中华实验和临床病毒学杂志
Chinese Journal of Experimental and Clinical Virology 중화실험화림상병독학잡지
- 主管单位： 实验和临床病毒学杂志
- 主办单位： 中国科学技术协会
- 影响因子： 0.71
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 11-2866/R
- 国内刊号： 段树学
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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密码子优化提高重组腺病毒中人轮状病毒G1VP7和G3VP7基因的表达量
目的 通过密码子优化提高重组腺病毒中人轮状病毒G1VP7和G3VP7基因的表达量.方法 人工合成按照人的优势密码子优化的人轮状病毒G1VP7和G3VP7基因,包装重组腺病毒后,与未优化的相同基因的重组腺病毒用Western Blot方法比较其表达量.结果 密码子优化的人轮状病毒G1VP7和G3VP7基因,与未优化的相同基因的重组腺病毒比较,其蛋白表达量大大提高.结论 密码子优化确实提高了重组腺病毒中人轮状病毒G1VP7和G3VP7基因的表达量,可望满足腺病毒载体疫苗的研发需要.
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定位表达于溶酶体、泛素的PrP载体的构建及鉴定
目的 构建定位于溶酶体、泛素的PrP表达载体,并进行蛋白表达特点及定位的鉴定.方法 将泛素基因、溶酶体膜定位信号序列基因和PrP基因连接,克隆至pcDNA3.1载体中,构建表达载体pcDNA3.1-UPrP、pcDNA3.1-PrPL;瞬时转染真核表达细胞,经Western Blot和间接免疫荧光技术检测PrP表达特点.结果 构建的各种PrP定位表达载体均可定位表达具有三种类型的糖基化分子的PrP,以双糖基化分子类型多.带有泛素、溶酶体信号的质粒pcDNA3.1-UPrP、pcDNA301-PrPL的PrP表达随着时间的延长蛋白表达量下降,提示泛素、溶酶体信号能加速表达PrP在细胞内的降解.结论 成功构建了溶酶体、泛素定位表达的PRNP核酸疫苗载体pcDNA3.1-UPrP、pcDNA3.1-PrPL,为PRNP核酸疫苗的研究奠定了一定的基础.
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VIP在胃腺癌中的表达及临床意义的研究
目的 研究血管活性肠肽(VIP)在胃腺癌组织和血浆中的表达及其与临床病理因素的关系.方法 采用ELISA法检测胃腺癌患者血浆中和正常对照组的VIP水平.RT-PCR方法检测VIPmRNA在胃腺癌组织、其相邻的正常胃腺癌组织及不典型增生胃黏膜的差异表达量,Western Blot法进一步检测胃腺癌组织中VLP蛋白的表达.结果 ELISA法检测正常人血浆vIP水平为(5.794±0.014)ng/ml,胃腺癌患者血浆中的VIP水平为(14.437±0.825)ng/ml.两者差异有统计学意义(P<0.05).RT-PCR分析胃腺癌组织中VIP mRNA的V/B值明显高于不典型增生胃黏膜及相应的癌旁正常胃黏膜,其V/B值分别为:(1.5261±0.3028)、(0.9334 ±0.2872)、(0.9051±0.2794),差异有统计学意义(P<0.01);正常胃窦黏膜与不典型增生胃黏膜中.V/B值的差异无统计学意义(P0.05);不同分化程度的胃腺癌组织VIP mRNA表达量的差异有统计学意义(P<0.05);有淋巴结转移与无淋巴结转移的胃腺癌组织VIP mRNA表达量之间差异亦有统计学意义(P<0.05).Western Blot法检测胃腺癌组织VIP蛋白表达量高于正常组织.结论 VIP可能参与了胃腺癌的发生.VIP蛋白的过度表达可能与胃腺癌的分化程度、侵袭有关,其表达对判断预后有参考价值.
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慢性乙型肝炎患者肝细胞凋亡的研究
目的 探讨慢性乙型肝炎(CHB)患者肝细胞凋亡与肝组织诱导性一氧化氮合酶(iNOS)、肝脏病理及血清转氮酶水平之间的相关关系.方法 取37例CHB患者和10例正常对照,采用dUTP缺口末端标记技术(TUNEL)检测肝组织中的细胞凋亡情况,免疫组化法检测肝组织iNOS的表达,并常规测定患者肝组织炎症分级和纤维化分期、血清丙氨酸转氨酶(ALT)、HBV DNA水平.结果 所有CHB患者的肝组织中均见到不同程度的TUNEL染色阳性.正常对照肝组织中未见到TUNEL阳性肝细胞.在CHB肝组织中,凋亡指数(A1)与炎症分级(r=0.404,P=0.015)及肝组织iNOS水平(r=0.465,P=0.004)明显相关并有统计学意义,而与血清ALT水平、HBV DNA以及组织学纤维化分期无明显关系.结论 慢性乙型肝炎患者体内氧化应激水平可能是肝细胞凋亡的诱导因素之一,细胞凋亡参与了CHB的肝细胞损伤过程,但并不影响患者的生物化学指标.
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吉林省麻疹野病毒的基因型别和基因特征
目的 阐明吉林省流行麻疹野病毒的基因型别和基因特征,为制定麻疹防控策略措施提供科学依据.方法 用逆转录-聚合酶链反应.限制性片段长度多态性分析(RT-PCR-RFLP)方法对2001-2006年分离的38株麻疹病毒进行基因分型;选择麻疹病毒代表株RT-PCR扩增N基因C-末端450个核苷酸,对比野毒和疫苗株核苷酸和氨基酸同源性,并构建N基因亲缘关系树.结果 经RT-PCR-RFLP基因定型,38株麻疹病毒分离珠均为H1基因型;对其中的29株进一步进行N基因C-末端450个核苷酸的序列测定和分析证实均为H1基因型的H1a亚型.吉林分离株与我国麻疹疫苗S191株450个核苷酸同源性为88.0%～89.4%,所提示氨基酸的同源性为91.8%～92.7%;吉林省内分离株核苷酸平均变异小于1.4%.结论 H1a基因亚型为吉林省近年来流行的麻疹野病毒绝对优势基因亚型.不同年份存在相同麻疹病毒的持续循环传播,同一年份也存有H1a亚型内不同病毒的共循环;与其他省之间存在相同麻疹病毒引起的传播链.
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四川地区部分人群和与人接触密切的家畜禽戊型肝炎病毒感染的调查及基因分型的研究
目的 了解四川地区人群和与人接触密切的家畜猪和鸡戊型肝炎(戊肝)病毒感染的分布及病毒基因分析.方法 采用万泰生物药业的HEV EIA诊断试剂检测人群、猪和鸡血清中戊肝病毒(HEV)IgG抗体.采用逆转录套式PCR方法(RT-nPCR)检测猪胆汁和血清中戊肝病毒核酸,并对阳性产物进行纯化和部分核苷酸序列分析.结果 学龄前儿童血清672份中有41份阳性,阳性率6.1%,成人血清661份中有280例阳性,阳性率42.36%,猪血清36份中有32份阳性,阳性率为88.89%,59份鸡血清HEV抗体均阴性.对15份HEV IgM抗体阳性的患者血清和54份猪胆汁进行RT-nPCR,从1份患者血清和3份猪胆汁扩增到戊肝病毒核酸,4株核苷酸序列之间同源性92.1%～98.6%,与GenBank HEV参考株ORF2相对应序列比较,核苷酸序列与Ch-T21(我国散发性急性肝炎人分离株HEV4 B亚型)之间同源性高占90.1%～96.9%.结论 四川地区部分人群和与人接触密切的家畜猪均存在HEV感染,尤其是家畜猪感染率高达90%左右,从人和猪分离到的病毒株核苷酸同源性很高,均属于戊肝病毒基因4型.
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四川绵阳部分人群甲、乙、丙和戊型肝炎病毒感染血清学调查
目的 了解健康人群肝炎病毒感染现状.方法 采用ELISA方法检测体检人群血清中抗甲(HAV-IgG)、乙(HBsAg和HBsAb)、丙(HCV-IgG)和戊型肝炎病毒抗体(HEV-IgG和IgM).人群血清均收集于2007年.结果 1352份人群血清肝炎病毒抗体阳性率,HAV-IgG为81,07%(1096/1352),HBsAg和HBsAb为5.4%(73/1352)和61.32%(829/1352),HCV-IgG为0.37%(5/1352),HEV-IgG为49.26%(666/1352).不同年龄段的人群HAV-IgG阳性率,10～19岁组为38.21%,20～29岁组为83%,30～39岁组为88%,40岁以上各年龄组为95.03%～97.77%.HBsAg和HBsAb阳性率,各年龄组依次为5.65%和50.83%、10.0%和68.0%、5.20%和78.80%、5.97%和78.11%、6.50%和62.50%、1.12%和51.40%、4.96%和30.58%.HCV-IgG阳性总数5份,其中10～19岁组1份,阳性率占0.33%,30～39岁组2份,占0.80%,60～69岁1份占0.56%,≥70岁1份占0.83%.HEV-IgG阳性率,10～19岁为26.58%,20～29岁组为42.0%,30岁以上各年龄组阳性率为55.22%～61.0%.对HEV-IgG阳性者再检测HEV-IgG,总阳性率为10.06%(53/527),各年龄组均有阳性者.结论 青少年HAV和HBsAb抗体低于人群总体水平,应及时加强免疫预防.人群HBsAg和HCV感染率与往年相比下降明显.HEV感染率随年龄增长而升高,特别是各年龄段均有新近感染者,应加强餐饮和公共卫生管理.
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SARS-CoV N基因重组腺病毒对树突状细胞前炎症细胞因子mRNA表达和分泌的影响
目的 探讨严重急性呼吸综合征相关的冠状病毒(SARS-CoV)感染后炎症细胞因子的mRNA表达和分泌水平的动态变化,在蛋白质水平上阐明SARS-CoV的致病机理.方法 本研究在建立树突状细胞(dendritic cells,DC)培养方法的前提下,利用SARS-CoV的N基因重组腺病毒(rAd-N)和对照的腺病毒(rAd-LacZ)来感染成熟的DC,用RT-PCR和ELISA法检测DC对IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-a的mRNA表达和分泌水平的变化.结果 IL-6和TNF-a mRNA的表达和分泌水平在前24 h之内是逐渐升高的,与对照组(rAd-LacZ感染)相比,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01).结论 SARS-CoY的N蛋白与SARS的急性期DC分泌过量的前炎症细胞因子有关.
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突变型乙肝病毒前C-C基因疫苗免疫BALB/C小鼠的研究
目的 了解乙肝病毒前C-C基因疫苗(VEC)的突变型VE2、VE4免疫BALB/c小鼠后诱发特异性体液和细胞免疫的效果.方法 分别用突变型和非突变型DNA疫苗免疫BALB/c小鼠,ELISA法检测小鼠抗HBc、抗HBelgG,免疫第28天取小鼠脾细胞用酶免疫斑点(ELISPOt)方法和CTL杀伤试验检测特异性细胞免疫功能.结果 VE2、VFA组抗HBe水平高于VEC组,抗HBc水平差异无统计学意义.3种质粒均能引发特异性细胞免疫反应,VE4、VE2强于VEC;联用VM7免疫后能使VEC、VE2、VE4特异性细胞免疫反应增强.结论 突变型前C-C基因疫苗在诱导BALB/c小鼠特异性体液和细胞免疫方面优于突变前.γ干扰素基因可作为基因佐剂增强HBV DNA疫苗诱导的特异性细胞免疫反应.
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一起不明原因感染性腹泻疫情的病原学诊断
目的 明确一起不明原因感染性腹泻疫情的病原体及其基因型别.方法 通过流行病学调查的方法,查明罹患率.对28例疑似病例的28份样本(粪便22份,呕吐物3份,肛拭子3份)采用RT-PCR方法进行诺如病毒核酸检测,并对5份阳性标本的核酸进行序列测定及遗传进化分析.结果 在调查的5694人中,发病160例,罹患率为2.81%.2007年3月7-9日为发病高峰.RT-PCR检测28份样本中,确定14份为阳性.对其中的5株毒株的核酸序列测定及序列遗传进化分析确定为GⅡ/4型诺如病毒,并与2006年诺如病毒流行株2006b同源性高,为97.9%.结论 本次感染性腹泻疫情由诺如病毒引起.
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人呼吸道合胞病毒融合糖蛋白非复制型重组腺病毒的构建和表达
目的 构建含有A亚型人呼吸道合胞病毒(Human Respiratory Syncytial Virus,RSV)融合糖蛋白(Fusion glycoprotein,F)基因的非复制型第一代重组腺病毒(First generation odenovirns vector,FGAd),并研究F基因在重组腺病毒中的表达.方法 利用限制性内切酶Xho Ⅰ和HindⅢ从质粒pGEM3zf-F中切下目的 基因F,克隆至穿梭质粒pShuttle-CMV,再与pAdeaRy-1在大肠埃希菌BJ5183中进行同源重组,鉴定正确后,用脂质体法转染293细胞,Western Blot鉴定目的 基因表达.结果 获得了表达RSV F基因的非复制型重组腺病毒FGAd/F,Western Blot检测到F基因的表达.结论 获得一株可表达A亚型BSV F的非复制型重组腺病毒FGAd/F,可用于体内研究观察其免疫效果及免疫保护作用.
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广东省2005-2007年麻疹病原学监测
目的 开展有效的麻疹病原学监测,分离麻疹病毒,了解广东省2005-2007年流行的麻疹野病毒分离株基因特征,为控制、消除麻疹提供科学依据.方法 用Veto/Slam细胞从暴发和散发麻疹疑似病例的咽拭子和尿液标本中分离麻疹病毒,并对所有分离到的麻疹病毒通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法,扩增出核蛋白(N)基因碳末端450个核苷酸片段,对其产物测定基因序列以定型.结果 2005-2007年共收到380份标本,包括咽拭子或尿液标本.共分离到82株麻疹野病毒.2005年病毒分离率为23.58%,2006年病毒分离率为17.11%,2007年病毒分离率为39.13%.病毒分离成功率与病例出疹天数和标本的采集质量有密切关系.结论 我省已经掌握了麻疹病毒的分离和分子生物学鉴定技术,分离率较高;我省多年来流行的麻疹毒株均为H1基因型,与国内流行的优势基因型一致.
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应用简便逆转录环介导等温扩增方法检测麻疹病毒核酸
目的 应用简便快速的核酸检测新方法--逆转录环介导等温扩增方法(RT-LAMP)检测麻疹病毒核酸,并与巢式逆转录多聚酶链式反应(nest-RT-PCR)方法进行比较.方法 比较RT-LAMP方法与nest-RT-PCR方法对吉林省历年麻疹病毒分离株以及临床疑似麻疹咽试子中麻疹病毒核酸检测的检出率.结果 两种方法对23株麻疹分离株麻疹病毒核酸阳性检出率均达到100%.针对18份麻疹病毒分离阴性的临床疑似麻疹咽试子分别利用RT-LAMP和巢式RT-PCR两种方法进行麻疹核酸检测,RT-LAMP方法阳性率为56.52%,巢式RT-PCR方法阳性率为47.83%.结论 RT-LAMP方法比巢式nest-RT-PCR方法更敏感.
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含HPV16L1基因重组腺病毒和1型重组AAV载体联合免疫效果的研究
目的 对表达HPV16L1抗原的重组腺病毒及1型重组AAV载体联合免疫效果进行研究.方法 分别构建含密码子优化型HPVl6LI基因重组腺病毒rAd-mod.HPV16L1及1型重组从V载体rAAV1-mod-HPV 16L1,将纯化的重组AAV病毒载体以肌注及滴鼻途径单独及联合免疫C57BL/6小鼠,使用体外中和实验检测各组小鼠血清中特异性中和抗体.结果 rAAV1-med-HPV16L1单独及与rAd-mod-HPV16L1联合肌注可诱导高滴度的血清中和抗体,在初免后第16周抗体滴度显著高于其他免疫组,联合肌注组诱导的抗体滴度高于单独肌注组;重组病毒联合滴鼻虽能产生一定的免疫加强作用,但抗体滴度仍显著低于rAAV1-mod-HPV16L1单独及联合肌注组.结论 型重组从V载体联合重组腺病毒以初免.加强模式肌注可诱导更高滴度的血清中和抗体.
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Bcl-2、Bax在功能失调性子宫出血子宫内膜中的表达
目的 研究凋亡调节蛋白Bcl-2、Bax在功能失调性子宫出血(功血)的子宫内膜中的表达.方法 采用免疫组织化学(免疫组化)方法,利用链霉素抗生物素蛋白--过氧化物酶法(SP)检测40例功血患者子宫内膜及40例子宫肌瘤标本的子宫内膜组织中Bcl-2、Bax基因的表达情况.结果 (1)Bel-2基因在正常月经周期子宫内膜组织的表达呈明显周期性变化,差异具有统计学意义(P<0.05).(2)Bcl-2基因随子宫内膜增生程度增加而表达逐渐增强,差异具有统计学意义(P<0.05).(3)Bax在正常月经周期子宫内膜组织的表达呈阳性.(4)Box随子宫内膜增生程度增加而表达逐渐减弱,差异具有统计学意义(P<0.05).结论 Bcl-2的过度表达和Bax的低表达可抑制子宫内膜细胞凋亡,使子宫内膜增生甚或不典型增生.与功能失调性子宫出血有密切关系.
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汉坦病毒ZJ5株M和S全片段的分子特性及序列的比较分析
目的 对浙江新分离的汉坦病毒疫苗后备筛选毒株ZJ5株的M和S全片段进行基因序列测定与基因分型,了解该毒株分子基础,并分析与其他病毒株以及20年前浙江分离的汉坦病毒ZIO、Z37疫苗株的差异.方法 提取汉坦病毒Z15株感染细胞总RNA,进行逆转录PCR扩增,产物纯化后克隆于T载体并测定序列.结果 扩增出ZJ5病毒M和S全片段并测定了序列,经对核苷酸和氨基酸序列分析表明,与汉城型(SEO)病毒有高的同源性,为SEOV,但与国内外已知的SEOV核苷酸差异高达11.7%～19.2%和6.7%～14.5%;用M和S片段核苷酸序列所构建的系统进化树显示,病毒株分在SEOV发生群,与SEOV的Gou3株亲缘关系近,但独自构成一进化支.结论 ZJ5株为一不同于现已报道的SEO型毒株的新亚型.
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EB病毒、巨细胞病毒、单纯疱疹病毒和柯萨奇病毒感染和多发性硬化复发关系的研究
目的 探讨0EB病毒(EBV)、巨细胞病毒(CMV)、单纯疱疹病毒-1(HSV-1)、柯萨奇病毒B组Ⅰ-Ⅵ型近期活动性感染和复发.缓解型多发件硬化(RR MS)复发的关系.方法 采用酶联免疫吸附法检测34例RR MS患者和200名正常对照者血浆EB病毒、巨细胞病毒、单纯疱疹病毒-1、柯萨奇病毒B组Ⅰ-Ⅵ型IgM抗体,比较病例组和对照组间上述病毒近期活动性感染率的差别,并对病例组病毒近期活动性感染者和无活动性感染者的临床资料进行分析比较.结果 两组问EB病毒、巨细胞病毒、单纯疱疹病毒-1及柯萨奇病毒B组Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅵ型IgM抗体阳性率的差异无统计学意义.RR MS组和对照组间柯萨奇病毒B组Ⅳ型、Ⅴ型IgM抗体阳性的差异有统计学意义(分别为3/34和0/200,P<0.05;2/34和0/200,P<0.05).病例组中任一病毒近期活动性感染者和无活动性感染者相比,其年龄、病程、发作次数、入院体温、血白细胞分类计数(中性粒细胞、淋巴细胞和单核细胞)、糖皮质激素应用与否及EDSS分值间的差异均无统计学意义.结论 RR MS患者复发期柯萨奇病毒B组Ⅳ型、Ⅴ型近期活动性感染率较高,但近期病毒活动性感染和症状的严重度无关,未发现EBV、CMV、HSV与RR MS复发的关系.
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广西家鼠型肾综合征出血热病毒的发现和鉴定
目的 从广西各地捕获的鼠肺标本检测汉坦病毒并鉴定其型别.方法 结合广西鼠疫监测采集啮齿类宿主动物,用ELISA法检测鼠肺标本,对汉坦病毒抗原阳性标本通过RT-PCR法扩增部分M片段上的核苷酸序列并测序,将扩增片段的核苷酸序列与已知病毒序列进行比对并分型.结果 在306份鼠肺标本中检测到1株SEO型的出血热病毒,阳性标本为广西沿海地区钦州市捕获的褐家鼠.结论 在广西沿海地区检测到SEO型汉坦病毒,其流行病学意义有待进一步研究.
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503例残留麻痹急性弛缓性麻痹病例病原流行病学特征分析
目的 分析广东省1994-2007年间残留麻痹病例的病原流行病学特征.方法 对1994-2007年广东省503例残留麻痹病例的粪便标本进行病毒分离、血清型鉴定和脊髓灰质炎(脊灰)病毒型内鉴定,并使用统计学方法,综合分析病原学结果与残留麻痹病例的免疫史、性别、年龄等流行病学资料之间的关系.结果 收检了503例残留麻痹病例的粪便标本,其中150例分离到脊灰病毒(PC),均为疫苗类似株,59例分离到非脊灰肠道病毒(NPEV),PV和NPEV的年度分离率分别在18.92%.47.06%和4.17%～25.00%之间浮动.PV分离率随年龄组的增大而降低,0岁组高,为61.11%;0～2次免疫的病例的PV分离率远高于全程免疫者,差异有统计学意义;残留麻痹病例中的PV和NPEV分离率均高于无残留麻痹的病例.结论 1994-2007年广东省未发现由脊灰野病毒引起的残留麻痹病例,2岁以下年龄组和0～1剂次免疫者中的PV分离率与残留麻痹有相关性.NPEVs也可能是儿童出现残留麻痹病例的病原之一.
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HBeAg阴性乙型肝炎ACLF患者的临床特征及抗病毒治疗短期疗效
目的 观察HBeAg阴性乙型肝炎慢加急性肝衰竭患者的临床特征及应用恩替卡韦抗病毒治疗的短期疗效.方法 132例HBeAg阴性和51例HBeAg阳性乙型肝炎慢加急性肝衰竭患者,分为常规治疗组及抗病毒治疗组,抗病毒组在常规内科治疗基础上加用恩替卡韦0.5 mg/d治疗,比较两组患者临床特征、病死率及抗病毒治疗短期疗效差异.结果 与HBeAg阳性组比较,HBeAg阴性组年龄较大(P=0.001),血清HBV DNA定量较低(P=0.001).HBeXS阴性组与HBeAg阳性组肝衰竭分期构成比及常规治疗病死率比较无差异.应用恩替卡韦抗病毒治疗时HBeAg阴性组生存率为54.24%,高于常规治疗组(35.62%),P=0.032,低于HBeAg阳性抗病毒组(80.00%),P=0.004.HBeAg阴性组血清HBV DNA在(3～5)log10拷贝/ml时,抗病毒治疗组生存率为55.56%,高于常规治疗组(20.00%),P=0.011.结论 乙型肝炎慢加急性肝衰竭患者中,常规治疗下HBeAg阴性患者与HBeAg阳性患者的病死率无差异.采用恩替卡韦抗病毒治疗能提高HBeAg阴性患者的生存率.在HBV DNA低水平复制的HBeAg阴性患者中恩替卡韦抗病毒治疗能提高生存率.
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轻型和重型手足口病临床和实验室特征分析
目的 研究2008年深圳市轻型和重型手足口病临床特点和实验室特征.方法 将深圳市东湖医院和儿童医院共145例手足口病住院患者作为研究对象,其中轻型124例,重型21例.收集患者临床和一般实验室资料,急性期与恢复期连续粪便和血标本,通过RT-PER检测EV71病毒核酸,分离和培养EV71肠道病毒,其中2例死亡患者行病理组织学检测.结果 与轻型患者比较,重型患者白细胞计数、血糖显著升高,但年龄显著降低,粪便中轻型和重型患者EV71基因检出率分别为35%与67%,重型患者EV71检出率显著高于轻型患者,从9例患者粪便中分离培养出肠道病毒,其中1例为死亡患者粪便标本.2例患者死于神经源性肺水肿和脑干脑炎.结论 EV71是重型患者和死亡患者的主要病原体,神经源性肺水肿和脑干脑炎是EV71型手足口病的主要死亡原因,对年龄小于4岁,高热、皮疹稀疏和高血糖的EV71型手足口病患者应警惕向重型发展.
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蛭丹化瘀口服液体外抑制RSV作用机制的研究
目的 研究蛭丹化瘀口服液体外抗呼吸道合胞病毒作用环节.方法 观察该药在不同浓度和不同的作用环节下RSV对Hep-2细胞的致病作用.结果 蛭丹化瘀口服液对细胞无毒浓度为5.5 mg/ml,并在此浓度中未能阻断RSV对细胞的吸附,细胞产生了完全病变.蛭丹化瘀口服液在2.75～5.50 mg/ml浓度中,药物直接灭活病毒组和先感染细胞再加入药物的治疗组均未产生细胞病变.结论 蛭丹化瘀口服液体外实验无预防RSV感染作用,有直接灭活RSV作用,并对进入细胞内的RSV有抑制作用.
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应用医用三氧治疗慢性乙型肝炎的临床分析
目的 探讨医用三氧治疗慢性乙型肝炎的疗效.方法 慢性乙型肝炎患者42例随机分为两组,对照组患者22例给予基础治疗,治疗组患者20例,常规基础治疗加用医用三氧治疗.分别在治疗前及治疗8周后观察生化及病毒学指标.结果 治疗结束时,治疗组及对照组肝功能均明显改善.治疗组显效、部分显效分别为10%,35%;对照组显效、部分显效分别为4.6%,13.6%(P<0.05).结论 医用三氧治疗慢性乙型肝炎有一定的疗效.
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高危型人乳头状瘤病毒和宫颈细胞学联合检测在诊断宫颈病变中的临床价值
目的 探讨高危型人乳头状瘤病毒(hish-risk human papillomavirus,HR-HPV)和宫颈细胞学联合检测在诊断宫颈病变中的临床价值.方法 对2004年10月至2006年12月北京大学第一医院就诊的患者进行HR-HPV检测和宫颈细胞学检查,对一项或两项结果异常者均行阴道镜下宫颈活检,并以宫颈活检结果为金标准,比较HR-HPV检测、宫颈细胞学检查、HR-HPV和宫颈细胞学联合检测对宫颈病变的诊断价值.结果 HR-HPV检测、宫颈细胞学检查及HR-HPV检测联合宫颈细胞学检查对诊断宫颈病变有不同价值.HR-HPV检测筛查CINⅡ、CINⅢ的敏感度、特异度、阳性预测值和阴性预测值分别为94.83%、31.06%、55.22%、87.02%,宫颈细胞学筛查CINⅡ、CINⅢ的敏感度、特异度、阳性预测值和阴性预测值分别为92.10%、31.06%、54.50%、81.43%,HR-HPV和宫颈细胞学联合检测筛查CINⅡ、CINⅢ的敏感度、特异度、阳性预测值和阴性预测值分别为99.65%、18.55%、61.46%、97.62%.结论 采用HR-HPV和宫颈细胞学联合检测可提高宫颈病变的检出率,并可指导临床医生对宫颈病变的治疗.
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实时荧光逆转录聚合酶链反应检测人类偏肺病毒方法的建立与应用
目的 建立一种快速、准确、特异的实时荧光逆转录聚合酶链反应方法(PCR),以检测人类偏肺病毒.方法 根据Hmpv-L基因序列设计引物和探针并对实时荧光PCR反应体系进行优化,提取总RNA,通过随机引物进行反转录反应;产生的cDNA通过实时荧光PCR进行鉴定.进一步评价实时荧光反转录PCR方法的特异性、灵敏度、重复性,对180例临床样本进行检测.结果 本实验所建立的实时荧光反转录PCR方法可准确、特异地检测人类偏肺病毒;该方法的灵敏度可达到1拷贝/μl;检测的批间和批内的变异系数均小于5%.180例肺炎和支气管炎患儿痰标本中共检测出28例人类偏肺病毒阳性,阳性率为15.56%(28/180);肺炎患儿检出率为15.60%(17/109);支气管炎患儿检出率为15.49%(11/71).男性患儿检出率18.56%(18/97),女性患儿检出率12.05%(10/83).患儿年龄小于2岁者检出率22.34%(21/94),2～5岁者检出率8.70%(6/69),大于5岁者检出率5.88%(1/17).结论 本研究建立的人类偏肺病毒实时荧光逆转录PCR方法快速、准确,结果可靠,实用性强;人类偏肺病毒已成为小儿呼吸道感染的重要病原体之一.
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Nonidet P-40致流感病毒脱包膜的AFM观察研究
目的 利用原子力显微镜(AFM)观察经非离子表面活性剂Nonidet P-40(NP-40)不同浓度系列处理的A型流感病毒表面形态变化,观察不同表面活性剂-病毒表面相互作用情况,以提供一种较为温和的病毒表面裂解条件,为利用AFM进一步研究病毒下层结构提供基础.方法 用不同浓度的非离子犁表面活性剂NP-40对完整的A型流感病毒进行处理,以轻敲模式经AFM成像,获得病毒球状体和丝状体的高度图、振幅图以及相位图,并观察和比较不同浓度非离子表面活性剂对病毒表面形态和结构的影响.结果 NP-40各浓度对病度表面破坏程度不一,病毒随NP-40浓度增高而逐渐降解,并出现部分剥离病毒表面.暴露下层衣壳,更清晰地展示包膜下层表面突起的表面形态学结果.结论 通过表面活性剂优化处理病毒颗粒,实现了利用AFM观测流感病毒包膜下形态结构的设想.
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改良Lowry法测定Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗蛋白质含量的研究
目的 建立Sabin株脊髓灰质病毒灭活疫苗(Sabin strain inactivated poliovims vaccine,SabinIPV)中微量蛋白质含量测定的方法.方法 采用lowry法结合三氯乙酸沉淀法测定试样中的蛋白质含量,摸索并优化各个实验条件.结果 该方法能够排除Sabin IPV疫苗样品中游离氨基酸、多肽和酚红指示剂等的干扰,线性范围为2.5-40μg/ml,r=0.9998;加标平均同收率为95.32%,批内和批间变异系数均小于10%.结论 三氯乙酸沉淀法结合Lowry法的改良方法可以用于测定生物制品中微量蛋白含量.
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肠道病毒71型重组VP1蛋白的表达和EV71型手足口病血清学诊断方法的建立
目的 获得纯化的具有免疫活性的肠道病毒71型VP1蛋白,建立EV71感染早期、快速和准确的ELISA血清学诊断方法.方法 通过PCR方法扩增出VP1基因,定向克隆到原核表达载体pET-21b(+),阳性质粒转化入E.coli B121(DE3)感受态细胞经IPTG诱导,SDS-PAGE电泳和蛋白免疫印迹分析目的 蛋白的表达水平.纯化的VPI蛋白用作包被抗原,建立手足口病(HFMD)患者抗-EV71-IgM和IgG的血清学诊断方法.结果 成功表达和纯化了VP1重组蛋白,所表达的蛋白能被EV71型手足口病患者血清所识别.调查发现,与正常人和EV71阴性手足口病患儿比较,EV71阳性手足口病血清中抗-EV71-IgM和IgG中A值显著升高.差异具有统计学意义(P<0.05).与RT-PCR结果比较,发现该方法IgM的诊断敏感性和特异性分别为73%和77%;该IgG诊断方法的敏感性和特异性分别为82%和83%.完成该试验仪需4 h.结论 利用pET原核表达系统成功克隆、表达和纯化了肠道病毒71型重组外壳蛋白VPI,且具有良好的抗原性.该抗原可用于研制EV71血清学诊断试剂盒.
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用于人乳头瘤病毒基因分型悬浮芯片法的建立和应用
目的 建立一种适合于临床应用的人乳头瘤病毒(HPV)基因分型检测新方法.方法 利用HPV型特异性探针和MY09/11通用引物,制备可对HPV16、18、26、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68、73及82型等18种高危型和6、11、34、40、42、43、44、54、61、67、70及84型等12种低危型HPV进行分型检测的悬浮芯片检测方法;并以E7型特异性PCR法和DNA测序法作为"金标准",来验证悬浮芯片检测方法的准确性.结果 在810例临床样本中发现HPV感染病例243例,其中包括高危的HPV16、18、26、31、33、39、45、51、53、56、58、59、66、68、73和82型,以及低危的HPV6、11、34、54、61、67、70和84型,既有单一型感染也有混合型感染;经"金标准"证实,本研究建立的HPV悬浮芯片检测方法的一致率为90.9%,灵敏度为10个拷贝的HPV DNA分子.结论 利用悬浮芯片技术建立的HPV悬浮芯片检测方法可以简便、有效地检测18种高危型和12种低危型HPV,并能明确其基因类型,适用于l临床HPV感染的实验室诊断与流行病学研究.
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流感/禽流感病毒及其致病力鉴别的基因芯片技术研究
目的 建立流感/禽流感病毒及其致病力鉴别的基因芯片检测技术.方法 以血凝素(HA)、神经氨酸酶(NA)、核蛋白(NP)基冈作为靶片段,设计病毒检测和致病力特异性鉴别探针,建立基因芯片鉴别检测技术,采用单引物扩增法(SPA)处理样本核酸,分别对此芯片进行特异性、敏感性和符合率评价.结果 此芯片能够特异性的检测H1N1、H3N2、B型流感病毒及H5N1、H9N2禽流感病毒,敏感性分别为8HAU、16HAU、32HAU及8HAU、8HAU.致病力鉴别探针敏感性为32HAU.同RT-PCR方法比较,检测灵敏度为83.9%.结论 建立的常见流感病毒检测基因芯片特异性高、敏感性高、灵敏度高,更能够对致病力进行有效甄别,可作为临床诊断、传染病防控等方面的有益补充.
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狂犬病病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立和阳性对照的制备
目的 建立狂犬病病毒实时荧光定量PCR检测方法,制备狂犬病病毒(rabies virus,RV)的假病毒颗粒阳性对照.方法 在RV的N基因保守区设计引物和探针,建立反转录实时荧光定量PCR检测方法,克隆得到噬菌体MS2的装配蛋白和壳蛋白基因(MS2),将其重组到质粒pET-28b(+)中,再将RV的N基因片段重组到MS2下游,经原核表达得到RV假病毒颗粒.结果 实时荧光定量PCR检测RV重组质粒低检测限为15拷贝/μl,重组表达质粒经原核表达可形成耐RNase的RV病毒样颗粒.结论 建立了反转录实时荧光定量PCR检测RV核酸的方法,成功构建了可耐受RNase且无传染性的RV阳性对照.
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PD-1/PDL1信号通路与乙肝病毒慢性感染关系的研究进展
乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus,HBV)感染自然史可分为康复、表面抗原(HBsAg)无症状携带者、慢性乙肝、急性乙肝、乙肝后肝硬化、乙肝相关性肝癌等[1].慢性乙肝(chronichepatitis B,CHB)是HBV感染发病的常见状态,CHB的预后主要取决于病毒感染时机和宿主的免疫状况.
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腺相关病毒载体介导造血干细胞基因转导的策略
腺相关病毒(adeno-associated virus,AAV)已被广泛用作基因治疗的载体.本文就提高AAV载体在HSCs中的基因转导效率的策略综述如下.
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2008年西安地区手足口病病原血清分型
手足口病(Hand-fool-mouth disease,HFMD)是由一组肠道病毒引起的常见传染病.2008年4月,我国安徽阜阳发生了HFMD的流行并造成24例患儿死亡,病原体主要为肠道病毒EV71.
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麻疹实验室监测网络的建立和运转
麻疹是由麻疹病毒引起的一种具有高度传染性的急性发热出疹性疾病.其病死率在一些发展中国家和地区超过10%,少部分病例伴有巨细胞肺炎、包涵体脑炎等严重后遗症,个别病例会并发亚急性硬化性全脑炎.在全球广泛使用麻疹减毒活疫苗之后,麻疹在世界大多数地区得到了成功地控制.即使如此,据世界卫生组织(WHO)估计,近年来,每年仍有接近3000万人感染麻疹病毒,在2000年还有超过77万例的死亡病例.
| 年 | 期数 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2007 | 01 02 03 04 |
| 2006 | 01 02 03 04 |
| 2005 | 01 02 03 04 |
| 2004 | 01 02 03 04 |
| 2003 | 01 02 03 04 |
| 2002 | 01 02 03 04 |
| 2001 | 01 02 03 04 |
| 2000 | 01 02 03 04 |
| 1999 | 01 02 03 04 |
| 1998 | 01 02 03 |
