中华普通外科杂志
Chinese Journal of General Surgery 중화보통외과잡지
- 主管单位： 普外临床
- 主办单位： 中国科学技术协会
- 影响因子： 1.11
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 11-3855/R
- 国内刊号： 冷希圣
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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肝硬化门静脉高压症术后门静脉系统血栓形成的诊治
目的 探讨肝硬化门静脉高压症术后门静脉系统血栓形成(portal vein thrombosis,PVT)的临床诊断、治疗和预防.方法 回顾性分析近5年来118例肝硬化门静脉高压症患者断流手术后3～5 d发现的35例PVT的临床资料.结果 本组PVT的发生率为29.7%.35例PVT中出现发热17例,腹泻11例,腹胀9例,呕吐咖啡样液体及黑便4例,腹痛3例,腹水2例,上消化道大出血2例,13例无临床症状.均给予低分子右旋糖酐500 ml+丹参20 ml静注,每天1次;低分子肝素钙2500 IU皮下注射每8小时或每12小时1次,共10～14 d,尿激酶20～40万单位静脉滴注每天1次,共5～7 d,出院前改华发令口服.彩色超声结合螺旋CT或磁共振血管造影检查:门静脉完全再通12例,部分再通21例,无改善2例,大出血2例,死亡1例.结论 及早行彩色超声检查有助于早期诊断PVT;及早进行抗凝祛聚、溶栓治疗效果确切,有助于防止肠管坏死的发生,预防再出血,降低病死率.
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结肠成形袋与结肠J型袋改善直肠癌术后排便功能的比较
目的 比较结肠成形袋和结肠J型袋对改善直肠癌术后排便功能的作用.方法 将73例中下段直肠癌随机分成两组,第1组(CPP组)36例,行结肠成形袋手术.第2组(CJP组)37例,行结肠J型袋手术.分别于术后6、12个月对患者排便功能进行评价.结果 CPP组均成功实施了结肠成形袋手术,但CJP组有4例(10%)因盆腔狭窄、肥胖未能成功实施结肠J形袋手术.术后6个月时两组每日平均排便次数为4.3和4.5,便后1 h内需再次排便为23%和20%,大便失禁评分为3和4.两组差异无统计学意义(t=0.384,x2=0.101,t=0.643,P＞0.05).术后12个月对每日平均便次、便后1 h内需再次排便、大便失禁等情况进行综合评分.CPP组和CJP组分别为:2.4次、2.2次;5%、6%及2、3分.两组差异无统计学意义(t=0.419,x2=0.506,t=0.582,P＞0.05).结论 结肠成形袋和结肠J型袋对改善直肠癌术后排便功能的作用相似.结肠成形袋方法简单、临床效果肯定,是一种很有前途的结肠贮袋手术.
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过氧化物酶体增殖物活化的受体γ对肝星状细胞作用机制的研究
目的 探讨过氧化物酶体增殖物活化受体γ(PPARγ)对肝星状细胞(HSC)生物学特性的影响及其作用机制.方法 用MTT法和流式细胞仪检测对照组、罗格列酮组、GW9662+罗格列酮组、GW9662组大鼠肝星状细胞的增殖和凋亡情况;采用RT-PCR方法检测各组PPARγ及Ⅰ型前胶原mRNA表达;用免疫组织化学法和Western blot法检测PPARγ及Ⅰ型胶原蛋白表达;结果 罗格列酮组的肝星状细胞增殖率MTT(0.49±0.06)较对照组(1.00±0.045)、GW9662组(0.89±0.043)和罗格列酮+GW9662组(0.78±0.049)明显减弱,凋亡率明显增高(P＜0.05);罗格列酮组PPARγmRNA表达(1.63±0.179)显著高于对照组(0.46±0.021)、GW9662组(0.41±0.01)和罗格列酮+GW9662组(0.45±0.20)(P＜0.05),罗格列酮组Ⅰ型前胶原mRNA表达(0.32±0.02)与对照组(1.61±0.09)、GW9662组(1.81±0.22)和罗格列酮+GW9662组(1.37±0.01)相比显著降低(t值分别为15.59,14.68,8.07,P＜0.01);其他各组之间PPARγ和Ⅰ型前胶原mRNA的表达差异无统计学意义(P＞0.05).PPARγ及Ⅰ型胶原蛋白表达所得结果与RT-PCR结果相一致.结论 PPARγ特异性激动剂罗格列酮可以增加PPARγ的表达,抑制HSC表达Ⅰ胶原,抑制HSC增殖,诱导HSC凋亡,PPARγ配体对于缓解肝脏纤维化具有一定的作用.
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肝细胞生长因子联合成纤维细胞生长因子-4诱导人骨髓间充质干细胞分化为肝样细胞的实验研究
目的 探讨肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)联合成纤维细胞生长因子-4(fibroblast growth factor-4,FGF-4)诱导人骨髓间充质干细胞(human bone marrow mesenchymal stem cells,HMSCs)向肝细胞方向分化的能力.方法 分别用HGF、FGF-4、HGF+FGF-4诱导HMSCs分化为肝样细胞.在不同分化阶段用免疫细胞化学染色法检测甲胎蛋白(alpha fetoprotein,AFP)和细胞角蛋白18(cytokeratin 18,CK18);免疫荧光细胞化学染色法检测AFP、白蛋白(albumin,ALB)的表达;RT-PCR检测AFP和ALB mRNA表达的情况.结果 HMSCs经诱导向肝样细胞转化.免疫细胞化学染色各诱导组均可检测出AFP和CK18表达,图像分析表明HGF+FGF-4联合诱导分化的AFP、CK18阳性率高,HGF次之,FGF-4则较弱;免疫荧光细胞化学染色发现各诱导组AFP、ALB均为阳性表达;各诱导组RT-PCR均可检测出AFP和ALB mRNA的表达,而阴性对照组则没有表达.结论 HGF、FGF-4、HGF+FGF-4均能诱导HMSCs分化为肝样细胞,分化的肝样细胞能分泌肝细胞特异性产物AFP、ALB、CK18等.以HGF+FGF-4诱导HMSCs分化为肝样细胞的阳性率高.
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胃癌肝转移相关基因的克隆鉴定
目的 克隆胃癌肝转移的相关基因.方法 将标本分成有肝转移和无肝转移的胃癌原发灶两组,每组9例.提取组织总RNA,反转录成cDNA,将RT-PCR的扩增产物在PAGE测序胶上电泳,经EB染色分离两组差异表达的基因片段,TA克隆差异片段后进行测序,用GenBank BLAST软件进行同源性分析.将其中获得的1个与人内源性逆转录病毒基因片段做为标志物,用RT-PCR检测其在肝转移胃癌、无肝转移胃癌组织中的表达.结果 有肝转移与无肝转移胃癌组织之间存在明显的基因表达差异,差异明显的10个基因片段均呈高表达.与人内源性逆转录病毒同源的基因片段在有肝转移胃癌组织中有7例表达,在无肝转移胃癌组织中有2例表达(P=0.007).结论 肝转移以胃癌癌基因突变为主,人内源性逆转录病毒基因片段在有肝转移胃癌组织中的表达高于无肝转移胃癌组织.
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Syk(L)细胞核移位现象对乳腺癌细胞侵袭力的影响
目的 探讨2种Syk蛋白异构体在乳腺癌细胞中的表达、细胞亚细胞器中分布和对乳腺癌细胞侵袭力影响.方法 采用Western blot方法检测6种乳腺癌细胞系中Syk的表达;采用胞核、胞浆分离试验及质粒定点突变技术检测2种Syk蛋白异构体在细胞亚细胞器中的分布并探讨Syk(L)的核移位机制;采用体外侵袭力实验研究2种Syk蛋白异构体和DEL域碱性氨基酸突变成非碱性氨基酸的Syk(L)对肿瘤细胞侵袭力的影响.结果 2种Syk蛋白异构体在4种乳腺癌细胞系中同时表达;Syk(L)在乳腺癌细胞中的表达可明显抑制细胞的侵袭力,Syk(S)对侵袭力无影响;在同时表达2种Syk蛋白的乳腺癌细胞系MB468及分别表达Syk(L)、Syk(S)的稳定细胞株MB435中,只有分子量较大的Syk(L)可从胞浆移位到胞核内.DEL域内的碱性氨基酸被突变为非碱性氨基酸后,Syk(L)失去核移位功能,亦不能抑制乳腺癌细胞的侵袭力.结论 Syk(L)-DEL域内的碱性氨基酸具有核定位信号功能,Syk(L)的核移位现象与其抑制乳腺癌细胞侵袭力功能密切相关,Syk(L)的抑癌功能是由它移位到细胞核内行使的核蛋白相关功能决定的.
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胰管结石合并壶腹部周围病变的诊断及手术方式探讨
目的 探讨胰腺结石合并壶腹部周围病变的诊断和手术方式.方法 回顾性分析1994年4月-2005年10月32例胰管结石中8例合并壶腹部周围病变的临床资料.结果 8例胰腺结石合并壶腹部周围病变患者中5例术前未获得明确诊断.3例胰管结石合并胰头癌患者行胰十二指肠切除、胰空肠捆绑吻合术,术后生存期分别为14个月、18个月和23个月;3例十二指肠乳头癌合并胰管结石行胰十二指肠切除、胰管切开取石、胰管端侧与空肠侧侧吻合术,分别已生存10个月、12个月和18个月;1例环状胰腺、十二指肠膜状闭锁合并胰腺结石行胰头部及环状胰腺、十二指肠球部和部分降部、胆管下端切除、十二指肠胰体尾捆绑吻合、胆肠吻合术;1例胰管结石合并胰腺钩突囊肿行囊肿切除、胰管与空肠侧侧吻合术,2例术后效果均良好.结论 胰管结石患者应考虑合并壶腹部周围病变可能,合理选择手术方式不仅可以改善患者生活质量、还可以延长生存时间.
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人γ-干扰素基因修饰的结肠癌细胞瘤苗的抗肿瘤作用
目的 研究人γ-干扰素(human interferon-γ,huIFN-γ)基因修饰的结肠癌细胞瘤苗的成瘤性及抗肿瘤作用.方法 用逆转录病毒质粒pL(IFN-γ)SN将人IFN-γ基因转导入鼠结肠癌细胞株CT26中,用G418进行筛选,得到抗性克隆CT26/IFN-γ,比较CT26/IFN-γ与野生型CT26的成瘤性,评价CT26/IFN-γ对野生型CT26细胞肝转移模型的治疗作用.结果 CT26/IFN-γ能在含0.6 g·L-1 G418的培养液中稳定生长;RT-PCR证实IFN-γ基因在CT26/IFN-γ中表达;CT26/IFN-γ细胞能分泌人IFN-γ,体外培养体系中产量为3.5 fg·cell-1·d-1;CT26/IFN-γ的成瘤性比野生型CT26差[Balb/c小鼠肿瘤体积分别为(480±138)mm3与(991±176)mm3,F=31.29,P=0.000];CT26/IFN-γ对野生型CT26的肝转移亦有明显抑制作用,荷瘤小鼠存活期明显延长(P=0.000).结论 人IFN-γ基因修饰的结肠癌细胞瘤苗有一定的抗肿瘤作用,值得进行深入研究.
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腹腔镜联合射频消融和125I粒子治疗晚期直肠癌并肝转移
目的 探讨腹腔镜切除并联合应用射频消融和125 I粒子植入治疗晚期直肠癌合并肝转移的临床价值.方法 对30例术前确诊为直肠癌,经CT发现肝脏有实性占位的患者术中行腹腔镜下直肠癌切除,经吻合器吻合肠段后,即行腹腔镜下肝转移瘤切除或射频消融,后将125I粒子植入盆腔及肝脏肿瘤部位.结果 术中超声发现新病灶7个,所有患者均顺利行腹腔镜切除手术,无中转开腹及严重并发症.25个转移病灶位于肝脏右叶仅行腹腔镜下射频消融及125I粒子植入,8个转移病灶行离体切除.随访12～25个月(平均22.3个月),有6例转移癌未见液化,行腹腔镜下二次射频.1年生存率为73%(22/30).结论 腹腔镜切除并联合应用RFA和125I粒子植入治疗晚期直肠癌并肝转移癌具有微创、安全、疗效确切、术后恢复快等优点.
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肿瘤坏死因子α对重症急性胰腺炎低钙血症的影响及作用机制
我们通过检测重症急性胰腺炎大鼠血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)、血钙水平及骨、肾组织甲状旁腺激素受体(PTHR)mRNA表达,同时观察抗肿瘤坏死因子α单克隆抗体(TNF-αMCAb)治疗后对血钙、血清TNF-α水平及骨、肾组织PTHR mRNA表达的影响,并探讨TNF-α在重症急性胰腺炎低钙血症发生中的作用机制.
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原发性肝癌患者外周血中期因子水平与肝癌临床病理特征及预后的关系
我们采用酶联免疫吸附实验检测肝癌患者外周血中中期因子(midkine,MK)水平,探讨与肝癌临床病理特征及预后的关系.
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腹腔镜脾切除与开腹脾切除的对比研究
我院从1993年11月至2005年3月共对56例血液病患者实施腹腔镜脾切除,其中全腹腔镜脾切除39例,腹腔镜辅助脾切除15例,手助腹腔镜脾切除2例,均获成功.1988年7月至1993年8月行开腹脾切除治疗血液病患者22例,现将两种手术方式进行比较,报告如下.
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表现为Krukenberg瘤的胆管癌卵巢转移一例
患者女,60岁.因胆管癌术后12个月,发现下腹肿物3个月.以肿物性质待查入院.患者12个月前因肝门部胆管癌于外院行剖腹探查术,术中见肿瘤大小为3.0 cm×1.8 cm×1.7 cm,位于肝门部,侵犯左右肝管与胆囊管,行左半肝切除术+胆囊切除术+胆肠内引流术.
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肝纤维肉瘤一例
纤维肉瘤(malignant fibrous histiocytoma,MFH)肝脏非常少见,自1985年以来,国内外病例报告不超过40例.以下是我们对1例肝脏纤维肉瘤的报告.
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肝脏恶性纤维组织细胞瘤一例
患者,女,55岁,因发热2月余,右上腹胀痛1个月入院.查体:T:37.2℃,R:23次/分,P:110次/分,BP:120/75mmHg.全身皮肤黏膜无黄染,右下肺叩诊浊音、呼吸音减弱.
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回盲部肠系膜淋巴结结核并寒性脓肿破裂误诊为急性阑尾炎一例
患者男,32岁.因腰外伤20 h,转移性右下腹痛18 h入院.因车祸致腰部外伤,感觉腰部隐痛.伤后2 h胃部不适,后感觉脐周隐痛,疼痛持续加剧.伤后13 h疼痛转移至右下腹.
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Fournier's坏疽二例
Fournier's坏疽(Fournier's gangrene,FG)是临床上少见而严重的外科感染,病情凶险,病死率可达50%以上[1].本院普通外科收治2例,报告如下.
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回盲部恶性黑色素瘤胆囊转移一例
患者男,72岁.因黑便4个月入院.2年内体重下降10 kg.既往无肿瘤病史.查体:T 36.2℃ BP 150/60 mmHg全身浅表淋巴结未触及肿大.腹软,右下腹压痛,可触及一7.0 cm×6.0 cm肿物,肝脾未触及,肠鸣音活跃.疗好转.
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多发性肝细胞腺瘤伴破裂出血一例
多细胞腺瘤(hepatocellular adenoma,HCA)为一种罕见的肝良性肿瘤,临床上无特异性表现,易误诊为肝癌.HCA在普通人群中每年发病率为1/100万[1],现将我科室急诊收治的1例多发性HCA伴破裂出血报道如下:
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再次肝移殖的适应证和预后
再次肝移植(liver retransplantation,re-LT)是挽救移植肝失功能受体生命的惟一手段.文献报道的re-LT率为11.5%～19.4%[1-3].re-LT受体占用了多个供肝,进一步加重了供肝资源的匮缺.因此,re-LT超越了医疗范畴,在伦理学和经济学上也富有争议.如何合理选择re-LT受体和评估其预后成为当务之急.
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脾脏占位性病变60例临床与病理分析
随着影像检查的普及应用和诊断技术水平的提高,脾脏占位性病变得到了早期诊断和治疗.统计我们两家医院1975年以来所诊治脾脏占位性病变60例,手术切除后,均经病理证实,现对其诊断治疗分析如下.
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脾动脉灌注促进脾血回输20例
自1998年6月至2004年6月,我们对20例巨脾行脾切除术,采用术中脾动脉加压灌注的方法,以促进脾血回输,提高自体脾血回输量,避免了异体输血,效果较好,报告如下.
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开展肝癌转移复发研究的意义与途径
癌症是人口死亡的第二位原因,一些主要癌症如肝、肺、食管和胃癌的5年生存率均不超过30%,其中肝癌差,仅5%～6%.癌症死因主要是癌症的转移与复发,为此"癌转移"是21世纪生命科学需要迫切解决的问题.
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巴曲酶对自体静脉移植内膜增生的影响
目的 探讨巴曲酶(Batroxobin,BX)对移植静脉内膜增生的影响.方法 25只杂种犬分为实验组、对照组、假手术组分别行股静脉移植到股动脉,建立静脉移植模型.实验组给以巴曲酶治疗.分别检测3组血浆一氧化氮(nitric oxide,NO)、内皮素(endothelin,ET)含量,计算机图像分析测定移植静脉内膜、中膜面积及内膜面积/中膜面积比值,免疫组织化学染色检测移植静脉增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)和原癌基因C-myc表达情况.结果 血浆NO含量实验组高于对照组和假手术组(P＜0.01),ET含量实验组低于对照组和假手术组(P＜0.01).内膜面积和中膜面积在对照组较实验组和假手术组增生明显(P＜0.05).实验组与对照组比较,内膜面积/中膜面积之比值,差异无统计学意义(P＞0.05).PCNA表达实验组与对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.05),C-myc表达实验组与对照组比较,有差异有统计学意义(P＜0.01).结论 巴曲酶对内膜增生机制中的部分因素起抑制作用,对血管内膜增生具有一定的防治作用.
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重型肝炎患者肝移植术后细菌感染的防治
目的 探讨头孢吡肟治疗重型肝炎肝移植术后细菌感染的疗效.方法 对2005年1月至2005年6月我中心46例重型肝炎肝移植患者术后细菌感染情况和头孢吡肟的疗效进行分析.结果 本组患者术后细菌感染率为80.4%(37/46),共分离出细菌61株,其中革兰氏阴性(G-)杆菌占68.9%(42/62);革兰氏阳性(G+)球菌占31.1%(19/61).G-杆菌对头孢吡肟的耐药率为33.3%,明显低于对头孢他啶(64.3%)、头孢曲松(76.2%)和头孢噻肟(61.9%)的耐药率(x2=8.052,15.570,6.873,P＜0.01).经验治疗临床有效率为78.1%,患者使用过程中无明显不良反应.结论 对肝移植术后常见G-杆菌的耐药率较多数三代头孢菌素低,头孢吡肟作为重型肝炎患者肝移植术后经验治疗用药是安全有效的.
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肝移植围手术期糖尿病防治的初步研究
目的 研究肝移植围手术期糖尿病对患者的影响及防治措施.方法 回顾性分析131例肝移植患者临床资料,观察患者围手术期糖尿病的发生及对术后并发症的影响,探讨移植术后新发糖尿病与原发疾病、术后免疫抑制药物等因素的关系.结果 移植术后新发糖尿病发生率为19.3%(21/109),与糖尿病家族史和术后使用大剂量激素有关,与非糖尿病患者相比,围手术期糖尿病患者急性排斥反应、细菌感染、高血压等并发症的发生率显著升高(P＜0.05),术前及术后早期(2周内)将血糖降至正常可减少感染的发生.结论 围手术期出现糖尿病会增加肝移植患者术后并发症的发生率,应该有效控制血糖以减少感染并发症的发生,同时肝移植术后早期应避免使用大剂量激素.
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肝移植术后一过性肝内胆汁淤积症的临床特征和诊治体会
目的 探讨肝移植术后一过性肝内胆汁淤积症的特点,为诊断和鉴别诊断提供参考.方法 回顾性分析200例肝移植术后早期(1个月内)高胆红素血症的临床资料,对一过性肝内胆汁淤积症的发生、发展和转归进行总结.结果 112例发生术后早期一过性肝内胆汁淤积症.其特点为DBIL和γ-GT从术后第2、3天起进行性升高,7～14 d达高峰,之后逐渐下降,多数病例约21～28 d左右恢复正常.本组DBIL和γ-GT的平均峰值分别为(157.32±82.08)μmol/L和(172±80)IU/L,DBIL高值为384.75 μmol/L,黄疸持续时间长为38 d.在DBIL和γ-GT进行性升高期间,AST、ALT则由术后的高值进行性下降,在1周内可降至正常范围,并持续在这一水平.此期间可排除急性排斥反应、药物中毒和胆管阻塞等.结论 肝移植术后早期一过性肝内胆汁淤积症是由于供肝缺血和再灌注损伤引起的泌胆系统可逆性的病理改变,其发生率高,临床经过有一定规律性,绝大多数无需特殊治疗可自行恢复.
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乙肝患者肝移植术后免疫抑制治疗下拉米夫定耐药的发生和治疗
目的 探讨乙肝患者肝移植术后在免疫抑制治疗下拉米夫定耐药的发生、处理及疗效.方法 对2003年10月至2005年3月因乙肝相关性终末期肝病在我院接受肝移植并完整随访1年以上的157例患者的临床资料进行回顾性分析,观察并总结肝移植术后,在免疫抑制状态下拉米夫定耐药病例的发生、处理和疗效.结果 肝移植术后随访1年以上共发现11例患者出现拉米夫定耐药,其中10例出现在术后1年内,肝移植术后1年的拉米夫定耐药率是6.37%,出现拉米夫定耐药时采用联合新的核苷类似物阿德福韦、恩替卡韦可以有效控制乙肝病毒的复制、改善肝功能;治疗12周、24周和48周时HBV-DNA转阴率分别为27.3%、36.6%、62.5%,下降幅度分别为log DNA(3.85±0.79)、log DNA(3.27±0.84)、log DNA(3.19±0.58),HBeAg阳性血清HBeAg的血清转换率为18.2%、27.3%、50.0%.结论 拉米夫定联合小剂量乙肝免疫球蛋白可以有效推迟肝移植术后免疫抑制治疗下拉米夫定耐药出现的时间,联合新的核苷类似物抗病毒药物对肝移植术后出现的拉米夫定耐药的乙肝病毒疗效确切.
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肝移植术后HBV再感染的治疗
目的 分析肝移植术后乙型肝炎病毒(HBV)再感染患者的抗病毒治疗与乙肝病毒基因变异情况.方法 317例HBV相关终末期肝病患者肝移植术后15例单独使用LAM,302例使用小剂量乙肝免疫球蛋白(hepatitis B immune globulin,HBIG)和拉米夫定(lamivudine,LAM)(或adefovir dipivoxil,ADV)联合预防HBV再感染,同时检测HBV血清标志物、血清HBV DNA、YMDD区变异、及肝活检组织乙型肝炎标记物.结果 术后LAM组有4例术前HBV DNA阳性患者术后HBV再感染,LAM+HBIG联合用药组16例HBV再感染,两组术后HBV再感染差异有统计学意义(26.7% vs.5.30%,P＜0.01).317例患者术后12例发生YMDD变异,发生率为3.79%,再感染病例60%(12/20).经加用ADV治疗后5例HBV DNA转阴性,4名患者HBV DNA滴度下降,肝功能显著改善,3例发生纤维淤胆性肝炎,2例死亡,1例经再次肝移植治愈.结论 小剂量HBIG+LAM可以有效地预防肝移植术后HBV再感染;在小剂量HBIG+LAM用药基础上HBV再感染可能产生YMDD(tyrosine,methionine,aspartate,aspartate)变异;ADV可作为LAM耐药后用药,对于发生突破性感染的患者应采取以ADV为主的综合治疗.
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大鼠无心跳供体热缺血损伤后供肝组织学与超微结构的动态变化
目的 动态观察移植肝热缺血损伤后组织学与超微结构的变化特点,预测无心跳供体(NHBD)中供肝耐受热缺血的安全时限.方法 实验动物按供肝热缺血时间分别为0、10、15、20、30、45、60 min,随机分为7组.按各组条件分别作原位肝移植,动态观察单纯热缺血期和肝移植术后6 h、24 h、48 h各组移植肝组织学、组织化学和超微结构变化规律.结果 NHBD的供肝不仅发生热缺血阶段缺血缺氧造成的损伤,在移植肝复流后,也存在再灌注损伤,且再灌注期肝组织损伤的程度与热缺血时间长短有密切关系.热缺血30 min以前,移植肝仅出现组织细胞的变性,未见明显坏死.45 min组,肝组织可见小灶状的坏死,在小叶中央区首先发生.60 min组,肝细胞坏死的范围扩大,呈片状或弥漫性分布;肝窦内皮细胞明显肿胀呈泡状或气球状,肝血窦阻塞,呈微循环障碍.结论 大鼠供肝经受30 min以内热缺血损伤,肝组织损伤处在可复性阶段.热缺血60 min以后,呈现不可逆性的形态学改变.
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Tet-on基因表达系统调控HIF-1α表达对肝癌细胞凋亡的影响
目的 探讨HIF-1α表达在体外对肝癌细胞凋亡的影响.方法 利用Tet-on基因表达系统调控HePG2细胞HIF-1α的表达,观察细胞凋亡.结果 酶切和DNA测序证实Tet-on基因表达系统反应质粒pTRE-HIF-1α构建成功.获得了受强力霉素调控、稳定表达HIF-1α的肝癌细胞.经阿霉素诱导凋亡后,强力霉素终浓度为0μg/ml、0.02 μg/ml、0.2 μg/ml、1 μg/ml、2μg/ml、5μg/ml时的细胞凋亡率分别为59.6%、50.9%、38.1%、30.5%、23.9%、18.3%;强力霉素0.02 μg/ml、0.2 μg/ml、1μg/ml、2μg/ml、5μg/ml处理细胞后,Casepase-3活性分别降低了2.3、5.5、8.7、12.6、18.8倍.RT-PCR检测结果显示,随着强力霉素浓度的增加,HIF-1α表达水平增加,Survivin和Bcl-2基因表达强度逐渐增加,差异有统计学意义(P＜0.001).结论 HIF-1α基因在体外可以抑制肝癌细胞凋亡,而且随着HIF-1α表达水平的增加,对肝癌细胞的凋亡抑制作用进一步加强,可能与HIF-1α诱导survivin和Bcl-2的表达及抑制casepase-3的活性有关.
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原发性肝癌半肝切除术中不同血流阻断方式的应用研究
目的 研究不同肝脏血流阻断方式在半肝切除治疗原发性肝癌中的应用.方法 回顾性分析我院2000-2005年行半肝切除治疗原发性肝癌的相关病例资料.A组:行第一肝门阻断(Pringle法)83例;B组:行Pringle法联合肝下下腔静脉阻断67例;C组:解剖性半肝血流(肝动脉、门静脉及肝静脉)阻断32例.结果 手术时间C组较A、B组显著延长(t=3.27、t=2.74,均P＜0.01),B组术中肝下下腔静脉阻断后中心静脉压(3.99±1.87)cmH2O,较阻断前(8.32±3.56)cmH2O显著下降(t=8.81,P＜0.01);出血量(263±146)ml较A组(657±384)ml显著减少(t=7.94,P＜0.01),并且在肝下下腔静脉阻断后没有发生严重的肾脏及循环系统并发症.C组出血量(255±178)ml较A组显著减少(t=5.68,P＜0.01),术后第1天A、B组转氨酶比C组显著升高(t=8.23、8.56,P＜0.01).结论 原发性肝癌行半肝切除术中肝下下腔静脉阻断是一种减少出血的安全有效的简便方法,解剖性半肝血流阻断技术要求高,但可避免肝脏缺血再灌注损伤,术中肝损伤也小.
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增殖性腺病毒CNHK600-p53的构建及对肝癌细胞抑制的体外实验研究
目的 研究携带p53基因的新型增殖性腺病毒CNHK600-p53的导入是否增加肝癌细胞株PLC/PRF5对化疗药物的敏感性.方法 采用四甲基偶氮唑盐(methylthiazolyl tetrazolium assay,MTT)法,观察化疗药物5-氟尿嘧啶(Fluorouracil,5-Fu)、丝裂霉素(Mitomycin,MMC)和表阿霉素(Epirubicin,EPI)单独及与CNHK600-p53联合对肝癌细胞株PLC/PRF5的杀伤效应.结果 PLC/PRF5在5-Fu浓度为400 μg/ml时细胞抑制率为(65±4.2)%,MMC浓度为1μg/ml细胞抑制率为(41±1.9)%,EPI浓度为10μg/ml细胞抑制率为(65±1.8)%.转入CNHK600-p53(MOI=0.625)后再使用上述浓度的化疗药物,细胞抑制率分别为(89±5.3)%、(60±2.3)%和(75±1.5)%.当MOI值为0.3125,0.625,1.25时,CNHK600-p53组和Ad-p53组的细胞抑制率分别为(27±2.5)%、(30±3.7)%、(61±4.3)%和(4±2.7)%、(5±3.5)%、(16±4.5)%.结论 单用CNHK600-p53效果优于Ad-p53,携带p53基因的CNHK600-p53能提高肝癌细胞株PLC/PRF5对化疗药物的敏感性.
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多药耐药相关蛋白在肝癌多药耐药细胞系HePG2/ADM中的作用
目的 研究4种耐药蛋白:多药耐药蛋白(multi-drug resistance protein 1,MDR1),多药耐药相关蛋白1(multi-drug resistance related protein 1,MRP1),肺耐药蛋白(lung resistance protein,LRP),乳腺癌耐药蛋白(breast cancer resistance protein,BCRP)在肝癌多药耐药中的作用.方法 通过培养液中阿霉素(adriamycin,ADM)浓度递增诱导法筛选培养,建立HePG2/ADM肝癌多药耐药细胞株;采用real time荧光定量PCR检测四种耐药蛋白mRNA在正常肝细胞系L02、肝癌细胞系HePG2及HePG2/ADM中的表达差异;Western blot检测3种细胞系中4种耐药蛋白的表达.结果 (1)建立HePG2/ADM细胞系.MTT法检测阿霉素对HePG2/ADM细胞IC50为亲本细胞的282倍(P＜0.05).(2)HePG2/ADM中MDR1和BCRP mRNA表达分别是HePG2的400倍(F=87.49,P＜0.05)和9倍(F=1006,P＜0.05).MRP1和LRP mRNA表达差异无统计学意义(FMRP1=3.43,FLRP=2.44,Pall＞0.05).(3)L02和HePG2中4种耐药蛋白mRNA的表达均无差异(FMDR1=1006,FBCRP=87.49,FMRP1=3.43,FLRP=2.44,Pall＞0.05).(4)Western blot检测发现HePG2/ADM细胞中MDR1,BCRP,LRP蛋白表达显著高于HePG2和L02细胞(FMDR1=28.68,FBCRP=18.60,FLRP=6.28,Pall＜0.05),MRP1蛋白表达不增高(FMRP1=0.70,P＞0.05).(5)4种耐药蛋白表达在HePG2和L02细胞差异均无统计学意义(FMDR1=28.68,FBCRP=18.60,FMRP1=0.70,FLRP=6.28,Pall＞0.05).结论 MDR1和BCRP在HePG2/ADM多药耐药中起重要作用,HePG2/ADM多药耐药与MRP1和LRP可能无关.
