中华实验和临床感染病(电子版)杂志
Chinese Journal of Experimental and Clinical Infectious Diseases(Electronic Version) 중화실험화림상감염병잡지(전자판)
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维持性血液透析患者HCV检测方法的比较
目的 探讨维持性血液透析(HD)患者丙型肝炎病毒(HCV)的检测方法 .方法 对108例HD患者,采用荧光定量PCR法测定血清HCV RNA,用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测血清HCV抗体(抗-HCV)和HCV核心抗原(HCV-cAg),并同时检测丙氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST),计算其变动率. 结果 HD患者荧光定量PCR HCV RNA检出率为33.3%(36/108),抗-HCV阳性率为32.4%(35/108),HCV-cAg阳性率为26.9%(29/108),HCV标志阳性患者中仅4例ALT和AST均升高.在抗-HCV阳性患者中,HCV RNA检出率为82.9%(29/35);在抗-HCV阴性患者中,HCV RNA检出率为9.6%(7/73);在HCV RNA阴性患者中,抗-HCV阳性率为8.3%(6/72),两者符合率为88%[(29+66)/108];在HCV RNA阳性患者中HCV-cAg检出率为80.6%(29/36).结论 ALT不能作为血液透析患者HCV诊断和反映病情的一项敏感指标,荧光定量PCR技术可弥补ELISA检测的不足,在抗-HCV阴性的血液透析患者中检测HCV RNA具有重要意义,对监测无症状的HCV携带者或新发现的感染者,应用ELISA法检测HCV-cAg将是有意义的发展方向.
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男性非淋菌性泌尿生殖系统炎症患者解脲和人型支原体感染及耐药性变迁研究
目的 研究男性非淋菌性泌尿生殖系统炎症患者解脲支原体(UU)和人型支原体(MH)感染及对抗菌药物耐药情况的变迁,以了解本地区男性支原体的感染状况并指导临床合理使用抗菌药物.方法 采用病原培养法和PCR方法 对2007年1月~12月在我院门诊以泌尿生殖系统不适就诊的453例患者的泌尿生殖系统标本进行UU和MH检测,同时进行体外药物敏感试验,并与2000年进行比较,对UU和MH的感染及体外药物敏感性的变化情况进行分析.结果 2000年131例支原体检测结果 中UU 46例占35.1%,MH 18例占13.7%,UU和MH混合感染者24例占18.3%;2007年453例支原体检测结果 中,UU 151例占33.3%,MH 60例占13.2%,UU和MH混合感染者78例占17.2%.2007年与2000年相比,男性泌尿生殖系统UU和MH对CRA和AZI的耐药率明显增高,对JOS的耐药率有所改善,而DOX和MIN的耐药率相对稳定;敏感性较高的依次是DOX、MIN和JOS.结论 UU和MH已成为男性非淋菌性泌尿生殖系统炎症的主要病原体且以UU为主.男性泌尿生殖系统感染患者的就医人数2007年比2000年显著增多,提示人们的自我保护意识明显加强.2007年与2000年相比,UU、MH的感染率以及UU和MH的混合感染率虽然变化不大,但一段时间以来都维持在较高的水平,应引起人们的高度重视.UU和MH的耐药率较高,且随着时间的变化,其耐药性也随之改变.因此,临床治疗支原体感染时应尽量根据药敏结果 选择敏感药物.DOX、MIN和JOS可作为本地区支原体感染治疗的首选药物.
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药物性肝炎34例临床特点及相关因素分析
目的 通过分析34例药物性肝炎的临床特点和相关因素为临床安全用药、规避药物造成肝损害的不良反应提供依据.方法 对2004~2007 年收治的已经确诊为药物性肝炎的34例患者的临床和组织学资料进行回顾性总结分析.结果 34例患者均有肝功能损害,多数有不同程度的乏力、纳差、恶心、黄疸,部分病例有嗜酸细胞增高、单核细胞数增多;中药致肝损伤占47.1%;女性、年龄大者、药物过敏者发病率较高;皮肤病用药、保健药、中药造成的肝损害有上升趋势.结论 药物性肝炎与病毒性肝炎临床表现相似,淤胆型多见,重型肝炎发病率较低.性别、年龄、特异性体质等与药物性肝炎发生有关,中药所致肝损伤应引起重视.
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HIV感染者血β2微球蛋白(β2MG)的临床意义
目的 分析HIV感染者血β2微球蛋白(β2MG)的临床意义.方法 检测HIV感染者血β2MG、蛋白电泳、T淋巴细胞亚群计数、肌酐,分析血β2MG与蛋白电泳、T淋巴细胞亚群计数的相关性.结果 HIV感染者血β2MG升高者占86.5%(64/74),其中无症状期、AIDS期患者中血β2MG升高者分别占90.9%(20/22)、84.6%(44/52).AIDS期患者血β2MG水平显著高于无症状期感染者(P<0.01),且CD4<200/ml的HIV感染者血β2MG明显高于CD4>200/ml的感染者(P<0.05);78.8%(67/85)HIV感染者血清γ球蛋白百分比升高,其中无症状期和AIDS期感染者分别为75%(27/36)和81.6%(40/49).未观察到无症状期和AIDS期感染者γ球蛋白百分比有统计学差异(P>0.05),但是无症状期感染者血清白蛋白百分比明显高于AIDS期感染者(P<0.05).HIV感染者血β2MG与血清γ球蛋白百分比呈正相关:r=0.455(P<0.01),而与血清白蛋白百分比呈负相关:r=-0.586(P<0.01).HIV感染者血β2MG与CD4计数呈负相关:r=-0.279(P<0.05),也与CD4/CD8比值呈负相关:r=-0.399(P<0.01).对血β2MG>3.0 mg/L的HIV感染者,其血β2MG与CD4计数、CD4/CD8比值呈负相关:r=-0.434、r=-0.427 (P<0.01).几乎所有的HIV感染者肾功能指标都正常.结论 绝大多数HIV感染者血β2MG升高,且随着疾病进展而升高,可能与免疫系统被激活和淋巴细胞被破坏有关.HIV感染者血β2MG升高是因机体产生了更多的β2MG,而非因HIV感染者肾小球滤过率降低,滤过功能受损所引起.
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实时定量PCR与COBAS Amplicor定量检测血清HBV DNA的方法比较
目的 比较实时定量PCR法与COBAS Amplicor法定量检测血清HBV DNA.方法 自国家药品生物制品鉴定所与国家临检中心随机选取158例临床血清标本,比较了两种检测方法 的线性范围、准确度、重复性、实验时间及成本.结果 实时定量PCR的批内差和批间差分别为0.3%~3.8% 和 1.4%~8.1%.实时定量PCR法与COBAS AMPLICOR 法具有良好的相关性(r=0.948),实时定量PCR法成本低且检测范围更宽.结论 实时定量PCR是监测慢性乙型肝炎患者HBV DNA水平的有效方法 .
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人类白细胞抗原等位基因与慢性乙型肝炎聚乙二醇化干扰素疗效的相关性研究
目的 探讨人类白细胞抗原(HLA)-DRB1等位基因与聚乙二醇化干扰素(PEG-IFN)抗HBV应答的相关性.方法 应用聚合酶链反应-序列特异性引物(PCR-SSP)技术对青岛地区46例慢性乙型肝炎患者HLA-DRB1进行等位基因多态性分析.结果 30例有应答者HLA-DRB1*15等位基因频度(46.67%)高于16例无应答者(12.5%),RR=6.125,P=0.021; HLA-DRB1*07的分布则相反(26.67%对75%,RR=0.121,P=0.002).结论 推测HLA-DRB1*15可能与PEG-IFN的高应答有关, HLA-DRB1*07可能与PEG-IFN低应答有关.
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HBeAg阴性慢性乙型肝炎研究进展
乙型肝炎病毒 (HBV)感染是全球面临的严重公共卫生问题,全世界约20亿人曾感染HBV,其中3.5亿为慢性HBV感染者,每年约有100万人死于HBV感染所致的肝衰竭、肝硬化和原发性肝细胞癌(HCC)[1].根据血清HBeAg的状况,慢性乙型病毒性肝炎可以分为HBeAg阳性和阴性两种[2].近年来的临床与基础研究表明,HBeAg阴性的慢性乙型肝炎患者所占的比例逐年增高,其分子病原学、流行病学、发病机制、自然进程、临床表现、预后、抗病毒治疗的方案与应答等诸多方面与HBeAg阳性的慢性乙型肝炎存在显著差别.
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病毒和持续酒精刺激诱发肝细胞癌的分子水平研究进展
肝细胞癌(hepatocellular carcinoma, HCC)是世界上常见的癌症, 每年导致100万人死亡.在我国,据近的调查资料表明,肝癌年死亡率为20.4/10万,占全部恶性肿瘤的18.8%,已由上世纪70年代的第三位上升到第二位.大量研究表明,慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染﹑慢性丙型肝炎病毒(HCV)感染是诱发肝硬化并终引起HCC 的主要危险因子.另外,持续性酒精刺激、接触黄曲霉毒素B1和各种代谢性肝疾病也能导致HCC.
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丙型肝炎病毒复制的研究进展
丙型肝炎病毒(HCV)感染是全球范围内导致慢性肝炎、肝硬化以及肝癌的重要原因.1989年,对一位输血后非甲非乙型肝炎患者的血清表达文库进行免疫筛选后,首次证实了HCV的存在[1].但HCV很难被直接观察到,也无法在体外进行有效的培养,这妨碍了病毒生命周期的阐明以及特异性抗病毒药物和预防性疫苗的发展.尽管存在种种障碍,在过去的18年中对HCV的研究还是取得了重大进展,主要通过异源表达系统、黑猩猩体内感染的功能性cDNA克隆、复制子(replicon)系统和假病毒(膜表面为功能性HCV包膜蛋白的逆转录病毒颗粒, HCVpp)以及HCVcc(细胞培养来源的HCV)等来实现的.本文就近年来HCV复制方面的研究进展作一综述.
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双环醇保肝的基础与临床研究进展
一、基础研究1.双环醇能够稳定肝细胞膜的完整性及其显著的肝细胞保护作用:(1)双环醇对急性实验性肝损伤动物模型的保护作用[1-3]:分别以四氯化碳、对乙酰氨基酚和D-氨基半乳糖3种化合物损伤小鼠肝脏,实验中给小鼠灌服不同剂量的双环醇.结果显示血清ALT和AST显著降低,有明显的剂量-效应关系,同时肝组织形态学损伤明显降低,片状坏死明显减轻、炎症和脂肪变性减轻;
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AnnexinⅤ法检测HepG2细胞凋亡
目的 应用Annexin V-PITC/PI技术检测化疗药物顺铂(CDDP)诱导肝癌细胞(HepG2)凋亡作用的特性.方法 将不同浓度的CDDP与肝癌细胞株HepG2共孵育4 h、15 h、24 h、36 h后,应用流式细胞术和Annexin V-PITC/PI双染免疫荧光法观察细胞凋亡情况.结果 CDDP可以诱导HepG2细胞发生凋亡,随着药物浓度的增加和作用时间的延长,发生凋亡和坏死细胞的比例增加.结论 化疗药物CDDP诱导肝肿瘤细胞凋亡呈时间和剂量依赖性.AnnexinⅤ-FITC /PI双标记流式细胞术可用于早期细胞凋亡的检测.
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含CpG的不同寡脱氧核苷酸对慢性HBV感染者外周血单个核细胞刺激能力的研究
目的 探讨人工合成硫代修饰的含CpG 基序的寡脱氧核苷酸(ODN)作为佐剂对慢性HBV感染者外周血单个核细胞(PBMC)免疫应答能力的影响. 方法 31例慢性HBV感染者分成两组,免疫耐受组(14例)和免疫清除组(17例),同时设置7例正常对照.用CpG1826、CpG1826m、CpGT7、HBsAg、M1(CpG1826+HBsAg)、M2(CpG1826m+HBsAg)、M3(CpGT7+HBsAg)分别与受试者的PBMC共同孵育,酶联免疫斑点法检测IFN-γ的分泌情况,以斑点数的多少评价细胞分泌IFN-γ的能力.结果 CpG1826、CpG1826m、CpGT7、HBsAg、M1、M2、M3与PBMC孵育后,IFN-γ斑点数分别为16±10、17±9、17±10、201±51、215±63、 218±63、216±59.其中,免疫清除组分别为21±10、22±9、23±10、226±49、261±51、264±47、 254±54;免疫耐受组分别为8±4、10±3、8±4、164±42、155±36、157±41、167±27;正常对照组分别为17±6、17±7、18±9、209±17、217±24、221±17、217±46.在3种不同免疫状态组,单用HBsAg与CpG ODN联合HBsAg比较均无显著性差异,但不同免疫状态组间均有显著性差异(P<0.05).结论 不同CpG ODN均不能显著增加HBsAg刺激PBMC分泌IFN-γ的能力,且3种 CpG ODN联合HBsAg刺激PBMC分泌IFN-γ的能力间无显著性差异.
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毕赤酵母及大肠埃希菌表达的重组乙型肝炎病毒e抗原在乙型肝炎病毒e抗体检测中的比较分析
目的 探讨毕赤酵母及大肠埃希菌表达的重组乙型肝炎病毒e抗原(recombinant hepatitis B e antigen, rHBeAg)在乙型肝炎病毒e抗体(hepatitis B e antibody, HBeAb)免疫检测中的应用.方法 用分子筛纯化两种rHBeAg,进行特异性和免疫反应性鉴定;分别用纯化后毕赤酵母表达的HBeAg(A)、大肠埃希菌表达的HBeAg(B)作为中和试剂,单克隆HBeAb为固相抗体,辣根过氧化物酶标记多克隆HBeAb为探测抗体,用固相-液相竞争抑制法酶联免疫吸附实验检测HBeAb标准品及乙型肝炎病毒PCR阳性和阴性的临床标本.结果 (1)检测中国药品生物制品检定所HBeAb国家参考品结果 :试剂A:阴性符合率(-/-)15/15,阳性符合率(+/+)10/10;灵敏度参考品低检出量(稀释度)1#= 1∶ 128,2#=1∶ 128,3#=1∶ 256.试剂B:阴性符合率(-/-)15/15;阳性符合率(+/+)9/10;灵敏度参考品低检出量(稀释度)1#=1∶ 32;2#=1∶ 64;3#=1∶ 64;大肠埃希菌抗原的灵敏度明显低于毕赤酵母抗原;(2)对乙型肝炎病毒PCR阳性及阴性的临床标本进行检测:试剂A和试剂B对PCR阳性组的HBeAb阳性检出率分别为50.4%和51.6%,差异无显著统计学意义(P>0.05);PCR阴性组的HBeAb阴性检出率,试剂A和试剂B分别为 91.2%和 86.7%,差异有显著统计学意义(P<0.01).结论 毕赤酵母表达的HBeAg用于HBeAb的检测灵敏度及特异性均优于大肠埃希菌表达产物.
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产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯杆菌耐药性分析及CTX-M酶的检测
目的 分析北京地坛医院产超广谱β-内酰胺酶(extended-spectrum β lactamases,ESBLs)大肠埃希菌和肺炎克雷伯杆菌的耐药情况及其携带CTX-M酶的基因类型.方法 对北京地坛医院2006年8月至2007年7月期间收集的无重复21例产ESBLs菌株,采用微量药敏定量实验检测20种抗生素的小抑菌浓度,用针对CTX-M基因的特异性引物进行PCR扩增并确定其基因型,PCR产物进行克隆测序.结果 21例菌株对大多数β-内酰胺类药物明显耐药,多数对氨基糖苷类和氟喹诺酮类耐药,但对亚胺培南100%敏感;产CTX-M酶的有10株,其中有7株产CTX-M-14酶,2株产CTX-M-3酶,1株产CTX-M-9酶.结论 北京地坛医院2006年8月至2007年7月期间产ESBLs菌多为多重耐药菌,并且存在CTX-M酶的流行,主要是CTX-M-14酶和CTX-M-3酶.
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产ACT-2型头孢菌素酶和CTX-M型超广谱β-内酰胺酶及携带Ⅰ类整合子的大肠埃希菌
目的 分析大肠埃希菌临床分离菌(E1)携带的β-内酰胺酶基因(AmpC,ESBLs)及Ⅰ类整合子基因的存在情况.方法 应用琼脂稀释法测定E1菌的耐药表型,应用聚合酶链反应及序列分析法分析其AmpC,ESBLs和整合子的基因类型,并进行质粒接合转移实验.结果 E1仅对亚胺培南、环丙沙星、左旋氧氟沙星和阿米卡星敏感,同时携带CTX-M-13、SHV-1、TEM-1和ACT-2型β-内酰胺酶基因,Ⅰ类整合子基因呈阳性.结论 大肠埃希菌耐药机制复杂,可同时携带多种β-内酰胺酶,并已成功地将AmpC 和ESBL 接合在一起,对此类产酶菌应首选碳青酶烯类药物进行治疗,并应高度重视整合子对多重耐药形成的作用.
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RT-PCR检测手足口病病原体EV71
目的 应用分子生物学技术检测手足口病病原体EV71,为临床诊断提供依据.方法 根据卫生部发布的<手足口病预防控制指南>(2008年版),收集2008年5月深圳市东湖医院收治的临床诊断为手足口病患儿的大便标本265份.应用RT-PCR技术检测手足口病病原体EV71,将RT-PCR产物测序并在GenBank进行比对分析以检测该方法 的准确度.结果 RT-PCR扩增到特异性EV71 VP1区DNA片段,大便阳性率为24%.测序验证所得DNA片段是EV71 VP1区基因,同时也验证RT-PCR准确度达70%(14/21).结论 RT-PCR检测手足口病病原体EV71可以应用于临床辅助诊断.
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恩替卡韦治疗HBeAg阳性慢性乙型肝炎短期疗效观察
长期核苷(酸)类似物抗病毒治疗,耐药是必须要面临的一个重要问题,HBV本身的复制特点使任何一种药物都无法避免耐药问题.基于病毒耐药的发生与病毒抑制程度密切相关,将病毒载量降至不可测水平可减少耐药发生的可能,因此可使用强效及具有高耐药基因屏障的药物,提高患者依从性,一旦早期应答不理想需及时换药以预防耐药发生.
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征兵中检出同性恋高中生HIV感染1例报告
艾滋病是艾滋病病毒(HIV)侵入人体后引起的以免疫缺陷为特征的一种严重的全身性、慢性传染病,本病传播迅速,病死率高.为防止新兵将传染源引入部队,每年都对应征新兵进行HIV抗体筛查.2006年11月份的征兵体检中,检出同性恋高中生HIV感染1例,现报告如下.
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美国DHHS成人与儿童抗反转录病毒治疗指南的修订
自1996年高效联合抗病毒治疗HIV感染的联合疗法问世,治疗药物和方法不断改善.2007年12月1日,美国DHHS(健康与人类服务部)公布了新的成人与儿童抗反转录病毒治疗指南,对2006年10月10日的版本中部分内容做了修订.现将部分修订内容摘译整理,为国内相关人员提供参考.
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艾滋病相关皮肤病变的中医药研究回顾及161例病例分析
HIV/AIDS相关皮肤病变是指艾滋病患者特征性的患病率、病程、严重程度和治疗效果因HIV感染较正常人群有所改变的皮肤病,是HIV/AIDS常见的伴发疾病之一.据国外研究报道,HIV/AIDS相关皮肤表现的发病率高达70%~90%,几乎所有艾滋病患者在HIV感染的不同时期都经历过不同形式、不同程度的相关皮肤疾病的困扰.部分皮肤病影响患者的容貌及睡眠,加重心理压力,严重瘙痒、疼痛等严重影响着患者的生活质量[1].
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慢性丙型肝炎的治疗研究进展