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中华实验和临床病毒学

中华实验和临床病毒学杂志

Chinese Journal of Experimental and Clinical Virology 중화실험화림상병독학잡지

统计源期刊
  • 主管单位: 实验和临床病毒学杂志
  • 主办单位: 中国科学技术协会
  • 影响因子: 0.71
  • 审稿时间: 1-3个月
  • 国际刊号: 11-2866/R
  • 国内刊号: 段树学
  • 发行周期: 双月刊
  • 邮发: cjecv@cmaph.org
  • 曾用名: 实验和临床病毒学杂志
  • 创刊时间: 1987
  • 语言: 英文
  • 编辑单位: 中华医学会
  • 出版地区: 北京
  • 主编: 中华实验和临床病毒学杂志编辑委员会
  • 类 别: 基础医学
期刊荣誉:
  • 2013-2014年长沙急性下呼吸道感染住院儿童腺病毒的分子流行特征

    作者:罗小芳;张兵;段招军;刘沁;谢志萍

    目的 了解2013-2014年长沙地区急性下呼吸道感染患儿人腺病毒(HAdV)的基因型别和流行特征,为腺病毒的防治提供依据.方法 搜集2013年4月至2014年3月湖南师范大学附属第一医院儿童医学中心因急性下呼吸道感染住院的患儿的鼻咽抽吸物(NPAs) 603份,用荧光定量PCR方法进行11种常见呼吸道病毒的核酸检测.采用巢氏PCR扩增腺病毒阳性标本的hexon基因片段并进行序列分析.结果 603例标本共检测出HAdV阳性标本119份,检出率为19.73%.成功分型88份,其中7型27例,占30.68%;2型17例,占19.32%;3型14例,占15.91%;1型14例,占15.91%;5型6例,占6.82%;6型3例,占3.41%;4型4例,占4.55%;57型2例,占2.27%;14型1个,占1.14%.人腺病毒感染呈全年散发,夏季检出率相对较高.感染人群主要是7岁以下儿童(95.80%).结论 人腺病毒是2013-2014年度长沙地区儿童急性下呼吸道感染的重要病原体,优势流行株为7型和2型.B亚组中HAdV-7、HAdV-3的致病性强于C亚组及E组中的其他型别.

  • MicroRNA-126慢病毒增强MSCs-水凝胶修复下颌骨缺损效果的研究

    作者:孙福财;麻益可;蔡志斌;杨兆安

    目的 构建MicroRNA-126慢病毒载体以及研究MicroRNA-126对缺血条件下间充质干细胞存活和成骨分化的影响.方法 构建MicroRNA-126慢病毒载体并感染间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSCs);流式检测转染能力和MSC合成Ⅰ型胶原能力;ELISA检测细胞培养上清中骨钙素、胰岛素样生长因子1(Insulin-like growth factor 1,IGF-1)和转化生长因子β(Transforming growth factor-β,TGF-β)的含量;构建下颌骨骨缺损模型,在体内注射混合有MSCs的水凝胶,移植48 h,检测存活率和分化为成骨细胞的比率.结果 流式的结果显示MicroRNA-126的慢病毒载体能顺利的转染进入细胞;ELISA的结果显示MicroRNA-126的慢病毒载体转染的MSC能分泌更多的骨钙素、IGF-1和TGF-β,相对于对照病毒处理组分别上升了1.43、1.87和2.63倍(P<0.05);动物实验的结果显示移植48h后,MicroRNA-126组存活的干细胞的数量是对照病毒组的4.56倍,分化为成骨细胞的MSC的比例为75%,是对照病毒组的3.95倍(P<0.05).结论 MicroRNA-126可以维持缺血条件下间充质干细胞存活及其向成骨细胞的分化.

  • 新生儿脐带血调节性T细胞和pDC频数及功能研究

    作者:刘莲;陈晓雪;张璐;路遥;刘梦;张丹;申戈;吴淑玲;胡蕾苹

    目的 探讨新生儿脐带血中CD4+ CD25+ CD127low调节性T细胞和pDC频数和功能.方法 收集2013年8月至2014年2月在北京地坛医院妇产科分娩的HBV DNA阴性(<100IU/ml)孕妇所生新生儿脐带血以及正常成人外周静脉血,采用流式细胞仪分析技术测定两组全血样本中CD4+ CD25+ CD127lowTreg细胞占CD4+细胞比率以及pDC频数和表面分子水平;采用Luminex技术分别检测两组血清中细胞因子IFN-a、IFN-r、IL-6、IL-10、IL-17A、Flt-3L水平.结果 新生儿脐带血CD4+ CD25+ CD1271owTreg细胞频数(7.34土1.54)与正常成人组(8.14土1.15)之间差异无统计学意义;新生儿Linl-HLA-DR+CD123+pDC细胞频数及其表面功能分子CD80、CD83和CD86阳性率均显著低于正常成人组(P =0.000),而TLR-9表达阳性率(21.30土22.50)与成人(34.27土11.31)差异无统计学意义;新生儿脐血中细胞因子IFN-r及IL-17A水平显著低于正常成人组(P=0.003,P=0.010),而IFN-a、IL-10、IL-6及Flt-3L水平在两组之间差异无统计学意义.结论 新生儿pDC频数、成熟度低于成人可能与新生儿感染HBV易慢性化有关.

  • 乙型肝炎病毒活性RNase H酶的表达纯化及在药物筛选中的应用

    作者:卢高峰;于泳;孙趁意;崔静;郑鹏远

    目的 获得具有体外活性并且能够用于药物筛选的乙型肝炎病毒(HBV) RNaseH酶.方法 以pMAL-c5xHis为骨架,构建重组基因C型HBV RNase H酶表达质粒,通过大肠埃希菌高效表达出分子量为60KDa的可溶性目的蛋白,通过镍亲和层析法纯化出HBV RNase H酶.Commassie染色和Western Blot方法鉴定目的蛋白;采用寡核苷酸引导的RNA切割法鉴定HBV RNase H酶活性、对温度变化的稳定性及其在HBV RNase H酶抑制剂体外筛选中的应用.结果 Commassie染色、Western Blot分析结合寡核苷酸引导的RNA切割法鉴定显示成功表达和纯化出具有活性的HBVRNase H酶,酶活性对温度变化具有稳定性,并且对HBV RNase H酶抑制剂具有良好的敏感性.结论 通过基因重组和镍亲和层析法可以体外获得具有活性的HBV RNase H酶,并可以用于HBVRNase H酶抑制剂的体外筛选.

  • 白银地区5岁以下住院儿童RSV感染流行病学分析

    作者:乔瑞娟;汪鹏;康倩;王旭霞;张入学;陈建华;倪丰安;冯双成;李普

    目的 了解甘肃省白银地区儿童中呼吸道合胞病毒(RSV)的病原学特点及流行特征,为甘肃省RSV疾病的诊断治疗及疫苗的应用等提供依据.方法 选取白银市3家哨点医院,从2012年4月-2015年3月期间每月采集5岁以下肺炎住院儿童的深部吸痰标本共1400份,进行呼吸道病原谱的检测,其中RSV病毒使用双通道实时荧光PCR检测.结果 5岁以下肺炎儿童RSV感染总体阳性率为33.00%;462例RSV阳性患儿中,247例为A亚型,215例为B亚型,在2012-2014年以RSVB为主,2014-2015年以RSV A为主;2岁以下年龄组较2岁以上儿童RSV阳性检出率高(P<0.05),RSV感染的高峰季节在冬春季节12月至次年3月期间;A、B两个亚型交替流行.结论 RSV病毒是白银市5岁以下儿童下呼吸道感染病例中病毒性病原的首位,每年冬春季节存在流行高峰.A、B两个亚型交替流行.

  • 人巨细胞病毒UL138含多个B细胞表位病毒样颗粒的构建及鉴定

    作者:李宝青;田晓娟;陈晓晴;王红;陶洪群;郑育;沈贤;李文姝;张丽芳

    目的 利用毕赤酵母系统表达HPV16 L1-HCMV UL138含多个B细胞表位片段的嵌合病毒样颗粒,并评价其免疫效应.方法 选择富含B细胞表位的HCMV UL13896-138片段,构建毕赤酵母真核表达质粒pPIC3.5K/HPV16L1/UL13896-138.线性化后的重组质粒电转化GS115毕赤酵母,甲醇诱导HPV16 L1/UL13896-138蛋白表达,采用肝素亲和层析法纯化嵌合VLPs,并加以鉴定.将纯化的嵌合VLPs免疫BALB/c小鼠,通过ELISA检测免疫小鼠血清的UL138特异性抗体水平.结果 经PCR、酶切和测序分析表明成功构建了pPIC3.5K/HPV16 L1/UL13896-138嵌合重组质粒.经甲醇诱导后,SDS-PAGE和Western Blot证实重组酵母菌裂解产物存在目的蛋白.肝素亲和纯化后,透射电镜观察到了直径大约55nm的病毒样颗粒.免疫小鼠血清的ELISA结果显示,HPV16 L1-HCMV UL138B细胞表位嵌合病毒样颗粒能诱导小鼠产生较高水平的UL138特异性IgG抗体.结论 以HPV16 L1为载体,利用整合型重组毕赤酵母表达系统成功制备了HCMV UL138含多个B表位片段的嵌合病毒样颗粒,免疫小鼠可产生较高水平的体液免疫反应.

  • 呼吸道病毒感染患儿外周血淋巴细胞亚群测定及临床意义

    作者:冯志山;赵梦川;李贵霞;石仲仁;王乐;袁晔;郭巍巍;李军;杨硕

    目的 分析呼吸道合胞病毒(humanrespiratory syncytial virus,HRSV)、副流感病毒3型(humanparainfluenza virus Ⅲ,HPIV3)和鼻病毒(human rhinovirus,HRV)感染患儿外周血T淋巴细胞亚群、B淋巴细胞及NK细胞的变化,并探讨其临床意义.方法 病例对照研究.收集2014年2月-2014年11月河北省儿童医院146例急性呼吸道感染患儿标本,应用GeXP多重基因表达系统及RT-PCR扩增技术检测20种常见呼吸道病毒,选择呼吸道合胞病毒感染50例,副流感病毒Ⅲ型感染46例,鼻病毒感染50例.50名健康儿童作为对照组.采用流式细胞仪检测病毒感染患儿及健康对照组儿童外周血T淋巴细胞亚群、B淋巴细胞和NK细胞值.病毒感染组与正常对照组的比较采用两独立样本比较的Mann-Whitney U检验,不同病毒感染组间的比较采用多个独立样本比较的Kruskal-Wallis H检验.结果 HRSV组、HPIV3组和HRV组患儿外周血CD3+、CD8+、CD3+ CD4+ CD8+、CD56+水平均明显低于健康对照组(P1均分别为<0.001,<0.001,<0.001,和0.002;P2分别为<0.001,<0.001,0.002和0.043;P3分别为<0.001,<0.001,0.001和<0.001),CD19+水平及CD4 +/CD8+比值较对照组均显著升高(P1为0.004和<0.001;P2、P3均<0.001).HRSV组和HPIV3组患儿的外周血CD4+水平较对照组明显升高(P分别为<0.001和0.001),但HRV组患儿外周血CD4+水平与对照组相比,差异无统计学意义(P=0.319);三组病毒感染组分别比较,HRSV组和HRV组CD4+水平(P =0.034)和CD4+/CD8+比值(P=0.018)差异有统计学意义,其他均无统计学意义.结论 HRSV、HPIV3及HRV感染均可导致机体细胞免疫功能明显紊乱,且三种病毒感染后外周血淋巴细胞亚群变化趋势一致,均可使病情恶化或病程延长.及时准确的了解病毒感染患儿外周血淋巴细胞亚群的变化能更好地认识疾病的转归,且有助于指导临床的治疗.

  • 深圳H7N9流感病毒PB1-F2基因分子特征

    作者:董方圆;王昕;彭博;武伟华;刘慧;丁小满;郑青;房师松

    目的 了解深圳20株H7N9流感病毒PB1-F2基因的分子特征.方法 使用DNAstar、MEGA等生物软件对深圳地区H7N9流感病毒PB1-F2进行核苷酸、氨基酸序列同源性和系统进化分析.结果 2014年底到2015年H7 N9流感病毒爆发主要集中在广东省,以深圳居首.深圳20株H7N9流感病毒PB1-F2基因主要分为三个亚系.3株的PB1-F2基因的N端缺失编码52个氨基酸;1株PB1-F2基因的C端缺失编码57个氨基酸;1株PB1-F2基因的C端缺编码76个氨基酸;其余株PB1-F2基因编码90个氨基酸.各深圳株与A/Anhui/1-DEWH730/2013株相比核苷酸和氨基酸的同源性分别为96.0%~100%和89.0% ~ 100%.各深圳株之间的核苷酸同源性和氨基酸同源性分别为94.9%~100%和85.7% ~100%.结论 深圳H7N9流感病毒PB1-F2基因具有独特的分子特征.

  • 云南省手足口病高发区健康人群EV71IgG抗体水平分析

    作者:尹洁;吴强;杨汝松;寸建萍;徐闻;赵世文

    目的 分析云南省手足口病高发地区健康人群的肠道病毒71型(EV71)抗体水平,为科学防治手足口病提供依据.方法 选择云南省手足口病的高发地区玉溪市随机抽取2个县,将健康人群分成0 ~岁、1~岁、3~岁、5~岁、7~岁、11~岁、15~岁、20~岁8个年龄组,通过先分层后整群抽样的方法,抽取健康儿童血液,应用酶联免疫吸附实验(ELISA)测定血清EV71IgG抗体.结果 共采集787份标本,抗体阳性率41.3%;5~岁组的抗体阳性率高(64.0%),低为0~岁组,阳性率仅为20.7%,不同乡镇、不同年龄组、不同性别人群抗体阳性率存在统计学差异(P<0.05).结论 人群对EV71普遍易感,健康人群中存在一定的隐性感染,与地区、人群年龄、性别分布相关.

  • 宫颈癌组织中eIF-4A蛋白的表达及其临床意义研究

    作者:郑婷华;华王茜;杨小杰;韩炜;周钰昆;郑韦

    目的 分析真核细胞起始因子eIF-4A在宫颈癌及不同级别宫颈内瘤变组织中的表达及其临床意义.方法 选择本院本科2012年2月~2015年3月行手术治疗或行病理活检后经病理组织学诊断为宫颈癌患者80例,高度宫颈上皮内瘤病变(CINⅡ级及Ⅲ级)40例,低度宫颈上皮内瘤变(CIN Ⅰ级)40例,以及本科相同时间段子宫肌瘤患者经全子宫切除术、病理学诊断为正常宫颈的患者40例为对照组.免疫组化法测定eIF-4A蛋白在宫颈癌组织、不同级别的宫颈内瘤变组织以及正常组织中的表达水平,探讨其与宫颈癌的病理及临床分级、分期之间的关系.结果 eIF-4A蛋白在各种组织中的表达阳性率分别为:正常宫颈组织(0.0%)、CIN Ⅰ(52.5%)、CIN Ⅱ和Ⅲ(77.5%)、宫颈鳞癌组织(81.8%),其阳性表达率呈逐渐递增趋势,差异具有统计学意义(x2=77.874,P<0.05),其线性趋势检验有统计学意义(x2 =65.810,P<0.05).eIF-4A蛋白表达在CIN Ⅱ和Ⅲ期组织与宫颈鳞癌组织的表达,差异无统计学意义(x2=0.292,P>0.05).eIF-4A蛋白在宫颈癌组织中的表达与其组织学类型无关(x2=0.779,P=0.377);与其组织分化程度有关(x2=8.042,P=0.018);与其临床分期有关(x2=6.765,P=0.009).结论 eIF-4A可能与宫颈癌的发生、发展相关,可能在宫颈癌起始过程即发挥了作用.

  • 网络招募的男男性行为者HIV感染状况及影响因素分析

    作者:韩威;童晶;张培栋;张利宁;周长月

    目的 分析基于网络平台招募的男男性行为(MSM)人群性行为特征及艾滋病病毒(HIV)血清学检测情况,分析相关影响因素.方法 通过网络招募近1年内有同性性行为的MSM,开展面对面的问卷调查,并采血进行HIV、梅毒和HCV抗体检测,采用logistic回归方法分析感染的相关影响因素.结果 共招募有效调查对象400名,中位数年龄27岁,未婚占65.25%;大专及以上学历占56.00%;总体知识知晓率为92.75%;近一次与同性和异性发生性行为的安全套使用比例为78.96%和79.82%;HIV抗体阳性检出率为7.25%(29/400).多回归分析结果有统计学意义的变量包括年龄、知晓情况、与同性肛交安全套的使用、与异性性交安全套的使用、梅毒感染和性病感染.结论 基于网络招募的MSM危险性行为发生率和HIV感染率较高,安全套使用率低,应探索应用互联网开展有效的健康教育和检测动员,完善性病和艾滋病综合防治机制,采取有效针对措施加大对该人群干预力度.

  • 肠道病毒71感染病毒载量与细胞因子和免疫球蛋白水平的相关性

    作者:杜潘艳;王晓波;王宝林;高翠红;张双;陈苏;何亚萍;蔡树娟

    目的 检测手足口病患儿肠道病毒71型(EV71)病毒载量与白介素6(IL-6)、白介素10(IL-10)、S100B、免疫球蛋白A(IgA)、G(IgG)水平,探讨EV71病毒载量与细胞免疫、体液免疫以及病情轻重的关系.方法 收集本院儿科确诊的手足口病例385例,根据临床症状和体征将其分为轻度组(237例)和重症组(148例).患儿咽拭子采用实时荧光定量反转录PCR技术检测EV71病毒核酸;采用双抗体夹心法检测患儿血液和脑脊液中白介素6(IL-6)、白介素10(IL-10)及S100B水平;免疫比浊法检测血清IgA、IgG水平.结果 EV71病毒载量在重症组与轻度组间差异无统计学意义(P>0.05);血清IL-6、IL-10和脑脊液S100B水平均与病情轻重呈高度相关性(P<0.01),脑脊液IL-6、IL-10、WBC计数与病情轻重呈低度正相关性(P<0.05),血清S100B与病情轻重呈中度正相关(P<0.01);IgA、IgG水平均与病情轻重呈中度负相关性(P<0.05).结论 EV71病毒载量的高低与患儿免疫状态无关,也不能作为判断病情轻重的关键因素.

  • 2010-2014年苏州市流感病原学监测结果分析

    作者:夏瑜;沈强;陆步来;雅雪蓉;韩卫宁;张钧;吴伟华

    目的 了解苏州市2010-2014年的流感样病例(Influenza-like illness,ILI)病原学特点,为苏州市流感的防控工作提供科学依据.方法 对苏州市立医院本部和苏州市儿童医院的呼吸科就诊病人进行监测采样,获得成人及儿童流感样病例咽拭子标本,采用实时荧光-PCR方法进行病毒核酸检测,并对结果信息进行描述分析.结果 2010-2014年苏州市共采集ILI咽拭子标本8035份,其中流感阳性标本959份,总阳性率为11.94%,相邻年份阳性率差异有统计学意义(x2=77.78,P<0.0001).各个年龄组病例阳性率高的是10 ~ 19岁年龄组,低的是40 ~ 49岁年龄组;苏州市流感的流行季节为冬春季和夏季,B型流感主要在冬春季流行,而A型流感在全年流行,各个亚型交替流行.结论 苏州地区2011-2014年流感病毒感染人群各个年龄组,发病高峰为每年的冬春季和夏季,各种流感亚型交替流行,因此需要长期对苏州市流感进行病原学监测,为进一步控制流感的传播提供理论基础.

    关键词: 流感 病原学 监测
  • 肠道病毒71感染手足口病患者27种细胞因子的研究

    作者:关恒云;黄象娟;王春荣;刘岚铮;杨国樑;韩秀云;成洪旗

    目的 基于液相芯片分析平台,揭示EV71感染手足口病患者细胞因子表达水平与病情严重程度的关系.方法 收集济南市2009-2014年43例EV71感染手足口病患者血清,其中16例为轻症患者、27例为重症患者,同时随机选取10例健康人群血清作为对照组.利用Bio-plex液相芯片平台检测分析血清中27种细胞因子表达水平.结果 EV71感染手足口病患者重症组血清中22种细胞因子表达水平较对照组有不同程度升高(P<0.02),包括IL-1 ra、IL-2、IL-4、IL-5、IL-6、IL-7、IL-8、IL-9、IL-10、IL-12(p70)、IL-13、IL-15、IL-17、etotaxin、G-CSF、IFN-γ、IP-10、MCP-1、PDGF-BB、MIP-1β、RANTES和TN F-α;轻症组血清中21种细胞因子表达水平较对照组显著升高(P<0.02).GM-CSF在重症组和轻症组表达水平均较对照组明显降低(P<0.02).等级相关分析显示12种细胞因子表达水平与病情严重程度呈中度正相关(IL-1 ra、IL-7、IL-9、IL-10、IL-13、IL-17、etotaxin、IP-10、PDGF-BB、MIP-1β、RANTES和TNF-α),GM-CSF与病情程度呈中度负相关.结论 济南市EV71感染手足口病患者血清中多种细胞因子表达水平在病情发展过程中发生显著变化,并与病情严重程度密切相关.液相芯片为手足口病细胞因子研究提供了一种高效平台.

  • 肿瘤标志物的联合检测在肺癌诊断中的价值

    作者:王刚;张茜;张延京

    目的 探讨血清肿瘤标志物神经特异性烯醇化酶(NSE)、细胞角蛋白21-1片段(CYFRA21-1)、糖类抗原125 (CA125)、癌胚抗原(CEA)、肿瘤相关物质(TSGF)和鳞状细胞抗原(SCC)在肺癌诊断中的价值.方法 采用免疫化学发光法分别检测76例肺癌患者、50例肺良性疾病患者和48例健康对照组血清中的6种肿瘤标志物含量.结果 肺癌患者6种标志物血清浓度明显高于健康对照组(P<0.05);除CA125外,其他5种含量均明显高于肺良性疾患组(P<0.05).SCC和CYFRA21-1浓度在肺鳞癌组中明显高于其他两个组肺癌(P<0.05和P<0.01),CA125和CEA浓度在肺腺癌组中明显高于其他两组肺癌(均P<0.01),NSE浓度在小细胞肺癌组中高于其他两组肺癌(P<0.05),TSGF在三组肺癌中浓度无明显差异(P>0.05).联合检测可明显提高肺癌诊断的敏感性(P<0.01).结论 联合检测肿瘤标志物在肺癌诊断及肺癌病理分型中具有较高的临床应用价值,优于单项检测.

    关键词: 肺癌 肿瘤标志物
  • 河南省四地区一线艾滋病抗病毒治疗失败的耐药分析

    作者:刘佳;杨文杰;闫江舟;刘春华;薛秀娟;孙国清;田随安;孙定勇;朱谦

    目的 了解河南省重点地区艾滋病一线抗病毒治疗失败人群的耐药情况.方法 对河南省四个重点地区(商丘、开封、周口和驻马店)2010年6月-2011年11月间病毒载量>1 000拷贝/ml且治疗>一年以上的成年患者进行基因型耐药检测,分析耐药发生情况及其影响因素.结果 本研究对2 529例一线抗病毒治疗失败的艾滋病患者进行了分析,其中感染途径为采血浆/输血的患者占92.41%.治疗时间和CD4+T淋巴细胞与耐药的发生有关.63.35%的患者有耐药的发生,非核苷类逆转录酶抑制剂(NNRTI)、核苷类逆转录酶抑制剂(NRTI)和蛋白酶抑制剂(PI)的耐药发生率分别为60.02%、48.95%和1.46%.患者对依非韦伦(EFV)和奈韦拉平(NVP)的耐药发生率均为60.50%,对拉米夫定(3TC)、齐多夫定(AZT)、司坦夫定(D4T)、去羟肌苷(DDI)和替诺福韦(TDF)的耐药发生率分别为:38.87%、35.31%、36.10%、35.03%和27.52%.结论 既往采血浆途径感染的患者仍然是河南省艾滋病一线抗病毒治疗病毒学失败患者的重点人群,及时的病毒学监测和有效的方案调整以及更多治疗方案的提供是必须的.

  • 轮状病毒疫苗株VP8*核心区蛋白的表达和纯化

    作者:孙晓曼;郭妮君;李丹地;段招军

    目的 为了研究轮状病毒疫苗株VP8*蛋白的功能和结构特征,利用原核表达系统纯化得到VP8 *核心区蛋白(VP8* core,64-223位氨基酸).方法 从口服疫苗中提取兰州疫苗株LLR病毒核酸,RT-PCR得到目的片段,克隆到pET30a载体中构建重组质粒.根据已合成的Rotateq和Rotarix P[8] VP8*全长基因,PCR得到VP8*核心区片段,克隆到pET30a载体构建重组质粒.重组质粒转化大肠埃希菌BL21(DE3)进行蛋白表达.利用HistrapHP和superdex200纯化柱,通过亲和层析和分子筛层析纯化得到目的蛋白.结果 VP8*核心区蛋白以可溶形式表达,并通过纯化得到较纯的VP8* core蛋白,聚丙烯酰氨凝胶电泳(SDS-PAGE)显示相对分子质量约为20 kDa.结论 成功构建了pET30a-VP8* core重组质粒,得到轮状病毒各疫苗株VP8* core蛋白,为研究疫苗株受体结合特征以及疫苗评价提供了基础和参考.

  • 自制室内质控品在BK病毒DNA定量检测中的应用

    作者:应葳;戎国栋;赵鸿;张洁心;黄珮珺;王芳;徐婷;陈丹

    目的 探讨自制尿液和血清室内质控品用于BKV DNA定量检测室内质量控制的可行性.方法 收集含有较高浓度BKV DNA(104 ~ 106拷贝/ml)的临床尿液和血清标本,分别充分混匀并分装数管,于-70℃冻存.荧光定量PCR测定BKV DNA含量,连续检测20批次.采用“即刻法”、“学生化残差法”分析检测结果,并绘制Levey-Jennings质控图,进行室内质控动态监测.结果 “即刻法”分析BKV DNA尿液和血清质控品,每批次检测值的SI上限和SI下限均在控;“学生化残差法”分析BKV尿液和血清质控品,每批次均无离群值.Levey-Jennings质控图显示BKV尿液质控品检测结果,除第四批次外均在警戒线(x)±2S内((x)=6.06,S=0.33,CV=5.45%),血清质控品每批次检测结果均在警戒线(x)±2S内((x) =4.35,S=0.36,CV=8.38%).结论 BKV尿液和血清室内质控品均匀稳定,制备简单,单次制备量大,适用于BKV DNA荧光定量PCR检测的室内质量控制.

  • 一种快检试剂对不同基因型诺如病毒的检测评价

    作者:高志勇;严寒秋;刘白薇;霍达;杜轶威;王全意

    目的 评价一种快检试剂对不同基因型诺如病毒的检测效果.方法 收集2011年4月到2015年5月诺如病毒核酸阳性的腹泻患者粪便标本101份,用荧光定量RT-PCR检测GⅠ/GⅡ组诺如病毒核酸.用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)扩增衣壳蛋白区基因,测序、进化分析确定基因型.以荧光定量RT-PCR检测和基因型分型结果为参照,对德国拜发公司免疫层析法快速检测试剂(RIDA(R)QUICK Norovirus)进行评价.结果 101份标本中,荧光定量RT-PCR检测出8份GⅠ,93份GⅡ.RIDA(R)QUICK检出1份GⅠ,57份GⅡ,符合率57.4%.RIDA(R)QUICK可检出GⅠ.9、GⅡ.3、GⅡ.4、GⅡ.6、GⅡ7、GⅡ.13、GⅡ.17、GⅡ.21和GⅡ.N,不能检出GⅠ.2、GⅠ.6、GⅠ.N和GⅡ.2.RIDA(R)QUICK对GⅡ.4型诺如病毒的检出率较高(77.8%,28/36),但对新的GⅡ.17变异株检出率较低(38.1%,8/21).RIDA(R)QUICK阳性的条带深浅度与荧光定量RT-PCR平均Ct值存在相关性(rs=0.498).结论 RIDA(R) QUICK能检出GⅡ组诺如病毒的常见基因型,但对新出现的GⅡ.17变异株检出效果较差.

  • 2010-2014年度国家自然科学基金资助艾滋病领域基础研究分析

    作者:张昕;李小溪;薛丽香;赵敏;陈威巍;张政;王福生

    目的 分析国家自然科学基金在艾滋病领域基础研究的资助现况,并对其发展趋势提出思考.方法 统计2010-2014年度国家自然科学基金在艾滋病领域的申请及资助情况,分析项目的细分领域、申请人及申请单位情况、资助金额及其变化趋势.结果 艾滋病领域年均资助80项,资助率20.47%,涉及交叉学科多,大项目比例偏低,综合型大学在该领域投入不够.结论 国家自然科学基金的长期稳定投入促进了艾滋病领域的基础研究,尤其在在药物、流行病、数学模型等方面进步显著,国际交流密切,但整体机制研究不够深入、尚缺少理论与实践的重大突破.

  • 流感病毒经典重配中X-157母本株HA抗血清制备

    作者:唐静;辛丽;郭俊峰;舒跃龙

    目的 制备流感病毒经典重配过程中所需的X-157母本株血凝素蛋白(Hemagglutinin,HA)抗血清.方法 X-157株流感病毒灭活纯化后经菠萝蛋白酶消化HA蛋白,蔗糖连续密度梯度离心法纯化,SDS-PAGE法鉴定纯化HA蛋白,免疫兔子收集抗血清,血凝抑制试验法(Hemoglutination Inhibition assay,HI)测定抗血清效价,单向免疫扩散法(Single Radial Immunodiffusion,SIRD)鉴定HA抗血清纯度.结果 成功制备了高免疫原性X-157株HA蛋白,兔抗HA血清HI滴度可达2560,SIRD鉴定为高纯度HA抗血清.结论 制备了流感病毒经典重配中关键试剂,摸索成功整套技术方法,为我国自主研发季节性流感疫苗株奠定了基础.

  • 全世界首次报道塞卡病毒可以引起婴儿小头畸形

    作者:任晓杰;李元元;王桂琴;梁国栋

    2015年12月1日世界卫生组织(WHO)发布旅行警告,随后,Science和Lancet Infection杂志纷纷发文报道全世界首次发现蚊虫传播虫媒病毒,塞卡病毒(Zika Virus,ZIKA),感染可以引起婴儿神经系统疾病,并且该病毒可以通过性途径传播.目前,塞卡病毒感染已经在20余个国家流行并引发多个国家的输入性病例.塞卡病毒及塞卡病毒感染引起的疾病不仅是病毒学家面临的新的研究课题,也是全世界各国将要面对的重要公共卫生问题,本文就相关信息进行综述并对该病毒基础研究和相关公共卫生问题提出意见和建议[1-3].

    关键词:
  • 西尼罗病毒的研究进展

    作者:苏祥;赵丽

    西尼罗病毒(West Nile virus,WNV)是一种嗜神经性虫媒病毒,属黄病毒科(Flaviviridae)、黄病毒属(Flavivirus),与乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)、圣路易斯脑炎病毒(St.Louis encephalitis virus,SLEV)、墨累山谷脑炎病毒(Murray Valley encephalitis virus,MVEV)、罗西奥病毒(Rocio virus)同属乙型脑炎血清群[1],WNV感染引起的急性传染病称为西尼罗热(West Nile fever,WNF)[2].WNV是1937年从乌干达西尼罗地区的一名发热女性患者的血清中分离出的[3],1999年传入美国.目前,WNF在世界范围内广泛流行,已成为全球严重的虫媒传染病之一.本研究总结了国内外WNV新研究结果,对WNV的生物学特性及WNF的流行现状进行综述.

    关键词:
  • 传染病双语病例库的教学效果问卷调查与分析

    作者:李威;程香普;李在村;郑素军;黄晓婕;张宏伟;张世斌;柳雅立;张月宁

    探索传染病学双语教学的方法,评价双语病例库教学效果,为进一步在该课程中全面开展和改进传染病双语病例库教学提供依据.本研究织教师编写传染病双语病例,在医学生的理论授课中和见习中使用,选取开展双语教学的七年制临床医学专业38名学生进行问卷调查,研究他们对双语病例库教学的看法,评价教学效果.在经济、政治全球一体化的快速步伐下,信息交流国际化的趋势已经形成[1].医学教育国际化也随之被提上我国的日程.

    关键词:
  • 病毒性肝炎教学的思考与变革

    作者:谢尧;李明慧;张璐;路遥;申戈;吴淑玲

    本研究对目前病毒性肝炎的教学现状进行了分析,对目前教学中存在的不足进行思考,并提出解决问题的方法,旨在提高病毒性肝炎教学质量,培养出符合现代医学发展的合格医学人才.在人类长期与病毒性肝炎做斗争的历史中,病毒性肝炎的防治已取得了巨大的成就.比如我国2006年乙肝流行病学数据表明,一般人群乙肝病毒表面抗原携带率已由1992年的9.75%降至2006年的7.18%,5岁以下儿童的乙肝病毒表面抗原携带率已降低到0.96%,提前实现了世界卫生组织提出的乙肝控制目标,从而使我国由一个乙肝的“高流行地区”降低到了“中流行地区”水平.

    关键词:
中华实验和临床病毒学分期目录
期数
2018 01 02 03 04 05 06
2017 01 02 03 04 05 06
2016 01 02 03 04 05 06
2015 01 02 03 04 05 06
2014 01 02 03 04 05 06
2013 01 02 03 04 05 06
2012 01 02 03 04 05 06
2011 01 02 03 04 05 06
2010 01 02 03 04 05 06
2009 01 02 03 04 05 06
2008 01 02 03 04 05 06
2007 01 02 03 04
2006 01 02 03 04
2005 01 02 03 04
2004 01 02 03 04
2003 01 02 03 04
2002 01 02 03 04
2001 01 02 03 04
2000 01 02 03 04
1999 01 02 03 04
1998 01 02 03

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