Smad2反义寡核苷酸抑制高糖培养大鼠系膜细胞细胞外基质的分泌

目的观察Smad2反义寡核苷酸(ODN)对高糖培养的系膜细胞分泌纤连蛋白(FN)、Ⅳ型胶原(ColⅣ)的影响,探讨Smad2在肾小球硬化中的作用,寻找延缓肾小球硬化的新方法.方法设计、合成Smad2起始密码子部位的正义、反义和随机ODN,用脂质体法将ODN瞬时转染大鼠系膜细胞,并进行高糖培养.观察Smad2 mRNA及蛋白的表达及其对系膜细胞细胞外基质(ECM)分泌的影响.结果转染Smad2反义ODN的大鼠系膜细胞,其Smad2 mRNA及蛋白表达均降低,与高糖组、正义组和随机组相比差异有统计学意义(P＜0.05),与正常对照组相比无统计学意义(P＞0.05).高糖组、反义组、正义组和随机组培养上清液中FN含量(ng/ml)分别为84.19±6.81、57.65±5.05、78.72±9.13、77.13±7.36;ColⅣ含量(ng/ml)分别为55.27±4.75、22.31±3.24、46.23±2.02、45.92±1.21.反义ODN组FN、ColⅣ的含量均减少,与高糖、正义、随机ODN组相比差异有统计学意义(P＜0.05).结论反义Smad2 ODN可抑制高糖刺激引起的系膜细胞Smad2 FN和Col的表达上调,该研究结果为延缓肾脏纤维化提供了新的思路和治疗途径.

富含半胱氨酸的酸性分泌糖蛋白对囊肿衬里上皮细胞细胞周期及其调控基因表达的影响

目的研究富含半胱氨酸的酸性分泌糖蛋白(SPARC)对人常染色体显性多囊肾病(ADPKD)囊肿衬里上皮细胞(CLECs)细胞周期及其调控基因表达的影响,初步探讨SPARC对CLECs的作用.方法体外条件下用不同浓度SPARC处理CLECs,5-溴-2脱氧尿苷酶联免疫吸附测定法(BrdU ELISA)测定CLECs增殖;流式细胞术检测细胞周期;实时荧光定量RT-PCR方法检测CLECs细胞周期调控基因ClnD1、P21wafl表达水平的变化.结果μg水平的SPARC能有效抑制ADPKD CLECs增殖(P＜0.01),使细胞周期停滞于G0/G1期.10μg/ml SPARC刺激后,ClnD1 mRNA水平(3.56±0.54)×104拷贝/百万GAPDH较对照组(7.50±0.99)×104显著减弱,P21WaflmRNA水平(7.72±0.85)×103较对照组(4.25±1.38)×103显著增强.结论SPARC能够有效抑制CLECs细胞周期的进展.其机制可能通过抑制ClnD1、促进P21Wafl的表达,抑制细胞通过G1-S期限制点,从而对其增殖产生显著的抑制作用.

局灶节段性肾小球硬化症大鼠尿足细胞动态检测及其意义

目的建立局灶节段性肾小球硬化症(FSGS)大鼠模型,观察尿中脱落的肾小球足细胞的变化,并探讨其意义.方法FSGS组(n=7):采用左颈静脉插管一次性缓慢注射嘌呤霉素核苷酸(PAN,9 mg/100 g体重)的方法建立FSGS大鼠模型.正常对照组(n=5):注射等量生理盐水,实验周期20周.动态检测24 h尿蛋白定量;间接免疫荧光方法动态检测尿沉渣足细胞特异性标志蛋白podocalyxin(PCX)、Wilm＇s tumor-1(WT-1);20周末肾组织光镜下观察肾小球病变;电镜观察肾小球足细胞的改变;免疫荧光染色观察肾小球内PCX和成熟足细胞特异性标志蛋白synaptopodin(PP44)的表达.结果FSGS组大鼠24 h尿蛋白定量在第3天较注射前明显升高,第12天达到高峰[(672.74±98.72)比(19.31±3.15)mg/24 h,P＜0.01),此后开始下降,于第6周接近注射前水平,持续至11周[(35.46±14.88)比(19.31±3.15)mg/24 h,P=0.0238];从12周开始再度缓慢升高,持续高水平至20周,为注射前近7倍[(140.61±68.90)比(19.31±3.15)mg/24 h,P＜0.01].FSGS组大鼠从12周开始,尿足细胞出现阳性(＞1～5个/HP),持续至20周.光镜显示,30%～50%肾小球出现不同程度的局灶节段性硬化;电镜证实足突部分融合并可见足突与基底膜剥离.足细胞特异标记蛋白PCX、PP44在肾小球节段性硬化部位呈现节段性缺失.对照组大鼠24 h尿蛋白定量在20周内无明显变化[(23.05±1.40)比(19.31±3.15)mg/24 h,P＞0.05],尿中亦未见阳性足细胞.结论足细胞损伤脱落可能是启动FSGS发生、发展的重要致病因素之一.尿中脱落足细胞可作为判断FSGS进展的标志之一.

托拉塞米注射液治疗水肿性疾病安全性和利尿效果研究

目的观察托拉塞米注射液在水肿性疾病中的利尿效果及安全性.方法采用随机、单盲、多中心对照研究方法.托拉塞米注射液与呋塞米注射液的用药剂量比为1:2.结果共观察了219例肾病水肿、充血性心力衰竭和肝硬化腹水患者,其中托拉塞米组110例,呋塞米组109例.治疗前托拉塞米组和呋塞米组尿量分别为(1300.09±509.33)和(1472.95±647.88)ml/24 h(P=0.03),用药后第1天尿量即分别增至(2091.96±859.76)和(2058.26±828.81)ml/24h(与用药前比较,P均＜0.01).托拉塞米组用药后尿量增加＜30%11例,30%～50%24例,51%～80%29例,81%～100%7例,＞100%39例;呋塞米组用药后尿量增加＜30%31例,30%～50%35例,51%～80%14例,81%～100%12例,＞100%27例.托拉塞米组有1例在用药后发生一过性耳聋,自行缓解,以后随访也无听力障碍;其余不良反应与呋塞米组均无差异.结论短期应用托拉塞米注射液治疗水肿性疾病利尿效果显著,副作用小,与呋塞米注射液无显著差异.

胰岛素样生长因子家族与糖尿病肾病关系的临床研究

糖尿病肾病(DN)是糖尿病(DM)常见并发症.近年研究表明,胰岛素样生长因子(IGFs)家族在DN的发生、发展中起一定作用.我们利用分子生物学方法研究DN各阶段中IGFs家族成员的血清水平,并探讨其病理意义以及与相关指标之间的关系.

白介素10对内毒素诱导急性肾衰竭大鼠炎症介质的影响及保护作用

研究表明,促炎介质与抗炎介质的不平衡是加重炎症反应,促进多器官功能不全综合征(MODS)发生发展的重要因素[1].白介素10(IL-10)是重要的抗炎介质,它能明显抑制单核-吞噬细胞的致炎作用.本研究用内毒素攻击大鼠,观察IL-10对肾组织炎症介质肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白介素6(IL-6)基因表达的影响及对肾组织的保护作用,为IL-10治疗MODS及急性肾衰竭(ARF)提供实验依据.

肥大细胞类胰蛋白酶对人肾成纤维细胞作用机制探讨

肥大细胞在身体广泛分布,近年发现在肾组织的炎症和纤维化部位常有大量肥大细胞浸润,且与其病变程度呈正相关,是预后的标志之一.肥大细胞激活后分泌大量炎性介质,其中丰富的介质是一种四聚体的丝氨酸蛋白水解酶(类胰蛋白酶),占肥大细胞蛋白重量的25%左右.这种酶可能是通过蛋白水解酶激活受体2(PAR-2)发挥其效应的.单核细胞趋化因子1(MCP-1)是单核-巨嗜细胞系统重要的趋化因子.我们旨在研究肥大细胞类胰蛋白酶对人肾成纤维细胞(HRF)作用的机制,为慢性肾纤维化的发病机制提供新的观点.

连续性静脉-静脉血液滤过治疗重症颅脑疾病并高钠血症一例

患者,男,77岁.2003年12月10日因突发昏迷并致头部外伤半小时入院,短暂意识转清后又陷入深昏迷.BP170/90 mmHg,生理、病理反射均消失,GCS评分3分,电解质正常,CT示双侧额叶及蛛网膜下腔出血,左侧颞顶硬膜下出血(56ml).诊断:急性出血性脑血管病并颅脑损伤.立即行"颅内血肿清除+去骨瓣减压+右额板钻孔引流术".

原发性高血压并微量白蛋白尿患者高敏C反应蛋白水平观察

高敏C反应蛋白(hs-CRP)作为一项敏感的炎症指标可反映动脉粥样硬化的严重程度,对冠心病(CHD)患者有重要意义.本研究探讨原发性高血压(EH)伴微量蛋白尿患者与hs-CRP的关系及意义.

支架重建血运治疗缺血性肾病

随着我国人口老龄化的加剧,如何阻止缺血性肾病进展为终末期肾病已越来越为临床关注.近年来,肾动脉支架置入术(PTRAS)已成为治疗动脉粥样硬化性肾血管病(ARVD)的主要措施,但是否能改善肾功能,尚有很大争议.我们报告27例ARVD并慢性肾功能不全患者经支架重建血运后随访6个月以上的临床结果,评估该方法对肾功能的影响及安全性.

血清尿酸水平与过敏紫癜性肾炎的相互关系探讨

过敏紫癜肾炎(HSPN)是儿科常见的继发性肾小球疾病,其机制尚未完全明确.近年发现,血清尿酸(BUA)升高与许多疾病相伴随.我们探讨了BUA升高与HSPN之间的相关性.

低分子量肝素对肾病综合征患者组织纤溶酶原激活物与D-二聚体的影响

肾病综合征(NS)常存在高凝状态,肝素的抗血栓作用也逐渐被接受,因而,研究肝素的溶栓作用具有重要的临床意义.

脂蛋白肾病一例

患者女性,35岁,1年前于上呼吸道感染10 d后出现眼睑水肿,继之全身水肿,伴尿量减少,经当地医院治疗无效.10 d前无明显诱因全身水肿复发并加重,伴尿量减少而转入我院进一步诊治.查体:P 101次/min,BP 121/81 mmHg,慢性病容,贫血貌,眼睑及双下肢轻度水肿,心肺腹未见异常,肾区无叩痛.

原发性小血管炎继发可逆性肾盂积水一例

原发性小血管炎继属系统性自身免疫性疾病,临床表现复杂多变,故易误诊而导致病情恶化.现报告一例原发性小血管炎继发肾盂积水,以提高对该病的认识.

关注血液透析中若干问题,进一步提高血液透析治疗水平

临床研究的一个重要组成部分是流行病学研究.终末期肾衰竭(ESRD)的流行病学研究结果(USRDS及欧洲资料)显示全球ESRD人数在逐年持续增加,已超过了人口年增长率.截止2001年底血液透析人数已高达101.5万.尽管血液透析取得很大成功,ESRD患者可赖以生存,但透析仍是一种死亡率高,生活质量不够理想和高花费的治疗模式.为了减轻沉重医疗负担,人们认识到要重视慢性肾脏病(CKD)的早期识别和防治,减少ESRD的发生.2003年公布的K/DOQI_CKD临床实践指南,对肾脏病学界起了非常巨大的影响.对于已经血透的患者,降低其死亡率,提高患者生活质量和减少治疗上的花费是摆在我们面前艰巨的任务.

警惕非法医学期刊的招摇撞骗

维持性血液透析患者微炎症状态的认识与防治

近年来,尽管对尿毒症毒素的认识不断深入以及血液净化技术已有长足的发展,终末期肾病(ESRD)患者的预后仍然不够理想.经过治疗的ESRD患者的死亡率仍高达25%,预期寿命比正常人群少20～25年.其中主要的死因是心、脑血管并发症,占全部死因的40%～50%,是普通人群的20～100倍,而加速进展的动脉粥样硬化是受关注的原因之一.尸检和冠脉造影发现,尿毒症患者冠脉粥样斑块形成的比率是30%,发生过一次心肌梗死后1年和2年病死率分别是55.4%和62.3%,在普通人群中这一数据仅为10%～15%.除了一些传统的危险因素(如年龄、性别、家族史、高血压、吸烟、糖尿病、高脂血症、肥胖等)以外,近年来的研究表明,一个非传统的危险因素--维持性血透患者的微炎症状态可能通过不同的机制导致营养不良和进展性的动脉粥样硬化性的心血管疾病.

尿毒症患者血管中膜钙化和骨特异性蛋白的表达

目的研究尿毒症患者血管中骨特异性蛋白的表达和钙盐沉积的关系.方法88例尿毒症患者在接受肾移植手术时,留取其腹壁下动脉的近端2～3 cm.钙盐沉积染色采用yonKossa法和茜素红染色方法.骨特异性蛋白,包括骨桥蛋白(OPN)、骨唾液酸桥蛋白(BSP)及碱性磷酸酶(AKP)的表达采用免疫组化染色法.测定血钙、磷、PTH、甘油三酯(TG)、总胆固醇(Tch)、低密度脂蛋白(LDL),计算体重指数(BMI).结果 88例腹壁下动脉标本中出现血管钙化的有23例,发生率为26.1%;轻中度钙化8例(9.1%),重度钙化15例(17%),均发生在血管中膜.出现明显钙化的腹壁下动脉的中膜均有OPN、BSP、AKP的阳性沉积;65例无明显钙化的标本中也有50例(76.9%)中膜有AKP、OPN、BSP的阳性沉积.腹壁下动脉重度钙化标本中膜OPN、BSP、AKP免疫组化的积分均显著高于无钙化标本,轻中度钙化标本AKP的积分也高于无钙化标本.年龄、BMI与OPN、AKP、BSP免疫组化阳性积分均成正相关,血磷与OPN(r=0.262,P=0.017),AKP(r=0.23,P=0.036)成正相关.结论尿毒症患者腹壁下动脉的钙化与骨特异性蛋白的表达有关.在一些无显性钙化的患者腹壁下动脉也有骨特异性蛋白的表达,提示血管骨特异性蛋白的表达可能是血管壁钙化的早期表现,细胞介导的主动钙化过程参与了尿毒症患者血管中膜的钙化.

低钙透析液及盐酸米多君对血液透析患者血压的影响

目的研究低钙离子浓度1.25 mmol/L透析液(DCa1.25),及盐酸米多君对血透患者血压的影响.方法将透前或透后高钙血症的血透患者的透析液从DCa1.5换为DCa1.25,如出现低血压则透前停服降压药;如仍低血压或原透前未服降压药者给予盐酸米多君2.5 mg或5mg.观察不同钙浓度透析及加用盐酸米多君后血压和血容量变化.所有病例检测超声心动图,以及立卧位血压和持续握力试验用以反映自主神经功能.结果本组患者共21例,男9例,女12例,年龄(54.4±14.2)岁,透析龄(33.04_±30.1)月.换用DCa1.25后,9例(42.9%)血压稳定,10例(47.6%)透析中出现头晕、出汗或抽搐伴随低血压;1例仅下肢抽搐;1例心前区不适.低血压组立卧位血压实验阳性者比例显著高于血压稳定组(50%比0%,P＜0.05),而超滤率、白蛋白、血红蛋白、并发症、心脏收缩舒张功能及左室肥厚比例均无显著差异.低血压组的10例患者中,停服降压药仍低血压或原未服药者共5例,透析前30 min予盐酸米多君2.5或5 mg.用DCa1.25透析时血容量较DCa1.5明显下降[(81.6±2.09)%比(86.18±2.38)%,P＜0.05),盐酸米多君可提升单用DCa1.25透析时血容量[(85.96±3.10)%,P＜0.05].结论本组使用DCa1.25的患者中约50%出现低血压,与其自主神经功能低下有关.出现低血压者可停服透前降压药,无效者或原未服药者可透前服用盐酸米多君,后者可通过增加外周血管张力和降低低钙透析时血容量下降幅度,从而有效维持血压.

终末期肾衰竭患者血清胎球蛋白A水平改变与临床预后的关系

目的探讨终末期肾衰竭(ESRD)患者在透析前以及透析1年后血清胎球蛋白A浓度的改变,以及其与临床表现及预后之间的关系.方法247例透析前ESRD患者接受血清胎球蛋白A及有关生化检查,其中131例在透析1年后再次检测.此外,用B超检测颈动脉斑块.患者随访期中位数为29.6(范围12.1～42.0)个月.70例健康人入选对照组.结果 ESRD患者血胎球蛋白A水平较正常对照组明显降低(P＜0.05).透析前血胎球蛋白A水平与血白蛋白(P＜0.01)、IL-6(P＜0.05)、血钙磷乘积(P＜0.05),尤其是与血磷水平(P＜0.05)相关.炎症、营养不良患者血胎球蛋白A水平较低(P＜0.05).颈动脉有斑块的患者血胎球蛋白A浓度较无斑块者明显降低(P＜0.01).透析1年后胎球蛋白A血浓度较治疗前相比明显降低(131例,P＜0.01).62%患者经过1年的肾脏替代治疗后胎球蛋白A水平较治疗前相比明显下降.无论是在治疗前还是在治疗1年后,随访中存活的患者胎球蛋白A水平显著地高于死亡者(P＜0.05).结论 ESRD患者低胎球蛋白A水平与营养不良、炎症、动脉粥样硬化以及病死率相关,经肾脏替代治疗后胎球蛋白A水平仍持续下降.胎球蛋白A水平是ESRD患者预后的一个重要独立因素.

红细胞生成素及其抗体在维持性血液透析患者中的研究

临床发现部分血液透析(HD)患者使用足够红细胞生成素(EPO)后,贫血改善不明显;同时也有一些患者在使用EPO一段时间后,对EPO反应性低下,对于其确切机制尚未明了.近年来,研究发现EPO不仅可以诱导机体产生抗EPO抗体,而且该抗体还可导致纯红细胞再生障碍性贫血(纯红再障,PRCA)[1],但出现抗EPO抗体并非都有纯红再障.我们检测了52例HD患者EPO及其抗体水平,探讨抗EPO抗体及EPO在透析人群中的意义.

血液透析患者冠状动脉电子束CT扫描钙化积分及其相关因素

目的探讨血液透析患者冠状动脉钙化的相关因素.方法以冠状动脉电子束CT(EBCT)扫描钙化积分确定冠状动脉钙化的程度,回顾性分析心血管疾病的危险因素及钙磷代谢异常等因素对冠状动脉钙化的影响.结果 22例维持性血液透析患者进行了EBCT检查,有21例患者(95.4%)存在不同程度的冠状动脉钙化(EBCT钙化积分＞0分),EBCT钙化积分平均1935.54分(0分～9833分).EBCT钙化积分≥100分的患者心血管疾病的发病率、血清磷、钙磷乘积和C-反应蛋白显著增高而血清白蛋白显著降低(P＜0.05).多元逐步回归分析的结果显示,冠状动脉钙化的影响因素有透析龄和低密度脂蛋白(HDL-C)(P＜0.05).结论尿毒症血液透析患者普遍存在冠状动脉钙化,但确切的机制不清楚.冠状动脉钙化(EBCT钙化积分)与高血磷、高钙磷乘积等有关,透析龄、HDL-C是冠状动脉钙化的独立影响因素.

武汉地区维持性血液透析患者生活质量及影响因素

随着生物-心理-社会健康观的新医学模式的发展,终末期肾衰竭(ESRD)的治疗目的已不再局限于生命的维持和症状的缓解,而是使患者的生理、心理和社会活动得到缓解和恢复.我们用普适性量表(SF-36)和肾脏疾病特异性调查表(KDQ)相结合,了解武汉地区维持性血透患者的生活质量状况及其影响因素.

高纯度透析浓缩液对血液透析患者血清白细胞介素6、肿瘤坏死因子α和白蛋白水平的影响

目的比较高纯度透析浓缩液和普通透析浓缩液对长期透析患者血清促炎症因子白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和血清白蛋白的影响.方法采用前瞻性临床对照研究,将85例维持性血液透析患者随机分为两组,分别采用普通透析浓缩液(常规组,42例)和高纯度透析浓缩液(高纯度组,43例)进行常规低通量血液透析治疗并随访12个月.比较常规组与高纯度组患者在血清IL-6、TNF-α、血清白蛋白、干体重、体重指数(BMI)、上臂中肌肉周径(MAC)、血红蛋白、红细胞压积、白细胞计数、中性粒细胞计数以及红细胞生成素应用剂量上的差异.结果高纯度组43例,常规组42例,两组患者间年龄、性别比例、透析龄、BMI、Kr/V值和血清IL-6、TNF-α水平差异无统计学意义.与基础水平比较,随访结束时高纯度组患者血清IL-6[(6.91±5.13)pg/ml比(3.06±2.42)pg/ml]和TNF-α水平[(14.78±4.61)pg/ml比(13.60±4.24)pg/ml]显著下降;血清白蛋白[(35.9±3.7)g/L比(37.6±3.4)g/L]、血红蛋白[(82.4±24.7)g/L比(88.2±22.9)g/L]及红细胞压积(0.25±0.07比0.28±0.05)均显著上升.与常规组比较,随访结束时高纯度组血清IL-6[(3.06±2.42)pg/ml比(4.22±3.99)pg/ml]和TNF-α水平[(13.60±4.24)pg/ml比(15.79±6.38)pg/ml均显著下降.结论提高透析浓缩液的洁净度,减少透析浓缩液中的细菌和内毒素污染,可以降低常规低通量血液透析患者血清促炎症因子(IL-6和TNF-α)水平,提高血清白蛋白水平,改善透析患者部分临床营养学指标,对血液透析患者的长期存活和生活质量产生有益的影响.

维持性血液透析患者抑郁患病情况及相关因素研究

维持性血液透析(HD)患者抑郁患病率明显高于正常人群,抑郁被认为是HD患者中常见的精神疾病[1].我们通过对HD患者进行抑郁患病情况以及生活质量调查,分析相关因素,探讨抑郁和生活质量关系.

生物电阻抗频谱法分析血液透析患者体液分布异常及其对血压的影响

目的了解血液透析(HD)患者透析前后体液的分布状况及其对血压的影响.方法106例健康志愿者作为正常对照,按性别分为2组,用生物电阻抗频谱法检测并计算细胞外液(ECV)、细胞内液(ICV)占体重的百分比(ECV%、ICV%)和ECV/ICV比值.选择我院透析龄2月以上的稳定HD患者67例,按照透析前后血压状况将患者分为低血压倾向组、正常血压组、普通高血压组和顽固性高血压组,分别于透析前和透析后测量体重、ECV、ICV,并计算ECV%、ICV%和ECV/ICV比值.ECV、ICV采用电生物阻抗分析仪测定.结果HD患者ECV%、ECV/ICV透后较透前下降,而ICV%上升;透前ECV%、ECV/ICV明显高于正常对照,透后接近正常人群水平.顽固性高血压患者(均为男性)透后ECV%仍明显高于正常对照水平[(31.6±1.0)%比(25.3±1.6)%,P＜0.01],而低血压倾向患者(均为女性)在透析前ECV%即与正常对照水平无明显差异[(21.6±1.5)%比(22.6±1.4)%,P＞0.05],透后明显低于正常对照水平[(19.3±1.6)%比(22.6±1.4)%,P＜0.01].结论HD患者水分布与正常人相比存在着明显不同,表现为ECV%增加和ICV%减少,而血液透析通过脱水和水分向细胞内转移部分纠正了这种异常.ECV%反映了HD患者水负荷的情况,并与血压之间存在着密切的关系.