中华实验和临床病毒学杂志
Chinese Journal of Experimental and Clinical Virology 중화실험화림상병독학잡지
- 主管单位： 实验和临床病毒学杂志
- 主办单位： 中国科学技术协会
- 影响因子： 0.71
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 11-2866/R
- 国内刊号： 段树学
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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重组腺病毒介导的BCL-Xl基因过表达治疗急性肝衰竭大鼠的研究
目的 明确肝细胞凋亡与急性大鼠肝衰竭模型肝组织损伤程度的关系;明确BCL-Xl过表达对急性肝衰竭大鼠肝脏的治疗保护作用.方法 将60只Wistar大鼠随机分为正常对照组、模型组、处理组三组.正常对照组及模型组给予门静脉注射生理盐水,处理组予门静脉注射重组BCL-Xl腺病毒.预处理7 d后模型组及处理组予D-氨基半乳糖+脂多糖建立肝衰竭模型,观察各组大鼠的BCL-Xl蛋白的表达、ALT、AST水平、肝细胞凋亡率及死亡率.结果 BCL-Xl基因在处理组的表达高于在模型组中的表达;建立大鼠肝衰竭后6 h,处理组的血清ALT、AsT水平低于模型组(P<0.05).处理组的肝细胞凋亡率低于模型组(P<0.05).处理组的大鼠死亡率低于模型组(P<0.05).结论 在急性肝衰竭大鼠中,肝细胞的凋亡率与大鼠的死亡率呈正相关;BCL-Xl在肝组织中的过表达能减少急性肝衰竭模型大鼠的肝细胞凋亡率,降低急性肝衰竭大鼠的死亡率.
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登革2型病毒ZS01/01株E蛋白在真核细胞中的分泌表达研究
目的 对登革2型病毒(DENV-2)ZS01/01株E蛋白在哺乳动物细胞及昆虫细胞中的分泌表达进行研究.方法 RT-PCR扩增DENV-2 prM/E基因,通过融合PCR在prM基因前添加来自乙型脑炎病毒的信号肽序列,并将E基因羧基末端20%区域缺失或替换为乙型脑炎病毒SA14-14-2株E基因相应序列,将上述基因元件分别克隆入哺乳动物细胞表达载体pcDNA5/FRT及昆虫细胞表达载体pAcUW51-M中,将重组质粒转染293T细胞或S19细胞,利用间接免疫荧光(Immunofluoreseence assay,IFA)及Western Blot检测E蛋白的表达与分泌.结果 各重组质粒分别转染293T细胞或Sf9细胞后,E蛋白在细胞内均有效表达,而仅有携带乙脑信号肽且缺失或替换E基因羧基末端20%区域的重组质粒转染293T细胞后,上清中可检测到明显的E蛋白分泌.结论 信号肽及E基因羧基末端20%区域对登革病毒E蛋白的分泌至关重要,宿主细胞对其亦有一定影响.
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季节性流感裂解疫苗在小鼠中半数有效剂量ED50a的测定
目的 探讨季节性流感疫苗在小鼠中的免疫原性及其使50%小鼠血凝抑制抗体滴度(HI)达到40的血凝素(HA)有效剂量(ED50a).方法 以我国2008-2009年度季节性流感裂解疫苗为模式,将该疫苗中针对甲型流感病毒H1N1与H3N2两种组分按照HA不同剂量免疫小鼠,通过比较1针免疫与2针免疫所产生的HI抗体强度探讨季节性流感疫苗在小鼠中的免疫原性,确定疫苗免疫程序;此后,观察两种疫苗组分免疫小鼠后的HI抗体动力学,确定HI抗体产生的高峰期;后,使用HA不同剂量免疫小鼠,在HI抗体高峰期测定使50%小鼠HI抗体滴度达到40的HA有效剂量(ED50a).结果 季节性流感疫苗1针与2针免疫结果显示,两种疫苗组分1针免疫可在小鼠中产生HI抗体滴度范围为10～120,2针免疫可以使HI抗体滴度为1针免疫的10～100倍;HI抗体动力学研究表明,两种疫苗组分1针免疫后第28～35天为HI抗体产生的高峰期;该高峰期的ED50a测定结果表明,两种疫苗组分使50%小鼠HI抗体滴度达到40的HA有效剂量(ED50a)均为1.5μg.结论 季节性流感疫苗在小鼠中具有良好的免疫原性,1针免疫后第28～35天为抗体产生的高峰期,使50%小鼠HI达到40的HA有效剂量为1.5μg,为建立以季节性流感疫苗为参考的免疫保护评价体系奠定了基础.
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2009年徐州地区疑似肠道病毒感染病例病原学研究
目的 了解2009年徐州地区肠道病毒感染引起手足口病情况,为手足口病防控工作提供科学依据.方法 采用荧光RT-PCR方法对240例临床诊断为肠道病毒感染的手足口病例中的222例肛拭子和咽拭子标本同时进行EV和EV71、CA16特异性RNA检测,用ELA方法对其中的114例急性期血清标本进行EV71-IgM抗体检测.同时检测健康儿童254份咽拭子和258份血清标本以及密切接触者咽拭子54份标本.结果 240例疑似肠道病毒感染者,总EV感染率为72.50%(174/240),其中EV71感染率为57.92%(139/240),CoxA16感染率为9.17%(22/240),其他EV感染率为5.42%(13/240).240例疑似肠道病毒感染者中的222份肛拭子标本EV71-RNA阳性率为45.94%(102/222)、咽拭子EV71-RNA阳性率为25.68%(57/222),114份急性期血清中EV71-IgM抗体阳性率为86.84%(99/114).254份健康儿童咽拭子EV71-RNA阳性率为1.57%(4/254),未检出CoxA16-RNA;258份健康儿童血清标本EV71-IgM抗体阳性率是2.71%(7/258).密接(医护人员)咽拭子54份,EV-RNA检测均为阴性.结论 徐州地区手足口病流行主要由EV71型引起.3岁以下儿童流行期间存在被EV71型隐性感染,并产生IgM抗体.成人即使密切接触传染源也不易被感染EV71.疑似病例急性期血清中EV71-IgM抗体检测阳性率高(86.84%),其次为肛拭子EV71(45.94%)和咽拭子EV71(25.68%)的RNA检测阳性率.ELA试剂盒用于EV71型感染的早期诊断,具有操作简单快速经济,值得在基层推广.
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携带肠道病毒71型VP1基因的重组减毒沙门菌的构建和鉴定
目的 构建和鉴定能够稳定携带肠道病毒71型(EV71)VP1基因的重组减毒伤寒沙门菌,用于口服EV71 DNA疫苗的研发.方法 利用DNA重组技术,构建表达EV71 VP1蛋白的真核表达质粒VR-EV71 VP1,体外转染Vero细胞后检测目的 蛋白体外表达和抗原性,并将该质粒电转化至减毒伤寒沙门菌SL7027.结果 酶切鉴定证实构建含EV71 VP1基因的重组质粒,体外表达目的 蛋白具有较好的抗原性,并获得稳定携带该质粒的重组减毒伤寒沙门菌.结论 成功构建稳定携带肠道病毒71型VP1基因的减毒伤寒沙门菌,为下一步的疫苗研究打下了基础.
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HCV Core蛋白与IFN敏感性相关结构及功能的生物信息学分析
目的 生物信息学工具分析不同基因型HCV Core蛋白与IFN敏感性相关的结构功能及差异.方法 应用生物信息学工具对不同基因型HCV Core蛋白二级结构、三级结构、修饰位点及主要功能结构域预测分析.结果 HCV Core蛋白氨基酸序列、二级结构、三级结构各型间存在差异,可能存在酰胺化、cAMP依赖的激酶、PKC、TYR磷酸化等修饰位点及与两性蛋白SH3结构域、ERK、PKC相互作用的区域.结论 不同基因型HCV Core蛋白结构功能不同影响IFN治疗敏感性.
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中国部分甲肝病毒流行株结构蛋白VP3-VP1区基因特点分析
目的 分析中国部分甲肝病毒流行株结构蛋白VP3-VP1区基因特点.方法 收集42份甲肝患者急性期血清标本,经核酸提取、逆转录及巢氏PCR,测得结构-非结构蛋白VP3-VP1-2A区序列,进行序列同源性比较并分析其基因特点.结果 42株HAV病毒株在VP1-2A连接处核苷酸和氨基酸序列同源性分别为89.1%～100%和97.3%～100%;在全长结构蛋白VP3-VP1区的核苷酸和氨基酸序列同源性分别为87.6%～100%和98.8%～100%.VP1-2A连接处序列相同的病毒株在全长结构蛋白VP3-VP1区的核苷酸同源性为98.4%～100%,0～2个氨基酸位点不同.本实验所得序列在中和抗原位点处氨基酸序列均未变异.结论 42株病毒株均属于I型,40株是IA亚型,2株IB亚型.本实验所用HAV流行株在结构蛋白VP3-VP1区的核苷酸存在差异但是氨基酸序列高度保守且没有中和抗原位点处的变异.VP1-2A结合处核苷酸序列相同的分离株在全长结构蛋白VP3-VP1区核苷酸序列相同或相近,氨基酸序列保守.
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拉米夫定初始联合阿德福韦酯治疗失代偿期乙型肝炎肝硬化1年的疗效评价
目的 观察拉米夫定(LMV)初始联合阿德福韦酯(ADV)治疗失代偿期乙型肝炎肝硬化1年的疗效和可能的肾功能异常.方法 36例无核苷类似物治疗史的乙型肝炎肝硬化失代偿期患者,随机分为2组,对照组(n=18)给LMV 100 mg/d单药抗病毒,观察组(n=18)给LMV 100 mg/d+ADV 10 mg/d,同时均予常规护肝及对症、支持治疗,疗程1年;观察治疗前后肝功能、Child-Pugt评分和血清肌酐变化,病毒学应答率和病毒学反弹发生率,统计学比较组同差异.结果 (1)基线时两组患者性别、年龄、HBeAg状况、HBV载量、血肌酐和Child-Pugh评分均无统计学差异(P>0.05).(2)治疗结束时2组均无死亡发生,自身前后对比肝功能改善、Cllild-Pugh评分下降、HBV-DNA水平显著下降,观察组疗效优于对照组(P<0.01)、病毒学应答率高于对照组(88.89%vs 66.67%,P<0.05).(3)观察组无病毒学反弹发生,对照组3例(16.67%)发生病毒学反弹,HBV P区基因测序均系rtM204V变异.(4)2组患者均无血肌酐增高发生.结论 乙型肝炎肝硬化失代偿期LMV初始联合ADV 1年治疗在肝功能改善、病毒学应答和HBV耐药变异等方面均优于LMV单药治疗,且肾脏安全性良好.
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一例噬血细胞综合征与人疱疹病毒7型感染相关性的报告
目的 研究人疱疹病毒7型(HHV-7)病毒感染与噬血细胞综合征发生的关系,为临床噬血细胞综合征患者诊断和抗病毒的治疗提供依据.方法 收集噬血细胞综合征患者不同治疗期外周血,提取DNA,合成HHV-7引物,PCR扩增片段,基因序列分析,荧光定量PCR法测定病毒载量,化学发光法测定血液铁蛋白的浓度,分析二者的相关性.结果 经PCR扩增和基因序列分析在噬血细胞综合征外周血中检测到HHV-7基因片段,其HHV-7病毒载量随着血液铁蛋白的浓度而变化.结论 HHV-7感染可以继发引起噬血细胞综合征并且与HHV-7病毒载量有关.
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HBV抗原定量对干扰素联合阿德福韦酯治疗HBeAg阳性慢乙肝的疗效预测
目的 了解HBV抗原定量(HBsAg水平)对聚乙二醇干扰素α-2a序贯联合阿德福韦酯(ADV)治疗HBeAg阳性慢性乙肝患者48周疗效的预测.方法 62例HBeAg阳性慢性乙肝患者应用聚乙二醇干扰素α-2a治疗24周时,根据疗效进行分组.若HBV DNA≤100 IU/ml,定为A组,继续单药治疗至48周;若HBV DNA>100 IU/ml,定为B组,加用ADV治疗至48周.B组患者联合治疗至48周时,若HBV DNA≤100 IU/ml,定为B1组,若HBV DNA>100 IU/ml,定为B2组.疗效评价指标:HBV DNA显著抑制(HBV DNA≤100 IU/m1).治疗过程中监测患者ALT、TBIL、HBV DNA及HBsAg、HBeAg水平,采用SPSS16.0进行统计学分析.结果 基线水平三组患者平均年龄、性别分布、ALT水平差异均无统计学意义(P>0.05).A组与B1、B2组患者基线HBV DNA、HBsAg、HBeAg水平差异有统计学意义(P<0.05).B1、B2组比较,12周、24周HBsAg下降水平的差异均有统计学意义(P<0.05),而HBeAg下降水平的差异无统计学意义(P>0.05).结论 聚乙二醇干扰素α-2a治疗24周HBV DNA仍高于100IU/ml的慢性乙肝患者,12周、24周HBsAg下降水平可以预测加用ADV治疗至48周的疗效.
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鼻病毒在婴幼儿下呼吸道感染中作用的研究
目的 探讨鼻病毒在婴幼儿下呼吸道感染中的作用.方法 收集2008年5月到2009年4月北京儿童医院下呼吸道感染住院儿童鼻咽分泌物标本240份,使用Real-time RT-PCR方法筛选鼻病毒阳性标本,并进行统计分析.结果 在240例住院儿童中,入院诊断为肺炎的208例,占86.67%(208/240),支气管炎21例(8.14%).毛细支气管炎11例,无死亡病例,男女病例比例为1.93:1,且2009年2月采集标本数达到多.采用Real-time RT-PCR方法检测为鼻病毒阳性的标本71份,阳性率为29.58%(71/240),且主要的临床诊断症状是肺炎.发病年龄以2岁以下婴幼儿为主,占81.69%(58/71),其中以13～18月、≥24月年龄组发病率高,发病率为33.33%.结论 鼻病毒感染季节为春季和冬季,尤以2岁以下婴幼儿感染为主,主要症状表现为肺炎、支气管炎及毛细支气管炎等下呼吸道感染.鼻病毒流行具有季节性,且传染性强,传播速度快.应做好医院内防护措施,避免交叉感染.
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中国30个地区HBV基因型分布特点和临床意义
目的 了解中国乙型肝炎病毒感染者中HBV基因型的分布特点和临床意义.方法 应用型特异性引物聚合酶链反应法,对中国30个省市自治区共2922份HBV感染者血清标本进行基因型检测,同时检测相关病毒学及肝功能生化指标,分析基因型分布特点及临床意义.结果 2922例HBV感染者中,B、C、B/C、D基因型分别占15.9%、83.5%、0.41%、0.21%,未发现其他基因型.北方地区C基因型占绝大多数,南方地区浙江、江苏地区以C基因型为主,广东、湖南、湖北、江西以B基因型为主.B基因型较C基因型HBV感染者平均年龄小(P<0.001);C基因型HBV感染者HBeAg阳性率较B基因型高(P=0.023);B基因型HBV感染者乙型肝炎病毒载量较C基因型高(P=0.038);C基因型HBV感染者CHE、ALB较低,差异有统计学意义(P值分别为0.016).结论 中国HBV基因型以B、C基因型为主,仅少量的B/C和D基因型.北方地区以C基因型为主,南方地区C基因型明显减少,部分南方地区以B基因型为主.C基因型HBV感染者年龄较大、HBeAg阳性率高、HBV DNA载量低,病情较重.
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呼吸道感染患者肺炎支原体抗体检测结果分析
目的 研究肺炎支原体(MP)感染发病率与患者年龄、性别和季节的关系.方法 用被动凝集法检测呼吸道感染患者血清中肺炎支原体抗体(MP-Ab),并对2010年患者MP-Ab检测结果进行分析.结果 5年检测结果阳性率为30.10%;男、女性患者阳性率分别为30.74%、36.12%,差异有统计学意义(P<0.05);各年龄组差异有统计学意义(P<0.001),3～14岁阳性率高;季节发病率差异无统计学意义;阳性滴度>1:640的患者占10.18%.结论 MP感染逐年增加,3～14岁儿童为高危人群,女性感染机会高于男性,全年均可发病;大多患者预后良好.
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人乳头瘤病毒检测在宫颈病变中的应用价值
目的 了解宫颈细胞学异常患者中人乳头瘤病毒(HPV)的感染状况,评估HPV检测在宫颈病变筛查中的价值.方法 随机选取宫颈薄层液基细胞学检测异常的101例患者进行了HPV检测,同时行组织病理学检查.结果 (1)101例宫颈细胞学异常患者中,细胞学为ASCUS、LSIL、HSIL、鳞状细胞癌时高危型HPV阳性率分别为84.2%、88.6%、100.0%和2/2;(2)101例细胞学异常患者中20例为CIN Ⅰ,81例为CINⅡ及以上级别,高危型HPV阳性率在CIN Ⅰ、CINⅡ及以上级别分别为60%、97.5%;(3)ASCUS组中,高危型HPV阳性患者中CINⅡ及以上病变的发生率为87.5%,HPV阴性患者中CINⅡ及以上病变的发生率为16.7%;(4)高危型HPV型别分布由高到低分别为HPV16型39.6%(40/101),HPV58型17.8%(18/101),HPV52型16.8%(17/101),HPV18型9.9%(10/101)以及HPV33型9.9%(10/101).结论 高危型HPV感染率与宫颈病变级别呈正相关;HPV检测可作为ASCUS患者的有效分流手段.宫颈病变患者中高危型HPV感染以16、58、52、18、33型为主.
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丙型病毒性肝炎患者流行及治疗现状调查
目的 探讨丙型病毒性肝炎患者的感染途径、从感染到发现病情所需时间、从发现病情到治疗所需时间.方法 对2004年3月至2010年7月到广州市第八人民医院就诊的216例慢性丙型病毒性肝炎患者的感染途径、发现病情年限和治疗年限进行回顾性分析.结果 72.22%的患者患有输血后丙肝(PTHC),27.78%的患者患有散发性丙肝(SHC).32.61%的患者感染丙肝病毒15～20年后才发现病情,3.26%的患者20年以上才发现病情,33.80%的患者发现病情5年以上给予抗病毒治疗,17.13%的患者发现病情10～15年后才给予治疗.结论 大多数患者通过输血或血制品感染上丙肝,大多数患者感染丙肝病毒15年以上才发现病情,有将近一半的患者发现病情5年以上进行治疗,相当一部分发现病情10余年后才进行治疗.
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T7RNA聚合酶真核表达质粒的构建及其病毒拯救功能的鉴定
目的 建立T7RNA聚合酶真核表达质粒细胞内病毒拯救系统.方法 利用分子生物学技术,以大肠埃希菌BL21(DE3)的T7RNA聚合酶基因为目的 基因,构建T7RNA聚合酶真核表达质粒VR-1a并鉴定,然后将VR-1a和EV71病毒感染性克隆质粒共转染Vero细胞并传代,观察其细胞病变,同时用RT-PCR检测EV71病毒核酸和用ELISA检测EV71病毒抗原.结果 酶切和测序显示成功构建T7RNA聚合酶真核表达质粒VR-1a,和EV71病毒感染性克隆共转染Vero细胞后出现明显的病变,RT-PCR检测EV71病毒核酸阳性并测序证实,ELISA检测显示有EV71病毒抗原.结论 此方法可以用于细胞内拯救EV71病毒,有望应用于EV71病毒的核酸疫苗免疫研究.
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高危型人乳头状瘤病毒DNA检测方法在宫颈疾病中的临床意义
目的 评价高危型人乳头状瘤病毒DNA(酶切信号放大法)(Cervista High-risk humanpapilloma vires,Cervista HR-HPV)检测方法在宫颈疾病中的临床意义.方法 利用Cerrista HR-HPV检测方法对437例人组标本进行高危型HPV检测,检测结果与基因测序结果进行对比,同时评价Cervista HR-HPV检测方法在检测CIN2以上的宫颈病变(CIN 2+CIN 3+Cancer,以下简称CIN2+)的能力,以及三组A5/A6,A7,A9与CIN2+的相关性.结果 Cervista HR-HPV检测方法与基因测序结果相比总体符合率为88.26%,基因测序阳性率为29.08%,本实验为38.96%(P<0.0001).该检测方法对CIN2+灵敏度98.46%.特异度58.49%.阳性预测值29.68%,阴性预测值99.54%.A9和CIN2+的95%OR值的可信区间为10.086～57.283(P<0.0001).结论 Cervista HR-HPV与基因测序的检测一致性较好.对于CIN2+灵敏度与特异性较好,可以应用于宫颈癌的防癌筛查,出现A阳性的患者建议进一步行阴道镜检测确诊是否有CIN2+.
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实时荧光PCR检测手足口病病原体方法的建立及初步应用
目的 建立一种能同时检测肠道病毒、肠道病毒71型和柯萨奇病毒16型等手足口病病原体核酸的实时荧光PCR方法.方法 针对上述病毒的基因序列,设计、合成引物、探针.对38例手足口病患者在实时荧光PCR仪上进行扩增、检测和结果分析;并与常规RT-PCR方法的检测结果进行比对.结果 38例患者肠道病毒、肠道病毒71型和柯萨奇病毒16型实时荧光PCR方法与常规RT-PCR方法的阳性率分别为:73.7%、60.5%、13.2%、71.1%、55.3%、13.2%.统计分析表明,两种方法差异不具有统计学意义.结论 成功建立了肠道病毒、肠道病毒71型和柯萨奇16型病毒核酸的实时荧光PCR检测方法.
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丙型肝炎病毒的病毒学检测方法
丙型肝炎病毒(Hepatitis C Virus,HCV)感染引起的丙型病毒性肝炎呈全球分布,世界人口的3%即大约1.7亿人为丙肝感染者,且发展中国家高于发达国家.1992-1995年全国病毒性肝炎血清流行病学调查显示,我国人群丙肝感染率为3.2%[1].
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发热伴血小板减少综合征布尼亚病毒概述
2007年以来,中国疾病预防控制中心在对湖北、河南、江苏、浙江等地所报告的高度散发发热伴血小板减少病例(SFTS)进行了人粒细胞无形体感染监测,但发现,大部分病例不能检测到无形体特异性核酸或抗体.
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| 2010 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2007 | 01 02 03 04 |
| 2006 | 01 02 03 04 |
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| 2000 | 01 02 03 04 |
| 1999 | 01 02 03 04 |
| 1998 | 01 02 03 |
