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采用表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱技术筛选乳腺癌新辅助化疗敏感蛋白谱

袁凯;张坤;马英路;付荣湛

摘要: 目的 应用表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱(SELDI-TOF MS)技术检测乳腺癌新辅助化疗前后癌组织内蛋白质谱的变化,筛选乳腺癌新辅助化疗敏感性相关蛋白质.方法 60份样本来自2009年3月至2010年8月山东省千佛山医院乳腺外科收治的30例乳腺癌患者CEF新辅助化疗前后的乳腺癌组织.化疗前,行粗针穿刺获得乳腺癌组织;化疗后,在乳腺癌根治术中取样.应用SELDI-TOF MS技术检测乳腺癌组织的蛋白质谱,所得数据采用Biomarker wizard 3.0.2软件分析,得到差异蛋白谱,再采用SPSS17.0软件对数据进行Shapiro-Wilk正态性检验和配对设计t检验.根据差异蛋白质的质荷比,在SWISS-PROT数据库中检索与差异蛋白质相匹配的存在于乳腺组织或乳腺癌组织中的蛋白质.结果 通过比较患者新辅助化疗前后的蛋白峰值,筛选出8个蛋白峰有差异的蛋白质,其质荷比(m/z)分别为5825.9、8949.5、11 053.5、11 652.0、17 898.9、22 250.6、26 055.5、38 546.6,化疗后这8个蛋白峰均高于化疗前(11.0±5.0比8.2±4.9、10.7±4.5比6.3±3.4、22.3±9.9比15.3±9.9、28.0±10.2比21.4±9.3、9.5±4.6比5.4±3.4、1.1±1.0比0.6±0.5、2.0±0.7比1.5±0.7及2.7±2.2比1.5±1.2,P值均<0.05).结论 应用SELDI-TOF MS技术可以筛选出与乳腺癌新辅助化疗敏感性相关的蛋白质谱.

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  • 采用表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱技术筛选乳腺癌新辅助化疗敏感蛋白谱

    作者:袁凯;张坤;马英路;付荣湛

    目的 应用表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱(SELDI-TOF MS)技术检测乳腺癌新辅助化疗前后癌组织内蛋白质谱的变化,筛选乳腺癌新辅助化疗敏感性相关蛋白质.方法 60份样本来自2009年3月至2010年8月山东省千佛山医院乳腺外科收治的30例乳腺癌患者CEF新辅助化疗前后的乳腺癌组织.化疗前,行粗针穿刺获得乳腺癌组织;化疗后,在乳腺癌根治术中取样.应用SELDI-TOF MS技术检测乳腺癌组织的蛋白质谱,所得数据采用Biomarker wizard 3.0.2软件分析,得到差异蛋白谱,再采用SPSS17.0软件对数据进行Shapiro-Wilk正态性检验和配对设计t检验.根据差异蛋白质的质荷比,在SWISS-PROT数据库中检索与差异蛋白质相匹配的存在于乳腺组织或乳腺癌组织中的蛋白质.结果 通过比较患者新辅助化疗前后的蛋白峰值,筛选出8个蛋白峰有差异的蛋白质,其质荷比(m/z)分别为5825.9、8949.5、11 053.5、11 652.0、17 898.9、22 250.6、26 055.5、38 546.6,化疗后这8个蛋白峰均高于化疗前(11.0±5.0比8.2±4.9、10.7±4.5比6.3±3.4、22.3±9.9比15.3±9.9、28.0±10.2比21.4±9.3、9.5±4.6比5.4±3.4、1.1±1.0比0.6±0.5、2.0±0.7比1.5±0.7及2.7±2.2比1.5±1.2,P值均<0.05).结论 应用SELDI-TOF MS技术可以筛选出与乳腺癌新辅助化疗敏感性相关的蛋白质谱.

  • 麦默通微创旋切术治疗乳腺炎性病灶95例临床分析

    作者:黄清丰;胡金月;翟雪雁;吕晶;付倩;张兰;霍彦平

    目的:探讨应用麦默通微创旋切术加置管引流治疗乳腺炎性疾病的临床疗效。方法回顾性分析郑州大学附属郑州中心医院乳甲外科2009年6月至2012年12月收治的95例超声及临床检查诊断为急、慢性乳腺炎伴脓肿形成的女性患者的临床资料,所有患者均于炎症局限后在超声引导下行乳腺炎性病灶麦默通微创旋切术加置管引流治疗。结果95例患者均采用麦默通微创旋切术加置管引流,超声均能清晰显示微创旋切病灶及脓液抽吸过程,术后置管引流约5~7 d,治愈率为97.9%(93/95)。其中4例患者术后出现少量皮下淤血,平均7~14 d后缓慢自行吸收。术后3、6个月分别复查超声,均提示切除完全,愈合良好;2例合并浆细胞性乳腺炎的患者分别于术后13、15个月复发,复发率为2.1%(2/95),再次行开放性手术后治愈。其中3例涉及2个以上象限的巨大脓肿经本方法治疗,术后置管引流7 d,均愈合良好,随访未见复发。95例患者的脓液标本均经细菌培养,阳性率为70.5%(67/95);切除标本病理结果均为乳腺炎性病变。结论超声引导下麦默通微创旋切术加置管引流治疗急、慢性哺乳期及非哺乳期乳腺炎伴脓肿形成的患者,其疗效均可靠,值得临床推广。

  • CYP2D6*10基因多态性与服用他莫昔芬乳腺癌患者预后的相关性

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  • Rac1蛋白调控乳腺癌MDA-MB-231细胞分泌血管内皮生长因子的研究

    作者:马骥;赵庆丽;赵易;刘颖

    目的:探讨Rac1蛋白对乳腺癌MDA-MB-231细胞分泌血管内皮生成因子( VEGF)的调控作用。方法在乳腺癌MDA-MB-231细胞中分别转染Rac1正显性真核表达质粒( V12Rac1组)及空白对照质粒(空白对照组)和Rac1小干扰RNA ( siRac1组)及对照小干扰RNA (沉默对照组)后,通过ELISA分别检测转染后24、48、72 h由MDA-MB-231细胞分泌的VEGF蛋白水平;通过Western blot检测各组血管生成相关因子p53和VEGF表达的变化。两组Western blot 定量分析数据比较采用t检验, VEGF分泌数据采用重复测量的方差分析。结果 ELISA分析结果显示:当MDA-MB-231细胞中高表达Rac1时,细胞分泌的VEGF水平随着时间的延长而逐渐升高,与空白对照组相比组间差异有统计学意义(组间比较:F=837.122, P<0.001;不同时间点比较:F=57806.374, P<0.001;交互作用:F=7663.095,P<0.001);当MDA-MB-231细胞中低表达Rac1时,细胞分泌的VEGF水平随着时间的延长逐渐升高,但低于沉默对照组,差异有统计学意义(组间比较:F=511.891,P<0.001;不同时间点比较, F=268.078,P<0.001;交互作用:F=120.708,P=0.001)。 Western blot 结果显示,当MDA-MB-231细胞高表达Rac1,与空白对照组相比,p53蛋白表达降低(t=-6.392, P=0.003),VEGF蛋白表达升高(t=7.497, P=0.002);当MDA-MB-231细胞中低表达Rac1,与沉默对照组相比,p53蛋白表达增加(t=5.307, P=0.006),VEGF蛋白表达降低(t=-7.395, P=0.002)。结论在乳腺癌MDA-MB-231细胞中,Rac1表达高低可以引起细胞分泌VEGF的水平变化,Rac1可能通过抑制p53表达而增加VEGF表达。

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    目的:探讨氟哌噻吨-美利曲辛片联合非甾体抗炎药对中青年女性乳腺癌保留乳房术后慢性疼痛的疗效。方法纳入2011年3月至2012年9月在本院行乳腺癌保留乳房手术的中青年女性患者120例,患者术后均有不同程度的慢性疼痛,综合医院焦虑抑郁测定表( HAD)评分为8~15分。随机数字表法分为治疗组(n=60)及对照组(n=60),对照组采用非甾体抗炎药布洛芬缓释胶囊(芬必得,0.3 g,每日2次),治疗组采用芬必得联合氟哌噻吨-美利曲辛片(1片,每日2次),疗程8周,分别于入组时、治疗4周和8周后进行疼痛模拟评分( VAS)。采用HAD进行情绪障碍评分以及采用匹茨堡睡眠质量指数( PSQI)进行睡眠质量评分。计量资料的比较采用t检验、重复测量的方差分析,率的比较采用χ2检验。结果治疗4周和8周后治疗组疼痛VAS评分显著降低(F=8.337, P=0.002),有效率高于对照组(38.33%比20.00%,χ2=4.881,P=0.027;70.00%比36.67%,χ2=13.393,P=0.000);治疗组焦虑及抑郁指数明显降低(F=16.825, P=0.000;F=10.026, P=0.000),且均低于对照组(F=6.074, P=0.033;F=4.221, P=0.172);治疗组PSQI下降(F=8.681, P=0.001),两组差异无统计学意义(F=3.587, P=0.284)。结论氟哌噻吨-美利曲辛片联合非甾体抗炎药治疗中青年女性乳腺癌保留乳房术后慢性疼痛疗效优于单纯非甾体抗炎药,且伴有情绪及睡眠质量改善。

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