高糖和胰岛素对肾小球系膜细胞葡萄糖转运蛋白4表达及易位的影响

目的 观察高糖和胰岛素对体外培养的肾小球系膜细胞(GMC)葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)的影响以及胰岛素引起GLUT4易位的情况,探讨GLUT4在糖尿病肾病(DN)发生发展机制中的作用.方法 将体外培养的鼠1097系膜细胞分为8组:对照组、生理浓度胰岛素组(10-9 mol/L)、低浓度胰岛素组(10-8 mol/L)、高浓度胰岛素组(10-6 mol/L)、高糖组(30mmol/L)、甘露醇组、高糖加高浓度胰岛素组和高糖加生理浓度胰岛素组.RT-PcR检测GLUT4 mRNA 表达;共聚焦显微镜观察各组GLUT4蛋白表达,以及胰岛素引起GMc GLuT4易位的剂量-时间效应.结果 胰岛素可增加GLUT4的表达,高糖使GLUT4表达明显下降.胰岛素可引起系膜细胞GLUT4易位.低浓度胰岛素组、高浓度胰岛素组细胞GLUT4均在加入胰岛素15 min后达到大易位,且以后的45 min胞膜上的GLUT4的荧光强度与15 min时差异无统计学意义(P＞0.05).结论 不同浓度的胰岛素均可刺激系膜细胞GLUT4易位,且过程是相似的.高糖明显抑制GLUT4在系膜细胞上的表达.胰岛素可部分拮抗高糖导致的GLUT4下调.且旱剂量依赖性.

罗格列酮对实验性慢性环孢素肾病的作用

目的 探讨罗格列酮(RSG)对慢性环孢素肾病(CCN)大鼠模型的肾保护作用.方法 低盐饮食基础上建立CCN大鼠模型,其中1组模型鼠用RSG同时灌胃.分别在实验开始后第14天和第35天处死动物,检测血浆和肾组织血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、AngⅡ1型受体(ATlR)、转化生长因子β1(TGF-β1)、细胞外调节蛋白激酶(p-ERK)、α-SMA和纤连蛋白(FN)的表达.在体外用不同浓度的CsA和RSG孵育NRK细胞.RT-PCR检测肾皮质TGF-β1,Western印迹分析检测FN、ATlR、p-ERK水平.结果 RSG可改善环孢素A导致的大鼠肌酐清除率的下降[(0.586±0.094)比(1.072±0.105)ml·min-1·kg-1,P＜0.01]、血浆和肾组织AngⅡ水平增加(P＜0.01)、肾间质单核细胞浸润(P＜0.01)、肾问质纤维化(1.707±0.019比2.335±0.022,P＜0.01)、肾组织α-SMA表达增加(P＜0.01)、肾皮质TGF-β1 mRNA水平增加(P＜0.01)、NRK细胞FN、ATlR和p-ERK蛋白水平增加(P＜0.05).结论 RSG可能通过减轻炎细胞浸润、影响Ang Ⅱ作用和下调TGF-β1等途径减轻CsA所致的肾组织损伤.

急性缺血再灌注损伤对肾脏的近期和远期作用

目的 探讨急性缺血再灌注(IR)损伤对大鼠肾脏的近期和远期作用及其机制.方法 双侧肾蒂夹闭40 min后再灌注,制作大鼠IR模型.术后4 h、24 h、48 h、72 h、1周、5周和10周收集血样和肾脏标本,动态观察肾脏病理、肾功能和大鼠死亡情况.用透射电镜观察小管上皮细胞的超微结构;原位末端标记法(TUNEL)检测肾小管上皮细胞凋亡情况;Masson染色法观察小管问质纤维化程度;Western印迹法测定α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达;免疫组织化学法观察肾脏α-SMA和转化生长因子β1(TGF-β1)的分布和表达.结果 再灌注后IR组的Scr和BUN水平逐渐升高,48 h达到高峰.IR组病死率为32%(8/251,假手术(Sham)组病死率为0(0/22).再灌注48 h IR组出现近端肾小管上皮细胞广泛性坏死和少量凋亡;IH组术后5周和10周有轻至中度的小管间质纤维化,术后1周肾脏α-SMA和TGF-β1蛋白表达显著升高,以后两者表达有所下降但仍高于Sham组.结论 严重的缺血再灌注损伤不仅是早期肾小管大量坏死、肾功能急剧下降和病死率增高的原因,而且可以导致小管问质纤维化,影响肾脏的远期预后.TGF-β1过表达和肌成纤维细胞增多可能介导了纤维化病变.

罗格列酮对糖尿病大鼠肾脏保护作用机制的探讨

目的 探讨罗格列酮对糖尿病大鼠肾脏的保护作用机制.方法 将大鼠分为正常组、糖尿病组、小剂量罗格列酮组、大剂量罗格列酮组.药物干预4周后,检测各组大鼠的血糖(BS)、三酰甘油(TG)、胆固醇(TC)、肌酐(Scr)水平及尿白蛋白定量(24 h).随后处死大鼠,测定肾组织中丙二醛(MDA)含量、总抗氧化能力(T-AOC)及铜锌超氧化物歧化酶(Cu-ZnSOD)、谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)、核转录因子-KB(NF-κB)的活性.同时留取肾脏组织作PAS染色行病理检查.RT-PCR和免疫组化法检测肾组织中单核细胞化学吸引蛋白质1(MCP-1)mRNA及蛋白质的表达.结果 与糖尿病组相比,大剂量罗格列酮干预组BS、TC、TG差异无统计学意义;而肾组织MDA含量、MCP-1 mRNA及蛋白质表达、NF-κB活性差异有统计学意义(P＜0.05),SOD、GSH-Px、T-AOC活性显著上升;肾小球面积及体积减小.结论 大剂量的罗格列酮可显著改善糖尿病大鼠的肾脏损害,其机制可能与其抗氧化,抑制NF-κB活性,降低MCP-1的含量有关.

FK506对糖尿病大鼠早期肾脏肥大的抑制作用及机制

目的 探讨FK506对糖尿病大鼠早期肾脏肥大的抑制作用及机制.方法 应用链脲菌素(65 mg/kg)腹腔注射建立大鼠糖尿病模型.每日分别给予FK506 0.5、1.0 mg/kg灌胃,共4周:观察大鼠肾质量/体质量、尿白蛋白排泄率(AER)、Ccr及肾组织病理形态学变化.应用Western印迹和免疫组化方法检测肾组织钙神经蛋白(calcineurin,CaN)、1αⅣ型胶原、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及转化生长冈子β1(TGF-β1)蛋白表达.结果 FK506 1.0组大鼠相对肾质量明显低于模型组(P＜0.05).FK506 0.5与1.0组大鼠AER水平与肾小球平均体积明显低于模型组(P＜0.05、0.01).FK506 1.0组肾小管间质-损伤指数也明显低于模型组＜P＜0.01).Western印迹显示,模型组肾组织CaN蛋白表达较对照组增加2.4倍;FK506 0.5与1.0组肾组织CaN蛋白表达比模型组下降38.0%与73.2%.模型组肾组织1αⅣ型胶原、Ⅳ-SMA及TGF-β1蛋白表达明显高于对照组;FK506组肾组织上述蛋白表达明显低于模型组(P＜0.05、0.01).结论 FK506对糖尿病大鼠早期肾脏肥大有明显抑制作用,其机制与下调肾组织增高的CaN表达有关.

尿毒症患者高级蛋白氧化产物与血管钙化的关系及其机制探讨

目的 研究CKDV期患者血中高级蛋白氧化产物(AOPP)水平及其与动脉钙化的关系,并探讨AOPP可否诱导动脉平滑肌细胞向成骨细胞分化.方法 50例CKDV期患者为尿毒症组,10例肾功能正常的胸腺瘤患者作为对照组.测定血AOPP、钙、磷、甲状旁腺激素(iPTH)水平,同时分别取桡动脉和同级别的胸廓内动脉做组织学检查.体外用次氯酸处理的人血清白蛋白(AOPP-HAS)作用于主动脉平滑肌细胞(HASMC),以单纯人血清白蛋白(HAS)培养基和常规培养基作为对照,RT-PCR法柃测核结合因子α-1(CBFα-1)及骨桥蛋白 (OPN)水平.结果 CKDV期患者血浆AOPP水平明显高于对照组[(90.22±55.88)μmol/L比(35.79±4.31)μmol/L,P＜0.011.50例桡动脉标本中44例有OPN沉积于中膜(88%),其中24例有明显的钙化(48%),对照组无一例有OPN沉积及钙化.Pearson相关分析显示血清AOPP水平与桡动脉内膜中层厚度(IMT)(r=0.691,P＜0.01)及管壁/管腔比值(r=0.354,P＜0.05)呈正相关.血管钙化程度与AOPP(r=0.791,P＜0.01)、血清磷(r=0.602,P＜0.01)、iPTH水平(r=0.549,P＜0.05)呈正相关.体外试验显示AOPP-HAS可诱导HASMC表达CBFα-1和OPN,而单纯HAS无此效应.结论 CKDV期患者普遍存在高AOPP血症和血管钙化,血AOPP水平与血管钙化密切相关.这可能与AOPP直接诱导动脉平滑肌细胞向成骨细胞分化有关.

系统性硬化并发急性肾损伤的临床病理分析

目的 探讨系统性硬化(SSc)急性肾损伤(AKI)患者的临床和病理特点.方法 回顾性分析11例SSc急性肾损伤患者的临床资料,比较抗中性白细胞胞质抗体(ANCA)阳性和阴性SSc患者的肾脏损伤情况.结果 11例SSc急性肾损伤患者中,ANCA阴性9例,6例临床表现为硬皮病肾危象(SRC),其中4例肾活检示小叶间动脉和入球小动脉内皮细胞增生、肿胀,内膜黏液性水肿,内弹力纤维断裂,"洋葱皮样"改变和肾小球弥漫性缺血;无恶性高血压表现2例;急性肾小管坏死l例.MPO-ANCA阳性2例,无恶性高血压表现,1例肾活检示新月体肾炎.所有病例均予糖皮质激素治疗,8例患者接受环磷酰胺(CTX)治疗,9例患者接受血液透析治疗.SRC的6例患者都接受了大剂量的ACEI和(或)ARB治疗,其中4例于6个月内死亡,余ANCA阳性和阴性的患者中也各有1例死亡.结论 SSc患者AKI的临床表现多样,SRC、ANCA相关性小血管炎都可能导致SSc患者急性肾损伤发生,两者在临床、肾脏病理及治疗方面有明显的不同,但预后都不良.大剂量糖皮质激素有诱发SRc的可能,建议泼尼松用量＜15 mg/d.

黄芪水提物对健康人尿钠排泄的影响及机制研究

目的 探讨黄芪水提物(ARE)对健康人的利尿利钠作用及其机制.方法 采用双盲交叉试验.12名健康男性志愿者口服生理盐水(10 ml/kg)后随机分为ARE组和安慰剂组,2周洗脱期后再进行试验.结果 与安慰剂组相比,ARE组尿钠排泄量(UNaV)在1.5 h和2 h分别增加73%和43%,2 h时达高峰[(0.30±0.05)比(0.21±0.02)mmol/min,P＜0.05],4 h时作用基本消失.尿钠排泄分数(FENa)和尿氯排泄量(UClV)也显著增加,均在2 h达高峰,而尿量、尿钾及尿肌酐排泄量在服药4 h内均无增加,12 h和24 h尿量及尿电解质排泄量也无改变.口服ARE后血浆心钠素浓度(pANP)、尿环磷酸鸟苷排泄量(UcGMPV)及UcGMP/pANP比值均在2 h显著增加(P＜0.05).UNaV与血浆pANP、UcGMPV及UcGMPV/pANP比值正相关(P均＜0.05),而与Ccr无相关(r=0.153,P＞0.05).结论 ARE能增加健康人尿钠排泄,其机制与ARE促进ANP产牛以及增加ANP肾脏活件有关.

罗格列酮对糖尿病肾病大鼠足细胞nephrin和podocin表达的影响

本研究采用糖尿病肾病(DN)大鼠模型,通过观察肾组织足细胞超微结构及其相关分子表达的变化,以及罗格列酮对其的影响,进一步揭示足细胞相关分子在实验性DN发病中的作用及脂质过氧化物增殖物激活受体γ(PPARγ)激动剂治疗DN的分子机制,为DN的预防和治疗提供理论依据.

螺内酯对肾间质纤维化中细胞增殖凋亡失衡的影响

螺内酯是醛固酮受体拮抗剂,传统认为是弱效利尿剂,新近发现它能改善单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾间质纤维化病变程度,但作用机制尚不清楚[1].本研究从细胞增殖凋亡失衡角度来探讨醛固酮受体拮抗剂对UUO大鼠肾间质纤维化的作用.

静脉注射与静脉滴注蔗糖铁治疗血液透析患者肾性贫血的疗效比较

本研究对静脉注射与静脉滴射蔗糖铁的疗效及安全性用随机、对照的方法进行了比较.一、对象与方法1.对象:40例Hb＜90 g/L、血清铁(SF)≤300 μg/L或转铁蛋白饱和度(TSAT)≤25%,2周内未用过静脉铁剂的维持性血液透析患者.

连续静脉-静脉血液滤过对亚胺培南的药代动力学影响

为了解亚胺培南在接受连续静脉-静脉血液滤过(CVVH)治疗的无尿患者体内的药代动力学特征,以指导临床用药,我们作了以下研究.

慢性肾脏病非透析患者心理状况的相关性研究

本研究对慢性肾脏病非透析患者的情绪、心理健康状况、人格等心理因素与病情的相关性进行研究.一、对象和方法收集慢性肾脏病非透析住院患者58例,男34例,女24例.

同卵孪生同胞间肾移植术后过敏性紫癜性肾炎快速复发一例

患者,男,35岁,近20年反复发作紫癜2次,2005年10月出现尿毒症,于2005年12月1日入我院.查体:血压150/110 mm Hg,贫血貌,眼睑轻度水肿,睑结膜苍白,心肺未见异常,双下肢轻度凹陷性水肿.

肾病综合征并发下肢动脉血栓导致横纹肌溶解一例

肾病综合征患者并发下肢动脉血栓并不少见,但由此引发横纹肌溶解综合征的病例尚未检索到有关报道:我们报告肾病综合征并发下肢动脉血栓导致横纹肌溶解1例,并对此提出治疗建议.

成年型多囊肾并发颅内动脉瘤一家系报告

患者(Ⅲ4),女,38岁.26岁时发现肉眼血尿、腰痛,B超、CT诊断为"多囊肾、多囊肝".此次因反复出现头晕、头痛人院.查体:BP 150/70 mm Hg,双瞳等大等圆,心肺未见异常,腹部膨隆,扪及增大的双肾,表面不平,触痛明显.

生物人工肾系统的组织工程构建及应用

一、生物人工肾的研究及应用概况1.研究慨况:急慢性肾功能衰竭是临床上较常见的肾脏疾病,尽管采用血液透析、透析滤过及非卧床持续性腹膜透析(CAPD)治疗可延缓疾病的进展,但临床上仍有较高的病死率[1].

转化生长因子β1短发夹RNA对白蛋白刺激人肾近曲小管上皮细胞细胞因子表达的影响

目的 研究pcDu6载体质粒介导的转化生长因子β1(TGF-β1)短发夹RNA(shRNA)对人血清白蛋白(HsA)致人肾近曲小管上皮细胞(HK2细胞)增殖,TGF-β1、结缔组织生长因子(CTGF)和纤连蛋白(FN)表达的影响,并探讨有关机制.方法 构建TGF-β1shRNA的pcDu6载体质粒,体外培养HK2细胞株.采用脂质体转染将表达TGF-β1 shRNA的pcDU6质粒载体(pcDU6-A1-A2和pcDu6-Bl-B2)分别导入实验组细胞.用HsA(5 g/L)刺激HK2细胞12 h或24 h.四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法测定细胞增殖水平.RT-PcR半定量分析HK2细胞中TGF-B1、CTGF和FN mRNA的表达水平;双抗夹心酶联免疫吸附法检测HK2细胞培养液中TGF-β1及FN蛋白质水平.结果 HK2细胞在HSA刺激下,其TGF-β1、CTGF及FN mRNA的表达明显上调,培养液中TGF-β1和FN的蛋白质含量亦明显升高(P＜0.05).与pcDu6空载体组比较,pcDU6载体质粒介导的TGF-β1 shRNA干扰组TGF-β1、CTGF及FNmRNA的表达明显下调(P＜0.05).TGF-β1 shRNA转染HK2细胞后12 h或24 h,细胞培养液中TGF-β1和FN蛋白质含量明显下降,HK2细胞增殖被部分抑制(P＜0.05).在细胞增殖、TGF-β1、CTGF及FN基因表达方面,TGF-β1 shRNA干扰组组间比较,以及pcDU6空载体转染组与HSA刺激组比较,差异均无统计学意义.结论 pcDU6载体质粒介导的TGF-β1 shRNA能够明显抑制HSA刺激下HK2细胞增殖TGF-β1、CTGF和FN基因的表达.HSA刺激HK2细胞增殖及CTGF和FN基因的过表达可能通过TGF-β1介导.

单核细胞化学吸引蛋白质1小分子干扰RNA人肾小管上皮细胞株的建立

目的 建立单核细胞化学吸引蛋白质1(MCP-1)小分子干扰RNA(siRNA)人肾小管上皮细胞株,并检测MCP-1 siRNA对人肾小管上皮细胞(HKC)MCP-1基因的抑制效应.方法 针对人MCP-1 mRNA 67、116、142位点设计并合成3对MCP-1 siRNA序列.构建MCP-1 特异性siRNA真核表达载体,以脂质体法瞬时转染至HKC.转染24 h后分别应用实时定量RT-PCR及Western印迹技术检测HKC内MCP-1 mRNA、蛋白表达,筛选出抑制效率高的MCP-1 siRNA.以筛选出的MCP-1 siRNA序列构建慢病毒穿梭质粒.使用慢病毒穿梭质粒进行慢病毒颗粒的包装和生产,得到病毒液并确定其滴度.以病毒液感染HKC,筛选MCP-1 siRNA人肾小管上皮细胞株,并应用实时定量RT-PCR及Western印迹技术检测HKC内MCP-1 mRNA、蛋白表达.结果 成功建市MCP-1特异性siRNA人肾小管上皮细胞株.MCP-1 siRNA稳定转染能下调人肾小管上二皮细胞MCP-1 mRNA(68.49±6.38)%、蛋白(72.97±6.13)%,与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.01).结论 MCP-1特异性siRNA能高效抑制HKC内MCP-1基因表达.MCP-1 siRNA人肾小管上皮细胞株的建立为MCP-1基因功能及肾间质纤维化防治研究提供实验材料和依据.

正确使用字词

肥胖相关肾病

近20年来全球范围肥胖人群成倍增加,在我国随着生活方式及饮食结构的改变,超重和肥胖人群也迅猛增长,并日渐成为突出的社会公共卫生问题.1997年世界卫生组织(WHO)明确宣布肥胖为一种疾病.

应该被废弃的诊断名词——"隐匿性肾炎"和"隐匿性肾小球疾病"

一、该名词的来源和历史背景该名词的定义各家的看法曾不一致[1].1992年6月,我国中华内科杂志编委和肾脏病专业组专题讨论会,制定了原发性肾小球疾病临床诊断标准.