中华实验和临床病毒学杂志
Chinese Journal of Experimental and Clinical Virology 중화실험화림상병독학잡지
- 主管单位： 实验和临床病毒学杂志
- 主办单位： 中国科学技术协会
- 影响因子： 0.71
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 11-2866/R
- 国内刊号： 段树学
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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反义硫代寡核苷酸体外抑制柯萨奇病毒B3增殖的研究
目的 在CVB3易感的Vero细胞系中观察与 C V％RNA 5'NCR的nt 581-601区域互补的2l聚硫代AODN抗病毒活性。方法 采用MTT法测定细胞活性，直接观察CPE，测定培养上清TCID50，并分别用ELISA和斑点杂交法检测CVB3抗原及其RNA。结果 1.AODN可推迟和减轻CPE，且随AODN浓度增加，对CPE的抑制作用增强，感染细胞存活率也随AODN浓度升高而升高；2.AODN可抑制CVB3抗原表达及RNA的合成，且呈剂量依赖关系；3.培养上清中病毒滴度随AODN浓度升高而降低。AODN抗病毒活性在转染后48 h效果较好；10 μnol／L浓度抑制效果较好。本研究结果 也显示10 μnol／L SODN对CVB3感染细胞CPE有较弱的抑制作用，但RODN未显示抗病毒活性；AODN未显现对HSV-l感染细胞CPE抑制活性，但对其他肠道病毒如CVB5，Polio-1和ECHO-6有较弱的抑制活性。结论 AODN可能通过抑制CVB3RNA复制来抑制病毒合成。
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银强化滴金免疫法检测肾综合征出血热IgM的研究
目的 建立一种检测血清汉滩病毒抗体IgM的方法 。方法 将汉滩病毒抗原点于硝基纤维膜上，应用φ 15nm的羊抗人IgM金标抗体与血清标本中的汉滩病毒IgM结合，再加银加强试剂，阳性者为棕黑色。结果 整个试验过程需要10 min，用该法与ELISA法对比检测临床标本，结果 有良好的一致性，总符合率为98％。结论 银强化滴金免疫法操作简单，试剂稳定、安全、敏感、快速，适于基层。
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婴幼儿腹泻物中肠道腺病毒的检测
目的 了解深圳市婴幼儿腹泻患者的不同型别腺病毒的感染情况.方法 应用聚合酶链反应技术(PCR)对114份婴幼儿腹泻标本进行腺病毒DNA检测，并使用Taq I和RsaI内切酶对扩增产物进行限制性内切酶图谱分析结果 婴幼儿腹泻标本腺病毒DNA检测的阳性率为14％(16／114)，利用TaqI鉴别腺病毒型别，其中有11份样品水解为191b[p和110bp的两个片段，表明肠道腺病毒DNA检测的阳性率为9.65％(11／114)；经RsaI切后，有2份水解为256bp和45bp(腺病毒40型)，阳性率为1.75％(2／114)，9份水解为2211和90(腺病毒41型)，阳性率为7.89％(9／114)。结论 所检要幼儿腹泻患者的样品中肠道腺病毒40和41的感染率约为9.65％(11／114)，其他型别腺病毒的感染率为4.35％(5／114)。
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汉滩病毒感染神经元细胞模型的建立
目的 利用体外培养的昆明小鼠胚胎脑皮质神经元，感染汉滩病毒(Hantaan virus.HT-NV)，建立病毒感染的神经元细胞模型，供探讨病毒感染神经元后细胞的变化及损伤机制之用。方法 将孕16～19 d的昆明种小鼠胚胎皮质神经元正常培养存活后，感染汉滩病毒A9株造成细胞损伤模型。使用间接免疫荧光方法 检测神经元荧光抗体阳性情况；利用MTT比色试验检测细胞存活情况；通过免疫组化方法 观察神经细胞生长的情况。结果 病毒感染的神经元在继续培养一周时，间接免疫荧光检测反应阳性；M TT比色试验显示病毒感染组神经元活性明显下降；神经元特异性烯醇化酶(Neuron speciafic enblase.HSE)免疫组化显示病毒感染组神经元胞体面积和突起长度均低于阴性对照组。结论 HTNV对神经元存在直接作用，使细胞在病毒感染后出现损伤性变化，胚胎鼠皮质神经元是敏感的H TNV靶细胞之一。
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HCMV AD169株大鼠慢性感染模型的初步探讨
目的 探讨人巨细胞病毒(Human Cytomegalovirus,HCMV)感染大鼠的敏感性和稳定性，探讨建立大鼠感染HCMV动物模型的可行性。方法 第一次动物试验：SD大鼠30只，随机均分为3组，分别为接种病毒组、灭活病毒组和正常对照组，病毒接种途径为尾静脉注射；第二次动物试验：Wistar大鼠40只，分别为接种病毒组(20只)、灭活病毒组(20只)，病毒接种途径同第一次动物试验。两次试验动物均于90d后分别以病理学方法 研究动物组织损伤特点，以免疫组化方法 检查病毒抗原，原位杂交方法 检测动物组织细胞中HCMV基因。结果 两次静脉途径接种HCMV AD169株90d的动物，组织发生广泛病理损害，免疫组化方法 和原位杂交方法 在多种组织细胞内查到HCMV抗原和基因表达。结论 HCMV AD169株可感染健康大鼠，可望作为HCMV动物慢性感染模型。
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TLMV5＇非编码区基因的克隆与序列分析
目的 调查TTV阴性的非甲～庚型肝炎患者中TTV～like mini virus(TLMV)感染情况，对TLMV5＇非编码区(5＇NCR)部分基因进行分子克隆与序列分析。方法 采用巢式PCR技术检测53例T T V阴性的非甲～庚肝炎患者血清TLMV DNA，对PCR产物进行克隆、测序和分析。结果 53例病例中TLMV DNA阳性37例(69.8％)，对其中8株TLMV基因克隆测序，并与Takahashi报道的TLMV序列(GenBank Accession No ab 026930、ab026931)比较，其核苷酸序列同源性在64％～83％之间。结论 在T TV阴性的非甲～庚肝炎患者中存在TLMV感染。TLMV5＇NCR基因变异性较大。TLMV的致病性及其与非甲～庚肝炎的关系尚有待进一步研究。
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庚型肝炎病毒感染对慢性丙型肝炎的临床与病理学影响
目的 探讨庚型肝炎病毒(HGV)感染对慢性丙型肝炎(CH-C)的临床与病理学影响。方法 应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法对53例经肝穿活检确诊的CH-C患者血清标本进行了HGV-RNA检测，并将合并与未合并HGV感染者进行了临床与病理学对比。结果 HGV-RNA阳性15例(28.30％)。合并与未合并HGV感染者在临床表现、肝功能等生化指标水平、HCV-RNA阳性率及肝脏病理损害等方面差异均无显著性(p>0.05)。结论 HGV感染对CH-C的肝脏损害及HCV复制无影响。
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狂犬病毒3aG株糖蛋白基因在人5型重组腺病毒中的表达研究
目的 构建表达狂犬病毒糖蛋白基因(GP)的重组人腺病毒。方法 克隆狂犬病毒疫苗株GP基因并测序，将其插入E3区缺失的Ad5载体，置于E3区早期启动子的控制下，通过同源重组，蚀斑纯化，筛选表达GP的重组人腺病毒。用ELISA法检测表达的糖蛋白，快速荧光灶抑制试验(RFFTT)法测定此重组病毒免疫小鼠后产生的中和抗体。结果 获得的3aG株基因的开放读码框为1575个核苷酸，编码524个氨基酸；经同源重组和蚀斑纯化获得了E3区表达狂犬病毒GP基因的重组人腺病毒；其表达产物能特异性地被抗狂犬病毒人免疫血清所识别；免疫小鼠后能产生一定水平的中和抗体。结论 成功构建了E3区表达狂犬病毒GP基因的重组人腺病毒，此重组腺病毒能有效诱导产生特异性中和抗体。
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输血传播病毒部分基因的克隆表达及表达产物活性的初步鉴定
目的 构建含输血传播病毒(TT V)部分基因序列的原核表达载体并进行表达及产物活性的鉴定。方法 在计算机模拟基础上，采用PCR的方法 ，从一名非甲～庚肝炎患者血清中，扩增编码蛋白具有抗原活性的TTV ORF2部分基因片段。将该片段插入表达载体pQE-30，在大肠埃希菌中进行表达并利用酶联免疫吸附试验(ELISA)鉴定表达产物活性。结果 SDS-PAGE电泳后经电脑分析显示，表达产物相对分子质量与预计相同，表达量占菌体总蛋白量的22.33％。经ELISA检测表明表达产物有结合抗体活性。结论 成功构建了含TTV部分基因的原核表达载体，表达产物具有抗原活性。
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HPV 16 YY1位点突变株诱导的永生化细胞系具有部分转化细胞特征
目的 检测HPV 16 YY1位点突变株诱导的包皮角原细胞永生化细胞系的生物学特性。方法 提取永生化细胞株蛋白，以Western blot检测细胞内源性这p53蛋白含量；以TRAP法检测细胞中端粒体酶活性；将永生化细胞系接种于含有10％FCS的软琼脂培养基，观测细胞的软琼脂生长能力。结果 Western blot检测结果 显示4株永生化细胞系中p53均为阴性；端粒体酶活性均为阳性，并且随着细胞传代活性增强；在细胞传代初期各细胞系在软琼脂层上不能生长，而后期3株细胞系在软琼脂生长形成集落。结论 HPV 16 YY1位点突变株诱导的永生化细胞具有端粒体酶活性和软琼脂形成集落能力。
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抗病毒抗生素17997对HSV1DNA及蛋白质合成的选择性抑制作用
目的 研究抗病毒抗生素17997对单纯疱疹病毒1型(HSV-1)DNA及蛋白质合成的影响。方法 应用氯化铯密度梯度离心，PAGE电泳及Western Blot方法 分别研究HSV-1 DNA及蛋白质合成。结果 17997 0.5 μmol／L，1.0 μmol／L，2.0 μmol／L及4.0 μnol／L分别抑制HSV-l DNA合成63.1％，74.1％，93.9％及100％。17997 4.0μnol／L对细胞DNA合成无影响。同上4种浓度17997对VERO细胞蛋白质合成无影响，但可选择性地抑制病毒蛋白质合成。结论 17997对细胞无毒浓度可选择性地抑制HSV-1 DNA及蛋白质合成。
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山东省某些高危人群HIV-1感染者分子流行病学研究
目的 了解流行于山东境内HIV-1毒株的亚型分布及变异情况，分析其来源并推测其流行趋势。方法 采集了25份HIV-1抗体阳性感染者的全血分离单核细胞(PBMC)，提取前病毒DNA，经nested-PCR扩增HIV-1膜蛋白(env)基因的C2-V3区并进行序列测定和亚型分析。结果 25份HIV-1阳性感染者的PBMC样品中扩增到24份可用于序列测定的HIV-1env基因片段，经序列测定和基因分析鉴别出共有5种HIV-1M亚群基因亚型：A、B、C、E和B＇亚型。13名有偿献血人员均为B＇(泰国B)亚型，10名回国劳工及1名回国劳工的女性配偶中存在A、B、C、E四种亚型。结论 山东省HIV-1各种亚型毒株感染情况复杂，因此应加强对献血者及回国劳工等高危人群的检测和控制，以防HIV-1各亚型毒株在全省的蔓延。
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海南岛两株甲病毒基因组3＇末端核苷酸序列的克隆与分析
目的 从分子水平鉴定海南省分离的两株甲病毒(HBb17和M1病毒)。方法 采用RT-PCR方法 ，分别扩增两株病毒基因组的3＇末端核苷酸序列，扩增产物经亚克隆，筛选重组子并测定核苷酸序列对序列进行分析。结果 HBb17和M1病毒分别扩增出约1.6kb和1.3kb的特异片段。序列分析表明，在3＇末端非翻译区HBb17病毒与罗斯河病毒(国际标准株T48病毒)核苷酸同源性为99％，M1病毒与鹭山病毒(SAG)同源性为98％；两病毒结构基因的E1区序列，HBb17病毒与罗斯河病毒核苷酸(氨基酸)同源性为99％(99％)，M1病毒与鹭山病毒核苷酸(氨基酸)同源性为97％(99％)，M1病毒与盖塔病毒同源性为94％(98％)。结论 序列分析表明，海南岛分离的HBb17病毒属于罗斯河病毒，M1病毒可能是鹭山病毒或盖塔病毒的变异株。
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呼吸道合胞病毒的分型研究
目的 了解北京地区1990～1991年和1997～1998年两个非连续的流行年中呼吸道合胞病毒(RSV)A、B亚型和基因型的流行情况。方法 用间接免疫荧光法(ⅡF)检测RSV阳性鼻咽分泌物(NPS)标本或RSV分离株，划分A、B亚型。根据N基因片段的限制性酶切图型将RSV分离株分成至少6个基因型NP1-6NP1，3和6属于B亚型，NP24和5属于A亚型。根据SH基因片段的核苷酸序列将A亚型分离株进一步划分为SH基因型SHL1-6。SHL之间关系密切，并与NP有关。SHL1，3和4紧密相关，属于NP2；SHL2和6属于NP4；SHL5属于NP5。结果 1997冬季～1998年春季145份RSV NPS标本中，83份(57.2％)为B亚型，62份(42.8％)为A亚型，A：B为1：1.3。1997～1998流行年所获的10株RSV分离株中，2株为A亚型，8株为B亚型，A：B为1:4。1990～1991流行年所获的10株毒株中，8株为A亚型，2株为B亚型，A：B为4：1。1997～1998流行年分离到的10株RSV分离株中，2株A亚型均属NP4，SHL2；而2株B亚型均为NP3。根据NP推导出的A、B亚型划分与单克隆抗体定义的亚型一致。结论 北京地区RSV A、B亚型或多个基因型可同时流行，但每个流行年的优势基因型可不同。相距5年仍可分离到相同的毒株，表明尽管A亚型毒株之间存在明显的差异性，一些基因型仍然相当稳定。
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辛德毕斯病毒结构蛋白基因对宿主细胞影响的初步研究
目的 了解辛德毕斯病毒基因结构与功能的关系，阐明其分子致病分子机理。方法 构建了辛德毕斯病毒(XJ-160病毒株)结构基因的真核表达质粒，pcDNA3.1ABC，转染BHK-21细胞后观察其对宿主细胞的影响。结果 转染病毒结构基因的BHK-21细胞，可以发生辛德毕斯病毒感染所出现的细胞毒性反应，表现为：细胞存活率降低；细胞核染色质浓缩、凝集；G1期细胞减少、而处于s期的细胞增多。结论 辛德毕斯病毒结构蛋白基因可引起宿主细胞的凋亡。
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协同受体与艾滋病发病机理的研究进展
我们着重就协同受体与艾滋病发病机理的研究进展作一介绍。 1 协同受体介导病毒感染细胞 HIV-1感染人体后引起进行性的艾滋病病变，通常经历三个典型的时期，第一为急性感染期，表现为病毒血症；接着是无症状期，此时在淋巴器官中大多可检测出病毒的复制；后是免疫系统破坏，伴随病毒血症的再次出现。并产生继发性感染等而导致病人死亡。引起人体艾滋病的HⅣ-1病毒株有以下几种：①嗜巨噬细胞HIV-1株；②嗜T细胞HIV-1病毒株；③部分原代HIV-1分离株是双嗜性的，既感染嗜巨噬细胞，又感染T细胞[1-3]。
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癌基因 bc1一2和病毒在神经细胞凋亡中的关系
细胞凋亡是细胞接受某种或受到某些因素刺激后产生的一种主动的，由一些凋亡相关基因相互作用的细胞消亡过程，这与坏死不同。细胞凋亡是一种重要的生命现象，不仅出现在生理状态下，而且更与许多疾病相关联。发育过程中的神经细胞凋亡是保证机体正常发育和维持生理过程所必须的，而分化成熟的神经细胞凋亡过程则会引起病理性损害，如巴金森病和老年性痴呆[1]。病毒的感染和复制常与感染性疾病的细胞凋亡有关。在病毒感染早期，宿主细胞利用细胞凋亡以阻止病毒的复制和扩散。机体的免疫系统通过凋亡途径杀伤被感染细胞。另方面病毒在感染早期抑制细胞凋亡，以利病毒的存活、复制和扩散。
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TT病毒的基因变异分析与基因分型
我们对80例非甲～非庚型肝炎患者、血清ALT升高以及长期维持性血透患者(部分患者有输血史)进行检测，对二十余例 TTV分离株进行测序研究，结果如下： 提取患者血清DNA，巢式PCR扩增TTV。参照Okamoto等报道的N22分离株 TTV基因序列设计套式引物:n 5＇-ACA GAC AGA GGA GAA GGC AAC- 3＇(1892 ～ 1913),T2 5＇ - GGA TAC CTA TTAGCT C TC AT- 3＇(2187 - 2207), T3 5＇ -GGC AAC ATG TTA TGG ATA GAC- 3＇(1914- 1935) ,T4 5＇ - CCT C GC ATT TTACCA T TT CCA - 3＇(2165 - 2186)。
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应用双重聚合酶链反应检测乙型、丙型肝炎病毒
常规聚合酶链反应(PCR)方法对患者HBV和HCV需要分别检测，因而操作繁琐，费时费力，且增加了污染的机会，为此，我们建立了双重PCR技术，实现一步法同时进行HBV和HCV的检测。 选取肝病患者血清标本115例，20例正常对照标本采自HBsAg阴性、肝功能正常的献血员。核酸提取采用蛋白酶K消化，酚／氯仿抽提，乙醇沉淀，将提取的DNA和RNA复悬于焦碳二乙酯处理过的蒸馏水中，并加入2U RNA酶抑制剂Rnasin。PCR反应在核酸提取管中进行，总体积50μl，反应条件为10 mmol／L Tris·Cl(pH8.3)，50mmol／LKCl，2mmol／LMgCl2，0.5μmol／L HBV和HCV引物，0.2 mmol／LdNITP,AMVRT逆转录酶2U，Tag DNA聚合酶2U，RNA酶抑制剂Rnasin 10 U，混匀。
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全血金标检测试纸条法在HBsAg献血者初筛中的应用
目前，血站对献血者HBsAg的筛查，大多采用ELISA法，虽然该法特异性、敏感性均佳，但因操作繁琐，故不适用于非固定采血点对献血者的快速筛查，而未经筛查直接采集的血液，往往由于该项检验不合格而报废。采用全血金标试纸条法对献血者进行HBsAg初筛，几分钟内即可完成检验，降低了血液报废率。 1 材料与方法 1.1 原理 全血金标试纸采用胶体金免疫技术，在硝酸纤维素膜上预包被金标抗HBsAg单抗(Au-ssAb)，硝酸纤维素膜上检测线和对照线上分别包被抗HBsAg单抗(sAb2)和羊抗鼠kgG。检测时，样本血清中HBsAg可与胶体金-抗体结合形成复合物，由于层析作用，复合物沿纸条向前移动。
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单磷酸阿糖腺苷与海力特联合治疗慢性乙型肝炎的临床观察
应用抗病毒药物单磷酸阿糖腺苷(ARA-Amp)和免疫调节剂海力特治疗慢性乙型肝炎30例，取得了一定疗效，现报告如下。 1 材料和方法 1.1 病例选择本组60例均为住院患者，诊断符合1995年第五届全国传染病、寄生虫会议修订的诊断分型标准，并HBsAg、HBeAg、HBV DNA均阳性。全部病例过去半年未接受过病毒药物治疗，随机分为治疗组和对照组。治疗组：男21例，女9例，平均年龄34岁。慢肝轻度17例，中度9例，重度4例。对照组：男23例，女7例，平均年龄34岁。
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氧氟沙星、叠氮胸苷单独及与干扰素合用对黄病毒增殖的影响
选用氧氟沙星(OFLX)和叠氮胸苷(AZT)单独投入及与IFN并用，观察其抗病毒活性结果如下： 1 材料和方法 1.1 病毒和细胞所用黄病毒为乙型脑炎病毒JEV的JaGAr-01株。细胞是人肝癌细胞株HepG2。细胞培养所用培养液为DMEM加10％胎牛血清(FCS)。 1.2 感染病毒病毒感染剂量为l0 m.o.i(multiplicityinfection)，37℃吸附60min，在5％CO2孵箱中培养。将各种浓度的药物添加至含病毒的细胞培养液中，24h后采取培养上清液，测定病毒的含量。 1.3 病毒滴定用空斑形成方法。将含有病毒的培养上清液按比例稀释，在24孔培养板内单层培养的仓鼠肾细胞株BHK上，添加0.6％的甲基纤维素液和含有1％FCS的MEM培养液，3d后用甲醇固定，l％结晶紫染色，计算空斑数。
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二羟丙腺苷与高压氧联用对人工感染日本乙型脑炎病毒小鼠治疗作用的初步观察
目前临床上尚缺乏有效的针对乙型脑炎(下称乙脑)的药物治疗，近我们初步观察到一种核苷衍生物类化合物〔(RS)型二羟丙腺苷(RS)-9-(2，3-二羟丙烷基)腺嘌呤〕(下称(RS)-DHPA)与高压氧联合在小鼠体内对人工感染乙脑病毒的抑制作用，现报告如下。 乙脑病毒为P3～53株，以其不同浓度腹腔内接种于昆明纯种小鼠，测得其LD50为10-6.55/0.1 ml。实验中所用小鼠全为8 5～9.5 g/只，(RS)-DHPA纯品为比利时王国E De Clercq教授惠赠，用小鼠试选出无明显毒性作用的大剂量，作为实验之用。
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乙型肝炎患者表面抗原与抗体检测和分析
我们采用Abbott公司的Imx自动免疫分析仪及其微粒子酶免分析法进行HB-sAg、抗-HBs、HBeAg、抗-Hbe和抗-HBc的检测；采用美国Biatronics公司建立的Am-plisensor法进行PCR定量检测；采用PCR产物直接测序。统计学方法，率采用x检验；均数采用t检验；相关性采用直线回归分析。共调查317例，男254例，女63例，年龄2～77岁，平均(32.9±14.7)岁，共检出HBsAg与抗-HBs同时阳性者29例，总检出率9.15％，其中无症状感染者4.69％(3/64)、急性肝炎0(0／16)、慢性肝炎11.11％(16／144)、重型肝炎18.42％(7／38)和肝硬化5.45％(3／55)。
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人巨细胞病毒与大肠癌相关关系的研究
人巨细胞病毒(human cytomegalovirus，HCMV)与宫颈癌关系十分密切，但与大肠癌关系的报道较少。本文就HCMV感染及大肠癌p53基因与HCMV感染的相关性进行了研究。 1 材料和方法 1.1 标本来源 收集1994年～1996年白求恩医科大学中日联谊医院外科切除大肠癌组织共60例，存放于-80℃。均经病理证实，并结合临床进行了Dukes分期和组织分化程度分型。患者年龄在38～72岁之间，男42例，女18例。 1.2 DNA模板制备取-80C冻存组织约1 g，经组织研磨器研磨，加入1mlDNA裂解缓冲液置55℃ 1 h，95C 15mmin，经13 000 r／m min离心10 min，上清即为DNA模板。再0.8％～1％低电渗琼脂糖凝胶电泳，以排除降解的模板。
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一株HIV1变异株的发现
我们在进行序列分析过程中发现一株不同于以往国内外报道的新型HIV1的变异毒株。现报道如下：1 材料和方法1.1 前病毒DNA的提取某HIV1感染者300μLEDTA抗凝血，使用Promega公司的DNA提取试剂盒(Wizard GenomicDNA Purification Kit)提取HIV1前病毒DNA。1.2 HIV env基因c2-v3区的套式PCR扩增 以所提的HW1前病毒DNA为模板，利用一对外侧引物EP1，EP2(序列为，EP1：5＇-GGCAGTCTAGCA-GAAGAAGAGG-3＇：EP2：5＇-CCTACTTC-C TGCCACATG-3＇)和一对内侧引物EP3，EP4(序列为，EP3：5＇-GATCTGA-CAATTTCACGAACAAT TGC-3＇；EP4：5＇-C TGGGTCCCCTCCTGAAGGATG-3＇)进行nested-PCR反应。反应条件为94qC30s,55℃30s，72℃30s，35个循环；72℃C5min结束扩增。1.3 PCR扩增片段的克隆P CR扩增的特异性片段经Promega公司的PCR产物纯化试剂盒(WizardPCRprepsDNA pu-rification system)纯化后，与PGEM-T载体连接克隆于JM109宿主菌中
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RT-PCR检测不同人群庚型肝炎病毒感染
为了解成都地区HGV感染情况，我们采用逆转录.聚合酶链反应(RT-PCR)对职业献血员、健康自然人群和急慢性肝炎病人进行了检测。 1 材料和方法 1.1 对象成都职业献血员165名，各项体检均合格。成都键康自然人群406名，A～E肝炎血清标志均阴性，ALT正常。肝炎病人包括急性甲型肝炎32人，急性乙型肝炎87人，慢性乙型肝炎95人，慢性丙型肝炎23人，非A～E肝炎18人，这些病人均用酶联免疫吸附试验(ELSA)(上海科华试剂)测定血清病毒抗原／抗体证实。 1.2 HGV引物据5＇-NCR和NS5α区设计引物和捕获探针[2]，由北京赛百盛(美国)生物工程公司合成。5＇-NCR区扩增位于100-285核苷酸片段，NS 5α区扩增位于6 904-7 059核苷酸片段。
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乙型脑炎病毒高株部分基因序列分析
乙型脑炎病毒(JEV)高顺生株(高株)是我国学者于60年代从病人脑内分离到的乙脑病毒野毒株，其血凝活性的pH值较宽，与其他乙脑毒株不同，国内外对高株分子生物学研究尚未开展。我们对高株这两段基因保守区进行了DNA序列分析，以初步了解高株与其他乙脑野毒株基因序列的不同，为进一步阐明高株基因组结构与功能的关系奠定基础。 1 材料和方法 1.1 病毒的培养将中国预防医学科学院病毒学研究所虫媒病毒研究室冻存的感染高顺生野毒株的鼠脑在无菌状态下仔细研磨，离心取上清，10倍稀释后接种单层BHK细胞，数天后出现典型细胞病变(CPE)。
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急性呼吸道感染患儿巨细胞病毒感染的研究
巨细胞病毒(HCMV)在人群中感染非常普遍，但大多数呈亚临床不显性感染或潜伏感染，在宿主特殊的状态下，这种潜伏感染可被激活为其重要的生物学特征[1，2]。为研究小儿急性呼吸道HCMV感染，根据1994年全国小儿巨细胞病毒感染学术会议上拟定的诊断标准[3,4]，选用HCMV-IgM为HCMV活动感染指标，对250例冬春季急性呼吸道感染(ARI)患儿和50名同期健康儿童进行了HCMV-lgM、呼吸道合胞病毒IgM(RSV-IgM)，腺病毒IgM(AdV-IgM)特异抗体同步检测和部分临床资料分析。 1 材料和方法 1.1 病例选择 1996年11月～1997年3月、1997年11月～1998年3月两个冬春季节期间在开封市儿童医院门诊及呼吸病房住院，临床诊断为病毒性呼吸道感染的患儿250例。男158例，女92例，年龄40～12岁。对照组系同期在市儿童医院健康体检的健康儿童50例，男40例，女10例，年龄7个月～12岁。
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对几种肝纤维化诊断指标的评价
对104例病毒性肝炎患者同时进行了血清Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)及透明质酸(HA)等纤维化指标及肝组织病理学检查，以评价国产试剂在病毒性肝炎肝纤维化诊断中的意义。 1 材料和方法 1.1 研究对象 104例病人均为解放军302医院住院病人。男性93例，女性11例，年龄15～67岁。 1.2 诊断标准 按照1995年北京第五次全国传染病与寄生虫病学术会议修订的诊断标准。急性肝炎10例，慢性肝炎81例，晚期肝硬化14例(均为死亡患者)。 1.3 标本采集 肝穿活检前后2 d空腹抽血，分离血清，-20℃冻存备用。死亡患者死后立即肝穿，同时留取静脉血或心血分离血清。 1.4 试剂及方法 PCⅢ、HA采用放射免疫法，Ⅳ-C采用一步夹心EIA法。试剂分别购自重庆市肿瘤研究所和上海海医研究所。 1.5 统计分析 采用F检验。
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戊型病毒性肝炎1 7例临床分析
我们对17例急性、亚急性重症戊型肝炎进行了分析。 1 材料和方法 1.1 病例 17例戊型病毒性急性和亚急性重型肝炎患者均为1992～1996年间302医院的住院病人。男14例，女3例。平均年龄为50.35岁(21～68岁)；60岁以上者6人，占35.29％。急性重型5例，亚急性重型12例。临床诊断和分型按1995年北京全国传染病寄生虫病学术会议修定的标准。 1.2 检测方法和试剂乙型肝炎五项指标及抗-HBC IgM，抗-HCV、抗-HEV、抗-HEV lgM、抗-HAV lgM、抗-CMV lgM、抗-EBV IgM、抗-HD IgM及-RDA g的检测均采用ELISA方法。HBVM、HEVM及抗-HAV lgM诊断试剂盒由302医院制备。抗-HCV诊断药盒北京福盈生物工程有限公司提供。抗-EMVIgM及抗-EBVIgM试剂由德国豪迈公司提供。肝功能指标包括丙氨酸转氨酶、胆红质定量、球蛋白、白蛋白及凝血酶原活动度。
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230例甲胎蛋白阳性原发性肝癌病人血清HBV抗原抗体模式分析
原发性肝癌(PH C)与乙型肝炎病毒(HBV)感染的相关性已较明确，为探讨肝癌病人HBV感染状态，我们对230例甲胎蛋白(AFP)阳性确诊为PH C病人的HBV血清标志物进行了检测与分析。 1 材料和方法 230例PHC患者中，男200例，女30例，年龄28～77岁，平均52.84岁，为解放军302医院1995年至1998收治的病例，根据肝癌诊断标准，经临床、B超及CT证实且AFP阳性的PHC病人。AFP的检测采用放射免疫测定法，以AFP>400ng／ml判定为阳性；HBsAg、HBeAg、HBsAb的检测用双抗体夹心法。HBeAb及HBcAb的检测用竞争法。试剂盒由解放军302医院生产。
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戊型肝炎患者血清戊型肝炎病毒RNA的动态观察及意义
目前，国内外对戊型肝炎(HE)患者病毒血症已有研究，各家报道有明显不同，我们采用逆转录-聚合酶链反应方法检测32例HE患者系列血清，探明HE患者病毒血症持续时间和消长规律。 检测对象为中国医大二院传染科1995年1月至1996年10月期间住院患者32例，临床诊断为戊型肝炎。分别收集患者病后0～7 d、8～14 d、15～12 d、22～28d系列血清共125份，用异硫氰酸胍一步法抽提HEV RNA。引入一对外引物序列为：外正向引物(4459-4478)5＇- GCATTATGGA GGAGTGT GG-3＇，外反向引物 (4877-4858)5＇- CCAGG GCCC-CAATTCTTG-3＇，一对内引物序列为：内正向引物(4522--4539)5＇-GCGTG-GATCTTGCAGGCC-3＇，内反向引物(4741-4760)5＇-TTCAACTTCAA GCCACA GCC-3＇，进行2次PCR扩增。
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495例慢性重型肝炎患者疗效分析
现将302医院近10年收治的495例慢性重型肝炎患者的治疗效果分析如下。 1 材料和方法 1.1 一般资料495例患者系302医院住院病人，其中男性428例，女性67例，平均年龄43岁(8～73岁)。 1.2 诊断标准 符合1995年北京第五次全国传染病寄生虫病学术会议修订的慢性重型肝炎诊断标准。 1.3 治疗方法 治疗分3组。综合组189例，用6 912(复方茵陈)注射液、六合氨基酸、人血白蛋白、血浆(或鲜血)、支链氨基酸、强力宁、丹参及门冬氨酸、钾、镁等，并按病情使用脱氨、利尿、补钾、脱水、止血和抗感染等药物。促肝细胞生长素组178例，在同时使用综合组的基础上加用促肝细胞生长素80～200 mg加入5％葡萄糖或10％葡萄糖200ml中滴注，每日1次。G-I组128例，在同时使用综合组的基础上加G-I，10单位加入5％葡萄糖或10％葡萄糖400ml中滴注，每日1次。
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世界综合医学大会(2000香港)——世界传统医药日暨紫荆花医学成就奖颁奖典礼
为促进医学的经验交流与应用，发展综合医学，探讨优良的医学教学方法，以及中国加入WTO之后，中医药的发展战略，经与世界多国卫生部、医学机构商定于2000年10月22日-23日在香港举办“世界综合医学大会”。届时将有澳洲、英国、泰国、老挝、越南、印尼、柬埔寨等国家卫生部(局)的高层官员参加，并邀请欧美等地医药学术团体赴会，盛况空前，除进行学术交流外，还举行香港紫荆花医学成就奖颁奖典礼。会后还组织杰出代表赴新加坡、马来西亚、文莱／印度／英国学术访问。 大会特邀请嘉宾：老挝卫生部部长、越南卫生部副部长、泰国卫生部医疗司司长、中国中医药学会秘书长、澳大利亚维省卫生部官员、南京中医药大学校长 主办机构：香港国际传统医学研究会、泰国卫生部泰中医学交流中心、澳洲全国中医 药针灸学会联合会、中华医学会深圳分会 协办机构：英国世界传统医学会、加拿大世界传统医学会、香港理工大学、深圳市中西 医结合临床研究所等国内外15个医学团体或学术机构 邀请对象：医药卫生部门负责人、医院院长、知名医学专家和业务骨干、药厂及医疗器 械厂厂长、医药科技人员、医药卫生专业媒体负责人等 交流科目：医院管理、普通内科、外科、神经科、口腔医学、影像医学、老年医学及美容 医学等。交流形式分主题报告、分组研讨、招商洽谈(共六场) 参会要求：需提交2500字以内论文一篇及300字以内个人简介。2寸近照4张。 国内报名地址：深圳市振华路1号红会医院第一门诊部后座四楼深圳市中西医结 合临床研究所。 资料请寄：深圳市华侨城沙河邮局38号信箱邮编：518053 电 话：0755-6606533 6607533 6607066/6606874 6609401(宅) 传 真：0755-6600900 联系人：彭索福小姐/商鉴小姐E-mail：szjtn@public. Szptt. Net. Cn
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登革出血热并骨髓象异常一例
患者，男性，26岁，工人。因颜面、四肢水肿2个月，发热1个多月于1996年9月4日入院。缘患者于2个月前在广州市郊挖掘隧道时被蚊子叮咬双脚后于叮咬处出现红肿、丘疹与水疱，旋即出现颜面及四肢水肿，1个多月前开始发热；体温38℃～39.5℃，呈不规则型，伴全身肌肉、骨胳酸痛，并出现皮疹、皮肤瘀点，经抗炎等多种治疗无效，遂以"发热原因"入院(同期作业被蚊子叮咬者有3人患病，1～2周予一般治疗而愈)。既往体健，无肝炎、肾炎及结核病史。入院体查：体温38℃，脉搏100次／min，呼吸21次／min，血压16／10 kPa(1 kPa=7.5mmHg)；意识清楚，急性重病容，皮肤可见散在红色皮疹，压之褪色，双上肢内侧可见散在性瘀点，皮肤无黄染，双颌下可扪及3个花生米大小浅表淋巴结，活动，无压痛。
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