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中华实验和临床病毒学

中华实验和临床病毒学杂志

Chinese Journal of Experimental and Clinical Virology 중화실험화림상병독학잡지

统计源期刊
  • 主管单位: 实验和临床病毒学杂志
  • 主办单位: 中国科学技术协会
  • 影响因子: 0.71
  • 审稿时间: 1-3个月
  • 国际刊号: 11-2866/R
  • 国内刊号: 段树学
  • 发行周期: 双月刊
  • 邮发: cjecv@cmaph.org
  • 曾用名: 实验和临床病毒学杂志
  • 创刊时间: 1987
  • 语言: 英文
  • 编辑单位: 中华医学会
  • 出版地区: 北京
  • 主编: 中华实验和临床病毒学杂志编辑委员会
  • 类 别: 基础医学
期刊荣誉:
  • 云南省EV71的分离鉴定和生物学特性分析

    作者:赵世文;尹卫东;寸建萍;高强;尹洁;刘国军;陆林;徐闻

    目的 对云南省采集的8份EV71标本进行分离鉴定,进行生物学特征分析.方法 采集HFMD息儿的标本,然后使用RT-PCR法进行鉴定,对鉴定为阳性的标本进行病毒分离,分离得到的病毒株在Vero细胞中培养,并进行VP1基因测序.用病毒免疫小鼠,免疫后血清进行中和试验和交叉保护试验.结果 8份标本均为EV71,并均在Vero细胞中都表现出细胞病变;部分免疫血清效价可高达1:10 000以上.结论 8株病毒在Vero细胞中有良好的适应性;免疫血清对A和C4基因型保护效果明显.

  • 重型乙型肝炎患者T细胞受体BV CDR3家族表达水平分析

    作者:施文娟;万红;周渐;魏丽;杨正茂;王兆勋

    目的 探讨重型乙型肝炎(FHB)患者外周血T淋巴细胞受体(TCR)β链V区(BV)互补决定区3(CDR3)基因各家族谱系的表达及其临床意义.方法 选择我院2010年10月至2012年3月收治的FHB患者(FHB组)28例及20例健康体检者(健康对照组),分别采集其外周血,肝素钠抗凝,分离单个核细胞,提取RNA并应用RT-PCR方法扩增TCR BV的CDR3区基因24个家族,并进行两组间扩增产物定量分析的比较.结果 FHB组ΔCt1,ΔCt12,ΔCt20含量较健康人群增多(P<0.05);ΔCt5、ΔCt7、ΔCt13、ΔCt14、ΔCt15、ΔCt22、ΔCt23含量较健康对照组下降(P<0.05).结论 FHB患者TCR BV CDR3区基因部分家族表达水平改变,提示T淋巴细胞免疫应答可能参与了FHB的发病过程.

    关键词: 肝炎 乙型 T淋巴细胞
  • 青海省2000-2011年麻疹病毒的分子流行病学研究

    作者:范丽霞;巴卓玛;赵生仓;易虎;姜双应;张燕;王慧玲;许文波

    目的 对青海省2000-2011年流行麻疹野病毒进行分子流行病学研究,为消除麻疹提供科学依据.方法 使用B95a细胞或Vero/SLAM细胞从2000-2011年青海省6个地市麻疹暴发和散发病例的咽拭子标本中分离的麻疹病毒,用RT-PCR方法扩增N基因羧基末端676个核苷酸片段,再对扩增产物进行核苷酸序列测定和分析,并与我国其他省份流行的麻疹病毒代表株基于N基因羧基末端450个核苷酸片段构建基因亲缘性关系树.结果 青海省2000-2011年共分离到19株麻疹病毒,均为H1基因型中的Hla基因亚型.在亲缘性关系树中显示,2000-2005年间流行的麻疹毒株与2009-2011年间流行的麻疹毒株处在两个不同的簇中,提示19株麻疹病毒株至少属于2条病毒传播链,其中2000-2005年间流行的麻疹病毒之后未再监测到.结论 青海省2000-2011年间流行的麻疹野病毒以Hla为绝对优势基因亚型,未监测到其他基因型病毒.青海省麻疹病毒不是独立进化的,而是与我国流行的麻疹病毒在共同进化.

  • 乙肝相关性肝衰竭患者外周血中IL-32表达水平及意义

    作者:庄桂龙;李国航;瞿志军;邝建玉

    目的 检测乙肝相关性肝衰竭患者血清中IL-32表达,探讨IL-32水平与丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、总胆红素(TBIL)及HBV DNA载量的相关性.方法 TRIzol提取55例乙肝相关性肝衰竭患者(重肝组)及20例健康人(对照组)外周血中淋巴细胞总RNA,real-time PCR检测IL-32 mRNA表达水平;用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清中IL-32蛋白表达,并与患者ALT、AST、TBil、HBV DNA两组之间的差异有统计学意义(P<0.05).结果 IL-32水平与ALT、AST、TBil呈正相关(P<0.05),与HBV DNA载量无相关性(P>0.05).结论 乙肝相关性肝衰竭患者血清中IL-32表达增高,与炎症程度相关,可能参与乙肝相关性肝衰竭的发病.

  • 肝细胞脂肪变对血清糖蛋白GP73水平的影响

    作者:魏红山;康艳芳;郝晓花;刘佳;李红敏;刘爱霞;任慧;黄玉波;李伯安

    目的 观察不同病因肝细胞脂肪变对肝病患者血清GP73水平的影响.方法 以100例健康体检者为对照,观察178例肝穿刺病理学检查发现肝脂肪变性患者的血清GP73水平差异.结果 与健康对照人群(35.61±12.22 ng/ml)相比,不同病因导致的脂肪肝患者(70.62±60.60 ng/ml)血清GP73显著升高.尽管酒精性脂肪肝(81.86±47.82 ng/ml)和急性肝损伤患者合并肝细胞脂肪变(82.77±77.73 ng/ml)血清GP73水平略高于慢性乙型肝炎患者(63.84±50.62 ng/ml)和非酒精脂肪肝患者(65.75±62.20 ng/ml),但不同病因导致的肝细胞脂肪变并未显示血清GP73水平差异有统计学意义.更为重要的是,68例F≥1.0(71.46 ±66.48 ng/ml),75例F≥2.0(69.58±62.31ng/ml),以及34例F3-F4的患者(71.65±43.89 ng/ml),血清GP73的水平差异无统计学意义(F=0.02,P=0.98).相反,显著性肝纤维化S≥2患者(91.04±82.37 ng/ml)其血清GP73水平显著高于纤维化轻微S <2(65.80±53.45 ng/ml)的患者(P =0.029).结论 肝细胞脂肪变导致血清GP73水平显著升高,但肝细胞脂肪变的程度似乎与血清GP73水平无关.

  • 2011-2012年中国发热伴血小板减少综合征监测分析

    作者:曲靖;张硕;李建东;李德新

    目的 分析2011-2012年中国发热伴血小板减少综合征(SFTS)的疫情概况、流行特征和趋势.方法 对2011-2012年我国SFTS病例资料及监测资料进行流行病学分析.结果 2011-2012年间我国共报告SFTS病例1229例,平均发病率为0.046/10万,累计死亡107例,病死率8.7%.全国共16个省、市、自治区有报告病例.每年5~7月为发病高峰.报告病例以55~70岁年龄组居多,占总病例数的44.2%,病死率8.5%,<30岁病例占总数1.63%,且无死亡病例.男女性别比为0.93:1.职业分布以农民为主(86.8%).结论 发热伴血小板减少综合征病例在我国分布广泛,尤其是在华中和华东地区,发病具有明显的季节性.应加强高发及可能发生疫情地区监测及出入境检疫.

  • 泛醌与Beclin-1及肝脏线粒体关系的相关性研究

    作者:谢放;张超;朱跃科;刘晖;刘雪梅;贾琳;王克菲;陈德喜;孟庆华

    目的 研究泛醌是否能通过调节自噬减轻慢加急肝衰竭大鼠肝损伤.方法 取空白对照、慢加急性肝衰竭模型组和慢加急性肝衰竭干预组(造模同时增加泛醌植物油每天注射10 mg/kg灌胃6周)SD大鼠各10只,光镜观察三组肝组织病理改变,电镜观察三组肝组织中线粒体超微结构,荧光定量PCR检测三组自噬基因Beclin-1 mRNA表达,Western Blot检测三组Beclin-1蛋白表达.结果 光镜下干预组肝细胞坏死面积约80%,模型组坏死面积约100%.电镜下模型组大部分线粒体内容物已经降解,而干预组多数线粒体尚存.荧光定量结果显示干预组Beclin-1表达水平较模型组显著升高(P<0.01).结论 泛醌可能通过促进自噬减轻慢加急性肝衰竭大鼠肝损伤.

  • 拉米夫定治疗失代偿乙型肝炎肝硬化的疗效与HBV基因型及细胞毒性T淋巴细胞的关系

    作者:王栋;顾锡炳;朱银芳;杨小娟;蒋祥虎;黄利华;邱源旺;吴杭源;俞萍

    目的 探讨拉米夫定治疗失代偿乙型肝炎肝硬化的疗效与乙型肝炎病毒(HBV)基因型及HBV特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)的关系.方法 80例失代偿乙型肝炎肝硬化患者(B基因型和C基因型各40例),HBV DNA阳性、HBeAg阳性、人白细胞抗原(HLA)-A2阳性,用拉米夫定100 mg/d治疗,观察1年后的疗效及其与HBV基因型、HBV特异性CTL的关系.结果 HBV DNA转阴:B基因型感染者40例(100%),C基因型感染者治疗至9、10个月时各有1例发生YMDD变异加阿德福韦酯治疗,其余38例中HBV DNA转阴26例(68.42%),HBV DNA转阴率C基因型感染者低于B基因型感染者,x2=14.91,P<0.01,HBeAg转阴:B基因型感染者18例(45%),多于C基因型感染者(7例,18.42%),x2=6.32,P<0.05,外周血HBV特异性CTL水平:治疗前,B基因型感染者(0.33±0.03)%,高于C基因型感染者[(0.11±0.02)%],t=8.12,P<0.001,治疗后1年:B基因型感染者0.44±0.04%,高于治疗前,t=4.01,P<0.001,也高于C基因型感染者治疗后1年[(0.23±0.03)%],=5.63,P<0.01,丙氨酸转氨酶(ALT)恢复正常:B基因型感染者38例(95%),多于C基因型感染者[(28例,73.68)%],x2=6.79,P<0.01.结论 拉米夫定治疗失代偿乙型肝炎肝硬化患者,C基因型感染者的疗效差于B基因型感染者,其机制可能与C基因型感染者的HBV特异性CTL水平低于B基因型感染者有关.

  • 口服培菲康散剂预防1~6岁婴幼儿腹泻的临床研究

    作者:刘晓玲;李孟磊;马文霞;夏胜利;许汴利

    目的 研究益生菌(培菲康散剂,BIFICO)对1~6岁婴幼儿腹泻发病的影响及预防作用.方法 490例要幼儿按年龄分层招募后被分为两组:试验组(n =247)和对照组(n=243).以随机、双盲、安慰剂对照为原则,给予合格的受试者口服临床研究专用培菲康散剂.受试者连续服用试验用药4天、随访观察21天为一个周期,共进5个周期.研究期内遵循“逢泻必检”原则,对受试儿童随访并采集腹泻婴幼患儿的粪便标本,进行病原学检测,评价预防效果.结果 共有480名完成全部实验.对照组和实验组分别有120人次和95人次发生腹泻,腹泻发生率分别为50.85%和38.93%,差异具有统计学意义(x2 =4.175,P=0.041).以观察周期分组后,第3周期对照组婴幼儿腹泻发病率显著高于实验组(x2 =4.415,P=0.036).从腹泻要幼儿粪便中共检出轮状病毒14株、诺如病毒3株、扎如病毒3株、腺病毒2株,另外检出沙门菌5株、细菌性痢疾4株.结论 口服培菲康散剂可降低1~6岁婴幼儿腹泻发病率,对腹泻具有一定的预防作用.

  • 不同肝脏病理炎症分级慢性乙型肝炎患者临床差异分析

    作者:肖灿辉;孙海霞;张卡;潘兴飞;黄飞飞;徐启桓

    目的 了解不同肝脏病理炎症分级的慢性乙型肝炎患者生化学和病毒学临床特征的差异.方法 回顾分析我院428例接受肝脏穿刺病理活检术的慢性乙型肝炎患者,肝功能、HBeAg和HBV DNA水平同时进行测定;根据肝脏炎症病理分级分为四组;利用SPSS16.0软件,统计分析不同肝脏炎症病理分级的患者的生化学、病理学和病毒学等指标.结果 平均年龄和性别构成比在四组患者中无差异;外周血ALT、AST、TBil、ALB和PTA均存在差异,均有统计学意义(P<0.05).G3组患者ALT水平高,明显高于G00-1组(P =0.001),其余各组之间差异均无统计学意义(P>0.05);G3组、G4组患者AST水平明显高于G0-1组、G2组(P<0.05),但是G3与G4、G0-1组和G2之间差异无统计学意义(P>0.05).G4组TBil水平明显高于G0-1、G2和G3三组(P<0.05),而三组之间比较差异无统计学意义(P>0.05).G2与G3组患者ALB水平差异无统计学意义(P>0.05),其余各组之间比较差异均有统计学意义(P<0.05).四组患者的PTA值组间比较差异均有统计学意义(P<0.05).四组患者的HBV DNA水平、肝脏组织的HBsAg和HBcAg表达水平、四组患者血清中HBeAg阳性和阴性患者所占比率无差异(P>0.05).结论 ALT、AST、TBiL、ALB和PTA在不同肝脏病理分级的慢性乙型肝炎患者存在差异;均在一定程度上可反映肝脏的炎症分级;ALT和PTA作为反映G0-1、G2和G3肝脏炎症分级的指标;ASL、TBil、ALB、PTA来反映G3与G4患者肝脏炎症的指标.HBVDNA水平和HBeAg状态与肝脏炎症分级无关.

  • 乙肝病毒大蛋白在乙肝患者诊疗中的临床意义

    作者:谢服役;孙琦;陈巍

    目的 通过检测血清中HBV-LP、HBV DNA、Pre-S1和HBV血清标志物,探讨HBV-LP对于反映HBV病毒复制和抗病毒疗效评估的意义.方法 采用ELISA法对220份血清标本进行HBV-LP、Pre-S1和HBV血清标志物检测,采用荧光PCR方法检测血清中HBV DNA含量.采用阿德福韦酯进行抗病毒治疗,在12周、24周、36周和48周进行各项血清学指标监测.结果 在慢性乙肝患者中,HBV-LP检出率与HBV DNA检出率差异无统计学意义,且显著高于Pre-S1和HBeAg检出率,在HBeAg阴性患者中HBV-LP与HBV DNA检出率相仿,在抗病毒治疗过程中,HBV-LP与HBV DNA降低趋势一致.结论 HBV-LP能够反映出HBV复制情况,是良好的慢性乙肝诊断和疗效评估指标.

  • 高危型人乳头瘤病毒检测结合薄层细胞学检查在宫颈癌筛查中的价值评估

    作者:孙笑非;顾依群;王爱春;王军;谢俊玲

    目的 分析高危型人类乳头瘤病毒(high risk human papilloma virus,HR-HPV)检测、液基薄层细胞学(thinprep cytologic test,TCT)检测与组织病理学诊断结果的符合情况.探讨二者联合检测对宫颈癌及癌前病变的诊断价值及意义.方法 回顾性分析2003年1月至2012年6月间就诊于北京市海淀区妇幼保健院TCT阳性诊断的患者,根据知情同意及自愿的原则,筛选其中HR-HPV检测结果完整,并同时于阴道镜下行活体组织病理检查的患者共3197例,比较分析HR-HPV检测、TCT与组织病理学诊断结果.结果 入选的3197例病例中,组织病理学结果为慢性炎症占58.6%;湿疣或CIN Ⅰ级占26.1%;CINⅡ-Ⅲ级占14.1%;浸润性癌1.2%;TCT诊断阳性病例与组织病理学结果符合率分别为:ASC-US 21.2%,ASC-H28.6%,LSIL39.6%,HSIL56.2%,宫颈癌72.4%;TCT诊断阳性的病例中,HR-HPV检测与组织病理学诊断结果相比,HR-HPV感染率随病理诊断级别的升高而显著升高(x趋势=292.354,P=0.000<0.05);随着TCT诊断级别的升高,HR-HPV阳性率显著上升(x2趋势=144.113,P=0.000 <0.05).结论 TCT能有效降低宫颈癌发病率,但由于低度宫颈病变的灵敏度较低,会造成一部分漏诊情况的发生.HR-HPV检测与TCT联合能够提高宫颈病变的检出率,是一种较为理想的宫颈癌筛查方法.

  • 恩替卡韦治疗HBeAg阴性慢加急性肝衰竭时机探讨

    作者:麦丽;严颖;张绍全;柯伟民;曹红

    目的 探索慢加急性肝衰竭严重性评分系统不同评分范围的HBeAg阴性慢加急性肝衰竭在内科综合治疗基础上加用恩替卡韦治疗时机与疗效的关系.方法 观察并比较108例不同肝衰竭严重性评分范围HBeAg阴性慢加急性肝衰竭加用恩替卡韦抗HBV开始治疗时、恢复期或临终前的肝衰竭严重性指标、HBV DNA载量、疗程和死亡率.结果 肝衰竭严重性评分高评分组(≥12分)19例,治疗前后肝衰竭严重性评分及HBV DNA载量差异均无统计学意义,死亡率为18/19.中上评分组(8~11分)30例,治疗前后肝衰竭严重性评分差异无统计学意义,治疗前后HBV DNA载量差异有统计学意义,死亡率66.67%(20/30).中下评分组(5~7分)36例,治疗前后肝衰竭严重性评分差异无统计学意义,治疗前后HBV DNA载量差异有统计学意义,死亡率30.56%(11/36).低评分组(≤4分)23例,治疗前肝衰竭严重性评分较缓解期肝衰竭严重性评分明显下降,差异有统计学意义,治疗前后HBV DNA载量差异有统计学意义,死亡率8.70% (2/23).结论 新颖的肝衰竭评分系统能较清晰地分辨恩替卡韦治疗HBeAg阴性慢加急性肝衰竭时机与疗效的关系.

  • 2002-2011年北京地坛医院急性肝炎住院患者病因研究

    作者:申戈;张璐;张艳丽;胡蕾萍;李明慧;路遥;李杏红;邱国华;庄立伟

    目的 探讨2002-2011年北京地坛医院收治的急性肝炎住院患者的病因.方法 统计2002-2011年地坛医院所收治的急性肝炎患者,总结急性肝炎病因变化的特点,并初步分析形成原因.结果 2002-2011年北京地坛医院收治急性肝炎6235名,年龄12~78岁.男性4309人,女性1926人.急性肝炎中,急性病毒性肝炎占70.44%~85.07%,CMV、EBV、药物性肝损害<5%,急性丁型及急性丙型肝炎<1.10%.2002-2011年北京地坛医院急性肝炎发病人数及构成发生明显变化.急性肝炎占总住院患者的比例由20.38%降至2.05%,比10年前低10倍.l0年间急性甲型肝炎病毒发病人数递减趋势明显,下降99.11%,急性乙型肝炎发病人数下降45.07%,急性戊型肝炎发病人数下降62.28%.急性肝炎构成比也在发生明显变化.急性甲型肝炎比例由2002年的31.31%,降至2011年1%以下,比10年前约低30倍.急性乙型肝炎比例由2002年26.47%上升至2011年45.88%,10年间上升约2倍.急性戊型肝炎由2002年26.73%,上升至32.05%,10年间上升1.20倍左右.结论 2002-2011年北京地坛医院收治急性肝炎占总住院患者比例由20.38%降至2.05%.急性肝炎的构成比发生变化.

  • 风疹病毒E1-374糖蛋白生物活性检测及其初步应用

    作者:李振梅;温红玲;林彬;孙成玺;褚福禄;袁晓晶;宋艳艳;许洪芝;王志玉

    目的 分泌表达风疹病毒E1-374糖蛋白并检测其免疫原性.方法 将E1-374蛋白的cDNA插入表达载体pGAPZαA中构建出表达质粒pGAPZαA-E1-374,经BlnⅠ酶线性化后通过电转的方法导入毕赤酵母菌,博来霉素筛选阳性菌落.间接免疫荧光和Western Blot检测E1-374蛋白的表达及免疫反应性.免疫小鼠后应用间接ELISA检测风疹病毒IgG抗体.结果 SDS-PAGE和Western Blot显示E1-374蛋白的相对分子质量为46.89×103.ELISA法检测免疫小鼠的抗血清为阳性.建立的间接ELISA方法的佳工作条件是抗原包被浓度为5.5μg/ml,血清佳稀释度为1:100,板内变异系数值为0.36%~12.45%.结论 E1-374蛋白能够引起小鼠体液免疫应答,是风疹亚单位疫苗的重要候选成分,并可应用于风疹病毒IgG抗体的检测.

  • 乙型肝炎病毒外膜大蛋白检测方法的建立

    作者:赵静;马洪滨;侯俊;郭静霞;徐军;宋永继;陈霖;刘爱霞;刘佳

    目的 建立人血清中乙型肝炎病毒外膜大蛋白(HBV-LP)的酶联免疫吸附试验(ELISA)检测方法.方法 辣根过氧化物酶标记HBV-LP单抗,优化各类反应液的工作浓度和各种反应条件,建立双抗体夹心的ELISA检测方法;同时评价所建立方法的灵敏度、特异性、稳定性等性能指标.结果 所建立方法的灵敏度为5 ng/ml,批内、批间变异均小于10%.在4℃和37℃条件下分别进行了3、5、7d的稳定性考察,线性相关系数均>0.98,标准偏差<10%.结论 成功建立了血清中HBV-LP的检测方法,该方法性能能够满足临床检测的需求.

  • 两种酶联免疫法检测丙型肝炎病毒抗体结果分析

    作者:赵龙友;纪勇平;王德镔;庄杰;周斌

    目的 比较双抗体夹心酶联免疫法和间接酶联免疫法检测丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV)时的灵敏度和特异性的差异.方法 选择一种夹心法试剂检测51份一种或两种间接法试剂阳性献血标本,并采用免疫印迹和核酸检测作为确证试剂.结果 与确证试剂相比,两种间接法试剂和一种夹心法试剂的假阳率分别为40.9%,59.1%和2.2%,阳性检出率均为100%,但夹心法的分析灵敏度比间接法高2~6倍.结论 夹心法试剂在灵敏度和特异性上都显著优于间接法试剂.

  • 国产试剂化学发光法检测梅毒螺旋体抗体的临床评价

    作者:蒋郁青;谢志贤;方雯丹;刘添翼

    目的 对国产化学发光法试剂盒检测梅毒螺旋体抗体的检测进行临床评价.方法 收集来自卫生部北京医院的血清样品共1200例,包括经临床确诊的梅毒患者血清300例,正常人血清900例.对标本分别用国产化学发光法试剂盒和国产酶联免疫吸附实验试剂盒同时测定梅毒螺旋体抗体,对结果进行统计学处理和分析,计算两种方法的特异性、灵敏度和临床符合率.结果 对临床确诊的血清样品检测结果表明,该试剂盒检测梅毒螺旋体抗体敏感度为99.3%,特异度为99.9%,阳性结果预测值为99.7%,阴性结果预测值100%.与ELISA法比较,两者阳性符合率98.7%,阴性符合率99.8%.总符合(有效)率为99.5%.结论 国产CLIA试剂盒与ELISA试剂盒的临床符合率达到临床检测要求,可用于临床检测.

  • 高尔基体蛋白73原核表达系统的构建及单克隆抗体的制备

    作者:郭静霞;魏红山;宋永继;赵静;刘爱霞;刘佳;陈霖;徐军;李伯安

    目的 克隆、表达高尔基体蛋白73(GP73),并制备单克隆抗体.方法 用逆转录聚合酶链反应法从人肝癌细胞系HepG2细胞中扩增GP73编码序列,将产物与pQE31载体连接,转化人大肠埃希菌BL21,诱导表达后通过His标签进行纯化,用纯化后的蛋白免疫BALB/c小鼠,采用常规的细胞融合技术制备单克隆抗体,并对其进行鉴定.结果 重组载体经序列分析与报道序列同源性100%,并获得了重组蛋白.筛选出5株能稳定分泌抗GP73的单克隆抗体杂交瘤细胞株,免疫球蛋白类型有2株为IgG1类.Western Blot印迹显示这些单抗能特异结合GP73蛋白.结论 成功构建了人高尔基体蛋白73原核表达体系,并获得了单克隆抗体.

  • 微孔板化学发光酶免疫分析法定量检测基质金属蛋白酶抑制剂-Ⅰ的方法研究

    作者:侯俊;张健;刘佳;赵静;郭静霞;陈霖;徐军;刘爱霞;宋永继

    目的 建立定量检测人血清中金属蛋白酶抑制剂-Ⅰ (TIMPⅠ)的微孔板化学发光酶免疫分析方法.方法 以辣根过氧化物酶标记TIMP Ⅰ单抗,以过氧化氢(H202)-鲁米诺(luminol)化学发光体系作为检测体系,采用双抗体夹心反应模式,优化筛选温育条件、抗体包被条件、酶标记物稀释度和发光反应时间等指标.同时进行了回收实验,热稳定性实验,并随机选取60例肝纤维化患者血清与进口试剂进行比对实验.结果 所建立方法的线性范围为0.2 ~ 12 ng/ml,相关系数0.996,检出限为0.12 ng/ml,批内、批间变异均小于10%.检测TIMP Ⅰ的临床高、中、低值血清回收率为分别为100.6%、96.5%和106.5%;在4℃和37℃条件下分别进行了3、5、7d的稳定性考察,线性相关系数均>0.98,标准偏差<6%;比对实验分析证明2种方法相关性具有统计学意义.结论 成功建立定量TIMP Ⅰ微孔板化学发光酶免疫分析方法,该方法具有较高的准确性、灵敏度及良好的重复性,并与进口试剂检测结果一致.

  • 高效表达乙型肝炎病毒表面抗原的CHO细胞株的建立

    作者:伊瑶;郭敏卓;田瑞光;苏秋东;卢学新;邱丰;周文亭;贾志远;毕胜利

    目的 探索乙型肝炎病毒表面抗原(S)基因在CHO无血清细胞培养系统中的高效表达.方法 构建包含乙肝病毒S基因的质粒,转染CHO细胞,经MTX筛选后对培养液上清中的表达产物进行血清学检测以及形态学的观察.结果 获得了能高效稳定表达HBsAg的CHO细胞株,电镜下可观测到小球型和管型颗粒,ELISA检测表达产物滴度达到1:5000.结论 成功构建高效表达乙型肝炎病毒S蛋白的CHO无血清培养细胞株,表达的HBsAg具有良好的抗原活性.

  • 四价流感疫苗预防季节性流感的研究

    作者:吴建华;赵越

    本综述介绍近期国外国内季节性流感流行情况,说明为什么需要在三价疫苗中增加另一个谱系B型病毒抗原组成四价流感疫苗,重点是在近几年流感流行季节中有关B型流感病毒和B型病毒二个谱系分布和流行的情况,以及四价流感疫苗研发的临床进展及注册批准的新产品.1 近年国内外监测的季节性流感流行病学情况在每个流行季节中除外二种A型流感病毒外,B型流感病毒占多大比例呢?根据来自美国CDC数据,从2001一2002年到2009-2010年10个流行季节,由参与监测的实验室上报的流感阳性标本中,B型流感占0.1% ~ 44%,平均为24%.欧洲监测数据来自相同流行季节,B型流感占1%~60%,平均为23%.

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  • 慢性丙型病毒性肝炎抗病毒治疗研究进展

    作者:穆彩琴;胡蕾苹;张璐;申戈;李明慧;谢尧

    本研究对慢性丙型肝炎抗病毒治疗近期研究进展进行总结,希望为临床丙型病毒性肝炎抗病毒治疗提供更多科学依据.1 标准化治疗方案慢性丙型肝炎的抗病毒治疗经过了单用干扰素和普通干扰素联合利巴韦林抗病毒的两个阶段,也经历过很多临床失败,单用普通干扰素的持续病毒学应答(SVR)为10%~30%,单用PEG-IFNα2a的SVR率也不超过40%,目前以聚乙二醇干扰素联合利巴韦林为标准治疗方案(Standard-of-care,SOC).尽管欧洲肝脏病协会推荐聚乙二醇干扰素联合利巴韦林和蛋白酶抑制剂的三联新标准用于治疗基因1型丙型肝炎,但因直接抗病毒药物尚未在国内上市,国内对DAAs的研究尚处于临床试验阶段,在应用于临床之前,我国仍以二联治疗的标准方案为主.

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  • 高校大学生艾滋病相关高危行为及健康教育现状

    作者:武薇;吴尊友

    处于性活跃期的青少年是艾滋病病毒(HIV)感染的主要受害人群.据世界卫生组织2012年11月发布的全球艾滋病疫情统计数据,截至2011年底,全球存活艾滋病病毒感染者和艾滋病患者3400万人,其中新增感染者250万人,170万人死于与艾滋病相关的疾病[1].在新增加的HIV感染者中,15~24岁的青少年约占42%[2].我国自1985年发现首个病例以来,艾滋病流行在主要传播方式和受感染人群方面都发生了很大的变化,从流行早期的以经血传播为主、以静脉吸毒者和既往供血员为主要受害人群,逐渐演变成目前的以性途径传播为主、以异性多性伴和男男性行为人群为主要受害人群.

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  • 环介导等温扩增技术研究进展及其在病原检测中的应用

    作者:聂凯;滕智平;曾毅;马学军

    环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)是日本学者Notomi[1]于2000年建立的一种新型的核酸扩增技术.近年来该技术在不断的改进和完善过程中被广泛应用于各种病原检测,本研究就LAMP技术进展和病原检测应用这两方面研究进展进行综述如下.1 LAMP技术的进展1.1检测反应的加速 提高检测反应的速度,缩短病原检测用时对于疾病的快速诊断和对症治疗具有重要意义.

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  • 小鼠Brg1 shRNA慢病毒载体构建及其在骨髓间充质干细胞中的沉默效应

    作者:董学君;孙荷;张帆;吕娟;钱颖;吴云路

    本研究拟构建慢病毒干扰载体高效下调BM-MSCs中Brg1蛋白水平,为进一步研究其在肝细胞分化中的功能奠定基础.1 材料与方法1.1 材料 限制性内切酶XhoI、HpaI、Xba I和Nhe Ⅰ购于加拿大Fermentas公司;兔抗Brg1和鼠抗β-actin抗体购于英国Abcam公司;BM-MSCs(P3-P6)由本实验室分离纯化得到;293T细胞和DH-5α由本实验室保存;慢病毒载体PLL3.7及混合包装质粒购自上海比昂生物医药科技有限公司.

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中华实验和临床病毒学分期目录
期数
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2017 01 02 03 04 05 06
2016 01 02 03 04 05 06
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2011 01 02 03 04 05 06
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2007 01 02 03 04
2006 01 02 03 04
2005 01 02 03 04
2004 01 02 03 04
2003 01 02 03 04
2002 01 02 03 04
2001 01 02 03 04
2000 01 02 03 04
1999 01 02 03 04
1998 01 02 03

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