中华实验和临床病毒学杂志
Chinese Journal of Experimental and Clinical Virology 중화실험화림상병독학잡지
- 主管单位: 实验和临床病毒学杂志
- 主办单位: 中国科学技术协会
- 影响因子: 0.71
- 审稿时间: 1-3个月
- 国际刊号: 11-2866/R
- 国内刊号: 段树学
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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SFTS病毒非结构蛋白重组质粒的构建及其体液免疫原性研究
目的 研究SFTS病毒(SFTS virus,SFTSV)的非结构蛋白(Nonstructural proteins,NSs)重组质粒的体液免疫原性.方法 利用聚合酶链反应法(Polymerase chain reaction,PCR)构建真核表达质粒pJW4303-NSs、pJW4303-NSs-opt、pJW4303-NSs-Flag;引入Nhe Ⅰ酶切位点及tPA(Tissue plasminogen activator,tPA)信号肽,构建质粒pJW4303-tPA-NSs-opt.将质粒转染至HEK 293T细胞,蛋白质印迹法(Western blot,WB)验证NSs表达.NSs相关质粒免疫BALB/c小鼠,采用酶联免疫吸附法(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测SFTSV NSs特异性IgG抗体.结果 成功构建了重组NSs质粒,WB验证了NSs可在HEK293T细胞内表达.pJW4303-NSs、pJW4303-NSs-opt、pJW4303-tPA-NSs-opt重组质粒均可诱导小鼠体内产生特异性IgG,其中单优化型质粒pJW4303-NSs-opt的免疫原性较好,在第6、8周的IgG水平显著高于野生型NSs质粒,差异具有统计学意义.结论 本研究构建的SFTSV的NSs重组优化型质粒具有良好体液免疫原性,其中单优化型效果佳.
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山东某高校大学新生乙型肝炎病毒感染及免疫分析
目的 研究大学生乙肝疫苗接种率及HBsAg、抗-HBs检出率,为大学新生乙肝防治工作提供依据.方法 以某高校2016年新入学的大学生为研究对象,发放调查问卷;采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清中HBsAg和抗-HBs.结果 728名研究对象乙肝疫苗接种率80.8%,城市高于农村(P <0.005).HBsAg阳性率为3.4%,城市、农村差异无统计学意义.抗-HBs阳性率为65.2%,城市高于农村(P<0.05).有接种史者抗-HBs阳性率明显高于无接种史者(P <0.005),以上各组性别差异均无统计学意义.结论 结合大学新生接种史和HBsAg、抗-HBs检测结果,进行乙肝疫苗加强;同时,应加强农村地区预防接种工作.
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HIV-1中和抗体2G12真核表达载体的构建及活性检测
目的 构建HIV-1中和抗体全基因共表达真核质粒载体,观察其在293T细胞中的表达并检测其活性.方法 合成HIV-1中和抗体2G12轻链可变区(VL)和重链可变区(VH),与含人IgG轻、重链恒定区的载体分别连接,构建出完整的2G12轻链和重链的载体,通过PCR扩增与连接将2G12轻、重链全长构建到真核表达载体pVR中,同时将内部核糖体进入位点(Internal ribosome entry site,IRES)插入到此载体中构建双基因表达系统,重组质粒转染293T细胞进行瞬时表达,ELISA检测抗体表达效果,通过结合实验及中和实验检测细胞上清的结合活性和中和活性.结果 获得可表达人IgG的重组双基因真核表达载体,转染后上清的抗体表达量为6.43 μg/ml,并且抗体保留了原来的结合活性和中和活性.结论 所构建的载体可表达具有较好的结合活性和中和活性的抗体,本研究为真核表达载体表达人HIV中和抗体全基因方面提供了可选择的平台.
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西安市流感样病例中人腺病毒感染特点分析
目的 分析2013-2015年西安市流感样病例中非流感患者腺病毒(HAdV)感染的流行病学特点和病毒分型特征.方法 收集2013年1月到2015年12月西安市两所国家级流感监测哨点医院的流感样病例样本,经荧光PCR筛检流感病毒阴性而腺病毒阳性的标本,进行病毒分离后对HAdV六邻体(Hexon)基因扩增、测序及分型鉴定,与HAdV 1-7型的参考序列构建基因进化树.结果 2 367份标本中检测出88例腺病毒阳性,阳性率为3.72%.共检出7种亚型的HAdV,其中HAdV-1型占9.09%,HAdV-2型占22.73%,HAdV-3型占23.86%,HAdV-4型占5.68%,HAdV-5型占7.95%,HAdV-6型占3.41%,HAdV-7型占1.14%.在腺病毒阳性病例中,男性检出率高于女性,但差异不具有统计学意义(P>0.05);按年龄分6个组,1岁以下3例阳性,1~3岁36例阳性,4~6岁26例阳性,7 ~18岁16例阳性,19 ~59岁5例阳性,60以上2例阳性.7岁以下儿童高发,年龄组间差异具有统计学意义(x2=0.10,P <0.05).结论 2013-2015年西安市上呼吸道感染中HAdV的主要的流行型别为3型和2型,7岁以下儿童高发;HAdV的感染全年散发,无明显季节性.
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我国沈阳一起GⅡ.17型诺如病毒胃肠炎暴发的分子病原学特征研究
目的 明确沈阳地区一起学校急性胃肠炎暴发的病原和基因特征.方法 采集2015年12月沈阳地区某高校暴发疫情中的学生和食堂从业人员病例肛拭子标本共计15份,采用荧光定量RT-PCR进行诺如病毒检测,并对阳性标本进一步进行传统RT-PCR方法扩增、序列测定和系统进化分析.结果 荧光定量RT-PCR检测确定12份标本为诺如病毒阳性,系统进化分析表明,12个毒株均为GⅡ.17基因型,与引起我国2014-2015年流行的GⅡ.17新变异株KR020503株同源性为99%以上.结论 引起我国2014-2015年流行的GⅡ.17新变异株是引起此高校急性胃肠炎暴发的病原,并且GⅡ.17型诺如病毒为东北地区首次检出.
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2011-2015年济南市流行性腮腺炎流行特征分析
目的 分析济南市2011-2015年流行性腮腺炎的流行特征,为制定针对性的防控措施提供科学依据.方法 通过中国疾病预防控制信息系统收集济南市2011-2015年间流行性腮腺炎疫情监测数据,对其流行特征进行描述性分析.结果 2011-2015年,济南市共报告流行性腮腺炎16 510例,年均发病率48.08/10万,发病时间呈现两个高峰,分别为1~2月和6~7月份,占总发病率的29.84%和18.33%;城区发病率明显高于县区(历城区62.71/10万VS平阴县39.42/10万);发病性别男女比例为1.17∶1,男性发病率明显高于女性发病率;发病年龄段主要以5~9岁为主(占发病总数的51.29%);发病集中分布在学生人群(占病例总数66.74%).结论 2011-2015年济南市流行性腮腺炎发病率呈下降趋势,应采用合理的免疫接种方案,对15岁以下儿童实施强化免疫,同时加强腮腺炎监测和防控.
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pVR-IL15基因佐剂对表达HBsAg重组病毒免疫效果的影响
目的 探索pVR-IL15基因佐剂在表达HBsAg病毒治疗型疫苗的不同免疫策略中对免疫应答的影响.方法 采用了携带乙肝病毒S基因片段的DNA、重组Ankara痘病毒和重组腺病毒序贯免疫策略免疫BALB/c小鼠,在序贯免疫策略的基础上联合pVR-IL15免疫.用ELISA和IFN-γELISPOT方法检测不同免疫组别中小鼠的细胞免疫和体液免疫反应强度.结果 联合pVR-IL15免疫组的体液免疫应答水平和细胞免疫应答水平均显著高于无联合pVR-IL15免疫组,差异具有统计学意义.结论 pVR-IL15基因佐剂能够增强表达HBsAg重组病毒诱导的小鼠免疫应答.
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2016年深圳市艾滋病患者对艾滋病认知及性行为现状调查
目的 了解深圳市HIV感染者在抗病毒治疗前对艾滋病相关知识知晓情况及其与不同性伴性行为情况,为开展健康教育干预提供依据.方法 在知情同意下,随机对首次服药前体检的HIV感染者进行现场问卷调查及相关信息的收集.结果 艾滋病知识总体知晓率为91.0%,同性恋和异性知晓率分别为94.46%和80.95%,二者差异有统计学意义(x2=21.254,P<0.001);不同学历、收入、感染途径、婚姻状况、居住地等相关因素差异均有统计学差异(P<0.05).在同性患者中,有58.3%初次男男性行为发生在大学或更早阶段,初次对象为在校同学占44.9%,初次年龄在30岁或以下占96.8%;曾经用过Rush的男同性恋者占42.7%.同性恋和异性恋在临时性伴数和安全套使用频率方面二者差异有统计学意义(P<0.05).结论 不同途径感染HIV的人群对艾滋病认知存在一定差异,医护人员在患者抗病毒治疗前后开展艾滋病相关知识和性安全的健康教育,不仅提高患者对艾滋病的知晓率,也可降低艾滋病的传播风险.
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应用外部引导序列切割人巨细胞病毒UL148 RNA的研究
目的 研究人巨细胞病毒(Human cytomegalovirus,HCMV)临床病毒株UL/b'区域UL148基因功能及抗HCMV治疗新策略,应用DNA性质外部引导序列(External guide sequences,EGS)在体外抑制UL148 RNA的表达.方法 应用RNA structure生物软件模拟UL148 RNA二级结构,选择二级结构相对简单的区域设计EGS,并合成EGS核苷酸序列.应用PCR方法分别扩增UL148及M1RNA基因,克隆至T7启动子下游,在T7 RNA聚合酶的作用下,体外转录UL148 RNA及M1RNA,其中UL148以32p标记并进行体外转录.混合EGS、M1RNA及UL148 RNA于切割反应液中,反应1h后,进行尿素变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分离,Typhoon扫描仪观察结果.结果 根据UL148 RNA二级结构选取第58 ~72位碱基作为EGS结合区域,其切割位点位于57位,针对此区域设计EGS57,并在体外进行EGS57与UL148 RNA结合的二级结构的模拟,可形成M1RNA天然作用底物类似的茎环结构.在T7 RNA聚合酶的作用下,分别在体外转录M1RNA及UL148 RNA,其大小均与预期相符.经切割反应,可获得与预期切割位点相符的切割条带.结论 EGS57可切割UL148RNA,其切割位点准确,与预期相符.该研究为进一步探讨UL148基因功能提供有效基因沉默工具.
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斯氏按蚊性别决定基因fruitless的鉴定及其性别可变剪接分析
目的 分离、鉴定和分析斯氏按蚊性别决定基因fruitless(Anstfru).方法 通过生物信息学方法与分子生物学方法获得了Anstfru基因的全长.通过RT-PCR方法验证Anstfru的性别可变剪接模式与时间表达特点.通过与已知物种FRU蛋白比较,分析斯氏按蚊FRU蛋白结构特点与分子进化特征.结果 分离并鉴定Anstfru基因全长,其在雌、雄蚊中通过可变剪切形成性别特异性mRNA.Anstfru在1~2龄阶段幼虫阶段开始表达,表达量随后逐渐升高,在成蚊中表达量高.FRU蛋白具有保守的BTB与锌指功能结构域区.结论 Anstfru具有保守的昆虫性别决定基因fru表达特征与功能结构域,对其深入研究将为其终应用于蚊虫雌雄分离技术,推动昆虫不育技术(Sterile insect technique,SIT)在蚊媒传染病防治上的应用.
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遗传性朊病毒病额叶脑组织差异蛋白质组学研究
目的 应用蛋白质组学方法,筛选遗传性朊病毒病(Prion disease)额中回皮质差异表达蛋白以探究朊病毒病的发病机制和干预靶点.方法 对我国经临床、病理及分子生物学方法确诊的3例遗传性朊病毒病尸检脑组织额中回皮质,以3例同年龄组的心脏猝死且无神经系统病变的尸检脑组织为对照,进行了差异蛋白质组研究.应用荧光双向差异凝胶蛋白电泳、MALDI-TOF/MS串联质谱仪进行差异蛋白质谱分析.Mascot search results软件进行搜库,确定差异表达蛋白.结果 表达上调的蛋白有:半乳糖凝集素-1(Galectin-1,Gal-1);泛素(Ubiquitin);兰尼碱受体2(Ryanodine receptor 2,RyR2);肌动蛋白结合蛋白(Profilin-2,PFN2);Rab相互作用溶酶体蛋白样蛋白-1(Rab-interacting lysomes protein-like protein 1,RILPL-1);髓鞘碱性蛋白异构体4(Isoform 4 of myelin basic protein);表达下调的蛋白是血色素β亚单位(Hemoglobin subunit beta).结论 结合文献分析其中泛素、Gal-1、RyR、PFN2和RILPL-1可能与遗传性朊病毒病发病机制关系更为密切.Gal-1可能在朊病毒病中发挥内源性神经保护机制;RyR2与记忆及肌阵挛有关;泛素、RILP-1与错误折叠蛋白质清除有关;PFN2可能与神经变性病的轴浆运输障碍有关.
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978例儿童流感临床分析
目的 探讨儿童流感的临床特征及治疗方法,为临床及时筛查、恰当诊治提供依据.方法 选取2014年1月1日至12月31日北京新世纪儿童医院门诊和住院诊治的实验室确诊流感病例978例进行回顾性调查.分析患儿流行病学特征、实验室检查结果、临床表现及治疗情况.结果 978例患者中,门诊和住院分别占90.8%和9.92%.冬季发病占85.28%,1-5岁患儿占57.16%,甲型流感病例占81.29%.高热(99.59%)及咳嗽(85.89%)是常见症状.病初末梢血白细胞平均6.86±2.68×109/L,淋巴细胞比例低于中性粒细胞.CRP正常范围(66.16%)或轻度增高(19.00±15.12 mg/L).乙型病例消化道症状明显高于甲型(P=0.000).住院病例中第一位为下呼吸道感染(71.13%),23.71%病例检测到合并其他一种或以上病原感染.发热总热程48 h后应用奥司他韦治疗者较48 h内应用者明显延长(P =0.000).7例重症肺炎病例多为小年龄、有基础病、混合感染,经积极综合治疗均治愈.结论 儿童流感主要症状为高热、咳嗽,消化道症状多见于乙型流感患儿.早期应用奥司他韦可明显缩短热程.重症病例需积极综合治疗.
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肥皂水对狂犬病病毒灭活作用的研究
目的 为考察肥皂水对狂犬病病毒的灭活作用,探讨狂犬病暴露后处置中冲洗伤口推荐使用肥皂水的浓度.方法 用不同浓度肥皂水与狂犬病病毒CVS-11混合作用后,分别感染BSR和N2a细胞,通过直接免疫荧光(DFA)和逆转录PCR(RT-PCR)的方法检测不同浓度肥皂水对狂犬病病毒的灭活效力.结果 在24孔板培养细胞为基础的模型中,确定了BSR和N2a细胞所能承受的肥皂水浓度上限为1.0%;不同浓度肥皂水对狂犬病病毒的灭活试验结果显示,终浓度为0.5%的肥皂水作用BSR或N2a细胞3 min后可完全灭活狂犬病病毒,使其丧失感染细胞的能力,而浓度为0.1%的肥皂水不能完全抑制狂犬病病毒的存活.结论 使用浓度为0.5%~1.0%的肥皂水与狂犬病病毒CVS-11混合作用3 min后能使其完全灭活.
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经NAs治疗显效慢乙肝患者PBMC中HBX基因检测及临床意义
目的 检测分析核苷(酸)类似物(Nucleoside analogues,NAs)治疗后血清HBV DNA 阴转的慢乙肝(Chronic hepatitis B,CHB)患者外周血单个核细胞(Peripheral blood mononuclear cell,PBMC)中HBX基因,研究其临床意义.方法 对60例经抗病毒治疗后血清HBV DNA阴转的慢乙肝患者,其中有部分病情进展为乙肝后肝硬化(HBV-related liver cirrhosis)及肝细胞性肝癌(Hepatocellular carcinoma,HCC),采用实时荧光定量PCR检测其PBMC中HBX基因,并分析其序列特点及临床意义.结果 60例患者中PBMC样品检测出HBX基因片段的有37例,检出率61.67%(37/60);三组人群中,HCC、乙肝后肝硬化患者PBMC中HBX基因检出率明显高于CHB患者(P=0.000,P=0.010);通过直接测序法,在2例HCC患者及1例CHB患者中,检测到HBX蛋白突变体蛋白HBX△120、HBX△129、HBX△131截短体;发现A389T/G391A、T380C两个热点突变,且HCC患者中A389T/G391A突变发生率明显高于CHB患者(P=0.021);对于HBeAg(-)的肝硬化、HCC患者,T380C突变发生率高于HBeAg(+)患者(P =0.035).结论 经NAs治疗后血清HBV DNA阴转的患者中,肝硬化、HCC患者的PBMC有更高的HBX检出率;HCC患者A389T/G391A双突变发生率高于CHB患者;HBeAg(-)的肝硬化、HCC患者T380C突变发生率高于HBeAg(+)患者.
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慢性阻塞性肺疾病急性加重患者常见病毒感染分析
目的 分析慢性阻塞性肺疾病(Chronic obstructive pulmonary disease,COPD)急性加重期患者感染病毒特点,及病毒感染在COPD急性加重中的作用.方法 将武警四川省总队医院2015年4月-2016年3月收治的COPD急性加重期患者193例为A组,同期COPD稳定期患者50例为B组.检测两组患者呼吸道合胞病毒、腺病毒、副流感病毒、甲型流感病毒、乙型流感病毒的IgM抗体.结果 两组患者在年龄、性别、病程方面差异无统计学意义(P>0.05).A组病毒感染率13.47%,高于B组(x2=5.29,P<0.05).A组感染的病毒以乙型流感病毒多见(感染率12.44%),之后依次为甲型流感病毒(感染率7.78%)、副流感病毒(感染率7.25%)、腺病毒(感染率2.63%)、呼吸道合胞病毒(感染率1.32%).单一病毒感染占COPD急性加重期感染病毒患者的34.6%,2种病毒感染占15.4%,3种或3种以上病毒感染占50%.夏秋季病毒感染率高于冬春期,但差异无统计学意义(P>0.05).结论 COPD急性加重患者有13.47%存在病毒感染,且大部分为2种或2种以上病毒感染,病毒感染可能在COPD急性加重中起重要作用,需重视COPD患者病毒感染的预防和治疗.
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潮汕地区食管癌血清标本中HPV的抗体检测
目的 检测潮汕地区食管癌患者血清中人乳头瘤病毒(HPV)相关抗体的存在情况,为我国食管癌患者的监测提供参考数据.方法 分别构建包含HPV16型E6/E7和HPV18型E6/E7基因的pSecTag重组载体,转染293细胞后分别表达HPV16型E6/E7和HPV18型E6/E7的融合蛋白,以融合蛋白为抗原,用免疫酶法检测76份食管癌患者血清及149份正常体检人群血清中HPV的IgG抗体;用L1做抗原的ELISA法检测相同样本的血清.结果 使用免疫酶法,E6/E7融合蛋白做抗原在所有血清标本中只有一份食管癌患者血清显示免疫阳性;使用ELISA法,L1做抗原,76例食管癌患者中有37例检测到抗体IgG阳性反应,阳性率为48.7%,149例体检人群中,79例有抗体IgG阳性反应,阳性率为53.0%.经统计分析二者无显著性差异.结论 HPV相关抗体检测方法尚不能作为食管癌的筛查工具,HPV感染的血清学检测用于食管癌的诊断有待于进一步的研究.
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HBV DNA一步法定量检测性能验证及评价
目的 评估一步法HBV DNA定量检测试剂的分析性能及其临床应用价值.方法 采用江苏省临床检验中心室间质控品和南京医科大学附属逸夫医院收集的高浓度临床标本,对一步法HBV DNA定量检测试剂的精密度、标本携带污染、正确度、功能灵敏度、分析测量范围等性能参数进行方法学性能验证和评价.结果 低浓度和高浓度标本的批内CV均≤5%,且重复性精密度<3/5TEa,中间精密度<4/5 TEa;无标本携带污染;正确度符合江苏省室间质评要求;功能灵敏度可以达到100 IU/ml,天间重复CV值≤20%;在7.58×101 ~ 7.58×108 IU/ml分析测量范围线性关系良好.结论 定量检测项目在正式用于患者标本检测前必须对检测系统的分析性能做详细充分的评价,通过验证一步法HBV DNA定量检测试剂可以满足目前乙肝筛查和临床疗效监测的需求,并且经济简便,适用于临床常规检测.
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猴痘病毒检测研究进展
猴痘是由猴痘病毒引起的人畜共患病,人类中出现的症状与过去在天花患者身上所看到的症状相似,但病情相对较轻,人群传播力弱于天花.但是自1980年世界上消灭天花以后,猴痘仍然威胁人类的健康.对疫情做出及时正确的反应依赖于有效的病毒检测方法.本文对近年来猴痘病毒的检测方法的发展做一综述,为我国应对可能出现的猴痘疫情以及生物反恐提供参考.
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自噬与凋亡在肠道病毒感染细胞过程中的影响及其相互作用
肠道病毒感染可引起一些严重的疾病,如脊髓灰质炎病毒感染导致急性弛缓性麻痹、柯萨奇病毒感染导致病毒性心肌炎和无菌性脑膜炎等、埃可病毒感染引起发热和无菌性脑膜炎等、肠道病毒71型感染导致心肺功能障碍和神经系统疾病等.近年来越来越多的研究发现,细胞自噬与凋亡在肠道病毒感染过程中有重要作用.本文就自噬和凋亡在肠道病毒感染过程中的影响及二者的相互作用进行综述.
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甲型流感病毒天然免疫机制研究进展
流行性感冒病毒,简称流感病毒,属于正粘病毒科.流感病毒感染宿主后,急性高热、全身疼痛、显著乏力和呼吸道症状是其典型的临床症状.感染宿主后,可引起Toll样受体、RIG-Ⅰ样受体和NOD样受体等宿主模式识别受体介导的抗病毒信号通路的激活,诱导干扰素和IL-1,IL-18等细胞因子表达,起到抗病毒的作用.本文对这三类PRRs的作用机制进行阐述.
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PBL教学模式在病毒性肝炎教学中的价值
随着PBL教学理念的迅速发展和普及,其在临床医疗教学中的作用也越来越受到人们的重视.将PBL教学模式渗透至病毒性肝炎中是一次临床教学的新型模式探索,这种以学生为主体,把提高学生自己解决问题能力为教学目标的教学方法既激发了学生在病毒性肝炎教学中的学习热情,同时也提升了学生独立思考、科研创新的能力.
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2018 | 01 02 03 04 05 06 |
2017 | 01 02 03 04 05 06 |
2016 | 01 02 03 04 05 06 |
2015 | 01 02 03 04 05 06 |
2014 | 01 02 03 04 05 06 |
2013 | 01 02 03 04 05 06 |
2012 | 01 02 03 04 05 06 |
2011 | 01 02 03 04 05 06 |
2010 | 01 02 03 04 05 06 |
2009 | 01 02 03 04 05 06 |
2008 | 01 02 03 04 05 06 |
2007 | 01 02 03 04 |
2006 | 01 02 03 04 |
2005 | 01 02 03 04 |
2004 | 01 02 03 04 |
2003 | 01 02 03 04 |
2002 | 01 02 03 04 |
2001 | 01 02 03 04 |
2000 | 01 02 03 04 |
1999 | 01 02 03 04 |
1998 | 01 02 03 |