中华实验和临床病毒学杂志
Chinese Journal of Experimental and Clinical Virology 중화실험화림상병독학잡지
- 主管单位: 实验和临床病毒学杂志
- 主办单位: 中国科学技术协会
- 影响因子: 0.71
- 审稿时间: 1-3个月
- 国际刊号: 11-2866/R
- 国内刊号: 段树学
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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广州市海珠区2012-2015年登革病毒分子流行病学分析
目的 了解2012-2015年广州市海珠区流行的登革病毒分子特征及可能的传播来源.方法 收集2012-2015年登革热患者血清样本,分析登革热流行特征.筛选急性期血清,核酸阳性标本用于细胞培养分离毒株,RT-PCR扩增登革病毒E基因全长,测序并利用分子生物学软件进行生物特征和信息学分析.结果 2012-2015年区域内共报告病例6 260例,各年龄段均有发病,10月份为发病高峰;选取发病5d内核酸检测阳性的血清样本48例,成功分离16株病毒,扩增测序获得E基因全长,比对发现2013年及2014年共11株分离株为同一种毒株,属于1型登革病毒G1型,与广州2009年分离株核苷酸同源性高达99.93%,与泰国流行株氨基酸同源性高达98.38%.2015年5个分离株为同一毒株属于2型登革病毒Cosmopolitan基因型,与印度流行株亲缘关系近.结论 区域内近4年的1型登革病毒属于G1基因型,可能来源于泰国.2型登革病毒属于Cosmopolitan基因型,可能来源于印度流行株.
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不同致病力禽流感病毒比较研究的适宜小鼠模型筛选
目的 筛选用于不同致病力禽流感病毒比较研究的适宜小鼠模型.方法 采用禽流感病毒高致病力毒株H7N9和低致病力毒株H9N2分别以滴鼻方式感染C57BL/6和BALB/c小鼠,观察小鼠临床症状、病理变化并检测体内病毒载量.结果 小鼠感染两类禽流感病毒1d后均出现竖毛、聚集成堆、反应迟钝、四肢无力等症状.H7N9与H9N2感染BALB/c小鼠导致的体重丢失低点分别为63.80%与66.35%,均低于C57BL/6小鼠(分别为68.96%与87.57%).感染小鼠的肺组织都存在间质肺炎、水肿、充血、炎细胞浸润等病理症状,H7N9感染C57BL/6小鼠后肺组织病毒载量峰值(1.02×105拷贝/ml)约为BALB/c组(8.72×103拷贝/ml)12倍;而H9N2感染后C57BL/6小鼠肺组织病毒载量(5.94×103拷贝/ml)仅为BALB/c小鼠(2.86×104拷贝/ml)的20%.结论 C57BL/6小鼠感染禽流感病毒更能表现出强弱毒株的致病特点,更适用于不同致病力禽流感病毒比较研究.小鼠的病理变化与临床特征与接种禽流感病毒株的生物学特征及小鼠品系均密切相关.
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负载Ad5-HIVgag/env的DC疫苗在小鼠体内的免疫原性研究
目的 用Ad5-HIV gag/env负载小鼠树突状细胞(Dendritic cell,DC),探索其在小鼠体内诱导的HIV Gag/Env特异性细胞免疫应答.方法 贴壁法分离纯化BALB/c小鼠DCs,并用细胞因子诱导DC细胞成熟,采用流式细胞术鉴定其纯度.利用重组腺病毒Ad5-HIV gag/env感染DC细胞,制备DC疫苗.用所制备DC疫苗免疫小鼠,在免疫后的不同时间点,用ELISPOT方法检测小鼠体内HIV特异性细胞免疫应答水平.结果 成功培养出Ad5-HIVgag/env负载的DC疫苗;免疫荧光以及流式细胞术检测到Gag/Env抗原可在DC内有效表达;上述DC疫苗免疫小鼠后能诱导高水平HIV特异性细胞免疫反应.结论 Ad5-HIV gag/env负载的树突状细胞疫苗可以在小鼠体内诱导较强的HIV特异性细胞免疫反应.
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克里米亚-刚果出血热病毒可视化逆转录环介导等温扩增快速检测法的建立
目的 建立克里米亚刚果出血热病毒(Crimean-Congo hemorrhagic fever virus,CCHFV)的可视化逆转录环介导等温扩增(reverse transcription loop-mediated isothermal amplification,RTLAMP)快速检测法.方法 体外合成CCHFV的S基因,构建重组质粒,体外转录为模板RNA,在线设计3组LAMP引物,使用实时浊度仪筛选出佳引物,以羟基萘酚蓝(Hydroxynaphthol blue,HNB)作为指示剂,建立可视化RT-LAMP反应体系.结果 实时浊度检测结果显示合成的3组LAMP引物中第1组引物的扩增效率高,峰值出现于20 min.添加环引物后,扩增效率进一步提高,13 min即可达到峰值.利用佳引物建立的CCHFV可视化RT-LAMP检测法低检测限浓度为10拷贝/μl,检出时间为30 min,较巢式RT-PCR法和实时定量RT-PCR法分别高1-3个数量级.该方法稳定性好,不会与症状相近的病原体如肾综合征出血热汉坦病毒(汉滩型和汉城型)、马尔堡病毒、新型布尼亚病毒、埃博拉病毒(GP蛋白和VP蛋白)产生交叉反应.结论 建立的CCHFV可视化RT-LAMP检测法,灵敏度好、特异度高、快速廉价、操作简单,无需开盖即可直接观察结果,适用于条件有限的基层单位和偏远地区.但仍需临床样本进行进一步验证.
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白纹伊蚊内源性登革病毒序列分析
目的 分析和验证白纹伊蚊(佛山株)基因组中的登革病毒来源的内源性病毒序列(endogenous viral elements,EVEs).方法 使用Blast序列比对工具,分别以四型登革病毒基因组全序列为待查序列对白纹伊蚊基因组进行序列比对分析.根据筛选得到的EVEs序列设计基因特异性引物,分别以雌、雄各8只成蚊个体进行基因组PCR检测并测序验证.结果 在白纹伊蚊基因组上共计找到5个与登革病毒高度同源性的EVEs片段.其中,EVE-1与DENV-2 P8-1407MS株、EVE-2-5与DENV-1 02-20株具有高度的相似性.基因组PCR检测结果显示,EVE-1在种群个体中保守存在,而EVE-2未检测到,EVE-3-5在不同个体中变异度较高.结论 白纹伊蚊基因组中存在登革病毒序列来源的EVEs,为研究登革病毒与媒介之间的相互作用提供了新的方向.
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2015年云南省西双版纳州登革2型病毒暴发疫情的调查研究
目的 阐明2015年云南省西双版纳州登革热流行病学特征和登革病毒血清型及其传播来源.方法 收集登革热病例资料,采集患者急性期血清标本,用RT-PCR法检测登革病毒核酸,并进行登革病毒C/PrM区核苷酸序列测定和分析.结果 2015年西双版纳州共报告登革热病例1 132例,其中本地感染病例1 089例(96.20%)、输入性病例43例(3.80%,来自缅甸38例、老挝3例和泰国2例).本地流行地区主要为景洪市城区和嘎洒镇,该流行区中埃及伊蚊为优势蚊种,流行月份为7-12月.病例年龄分布以20-49岁组为主,小2岁,大93岁;男女性别比为1∶1.05.经登革病毒核酸检测和序列测定,从患者血清中获得33株病毒的C/PrM区基因核苷酸序列.进化分析表明,这33株病毒均为登革2型病毒,其中的泰国输入性病例分离株与本地流行株高度同源,同为一个进化群,并与东南亚和我国福建和广东流行株亲缘关系较近,但与云南省瑞丽市2014年登革2型病毒流行株亲缘关系较远.结论 2015年西双版纳州发生了由登革2型病毒引起的本地登革热流行,来自泰国的登革热输入性病例是引起本地登革热流行的主要原因,埃及伊蚊是主要传播媒介.加强输入性病例和本地病例的监测和管理以及蚊虫控制是防止本病蔓延扩散的关键措施.
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北京地区人乳头瘤病毒39型的人群分布特征
目的 研究北京地区人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV) 39型的感染情况及分布规律.方法 收集2013年1月至2014年7月就诊于中国人民解放军总医院妇产科,并在30天内同时进行宫颈脱落细胞HPV分型检测及新柏氏薄层液基细胞学检测的女性患者,回顾性收集其临床信息.通过聚合酶链式反应对HPV39阳性样本进行HPV39病毒基因组全长扩增.结果 19 018例受试者中,HPV39阳性为518例,阳性率为2.72%,且在21-25岁组和46-50岁组呈现感染高峰,其阳性率分别为2.98%和2.44%.在宫颈病变中,HPV39在低度鳞状上皮内病变中的阳性率高,为18.52%.共扩增出5例HPV39阳性样本的病毒全基因组.结论 HPV39随年龄增大呈双峰分布,且在低度鳞状上皮内病变中占有较高的比例.宿主细胞中存在附加体形式的HPV39.
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希森美康试剂和罗氏试剂检测乙肝表面抗原的比较
目的 评估希森美康试剂定量检测乙肝表面抗原(Hepatitis B surface antigen,HBsAg)结果的重复性和罗氏试剂的相关性.方法 收集580例血清标本,用希森美康HISCL HBsAg试剂盒和罗氏Elecsys HBsAgⅡquant试剂盒进行检测,用统计学方法分析检测结果的相关性,通过与罗氏试剂检测结果比较,对希森美康试剂的特异性、敏感性和抗干扰物质能力进行评估.结果 希森美康试剂检测HBsAg的批内变异系数(coefficients of variation,CV)<5.0%,批间CV≤5.5%.238例标本用希森美康试剂重复检测,符合率100%,其中174例HBsAg阳性标本重复检测HBsAg结果相关性r=0.999,P<0.01.122例正常对照组两种试剂检测HBsAg均为阴性,符合率100%.287例HBsAg标本阳性希森美康与罗氏试剂检测HBsAg结果的相关性r=0.996,P<0.01.对含有可疑干扰物的标本,两种试剂检测结果相近(孕妇和婴儿r=0.992,P=0.000;各种病毒或梅毒感染r=0.995,P=0.000;抗病毒药物r=0.994,P=0.000;HBV基因变异耐药r=0.998,P=0.000;抗核抗体及类风湿因子r=0.997,P=0.000).结论 希森美康试剂检测HBsAg结果的重复性佳,与罗氏试剂具有良好的相关性.
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EV71检测细胞系的构建与鉴定
目的 构建71型肠道病毒(enterovirus 71,EV71)检测细胞系.方法 以含有绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)基因的EV71感染性克隆pWSK-T7-EV71-GFP为分子基础,构建GFP基因嵌入病毒基因组两端非编码区的表达盒UGFP,并将其克隆入质粒pLV-Puro获得慢病毒表达载体pLV-UGFP.将质粒pLV-UGFP和包装质粒Helper用脂质体转染法共转染入HEK293T细胞中,转染48 h后,用收集到的慢病毒颗粒感染BHK-21细胞,经嘌呤霉素压力筛选和系列稀释法获得用于外源EV71检测的工程细胞系BHK/UGFP.结果 BHK/UGFP细胞感染EV71 48 h后,可检测到GFP的表达,作为对照组细胞感染甲病毒属的辛德毕斯病毒(XJ-160)和黄病毒属的乙脑病毒(P3)等单股正链RNA病毒,则检测不到绿色荧光.该检测细胞系用不同滴度的EV71感染,至少可以检测到10 PFU/ml的EV71.结论 构建的BHK/UGFP检测细胞系可用于外源EV71的检测,且该检测方法特异性和灵敏性均良好.
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济南市2010-2015年麻疹流行状况及麻疹疫苗接种分析
目的 探讨济南市麻疹流行病学特征及麻疹疫苗的接种情况.方法 对2010年1月至2015年12月济南市报告麻疹病例、免疫接种等进行描述流行病学分析.结果 6年内济南市共报告麻疹2 086例,年均发病率4.24/10万,2012年发病率为0.07/10万,达到麻疹消除标准.男女年均发病率比较中,男性年均发病率显著高于女性(x2 =4.532,P<0.05).发病率高峰处于3-5月占总发病的51.97%;年龄段以0-4岁发病率高,占总发病的46.69%.职业调查中,麻疹发病率以散居儿童多,占总发病的54.27%.疫苗查漏补种后发病率有显著下降(x2=4.5324.113,P<0.05).结论 对适龄儿童接种两剂含麻疹成分疫苗,接种应达到高覆盖率,并予以维持;对散居儿童、流动儿童的免疫接种管理应不断加强;做好适龄人群的查漏补种工作,以达到国家麻疹消除水平.
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慢性乙型肝炎病毒感染女性孕晚期应用核苷(酸)类似物安全性的回顾性研究
目的 探讨慢性乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染孕妇孕晚期应用抗病毒药物对母儿的安全性.方法 利用医院电子病历系统回顾性收集首都医科大学附属北京地坛医院分娩的慢性HBV感染孕妇,根据孕妇孕28周后是否应用抗病毒药物分为用药组(孕晚期使用拉米夫定、替比夫定或替诺福韦)和对照组(孕期未使用任何抗病毒药物),比较两组孕妇妊娠并发症发生率,以及两组新生儿不良事件的发生率.结果 共收集到符合条件孕妇4 018例,其中用药组1 045例(其中用拉米夫定487例、替比夫定556例、替诺福韦2例),对照组2 973例,两组孕妇剖宫产率相似(49.5% vs51.7% P=0.306),围产期胆汁酸增高、羊水过多、羊水过少、产后出血、早产、羊水Ⅲ度粪染等并发症发生率相比均无统计学差异(P值均>0.05).两组新生儿出生体重、身长、1 min Apgar评分差异均无统计学意义(3 390 g vs 3 389 g P=0.728;50.22 cm vs 50.20 cm P =0.577;9.96 vs 9.94P =0.168),新生儿畸形发生率无差异(1.5% vs 1.4% P=0.783).拉米夫定及替比夫定两种药物相比,孕妇围产期胆汁酸增高、羊水过多、羊水过少、产后出血、早产、羊水Ⅲ度粪染等并发症发生率相比差异均无统计学意义(P值均>0.05).结论 孕晚期服用抗病毒药物不增加孕妇围产期并发症的发生率,未影响胎儿宫内发育,不增加新生儿畸形的发生率;抗病毒药物孕晚期使用对母儿基本安全;拉米夫定、替比夫定两组药物孕晚期使用安全性相当;尚需更长期、细致随访观察.
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慢性乙型肝炎治疗前X区变异与聚乙二醇干扰素α-2a治疗疗效的关系研究
目的 探讨慢性乙型肝炎治疗前X区变异与聚乙二醇干扰素α-2a治疗疗效的相关性.方法 收集HBeAg阳性慢乙肝患者,给予聚乙二醇干扰素α-2a治疗,收集基线及治疗12周后的患者血清.12周后根据HBVDNA下降水平分为三组:DNA应答组、DNA部分应答组、DNA无应答组.对患者基线血清进行全序列扩增、克隆、测序.通过logistic回归分析确定与聚乙二醇干扰素α-2a治疗疗效相关的变异位点,取P<0.05为有统计学意义.结果 共对29例患者进行了数据分析,DNA应答组7人、DNA部分应答组9人、DNA无应答组13人.各组间基线ALT水平比较(X2 =10.732,P=0.005),差异有统计学意义.年龄、性别、HBVDNA、HBsAg、HBeAg、HBeAb比较,差异均无统计学意义.共获得306条序列,进行统计学分析及结合临床应答,得到X区核苷酸变异位点共16个,进一步进行多因素logistic回归分析发现ntG1386A、ntG1437A、ntGl515A有利于干扰素抗病毒治疗;ntC1383A、ntT1425C、ntG1512A不利于干扰素抗病毒治疗.氨基酸水平分析发现V5M、G22S和D48N是干扰素治疗的有利因素,V30L和A47T是不利因素.结论 基线X区变异与聚乙二醇干扰素α-2a治疗疗效可能相关.
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替比夫定治疗儿童和青少年慢性乙型肝炎临床研究
目的 为探讨替比夫定在儿童和青少年慢性乙型肝炎(慢乙肝)抗病毒治疗中的疗效及安全性.方法 41例3-16岁HBeAg阳性慢乙肝患儿服用替比夫定片抗病毒治疗,总疗程52周.监测血生化、HBVM及HBVDNA定量并记录不良事件.结果 35例(85.4%)患儿ALT复常.HBVDNA载量平均下降了6.97±0.96logIU/ml(中位数7.3logIU/ml),31例(75.6%)低于检测下限.18例(43.9%)患儿HBeAg丢失;10例(24.4%)患儿HBeAg血清学转换.2例在52周时HBsAg定量已下降至< 10IU/ml.24周时HBVDNA转阴的患者52周ALT复常率、HBVDNA转阴率、E抗原阴转率、E抗原转换率明显优于HBVDNA未转阴的患者.本组患儿替比夫定抗病毒治疗HBVDNA下降与有无乙肝家族史没有相关性(P =0.122),HBVDNA下降与是否曾经接受过IFN治疗是相关的(P =0.004).本组患儿在治疗期间发生的不良事件均是轻度的,并且表现为一过性,没有一例严重不良事件.本组患儿治疗期间没有发生基因突变.结论 替比夫定在本组儿童和青少年慢乙肝抗病毒治疗中有明确的疗效,安全性较好.
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恩替卡韦与拉米夫定治疗乙型肝炎病毒相关肝衰竭生存率Meta分析
目的 通过Meta分析系统评价恩替卡韦和拉米夫定对HBV相关肝衰竭生存率的影响.方法 检索2007年至2015年公开发表的中、英文相关文献,严格按照文献纳入、排除标准筛选.采用RevMan 5.2版统计软件进行Meta分析,应用森林图对治疗4周、12周、24周、48周生存率进行分析.结果 纳入恩替卡韦和拉米夫定治疗HBV相关肝衰竭有关生存率的中、英文文献18篇,共计1 837例病例纳入研究,其中12篇为队列研究,6篇为randomized controlled trial(RCT)研究.Meta分析结果显示:恩替卡韦组4周、12周、24周、48周HBV DNA阴转率均高于拉米夫定组(4周:RR=1.52,Z=4.11,P<0.01;12周:RR=1.26,Z=3.85,P<0.01;24周:RR=1.26,Z=5.16,P<0.01;48周:RR=1.22,Z=3.41,P<0.01).恩替卡韦组4周、12周和24周生存率与拉米夫定组均无差异(4周:RR =0.97,Z=0.55,P=0.58;12周:RR=1.01,Z=0.15,P=0.88;24周:RR=1.02,Z=0.56,P =0.57),而48周生存率高于拉米夫定组(48周:RR值为1.18,Z=2.84,P<0.01).结论 恩替卡韦治疗HBV相关肝衰竭抗HBV疗效及改善远期生存率优于拉米夫定,更适合HBV相关肝功能衰竭的长期治疗.
年 | 期数 |
2018 | 01 02 03 04 05 06 |
2017 | 01 02 03 04 05 06 |
2016 | 01 02 03 04 05 06 |
2015 | 01 02 03 04 05 06 |
2014 | 01 02 03 04 05 06 |
2013 | 01 02 03 04 05 06 |
2012 | 01 02 03 04 05 06 |
2011 | 01 02 03 04 05 06 |
2010 | 01 02 03 04 05 06 |
2009 | 01 02 03 04 05 06 |
2008 | 01 02 03 04 05 06 |
2007 | 01 02 03 04 |
2006 | 01 02 03 04 |
2005 | 01 02 03 04 |
2004 | 01 02 03 04 |
2003 | 01 02 03 04 |
2002 | 01 02 03 04 |
2001 | 01 02 03 04 |
2000 | 01 02 03 04 |
1999 | 01 02 03 04 |
1998 | 01 02 03 |