中华实验和临床病毒学杂志
Chinese Journal of Experimental and Clinical Virology 중화실험화림상병독학잡지
- 主管单位： 实验和临床病毒学杂志
- 主办单位： 中国科学技术协会
- 影响因子： 0.71
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 11-2866/R
- 国内刊号： 段树学
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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青海省2016-2017年人肠道病毒A组71型基因特征
目的 对青海省2016-2017年手足口病(hand,foot and mouth disease,HFMD)人肠道病毒A组71型(human enterovirus group A type 71,EV-A71)的基因特征进行分析.方法 对青海省2016-2017年采集的HFMD标本,用荧光定量逆转录-聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)方法进行筛查,对EV-A71阳性标本进行病毒分离,对分离到的病毒提取核酸,用RT-PCR方法对VP1编码区进行扩增及核苷酸序列测定和分析,并与EV-A71各基因型和基因亚型的代表株序列构建亲缘关系进化树.结果 青海省2016-2017年共分离到114株EV-A71,均为C4基因亚型中的C4a进化分支.在亲缘性关系树中显示,又进一步分属2个不同的小分支.2016-2017年青海省流行的不同传播链上EV-A71与我国其他省流行的EV-A71基因亲缘关系较为接近.结论 青海省2016-2017年流行的EV-A71以C4a为绝对优势基因亚型,未监测到其他基因型病毒.青海省EV-A71不是独立进化的,而是与我国其他地区流行的EV-A71共同进化.
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肠道病毒5'-非翻译区测序分型的应用评估
目的 评估5’-非翻译区(5’-untranslated region,5’-UTR)扩增测序法对临床标本直接进行肠道病毒(enterovirus,EV)血清型分型的价值.方法 收集实时荧光聚合酶链反应(real-time PCR)检测EV通用型核酸为阳性的肛拭518份、鼻拭148份,采用5’-UTR区逆转录PCR(reverse transcription PCR,RT-PCR)对标本中的EV进行扩增、测序、比对及血清型分型,与VP1(viral protein 1)区简并引物巢式PCR测序分型方法比较,两者不一致的标本经EV血清型特异性RT-PCR验证.结果 666份EV通用型核酸为阳性的标本,5’-UTR和VP1区各分型成功553例(83.0％)和318例(47.7％),P＜0.001;以VP1法为参考,对肛拭中主要检出的血清型CoxA6(217例)、CoxA 16(88例)、EVA71(40例)、CoxA10(28例)和CoxA4(27例),5’-UTR法敏感度(57.1％～100％)、特异度(67.4％～98.1％)以及方法一致性(kappa值0.188 ～0.847),均因血清型而异;对鼻拭中主要检出的血清型EVD68(15例),5’-UTR法敏感度100％,特异度91.1％,一致性差(kappa值0.217).分型不一致标本,经CoxA6、CoxA 16、EVA71、CoxA10和EVD68型特异性RT-PCR验证,大部分得以确认.以VP1法联合型特异性RT-PCR法为参考,5’-UTR法的敏感度和特异性以及与参考方法的一致性均提高.结论 5’-UTR对肠道病毒的分型的敏感度和特异度因血清型而异,应用时应根据研究目的综合考虑.
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羊瘙痒因子263K感染仓鼠脑组织中兰尼碱受体2表达变化的研究
目的 探索RyR2在朊病毒感染金黄仓鼠脑组织中的表达变化.方法 通过免疫组织化学染色观察到RyR2在正常仓鼠及263 K毒株感染仓鼠的脑区分布情况;通过免疫印迹方法观察到正常及263 K毒株感染仓鼠终末期脑组织中RyR2表达变化情况;通过免疫荧光双标染色检测RyR2是否与朊蛋白存在共定位关系.结果 RyR2主要分布在仓鼠的小脑浦肯野细胞、大脑皮层,而在海马、下丘脑和嗅球也有表达.263 K毒株感染仓鼠终末期脑组织中,RyR2表达显著下降;免疫荧光双标染色发现,RyR2与朊蛋白存在共定位关系.结论 RyR2的表达在朊病毒感染的金黄仓鼠中变化明显,可能与认知功能的下降及神经元调亡有关.此研究为进一步探讨RyR2在朊病毒病中的作用和分子机制提供了一定基础.
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2012-2017年扬州市流感病原学监测结果分析
目的 分析扬州市2012-2017年的流感监测结果,阐明近年来流感流行特征和变化趋势,为预测和防控流感流行提供科学依据.方法 对江苏省苏北人民医院、扬州市第一人民医院和高邮市人民医院就诊患者进行监测采样,对流感样病例(Influenza-like illness,ILI)标本,采用实时荧光定量RT-PCR方法进行病毒核酸检测,并对结果信息进行统计分析.结果 2012-2017年扬州市共采集ILl咽拭子标本18 083份,其中流感核酸阳性标本1 983份,阳性率为10.97％,相邻年份阳性率差异有统计学意义(X2=167.93,P＜0.001).全年均有流感活动,主要流行季节为冬春季和夏季,共占阳性总数的83.61％,甲型流感全年流行,而乙型流感主要在冬春季流行,各个亚型呈现交替流行.各个年龄组均有阳性病例检出,阳性率高的是10 ～ 19岁年龄组,阳性率为16.33％,低的是20 ～29岁年龄组,阳性率为8.52％.结论 扬州地区2012-2017年流感流行具有明显的季节性,不同亚型毒株交替流行,高发人群以婴幼儿及青少年为主.
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2017年北京市东城区EV-A71和CV-A16分离株VP1基因序列特征分析
目的 通过分析北京市东城区2017年手足口疑似病例样本中肠道病毒A组71(enterovirus 71,EV-A71)和柯萨奇病毒A组16型(coxsackievrius A 16,CV-A16)毒株VP1基因序列特征,为手足口病的防治提供基础资料.方法 利用RT-PCR法对分离得到的EV-A71和CV-A16 VP1序列进行扩增和测序,利用DNAstar5.0和MEGA6.0软件对EV-A71和CV-A16的VP1序列进行比对分析并构建系统发育树.结果 2017年东城区共检测手足口疑似病例咽拭子95份,肠道病毒阳性46份(占48.42％);其中EV-A71阳性4份(占4.21％),CV-A16阳性4份(占4.21％),非EV-A71非CV-A16的其他肠道病毒阳性38份(占40.00％).4株EV-A71分离株核苷酸和氨基酸序列同源性分别为92.89％～99.15％和97.32％～98.66％;3株CV-A16分离株核苷酸和氨基酸序列同源性分别为93.90％～98.76％和98.32％～100.00％.系统进化树显示4株EV-A71属于C4a基因亚型,3株CV-A16属于Blb基因亚型.结论 北京市东城区2017年引起手足口病的病原主要以非EV-A71非CV-A16的其他肠道病毒为主,但是EV-A71和CV-A16仍占一定比例.EV-A71毒株属于C4a基因亚型;CV-A16毒株属于Blb基因亚型;与近年来中国大部分地区毒株的基因分型一致;没有检测到新亚型.
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辽宁省首例D8基因型麻疹病毒的分离与鉴定
目的 分离并鉴定辽宁省首次监测到D8基因型麻疹病毒.方法 本研究采用Vero/Slam细胞对该病例的咽拭子标本进行病毒分离,应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)分别扩增麻疹病毒(MEV)血凝素(hemagglutinin,H)基因全长和N基因羧基末端的450个核苷酸,对扩增产物序列进行分析.结果 辽宁D8基因型麻疹病毒分离株和世界卫生组织D8基因型参考株Mvi/Manchester.GBR/30.94在基因亲缘性关系树上同属一个分支,N基因和H基因核苷酸同源性均为98.9％.从GenBank上下载的D8基因型病毒序列进行比对,结果表明本研究分离的D8基因型麻疹病毒与2018年在哥伦比亚分离的MVi/LosPatios.COL/11.18/D8株病毒和2012-2016年在中国香港流行的D8基因型麻疹病毒核苷酸同源性为100％.结论 麻疹D8基因型病毒的检出,对积累辽宁省麻疹分子流行病学基线数据具有重要的意义,有助于全国及全球麻疹病毒的传播及溯源研究.
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2014-2017年盐城地区甲型H1N1流感病毒HA、NA基因变异分析
目的 研究盐城地区2014-2017年甲型H1N1血凝素(hemagglutinin,HA)和神经氨酸酶(neuraminidase,NA)分子遗传进化特征.方法 将盐城地区2014-2017年流感监测哨点医院以及流感暴发点采集的流感样病例标本进行核酸、病毒分离检测,选取2014-2017年甲型H1N1毒株,采用一步法RT-PCR方法扩增HA1和NA基因,扩增产物经测序,采用相应的生物信息软件进行核苷酸和氨基酸位点变异及基因种系进化特征分析.结果 2014-2017年抽取的17株甲型H1N1毒株HA1和NA基因各自分支的聚类关系基本一致,分为4个进化分支.与疫苗株A/California/07/2009(H1N1)相比,盐城地区毒株HA1基因编码区共涉及3个抗原表位(Ca、Sa、Sb)和6个抗原位点(K154R、S162N、K163Q、S185T、L191I、S203T)变异;受体结合位点220环中有3个位点(D222G/N、G223R和E224K)发生变异,190螺旋中涉及1个位点(L191I)的变异;2017年两株毒株(A/Jiangsu-YC/SWL1540/2017、A/Jiangsu-YC/SWL1545/2017)增加了1个162NQS糖基化位点.抗原表位、受体结合位点、糖基化位点发生了一定程度变异,导致在基因层面上A/California/07/2009(H1N1)疫苗株产生的保护效果有限,而2017年分离的两株毒株(A/Jiangsu-YC/SWL1540/2017和A/Jiangsu-YC/SWL1545/2017)与疫苗株A/Michigan/45/2015(H1N1)具有较好的保护效果.17株分离株未发生NA蛋白酶活性位点以及耐药位点的变化,部分毒株NA基因编码糖基化位点有一定变化.结论 2014-2017年盐城地区流行的甲型H1N1毒株HA1和NA基因正逐渐发生变异,这些变异位点的积累很可能会导致流感病毒发生实质性的抗原性的漂移.
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巨细胞病毒在平滑肌细胞表型转化中的作用及调控机制
目的 通过体内及体外实验探讨小鼠巨细胞病毒(murine cytomegalovirus,MCMV)对血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell,VSMC)表型转化的影响及表型转化PI3K/Akt通路的调控作用.方法 2 × 105PFU MCMV腹腔注射雄性载脂蛋白E基因敲除(apoE-/-)小鼠,饲养16周后取主动脉分别行HE染色、平滑肌22α(smooth muscle 22 alpha,SM22α)和骨桥蛋白(osteopontin,OPN)免疫组化染色.小鼠主动脉血管平滑肌细胞(MOVAS)传代培养后,与MCMV共孵育,检测MOVAS增殖程度,以及SM22a和OPN的表达.进一步应用Western blot检测MCMV在平滑肌细胞表型转化PI3K/Akt通路中的作用.结果 MCMV感染组的apoE-/-小鼠主动脉的动脉粥样硬化程度较对照组严重,动脉壁以表达合成期的标志蛋白OPN为主.3×104PFU MCMV感染MOVAS 24 h细胞后,SM22a表达较对照组下降,OPN表达较对照组增加(P =0.023,P=0.034).MCMV刺激磷酸化Akt蛋白表达上调(P =0.035),PI3K通路的抑制剂LY294002不仅抑制MCMV促平滑肌细胞表型转化,而且还阻断MCMV感染后的Akt蛋白磷酸化(P =0.031),而对对照组无明显影响(P=0.081).结论 MCMV诱导了平滑肌细胞的表型转化,PI3 K/Akt信号途径可能参与了MCMV促平滑肌细胞表型转化的过程.
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北京市朝阳区2011-2017年5岁以下腹泻患儿腺病毒分子流行病学特征
目的 研究北京市朝阳区感染性腹泻患儿中腺病毒(Adenovirus,AdV)的分子流行病学特征.方法 针对北京市朝阳区2011年4月至2017年12月收集的5岁以下腹泻患儿腺病毒感染者粪便标本,利用PCR方法检测其中腺病毒六邻体区核酸,并对扩增产物进行序列测定、腺病毒系统进化分析和型别鉴定,结合分析结果进行统计分析.结果 扩增并完成64例腺病毒阳性标本测序,男女比例为11∶5,平均年龄1.56岁,无明显的季节变化特征.系统进行分析结果显示,基于腺病毒六邻体基因,本研究共发现11种型别.AdV41型为主要的型别,占70.31％,其次依次是AdV31型(6.25％)、AdV40型(4.69％)、AdV1型(3.13％)、AdV5型(3.13％)、AdV6型(3.13％)、AdV7型(3.13％)、AdV2型(1.56％)、AdV3型(1.56％)、AdV4型(1.56％)和AdV61型(1.56％).结论 北京市朝阳区5岁以下腹泻患儿腺病毒感染呈现出型别多样性的特征,基于腺病毒六邻体基因,AdV41型腺病毒是该地区的主要流行型别,应加强对儿童腺病毒腹泻的监测.
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一种肉桂水提物抗单纯疱疹病毒1型活性研究
目的 评价一种肉桂水提物KPC-rg1对单纯疱疹病毒1型(herpes simplex virus type 1,HSV-1)的抗病毒活性,并探索其可能的广谱抗病毒作用.方法 体外培养Vero细胞,以HSV-1和HSV-1与KPC-rg1共孵育混悬液分别感染细胞,观察细胞形态并检测病毒载量;利用小鼠和树鼩角膜感染模型对HSV-1和HSV-1与KPC-rg1共孵育混悬液分别感染动物后的角膜病变情况进行评分;通过细胞病变效应实验和荧光衰减实验测定KPC-rg1对9种病毒的体外抗病毒活性.结果 被HSV-1感染的Vero细胞加入KPC-rg1 (0.0001～1.0 mg/ml)后对病毒复制有抑制作用,而HSV-1与KPC-rg1(0.001～1.0 mg/ml)共孵育后能保护细胞不被感染;KPC-rg1对HSV-1感染的动物角膜病变有一定的改善作用,而KPC-rg1与HSV-1共孵育后能完全保护动物不被HSV-1感染;KPC-rg1对多种包膜病毒有潜在的广谱抗病毒作用.结论 KPC-rg1是一种溶胶(丁达尔现象),可能与病毒能快速形成稳定的KPC-rg1/病毒超纳米颗粒结构,使病毒失去感染能力.KPC-rg1通过包裹HSV-1病毒抑制其感染,减少了潜伏或新增殖病毒对机体造成损伤,可缓解患者反复遭受病痛折磨.本研究丰富了肉桂水提物在抗病毒,特别是抗HSV-1的作用,为其开发成为潜在的抗HSV-1药物提供了初步科学依据.
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新城疫病毒HN糖蛋白头颈部相互作用区基因突变分析
目的 明确新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)包膜糖蛋白血凝素-神经氨酸酶(hemagglutinin-neuraminidase,HN)头颈部相互作用区91～112氨基酸(aa)片段的功能,阐明该区域促进细胞特异性膜融合的作用.方法 比对NDV HN 91～112 aa与MeV H、RSV G、hPIV3 HN,确定吸附蛋白相应的基因序列,采用片段缺失、置换和同源重组技术,构建NDV HN缺失突变体De(HN)和嵌合体Ch(MeV)、Ch(RSV)、Ch(hPIV3);痘苗病毒-T7瞬时表达系统在真核细胞BHK-21内表达各突变体;间接免疫荧光法和流式细胞术分析各突变体蛋白在细胞表面的表达情况;蛋白功能试验分别测定各突变体蛋白的促细胞融合活性、受体识别活性和神经氨酸酶活性.结果 De(HN)和Ch(MeV)、Ch(RSV)、Ch(hPIV3)的细胞表面表达效率分别为野生型的9.04％、82.20％、70.16％和75.65％;促细胞融合活性分别为野生型的3.83％、24.76％、29.42％和57.84％(P均＜0.05),其中De(HN)的促细胞融合活性基本消失,镜下未观察到合胞体形成;受体识别活性分别为野生型的13.48％、36.25％、34.93％和65.22％(P均＜0.05),与促细胞融合活性具有一致性;神经氨酸酶活性分别为野生型的10.81％、54.42％、50.13％和60.35％(P均＜0.05).结论 NDV HN蛋白91-112aa对膜融合功能有重要影响,缺失突变体膜融合功能的消失与其未能在细胞表面有效表达有关.
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NEDDylation参与乙型肝炎病毒前基因组RNA的包装
目的 探讨类泛素化修饰NEDDylation对乙型肝炎病毒(hapetitis B virus,HBV)生活史的影响.方法 利用不同浓度的NEDD8活化酶(NEDD8 activating enzyme,NAE)抑制剂MLN4924处理HepAD38细胞,阻断细胞内相关底物的活化过程,同时用HBV聚合酶抑制剂拉米夫定(lamivudine,LAM)作对照,检测HBV DNA的复制、蛋白的表达、核衣壳的形成.利用聚合酶失活的HBV表达质粒转染Huh-7细胞,然后用0.1μmol/L的MLN4924处理细胞,并用0.1％的DMSO作对照,检测核衣壳和其中的pgRNA.结果 HBV DNA复制随着MLN4924浓度增高而逐渐减弱.MLN4924浓度为0.1μmol/L时,细胞内核衣壳的量无明显变化,而其中HBV前基因组RNA(pregenomic RNA,pgRNA)下降了约47％.结论 NEDDylation参与HBV pgRNA的包装.
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调脂合剂对慢性丙型肝炎病毒感染合并脂肪肝患者脂质代谢紊乱的影响
目的 探讨调脂合剂对慢性丙型肝炎病毒感染合并脂肪肝患者脂质代谢紊乱的影响.方法 回顾性分析鄞州人民医院2016年1月至2017年1月收治的122例慢性丙型肝炎病毒感染合并脂肪肝患者临床资料,对照组仅接受抗病毒治疗,观察组接受抗病毒治疗同时增用调脂合剂.统计两组患者治疗前后各项血脂指标、HCV RNA载量下降情况、血清抗-HCV转阴率、肝功能指标及不良反应发生情况.结果 治疗后,两组患者血脂TG、TC、LDL-C水平明显下降且观察组血脂TG、TC、LDL-C水平下降幅度大于对照组;观察组患者血脂HDL-C水平上升明显,对照组患者血脂HDL-C水平基本无变化;两组患者肝功能ALT、TBA水平检测结果均有效降低且观察组降低幅度大于对照组,两组患者肝功能AST水平均有降低但组间差异无统计学意义;观察组HCV RNA载量下降情况、血清抗-HCV转阴率高于对照组;治疗后两组患者不良反应发生率差异无统计学意义(x2=0.000,P=1.000).结论 对慢性丙型肝炎病毒感染合并脂肪肝患者临床治疗中配合调脂合剂可有效增加抗病毒疗效,降低不良反应发生可能,帮助患者恢复肝功能,安全性高,值得临床推广.
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一起狂犬病病毒和HIV双暴露事件临床处置分析
目的 分析北京市一起一犬伤多人(暴露者中有1例为HIV阳性者)事件处置情况,探讨狂犬病和HIV双暴露处置路径及预后.方法 采用描述性流行病学调查方法对一起一犬伤多人事件的暴露者情况、狂犬病和HIV暴露后预防处置(post-exposure prophylaxis,PEP)措施和随访转归进行分析.结果 9例暴露者经规范的狂犬病PPE,随访6个月未发生狂犬病病例.6例HIV阴性暴露正常人经HIV暴露后预防,随访12周未发生HIV阳转.结论 一犬伤多人事件中,除狂犬病暴露外,更要警惕顺序咬伤人群中可能存在HIV、HBV、HCV感染状态造成潜在的其他血源性传染病传播的风险,尽早进行规范的PEP至关重要.
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HBeAg阴性慢性乙型肝炎核苷(酸)类似物序贯干扰素治疗疗效的相关因素研究
目的 研究HBeAg阴性慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B,CHB)患者核苷(酸)类似物(nucleos (t) ide analogs,NA)序贯干扰素治疗疗效的影响因素.方法 核苷(酸)类似物治疗的HBeAg阴性慢性乙型肝炎向PEG-IFNα-2α转换(序贯治疗),二者联合应用3个月后单独应用PEG-IFNα-2a治疗,PEG-IFNα-2a180μg每周1次皮下注射.监测患者序贯治疗前(基线)及序贯治疗的第12、24、36、48、72及96周的HBsAg含量和HBV DNA载量.结果 共有26例HBeAg阴性CHB患者人组,有6例(23.1％)获得HBsAg消失/HBsAg血清学转换.获得HBsAg消失/HBsAg血清学转换组和未获得HBsAg消失/HBsAg血清学转换组这两组比较显示,获得HBsAg消失/HBsAg血清学转换组基线HBsAg含量为2.210log10IU/ml,显著低于(t=-4.252,P=0.000)非HBsAg消失患者的基线HBsAg含量(3.385log10IU/ml);序贯治疗72、96周以后两组HBsAg下降幅度均有显著性差异(3.511vs0.723log10IU/ml,4.291vs0.737log10 IU/ml)(t=6.712,P=0.000,t=13.391,P=0.000、0.000).两组之间的年龄、性别、NA治疗时间均无统计学差异.12例(46.2％)获得SVR.获得SVR和未获得SVR组这两组比较显示,获得SVR组基线HBsAg含量为2.575log10 IU/ml,显著低于(t=-4.319,P=0.000)非SVR患者(3.576log10IU/ml);序贯治疗的各时间点两组HBsAg下降幅度差异均有统计学意义(0.612vs0.088,1.192vs0.107,1.566vs0.167,1.817vs0.176,2.424vs0.193,2.188vs-0.014,log10 IU/ml)(t=3.109、4.717、4.500、4.544、5.560、4.265,P=0.008、0.010、0.001、0.001、0.000、0.003).两组之间的性别、NA治疗时间均无统计学差异,年龄差异有统计学意义(30.8vs39.9岁)(t=-2.747,P=0.011).9例患者基线HBV DNA为阳性,序贯治疗后5例(55.6％) HBV DNA被抑制,HBV DNA被抑制的患者均在第12周时伴随HBsAg下降,但对随后HBsAg是否继续下降及转阴无影响.HBV DNA被抑制与未被抑制患者的年龄、性别、NA治疗时间、HBsAg基线含量,治疗过程中HBsAg下降幅度均无统计学差异.结论 对于HBeAg阴性的CHB患者来说,基线HBsAg较低(2log10 IU/ml水平)及其早期滴度大幅下降的核苷(酸)类似物序贯干扰素治疗患者较容易获得SVR;其中延长干扰素疗程更容易达到HBsAg消失/HBsAg血清学转换.
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模拟表位型EB病毒感染诊断抗原的制备
目的 利用大肠埃希菌表达系统获取模拟表位型诊断抗原用于EB病毒(epstein-Barr virus,EBV)感染的早期诊断,并初步评价其抗原性.方法 将EB病毒模拟表位GP125、F1、A2、A3 C2多肽序列用特定连接臂串联,密码子优化后全基因合成;将目的片段插入带有Trx标签的表达质粒中,在大肠埃希菌中进行表达,并利用亲和层析和离子交换层析纯化目的蛋白;利用Western blot技术对目的蛋白抗原性进行鉴定,并建立EBV-IgM抗体检测捕获法ELISA技术,初步评价此方法对阴阳血清样本的鉴别能力.结果 所获取EBV模拟表位诊断抗原浓度为2.8 mg/ml,纯度为99.01％;Western blot实验发现,以anti-Trx单克隆抗体或EBV-IgM阳性血清作为第一抗体,在NC膜约26×103处都可以发现特异条带(与预期一致);对50份EBV急性感染阳性血清和50份阴性血清进行检测得出,阳性血清样本OD值1.352 (95％ CI:1.233 ～1.489)与阴性血清样本OD值0.135(95％ CI:0.113 ～0.159)分布区组明显(P＜0.05),其中灵敏度为98.0％,特异性为96.0％,一致性检验kappa值为0.940,一致性优异.结论 原核表达与亲和及离子交换层析纯化可以获取抗原性良好的EBV感染诊断抗原,偶联HRP后可以作为检测抗原应用于EBV-IgM捕获法ELISA血清学检测中.
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肠道病毒71型非编码区结构与功能研究进展
肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)是婴幼儿手足口病的重要病原体之一,也是继脊髓灰质炎病毒之后的又一种非常重要且常见的嗜神经病毒.EV71非编码区(untranslated regions,UTRs)的某些位点突变或空间结构改变会影响病毒翻译和复制能力以及病毒对细胞组织的亲和力,甚至导致毒力发生变化.目前,EV71的致病机制尚不明确,非编码区的研究是必不可少的一部分,本文综述了近几年来关于EV71非编码区基本结构以及功能研究的新进展.
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测定病毒感染性的PMA-核酸检测法的研究进展
大量的分析方法可用于检测临床样品中的病毒,例如动物感染试验、细胞培养试验和聚合酶链式反应.核酸检测法有很高的敏感性和特异性,但是未能建立被检病毒基因组和病毒感染性间的关系.叠氮溴化丙锭(propidium monoazide,PMA)-核酸检测法可弥补此缺陷,从而测定病毒的感染性.本综述描述了PMA-核酸检测法的原理和步骤,分析了PMA-核酸检测法的优势和局限,讨论了病毒结构、灭活方式和实验条件对PMA-核酸检测法的影响,并总结了该方法的研究进展.
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中国乙型脑炎病毒株的毒力变异和减毒活疫苗的研究
1949年以来中国学者在自然界分离到数百株乙型脑炎(乙脑)病毒株,并对这些病毒株进行神经毒力的研究,发现毒株间存在明显的毒力差异,特别是神经外毒力,差异的原因与自然界环境如媒介、宿主和气候等有关.乙脑的显性和隐性感染则与病毒株的毒力强弱密切相关.对乙脑病毒的变异进行研究,发现病毒可以通过小鼠脑内或不同的细胞传代而毒力逐步减弱,特别是神经外毒力降低更快,并且可以通过空斑把强弱病毒分离从而挑选到低毒力的弱毒株.通过不同减毒试验,获得多株不同毒力的弱毒株用于人体、猪和马的免疫.特别是其中发现病毒通过实验动物体内的非神经组织传代,能够进一步降低病毒的残余毒力并提高其免疫性,应用该创新性技术成功筛选到1株高度减毒而稳定并保持高免疫性的SA14-14-2株,用该株病毒生产的活疫苗,自1989年取得生产许可证以来已在国内外广泛应用,证实其安全高效达到国际领先水平,并于2013年取得WHO的预认证.
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手足口病患儿外周血T细胞亚群变化规律的Meta分析
目的 系统评价手足口病患儿外周血T细胞亚群的变化规律.方法 采用Cochrane评价方法,以手足口病、T细胞亚群、淋巴细胞亚群、Hand,foot and mouth disease(HFMD)、lymphocytesubsets、T-Lymphocyte subsets为关键词,检索中国知网、万方、维普、中国生物医学期刊文献数据库、PubMed、Springerlink,检索日期为2014年1月至2017年10月.分别由2名研究者对纳入研究的文献进行筛选、数据提取和质量评价.应用RevMan5.3进行Meta分析森林图的绘制,Stata14.0软件进行发表偏倚检验和敏感性分析.结果 共纳入文献23篇.普通组VS重症组:CD3+ CD4+T细胞、CD3+ CD8+T细胞、CD3+T细胞、CD4/CD8的均数差(mean difference,MD)及95％ CI分别为7.27(5.91,8.63),3.40(0.68,6.12),11.56(8.59,14.53),0.24(0.14,0.34),差异有统计学意义,均高于重症组.普通组VS健康对照组:CD3+ CD4+T细胞、CD3+ CD8+T细胞、CD3+T细胞、CD4/CD8的MD及95％ CI分别为-5.62(-7.16,-4.07),-1.79(-2.79,-0.79),-6.85(-9.63,-4.07),-0.27(-0.48,-0.05),差异有统计学意义,均低于健康对照组.重症组VS健康对照组:CD3+CD4+T细胞、CD3+ CD8+T细胞、CD3+T细胞、CD4/CD8的MD及95％ CI分别为-12.03(-14.99,-9.07),-5.45(-7.47,-3.43),-18.52(-24.92,-12.12),-0.46(-0.71,-0.20),差异有统计学意义,均低于健康对照组.结论 手足口病患儿外周血T细胞亚群与该病的病情有关,随着病情的加重呈下降趋势.
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多重荧光定量PCR方法在呼吸道合胞病毒和腺病毒检测中的Meta分析
目的 通过Meta分析评价多重荧光定量PCR (multiplex real time polymerase chain reaction,MRT-PCR)方法在呼吸道病毒中常见呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)和腺病毒(adenovirus,ADV)感染的诊断价值,为临床应用提供参考.方法 检索数据库包括PubMed、EMBASE、Cochrane、万方、CNKI等,检索2010年1月至2018年1月关于MRT-PCR方法检测呼吸道病毒感染的中英文文献,由2位研究者独立筛选文献、提取资料,并采用QUADAS-2工具评价纳入研究的偏倚风险后,采用Meta-disc 1.4对数据进行统计分析.结果 本研究纳入10篇文献共2 528例样本.Meta分析结果显示,MRT-PCR检测RSV的Sen合并=0.87(95％ CI:0.83-0.90)、Spe合并=0.98(95％ CI:0.97-0.98)、AUC=1.00.MRT-PCR检测ADV的Sen合并=0.64(95％ CI:0.56-0.71)、Spe合并=0.99(95％ CI:0.98-0.99)、AUC=0.99、Q=0.96.Deeks漏斗图检验结果提示无明显的发表偏倚.结论 MRT-PCR方法检测RSV和ADV的灵敏度有待提高,但检测综合能力较好,对临床上呼吸道病毒感染的早期诊断具有一定的应用价值.
| 年 | 期数 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2007 | 01 02 03 04 |
| 2006 | 01 02 03 04 |
| 2005 | 01 02 03 04 |
| 2004 | 01 02 03 04 |
| 2003 | 01 02 03 04 |
| 2002 | 01 02 03 04 |
| 2001 | 01 02 03 04 |
| 2000 | 01 02 03 04 |
| 1999 | 01 02 03 04 |
| 1998 | 01 02 03 |
