中华生物医学工程杂志
Chinese Journal of Biomedical Engineering 중화생물의학공정잡지
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香烟烟雾暴露对大鼠肺组织Wnt3a和β-catenin蛋白表达的影响
目的 探讨香烟烟雾暴露对大鼠肺组织Wnt3a和β-catenin蛋白表达的影响.方法 20只雌性SD大鼠,按随机数字表分为对照组和模型组,每组10只.模型组大鼠被动吸入香烟烟雾,每天2次,每次45 min；对照组大鼠不接触香烟烟雾.100d后处死动物,光镜下观察肺组织的病理形态学改变,免疫组化法检测肺组织α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Wnt3a和β-catenin蛋白表达,并测定2组大鼠支气管平滑肌厚度.结果 模型组大鼠肺组织呈现慢性炎性反应和肺气肿样改变,小气道壁及平滑肌层增厚明显.α-SMA主要表达于气道和血管的平滑肌层.模型组支气管平滑肌厚度高于对照组[ (3.06±0.62) μm比(1.86±0.43) μm,P＜0.05].Wnt3a和β-catenin主要表达于支气管上皮细胞和肺泡上皮细胞.模型组与对照组支气管上皮细胞Wnt3a蛋白表达分别为74.54±4.14、89.24±3.02；肺泡上皮细胞Wnt3a蛋白表达分别为91.97±2.50、110.46±3.85,组间比较差异均有统计学意义(均P＜0.05).模型组与对照组支气管上皮细胞胞质β-catenin蛋白表达分别为86.97±4.87、103.18±3.77;支气管上皮细胞胞核β-catenin蛋白表达分别为95.75±3.91、116.12±5.76;肺泡上皮细胞胞质β-catenin蛋白表达分别为106.24±4.57、128.81±3.96；肺泡上皮细胞胞核β-catenin蛋白表达分别为125.44±4.89、152.90±4.10,组间比较差异均有统计学意义(均P＜0.05).结论 香烟烟雾可诱导大鼠肺组织Wnt3a和β-catenin蛋白表达上调.
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不同培养体系对鼠表皮干细胞增殖和分化的影响
目的 探讨不同培养体系对表皮干细胞增殖、分化的影响,建立理想的调控表皮干细胞增殖、分化的培养体系.方法 酶消化和Ⅳ型胶原快速黏附法获取鼠表皮干细胞.分别在普通培养皿培养、与几丁质膜生物支架材料共培养及以几丁质膜生物支架材料作为载体植入裸鼠体内培养等不同培养体系下观察表皮干细胞生长情况.普通培养和与几丁质膜生物支架材料共培养4周后,对比表皮干细胞克隆形成率的差异.免疫组织化学染色观察表皮干细胞以几丁质膜为载体植入裸鼠体内后4周表皮干细胞的增殖、分化情况.结果 表皮干细胞在普通培养皿培养3d左右,细胞开始克隆增殖；12 d左右融合成片；传代培养后增殖能力逐渐减低,融合成片时间逐渐延长,传代培养3～4代后细胞终末分化,失去增殖能力.几丁质膜生物支架材料培养表皮干细胞,2周后呈棋盘式集落生长,几丁质膜生物支架材料上有大量的表皮干细胞小集落,集落上有大量的增殖细胞附着生长,扫描电镜下见几丁质膜生物支架材料纤维直径约10 μm,以纤维为主,上下两层呈纵横排列成十字孔,孔间有大量表皮干细胞集落.几丁质膜生物支架材料培养表皮干细胞4周后,其克隆形成率明显高于普通培养皿培养[(12.6±2.7)％比(5.7±1.1)％,P＜0.05].表皮干细胞几丁质膜生物支架材料植入裸鼠体内培养4周后,细胞大量增殖形成巢状排列,在表皮干细胞巢周围,可见有类似皮肤附件结构.结论 表皮干细胞在体外普通培养皿培养可增殖生长,但维持增殖时间较短；与几丁质膜生物支架材料共培养,可较长时间地维持表皮干细胞的增殖特性；植入体内后表皮干细胞大量增殖.
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核磁共振弥散峰度成像在脑中风诊断中的应用
目的 研究弥散峰度成像(DKI)对脑组织灰质和白质的描述以及在脑中风诊断中的应用.方法 采用2例正常人以及15例脑中风患者(包含9例脑梗死,急性、亚急性和陈旧性各占3例)的脑部核磁共振图像作为试验数据.针对每例数据各个像素位置,分别对9个不同弥散梯度场下各个信号强度进行非线性拟合得到弥散系数(D值)和弥散峰度(K值),进而做出ADC图和DKI图.观察比较分析各例在ADC图和DKI图的表现.结果 DKI成像具有更多的纹理细节,包含更丰富的组织特征.急性、亚急性脑梗死病灶在DKI图呈现高信号,陈旧性脑梗死病灶在DKI图呈现低信号,平均峰度相对值(rMK)分别为2.193±0.166,1.789±0.162,0.564±0.069.结论 DKI对脑组织尤其是灰质以及一些脑中风病灶的描述相对于ADC图包含更多的组织信息.脑梗死病灶的rMK值具有特征性演变规律.
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慢病毒转染骨髓间充质干细胞在脊柱融合中的作用
目的 评价慢病毒转染的骨髓间充质干细胞诱导大鼠脊柱融合的能力.方法 构建携带骨形态发生蛋白2(BMP-2)的慢病毒并将其转染到骨髓间充质干细胞中,观察细胞的碱性磷酸酶染色和活性.并将转染的细胞移植到大鼠脊柱融合模型中,8周后处死大鼠,对其脊柱标本进行手触力学测试,Micro-CT扫描和组织学切片观察.结果 慢病毒转染细胞的碱性磷酸酶染色明显好于未转染细胞(3.2±0.4比1.1± 0.2,P＜0.05).转染的细胞移植到大鼠体内8周后,X线、Micro-CT、手触力学测试和组织学切片均显示转染的大鼠脊柱标本全部达到骨性融合.而未转染的大鼠脊柱标本均未融合.结论 慢病毒转染的骨髓间充质干细胞能够诱导脊柱融合,可作为基因载体工具用于脊柱融合.
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基于模糊综合评判的大型医用设备购置决策系统的设计与开发
目的 设计与开发科学地购置和引进大型医用设备的系统.方法 从引进设备的社会市场条件、医院的自身条件等方面逐一进行分析和论证,构建综合评价体系,运用模糊数学理论建立数学模型,在Windows环境下开发设备购置决策系统.结果 本系统将大型医用设备购置中定性问题定量化解决,为医院决策者解决决策问题.结论 通过应用实例,体现了大型医疗设备购置系统的科学化、简单化和可操作化,具有实际的指导意义.
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短时受精改善精子形态学异常及年龄对体外受精结局的影响——随机前瞻对照研究
目的 探讨短时受精是否能改善年龄、精子形态学异常对体外受精-胚胎移植(IVF-ET)结局的影响.方法 将200个IVF-ET周期进行随机分组比较,其中试验组1095个卵子行短时受精(精卵混合2h),对照组1003个卵子行常规受精(精卵混合约16～20 h).同时选取男方精液形态学异常和女方年龄≥35岁时,主要比较短时受精和常规受精的受精率、胚胎质量以及妊娠率情况,并进行统计分析.结果 短时受精组与常规受精组患者的基本情况,以及完全不受精率和受精率＜30％的周期率差异无统计学意义.短时受精组和常规受精组优质胚胎率分别为29.8％(192/645)和24.7％(142/576),前者高于后者(P＜0.05).在男方精液正常形态学＜10％的周期中,短时受精组和正常受精组的多原核率分别为6.5％(32/490)和10.5％(34/325)；而优质胚胎率分别为29.5％( 84/285)和15.2％(30/197),差异均有统计学意义(P＜0.05).在女方年龄≥35岁的周期中,短时受精组优质胚胎率为28.6％(42/147),明显高于正常受精组的13.1％(17/130),差异有统计学意义(P＜0.05).终短时受精组的植入率、妊娠率、临床妊娠率均稍高于常规受精组,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 对于所有IVF的不孕患者特别是当男方精液形态学异常时,短时受精(2 h)可明显降低多原核受精率及提高优质胚胎率；当女方年龄≥35岁时,短时受精亦可明显提高优质胚胎率,从而改善妊娠结局.
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人β防御素2在子宫内膜异位症和子宫腺肌症患者异位和在位内膜组织中的表达
目的 检测人β防御素2(hBD-2)在正常子宫内膜、子宫内膜异位症(EMS)和子宫腺肌症(AM)患者的异位和在位内膜组织中的表达及其临床意义.方法 选择2007年2月至2008年4月本院本科的EMS(卵巢内膜异位囊肿)、AM和非EMS(子宫肌瘤)患者各25例,分别取卵巢异位囊肿囊壁组织(EMS异位内膜组)、AM异位病灶组织(AM异位内膜组)和两组相应的在位子宫内膜组织(EMS在位内膜组和AM在位内膜组)以及非EMS患者的子宫内膜组织(对照组).采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)和原位杂交检测各组内膜组织中hBD-2和IL-1β、IL-6、TNF-α等的基因表达及其相关性.结果 将各组的hBD-2、IL-1β3、IL-6和TNF-α的基因表达水平进行比较,仅EMS异位内膜组显著高于EMS在位内膜组和对照组(M0.3684比0.0343、0.0034;M0.1011比0.0295、0.0080;M0.0040比0.0008、0.0005;M 0.0026比0.0005、0.0002；均P＜0.05)),而EMS在位内膜组与对照组、AM异位内膜组与AM在位内膜组、AM在位内膜组与对照组之间差异均无统计学意义(P＞0.05).EMS异位内膜组hBD-2的基因表达水平与该组的IL-1β和TNF-α的基因表达水平呈正相关(r=0.867,r=0.683,P＜0.05),与IL-6的基因表达水平无相关性(r=0.167,P＞0.05).结论 EMS异位内膜组织中hBD-2的高表达可能参与EMS的形成,可能与EMS患者体内IL-1β和TNF-α的上调有关.
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聚乙二醇改性去细胞猪主动脉瓣膜构建复合支架及其体外细胞毒性试验
目的 对去细胞猪主动脉瓣膜进行聚乙二醇(PEG)化改性,并评价改性后复合支架的细胞毒性.方法 合成功能基团为丙烯酰基的枝化状聚乙二醇衍生物,在去细胞猪主动脉瓣膜引入巯基,通过迈克尔加成反应完成PEG对去细胞猪主动脉瓣膜的交联,并作PEG改性前后瓣膜的生物力学测定.制作去细胞瓣膜的浸提液,浸提液分为单纯去细胞瓣膜组、PEG改性去细胞瓣膜组和阴性对照组(培养液),采用CCK-8法检测复合支架的浸提液对人脐静脉内皮细胞增殖率的影响,评价其细胞毒性.结果 PEG改性去细胞瓣膜反应条件温和,改性效果确切.复合瓣膜支架的抗拉强度明显高于去细胞瓣膜[(7.53±0.29)MPa比(5.65±0.24)MPa,P＜0.05],但与天然瓣膜[(7.68±0.20)MPa]差异无统计学意义(P＞0.05).复合支架和去细胞瓣膜毒性评级均0级,与阴性对照组差异无统计学意义(P＞0.05).人脐静脉内皮细胞经各浸提液的培养液培养后形态良好,增殖旺盛.结论 PEG改性能明显改善去细胞猪主动脉瓣膜的力学性能,且改性后的复合支架无细胞毒性,为进一步研究提供依据.
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基于人工神经网络的肺癌细胞形态学诊断模型的建立及应用
目的 使用纤维支气管镜刷片细胞形态学定量参数建立基于人工神经网络(ANN)的诊断模型,并验证其在辅助诊断肺癌中的价值.方法 利用HMIAS-2000医学图像分析系统,对组织病理学确诊的138例患者纤维支气管镜刷片细胞的细胞核进行形态定量研究,包括肺腺癌48例、肺鳞癌28例、肺小细胞癌22例,肺良性病变40例.取系统误差阈值为10-8,随机数字法选取22例肺癌、8例肺良性病变对获得的22项参数进行ANN建模及模型训练,并用盲法测试验证模型对肺癌诊断的敏感性和特异性.结果 所建立的ANN模型经过18次训练后即可达到误差要求.ANN模型诊断肺癌的敏感性为94.7％(72/76),特异性为96.9％(31/32).结论 使用纤维支气管镜刷片细胞形态学定量参数成功建立了基于ANN的诊断模型,对肺癌的鉴别诊断具有一定的应用价值.
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超声检查对克罗恩病患者疾病活动度的评估价值
目的 探讨超声检测对克罗恩病内镜下疾病活动度的评估价值.方法 收集2009年3月至2011年3月在本院就诊或随访的克罗恩病患者62例,采用克罗恩病简单内镜下评分将疾病分为非活动性病变和活动性病变,然后分别通过普通超声检测病变肠壁厚度、彩色多普勒超声进行肠壁血流分级、对比增强超声定量获取肠壁感兴趣区(ROI)灰度值上升百分率.采用受试者工作特征曲线来评估上述3项指标对内镜下疾病活动度的评估价值.结果 内镜检查显示,62例克罗恩病患者中活动性病变44例,非活动性病变18例.活动性与非活动性克罗恩病患者超声检测显示肠壁厚度分别为(5.57± 1.73) mm和(4.38±2.16)mm,肠壁血流2～3级者分别有28例和3例,肠壁ROI灰度值上升百分率分别为(82±27)％和(40％±25)％,差异均有统计学意义(均P＜0.05).选择4.8 mm作为肠壁厚度的佳截点,其评估内镜下克罗恩病活动度的敏感度、特异度和准确度分别为86.4％、66.7％和80.6％.肠壁血流分级评估内镜下克罗恩病活动度的敏感度、特异度和准确度分别为63.6％、83.3％和69.4％.选择55％作为肠壁ROI灰度值上升百分率的佳截点,其评估内镜下克罗恩病活动度的敏感度、特异度和准确度分别为93.2％、83.3％和90.3％.结论 相比普通超声和彩色多普勒超声,对比增强超声的定量检测能够有效地将肠镜下不同活动度的克罗恩病区别开来,可作为评估克罗恩病患者疾病活动度的理想方法.
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BD静脉留置针在乳腺癌改良根治术后皮下积液的应用疗效
目的 观察BD静脉留置针在乳腺癌改良根治术后皮下积液的应用疗效.方法 2008年1月至2009年12月本院78例乳腺癌改良根治术后出现皮下积液的患者完全随机分常规组(常规注射器处理)和试验组(BD静脉留置针处理),记录2组患者住院天数、手术后住院天数,伤口愈合程度,并进行对比分析.结果 试验组住院天数、手术后住院天数均明显低于常规组[ (13.60±3.42)d比(18.84±6.82)d,(10.23±2.66)d比(13.97±5.74)d,P＜0.05].体质量小于60 kg的患者,试验组比常规组的优势更明显(P＜0.05).结论 采取BD静脉留置针引流方式处理乳腺癌改良根治术后皮下积液有一定可行性,值得推广.
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舒芬太尼复合罗哌卡因蛛网膜下腔和硬膜外联合麻醉分娩镇痛对新生儿的影响
目的 观察舒芬太尼复合罗哌卡因蛛网膜下腔和硬膜外联合麻醉分娩镇痛对新生儿的影响.方法 选择产科无椎管内麻醉及无阴道试产禁忌证的足月单胎头位初产妇100例,随机分为两组.Ⅰ组(n=50)产妇给予0.5 mg/L舒芬太尼联合0.1％罗哌卡因,蛛网膜下腔麻醉单次用药1.5 ml,硬膜外自控镇痛持续剂量5 ml/h,锁定时间15 min.Ⅱ组(n=50)产妇给予0.1％罗哌卡因,蛛网膜下腔麻醉单次用药1.5 ml,硬膜外自控镇痛持续剂量5 ml/h,锁定时间15 min.观察分娩镇痛效果,于分娩镇痛开始后10(T1)、30(T2)、60 min(T3)及120 min(T4)记录产妇镇痛评分(VAS评分),记录镇痛泵的进药容量、总按压次数(D1)/实际有效进药次数(D2)值.两组新生儿出生后即行血气分析,记录新生儿阿氏评分(Apgar),新生儿出生后连续5d进行新生儿神经行为评分(NBNA)及测定新生儿黄疸指数、体质量及血糖.结果 两组产妇T1～T4时点VAS评分的差异无统计学意义.D1/D2比值在T1、T2时点差异无统计学意义,而在T3、T4时点Ⅱ组高于Ⅰ组(2.5±1.0比1.5±0.9,2.8±1.2比2.1±0.6,均P＜0.05).镇痛泵的进药总量Ⅱ组也高于Ⅰ组[ (21.2±3.1) ml比(12±4.5) ml,P＜0.05].两组新生儿出生后5d内的NBNA、黄疸指数、生理性体质量下降幅度及血糖之间差异均无统计学意义.结论 0.5 mg/L舒芬太尼联合0.1％罗哌卡因蛛网膜下腔和硬膜外联合麻醉分娩镇痛可提供良好的镇痛效果,对新生儿具有良好的安全性.
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光棒与插管型喉罩在辅助气管内插管中的比较
目的 比较光棒与插管型喉罩在盲探气管插管中应用的效果.方法 80例择期全身麻醉手术患者,年龄48 ～ 72岁,美国麻醉医师协会分级(ASA)Ⅰ～Ⅱ级,Mallampatis Ⅰ～Ⅱ级,随机分为光棒组(G组)和插管型喉罩组(H组),每组40例,麻醉诱导用药相同.记录两组插管情况及插管时间,于麻醉诱导前3 min (T0)、插管后1 min (T1)、3 min (T2)、5 min(T3)记录患者的平均动脉压(MAP)、心率(HR)变化,记录拔管后患者不良反应发生情况.结果 G组首次插管成功率为80％,二次插管成功率为15％；H组首次插管成功率为85％,二次插管成功率为12％,两组总成功率差异无统计学意义.插管时间G组为(40.2±14)s,明显短于H组(72.4±12)s(P＜0.05).两组插管后1 min、3 min患者的MAP较诱导前升高,HR较诱导前增快[G组(93±18)、(86±13)mm Hg和(70±15)bpm,H组(90±15)、(88±12)mm Hg和(72±9)bpm,1 mm Hg=0.133 kPa,(P＜0.05)],组间比较差异无统计学意义.拔管后呛咳、咽痛等不良反应两组亦差异无统计学意义.结论 光棒与插管型喉罩在盲探气管插管中成功率高、并发症少、对血流动力学影响轻微,是安全有效的气管插管器具.
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骨质疏松症诊断与骨密度测定方法
骨质疏松症的主要发病机制是骨重建失衡,在遗传、内分泌、年龄和细胞因子等诸多因素影响下,骨形成和骨吸收失耦联,导致骨量减少和骨微结构改变,骨折危险性增高.骨质疏松症诊断需依赖骨密度测定[1].Broe等[2]认为骨密度下降是引起骨折的严重危险因素,骨密度测定可预测骨折风险[3].
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丝裂原活化蛋白激酶激活的蛋白激酶2的研究进展
丝裂原活化蛋白激酶激活的蛋白激酶2 (mitogen -activated protein kinase activated protein kinase 2,MK2)属于丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶家族,是p38的底物之一[1].MK2参与体内许多生理功能的调控,包括应激与炎性反应、细胞迁移、肌动蛋白重构等,其对炎性因子的调节作用格外受到重视[2-3].研究表明,MK2参与了动脉粥样硬化、高血压、阿尔茨海默病、银屑病、关节炎和急性胰腺炎等疾病的炎性反应过程[4].因此,对MK2的研究将为上述疾病的防治提供新的方向.
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靶向Atp6i和T细胞免疫应答cDNA7的小干扰RNA载体构建及其腺相关病毒重组颗粒的制备
目的 构建靶向Atp6i和T细胞免疫应答cDNA7(TIRC7)的RNA干扰重组体,包装成腺相关病毒(AAV)重组颗粒,为使用该干扰重组体进行体内外基因治疗相关疾病提供依据.方法 设计特异性针对Atp6i和TIRC7基因共同区域的小干扰RNA序列,连接到经Xba Ⅰ和BglⅡ酶切线性化的pAAV.H1载体上并转化DH5α菌株,提取质粒行酶切鉴定后进行测序分析.将酶切及测序分析鉴定成功的小干扰RNA序列与pAAV-RC、pHelper采用磷酸钙沉淀法共转染AAV-293细胞,复制、包装组成AAV.H1Atp6i重组病毒颗粒,以磷酸盐缓冲液(PBS)作为空白对照组,AAV.H1Luc作为阴性对照组,荧光显微镜观察转染效率.Western免疫印迹检测AAV.H 1Atp6i重组病毒颗粒对TIRC7蛋白表达的影响.结果 成功构建靶向Atp6i和TIRC7的RNA干扰重组体.重组质粒、pAAV-RC及pHelper成功转染AAV-293细胞,转染效率近100％,成功包装成AAV.H1Atp6i重组病毒颗粒.Western免疫印迹显示TIRC7蛋白在空白对照组、阴性对照组及AAV.H1Atp6i处理组均有表达,相对分子质量为75 000,AAV.H1Atp6i处理组TIRC7蛋白表达较空白对照组和阴性对照组均下降了80％ (0.271 ±0.072比0.988±0.042、0.992±0.053,均P＜0.05).结论 成功获得靶向Atp6i和TIRC7的RNA干扰重组体以及AAV.H1Atp6i重组病毒颗粒,可以干扰TIRC7蛋白的表达.
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肿瘤显像剂S-11C-甲基-L-半胱氨酸的细胞摄取机制研究
目的 探讨肿瘤细胞摄取S-11C-甲基-L-半胱氨酸(11C-MCYS)的机制.方法 将Hepa1-6肝癌细胞分为Na+依赖组(NaCl组)及非Na+依赖组(氯化胆碱组)进行氨基酸转运实验.每组又分为对照组、L-氨基酸转运载体抑制剂2-氨基二环-2,2,1-庚烷-2-羧酸(BCH)组、转运系统A和ASC的抑制剂α-甲基-氨基异丁酸(MeAIB)组、MeAIB+丝氨酸组,分别加入11C-MCYS(400μ1 0.925 MBq/ml)、11C-MCYS(200μl 1.85 MBq/ml)+阻滞剂BCH(200μl 15 mmol/L)、11C-MCYS(200μl 1.85 MBq/ml)+阻滞剂MeAIB(200μl 15 mmol/L)以及11C-MCYS (200μl 1.85 MBq/ml)+阻滞剂MeAIB+丝氨酸(200μl15 mmol/L).作用4 min后终止培养应用γ计数仪测量细胞放射性活度.将Hepal-6肝癌细胞分为5组,各组均加入200 μl11C-MCYS( 1.85 MBq/ml)后分别加入50、100、200、300、350μmol/L浓度不等的MCYS进行竞争抑制实验.培养4 min后终止培养应用γ计数仪测量细胞放射性活度.结果 无论是否有Na+存在,对照组、BCH组、MeAlB及MeAIB+丝氨酸组对11C-MCYS摄取的差异均无统计学意义(均P＞0.05).MeAIB组和MeAIB+丝氨酸组中的NaC1组细胞放射性活性与氯化胆碱组相比差异均无统计学意义(18 958.18±97.32比20 582.27±196.32,18 385.24±122.96比21 620.54±131.41,均P＞0.05),两者均不能抑制Na+非依赖性氨基酸转运载体的转运.而BCH组中的NaC1组细胞放射性活性高于氯化胆碱组(2587.21±30.25比2340.61±21.09,P＜0.05),可见BCH能明显抑制Na+非依赖性氨基酸转运体对11C-MCYS的转运.不同浓度MCYS(50 ～ 350 μmol/L)作用下肿瘤细胞对11C-MCYS摄取差异无统计学意义(均P＞0.05).结论 肿瘤细胞摄取11C-MCYS是通过非Na+依赖的L-氨基酸转运系统进行转运的,极少涉及氨基酸转运系统A和ASC.
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RNA干扰同源盒A10表达对K562细胞增殖及凋亡的影响
目的 通过构建靶向同源盒A10(HOXA10)的真核表达载体,探讨利用RNA干扰沉默HOXA10基因对人慢性髓系白血病细胞株K562增殖和凋亡的影响.方法 根据筛选的针对HOXA10的特异性有效小干扰RNA(siRNA)序列设计合成短发夹RNA(shRNA)寡核苷酸链,构建pGPHI-GFP-Neo-HOXA10真核表达载体并测序,应用阳离子脂质体转染K562细胞.实验分为细胞对照组(仅加等量细胞及培养基),阴性对照组(脂质体转染阴性对照质粒)、实验组(脂质体转染pGPHI-GFP-Neo-HOXA10).转染载体24 h后利用RT-PCR检测各组HOXA10 mRNA表达；转染载体24、48、72 h后应用MTT法检测各组细胞增殖并计算细胞抑制率；转染载体48 h后应用流式细胞术检测各组细胞凋亡.结果 成功构建pGPHI-GFP-Neo-HOXA10载体并转染K562细胞.与细胞对照组和阴性对照组比较,实验组转染载体能有效降低HOXA10 mRNA的表达水平[(38.86±4.49)％比(88.52±9.24)％、(86.75±7.38)％,P＜0.05],而阴性对照组与细胞对照组比较差异则无统计学意义(P＞0.05).与阴性对照组比较,实验组载体作用于K562细胞24、48、72 h后,细胞增殖能力均明显下降,细胞抑制率明显升高[(39.92±0.74)％比(7.98±5.52)％;(55.62±1.18)％比(8.27±3.45)％;(66.30±1.26)％比(8.63±3.58)％;均P＜0.05].实验组细胞凋亡率较细胞对照组、阴性对照组也显著升高[(22.29±1.67)％比(9.82±0.69)％、(10.14±0.96)％,P＜0.05],而阴性对照组与细胞对照组比较差异则没有统计学意义(P＞0.05).结论 构建的真核表达载体pGPHI-GFP-Neo-HOXA10可有效沉默K562细胞中HOXA10基因的表达,能明显抑制K562细胞增殖并诱导其凋亡.
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检测鼠疫耶尔森菌LcrV抗体的上转换发光技术免疫层析试纸条的制备及应用
目的 本研究旨在制备一种用于检测鼠疫耶尔森菌LcrV抗体的上转换发光技术(UPT)免疫层析试纸条.方法 通过在试纸条分析膜检测带处固定抗原,质控带处固定抗体,结合垫位置半固定将上转换发光(UCP)颗粒标记的抗原,制备出了双抗原夹心模式的LcrV抗体检测UPT免疫层析试纸条.对制备成型后的试纸条进行了线性和灵敏度、准确性、及热稳定性4个方面的性能评价.后用此试纸条检测了40份自然感染鼠疫的兔和人血清标本,并将结果与ELISA检测结果进行了比较.结果 试纸灵敏度达0.97 mg/L,对所测17份猴血清标本的检测准确度为100％,在37℃的稳定存放期为10d.试纸对40份实际血清标本的检测结果与ELISA检测结果一致.结论 试纸有良好的灵敏度和线性检测能力.
| 年 | 期数 |
| 2018 | 01 02 03 05 06 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 |
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| 2000 | 01 02 03 04 |
