中华生物医学工程杂志
Chinese Journal of Biomedical Engineering 중화생물의학공정잡지
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生物玻璃-纳米羟基磷灰石梯度涂层的生物相容性研究
目的 对生物玻璃-纳米羟基磷灰石(BG-nHA)梯度涂层的生物相容性作初步的评价.方法 用低温烧结法在钛合金表面制备生物玻璃纳米羟基磷灰石梯度涂层,利用L929细胞检测梯度涂层材料的细胞毒性.取体外分离培养扩增的人骨髓基质干细胞(hBMSC),接种于涂层材料上,通过绿色荧光蛋白染色、扫描电镜和MTT法观察细胞的黏附和生长情况.结果 生物玻璃-纳米羟基磷灰石梯度涂层的细胞毒性分级为1级,人骨髓基质干细胞可以在涂层材料表面黏附和生长.结论 生物玻璃-纳米羟基磷灰石梯度涂层有良好的生物相容性,具有潜在的临床应用前景.
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稳定表达表皮生长因子受体293细胞系的建立及其生物学特性研究
目的 建立稳定表达野生型表皮生长因子受体(EGFR)全长的293细胞系.方法 通过脂质体瞬间转染的方法将含有EGFR全长的质粒转染293细胞系.利用抗生素筛选的方法使转染阳性的细胞扩增,单克隆化,进一步稳定传代.通过Western印迹的方法挑选高表达克隆,进而使用MTT法测细胞增殖活性.反复传代、冻存、复苏鉴定表达的稳定性.结果 获得1株稳定表达EGFR的293细胞系,命名为WT293,且转染前后细胞生长速度存在差异.结论 pcDNA3.1(一)载体能够作为稳定表达的载体用于筛选.稳定表达EGFR的293细胞系为配体受体相互作用及靶向EGFR的抗肿瘤药物作用机制的研究提供了实验素材和理论依据.
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人支气管上皮细胞GCLC基因调控区ARE及E-box顺式调控元件调控功能的研究
目的 通过对人γ-谷氨酰半胱氨酸酶催化亚单位(GCLC)基因调控区的ARE及E-box顺式调控元件诱导缺失突变,研究它们在人支气管上皮细胞内对GCLC基因转录调控功能的影响.方法 应用PCR方法克隆人GCLC基因调控区的大部分核苷酸序列,构建表达虫荧光素酶报告基因的野生型质粒PL45.采用PCR重叠延伸产生特异位点诱变的方法对ARE及E-box顺式调控元件进行缺失突变,构建相应的突变型质粒PLdel-ARE及PLdel- E-box.通过瞬时基因转染方法将上述质粒转染人支气管上皮细胞系16HBE,观察基因突变后的基因转录调控功能.结果 质粒PL45的虫荧光素酶相对活性值为9949.75±1441.33、质粒PLdel-ARE的虫荧光素酶相对活性值为21258.75±1563.64、质粒PLdel-E-box的虫荧光素酶相对活性值为17082.00±89.51.与野生型质粒PL45相比,PLdel-ARE、PLdel-E-box突变型质粒表达的虫荧光酶相对活性值显著上升.结论 ARE及E-box顺式调控元件具有负性调控作用.
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头孢西丁诱导产ACT-1型AmpC酶大肠埃希菌的比较蛋白质组学研究
目的 研究产AmpC酶大肠埃希菌在头孢西丁诱导前后的蛋白质谱差异,筛选有价值的靶位.方法 提取产ACT-1 AmpC酶大肠埃希菌在头孢西丁诱导前后的全菌蛋白,应用双向凝胶电泳技术分析和Blue silver法染色.凝胶图像分析后,对差异蛋白质进行MALDI-TOF质谱分析.结果 在所鉴定的8个差异蛋白当中,AmpC酶、外膜蛋白Ⅱ和转座酶表达显著上调,而磷酸转移酶系统的葡萄糖特异性组分ⅡA蛋白、抗碲酸盐蛋白、丙三醇磷酰基二酯酶、硫醇过氧化物酶及细菌分化蛋白FtsZ表达下调.结论 所鉴定的这些差异蛋白将为阐明产AmpC酶大肠埃希菌耐药产生的机制提供线索,也为筛选具有潜在价值的靶位提供理论依据.
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Kiss-1及基质金属蛋白酶9在结肠癌组织中的表达及意义
目的 检测Kiss-1及基质金属蛋白酶9(MMP-9)在结肠癌组织中的表达,探讨其临床意义.方法 采用链霉菌抗生物素蛋白-过氧化酶连接(SP)法检测68例结肠癌,26例结肠腺瘤及26例正常结肠组织中Kiss-1及MMP-9的表达情况,分析其与各种临床病理参数的关系及两者表达的关联性.结果 Kiss-1蛋白metastin在结肠癌组中的表达率(48.5%)明显低于结肠腺瘤组(80.8%)及正常结肠组(96.2%),并且其在结肠癌组中的表达率在不同的组织学分级、肌层浸润深度及淋巴结转移中差异有统计学意义(P均<0.05).MMP-9在结肠癌组中的表达率(75%)明显高于结肠腺瘤组(38.5%)和正常结肠组(15.4%),其在结肠癌组中的表达率在不同的肌层浸润深度、淋巴转移中差异有统计学意义(P均<0.05).Kiss-1蛋白metastin与MMP-9在结肠癌中的表达呈相反的趋势,有关联性(P<0.01).结论 Kiss-1蛋白metastin的表达下调和MMP-9的表达上调可能与结肠癌的浸润、转移有关.
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交联透明质素特性的研究
目的 研究交联透明质素的特征和性能,为其应用于临床提供理论依据.方法 采用扫描电镜-能谱仪分析交联透明质素的化学成分.采用傅立叶变换红外光谱法对交联透明质素结构进行分析.使用旋转流变仪测定交联透明质素凝胶的储能模量、耗能模量及粘度等流变学性能的动态变化.采用激光粒度仪测定凝胶中微粒的大小及分布.结果 能谱分析显示交联透明质素中主要成分与天然透明质素相同,但多了硫原子,该元素来自交联剂.红外光谱测定显示,交联透明质素的吸收特征基本与未交联透明质素相似,只是在示硫砜键振动的吸收加强.交联透明质素凝胶的储能模量、耗能模量显著高于天然透明质素凝胶,与频率的依赖性不明显,表现为强凝胶弹性体特征,凝胶微粒平均粒径约为500 μm.结论 交联透明质素是天然透明质素与二乙烯基砜交联反应形成的多聚物,该多聚物溶胀于水后生成水不溶性凝胶.交联透明质素微粒凝胶制剂具有稳定性好和粘弹性高等优点,有利于进一步拓展其临床应用.
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细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4融合蛋白抑制狼疮肾炎患者外周血单个核细胞B7分子表达及抗体产生
目的 探讨细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4融合蛋白(CTLA-4Ig)对活动期狼疮肾炎(LN)患者外周血单个核细胞(PBMC)细胞表面B7-1(CD80)和B7-2(CD86)表达的影响及其对抗双链DNA(dsDNA)抗体和免疫球蛋白产生的影响.方法 将18例活动期LN患者的抗凝血标本随机分为LN的CTLA-4Ig处理组(LN-T组9例)和普通培养组(LN-NC组9例).另以14例正常人的抗凝血标本为对照,随机分为正常人的CTLA-4Ig处理组(NC-T组7例)和普通培养组(NC-NC组7例).用密度梯度离心法分离PBMC.处理组加入CTLA-4Ig(10 ng/L)、普通培养组加入等量普通培养基37℃孵育72 h后,采用流式细胞仪技术检测PBMC细胞表面B7-1和B7-2分子的表达;ELISA法检测孵育液中抗dsDNA抗体、IgG及IgM水平.结果 活动期LN患者CTLA-4Ig处理组与普通培养组比较,PBMC表面B7-2分子表达明显下降(P<0.01);B7-1分子表达无显著变化(P>0.05);孵育液中抗dsD-NA抗体、IgG及IgM的生成均明显减少(P<0.01).而正常人的两组间各指标差异均无统计学意义(P>0.05).结论 CTLA-4Ig可抑制活动期LN患者的PBMC表面B7-2分子的表达,并可减少其抗dsDNA抗体、IgG及IgM的分泌.
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激光偏振光扫描仪测量正常和近视眼视网膜神经纤维层厚度及影响因素研究
目的 评价激光偏振光扫描仪(GDxVCC)测量正常人及近视眼视网膜神经纤维层(RN-FL)厚度并分析其与年龄、性别、眼别、屈光度间的相关关系.方法 用GDxVCC测量正常人(正视眼)161例240只眼和近视眼99例167只眼的RNFL厚度.分析正常人性别间、眼别间RNFL厚度的差异.用相关及回归方法分析RNFL与年龄及屈光度之间的相关关系.结果 240只正视眼的RNFL厚度全周平均值(57.31±5.31)μm、上方平均值(69.97 ±7.32)μm、下方平均值(68.67±7.56)μm.男性与女性间平均厚度差异无统计学意义(P=0.062~0.934);左右眼间平均厚度差异无统计学意义(P=0.577~0.689).RNFL平均厚度与年龄呈负相关(r=-0.239,P=0.007),回归方程为RNFLT=-0.073×年龄+60.284.近视患者的RNFL厚度全周平均值(59.62±5.69)μm、上方平均值(71.88 ±7.97)μm、下方平均值(71.80±8.39)μm.RNFL平均厚度与近视度绝对值呈负相关(r=-0.341,P=0.008),同归方程为RNFLT=-0.758×屈光度绝对值+63.038.结论 激光偏振光扫描仪可以精确测量RNFL厚度.正常人RNFL厚度性别间、眼别间差异无统汁学意义.随着年龄的增长,RNFL厚度逐渐变薄.随着近视屈光度的增加,RNFL厚度逐渐变薄.
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专用四肢关节低场MR在踝关节韧带急性损伤中的应用
目的 评价专用四肢关节低场MR在踝关节韧带急性损伤中的应用价值.方法 回顾分析23例踝关节急性创伤患者韧带和骨质损伤的MR表现.结果 23例踝关节损伤包括外侧副韧带损伤15例、内侧副韧带损伤3例和内外侧副韧带共同受累5例,其中伴7例骨挫伤、4例骨折及10例踝骨关节炎.MR检查能全面直观显示多条韧带、骨和软骨结构损伤的范围程度.结论 专用四肢关节低场MR在踝关节韧带损伤方面具有良好的应用价值,能全面评价踝关节损伤,为临床治疗提供依据.
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乳腺隐匿性病灶切除术前简易X线定位方法的应用
目的 探讨应用简易X线定位方法对乳腺隐匿性病灶切除的应用价值.方法 在普通钼靶乳腺机上应用简易X线定位法,对31例乳腺隐匿性可疑病变进行病灶切除术前定位.结果 30例一次定位成功,1例二次定位成功,定位满意度96.8%,病灶切除率为100%.结论 简易X线定位方法可以指导临床准确切除病灶,并且安全可靠、价格低廉、创伤性小,具有临床应用价值.
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HIV基因疫苗的研究进展
根据近来的报道,全世界有5 000 000人感染人类免疫缺陷病毒(HIV),3 000 000人死于艾滋病(获得性免疫缺陷综合征,AIDS).HIV的广泛流行将给全人类的健康带来严重的危害.因此,研发一种安全而有效的HIV疫苗是预防艾滋病的有效且经济的方法.
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登革基因疫苗研究进展
登革热是由登革病毒引起的一种严重的虫媒病毒性传染病[1].登革病毒属于黄病毒科(Flaviviridae)黄病毒属(Flavivirus),其基因组为单股正链RNA,长约11kb,共编码3种结构蛋白(C、prM、E)和7种非结构蛋白(NS1、NS2a、NS2b、NS3、NS4a、NS4b、NS5)[2].
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大鼠远端肺动脉平滑肌细胞分离与原代培养
目的 探索简便、高效原代培养大鼠远端肺动脉平滑肌细胞的方法,为研究肺动脉高压发病机制提供实验材料.方法 采用显微操作和分次酶消化法进行原代培养并与传统酶消化法比较.对培养的细胞进行形态学观察、平滑肌α-actin免疫荧光细胞化学法鉴定、激光扫描共聚焦显微镜计算纯度.结果 两种酶消化法均可获得高纯度的远端肺动脉平滑肌细胞.镜下细胞呈典型的"峰-谷"状生长,胞质特异的α-actin阳性表达,细胞纯度达98%.分次酶消化法获得的细胞数及细胞存活率均大于传统酶消化法,并且提前了3 d得到足够进行实验的细胞数量.结论 本法简便、可靠、低成本,短期内可获得大量高纯度、功能良好的远端肺动脉平滑肌细胞.
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小鼠阴道黏膜干细胞的分离、富集和鉴定
目的 研究小鼠阴道黏膜干细胞的分离、富集和鉴定方法,为干细胞替代疗法或构建人工阴道黏膜治疗先天性无阴道提供依据.方法 取7~8周龄小鼠的阴道黏膜上皮,用酶消化培养法原代培养阴道黏膜千细胞(VMSC).用Ⅳ型胶原黏附法并连续传代分离和富集VMSC.显微镜下动态观察细胞生长特性;苏木精-伊红(HE)染色;透射电镜观察细胞超微结构;荧光显微镜下观察标记滞留细胞(LRc).免疫组化SP法检测细胞表面标记物(β1整合素、细胞角蛋白19)进行鉴定.结果 用酶消化培养法得到原代VMSC,用Ⅳ型胶原黏附法分离到较纯的VMSC,经连续传代,富集到大量VMSC.动态观察发现细胞呈克隆性生长的干细胞特性.HE染色细胞呈椭圆形或梭形、核质比例大等幼稚细胞特征.透射电镜发现细胞呈未成熟细胞特征.荧光显微镜下LRC的核呈亮黄色,标记滞留时间长.免疫组化SP法检测β1整合素和细胞角蛋白19呈阳性表达.结论 用酶消化培养法可原代培养VMSC.用Ⅳ型胶原黏附法并连续传代可分离、富集VMSC.免疫组化SP法检测细胞表面标记物可鉴定VMSC.
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病毒预防靠病毒
异源基因转导细胞的重组病毒运载技术在各种基础与应用研究中已有几十年的历程.Darnell和同事利用重组腺病毒研究白蛋白启动子转录调控,属于早期应用实例之一[1].随着小鼠复制缺陷性反转录病毒问世,基因治疗的实验室研究进入了飞跃时期[2].该领域的研究热点为寻找各种DNA/RNA病毒载体或非病毒性载体[3-5].不久前,载体技术的思路已被引入基因疫苗的开发工作[6-10],这正是本系列综述所要涉及的主题.
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禽流感基因疫苗的研制
前言流感病毒属于正粘病毒科,是一种带衣壳的负链单股RNA病毒.甲乙两型流感病毒为该病毒分科之下的两个属,是人类流感的相关致病原.当前应用的流感疫苗所含成分就是处于流行期间的甲乙型流感病毒的灭活株或减毒株.
年 | 期数 |
2018 | 01 02 03 05 06 |
2017 | 01 02 03 04 05 06 |
2016 | 01 02 03 04 05 06 |
2015 | 01 02 03 04 05 06 |
2014 | 01 02 03 04 05 06 |
2013 | 01 02 03 04 05 06 |
2012 | 01 02 03 04 05 06 |
2011 | 01 02 03 04 05 06 |
2010 | 01 02 03 04 05 06 |
2009 | 01 02 03 04 05 06 |
2008 | 01 02 03 04 05 06 |
2007 | 01 02 03 04 05 06 |
2006 | 01 02 03 04 05 06 |
2005 | 01 02 03 04 05 06 |
2004 | 01 02 03 04 05 06 |
2003 | 01 02 03 04 05 06 |
2002 | 01 02 03 04 05 06 |
2001 | 01 02 03 04 05 06 |
2000 | 01 02 03 04 |