中华小儿外科杂志
Chinese Journal of Pediatric Surgery 중화소아외과잡지
- 主管单位: 中国科学技术协会
- 主办单位: 中华医学会
- 影响因子: 0.85
- 审稿时间: 1-3个月
- 国际刊号: 0253-3006
- 国内刊号: 42-1158/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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三种方法治疗儿童Delee B型肱骨远端经骺板骨折的疗效比较
目的 比较闭合复位、闭合复位内固定与有限切开复位内固定治疗儿童Delee B型肱骨远端经骺板骨折的疗效.方法 回顾性分析2008年1月至 2015年6月收治并获随访的36例儿童Delee B型肱骨远端经骺板骨折患儿资料,其中闭合复位组(闭合复位石膏固定)7例,男6例,女1例;平均年龄21个月.闭合复位内固定组(闭合复位克氏针内固定)11例,男8例,女3例;平均年龄23个月.有限切开复位内固定组(行小切口有限切开复位克氏针内固定)18例,男12例,女6例;平均年龄22.5个月.比较三组患儿术后1年肘关节功能及患侧与健侧提携角差别.结果 所有患儿获得12~60个月(平均26个月)随访.所有患儿均在术后4周获骨折临床愈合.术后1年时,按照Flynn肘关节评分标准评定疗效:闭合复位组优良率57.1%(4/7),闭合复位内固定组81.8%(9/11),有限切开复位内固定组100%(18/18).三组患儿患侧肘关节提携角与健侧差别分别为(17.4±5.2)°、(5.6±1.8)°、(3.5±0.8)°.三组比较及组间两两比较差异均有统计学意义(P<0.05).闭合复位组3例和闭合复位内固定组1例均因肘内翻行髁上截骨术.三组均无骨折延迟愈合、骨筋膜室综合征及医源性血管神经损伤等并发症发生.结论 治疗儿童Delee B型肱骨远端经骺板骨折,行有限切开复位经皮克氏针内固定,与闭合复位、闭合复位内固定相比,可获得更好的疗效,患侧后遗肘内翻程度更低.
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先天性胫骨假关节联合手术24例再骨折临床分析
目的 探讨先天性胫骨假关节经联合手术愈合后导致再骨折相关因素,为其临床治疗提供重要参考依据.方法 收集2007年4月至2015年8月在本院行先天性胫骨假关节联合手术再骨折患儿,分别对性别、是否合并NF1、踝关节是否固定、手术时年龄、再骨折时腓骨状态、再骨折处横截面积相对比进行无骨折生存分析.随访截止时间为2016年8月,获得再骨折24例(21例患儿,其中3例发生2次再骨折),男15例,女9例;16例合并I型神经纤维瘤;伴有腓骨假关节12例,7例伴有腓骨髓腔狭窄弯曲,4例伴有腓骨髓腔狭窄无弯曲,1例腓骨假关节由克氏针内固定.手术时平均年龄为3.4岁(0.8~7.4岁).平均随访时间为62.4个月(20~101个月);所有假关节愈合后均佩戴长腿保护性支具,均能在支具保护下负重行走.结果 男性组平均无骨折生存时间为25.9个月,女性组平均无骨折生存时间为22.4个月;两组之间无骨折生存率差异无统计学意义(P>0.05);无NF1组平均无骨折生存时间为20.4个月,合并NF1组平均无骨折生存时间为26.8个月;两组之间无骨折生存率差异无统计学意义(P>0.05);踝关节固定组平均无骨折生存时间为12.9个月,未固定组平均无骨折生存时间为23.9个月;两组之间无骨折生存率差异无统计学意义(P>0.05);手术时年龄≥3岁组平均无骨折生存时间为34.2个月,小于3岁组平均无骨折生存时间为15.4个月,两组之间无骨折生存率差异有统计学意义(P<0.05);伴有腓骨假关节组平均无骨折生存时间为12.5个月,腓骨假关节远端与胫骨假关节融合或腓骨完整组平均无骨折生存时间为34.9个月,两组之间无骨折生存率差异有统计学意义(P<0.05);横截面积相对比倒数值小于13.69组平均无骨折生存时间为33.3个月,大于13.69组平均无骨折生存时间为15.9个月,两组之间无骨折生存率差异有统计学意义(P<0.05).结论 采用联合手术时年龄应大于3岁,需要固定腓骨假关节,增大假关节愈合处横截面积有望获得较长的骨性愈合时间,从而提高远期愈合率.
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双向格林手术后房室瓣反流加重的原因分析
目的 探讨双向格林手术后房室瓣反流加重的原因.方法 2009年至2014年共523例患儿实施单纯的双向格林手术,其中术前存在左侧(体循环房室瓣)或共同房室瓣反流者420例,按原发畸形的种类及术前对房室瓣的描述加以登记.大多数患儿采用非体外循环下实施双向格林手术.术后复查心脏彩超评估房室瓣的反流变化.结果 术后体循环房室瓣反流改善的391例,术后体循环房室瓣反流无改善的18例,术后体循环房室瓣反流量增加的11例,其中死亡2例.术后体循环房室瓣反流少量及以下者,平均呼吸机辅助时间(6.3±2.4) h,术后房室瓣反流无改善或反流加重的患儿,平均呼吸机辅助时间(30.6±4.8)h.体循环房室瓣反流改善组患儿的原发畸形均为单心室类,体循环房室瓣反流于术后无改善者中8例为单心室畸形,10例为双心室类畸形,体循环房室瓣反流于术后加重者均为双心室类畸形.结论 双向格林术后原有的体循环房室瓣反流增加主要发生在双心室类畸形的患儿,术前房室瓣结构明显发育异常也是术后反流无改善的重要因素.
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先天性巨结肠患儿肠道内Smoothelin的表达
目的 本研究旨在探讨先天性巨结肠(Hirschsprung's disease,HD)肠壁中Smoothelin(SM)的变化和临床意义. 方法 自2007年1月至2013年1月,随机选取53例经病理证实先天性巨结肠患儿术中切除的肠段样本(狭窄段即无神经节细胞段、移行段和扩张段即有神经节细胞段).男33例,女20例,年龄3月龄~4岁(平均年龄1.3岁).取材分别为狭窄段、移行段和扩张段肠壁组织各1.0cm3大小,迅速用pH7.4的PBS液冲洗,不同浓度的蔗糖溶液中脱水,-80℃保存.同时留取相同部位的肠壁组织做组织HE染色病理学检查外,辅以PGP9.5、神经元特异性烯醇化酶(NSE)及S-100免疫组织化学染色,证实符合HD诊断.采用RealTime-PCR和免疫蛋白印记法方法从RNA和蛋白水平对SM在HD患儿肠道组织内的表达进行检测,并分析其参与HD发病过程的可能机制. 结果 SM mRNA表达在先天性巨结肠病扩张段、移行段和狭窄段分别为(27.13±16.44)×10-3、(21.60±10.02)×10-3和(19.66±9.92)×10-3;蛋白表达分别为43.13±12.44、36.83±9.43、23.63±4.97.移行段和狭窄段SM mRNA和蛋白均低于扩张段(P<0.05).结论 SM可能参与HD的发病过程.
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胆总管囊肿根治术后胆道梗阻的原因分析和治疗策略
目的 本研究旨在分析胆总管囊肿根治术后胆道梗阻的原因, 提出相应的治疗策略.方法 回顾2006年1月至2016年1月间47例在外院接受胆总管囊肿根治术后胆道梗阻,转入我院成功行腹腔镜二次手术的患儿,对其病因进行观察,分析及治疗.结果 出现胆道梗阻症状,即反复胆管炎或持续肝功能异常距离第一次手术的时间为术后2周~10.8年(平均1.7年).在外院接受抗炎保肝利胆PTD治疗时间2周~10年(平均2.7年),未见明显好转.接受二次手术的间隔时间为1个月~11年(平均4.5年).病理显示57.4% (27/47)患儿存在I~IV级肝纤维化.本研究发现术后胆道梗阻的原因如下:①异位肝右动脉前置压迫肝管空肠吻合口近端导致梗阻占27.6% (13/47).术中将异位肝右动脉重置于肝管空肠吻合口后方解除梗阻;②初次手术未解决伴发的单一或多处肝管狭窄占29.8% (14/47).二次手术中行肝管扩大成型+肝管空肠再吻合;③吻合口狭窄占42.6% (20/47).二次手术中行肝管空肠再吻合.中位随访时间为48个月(1~120个月),无1例发生胆道再梗阻或胆管炎.肝功能于二次术后1个月~2年恢复正常.结论 异位前置肝右动脉压迫、合并单一或多处肝管狭窄、吻合技术是胆总管囊肿术后胆道梗阻的原因.应尽早外科手术解除梗阻避免肝功能损伤及肝硬化.
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儿童输尿管肿瘤的诊治分析
目的 总结儿童输尿管肿瘤的病理类型、临床表现、诊断、治疗和预后,提高对该病的认识.方法 回顾性分析2011年1月至2015年10月我院收治的5例输尿管肿瘤患儿的临床资料,结合文献总结儿童输尿管肿瘤的病理类型、临床表现、诊断、治疗及预后.5例患儿均为男性,输尿管炎性肌纤维母细胞瘤3例,2例以腹痛就诊,分别为6岁和10岁,肿瘤位于输尿管下段,均行输尿管下段肿物切除+输尿管端端(输尿管膀胱)吻合,1例以尿痛并血尿就诊,年龄1岁9月龄,肿物来源于下段输尿管,经输尿管膀胱连接部长入膀胱,继发膀胱输尿管积水,经输尿管和膀胱联合切除肿物+输尿管膀胱再植术.结果 术后随访5~48个月,未见肿瘤复发及转移.恶性横纹肌样瘤1例6岁,以左下腹痛2周就诊,输尿管肿瘤边界不清与腰大肌肉和后腹膜粘连,切除肿物行输尿管端端吻合,术后ICE方案化疗一疗程后局部复发,放弃治疗,术后233d死亡.尤文/原始神经外胚层瘤1例12岁,以右侧腰痛10d就诊,肿瘤位于输尿管髂血管水平,行输尿管肿瘤切除术+输尿管端端吻合术,术后予CAV+IE化疗12个月,随访56个月,未见转移及复发.结论 输尿管肿瘤在儿童发病率极低,文献曾报道的病理类型包括炎性肌纤维母细胞瘤、恶性横纹肌样瘤、尤文/原始神经外胚层瘤、横纹肌肉瘤,术前无特异方法诊断,手术完整切除肿瘤并重建输尿管是治疗的主要方法,确诊需要结合病理检查,根据病理类型决定是否化疗,治疗后均需要长期随访.
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胆道闭锁患儿自身免疫性肝病抗体的筛查分析
目的 分析自身免疫性肝病相关抗体在胆道闭锁(BA)患儿血清中检出情况,探讨其在BA临床诊断及致病机制中的意义.方法 采用线性免疫印迹法分别检测81例BA组、48例疾病对照组(DC)和40例正常对照组(NC)血清中自身免疫性肝病IgG抗体,包括原发性胆汁性胆管炎相关抗体(PBC相关抗体,含AMA-M2、抗M2-3E 、抗Spl00、抗PML和抗gp210抗体)、自身免疫性肝炎相关抗体(AIH相关抗体,含抗LKM-1、抗LC-1、抗SLA/LP抗体)以及抗Ro-52抗体.结果 BA组患儿中PBC相关抗体组合检出率为18.5%,单一检出率由高到低分别为抗M2-3E抗体(14.8%)、抗PML抗体(3.7%)、抗gp210抗体(2.5%),AMA-M2(1.2%)和抗sp100抗体(1.2%),其中,抗M2-3E抗体阳性率明显高于NC组((χ)2=5.025,P=0.025),但与DC组(4.2%)无统计学差异(P>0.05).AIH相关抗体在BA患儿中仅检出抗LC-1抗体(7.4%),与DC组(6.3%)、NC组(7.5%)的检出率差异,无统计学意义(P>0.05).抗Ro-52抗体在BA、DC和NC组的检出率分别为6.2%,4.2%和5%,组间无统计学差异(P>0.05).结论 BA患儿血清中存在不同程度检出率的自身免疫性肝病抗体,PBC相关抗体检出率较高,尤其是抗M2-3E抗体.自身抗体的检出提示BA存在针对靶抗原的体液免疫,可能参与BA的免疫致病过程,但其在BA的血清学诊断意义仍待进一步研究.
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肝脏硬度测量在胆道闭锁与其他婴儿胆汁淤积鉴别诊断中的应用价值
目的 评价肝脏硬度测量在鉴别胆道闭锁与其他婴儿胆汁淤积时的应用价值,并与生化指标做对比研究.方法 选取2015年1月至2015年12月收治于首都医科大学附属北京儿童医院行手术探查及术后肝脏病理确诊的婴儿胆汁淤积患儿62例,男30例(48.4%),女32例(51.6%),平均手术时年龄(72.7±20.1)d;入组其他婴儿胆汁淤积患儿22例,男21例(95.5%),女1例(4.5%),平均手术时年龄(84.6±41.7)d.回顾性研究患儿术前3 d内的肝脏硬度测量值及生化指标,采用独立样本t检验、ROC曲线分析及配对卡方检验,对比评价肝脏硬度测量在鉴别胆道闭锁与其他婴儿胆汁淤积患儿时的应用价值.结果 比较两组患儿的肝脏硬度测量值、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、γ-谷氨酰转肽酶(GGT)、总胆红素(TBIL)、总胆汁酸(TBA),仅肝脏硬度测量值(12.29±6.99比8.05±2.97,P=0.007)和GGT(376.79±346.70比641.70±474.29,P=0.008)差异有统计学意义.对这两项指标进行ROC曲线分析,曲线下面积分别为AUROC(肝脏硬度测量)=0.743,AUROC(GGT)=0.696.取肝脏硬度测量界值8.1kPa时可获得大约登指数0.427,超过此值提示患儿为胆道闭锁的敏感度0.79,特异度0.64,阳性预测值0.86,阴性预测值0.52;取GGT界值344.15μmol/dl时可获得大约登指数0.359,超过此值提示患儿为胆道闭锁的敏感度0.68,特异度0.68,阳性预测值0.86,阴性预测值0.43.以手术探查实际结果为标准,分别对肝脏硬度测量(界值8.1kPa)和GGT(界值344.15μmol/dl)进行配对卡方分析(McNemar法),结果肝脏硬度测量8.1kPa(P=0.383),GGT344.15μmol/dl(P=0.019),提示当取肝脏硬度测量界值8.1kPa时对胆道闭锁和其他婴儿胆汁淤积的鉴别判断与实际情况无差异,而取GTT界值344.15μmol/dl时则与实际情况有差异.结论 肝脏硬度测量可较好的应用于胆道闭锁与其他婴儿胆汁淤积的术前鉴别,超过界值8.1kPa时能有效提示患儿为胆道闭锁.
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复发肝母细胞瘤的治疗进展
复发肝母细胞瘤依然是治疗的难点.本文介绍了肝母细胞瘤复发时的特点,包括复发部位、复发率、肿瘤复发相关的危险因素.同时重点介绍复发肿瘤的治疗方法,包括不同复发部位的肿瘤再手术、化疗、放疗、靶向治疗等,综述了这些治疗措施的临床应用或实验室研究进展,并分别比较了各种治疗方法的有效率.
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输尿管软镜在小儿泌尿外科中的应用进展
本综述介绍了输尿管软镜术在小儿泌尿外科的应用进展,总结了历年国际及国内范围的相关报道,分别从上尿路结石、上尿路肿瘤、肾盂输尿管连接部梗阻(UPJO)、肾盏憩室、尿道狭窄等方面做了详细的描述.通过讨论可知输尿管软镜术对小儿上尿路疾病的诊疗有着不可或缺的地位,对一些特殊的下尿路疾病也可发挥其独特的优势,取得良好的效果.但其在小儿泌尿外科的开展尚未成熟,仍需要更多规范的临床科研工作,推动小儿输尿管软镜手术的大量开展,以进一步提高我国小儿泌尿外科微创治疗水平.
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大鼠获得性漏斗胸形成过程中肺功能的观察
目的 观察获得性漏斗胸形成过程中肺功能的变化.方法 4周龄SD大鼠40只按数字随机法分为实验组和对照组各20只.实验组行经胸骨旁切断下位三对肋软骨观察漏斗胸形成,对照组不做任何干预,于术后3d和4周测定动物肺功能指标,包括:吸气阻力(Ri)、呼气阻力(Re)、肺的顺应性(Cl)、每分钟通气量(MVV)、用力肺活量(FVC)、第0.2s用力呼气容积(FEV0.2)、FEV0.2/FVC%、呼出50%FVC量时的流速(FEF50%)及用力大呼气流速(PEF)等,检测结果在组间进行比较分析.结果 造模术后1周内动物呼吸频率增快,其后漏斗胸逐渐形成并稳定.肺功能检测:术后3d测得Ri在实验组和对照组分别为(1.16±0.21)cmH2O·ml-1·s-1和(0.73±0.26)cmH2O·ml-1·s-1 (P=0.00),Re分别为(0.86±0.30)cmH2O·ml-1·s-1和(0.58±0.16)cmH2O·ml-1·s-1 (P=0.01),Cl分别为(0.05±0.01)cmH2O/ml和(0.09±0.02)cmH2O/ml(P=0.00),FVC分别为(3.69±0.10)ml和(3.89±0.19)ml (P=0.00),FEV0.2分别为(3.28±0.40) ml和(3.58±0.15)ml(P=0.02);术后4周测得Ri在实验组和对照组分别为(0.88±0.17) cmH2O·ml-1·s-1和(0.66±0.10)cmH2O·ml-1·s-1 (P=0.00),FVC分别为(5.76±0.52)ml和(5.47±0.20) ml(P=0.05).Ri在术后3d和4周的检测结果在同龄动物组间比较差异均有显著性,造模术后动物的吸气阻力增加(P<0.05);Re、Cl、FEV0.2和FVC等指标在术后3d的测得值组间差异有显著性,实验组Re增加而另3个指标减小(P<0.05),FVC在术后4周时组间比较P=0.05,而MVV 、FEV0.2/FVC%、PEF25%~75%和PEF等指标不论在术后3d还是4周的检测结果组间比较差异均无统计学意义(P>0.05).结论 通过胸骨旁切断下位三对肋软骨造成模型漏斗胸的形成过程中,幼鼠吸气和呼气阻力增加,胸壁和肺的顺应性均降低,随着漏斗胸的形成和稳定,肺功能重新建立适应,但胸廓的顺应性仍较正常降低.
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近五年中国大陆神经母细胞瘤基础研究述评
神经母细胞瘤(neuroblastoma,NB)是幼儿期常见的恶性实体肿瘤之一,国内外研究结果显示:NB的年发病率为0.3~5.5/10万,仅低于白血病和中枢神经系统肿瘤,其占据了15岁以下青少年恶性肿瘤的8%~10%,80%的NB病例发生于5岁以下的儿童[1-2].
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腹腔镜先天性巨结肠症手术操作指南(2017版)
一、前言先天性巨结肠症(Hirschsprung's disease,HD)又称为肠无神经节细胞症,是导致新生儿肠道梗阻和婴幼儿便秘的常见原因,其特点是肠管的黏膜下神经丛和肌间神经丛神经节细胞缺如,肠管丧失蠕动功能,导致肠道梗阻.HD的活产发病率约为1/5 000,病因不明,但已经公认HD是一种复杂先天性疾病,该病与基因结构异常有关[1-3].
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首届中国小儿泌尿外科将才工程培训班在洛杉矶儿童医院学习纪要
中国泌尿外科将才工程在中国工程院院士郭应禄教授的倡议和直接领导下于2002年启动,被尊称是培养中国泌尿外科优秀人才的"黄埔军校".迄今为止共选派了近一千多名顶尖的中国泌尿外科医生赴美国、欧州等国家以及台湾地区交流学习,培养出了一代中青年泌尿外科高层次人才,为加速中国泌尿外科事业进步,缩短与国际先进水平的差距做出了不可磨灭的贡献.在南加州大学医学院小儿泌尿外科谢会文教授的促进和协调下,首届中国小儿泌尿外科将才工程培训班一行14人于2016年10月29日至11月5日在中华医学会小儿外科学分会主任委员张潍平教授、前任主任委员孙宁教授、以及小儿外科学分会泌尿外科学组组长吴荣德教授带领下来到美国洛杉矶儿童医院学习交流1周.培训班学员均是来自北京、上海、广州、沈阳、成都、武汉、济南、福州的国内知名小儿泌尿外科中心的科主任和业务骨干.
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术前多基因联合检测指导化疗对进展期神经母细胞瘤儿童手术切除率及预后的影响
目的 探索术前多基因联合对进展期神经母细胞瘤(NB)患儿手术切除率及预后的影响.方法 收集2013年1月至2015年l月本院收治的采取手术治疗的进展期(Ⅲ、Ⅳ期) NB 患儿 46例,均经病理确诊.根据INSS 分期及COG危险度分层,本组病例Ⅲ期 19 例 (41.3%) ,Ⅳ期 27 例 (58.7%) ,中危15例(32.6%),高危31例(67.4%).46例患儿均行术前新辅助化疗及手术治疗.依据术前是否行多基因联合检测分为多基因联合检测化疗组和常规化疗组.多基因联合检测组患儿,根据药敏结果参考选择化疗方案,如常规方案中有一种药物敏感,则可选择该方案进行化疗.如常规方案中无敏感药物或化疗两个疗程后评估提示化疗效果欠佳,则根据药敏结果选用包含至少一个敏感药物的化疗方案.结果 3例ERCC阴性中危患者初使用方案无铂类药物,肿瘤缩小不满意,后根据药敏检测更换包含铂类药物方案后肿瘤缩小明显,均在更换方案后2~3个疗程行手术,其余4例中危患儿均提示TOPOIIα高表达,选用了OPEC方案及卡铂+足叶乙甙/阿霉素轮换.高危患儿中5例TOPOI阴性患儿初均使用CT方案,第二或三个疗程时根据药敏结果换用OPEC方案.其余患儿检测结果提示对铂类、足叶乙甙或蒽环类其中之一敏感,使用OPEC方案化疗.多基因联合检测组术前化疗3~6个疗程,平均 4.6个疗程,常规化疗组术前化疗4~8个疗程,平均 5.6个疗程.多基因联合检测组患儿肿瘤瘤体缩减率明显高于常规化疗组.两组患儿手术切除率差异无统计学意义.本资料所有患儿均获得随访,随访时间14~30个月,平均21个月,总体生存率为60.9%,中危组患儿2年生存率为80%,高危组期患儿2年生存率51.6%.多基因联合检测化疗组2年生存率为中危85.7%,高危53.8%,总生存率为65%,常规化疗组2年生存率为中危75%,高危50%,总生存率为57.7%.两组相比差异无统计学意义.结论 进展期神经母细胞瘤患儿联合检测ERCC1、TOPOI 和TOPOIIα表达指导个体化化疗,有效率有所提高,化疗不良反应减少,改善了患儿生活质量.
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神经母细胞瘤中SOX2、FoxM1表达与PI3K/AKT信号通路对其调控作用的实验研究
目的 分析神经母细胞瘤(NB) SOX2和FoxM1表达特点,初步探讨PI3K/AKT信号通路对SOX2、FoxM1调控作用.方法 收集重庆医科大学附属儿童医院2011年至2016年确诊的34例NB患儿手术切除组织标本,免疫组化(IHC)检测FoxM1蛋白表达水平并分析其与NB临床病理特征关系.20只荷瘤裸鼠数字随机均分为4组: LY294002组、LY294002对照组(C1)、IGF-1组、IGF-1对照组(C2).每2 d观察裸鼠一般情况并测量瘤体体积;HE染色观察瘤体病理形态学特征;Western blot、IHC检测瘤体组织pAKT、SOX2、FoxM1蛋白表达水平.结果 NB 组织:I-II 期FoxM1表达较III-IV期低,差异有统计学意义(P<0.05).裸鼠:干预结束后,与各自对照组相比,LY294002组裸鼠一般情况好,IGF-1组无差异.LY294002组瘤体体积(2 223.53±266.59) cm3,明显低于其对照组瘤体体积(3 239.61±519.15)cm3,差异有统计学意义(P<0.05),抑瘤率31.4%;IGF-1组瘤体体积(5 619.90±1 181.45)cm3,明显高于其对照组瘤体体积(4 118.52±749.29)cm3,差异有统计学意义(P<0.05);LY294002组裸鼠瘤体组织pAKT、SOX2蛋白表达水平下降,差异有统计学意义(P<0.05),FoxM1蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05),IGF-1组裸鼠瘤体组织pAKT、SOX2和FoxM1蛋白表达水平均升高,差异有统计学意义(P<0.05).结论 PI3K/AKT信号通路可能通过参与上调SOX2、FoxM1表达影响NB生长.
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miR-144通过靶定ITGβ1调控神经母细胞瘤的侵袭转移
目的 本研究旨在探讨miR-144对神经母细胞瘤的侵袭和转移的影响,并探索miR-144是否通过靶定ITGβ1调节神经母细胞瘤的侵袭和转移.方法 利用生物信息学技术预测miR-144的靶基因ITGβ1,应用荧光报告基因检测以及荧光定量PCR、Western Blot实验对靶基因进行验证.在神经母细胞瘤SH-SY5Y和SK-N-BE分别瞬时转染化学合成的成熟双链miR-144和靶基因敲降质粒及对照质粒,建立过表达miR-144细胞模型和靶基因敲降细胞模型.通过 Transwell侵袭实验和划痕实验检测细胞的体外侵袭和转移能力.结果 Transwell实验结果表明,在神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y和SK-N-BE中过表达miR-144后,细胞的侵袭数目分别为41±2和55±2,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.01).抑制ITGβ1基因的表达后,体外划痕实验结果表明,过表达miR-144后,与对照组相比,SH-SY5Y和SK-N-BE细胞的转移能力分别下降了65.45%和75.41%(P<0.01).荧光报告基因检测结果显示过表达miR-144后,含有结合位点的荧光报告质粒的相对荧光量降低了37.11%(P<0.01),而将结合位点进行基因突变后miR-144对靶基因的抑制作用消失.过表达miR-144后,与对照组相比,SH-SY5Y和SK-N-BE细胞内的ITGβ1 mRNA水平分别降低了40%和43%,Western Blot检测结果显示,ITGβ1蛋白水平分别降低了39%和40%.结论 miR-144通过靶定ITGβ1基因抑制神经母细胞瘤的侵袭和转移过程.