PKC-NF-κB信号传导对子(癎)前期患者脐血清诱导脐动脉平滑肌细胞胶原mRNA表达影响的体外研究

目的探讨蛋白激酶C-核因子-kappa B(protein kinase C-nuclear factor-kappa B,PKC-NF-κB)信号传导通路对子(癎)前期患者脐静脉血清诱导脐动脉平滑肌细胞(human umbilical artery smooth muscle cell,HUASMC)增殖及前胶原Ⅰ、ⅢmRNA的表达的影响.方法采用组织块培养法培养正常妊娠HUASMC,传代,待细胞长满至70%～80%,加或不加PKC的抑制剂多黏菌素B(ploymyxin B,PMB)作用30 min后分别加入子(癎)前期患者脐静脉血清,培养2 h,Western印迹法测定细胞胞浆Ⅰ-κB、胞核NF-κB活性;细胞培养48 h,MTT测定细胞活力,流式细胞学测定细胞周期,逆转录-聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chin reaction,RT-PCR)测定HUASMC的bcl-3及前胶原Ⅰ、ⅢmRNA的表达.结果子(癎)前期患者血清组HUSMC的胞浆Ⅰ-κB含量(0.3765±0.0321)明显低于对照组(0.7857±0.0296),胞核NF-κB含量(0.8549±0.0395)、bcl-3表达(0.6782±0.213)、细胞活力(0.249±0.0748)、前胶原Ⅰ的表达(0.7387±0.208)、S期细胞百分比(20.13±1.21)%及G2/M期细胞百分比(16.45±0.89)%明显高于对照组(P＜0.01),G0+G1期细胞百分比(62.53±2.85)%明显低于对照组(P＜0.01).PMB预处理组Ⅰ-κB含量(0.8120±0.0352)明显高于子(癎)前期组(P＜0.01);NF-κB核转位(0.4528±0.0315)、bcl-3表达(0.216±0.193)、S期细胞百分比(8.21±0.56)%及G2/M期细胞百分比(5.38±0.52)%、细胞活力(0.1525±0.0454)及前胶原Ⅰ(0.3084±0.022)的表达低于子(癎)前期组(P＜0.01),G0+G1期细胞百分比(89.61±3.18)%明显高于子(癎)前期组(P＜0.01).结论PKC-NF-κB信号传导途径的激活在子(癎)前期患者胎盘血管病变过程中可能起重要作用.

妊娠合并癫(癎)15例临床分析

目的探讨妊娠合并癫(癎)的风险以及适当的处理.方法回顾性分析我院1984年至2004年妊娠合并癫(癎)15例孕妇的病史,记录其年龄、产次、孕周、癫(癎)类型以及孕期发作情况、孕期的处理、分娩时情况、新生儿的情况等.结果妊娠合并癫(癎)的发生率0.06%.年龄20～29岁6例(40%),30～36岁9例(60%).初产妇14例,经产妇1例.＜37孕周1例,＞37孕周14例.66.7%的患者在20岁以前发病,33.3%的患者20岁以后发病.孕期发作频率增加者5例(33.3%),孕期发作频率减少者1例(6.7%),无变化者9例(60%)(7例患者孕期无发作).单药治疗的10例(66.7%);多药治疗的4例(26.7%);未治疗的1例(6.6%).新生儿Apgar评分均为10分,并且没有发现一例畸形.产后2例母乳喂养.结论患有癫(癎)的妇女建议孕前咨询.指导方针为孕前优化抗癫(癎)药物,稳定症状并加服叶酸.建议孕期密切监测血药浓度,及时调整用量.

Csx/Nkx2.5基因在胚胎心脏的表达及在先天性心脏病中的突变检测

目的了解Csx/Nkx 2.5基因在胚胎心脏发育过程中的表达情况及在先天性心脏病(先心病)患者中的突变情况.方法采用免疫组化方法检测Csx/Nkx 2.5基因表达,采用PCRSSCP-银染和DNA测序技术检测Csx/Nkx 2.5基因突变.结果Csx/Nkx 2.5基因在心房、小梁网中高表达.16周后心房表达趋于稳定,小梁网的表达稍有下降.在心室的表达早期较弱,逐渐升高,13至16周增加幅度大,16周后表达趋于稳定.心外膜不表达.在126例先心病患儿、16例先心病胎儿和30例正常人中发现编码21位氨基酸密码子的第3位碱基的三种多态性:A、G、A/G.结论Csx/Nkx 2.5基因在胚胎心脏发育过程中的表达有严格的时空规律,说明该基因在心脏发育过程中发挥重要作用.本研究中,无论是散发性或家族性先心病病例,均未检测到与先心病有关的突变.

实时荧光定量PCR检测细菌方法的建立及其临床应用

目的探索快速可靠的新生儿败血症和化脓性脑膜炎诊断的新方法及其临床运用.方法用自行设计的细菌16S rRNA基因高度保守区的引物和探针,对19种标准菌株、3种病毒株、新型隐球菌及白色念珠菌、人基因组DNA,以及疑似败血症的临床血标本、脑脊液共195份进行荧光定量检测,并同时进行血或脑脊液培养的对照.结果细菌荧光定量PCR具有较好的敏感性和特异性,低能检测到10个拷贝的16S rRNA基因,即相当于1～2个细菌,与人基因组DNA、真菌及病毒等无交叉阳性反应;荧光定量PCR的细菌DNA检出率为12.8%(25/195),明显高于血培养的阳性率7.1%(15/195,P＜0.01).结论应用通用引物和探针的荧光定量PCR扩增诊断败血症的方法检测快速、敏感性和特异性高,具有较大的推广及应用价值.

试管婴儿的出生缺陷及围产期情况研究

目的探讨试管婴儿发生先天畸形、围产期合并症及死亡的危险性.方法对1994年7月至2003年10月在我院接受IVF-ET术的156例母亲所生活产婴儿211例(试管婴儿组),及同期分娩的与母亲年龄及分娩时间相当的213例正常受孕母亲所生婴儿218例(对照组)进行分析,比较两组的母亲妊娠合并症及是否多胎、胎儿窘迫和出生窒息、出生缺陷、生后合并症、转儿科住院及存活情况.结果试管婴儿组的多胎妊娠、早产及剖宫产率均显著高于对照组,分别为37.2%和2.3%,37.2%和8.5%、97.0%和71.8%(P均＜0.01);妊高征、早期先兆流产率显著高于对照组,分别为22.4%和10.8%(P＜0.01),4.5%和0%(P＜0.01);对照组胎儿窘迫的发生率显著高于试管婴儿组,14.6%和4.5%.试管婴儿组心脏畸形率和畸形总数皆高于对照组,但未显示出统计学差异.结论试管婴儿的多胎率明显增高,由此造成的相关的围产期合并症发生率也随之增高.

家庭亲密度和适应性对产后康复影响的研究

目的探讨家庭亲密度和适应性对产后康复的影响.方法随机抽取本院住院产妇122例,采用家庭亲密度和适应性量表、爱丁堡产后抑郁量表进行测评,分析家庭亲密度和适应性与产妇产后抑郁情绪的关系.结果家庭亲密度和适应性与产后抑郁和产后康复显著相关.结论较高的家庭亲密度和适应性有助于产后康复和母乳喂养,有助于缓解产妇的抑郁情绪.

"GT-4A导乐分娩镇痛工作站"的临床效果观察

目的探讨不同分娩镇痛方法的临床效果和对产妇及新生儿的影响.方法将130例产妇随机分为三组:A组(50例)为使用"GT-4A导乐分娩镇痛工作站"进行镇痛;B组(40例)为吸入含50%笑气与50%氧气的混合气体镇痛;C组(40例)为空白对照.观察镇痛效果、产程时间、分娩方式、产后出血等.结果A组、B组均有镇痛作用,与C组比较差异均有统计学意义(P＜0.01),A组镇痛效果好于B组,差异有统计学意义(P＜0.01).A组活跃期为[(206.7±15.4)min]、第二产程[(28.8±2.4)min],均明显短于B组[(254.7±13.9)min和(49.8±3.8)min]、C组[(259.4±14.8)和(50.4±4.4)min](P值均＜0.05),A组总产程(654.2±35.1)min短于C组(759.5±25.7)min(P＜0.05).结论"GT-4A导乐分娩镇痛工作站"具有良好的镇痛效果,对母儿均无不良影响,操作简单方便,产妇乐于接受,不失为一种理想的分娩镇痛方法,适于在基层单位推广使用.

新生儿期Turner综合征一例

患儿,女,1 h,双足背肿胀1 h就诊.胎龄38周足月顺产.出生体重2622 g,身长48 cm,羊水清,Apgar评分1、5 min和10 min均为10分.生后即出现双足背肿胀来我院急科.

孕期体重增长与妊娠结局

孕前与孕期的营养状况直接关系着妊娠结局,对母婴的健康亦有重要影响.很多研究表明,在反映孕妇怀孕期间营养状况的各种指标中,孕期体重增长值与婴儿出生体重呈正相关[1],故可以用来预测妊娠结局.

孕期沙眼衣原体感染与母婴垂直传播

沙眼衣原体(chlamydia trachomatis,CT)是性传播感染常见致病菌,目前CT感染已成为世界性的健康和社会问题.妊娠期由于免疫功能降低常引起CT感染或复发,造成流产、早产、异位妊娠等不良妊娠结局,还可垂直传播给胎婴儿造成严重后果.因此,妊娠期CT感染和母婴垂直传播的研究非常重要.现就孕期CT感染母婴传播的研究进展综述如下.

妊娠期营养不良对后代的远期影响

妊娠期孕妇营养缺乏会导致胎儿生长受限(fetal growth restriction,FGR),Barker等人的系列研究提示胎儿低出生体重会导致一系列成年疾病的发生,包括糖耐量受损(impaired glucosetolerance,IGT)、2型糖尿病(type 2 diabetes,T2D)、心血管疾病(cardiovascular heart disease,CHD)、中心性肥胖和脂代谢异常等,这些被统称为代谢综合征.近年,有学者提出免疫系统的疾病也可能与宫内营养缺乏有关.另外,孕期营养过剩所致的孕母肥胖及高出生体重儿的发生率也逐年增高,印度等国家在这方面做了一些研究,并提出:出生体重与成年时患2型糖尿病的危险性之间呈"U"型关系,即Ushape假说.

肠三叶因子对新生鼠坏死性小肠结肠炎模型iNOS及TNF-α、NO的影响及意义

目的探讨肠三叶因子(intestinal trefoil factor,ITF)对坏死性小肠结肠炎(necrotizingenterocolitis,NEC)新生大鼠的肠黏膜组织中iNOS、TNF-α、NO的含量的影响,及ITF对NEC是否具有保护作用.方法建立NEC模型,对新生1日龄Wistar大鼠予100%二氧化碳,5 min后再予以100%氧气,5 min后放回母鼠身边喂养,第4天处死,取肠组织待检.新生鼠40只随机分为五组,每组8只,A组为NEC模型后予以腹腔注射ITF 0.5 mg;B组为NEC模型后予以皮下注射ITF 0.2mg C、D组为NEC模型后予以腹腔注射生理盐水分别为0.5 ml和0.2 ml;E组为正常对照组.取近回盲部1～2cm肠道组织固定包埋、切片、HE染色做病理学检查及免疫组化观察iNOS的表达,其他肠道组织制备组织匀浆取上清液检测TNF-α、NO的含量.结果A、B及E组iNOS呈弱阳性表达,C、D组iNOS呈强阳性表达;A、B组组织匀浆中TNF-α的含量各为[(30.515±2.731)和(32.229±4.978)pg/mg·pro]均较C、D组[(39.957±8.283)、(39.960±8.374)pg/mg·pro]明显下降(P＜0.01),与E组[(33.523±6.752)pg/mg·pro]差异无统计学意义(P＞0.05);A、B组组织匀浆中NO的含量各为[(0.37±0.07)和(0.54±0.08)μmol/mg tissue]较C、D组[(0.76±0.01)和(0.82±0.04)μmol/mg tissue]明显下降(P＜0.01),与E组[(0.41±0.02)μmol/mg tissue]差异无统计学意义(P＞0.05);A、B组间及C、D组间TNF-α、NO含量差异无统计学意义(P＞0.05);病理切片显示C、D组HE染色切片见肠壁损伤轻重不一,可见全肠黏膜绒毛坏死,病理评分的中位积分为3分;A、B组肠上皮细胞少量脱落,顶端绒毛坏死,病理评分的中位积分为1分.结论通过腹腔和皮下注射ITF可以减轻NEC后的肠道炎症反应,ITF有可能为治疗NEC提供新的方法.

维甲酸对高氧暴露早产大鼠胰岛素样生长因子系统表达的影响

目的探讨维甲酸(RA)对高氧暴露下早产大鼠肺组织胰岛素样生长因子Ⅱ(IGF-Ⅱ)、Ⅱ型IGF受体(IGF-2R)及IGF结合蛋白2(IGFBP-2)mRNA和多肽表达的影响及其抗损伤机制.方法260只孕21 d剖宫产鼠为早产鼠,生后第2天随机分为四组,Ⅰ组:空气+生理盐水;Ⅱ组:高氧(85%O2)+生理盐水;Ⅲ组:空气+RA;Ⅳ组:高氧+RA.Ⅱ、Ⅳ组持续暴露于85%氧气中,Ⅰ、Ⅲ组置于空气中;Ⅲ、Ⅳ组从生后第3天起每日腹腔注射RA,Ⅰ、Ⅱ组每日注射生理盐水.分别于生后4、7、10、14、21 d记病死率,取肺标本作辐射状肺泡计数(RAC);测IGF-Ⅱ、IGF-2R和IGFBP-2mRNA表达强度(RT-PCR)或多肽表达强度(Western印迹).结果(1)存活率:7 d内四组差异无统计学意义;7 d后各时间点Ⅱ、Ⅳ组明显低于Ⅰ、Ⅲ组(P＜0.05或＜0.01),但Ⅳ组明显高于Ⅱ组(P＜0.01).(2)RAC结果:4 d时,Ⅱ、Ⅳ组RAC值即明显减少(P＜0.01);随后与对应Ⅰ、Ⅲ组比较差异有统计学意义(P＜0.01),但Ⅳ组明显高于Ⅱ组(P＜0.01).(3)RT-PCR结果:IGF-ⅡmRNA表达强度:与Ⅰ、Ⅲ组相比,Ⅱ、Ⅳ组4 d时表达即增强(P＜0.01);14 d时,Ⅱ组较Ⅰ组、Ⅳ组较Ⅲ组表达差异有统计学意义(P＜0.01);其中Ⅳ组表达较Ⅱ组相对降低(P＜0.01);IGF-2 R mRNA表达强度在4和14 d时,Ⅱ、Ⅳ组明显高于Ⅰ、Ⅲ组(P均＜0.01),而Ⅳ组明显低于Ⅱ组(P＜0.01);IGFBP-2mRNA表达强度:Ⅱ、Ⅳ组明显强于相应的Ⅰ、Ⅲ组,但14d时Ⅳ组表达低于Ⅱ组(P＜0.01).肽表达强度结果:IGF-Ⅱ多肽、IGF-2R膜蛋白、IGFBP-2多肽的表达强度与其各自的mRNA表达变化相似.结论RA可部分逆转高氧引发的肺发育阻滞;RA下调高氧暴露下肺组织中IGFBP-2、IGF-Ⅱ和IGF-2R的表达可能是其干预肺损伤的机制之一.

新生鼠大脑皮层神经干细胞培养及其在同胞鼠的细胞替代作用

目的从新生鼠大脑皮层分离培养神经干细胞(neural stem cells,NSC),并将这些NSC植入局灶性缺血损伤鼠的大脑皮层,观察其植入同胞鼠后的细胞替代作用.方法应用含表皮生长因子(EGF)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF或FGF-2)的无血清DMEM/F12(1:1)培养液获得新生鼠NSC球,酶免疫技术检测NSC标志nestin和诱导分化实验证明所获得的细胞球是NSC.在细胞球的体外培养中掺入BrdU,标记NSC,用于移植实验.鼠出生后第4天,开颅去脑膜阻断脑皮层血液供应建立新生鼠脑皮层局灶性缺血动物模型,术后第4天(出生后第8天)将标记好的NSC直接注射到缺血损伤灶的边缘区.实验鼠分为损伤移植组、损伤对照组和假手术对照组.于移植后第4、7、14、30天杀鼠取脑,进行BrdU标记的酶免疫组化染色,检查植入细胞的存活和迁移情况.结果新生鼠大脑皮层在体外培养一周,可以获得漂浮生长的、表达nestin的、具有分化为神经元和星形胶质细胞潜能的NSC球.移植实验发现:植入细胞有向大脑皮层缺血损伤灶周边迁移的特点,促进损伤灶组织结构的修复,损伤获得了很好的细胞修复作用.镜下可见灶区有满视野BrdU标记的阳性细胞,颗粒层集聚密度大,未见有远部位的细胞迁移.假手术对照鼠脑内细胞逐渐减少,至移植后第14天只能检测到零星散在阳性细胞,明显较损伤移植鼠少.结论新生鼠大脑皮层内存在NSC.缺血性损伤可刺激移植的NSC增殖与迁移.移植的NSC对于大脑皮层局灶性缺血损伤灶的完整修复发挥了重要作用.

宫颈癌合并妊娠胎盘转移的电镜观察与临床处理

宫颈癌是育龄妇女常见的妇科恶性肿瘤,但宫颈癌合并妊娠较少见,据报道其发生率在我国约为9.2‰～70.5‰[1].至今有关宫颈癌胎盘转移的报道极少[2].近,我们研究一例宫颈癌合并妊娠的胎盘超微结构时却意外发现有转移现象.现将结果报道如下,并综合国内外文献报道对此类病例的临床处理进行讨论.

产程中腰麻-硬膜外联合镇痛对母儿影响的研究

产时镇痛为重要的产科课题之一.近年来,腰麻-硬膜外麻醉镇痛成为我国采用较多的产时镇痛方法之一,但该方法对母儿的影响方面大样本研究较少.我院自2001年始采用腰麻-硬膜外联合麻醉和产妇自控硬膜外镇痛(CSEA+PCEA)的技术开展了产程镇痛.本文作一回顾性分析,以了解CSEA+PCEA是否对母儿存在影响.

新生儿心力衰竭诊断标准临床应用

新生儿心力衰竭(心衰)是临床上常见的危重症,也是围产儿死亡的主要原因之一.由于新生儿的自身特点,临床表现不典型,又受原发病的影响,早期诊断困难.而且,国内外对心衰的评价,缺乏金标准,诊断仍限于症状、体征判断,临床上难以准确把握治疗时机,易贻误病情.为提高对新生儿心力衰竭的认识和诊断水平,本资料对39例心衰患儿的症状、体征变化过程进行动态观察,并应用1993年制订的新生儿心力衰竭诊断标准判断病情,现总结如下.

血清游离脂肪酸与妊娠期胰岛素抵抗的关系

妊娠期糖尿病(gestational diabetes mellitus,GDM)即妊娠期首次发生或发现的糖代谢异常[1],发病率约为1%～5%[2],并有逐年增高的趋势.目前GDM的发病机制尚不清楚,妊娠期胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)在其病因学中占重要地位,近年研究表明血清游离脂肪酸(free fatty acids,FFA)在2型糖尿病/肥胖胰岛素抵抗中起重要作用[3,4],本研究的目的亦在探讨血清FFA水平与GDM及正常妊娠的IR的关系.

围产期缺氧心肌损害的监测及诊断--附120例临床研究

围产期窒息缺氧后心肌损害愈来愈受到重视,严重心肌损害不仅可以加重脑损害,且预后不良,是围产期窒息死亡的主要原因之一,因此强调窒息后多脏器损害的监护及其适当治疗是很必要的.现将我院三年多来120例围产期缺氧后心肌损害患儿资料分析如下.

比较两种机械通气模式对呼吸衰竭早产儿通气及换气功能的影响

在过去的20年中,尽管死于原发性呼吸衰竭的早产儿明显减少,但是与机械通气相关的疾病仍时有发生,目前关于早产儿呼吸支持的佳策略仍未达成一致.同步间歇指令通气加容量保证(SIMV+VG)是一种新型的、同步的时间转换和压力限制的通气模式,这种通气模式对早产儿通气改善的优点在于它能保证潮气量接近生理需要量水平,这对锻炼患儿自己呼吸、防止潜在的肺损伤,同时防止过低潮气量引发肺不张的可能性大大减小了[1].

大胎龄早产儿颅内出血发生率调查及相关因素分析

颅内出血是早产儿死亡和致残的重要原因之一,长期以来,临床医师对胎龄≤34周的早产儿颅内出血问题给予了较大关注.我们在临床工作中发现胎龄＞34周～＜37周的大胎龄早产儿仍有较高的颅内出血发生率.为引起临床医师的重视,我们对其相关高危因素进行了分析.

《产科掌中宝》第二版出版