慢性肾衰竭大鼠血清对主动脉平滑肌细胞组蛋白乙酰转移酶p300及激活转录因子4表达的影响

目的 研究慢性肾衰竭大鼠血清对主动脉血管平滑肌细胞(VSMC)泛素-蛋白酶体系统、激活转录因子4(ATF4)及组蛋白乙酰转移酶p300表达的影响,初步探讨慢性肾衰竭血清对主动脉VSMC作用的可能机制.方法 建立慢性肾衰竭大鼠模型,采集其血清;采用原代培养的大鼠主动脉VSMC,分正常组(正常大鼠血清刺激)和慢性肾衰竭血清组(慢性肾衰竭血清刺激).用不同大鼠血清刺激72 h后,分别采用实时定量PCR、Western印迹及特异底物反应法检测慢性肾衰竭血清对VSMC泛素、泛素激活酶(ubiquitin activating enzyme,简称E1)、β转导重复相容蛋白1(β-transducin repeat containing protein 1,β-TrCP1)、p300及ATF4mRNA表达,E1、β-TrCP1、p300及ATF4蛋白表达及蛋白酶体活性的影响.结果 (1)慢性肾衰竭血清使主动脉VSMC泛素、E1、β-TrCP1、p300及ATF4mRNA表达增加,与正常组相比,差异均有统计学意义(P＜ 0.01),随时间延长;慢性肾衰竭血清组泛素、E1、β-TrCP1、p300及ATF4 mRNA表达逐渐升高,差异有统计学意义(P＜0.01).(2)慢性肾衰竭血清使主动脉VSMC E1、β-TrCP1、p300及ATF4蛋白表达增加,与正常组相比,差异均有统计学意义(P＜0.01);随时间延长,慢性肾衰竭血清组E1、β-TrCP1及p300蛋白表达逐渐升高,差异有统计学意义(P＜0.01).ATF4表达有下降趋势,但差异无统计学意义(P＞0.05).(3)慢性肾衰竭血清刺激后蛋白酶体活性增强,与对照组相比,差异均有统计学意义(P＜ 0.01);随时间延长,慢性肾衰竭血清组蛋白酶体活性逐渐升高(P＜0.01).结论 慢性肾衰竭血清可致大鼠主动脉VSMC泛素-蛋白酶体途径活化,但其对ATF4的降解受阻,可能和p300表达增高有关.这为进一步采取措施,防治慢性肾衰竭血管病变提供了一定的理论和实验依据.

血管紧张素Ⅱ正向调节高糖环境下大鼠肾小球系膜细胞TLR4信号及炎性因子表达

目的 观察血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对高糖环境下大鼠肾小球系膜细胞Toll样受体4(TLR4)信号通路与炎性因子表达的影响,论证AngⅡ对高糖环境下肾小球系膜细胞天然免疫炎性反应的正向调节作用.方法 细胞同步化后分组:正常对照(5.6 mmol/L葡萄糖)组、高糖(25 mmol/L葡萄糖)组、AngⅡ(10-7mmol/L)组、高糖(25 mmol/L葡萄糖)+AngⅡ(10-7mmol/L)组和AngⅡ(10-7 mmol/L)+血管紧张素1型受体(AT1R)阻断剂厄贝沙坦(10-5mmol/L)组和AngⅡ(10-7 mmol/L)+厄贝沙坦(10-5 mmol/L)+TLR4阻断剂(10 mg/L)组.分别于不同时间收集细胞,12h时采用实时定量PCR检测TLR4及其转接子髓分化因子88(MyD88)的表达,24 h时免疫荧光检测TLR4蛋白表达,24 h时Western印迹法检测TLR4、MyD88及核因子κB(NF-κB)蛋白的表达,同时收集24 h时细胞上清液用ELISA法检测白细胞介素6(IL-6)、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)的水平.结果 与正常对照组相比,高糖和AngⅡ组作用12h时TLR4、MyD88 mRNA表达显著上调(P＜0.01),24 h时TLR4、MyD88以及NF-κB蛋白表达显著上调(P＜0.01),同时炎性细胞因子IL-6、MCP-1水平亦显著上调(P＜0.01);与高糖或AngⅡ组相比,AngⅡ和高糖共同作用肾小球系膜细胞后TLR4、MyD88和NF-κB蛋白以及IL-6、MCP-1的水平进一步上调(P＜ 0.01);AT1R、TLR4阻断剂可显著下调AngⅡ诱导的高糖环境下系膜细胞TLR4、MyD88表达及IL-6、MCP-1水平(P＜0.01).结论 高糖和高肾素导致大鼠肾小球系膜细胞炎性因子表达增加均与TLR4-MyD88信号通路的激活相关,TLR4信号通路在糖尿病系膜细胞天然免疫炎性反应机制中发挥关键效应.AngⅡ对高糖环境下大鼠肾小球系膜细胞炎性因子释放起正向调节作用.

线粒体功能障碍参与顺铂诱导的小鼠急性肾损伤

目的 通过观察顺铂在不同剂量下诱导小鼠急性肾损伤的特点,进一步了解线粒体功能障碍参与急性肾损伤的机制.方法 雄性C57BL/6J小鼠18只,随机分为正常对照组(n=6)及顺铂处理组(n=12),其中顺铂处理组按顺铂给予剂量不同又分为10 mg/kg组(n=6)和20 mg/kg组(n=6).采用顺铂单次腹腔注射建立急性肾损伤模型,72 h后处死小鼠.测定肾功能相关生化指标、肾组织病理改变、肾损伤标志物的变化以及肾脏线粒体功能及结构变化指标.结果 (1)顺铂注射72 h后,顺铂处理组与对照组相比出现明显急性肾损伤表现,其中20 mg/kg组肾损伤程度更为严重,表现为随着顺铂剂量加大,肾生化指标血肌酐、尿蛋白等水平逐渐升高.(2)顺铂处理组肾小管结构破坏,蛋白管型形成,同时肾损伤标志物肾损伤分子1(KIM-1)mRNA升高(P＜0.05).(3)顺铂处理组肾小管线粒体结构破坏明显,同时线粒体DNA拷贝数下降(P＜0.05),线粒体相关蛋白过氧化物酶体增殖活化受体γ辅助活化因子1α(PGC-1α)及ATP合酶表达降低(P＜0.01),细胞色素C从线粒体向胞质释放;且不同浓度顺铂组间各项指标差异亦有统计学意义(P＜0.05).结论 顺铂能够呈剂量依赖性的诱导急性肾损伤发生,线粒体功能障碍参与了肾损伤发生,并与肾损伤的病理改变密切相关.

连续不卧床腹膜透析患者内皮功能障碍与动脉僵硬度的关系

目的 探讨连续不卧床腹膜透析(CAPD)患者内皮功能障碍与动脉僵硬度的关系.方法 应用彩色多普勒超声仪测定CAPD患者血流介导的扩张反应(FMD),采用自动脉搏波速度(PWV)分析仪测定患者颈-股动脉PWV(CF-PWV).检测相关血生化指标.对相应指标进行相关及多元逐步回归分析,探讨FMD和PWV的关系.结果 入选患者94例,男性45例,女性49例,平均年龄(61.98±11.83)岁,平均透析龄12.51 (6.29,27.60)个月.糖尿病患者的PWV显著高于非糖尿病患者[(13.25±1.66) m/s比(11.24±1.92) m/s,P＜0.01].PWV与年龄(r=0.319,P=0.002)、收缩压(r=0.289,P=0.005)、C反应蛋白(r=0.211,P=0.041)呈正相关,与白蛋白(r=-0.429,P=0.001)、FMD(r=-0.466,P=0.001)呈负相关.多元逐步回归分析结果显示糖尿病、白蛋白、FMD、年龄、SBP是PWV的独立影响因素.结论 在CAPD患者中内皮功能障碍与动脉僵硬度增高密切相关.

腹膜透析患者血清瘦素水平的变化及影响因素分析

目的 探讨腹膜透析患者瘦素水平变化及其影响因素.方法 入选维持性腹膜透析患者76例,分别于腹膜透析治疗开始前及治疗后第3、6、12、18、24个月共6个时间点,随访人体测量(体质量指数、肱三头肌皮脂厚度、腹围)、生化指标[胆固醇、三酰甘油、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)等]及血清瘦素水平.结果 在24个月的随访过程中,患者的瘦素水平显著升高(P＜0.01),并与体质量指数(r=0.412,P＜ 0.01)、肱三头肌皮脂厚度(r=0.308,P＜ 0.01)、腹围(r=0.284,P＜0.01)、HOMA-IR(r=0.184,P＜ 0.01)、三酰甘油(r=0.288,P＜ 0.01)呈正相关,与高密度脂蛋白胆固醇(r=-0.285,P＜0.01)水平呈负相关.多因素分析提示体质量指数(β=0.339,P＜0.01)、三酰甘油(β=0.157,P＜0.01)和高密度脂蛋白胆固醇(β=-0.126,P＜0.05)是影响瘦素水平重要的因素.结论 瘦素可能与其他代谢指标共同参与了腹膜透析患者心血管事件的发生与发展.

血液透析中血压变异性及影响因素的初步探讨

目的 了解终末期肾病(ESRD)患者血液透析过程中血压变异性(BPV)特点,分析BPV的影响因素.方法 入选规律血液透析且临床判断干体质量达标的患者81例,应用动态血压监测仪行围透析期血压监测.BPV用收缩压变异系数(SBP-CV)和标准差(SBP-SD)表示.根据SBP-CV均值将患者分成高收缩压变异性(SBPV)组和低SBPV组,对可能的影响因素年龄、透析龄、脱水量、失重比、降压治疗、电解质、营养水平、矿物质骨代谢指标、炎性标志物、血脂等进行分析,比较组间差异;并分别对上述观察指标与SBP-CV、SBP-SD行多因素多元逐步回归分析.结果 81例患者围透析期SBP-CV均值为(8.12±3.16)％,SBP-SD均值为(11.22±4.55) mm Hg.高SBPV(SBP-CV≥8.12％)组发生透析中高血压和低血压的比例(20.0％和25.7％)均高于低SBPV (SBP-CV＜ 8.12％)组(8.7％和6.5％)(P=0.009).高SBPV组透前高敏C反应蛋白(hs-CRP)和碱性磷酸酶(ALP)高于低SBPV组,差异有统计学意义[(7.19±5.95) mg/L比(3.35±2.78) mg/L,P=0.001; (180.31±96.32) U/L比(98.00±41.19) U/L,P=0.049].低SBPV组透前血肌酐、血钾高于高SBPV组,差异亦有统计学意义[(1015.83±276.20)μmol/L比(893.63±216.61) μmol/L,P=0.034; (5.27±0.78) mmol/L比(4.80±0.23) mmol/L,P=0.005].多因素多元逐步回归分析发现血液透析过程中SBP-SD与Hs-CRP呈正相关(β=0.499,P＜0.01),SBP-CV与Hs-CRP、透析龄呈正相关(β=0.464和0.211,P＜0.01和P＜0.05).结论 ESRD患者在血液透析过程中SBPV为8.12％,SBPV高的患者更容易发生透析中高血压和低血压,SBPV与血清hs-CRP水平密切相关.

血清脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白在慢性肾脏病患者中的变化及与动脉粥样硬化的相关性

KDIGO慢性肾脏病分级系统在1645例2型糖尿病患者伴发肾脏疾病及相关血管性疾病中的应用

目的 采用KDIGO慢性肾脏病分级系统,研究2型糖尿病患者肾脏疾病的发病情况、危险因素及并发心脑血管性疾病、死亡情况,探讨KDIGO分级系统的意义.方法 选取2008年6月至2012年12月于本院住院的1645例资料完整的2型糖尿病患者为研究对象,采用KDIGO慢性肾脏病分级系统进行分组,明确KDIGO分期下糖尿病患者的血管疾病发病情况,并对合并及不合并肾脏疾病两组间进行比较,分析肾脏疾病的危险因素,另分析其死亡的危险因素.结果 1645例2型糖尿病患者中男915例,女730例,平均年龄(57.86±12.54)岁,糖尿病病程(6.35±6.30)年.37.2％(612/1645)患者合并肾脏疾病,G3a、G3b期及G4+G5期分别占5.7％、3.5％、7.6％,蛋白尿患者占33.4％,其中微量白蛋白尿患者19.5％,大量白蛋白尿患者13.5％.49.5％患者合并高血压,67.7％合并高脂血症,27.4％合并糖尿病视网膜病变(DR),18.5％合并心脑血管疾病(其中16.5％合并冠状动脉性疾病(CAD),8.8％患者合并脑血管疾病),G3a和G3b组在DR、CAD、脑血管疾病的比较差异均有统计学意义(P＜0.05).糖尿病病程、合并高血压尤其是收缩压升高、糖尿病视网膜病变、高尿酸血症是2型糖尿病患者合并肾脏疾病的独立危险因素.而年龄、Scr、合并心脑血管疾病、高CKD分期是2型糖尿病合并肾脏疾病患者死亡的独立危险因素.结论 KDIGO慢性肾脏病分级系统可以更准确划分糖尿病患者肾脏疾病的分期以指导临床和判断预后,糖尿病患者肾脏疾病和心脑血管疾病的患病率较普通人群更高,早期控制血压、血尿酸等因素可延缓肾脏疾病的进展,需重视糖尿病视网膜病变的预测作用.

基于UPLC-qTOF-MS的肾移植急性排斥反应患者血浆代谢组学分析

目的 通过血浆磷脂代谢分析,发现、判别肾移植急性排斥反应的血浆生物标志物以辅助临床诊断.方法 选取2009年至2010年在本院行肾移植的患者33例,为术前组,术后按照是否发生急性排斥反应分为急性排斥组(n=14)和非急性排斥组(n=19),利用超高分辨率液相色谱-四级杆-飞行时间质谱串联(UPLC-qTOF-MS)分析技术建立肾移植急性排斥反应患者血浆代谢指纹图谱.采用偏小二乘法-判别分析(PLS-DA)分析肾移植术后急性排斥反应组与非急性排斥反应组患者的代谢差异产物,同时观察肾功能指标及肾组织病理改变.结果 血浆磷脂代谢分析鉴定发现17种差异性代谢产物:肌酐、各种鞘磷脂、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰胆碱、溶血磷脂酰胆碱等,其中传统指标肌酐水平增高,其余16种代谢产物降低.结论 基于UPLC-qTOF-MS代谢组学技术对肾移植患者血浆磷脂代谢分析,揭示了急性排斥反应过程中磷脂代谢变化规律:血浆磷脂酰胆碱酯解及脂肪酸β-氧化水平明显增高,免疫抑制治疗可降低磷脂酶活性,抑制磷脂酰胆碱酯解及脂肪酸β-氧化水平,有效地抑制肾移植术后急性排斥反应的发生及发展,其作为一种辅助手段,可能在肾移植急性排斥反应的早期诊断中具有应用前景.

血清铁调素25水平对腹膜透析患者心血管事件的影响及相关因素

铁调素(hepcidin)是一种产生于肝脏细胞并具有调节体内铁代谢平衡作用的铁调节蛋白,其中以hepcidin-25为其主要活性成分.hepcidin-25与动脉钙化的发生有密切关系[1].已有研究表明,冠状动脉钙化(CAC)是心血管事件发生的重要危险因素[2].本文旨在探讨血清hepcidin -25水平对持续性不卧床腹膜透析(CAPD)患者心血管事件及CAC的影响.

Notch信号通路抑制剂对白蛋白诱导的肾小管上皮细胞凋亡的保护作用

持续蛋白尿促进肾小管萎缩和肾间质纤维化,诱导肾小管上皮细胞凋亡,从而加速肾脏疾病的进展[1],然而具体机制目前尚未完全阐明.Notch信号通路进化高度保守,广泛参与调控细胞凋亡、增殖及分化等功能[2].研究发现,γ分泌酶抑制剂(DAPT)通过阻断Notch通路阻止氧化应激诱导的鼠小管上皮细胞(NRK52E)凋亡[3].本研究旨在探讨DAPT在白蛋白诱导的肾小管上皮细胞凋亡中的保护作用,并进一步阐明其作用的分子机制.

IgA肾病免疫抑制治疗中并发肺孢子菌肺炎10例分析

IgA肾病(IgAN)为世界范围内常见的原发性肾小球疾病,其发病机制与黏膜免疫反应相关,治疗涉及激素和免疫抑制剂的使用,可能带来各种感染.肺孢子菌(肺囊虫)为少见机会感染病原体,有报道显示,接受激素治疗的HIV阴性人群,肺孢子菌定植比例高达75％[1].目前系统性免疫病与HIV阳性人群的肺孢子菌肺炎(Pneumocystic pneumonia,PCP)感染研究结果越来越多,但IgAN合并PCP报道的文献甚少,较具有代表性的为Lv等[2]于2008年发表的霉酚酸酯治疗IgAN合并重症肺炎的研究.本文将探讨IgAN治疗中合并PCP病例的临床特点、治疗、预防以及预后分析,以期指导临床实践.

高迁移率族蛋白1在狼疮肾炎患者肾组织中的表达及意义

狼疮肾炎(LN)是继发性肾病的主要原因之一,也是系统性红斑狼疮(SLE)患者的主要死亡原因之一.高迁移率族蛋白1 (HMGB1)是1973年发现的一种广泛存在于真核细胞内的非组蛋白染色体结合蛋白,机体处于稳态时,大多数体细胞及免疫细胞可以表达基础量的HMGB1.近年来有研究发现HMGB1参与了多种自身免疫性疾病的发病过程[1-2].本研究分析HMGB1与SLE临床活动指数及肾脏病理指数的相关性,探索HMGB1测定作为SLE活动性指标及判断预后的临床实用价值,进一步探讨LN的发病机制.

血肌酐和胱抑素C联合的肾小球滤过率评估方程的评价

肾小球滤过率(GFR)的准确评估对慢性肾脏病(CKD)的诊断有重要意义,但测定繁琐、费用高,因此估算GFR的方程被开发出来,应用多的是基于血肌酐(Scr)的方程,其中MDRD方程尤为广泛.而有研究表明MDRD方程低估了GFR≥60 ml· min-1·(1.73 m2)-1人群的真实GFR,造成CKD的过度诊断[1],且应用于我国人群有偏差[2].而基于血胱抑素C(CysC)的GFR计算方程临床应用仍有限[3].2012年Lnker等[3]开发了Scr和CysC联合的GFR方程(简称联合方程),并证实该方程较单纯Scr或CysC的方程更准确,但在我国人群中的实际应用情况尚不清楚.

POEMS综合征合并重度肾小管间质损害一例

POEMS综合征是以多系统损害为特征的临床综合征,以多发性周围神经病(polyneuropathy)、脏器肿大(organomegaly)、内分泌障碍(endocrinopathy)、M蛋白(monoclonal protein)血症和皮肤病变(skin changes)为特征.POEMS综合征临床并不多见,其中合并肾损害的报道国内仅见个案报告[1-2],现将本院随访4年的1例报告如下.患者,男,63岁,5年前因“双侧腹股沟淋巴结肿大”就诊于南方医科大学某三甲医院,当时予行血生化示总蛋白102.4 g/L、球蛋白57.2 g/L;IgG 26.93 g/L、IgA 0.94 g/L、IgM 1.52 g/L、补体C30.31 g/L、补体C40.06 g/L;免疫固定电泳可见异常单克隆条带,类型为IgG+κ型;24 h尿蛋白量0.32 g/24 h;PET-CT示:全身多发淋巴结肉芽肿性增生;左髂后上棘骨髓穿刺示:骨髓造血功能中至重度不足,未见浆细胞克隆性增生.

腹膜后Castleman病并肾损害一例

患者,男,51岁,因双下肢水肿伴尿检异常3年于2010年3月11日入院.3年前未注意尿中泡沫和腹部包块.查体:T36.6℃,BP 110/70 mm Hg,双颌下、颈部、腹股沟均可触及肿大淋巴结,大约2 cm×1 cm,表面光滑,质中,活动可,无触痛,脐偏右可触及一约10 cm×8 cm肿块,表面光滑,质硬,活动差,无触痛,双下肢轻度指凹性水肿.辅助检查:血Hb 106 g/L,ALB 39.6 g/L,Scr 140.1μmol/L;尿潜血(-),尿蛋白(±),24 h尿蛋白量0.45 g;自身抗体(-).腹部超声:脾大.右下腹超声:腹膜后多发肿大淋巴结可能.下腹增强CT:腹部多发肿大淋巴结,考虑Castleman病,见图1.肾活检免疫荧光:IgA 4+,lgM+,C3c 2+.

嗜酸性肉芽肿血管炎一例

嗜酸性肉芽肿血管炎(eosinophilic granulomatosis with polyangiitis,EGPA)也称Churg-Stauss syndrome,是一种少见病,因多系统受累,临床表现多样,缺乏特异性,故确诊往往延迟.现将我院收治的1例EGPA的诊治和预后报告如下.患者,男,54岁,因“反复咳嗽、气短6个月,乏力1个月”于2011年12月13日入院.患者6个月前无诱因出现咳嗽、咳白色泡沫痰,就诊呼吸科,肺CT示双肺多发结节,双侧筛窦、右侧上颌窦黏膜局限性增厚,纵隔淋巴结肿大,支气管镜检查示黏膜慢性炎症.建议行肺穿刺,患者拒绝,予抗感染20 d.

腹膜-肾综合征

残余肾功能(residual renal function,RRF)除与较好的溶质与液体清除相关外,还与循环炎性标志物的减少、血压的降低、左心室肥厚的减轻及血红蛋白水平的升高、营养状态改善及钙磷代谢平衡相关联.RRF下降是腹膜透析(腹透)患者生存率降低的重要危险因素[1].腹膜是进行腹透的基本解剖结构,其功能完整是确保腹透治疗成功的关键.相对于血液透析,腹透本身具有较好的RRF保护作用.然而随着透析年限的延长,大部分腹透患者不可避免地出现RRF丧失以及腹膜功能降低,影响患者临床结局[2].

糖尿病肾病肾小管细胞形态功能异常的研究进展

糖尿病肾病(diabetic kidney disease,DKD)是终末期肾病(ESRD)的主要原因.虽然肾小球损伤在DKD的发病机制中处于中心地位,但目前许多学者认为,肾小管及间质病变也是2型糖尿病患者病理生理改变的重要组成部分[1],且临床与动物实验证明小管病变在DKD的进展中起关键作用[2].DKD状态下,肾小管上皮细胞形态与功能异常表现为:肾小管上皮细胞生长异常,葡萄糖及钠的重吸收功能紊乱及小管间质纤维化等,这些病理改变与DKD的进展密切相关.多种代谢产物、细胞因子、蛋白调控分子及信号通路参与调控上述的病理变化.本文以DKD肾小管细胞形态与功能异常为切入点,概括近年来DKD肾小管细胞功能变化及其相关机制的研究进展,以及肾小管间质纤维化对DKD进展的影响,并简要介绍了以肾小管细胞为“靶点”防治DKD的新思路.