中国医科大学学报杂志
Journal of China Medical University 중국의과대학학보
- 主管单位: 辽宁省教育厅
- 主办单位: 中国医科大学
- 影响因子: 1.42
- 审稿时间: 1-3个月
- 国际刊号: 0258-4646
- 国内刊号: 21-1227/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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慢性淋巴细胞性甲状腺炎合并甲状腺癌104例临床分析
目的 探讨我院慢性淋巴细胞性甲状腺炎(CLT)合并甲状腺癌的发病率及CLT合并结节的手术指征.方法 回顾分析我院2004年10月至2010年9月期间104例CLT合并甲状腺癌的临床资料.结果 本组CLT合并甲状腺癌的发生率为35.99%( 104/289).术前正确诊断率为27.88%.超声提示96.15%患者伴有甲状腺结节,80.77%伴有钙化.本组患者均行手术治疗,效果良好,5例(4.8%)于术后2年内复发.结论 CLT可能是甲状腺癌的前期病变.对CLT合并甲状腺结节者应考虑手术治疗,尤其术前超声提示钙化和/或ECT提示为“冷结节”者.对于CLT合并甲状腺癌的手术应采取甲状腺癌根治性手术的原则进行手术.
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乙酰肝素酶在胆管癌组织中的表达及意义
目的 探讨乙酰肝素酶( Hpa)在胆管癌组织中的表达及其与临床病理因素的关系.方法 免疫组织化学染色检测59例胆管癌手术标本和同时随机选取其中经HE染色、病理组织检查确定为癌旁组织26例的Hpa表达情况,与临床病理因素进行相关性分析.结果 Hpa在59胆管癌组织中阳性表达48例,阳性表达率为81.3%,TNM分期I期+Ⅱ期、Ⅲ期+Ⅳ期阳性率分别为77.8%、87.0%,但差异无统计学意义(P>0.05),癌旁组织中有3例表达弱阳性,阳性率表达率为11.5%.胆管癌组织及癌旁组织阳性表达率比较差异有统计学意义(P<0.05).相关分析认为,Hpa表达与淋巴结转移密切相关(P=0.002).与患者的性别、年龄、肿瘤大小和分化程度无关(P>0.05).结论 Hpa在胆管癌组织中高表达,Hpa的表达与肿瘤的淋巴结转移有关.
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中国北方特应性皮炎儿童FLG基因突变检测
目的 探讨FLG基因突变与中国北方儿童特应性皮炎(AD)的相关性.方法 采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术,检测59名年龄为6个月~12岁临床确诊的AD患者和169名健康人中E2422X、S2554X、S2889X、S3296X和R4307X这5个FLG突变位点的突变情况.结果 AD患者和健康对照者均未检测出FLG阳性突变结果.结论 FLG突变和本组AD患者的发病无关.FLG突变可能存在地域和种族人群的差异,但阴性结果也可能和样本量过少有关.
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不同通气方式对喉罩全麻腹腔镜胆囊切除术的影响
比较喉罩全麻腹腔镜胆囊切除术中气腹时不同呼吸频率的容量控制通气和压力控制通气对动脉血二氧化碳、气道峰压、胃扩张及术后腹胀、恶心、呕吐的影响.研究证明,在喉罩全麻行胆囊切除术时,采用气道压力较气腹前增加2 cmH2O、呼吸频率为16次/min的压力控制通气会减少术中胃扩张及术后腹胀及恶心、呕吐的发生.
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男男性行为人群艾滋病相关知识与性行为调查
目的 了解男男性行为者(MSM)艾滋病相关知识认知情况及性行为状况,为行为干预提供线索.方法 2010年1月至2010年12月对358名MSM匿名填写问卷调查,采用EPIDATA 3.1进行数据录入,用SPSS17.0统计分析.结果 近一次与男性肛交安全套使用率为56.6%,近1次与女性发生性行为时安全套使用率为33.6%;艾滋病相关知识总知晓率(答对6道及以上)为65.4%.文化程度和选择性伴地点对调查对象艾滋病相关知识的知晓得分差异有统计学意义.结论 被调查对象艾滋病知识知晓率较高,能够主动通过多种途径获得艾滋病防治知识,但不同性行为方式的安全套使用频率与艾滋病知识得分间无关联,MSM无保护性行为比例较高,如何切实有效地对MSM进行干预减少其高危性行为的发生仍需要思考.
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吡哆胺和替米沙坦对人肾小管上皮细胞活性氧生成的影响
目的 通过体外培养人肾小管上皮细胞株(HK-2)细胞,探讨吡哆胺和替米沙坦对肾小管上皮细胞活性氧生成影响.方法 HK-2细胞培养并按干预方式不同分为HK-2正常对照组,血管紧张素Ⅱ组(10-6 mol/L,AngⅡ组),替米沙坦组[替米沙坦(10-6mol/L)+ AngⅡ(10-6 mol/L),T组],吡哆胺1组[吡哆胺(1 mmol/L)+ AngⅡ(10-6 mol/L),P1组),吡哆胺2组[吡哆胺(10 mmol/L)+ AngⅡ(10-6 mol/L),P2],替米沙坦+吡哆胺联合组[替米沙坦(10-6 mol/L)+吡哆胺(10 mmol/L)+ AngⅡ(10-6 mol/L),TP组].流式细胞仪检测细胞上清液中的活性氧(ROS)浓度,荧光实时定量PCR方法检测HK-2细胞所表达的转化生长因子β1(TGF-β1)和晚期糖基化终产物受体(RAGE)mRNA表达量.结果 检测细胞上清液中的ROS浓度,与AngⅡ组比较,P1组和P2组均显著降低ROS浓度(P<0.01),TP组的ROS生成也明显减少(P<0.01),但T组与AngⅡ组间比较差异无统计学意义(P>0.05);与AngⅡ组比较,T组、P2组和TP组的HK-2细胞的RAGE,TGF-β1 mRNA表达量明显降低(P<0.05);与T组和P2比较,TP组HK-2细胞的TGF-β1 mRNA表达进一步降低(P<0.01).结论 替米沙坦和吡哆胺可协同下调HK-2细胞转化生长因子TGF-β1和RAGE的表达;在改善氧化应激功能上,吡哆胺作用强于替米沙坦.
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细小病毒B19的芯片检测方法构建
目的 运用基因芯片技术构建快速简便检测B19细小病毒的方法,用于B19病毒的大规模筛查和早期诊断.方法 利用Oligo6.0和primer5.0软件分别设计出5对引物(其中每对引物中的1个用Cy5标记)和6个探针,将探针固定在特制的醛基检测芯片上.分别提取B19病毒全基因组质粒、患者组血清、正常组血清的DNA,进行不对称扩增,产物与芯片杂交,观察结果;DNA测序验证芯片检测结果的准确性;观察等倍稀释不对称PCR扩增产物杂交信号的强度变化,检测芯片的灵敏度.结果 电泳结果表明PCR扩增获得的DNA片段和预期表达片段大小一致.芯片杂交结果和DNA测序验证结果完全吻合,芯片杂交信号的强弱会随着DNA浓度的降低而减弱.结论 本研究建立了细小病毒B19的芯片检测方法,该方法并具有较高的灵敏度和特异性.
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斑点追踪显像对冠心病患者左心室扭转运动的研究
目的 应用斑点追踪成像技术(STI)定量分析冠心病患者左心室扭转运动,探讨其临床应用价值.方法 采集经冠状动脉造影证实的303例冠心病患者左室短轴心底及心尖水平切面二维灰阶动态图像,测量各项左心室扭转参数并获得旋转曲线.结果 冠心痛患者冠状动脉轻度狭窄组、中度狭窄组和重度狭窄组中1支、2支、3支病变组之间差异均有统计学意义(P<0.05).结论 左心室扭转参数可以评价冠心病患者左心室收缩功能,STI为临床早期无创性诊断冠心痛提供了新方法.
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IL-22RA1基因多态性与系统性红斑狼疮发病相关性的研究
目的 探讨白细胞介素22受体A1(IL-22RA1)外显子基因多态性与中国北方汉族人群系统性红斑狼疮(SLE)及狼疮肾炎(LN)发病的相关性.方法 利用基因测序、聚合酶链式反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)电泳技术对中国北方汉族人群IL-22RA1基因单核苷酸多态性(SNP)进行筛选,通过比较基因型在SLE病例组与健康对照组中的分布,进而研究IL- 22RA1与SLE/LN的相关性.结果 在IL-22RA1基因第7外显子处存在1个有义SNP位点,该位点存在3种基因型,即C/C型、C/G型和G/G型.各型在SLE病例组和健康对照组中的分布差异无统计学意义.结论 IL-22RA1外显子基因有义SNP与中国北方汉族人群SLE的易感性可能无相关性.
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美沙拉嗪口服联合锡类散改良保留灌肠治疗老年溃疡性结肠炎的疗效
选择我院消化内科收治的老年溃疡性结肠炎患者66例,探讨美沙拉嗪口服联合锡类散改良保留灌肠治疗老年溃疡性结肠炎的临床疗效.
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隐匿性交界性早搏致房室传导多样化1例报告
报告房室交界区早搏隐匿性传导导致心电图多种房室传导现象共存患者1例,探讨同类心电图分析方法及临床意义.
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Arnold-Chiari畸形143例显微手术治疗经验体会
目的 探讨Amold-Chiari畸形手术治疗方法及治疗经验体会.方法 回顾性分析143例Amold-Chiari畸形患者的临床资料.143例患者均行枕下减压术,其中95例行轻划硬膜减压,48例行自体筋膜扩大重建.全部患者术前均行MRI检查,其中132例伴发脊髓空洞,24例伴有寰枢椎脱位、半脱位,颅底陷入、扁平颅底等寰枕畸形.结果 3例术后死亡,8例脑脊液漏,近期治疗无效5例.117例获得随访,随访3个月~6年,平均随访2.5年,痊愈67例,好转33例,远期治疗无效17例,一期行经口齿状突切除-枕颈内固定者7例,行单纯枢枕植骨融合者4例.结论 枕下减压自体筋膜修补扩大重建是目前为行之有效的方法,对于颅颈交界区的稳定性必须给予充分的重视.
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重组血管内皮生长因子165对肝硬化大鼠肝功能的影响
目的 探讨经门静脉导入重组血管内皮生长因子165对肝硬化大鼠肝功能的影响.方法 雄性SD大鼠50只,体质量180~220 g,完全随机分成正常组10只、诱导模型组40只.采用硫代乙酰胺诱导肝硬化模型方法,10周后成模25只.模型组随机分为肝硬化实验组15只和肝硬化对照组10只.实验组经门静脉插管植入Alzet微渗泵灌注血管内皮生长因子入门静脉,持续作用2周.正常组和肝硬化对照组行开腹后关腹对照处理.2周后处死各组大鼠,HE染色观察大鼠肝脏病理组织学改变;全自动生化分析仪检测血清中的丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、白蛋白(ALB)和总胆红素(TBIL)含量.结果 肝硬化对照组肝细胞变性坏死、弥漫纤维结缔组织增生,有假小叶形成.而肝硬化实验组变性坏死程度减轻,纤维结缔组织增生范围缩小,纤维化分级有明显改善,差异具有统计学意义(P<0.01).肝硬化对照组ALT、AST、TBIL均显著升高,ALB下降,同正常组相比差异具有统计学意义(P<0.01).肝硬化实验组同肝硬化对照组比较,ALT、AST、TBIL均显著下降,ALB上升,差异具有统计学意义[(115.71±12.63)U/L vs (192.36±21.84) U/L;(196.26±18.45) U/L vs (295.11±31.78) U/L;(6.32±1.32)μmol/Lvs (10.69±2.47) μmol/L;(14.57±1.92) g/L vs(9.90±1.27) g/L;P< 0.01)].结论 经门静脉灌注血管内皮生长因子165具有改善肝硬化大鼠肝脏功能的作用.
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HPC2突变体真核表达载体的构建
目的 构建在哺乳动物细胞表达的HPC2真核表达突变载体,并在U2OS细胞中表达.方法 从人U2OS细胞中克隆HPC2cDNA片段,并利用Gateway技术构建pcDNA3.2/V5/HPC2质粒.将质粒用脂质体瞬时转染U2OS细胞,细胞裂解后用Western blot分析HPC2的表达情况.设计突变引物,以HPC2质粒为模板进行PCR,将PCR产物连接并转化扩增,得到特定位点突变的pcDNA HPC2质粒.结果 PCR、酶切、测序均表明pcDNA-V5/HPC2突变质粒构建成功,并可在U2OS细胞中表达.结论 成功构建了pcDNA-V5/HPC2突变真核表达载体,为研究HPC2的功能提供了有力的工具.
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十全大补汤对小鼠骨髓源性细胞向脑内迁移的影响
目的 探讨十全大补汤对小鼠骨髓源性细胞向脑内迁移的影响.方法 将增强型绿色荧光蛋白转基因小鼠的骨髓细胞通过股静脉移植入实验小鼠制作成嵌合鼠模型,4周后分为实验组(口服十全大补汤组)和对照组(给水组),继续饲养5周.利用流式细胞术检测鼠血中GFP及CD1 1b阳性细胞比例,利用免疫组织化学法检测鼠脑GFP或Iba1阳性细胞的分布.结果 骨髓移植成功,嵌合鼠79%以上血白细胞由移植来源的骨髓细胞产生,十全大补汤能够促进血中单核巨嗜细胞系统的增殖.2组小鼠小脑内均偶可见GFP阳性细胞,差异无统计学意义.十全大补汤能够增加小鼠脑海马区固有小胶质细胞的数量.结论 对于无脑部损伤的小鼠,口服十全大补汤能够促进血中CD11b阳性的单核巨噬细胞系统的增殖,同时能够增加脑中固有小胶质细胞的数量.
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小鼠骨髓源性内皮祖细胞的培养和表面标志物鉴定
目的 建立一种从小鼠骨髓中分离、培养内皮祖细胞(EPC)的方法,并对EPC多种表面标志物进行鉴定.方法 密度梯度离心法获取小鼠骨髓源性单个核细胞,应用专门培养基EGM-2培养.观察不同时期细胞增殖情况;在培养7d后行DIL-AC-LDL和FITC-UEA-1双荧光染色鉴定及流式细胞检测;应用RT-PCR分析0,4,7d时CD31、CD34、CD45、CD117、CD133、FLK-1、VE-Cad等表面标志物的表达情况.结果 诱导培养的骨髓单个核细胞72 h后基本完成贴壁,8~9 d时贴壁70%~80%可进行传代,2~3周后呈典型的鹅卵石样外观.细胞培养7d后DIL-AC-LDL和FITC-UEA-1双染色阳性细胞比例为(90.16±6.77)%,流式细胞检测PE-Flk-1、APC-CD133、FITC-CD34均阳性概率为(1.73±0.27)%.RT-PCR结果显示随时间推移CD34、CD117、CD133的表达量逐渐下降,而CD31、FLK-1、VE-Cad等内皮系标志物的表达逐渐增加.结论 密度梯度离心法结合定向诱导培养可获得较多数量的EPC,以流式细胞检测技术为主,结合细胞形态学和功能学对EPC进行鉴定是一种较为理想的方法.
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内毒素与机械通气对大鼠膈肌氧化损伤的影响
目的 诱导型一氧化氮合酶(iNOS)是氧化应激的核心指标.本研究通过比较iNOS在脓毒症(sepsis)与机械通气(CMV)大鼠膈肌中iNOS的变化,分析sepsis及CMV对膈肌氧化应激的影响.方法 将32只健康SD大鼠随机分为4组(n=8),对照组、sepsis组、CMV组、sepsis+ CMV组.采用HE染色在光镜下观察肺组织的病理改变,采用免疫组化分析膈肌组织中iNOS的表达.结果 sepsis组肺组织病理发生改变,而sepsis+ CMV组肺部病理改变有所减轻.sepsis+ CMV组肺间质水肿明显减轻,中性粒细胞及白细胞渗出减少.免疫组化显示iNOS的表达在sepsis组、CMV组较对照组有明显增加(P< 0.05);sepsis+CMV组iNOS表达较单独sepsis组及CMV组增加更为明显(P<0.05).结论 内毒素8 mg/kg腹腔注射24h,可明显增加膈肌的氧化损伤;CMV 8 h也可以导致膈肌氧化损伤增强;内毒素联合CMV比单独sepsis组及CMV组膈肌氧化损伤增加更明显,这可能是呼吸衰竭及撤机困难的重要原因.
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下丘脑正中视前核内注入4-α-佛波醇-12,13-二葵酸对急性冷暴露大鼠体温的影响
目的 探讨在下丘脑内局部注入4-α-佛波醇-12,13-二葵酸(4αPDD)对大鼠在急性冷暴露过程中体温的影响及其机制.方法 预先在大鼠下丘脑内给予不同剂量(3.25、6.5和13 μg/mL) 4αPDD后,将大鼠进行急性冷暴露(4℃,4h),观察不同剂量的4αPDD对急性冷暴露过程中大鼠体温的影响,并采用Western blot方法检测下丘脑中瞬时感受器电位香草酸受体家族成员4 (TRPV4)表达水平的变化.结果 在3种剂量4αPDD(3.25、6.5和13 μg/mL)中,给予40PDD剂量越大,急性冷暴露对体温降低的影响越小.中、高剂量(6.5和13 μg/mL)组与单纯冷暴露组比较,各时间点体温变化差异有统计学意义(P<0.05).在1~3 h期间的各检测时间点,中、高剂量2组之间体温变化差异也有统计学意义(P<0.05).给予中、高剂量4αPDD并进行冷暴露时,TRPV4表达水平明显高于对照组及单纯冷暴露组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 4αPDD能减弱急性冷暴露所致的大鼠低体温.
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LYVE-1及Podoplanin在小鼠Lewis肺癌模型肿瘤内表达情况的初步研究
目的 检测两种淋巴管标志物LYVE-1及Podoplanin在小鼠Lewis肺癌模型肿瘤中的表达,并比较其表达特异性.方法 建立小鼠Lewis肺癌肿瘤模型,检测LYVE-1、Podoplanin在肿瘤内淋巴管的表达,并利用CD34标记肿瘤内的毛细血管以便与淋巴管进行区分.结果 LYVE-1及Podoplanin染色结果并不完全重叠,Podoplanin阳性表达结果除与LYVE-1相同部分外,尚存在大量棕黄色条带状及阳性细胞结构染色,且CD34表达阴性.结论 LYVE-1较podoplanin对Lewis肺癌淋巴管的识别更为特异,背景更为清晰,与CD34联合应用可准确区分毛细淋巴管与毛细血管.
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不同激酶活性的hPAK6基因原核表达载体的构建及重组蛋白的表达
目的 构建不同激酶活性的hPAK6原核表达载体并诱导和鉴定其融合蛋白表达.方法 野生型、激酶活型和激酶死型pcDNA3.1-PAK6经EcoR Ⅰ和Xho Ⅰ双酶切后,克隆至GST融合表达载体pGEX-5X-1,在E.coli BL21中诱导不同型GST-hPAK6融合蛋白表达,并经免疫印迹鉴定结果.结果 野生型、激酶活型和激酶死型hPAK6编码序列已被克隆至GST融合表达载体pGEX-5X-1,双酶切及测序鉴定正确,并在E.coli BL21中获得了诱导表达,蛋白的分子量均为101 kDa,免疫印迹检测到了融合蛋白表达.结论 成功构建不同激酶活性的hPAK6基因原核表达载体,并分别诱导表达出GST-PAK6融合蛋白.
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人精胺/精眯N1-乙酰基转移酶单克隆抗体的制备及鉴定
目的 制备鼠抗人精胺/精眯N1-乙酰基转移酶(SSAT)单克隆抗体,分析该抗体的效价、抗原特异性及其在Western blot 和免疫组织化学等分析技术中的可用性.方法 在BL21 (DE3)中原核表达带6×His标签的SSAT重组蛋白,并用Ni-NTA树脂亲和层析纯化.用SSAT重组蛋白免疫Balb/C小鼠,通过杂交瘤技术制备抗SSAT单克隆抗体,所得抗体的特异性及效价用ELISA、Western blot及免疫组织化学技术检测.结果 成功建立了稳定分泌鼠抗人SSAT的单克隆抗体杂交瘤细胞株,该单克隆抗体可用于ELISA、Western blot、免疫组织化学、免疫荧光等分析技术.结论 成功制备SSAT单克隆抗体,为SSAT相关的分子和病理研究奠定了基础.
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大鼠深低温冻储同种异体气管移植的实验研究
目的 探讨深低温冻储对大鼠同种异体移植气管上皮再生的影响.方法 用深低温冻储2周和6周的大鼠气管进行同种异体气管移植,以自体和异体新鲜气管作为对照,通过观察供体气管的组织学、上皮爬行和再生情况,评价深低温冻储不同时长对移植气管的存活和新生上皮再生的作用.结果 深低温冻储6周后实验组的移植气管复层上皮比自体气管移植组厚度明显变薄或成单层,软骨无变性坏死,未见有单核细胞浸润,长存活达35 d,而深低温冻储2周气管移植大鼠为10 d.结论 深低温冷冻后的组织可以保持其原有的活力和组织完整性,并能消减供体气管的抗原性.冻储6周的移植气管上皮再生和受体的存活率要优于冻储2周组.
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MK-801及CNQX对尾末端截断后小鼠血清褪黑素含量变化的影响
目的 观察谷氨酸N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体拮抗剂5-甲基二氢丙环庚烯亚胺马来酸(MK-801)、α-氨基3-羟基5-甲基4-异恶唑丙酸/海人藻氨酸(AMPA/Kainate)受体拮抗剂6-氰基-7-硝基喹喔啉-2,3-二酮(CNQX)对尾末端截断后小鼠血清褪黑素(MLT)含量变化的影响,为进一步研究截肢后中枢的可塑性变化提供依据.方法 用ELISA法测定尾末端2.5 cm截断后2h小鼠血清MLT含量,并观察静脉注射MK-801、CNQX对断尾后小鼠血清MLT含量变化的影响.结果 与对照组比较,断尾后2h小鼠血清MLT含量降低;MK-801、CNQX分别拮抗断尾引起的小鼠血清MLT含量的降低.结论 断尾后2h小鼠血清MLT含量降低;NMDA受体、AMPA/Kainate受体参与断尾引起小鼠血清MLT含量降低的过程.
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烹调油烟冷凝物诱导永生化人支气管上皮细胞恶性转化的研究
目的 用烹调油烟冷凝物(COFC)诱导正常永生化人支气管上皮细胞(BEP-2D)慢性恶性转化,构建恶性转化的细胞模型,以探讨COFC的危害.方法 通过MTT法确定诱导物的染毒剂量,以COFC处理细胞,用血清抗性实验和锚着独立生长实验鉴定细胞恶性转化的倾向和恶性特征,比较对照组和实验组抗血清促分化的能力和集落形成率,并将细胞接种于裸鼠,观察其成瘤情况.结果 以50 μg/mL的COFC对细胞进行染毒,传至第20代细胞,与对照组相比,其抗血清促分化的能力差异均有统计学意义(P<0.01);传至第35代,转化细胞的锚着独立生长实验克隆形成率差异均有统计学意义(P<0.05),并接种裸鼠成瘤,病理检查结果为低分化鳞癌.结论 COFC可诱导正常永生化人支气管上皮细胞发生恶性转化,提示烹调油烟对人体具有致癌致畸作用.
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肼苯哒嗪联合硝酸异山梨酯对心力衰竭大鼠内皮功能及氧化应激水平的影响
目的 探讨肼苯哒嗪(HYD)联合硝酸异山梨酯(ISDN)对心力衰竭大鼠内皮功能及氧化应激水平的影响.方法 利用阿霉素诱导大鼠心力衰竭模型,成模后分为安慰剂对照组(给予生理盐水)、培哚普利(2 mg·kg-1·d-1)+比索洛尔(5 mg·kg-1·d-1)组及培哚普利(2 mg·kg-1·d-1)+比索洛尔(5 mg· kg-1·d-1)+HYD(7.2 mg·kg-1·d-1)+ISDN(6 mg·kg1·d-1)组.药物干预6周后,取心肌组织测定心肌组织内皮型一氧化氮合酶(eNOS)和内皮素1(ET-1)的表达,同时测定丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)水平.结果 HYD+ISDN并不能增加心肌组织eNOS含量,对心肌组织内eNOS及ET-1的表达均无显著影响;HYD+ISDN可显著降低心肌组织MDA含量,同时使心肌组织SOD活性增高.结论 HYD+ISDN可改善心力衰竭大鼠体内氧化应激状态.
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NK4基因重组慢病毒载体的构建及在肝癌细胞中的表达
目的 构建共表达人NK4基因和增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因的重组慢病毒载体,转染人高侵袭转移肝癌细胞LM3(HCCLM3),观察其转染效率及表达情况.方法 采用DNA重组技术,将NK4基因克隆至带EGFP的慢病毒表达载体pLenti6.3-内部核糖体进入位点序列(IRES)-EGFP中,并用脂质体介导法将慢病毒包装系统和带NK4基因的质粒pLemi6.3-NK4-IRES-EGFP共转染293T细胞,包装慢病毒并测定滴度.以不同感染复数(MOI)的重组慢病毒感染293T细胞,筛选适MOI,以适MOI重组慢病毒感染HCCLM3细胞,观察转染效率.Western blot法测定细胞中NK4蛋白表达水平.结果 成功构建共表达NK4基因和EGFP基因的慢病毒载体pLenti6.3 -NK4 -IRES-EGFP,并对其包装、纯化及浓缩后测定病毒滴度为1.08×108 TU/mL.重组慢病毒感染HCCLM3细胞筛选其适MOI为7.转染后HCCLM3细胞中可见明显的NK4蛋白表达,而未转染细胞中无NK4蛋白的表达.结论 成功构建了NK4基因的重组慢病毒载体,有效地转染HCCLM3细胞后可高表达NK4蛋白.
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泉州市ICU护士工作压力与离职意愿相关性研究
目的 探讨ICU护士工作压力与离职意愿相关性,为制订应对措施提供依据.方法 采用普查法对泉州市12所医院ICU护士使用离职意愿量表和工作压力量进行调查.结果 ICU护士离职意愿得分(16.24±4.27)、工作压力得分(80.66±15.55)、护士工作压力源与离职意愿呈显著正相关(P<0.01).工作压力源量表中的护理专业及工作方面、管理及人际关系方面是预测护士离职意愿的重要因素.结论 工作压力源越高,离职意愿越强.针对影响离职意愿的主要因素,结合当地的情况提出干预策略,为稳定ICU护理队伍具有重要意义.
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齿状突畸形寰枢椎脱位合并小脑扁桃体下疝畸形1例围手术期护理体会
总结1例齿状突畸形寰枢椎脱位合并小脑扁桃体下疝畸形患者的临床资料,并阐述围手术期的护理.
年 | 期数 |
2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
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