中华血液学杂志
Chinese Journal of Hematology 중화혈액학잡지
- 主管单位： 中国科学技术协会
- 主办单位： 中华医学会
- 影响因子： 1.17
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 0253-2727
- 国内刊号： 12-1090/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
-
hTERT反义寡核苷酸对HL-60细胞致瘤性的影响及其诱导凋亡作用
目的研究人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因反义寡核苷酸(ASODN)对HL-60细胞致瘤性的影响及其诱导凋亡作用.方法用流式细胞术检测hTERT ASODN转染HL-60细胞72 h后细胞凋亡,琼脂糖凝胶电泳检测凋亡细胞DNA梯带;将转染及未转染寡核苷酸的HL-60细胞分别接种BALB/c裸鼠,观察成瘤情况,切片观察移植瘤组织形态;另取10只BALB/c裸鼠,改进成瘤方法使其均匀成瘤后分成两组,在瘤体局部分别注射ASODN、磷酸盐缓冲液(PBS),经7 d治疗后测量瘤体并切片观察其细胞形态变化,采用TUNEL方法检测细胞凋亡.结果hTERT ASODN作用于HL-60细胞72 h后,流式细胞术检测出早期凋亡峰,琼脂糖凝胶电泳显示DNA梯形条带,SODN组及空白对照组未检测出凋亡峰及DNA梯形条带.ASODN转染的HL-60细胞组BALB/c裸鼠接种后第16～17天成瘤,5只中2只成瘤,未转染组在第12～13天成瘤,5只中4只成瘤,成瘤后ASODN治疗组瘤组织间质及血管较少,PBS治疗对照组瘤组织间质发达,血管丰富.成瘤后ASODN治疗前肿瘤体积为(100.9±24.6)mm3,治疗后肿瘤与PBS对照组比较,生长明显减缓[瘤体积分别为(422.7±326.4)mm3和(786.4±357.6)mm3](P＜0.05).组织切片显示,ASODN治疗组瘤组织中可见大量细胞呈现凋亡形态,PBS治疗组则少见凋亡细胞.TUNEL检测显示,ASODN治疗组瘤组织中阳性细胞数较PBS治疗组明显增多(P＜0.05).结论hTERT基因ASODN能够诱导HL-60细胞凋亡并降低其在BALB/c裸鼠体内的致瘤性,抑制移植瘤增长速度.
-
急性髓系白血病患者PDGFRβ和SHIP基因突变及其单核苷酸多态性研究
目的探讨Ⅲ型受体酪氨酸激酶信号通路中PDGFRβ以及SHIP等基因突变和单核苷酸多态性(SNP)在急性髓系白血病(AML)发病中的意义.方法采用基因组PCR、RT-PCR、直接测序以及基质辅助激光吸收电离子化-飞行时间质谱技术(Mass-ARRAY)等方法,在273例AML患者中检测PDGFRβ以及SHIP等基因突变和SNP.结果PDGFRβ R685C和SHIP Q1153L为新发现的突变,阳性率分别为0.73%和0.36%.结论PDGFRβ R685C和SHIP Q1153L突变有可能参与急性髓系白血病的发病机制.
-
富血小板血浆优化培养间充质干细胞的实验研究
目的探讨以人富血小板血浆(PRP)取代动物血清培养可供临床应用的间充质干细胞(MSC)的新方法.方法骨髓标本取自行全髋关节置换术的造血功能正常患者的近端股骨.有核细胞2×105/cm2接种于25 cm2培养瓶中培养MSC,比较含12.5%胎牛血清(FCS)和12.5%马血清的完全Dexter培养液,含10.0%FCS的α-MEM培养液和含5%PRP的α-MEM培养液三种培养体系的扩增效果.有核细胞1×106与采自健康供者髂骨的相同数量的骨髓细胞分别接种于25 cm2培养瓶,14 d后计数成纤维细胞集落(CFU-F).结果从近端股骨中分离和扩增的细胞呈典型的成纤维样细胞形态,表型鉴定CD34、CD45阴性,SH2(CD105)、SH3(CD73)、Thy-1(CD90)阳性,体外诱导可向成骨细胞分化.其中含5%PRP的培养体系较其他两种传统培养方法具有显著增强的MSC扩增效果且不改变细胞表型及分化功能;来源于近端股骨的骨髓细胞CFU-F较常规髂骨穿刺物显著增高(分别为89±17和16±5,P＜0.01).结论建立以PRP取代FCS的培养体系,并采用取自外科手术中近端股骨的骨髓标本可在体外高效扩增可备临床细胞治疗应用的MSC.
-
肿瘤坏死因子凋亡诱导配体诱导白血病细胞凋亡中抵抗机制的初步探讨
目的初步探讨肿瘤坏死因子凋亡诱导配体(TRAIL)诱导白血病细胞发生凋亡过程中可能存在的抵抗机制.方法用流式细胞仪检测经TRAIL处理后,白血病细胞系K562、CEM凋亡情况及线粒体跨膜电位的改变;采用Western blot检测TRAIL处理后细胞凋亡相关蛋白Bcl-xL、Bax及内源性半胱天冬酶(caspase)-8表达情况;并用ELISA法检测核转录因子(NF)-κB活性变化.结果经TRAIL处理后,K562、CEM细胞出现不同程度的凋亡,其凋亡指数分别为29.98%、14.1%,后者显著低于前者(P＜0.001);线粒体跨膜电位下降,分别为73.25%、25.4%(P＜0.01);CEM细胞中内源性caspase-8的表达水平低于K562细胞,并且两者均表现出Bcl-xL表达上升、Bax表达下降,在CEM细胞中Bcl-xL/Bax比例为18.8,显著高于K562细胞中Bcl-xL/Bax的比值(5.1);并且在TRAIL处理CEM细胞后早期(2 h)即表现出NF-κB活性增加(0.48μmol·L-1·mg-1蛋白),高于K562细胞(0.326μmol·L-1·mg-1蛋白)(P＜0.001).结论TRAIL诱导白血病细胞凋亡过程中,CEM细胞对药物抵抗原因可能与CEM细胞内源性caspase-8表达水平较低、线粒体内膜敏感程度降低、NF-κB活性早期增加以及Bcl-2家族蛋白的表达变化有关.
-
人胚胎AGM区基质细胞在体外培养中对脐血CD34+细胞的支持作用
目的探讨人主动脉-性腺-中肾(AGM)区基质细胞对脐血CD34+细胞的造血支持作用.方法采用免疫磁珠法分离人脐血CD34+细胞,接种于底层已制备好的人AGM区基质细胞S1～S5饲养层的24孔板中,同时设无饲养层组及取自同期胚胎的躯干成纤维(hFT)细胞为对照,体外培养28 d,每7 d收获细胞并检测总数,流式细胞术检测CD34+、CD34+CD38细胞含量,并行造血细胞集落培养.结果在未加外源性造血生长因子的条件下,5株人AGM区基质细胞hAGMS1～S5对造血细胞总数、CD34+及CD34+CD38细胞、造血细胞集落均有不同程度的扩增及维持作用,与无饲养层组、hFT细胞组比较差异有统计学意义(P＜0.05).细胞总数在21 d达到峰值[扩增(25.13±4.83)倍],CD34+、CD34+CD38-细胞在扩增14 d达到峰值[(2.68±0.51)倍、(2.38±0.45)倍],高增殖潜能集落形成单位(HPP-CFU)亦在14 d达到峰值[(2.62±0.85)倍].hAGMS1～S5的造血支持作用组间比较差异亦有统计学意义(P＜0.05),其中hAGMS3、S4优于S1、S2及S5.结论人AGM区基质细胞对脐血CD34+细胞具有维持及扩增作用,特别是hAGMS3、S4两株细胞具有更好的维持作用,为胚胎早期造血发生机制和诱导胚胎干细胞造血分化研究提供了重要的模式细胞和基础资料.
-
人单核细胞白血病细胞系在裸鼠体内的生长及浸润:中枢神经系统白血病模型的建立
目的用人单核细胞白血病细胞系建立一种可重复的裸鼠中枢神经系统白血病(CNSL)模型.方法对4和6周龄BALB/c裸鼠进行切脾,环磷酰胺腹腔注射及全身亚致死剂量照射等预处理(SCI预处理),经尾静脉接种1×107人单核细胞白血病细胞系SHI-1细胞,应用RT-PCR、组织病理切片、免疫组织化学及流式细胞术检测裸鼠各脏器中SHI-1细胞浸润生长情况.结果裸鼠的生存期为33～46 d,部分裸鼠于5周后出现双下肢截瘫.SHI-1细胞可浸润多种脏器,并可形成淡绿色肿块,病理示在肝、肺、肾、睾丸等多部位发现有SHI-1细胞浸润,椎体及颅骨骨髓腔中有大量白血病细胞浸润,并可突破骨髓腔向椎管及颅内浸润,多位于硬膜及蛛网膜下腔,并可由脑皮层表面向深部脑组织浸润.结论SHI-1细胞可于经SCI预处理的裸鼠中形成稳定的、可重复的CNSL模型,可用于对CNSL的实验研究.
-
p38对放线菌酮经线粒体途径诱导HL-60细胞死亡的影响
目的研究p38对放线菌酮(CHX)经线粒体途径诱导HL-60细胞死亡的影响.方法利用p38特异性阻断剂SB203580(SB)阻断HL-60细胞p38途径,分别设对照组、单纯SB组、CHX组和CHX联合SB组;于处理6,9,12,18,24 h利用碘化丙锭(PI)染色流式细胞术检测亚二倍体峰细胞比率;于处理6和18 h进行膜联蛋白V(AnnexinV)/PI双标流式细胞术测定凋亡和坏死细胞比率;于处理18 h利用JC-1染色流式细胞术分析,通过对FL2的划分比较不同处理时间高JC-1集合体量细胞比率;测定细胞JC-1集合体(FL2)和JC-1单体(FL1)平均荧光强度,并计算线粒体膜电势(△ψm,FL2/FL1).结果在CHX处理6 h HL-60细胞亚二倍体峰细胞比率显著高于对照组,在此过程中阻断p38途径则在处理9 h开始亚二倍体峰细胞比率显著高于CHX组.处理18 h凋亡细胞比率:CHX组[(27.9±0.52)%]和CHX联合SB组[(28.54±1.38)%]均显著高于对照组[(2.45±0.65)%](P＜0.01);CHX联合SB组与CHX组比较差异无统计学意义(P＞0.05).处理18 h坏死细胞比率:CHX组和CHX联合SB组均显著高于对照组(P＜0.01);CHX联合SB组显著高于CHX组(P＜0.01).此外,CHX组和CHX联合SB组高JC-1集合体细胞比率均显著低于对照组(P＜0.01),CHX联合SB组高JC-1集合体细胞比率显著低于CHX组(P＜0.01).处理18 h时各实验组△ψmCHX组(0.17±0.01)和CHX联合SB组(0.05±0.003)均显著低于对照组(0.38±0.02)(P＜0.01),CHX联合SB组△ψm显著低于CHX组(P＜0.01).结论CHX可诱导HL-60细胞凋亡和线粒体去极化,在该过程中阻断p38途径可使线粒体的去极化作用增强,本模型中p38途径可能与HL-60细胞的坏死密切相关.
-
异基因外周血造血干细胞移植患者肺部并发症的临床研究
目的探讨异基因外周血造血干细胞移植(allo-PBSCT)后肺部并发症的发生率、发病机制、危险因素及有效的治疗方法.方法对70例allo-PBSCT患者肺部并发症的临床资料进行总结分析.结果26例患者,31例次发生肺部合并症.感染性并发症共20例次,包括细菌性、真菌性、巨细胞病毒(CMV)间质性肺炎和肺结核,其中部分为2种以上的混合性感染;非感染性并发症共11例次,其中迟发性非感染性肺部并发症(LONIPC)9例,肺水肿1例,放疗所致间质性肺炎1例.由肺部疾病导致的死亡9例(12.9%).不含甲氨蝶呤(MTX)的移植物抗宿主病(GVHD)的预防方案,重度急性GVHD和慢性广泛性GVHD是allo-PBSCT后肺部感染的高危因素,而移植时疾病处于晚期状态及慢性广泛性GVHD则与LONIPC的发生显著相关.结论肺部并发症是allo-PBSCT后的主要合并症,针对病原的抗感染治疗及针对LONIPC的及早诊治甚为关键.
-
四嗪二甲酰胺对人白血病细胞系SHI-1细胞体外作用的研究
目的观察四嗪二甲酰胺(ZGDHu-1)体外抑制白血病细胞系SHI-1细胞增殖,诱导细胞分化和凋亡作用,并初步探讨其作用机制.方法将不同浓度ZGDHu-1与SHI-1细胞在体外共培养,用细胞计数、锥虫蓝染色、MTT法、5'-溴-2'脱氧尿苷(Brdu)-ELISA法观察ZGDHu-1对SHI-1细胞增殖的抑制作用;用细胞形态学、DNA含量测定及细胞周期分析、膜联蛋白V/碘化丙锭(AnnexinV/PI)双标记和Hoechst 33258荧光染色等分析细胞凋亡.通过NBT试验、细胞表面抗原CD11b、CD14、CD64检测和细胞形态学观察分化情况.用流式细胞术检测ZGDHu-1诱导SHI-1细胞分化和凋亡过程中P38MAPK和STAT3磷酸化表达的变化.结果ZGDHu-1能抑制SHI-1细胞增殖和活力,呈现作用时间和剂量的量效关系,48和72 h IC50值分别为250 ng/ml,85 ng/ml.ZGDHu-1作用于SHI-1细胞后大部分细胞阻滞于G2/M期,200 ng/ml ZGDHu-1作用48 h,SH-1细胞G2/M期比例为(48.4±2.1)%;出现典型的细胞凋亡形态改变,DNA片断化,检出亚G1峰,AnnexinV/PI和Hoechst 33258荧光染色显示凋亡细胞的特征性改变.SHI-1细胞经2～50 ng/ml ZGDHu-1作用3 d后,细胞发生部分分化,NBT阳性率增加,细胞表面CD11b、CD14、CD64表达上调.ZGDHu-1作用SHI-1细胞后磷酸化P38MAPK表达增强,而磷酸化STAT3表达降低.结论ZGDHu-1能抑制SHI-1细胞增殖和细胞活力,诱导细胞分化,促进细胞凋亡,其机制可能与P38MAPK的活化增强和STAT3的活化抑制有关.
-
短发夹RNA诱导survivin基因缄默对Jurkat细胞凋亡和增殖的影响
目的研究应用载体表达短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)干扰技术抑制人T淋巴细胞白血病细胞株Jurkat细胞survivin基因的表达,探讨survivin基因表达缄默对Jurkat细胞凋亡和增殖的影响.方法构建针对survivin基因的shRNA重组质粒并转染至Jurkat细胞,分别用多重PCR和Western blot法检测瞬时转染和稳定转染细胞survivin基因mRNA和蛋白表达水平的变化;流式细胞术检测瞬时转染和稳定转染细胞凋亡指数的变化,绘制细胞生长曲线,探讨survivin shRNA转染对细胞生长和增殖的影响.结果多重PCR结果示与无功能(对照组)shRNA处理组和磷酸盐缓冲液处理组比较,survivin shRNA瞬时转染和稳定转染细胞survivin基因mRNA表达均显著下降,抑制率分别为66.67%和60.69%(P＜0.05);Western blot结果显示survivin shRNA瞬时转染和稳定转染细胞survivin蛋白表达水平亦显著降低,抑制率分别为63.41%和60.18%(P＜0.05).流式细胞术检测瞬时转染和稳定转染细胞的凋亡率显著增加,分别为(22.41±2.83)%和(20.73±2.56)%(与对照组比较,P均＜0.05),细胞倍增时间显著延长.生长曲线显示稳定转染细胞的生长显著减慢.结论shRNA重组质粒介导的RNA干扰能明显抑制Jurkat细胞survivin基因mRNA和蛋白产物的表达,诱导细胞凋亡和生长抑制.
-
CD66c在成人急性白血病细胞上的表达及意义
目的探讨CD66c及其基因CEACAM6在成人急性白血病细胞上的表达及意义.方法体外培养HL-60、K562、LCL721.221和Jurkat等急性白血病细胞,RT-PCR检测急性白血病患者骨髓细胞和白血病细胞中CEACAM6 mRNA的表达,并用多参数流式细胞术检测白血病细胞及白血病患者骨髓细胞CD66c分子的表达.同时对199例白血病患者骨髓细胞作细胞遗传学分析,并对25例CD66c阳性急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)患者进行白血病微量残留病(MRD)分析.结果①HL-60、K562、LCL721.221和Jurkat细胞的细胞膜和细胞质CD66c均阴性.②127例急性髓系白血病(AML)患者中4例CD66c阳性(3.15%),以M2、M4为主;79例ALL中CD66c阳性28例(35.44%),均为B-ALL;CD66c只在common B-ALL(54例中有20例)和pre B-ALL(11例中有8例)亚型表达,8例Ph+B-ALL患者CD66c均阳性.③MRD阳性与阴性组患者比较,6个月内复发率差异有统计学意义(维持治疗14周时MRD阳性者8例,其中6例复发;MRD阴性者17例,其中2例复发).④CEACAM6 mRNA在CD66c阳性B-ALL细胞强表达,在HL-60细胞呈弱表达,在K562、LCL721.221和Jurkat细胞不表达.结论CD66c在ALL中阳性表达是白血病MRD检测的标志之一.CD66c抗原表达与CEACAM6 mRNA的表达高度相关.
-
法尼酰基转移酶抑制剂手霉素诱导急性白血病细胞凋亡的研究
法尼酰基转移酶抑制剂(farnesyl transferase inhibitors,FTI)是一类新的信号传导抑制剂,国内外的研究表明FTI对甲状腺癌、胰腺癌、肺癌、肠癌、肝癌等肿瘤细胞生长均有明显的抑制作用[1,2].手霉素(manumycin)从链丝菌培养液中发现,其酰胺侧链与法尼基焦磷酸酯(FPP)竞争性结合法尼酰基转移酶(FTase),具有抑制法尼酰基转移酶的作用[3,4],且特异性强,有可能成为治疗急性白血病(AL)的新药.我们观察了手霉素对AL细胞系HL-60和U937细胞的作用及其机制.
-
巨细胞病毒感染树突细胞及其对抗原呈递的影响
已有研究报道[1],CMV感染单核细胞后,可抑制其向树突细胞(DC)分化,而树突细胞是重要的专职抗原呈递细胞,在免疫应答中起关键的引导和调节作用,其成熟程度是引发T细胞依赖性免疫应答所必需.我们旨在探讨CMV能否感染不同成熟阶段树突细胞及其对该细胞抗原呈递功能的影响.
-
丹参酮ⅡA抑制体外巨核细胞生长和诱导Meg-01细胞凋亡
丹参酮ⅡA是从中药丹参提取的药物,含有邻醌结构,此化合物易被还原为二酚类衍生物,并进一步被氧化为醌.在生物体内的代谢产物参与机体的生物化学反应,而表现出多种药理作用.比如抑制血小板聚集,改善血液循环,还有抗炎、抗菌、抑制自由基、抗氧化、性激素样活性等多方面的作用.近来研究还发现丹参酮ⅡA有直接杀伤肿瘤细胞,诱导细胞分化和凋亡的作用[1].但是,丹参酮ⅡA对巨核细胞生长和凋亡的影响,国内外还未见到有关报道.因此,我们主要观察丹参酮ⅡA体外对巨核细胞生长的影响及诱导巨核细胞系Meg-01细胞凋亡的作用.
-
反义Bmi-1对K562细胞增殖的抑制作用及机制探讨
目前已知Bmi-1对于正常和白血病造血干细胞的自我更新至关重要[1,2],而且在正常和白血病造血干/祖细胞增殖活性的调控中Bmi-1是一个值得关注的基因[3,4].我们通过将反义Bmi-1表达载体用脂质体介导的基因转染法将其导入红白血病细胞系K562细胞中,观察其对K562细胞的体外增殖、细胞周期、P16蛋白及细胞凋亡的影响.探讨Bmi-1反义寡核苷酸抑制白血病细胞增殖的作用机制及在白血病基因治疗中的作用.
-
伊马替尼治疗特发性嗜酸粒细胞增多综合征一例
男,41岁.因乏力、发热2个月余就诊,否认传染病接触史、过敏史、哮喘史、特殊用药史.体检:体温38.1℃,贫血貌,浅表淋巴结无肿大,皮肤无瘀点、瘀斑,胸骨中下段压痛,心肺检查无阳性体征,肝肋缘下未及,脾肋缘下7cm,神经系统检查无阳性体征.
-
雷帕霉素成功治愈硬皮病样慢性移植物抗宿主病一例
患者,男,12岁.因眼睑水肿3 d,于2002年4月来我院就诊.经MICM分型确诊为慢性粒细胞白血病慢性期.患者与其母HLA高分辨配型为全相合,经家属同意后于同年9月行骨髓移植.
-
PU.1与造血系统发育和造血系统疾病的关系
Ets家族的转录因子在造血细胞的生存、生长和分化方面起着重要的作用.而PU.1是Ets家族中重要的转录因子.PU.1蛋白的C末端结合区域与Ets-1极其相似.与其他Ets家族转录因子一样,GGAA是PU.1的结合点.在体外,GAGGAA是PU.1的理想结合点.PU.1主要表达于造血细胞,包括CD34+细胞、巨噬细胞、B淋巴细胞、中性粒细胞、肥大细胞和原始红细胞等.近的研究表明,PU.1与中性粒细胞、巨噬细胞、巨核细胞、红细胞、成骨细胞、嗜酸细胞、树突细胞和肥大细胞等的发育、分化有着密切的关系,也与白血病、淋巴瘤的发生有关.对PU.1的研究是近年来的一个研究热点.
-
造血干细胞骨髓特定微环境的研究进展
造血干细胞(HSC)成功植入到骨髓需要两个条件:①HSC能归巢于骨髓特定的造血微环境;②HSC能在这一特定的微环境内维持长期造血.早在1978年Schofield就提出龛(niche)的概念来定义骨髓中适宜HSC生存的特定微环境结构[1].该假说认为HSC定位(lodge)于骨髓特定的三维环境内,以维持其自我更新的特性,而一旦离开龛,HSC在基质细胞和各种细胞因子作用下进入分化和增殖状态.
-
氟达拉滨联合不同剂量阿糖胞苷治疗复发、难治性急性白血病86例分析
氟达拉滨(Flud)、阿糖胞苷(Ara-C)、粒细胞集落刺激因子(G-CSF)组成的FLAG方案治疗复发、难治性急性髓系白血病(AML)的完全缓解(CR)率多在50%左右,而且不良反应明显.我们应用Flud联合不同剂量Ara-C治疗复发、难治性急性白血病86例,旨在探讨适合中国患者的佳方案.
| 年 | 期数 |
| 2019 | 02 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 z1 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2001 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2000 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 1999 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 1998 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 1997 | 02 |
