ar+激光及其线偏振激光的总衰减系数、吸收系数、散射系数、平均散射余弦、光学穿透深度、折射率均有极显著性差异(P＜0.01),而在Kubelka-Munk二流模型下人膀胱癌和膀胱组织对4个波长中的任一波长的Ar+激光及其线偏振激光的吸收系数、散射系数、总衰减系数、有效衰减系数也有极显著性差异(P＜0.01).结论提示采用双积分球系统和光辐射测量技术的基本原理以及运用生物组织的光学模型,通过测定在Kubelka-Munk二流模型下人膀胱癌和正常膀胱组织分别对476.5,488,496.5,514.5 nm激光波长的光学特性参数的差异,可能是对病变的膀胱组织的鉴别诊断的一种有效方法.

直肠全系膜切除术后吻合口漏的危险因素分析和对策

目的探讨直肠全系膜切除(TME)术后吻合口漏的发生率、危险因素和治疗方法.方法607例距肛缘3～12 cm的中下段直肠癌行TME技术的直肠癌前切除术,对术后资料进行回顾性统计分析.结果2%的病例同时行横结肠造瘘术.术后吻合口漏发生率为5.8%,其中68.6%的病例通过单纯经双套管冲洗引流治愈,28.6%需行横结肠造瘘术,两组的治愈时间无差异.年龄、吻合技术和糖尿病与吻合口漏的发生密切相关(P＜0.05或0.01),而性别、肿瘤距肛缘距离、预防性造瘘和术前放疗与吻合口漏的发生无关.结论TME手术常规附加近端肠造瘘并无必要,对少数高危病例可能有价值.单纯经引流管冲洗可治愈大部分吻合口漏,少数病例需行剖腹探查肠造瘘术.

Survivin、Ki67在宫颈癌中的表达及临床意义

目的通过检测survivin、Ki67在宫颈癌中的表达,探讨其与宫颈癌组织增殖与凋亡的关系.方法应用免疫组化SABC、SP法.结果①宫颈癌中survivin、Ki67表达显著高于正常宫颈组织(P＜0.01);②survivin表达与年龄、临床分期和淋巴结转移有关,但与宫颈癌组织细胞类型及分化程度元明显相关关系.Ki67表达只与临床分期有关,与年龄、组织学细胞类型、淋巴结转移及分化程度无明显相关关系.③宫颈癌组织中survivin表达与Ki67表达相关.结论survivin、Ki67异常表达参与了宫颈癌的发生发展与凋亡抑制和增殖能力增强有关.

肿瘤库(用于分子生物学研究)的建立及管理

目的探讨分子生物学研究中肿瘤库的建库条件,标本的采集、保存和质量控制,以及肿瘤库的信息化管理等有关问题.方法手术或腔镜操作时采集的肿瘤组织(包括肿瘤、瘤旁和远端正常组织)以及肿瘤患者的血清/血浆标本和从肿瘤组织中提取的核酸、从血液中分离的淋巴细胞、干细胞等肿瘤资源及正常人的血清标本按分子生物学实验要求分装处理后液氮或-80℃深低温冷冻保存;开发出一套信息管理系统应用于肿瘤库的管理,系统功能包括:患者临床资料、随访信息、辅助检查信息、标本基本信息、标本存放位置坐标、标本使用与废除管理、实验结果登录、综合查询等.结果1999年12月至2003年12月收集标本达3138份,包括良恶性肿瘤共37个病种/病理类型.已向市内外提供标本320份,其中市内240份,省外80份,用于DNA、RNA和蛋白的相关研究,效果良好.结论肿瘤库的建立,可向研究者们随时提供经确诊的、合乎现代分子肿瘤学研究要求的各种肿瘤标本和正常对照标本,有利于有效地利用肿瘤资源.

斯普林在进展期胃癌综合治疗中作用的临床研究

目的观察斯普林在进展期胃癌综合治疗中的作用.方法将86例进展期胃癌病人随机分成两组:一组为研究组(45例):斯普林联合化疗,另一组为对照组(41例):化疗组.结果研究组总有效率为62.1%,对照组总有效率为42.6%,研究组高于对照组(P＜0.05);研究组病人的不良反应明显轻于对照组;研究组病人的Karnofsky评分高于对照组(P＜0.05).结论斯普林联合化疗具有抑制肿瘤生长、改善生活质量、提高患者对化疗耐受性的作用.

基因技术在逆转肿瘤细胞多药耐药性上的应用

MDR(multiple drug resistance)调节剂或化学增敏剂可通过抑制P-gp输出泵的活动来逆转经典的耐药表型.应用MDR调节剂的一个障碍在于所需治疗剂量下的内在毒性.例如,环孢菌素A可引起心脏功能衰竭、高血压、高胆红素血症和免疫抑制等.并且肿瘤细胞可形成针对所用化学增敏剂的抵抗,即所谓的第三抵抗.因此,很有必要发展一些有选择性的、低毒高效的策略来克服MDR.研究表明,肿瘤细胞产生MDR的根本原因是某些基因不协调表达,导致某些与MDR相关的蛋白质和酶上调或下降,从而产生耐药.因此从理论上讲,在基因水平逆转MDR将是解决问题的关键.目前此方面的研究主要集中在MDR1基因及某些癌相关基因.反义核酸技术给耐药逆转提供了新的高效特异性的方法,较传统的MDR逆转方法有较多优势.近来发展起来的RNA干涉技术,为肿瘤多药耐药的基因逆转提供了新的方法.

间歇性雄激素抑制:晚期前列腺癌治疗的又一选择

目前晚期前列腺癌内分泌治疗的金标准是持续性雄激素抑制(Continuous androgen suppression,CAS).然而,CAS存在以下缺点:可能导致前列腺癌的雄激素依赖状态迅速丧失,使预后更差;使患者生活质量下降;长期雄激素抑制导致诸多的副作用;维持治疗的费用高昂.因此,人们试图寻找一种更为理想的治疗方式.

40例前列腺癌放射治疗疗效分析

目的探讨外照射结合Ir192模板插植后装治疗前列腺癌的疗效.方法40例前列腺癌患者采用18MV X线外照射,总剂量为40 Gy/20Fx,在接受外照射2周内进行Ir192模板插植后装治疗.结果全组中位随访时间29个月,5年总生存率61.2%.Ⅱ级、Ⅲ级急性泌尿系统反应各1例,Ⅲ级晚期泌尿系统反应1例,Ⅱ级、Ⅲ级急性胃肠道反应分别为2例、1例,Ⅲ级晚期胃肠道反应1例.结论外照射结合Ir192模板插植后装治疗是一种安全、有效的前列腺癌放射治疗方案,治疗的副反应尚能接受.

20例食管癌肉瘤的诊断与治疗分析

目的食管癌肉瘤是一种罕见病,通过回顾分析本组较大样本食管癌肉瘤的病理及临床特点,探讨其诊断治疗.方法对20例食管癌肉瘤病人的临床资料进行回顾性分析.结果食管癌肉瘤多为覃伞样、息肉样腔内生长,个别呈浸润生长.光镜下肉瘤与癌两种成份共存,瘤体以肉瘤成分为主,表面及蒂多分布癌组织,活检常显示为鳞癌,故术前多不能明确诊断.20例患者中9例侵犯粘膜层,1例浅肌层,4例深肌层,6例侵犯外膜.4例出现淋巴结转移,淋巴转移率20%,转移成分3例鳞癌,1例肉瘤.手术切除率100%.1、3、5年生存期分别为85%、68%、68%.结论食管癌肉瘤是一种低侵袭性,低淋巴转移率,预后尚佳的肿瘤.X线表现为食管腔内息肉样的充盈缺损,轮廓较为光滑整齐,粘膜显示"涂抹征".食管镜活检多显示鳞癌或低分化癌,术前难以确诊.治疗以手术切除为主,必要时辅以放化疗.

胸腔灌注DDP与斯奇康加全身化疗治疗恶性胸腔积液

我科自2002年6月～2004年5月,采用胸腔留置引流及灌注DDP与斯奇康加全身化疗治疗恶性胸腔积液(MPE)28例,获得了满意的临床疗效,报告道下.

DNA修复基因XPD多态性和肝细胞肝癌危险性的病例-对照研究

目的探讨DNA修复基因XPD多态性和肝细胞肝癌(Hepatocellular carcinoma,HCC)发生的关系.方法应用病例-对照研究方法,选择了江苏启东地区72例HCC患者以及137例正常对照,以年龄(±3岁)和性别为配对因素进行了配对,对XPD-751位点基因多态性作PCR-RFLP分析.结果XPD-751位点的Gln/Lys或Gln/Gln基因型的发生频率在病例组中明显高于对照组,差别有显著性(OR=3.13,95%CI=1.16～8.47),在调整了HBV感染因素后,差别的显著性虽然消失,但可信限下限位于临界处(OR=2.70,95%CI=0.98～7.42).对HBV感染患者并同时伴有XPD-751位点为Gln/Lys或Gln/Gln基因型的个体,其HCC发生的危险性是HBV阴性及XPD-751位点为Lys/Lys野生型基因型个体的6.68倍,差别有显著性(OR=6.68,95%CI=3.43～13.01).结论本次研究的结果首次应用病例-对照研究发现XPD-751位点基因多态性可能影响HCC的发生,同时指出XPD-751位点基因多态性和HBV感染之间可能存在基因-环境交互作用.

上海市不同出生队列妇女月经生育等因素变化趋势分析

目的通过不同出生队列妇女月经生育等因素变化趋势的分析,为上海市区女性乳腺癌发病率显著上升的趋势作出可能的解释.方法利用出生队列的方法对居住在上海市长宁区1927年～1961年出生的74943名中老年妇女的月经生育状况、更年期激素替代疗法的应用和绝经后体重增长的情况进行了分析比较.结果随着出生年代的推进,上海市区妇女月经初潮年龄提早,绝经年龄推迟,行经年数延长,婚育年龄推迟,哺乳时间缩短,50岁较20岁时体重增加更多.结论本研究结果为解释上海市区女性乳腺癌发病率显著上升的趋势提供了客观的依据.

第六届"德彪-CCRF"中国奖(2005年度)

人卵巢癌相关候选基因HE4(WFDC2)的转录调控主要由Sp1与位于-71和-48的Egr-1位点结合所介导

目的阐明HE4基因转录调控机制的细节.方法1.用半定量RT-PCR的方法评估HE4基因在肿瘤细胞株中的表达情况;2.以荧光素酶报告基因载体为基础,对HE4基因的上游顺序构建了3'、5'缺失突变和一系列连接体扫描突变;3.通过瞬时转染/体外双荧光素酶报告系统对这些重组质粒中插入片段进行启动子活性的分析;4.针对蛋白和关键顺式区域的结合的特异性和能力,开展泳动滞后和抗体介导的超迁移分析.结果通过对(-1860/+29)的HE4基因上游片段及其剪切体的分析,将HE4基因小启动子确定为-107/+15的DNA片段.通过对连接体扫描突变体的分析,将关键的顺式作用元件确定在W45(-71/-48)片段,生物信息学提示该区存在两个Egr-1位点.通过用已知的反式作用因子与报告基因质粒分别进行共转染,提示Sp1是为有效的反式作用因子,而不是Egr-1.通过泳动滞后和抗体介导的超迁移实验,证实Sp1确实是参与作用的转录因子.结论HE4基因的转录活性主要是由转录因子Sp1与位于(-71/-48)区域的两个Egr-1位点结合所介导的.