中华血液学杂志
Chinese Journal of Hematology 중화혈액학잡지
- 主管单位： 中国科学技术协会
- 主办单位： 中华医学会
- 影响因子： 1.17
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 0253-2727
- 国内刊号： 12-1090/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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人胎盘贴壁细胞的分离培养及造血相关因子表达
目的探讨人胎盘贴壁细胞(hPDAC)的分离培养及造血相关因子的表达.方法酶消化法分离培养人胎盘组织中贴壁细胞,并鉴定其生物学特性,用RT-PCR方法检测造血相关因子表达.结果成功分离培养出hPDAC,并证实其具有间充质干细胞特性,表达多种造血相关因子,包括SCF、FL、G-CSF、GM-CSF、M-CSF和IL-6.结论 hPDAC可为脐血CD34+细胞体外扩增提供潜在滋养层.
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CⅡTA反义cDNA抑制Hela细胞表面MHCⅡ类抗原的表达
目的探讨Ⅱ类主要组织相容性复合物(MHCⅡ)激活因子(CⅡTA)的反义cDNA对细胞表面MHCⅡ类分子表达的抑制.方法克隆3条CⅡTA反义片段(arⅡ1、arⅡ2、arⅡ3),并稳定转染Hela细胞.免疫组化、流式细胞术检测细胞核内CⅡTA蛋白及其调控的经典MHCⅡ(HLA-DR、-DP、-DQ)类抗原表达,RT-PCR法检测CⅡTA、经典MHCⅡ及恒定链的mRNA水平.结果三种反义片段中arⅡ2效果佳.在重组人IFN-γ诱导下,arⅡ2阳性Hela细胞与正义链组比较,CⅡTA蛋白抑制率达87.23%, HLA-DR、-DP及-DQ抗原诱导型表达分别降低了79.21%、90.31%及48.30%;同时CⅡTA、经典的MHCⅡ及恒定链的mRNA含量明显减少(P<0.05).结论 CⅡTA反义片段抑制了自身mRNA含量,从而阻止其调控的MHCⅡ分子的表达,为预防移植物抗宿主病提供了一种新思路.
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拓扑异构酶Ⅱ抑制剂足叶乙甙和阿霉素诱导AML1基因重排、融合
目的探讨拓扑异构酶Ⅱ抑制剂与染色体t(8;21)形成之间的关系.方法 K562细胞经不同浓度足叶乙甙(Vp16)和阿霉素(DOX)作用不同时间后用Southern杂交检测AML1、ETO基因重排,用筑巢式RT-PCR联合序列分析检测AML1-ETO融合基因.结果 10,50,100 μmol/L DOX作用16 h AML1基因重排阳性,50 μmol/L DOX作用48 h AML1-ETO融合基因阳性.结论拓扑异构酶Ⅱ抑制剂诱导AML1基因重排、融合是染色体t(8;21)形成机制之一.
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细胞周期素G1反义硫代脱氧寡核苷酸抑制HL-60细胞在裸鼠体内生长的实验研究
目的探讨细胞周期素G1(cyclin G1)反义硫代脱氧寡核苷酸对HL-60细胞在裸鼠体内生长的抑制作用.方法将裸鼠随机分成对照组、正义寡核苷酸(SON)组、反义寡核苷酸(ASON)组,其中SON组和ASON组接种转染的HL-60细胞(HL-60/S和HL-60/AS)前接受3Gy的60Co照射;将各组HL-60细胞接种于裸鼠皮下连续观察裸鼠的出瘤时间、瘤体大小,计算抑瘤率;病理切片用苏木精-伊红染色,电镜观察移植瘤组织的结构和细胞形态变化;用流式细胞仪(FCM)和RT-PCR分别检测cyclin G1 蛋白和mRNA水平的表达;电镜和FCM检测细胞凋亡.结果①cyclin G1 ASON组与SON组和对照组比较,对HL-60细胞在裸鼠体内生长有明显抑制作用,抑瘤率为69.4%.成瘤率、瘤重、瘤体积明显小于SON组和对照组.②镜下见cyclin G1 ASON组的HL-60细胞部分细胞形态发生改变,核分裂象少见,细胞的异型性较小,并且有凋亡细胞出现.结论 cyclin G1 ASON能明显抑制HL-60细胞在裸鼠体内的生长,并且促使部分细胞发生凋亡.
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p53基因诱导白血病细胞凋亡的机制研究
目的探讨p53基因诱导白血病细胞凋亡过程中内源性TGF-β1、TNF-α、端粒酶活性、Bcl-2表达的改变及其意义.方法利用脂质体将温敏型p53基因[pN53cG(Val135)]导入p53基因缺失的白血病细胞系HL-60、K562细胞,经G418筛选,获得稳定表达P53蛋白的抗性克隆细胞HL-60 pN53cG,K562-pN53cG细胞.采用缺口末端标记法、片段化DNA分析、RT-PCR、定量PCR、ELISA、PCR-ELISA、流式细胞术等方法检测外源性p53基因诱导白血病细胞凋亡过程中TGF-β1、TNF-α、bcl-2、端粒酶反转录酶(hTERT)mRNA表达变化、细胞上清TGF-β1水平和端粒酶活性及TGF-β1、TNF-α反义PS-ODNS对白血病细胞凋亡和Bcl-2蛋白表达的影响.结果①外源性野生型p53基因诱导细胞凋亡过程中内源性TGF-β1和TNF-α mRNA表达上调,bcl-2及hTERT mRNA表达下调,细胞培养上清TGF-β1蛋白水平明显升高,端粒酶活性水平下降;②TGF-β1、TNF-α反义PS-ODNS能够明显抑制野生型p53基因诱导细胞凋亡的发生,并使细胞bcl-2 mRNA及蛋白表达恢复到处理前的水平.结论 p53基因诱导白血病细胞凋亡可通过上调内源性TGF-β1和TNF-α水平,下调hTERT mRNA表达及端粒酶活性,抑制bcl-2基因表达而发挥作用.
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吲哚美辛诱导HL-60细胞凋亡过程中伴有β-catenin/c-myc信号转导途径的抑制
目的研究吲哚美辛对HL-60细胞的增殖抑制和凋亡诱导效应,从β-catenin信号转导途径揭示其分子机制.方法以不同浓度的吲哚美辛(0,25,50,100,200,400 μmol/L)作用于HL-60细胞,以锥虫蓝染色确定干预后的HL-60细胞活力;分析HL-60细胞增殖能力;DNA梯状胶电泳鉴定细胞凋亡.Western印迹证明凋亡调节蛋白caspase-3的裂解激活以及β-catenin,c-myc蛋白质的表达.结果吲哚美辛能明显抑制HL-60细胞增殖和诱导细胞凋亡,并表现出浓度和时间依赖性;HL-60细胞凋亡伴有caspase-3蛋白的表达上调和裂解活化;β-catenin蛋白表达呈吲哚美辛浓度依赖性下调和降解;c-myc蛋白表达呈吲哚美辛浓度依赖性下调.结论吲哚美辛能抑制HL-60细胞增殖和诱导HL-60细胞凋亡.β-catenin→c-myc信号转导途径受抑与吲哚美辛的抗白血病效应存在一定的联系.
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高三尖杉酯碱启动白血病细胞凋亡的比较蛋白质组学研究
目的解码高三尖杉酯碱(HHT)启动白血病细胞凋亡相关蛋白.方法在建立HHT启动HL-60细胞早期凋亡模型的基础上,分别提取未用和经HHT作用的HL-60细胞总蛋白,构建其相应的双向电泳图谱,应用图像扫描仪及图像分析软件获得差异蛋白斑点的信息 ,运用MALDI-TOF-MS分析呈显著性差异的蛋白斑点,将检测出的肽链质量输入蛋白质数据库获得差异蛋白质信息.结果 MHCⅠ类抗原分子、钙结合蛋白D-28K、氯通道蛋白6、癌蛋白OP18、锌指蛋白HELIOS和凋亡抑制物样蛋白2与HHT启动白血病HL-60细胞凋亡相关.结论运用比较蛋白质组学技术解码HHT启动白血病细胞凋亡相关蛋白,将有助于揭示HHT治疗白血病的机制, 为开发HHT相关的以诱导白血病细胞凋亡为靶位的药物先导化合物提供参考.
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蛋白转导结构域介导BCR/ABL对慢性粒细胞白血病患者T细胞的活化作用
目的研究蛋白转导结构域(PTD)介导的BCR-ABL融合蛋白对慢性粒细胞白血病(CML)患者T细胞的特异性活化作用.方法利用基因工程技术将PTD基因与CML b3a2 bcr/abl基因融合并原核表达,纯化的PTD-BCR/ABL融合蛋白与CML患者外周血单个核细胞(PBMNC)体外共孵育,用流式细胞仪分别检测CD4+、CD8+ T细胞的早期活化抗原CD69的表达.结果 PTD-BCR/ABL抗原体外激活CD8+ T细胞的佳浓度为100 μg/ml,时间为3 d.在此刺激条件下,15例CML患者中,10例表现CD8+ T细胞早期活化,CD69表达率为(15.01±3.75)%;4例表现CD4+ T细胞早期活化,CD69表达率为(10.32±3.08)%;其中有3例CD8+和CD4+ T细胞同时活化;而对照的BCR/ABL抗原刺激组无一例表现CD8+或CD4+ T细胞活化,其CD69表达率分别为(1.36±0.31)%和(1.41±0.43)%,与PBS空白对照组相比差异无显著性(P>0.05).结论 PTD能将外源性BCR/ABL抗原转导入抗原呈递细胞内,加工呈递后激活抗原特异性CD8+及CD4+ T细胞.
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p53基因修饰树突细胞诱导特异性抗肿瘤免疫应答的实验研究
目的探讨含p53基因的质粒pC53-SN3转染的树突细胞(DC)体外诱导特异性抗肿瘤细胞毒性T淋巴细胞(CTL).方法应用脂质体介导将质粒pC53-SN3转染肺癌患者单个核细胞[HLA-A2+]衍生的DC,然后与未经纯化的自体T细胞混合培养以诱导CTL(T-pC53-SN3),并通过乳酸脱氢酶(LDH)释放实验测定其对p53基因突变的HLA-A2+人肺癌细胞系Calu-6的杀伤活性.结果用质粒pC53-SN3转染DC后,发现CD1a、CD83显著升高,转染前表达率分别为(5.45±0.89)%、(3.26±0.47)%,转染后分别为(52.15±11.56)%、(25.78±12.35)%.但CD86、CD40、HLA-DR等DC相关标志与转染前无明显改变.LDH释放实验显示,以Calu-6作为靶细胞,T-pC53-SN3诱导的杀伤作用显著高于T-IL-2(IL-2 100 U/ml刺激外周血单个核细胞产生的CTL),效靶比为10∶1时其杀伤活性分别为(56.79±15.67)%和(39.33±9.88)%.同时细胞表面标记检测可见T-pC53-SN3细胞中以CD8+细胞为主,且CD69、CD45RO/CD8表达均显著升高.结论 p53基因修饰的DC对p53突变的人肺癌细胞系可有效诱导HLA-A2限制的特异性CTL.
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转mdr1基因诱导CIK细胞耐药并保持肿瘤杀伤活性
目的将多药耐药基因(mdr1)转入细胞因子诱导的杀伤(cytokine-induced killer,CIK)细胞,观察其是否产生耐药性并且保持肿瘤杀伤活性.方法用IFN-γ, CD3单抗, IL-2, IL-1等细胞因子体外诱导外周血单个核细胞获得CIK细胞.采用电穿孔方法将mdr1基因表达质粒pHamdr转入CIK细胞.转染后72 h提取细胞总RNA,DNA酶消化残留质粒DNA后进行RT-PCR,鉴定mdr1基因表达;流式细胞仪检测细胞膜耐药蛋白(P-gp)表达.四唑蓝比色法(MTT)检测转基因后CIK细胞对阿霉素和秋水仙碱的耐药性;同时检测转染前后CIK细胞对MCF7细胞(人类乳腺癌细胞系)的杀伤活性变化.结果转染mdr1后的CIK细胞mdr1 mRNA阳性,P-gp阳性的CIK细胞为21%～37%(平均27%).转染后CIK细胞获得了多药耐药性,对阿霉素的IC50值较转染前升高了22.3～45.8倍,对秋水仙碱的IC50值升高了6.7～11.35倍.转染前后CIK细胞对MCF7肿瘤细胞的杀伤活性无明显变化(P>0.05).结论 CIK细胞转入mdr1基因后获得了多药耐药性,转染后的CIK细胞仍然保持原有的肿瘤细胞杀伤活性.
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继发于急性早幼粒细胞白血病的治疗相关性急性单核细胞白血病一例
患者,男,14岁,因诊断急性早幼粒细胞白血病(APL)31个月,发现血常规异常3 d于2002年1月8日入院.患者首次发病于1999年4月,因面色苍白、皮肤有出血点入院.血常规:Hb 64 g/L, WBC 1.1×109/L, BPC 23×109/L.骨髓象:增生明显活跃,原始细胞0.040,异常早幼粒细胞0.720,该类细胞胞体大且有瘤状突出,胞核大且有扭曲折叠或凹陷,染色质呈颗粒状,核仁大,1～3个,胞浆灰蓝色,大部分充满细小的紫红色颗粒,极少数胞浆内有粗颗粒,可见Auer小体.POX染色强阳性率100%,诊断为APL.
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类再生障碍性贫血表现的急性淋巴细胞白血病前期一例
患者,男,48岁.因全身瘀点、瘀斑伴纳差1个月余,且伴外周血全血细胞减少于2002年9月21日入院.患者2002年8月受凉后出现上呼吸道感染卡他症状,3 d后自行缓解,同时出现右大腿抽搐,影响行动.8月16日起双上臂出现多处瘀斑,直径2 cm左右,同时出现纳差.
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骨髓坏死4个月后发生急性早幼粒细胞白血病一例
患者,女,21岁.因左髋部反复疼痛并发热半年于2002年6月25日来诊.患者2002年初出现左髋部疼痛,伴发热(38.5 ℃左右),无多汗、腹泻、食欲不振等症状,疼痛持续4～5 d后自行消失,体温趋于正常,间隔1个月左右再次发作,性质同前,有逐渐加重趋势.外院行CT及核磁共振检查示左髋关节囊内积液.查体发现左髋部无红肿,活动不受限,但局部有压痛.
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腺病毒介导CTLA4Ig基因在骨髓基质细胞中的表达
成熟T细胞在移植物抗宿主病(GVHD)的发生、发展中起着核心作用,而T细胞活化必须同时存在MHC/抗原肽-TCR和共刺激信号,缺少或阻断T细胞的共刺激信号将导致T细胞的无反应、细胞凋亡或克隆丢失,从而诱导免疫耐受.在众多的共刺激信号途径中,作用明显,肯定的是B7/CD28途径[1].
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天津地区2 854份脐血HLA-Ⅰ类等位基因多态性分析
我们对天津地区收集的2 854份汉族健康供者脐血进行HLA分型,样本量较大,可以反映出本地区特征,现报告如下.
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Evi-1反义寡核苷酸对人红白血病细胞系HEL的抑制作用
Evi-1 (ecotropic virus integration site 1) 定位于染色体3q26,为一原癌基因,与髓系恶性肿瘤的发生密切相关[1].Evi-1基因编码含两个锌指区的蛋白,能特异地结合基因启动子DNA 序列,发挥转录调节作用[2].正常人骨髓和外周血细胞Evi-1 mRNA表达阴性[1].我们的初步研究结果表明,近50%的骨髓增生异常综合征(MDS)患者Evi-1基因表达阳性,Evi-1的表达水平与MDS向急性髓系白血病(AML)演变有关[3,4].为进一步探讨Evi-1在AML 发生和发展中可能的作用,我们观察了Evi-1反义寡核苷酸(Evi-1-AS)对人红白血病细胞系HEL增殖的抑制作用.
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三氧化二砷治疗非单纯t(15;17)的急性早幼粒细胞白血病疗效观察
典型的t(15;17)(q22;q12)是急性早幼粒细胞白血病(APL)特有的染色体重排,全反式维甲酸(ATRA)治疗APL有较好的疗效.此外尚有一部分患者除t(15;17)外,还存在其它染色体畸变,如变异性染色体异常、复杂染色体异常,ATRA疗效欠佳.我们对非单纯t(15;17)的复杂染色体异常,用ATRA治疗无效或复发的APL患者,用三氧化二砷(As2O3)治疗取得较好的疗效,现报告如下.
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实时荧光定量RT-PCR检测TGF-β1 mRNA表达
利用荧光TaqMan技术(5′核酸外切酶活性)和一种可以实时检测荧光信号的仪器(ABI Prism 7700序列检测系统),在PCR反应完全封闭的情况下可实时检测PCR扩增的动力学变化,能够对标本扩增过程中的起始拷贝数快速、准确地定量,极大地克服了原有PCR技术存在的不足,已逐步成为PCR更新换代的新技术[1,2].目前常规检测β1转化生长因子(TGF-β1)表达多采用竞争RT-PCR及内源性参比基因RT-PCR,它们都属于PCR终点法检测,很难对起始模板数准确定量.我们利用实时荧光定量RT-PCR技术建立了检测TGF-β1 mRNA表达的方法.
| 年 | 期数 |
| 2019 | 02 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 z1 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2001 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2000 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 1999 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 1998 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 1997 | 02 |
