中国防痨杂志
Chinese Journal of Antituberculosis 중국방잡지
- 主管单位： 中国科学技术协会
- 主办单位： 中国防痨协会
- 影响因子： 2.52
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1000-6621
- 国内刊号： 11-2761/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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结核分枝杆菌新型抗原Rv3400的免疫原性研究
目的 用结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis)特异性抗原Rv3400联合弗氏不完全佐剂(incomplete Freund's adjuvant,IFA)构建结核亚单位疫苗(Rv3400-IFA),在C57BL/6小鼠体内评估其免疫效应.体外用抗原Rv3400感染巨噬细胞RAW264.7并评估其免疫应答.方法 PCR扩增基因Rv3400,构建重组质粒pET28a(+)-Rv3400,转入大肠埃希菌BL21 (DE3) pLysS感受态细胞中,诱导表达并纯化Rv3400蛋白.用抗原Rv3400、阳性对照脂多糖(lipopolysaccharides,LPS),分别刺激小鼠巨噬细胞RAW264.7,阴性对照为未刺激的巨噬细胞,流式细胞术检测细胞表面分子表达,收集细胞培养上清,ELISA检测细胞因子的分泌.另一方面纯化的Rv3400蛋白与IFA充分乳化构建亚单位疫苗免疫小鼠;C57BL/6小鼠采用数字表法随机分为3组,分别为实验组Rv3400组、阳性对照组Rv3425组、阴性对照组IFA组,每组5只,每2周1次、共免疫3次.分别采用酶联免疫斑点检测技术(enzyme-linked immunospot assay,ELISPOT)和酶联免疫吸附测定(ELISA)技术对免疫小鼠的细胞免疫和体液免疫进行评估.结果 (1)成功克隆表达并纯化结核分枝杆菌特异性抗原Rv3400.(2)体外细胞实验结果显示:Rv3400抗原刺激巨噬细胞,其表面分子CD80、CD86、CD40、MHCⅡ表达量显著提高,阳性细胞比率[分别由未刺激的(34.70±2.40)％、(31.25±18.31)％、(41.80±6.01)％、(44.30±0.44)％提高至1 μg/ml Rv3400抗原刺激后的(90.45±7.71)％、(90.10±4.10)％、(89.97±7.79)％、(85.13±5.12)％];能促进细胞分泌高水平的肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6),分别达(49 217.0±390.61) pg/ml、(1783.4±51.18) pg/ml.(3)免疫小鼠后,ELISPOT结果显示:实验组Rv3400组小鼠分泌INF-γ的斑点形成细胞(spot forming cells,SFC)(136.20±95.09)显著高于阴性对照组(14.00±9.62)(t=2.859,P＜0.01);ELISA结果显示:Rv3400组小鼠T细胞产生TNF-α和IFN-γ的水平[(247.38±142.268)pg/ml、(325.45±75.19)pg/ml)]明显高于阴性对照组[(69.25±60.06) pg/ml、(2.22±1.28) pg/ml(t=2.579,P＜0.05;t=8.597,P＜0.01)];(4)Rv3400组小鼠脾CD4+ CD44high、CD4+ CD62Llow、CD8+ CD44high、CD8+ CD62LlowT淋巴细胞百分比[(44.20±11.95)％,(43.56±11.90)％,(48.88±7.42)％,(47.04±7.72)％]与对照组IFA组[(27.02±6.56)％,(62.60±4.73)％,(30.57±6.00)％,(58.48±6.06)％]相比,差异有统计学意义(one-way ANOVA,F=18.460,F=8.108,F=32.194;F=4.080;P＜0.05,P＜0.01,P＜0.01,P＜0.05),呈显著性增加.(5)通过间接ELISA测定免疫后的小鼠血清抗体IgG效价水平高达1:409 600,表明抗原Rv3400也能诱导有效的体液免疫应答;IgG2b/IgG1水平为1.8,说明抗原Rv3400诱导小鼠以Th1型免疫反应为主.结论 亚单位疫苗Rv3400-IFA在C57BL/6小鼠体内可产生较好的细胞免疫和体液免疫效应.结核分枝杆菌特异性抗原Rv3400有望成为新的结核病疫苗设计及诊断的候选抗原.
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母牛分枝杆菌菌苗治疗卡介苗反应性淋巴结炎临床分析
目的 评价母牛分枝杆菌菌苗(微卡)在治疗卡介苗反应性淋巴结炎的临床效果,为治疗卡介苗反应性淋巴结炎提供参考依据.方法 搜集2012年1月至2015年7月上海市公共卫生临床中心的住院卡介苗反应性淋巴结炎患儿74例.根据患儿家属的治疗意愿,25例患儿口服异烟肼、利福平抗结核药物治疗(抗结核治疗组),44例患儿接受微卡治疗(微卡组),5例先天性免疫缺陷病患儿口服异烟肼、利福平、乙胺丁醇抗结核十微卡治疗.比较抗结核治疗组和微卡组患儿的治疗效果和不良反应.应用SPSS 21.0软件处理数据,组间比较采用x2检验,以P＜0.05为差异有统计学意义.结果 抗结核治疗组100.0％(25/25)患儿淋巴结肿大均逐渐消退,微卡组95.5％(42/44)淋巴结肿大逐渐消退,两组有效率比较差异无统计学意义(x2=1.170,P＞0.05).抗结核药物治疗组16.0％(4/25)的出现肝功能损伤,微卡组无患儿出现肝功能损伤,两组肝损伤发生率比较差异有统计学意义(x2=7.473,P＜0.05).结论 采用微卡治疗卡介苗反应性淋巴结炎具有较好的效果,且可减少患儿不良反应的发生.
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豚鼠模型卡介苗接种所引发的淋巴结炎致病菌的分离和鉴定
目的 建立由卡介苗接种所引发的淋巴结炎致病菌分离与菌型鉴定的豚鼠模型,研究卡介苗临床不良反应病原学的鉴定方法.方法 按照随机数字表法将39只豚鼠分为生理盐水组(3只),高剂量和低剂量卡介苗接种组(各18只).分别于注射生理盐水和卡介苗后4、5、8周对豚鼠进行解剖,手术摘取卡介苗接种后豚鼠的淋巴结与局部脓肿,研磨处理为组织悬液.将组织悬液接种于改良罗氏培养基、7H11培养基、7H9液体培养基进行培养,同时对组织悬液进行抗酸染色与卡介菌特异性缺失区1(BCG RD1)的检测.培养结束后对3种培养物均进行抗酸染色与BCG RD1的检测.结果 组织悬液在改良罗氏培养基上培养阳性结果为淋巴结33/33,脓肿6/6;在7H11培养基上培养阳性结果为淋巴结33/33,脓肿6/6;在7H9液体培养基阳性结果为淋巴结22/33,脓肿6/6.培养物抗酸染色结果呈阳性,细菌形态与特性与卡介菌一致;培养物BCG RD1的检测结果与卡介苗DNA国家参考品及皮内注射用卡介苗特异性鉴别试验用国家参考品的扩增结果一致(196 bp).结论 卡介苗接种导致的淋巴结炎的相关标本可以通过固体培养法培养出致病菌,对培养物进行BCG RD1的检测可以鉴定菌型.卡介苗高剂量免疫、选取肿大淋巴结作为检查样本和固体培养基培养法更有利于模型的建立.
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趋化因子5和趋化因子受体5基因多态性与肺结核易感性的关系
目的 探讨趋化因子5 (CCL5)及趋化因子受体5(CCR5)基因多态性与肺结核(pulmonary tuberculosis,PTB)易感性的关系.方法 选取2014年2月至2015年4月首都医科大学附属北京胸科医院收治的PTB患者作为病例组,共494例;选取413名健康志愿者作为对照组.采集研究对象静脉血,使用竞争性等位基因特异性PCR方法检测其CCL5启动子区rs2107538和CCR5启动子区rs1799987基因型,计算病例组和对照组的基因型及等位基因频率,并对其分布情况进行比较,分析各基因多态性与PTB患病的相关性.结果 CCL5启动子区rs2107538基因-403位点GG、GA、AA基因型及等位基因G、A的频次和频率病例组分别为:202(41％)、224(45％)、68(14％)和628(64％)、360(36％);对照组分别为:152(38％)、209(51％)、52(13％)和513(62％)、313(38％),两组之间基因型分布和等位基因分布差异均无统计学意义(x2值分别为2.50和0.35,P值均＞0.05).CCR5启动子区rs1799987基因-2459位点AA、AG、GG基因型及等位基因A、G的频次和频率病例组分别为:99(20％)、272(55％)、123(25％)和470(48％)、518(52％);对照组分别为:67(16％)、210(51％)、136(33％)和344(42％)、482(58％),两组之间基因型分布和等位基因分布差异均有统计学意义(x2值分别为7.62和6.14,P值均＜0.05).携带该位点基因型GG和等位基因G可降低PTB患病风险[OR(95％CI)值分别为:0.68(0.50～0.91)、0.78(0.64～0.94)].结论 CCL5启动子区rs2107538基因多态性与PTB患病无相关性;携带CCR5启动子区rs1799987基因-2459位点基因型GG和等位基因G可降低PTB患病风险.
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结核分枝杆菌核酸检测在矽肺结核患者中的应用价值
目的 评价核酸检测法在矽肺结核患者中的临床应用价值.方法 选取2015年1-12月在北京京煤集团总医院尘肺与结核病科住院的165例诊断为矽肺结核患者作为病例组;以同时期住院的90例矽肺患者作为对照组.留取研究对象痰标本用于检测.分别应用痰涂片显微镜检法、固体培养法和核酸检测法对研究对象的痰液标本进行检测,并对检测结果进行比较.结果 以固体培养检测结果作为标准,核酸检测法检测病例组的敏感度为94.7％(36/38),特异度为81.1％ (103/127),阳性预测值为60.0％ (36/60),阴性预测值为98.1％(103/105);以痰涂片法为标准,核酸检测法检测病例组的阳性预测值为55.0％(33/60),阴性预测值为100.0％(105/105),敏感度为100.0％(33/33),特异度为79.5％(105/132).与固体培养法和痰涂片法为标准,核酸检测法检测对照组的特异度均为96.7％(87/90).病例组中,核酸检测法检测阳性率为36.4％(60/165),高于固体培养法的23.0％(38/165)和痰涂片法的20.0％(33/165),差异有统计学意义(x2=12.85,P＜0.05);对照组中,核酸检测法检测阳性率为3.3％(3/90),其他方法检测阳性率为0.0％.结论 在矽肺结核患者中,核酸检测对Mtb有较高的敏感度和特异度,对Mtb快速检测及辅助诊断具有较高的临床应用价值.
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荧光定量PCR技术在诊断骨关节结核患者中的价值
目的 探索荧光定量PCR技术在骨关节结核患者诊断中的价值.方法 选取2015年1月至2015年9月在首都医科大学附属北京胸科医院骨科进行手术治疗的39例骨关节结核患者(病例组)和20例非骨关节结核患者(对照组)作为研究对象.收集研究对象的石蜡包埋组织标本,并对标本行结核分枝杆菌荧光定量PCR检测,计算荧光定量PCR检测的敏感度及特异度.通过病历查询研究对象的组织形态学及抗酸染色检测结果.比较荧光定量PCR技术与组织形态学及抗酸染色检测敏感度的差异.结果 病例组39例骨关节结核患者中,荧光定量PCR检测的敏感度为97.4％(38/39);病例组中8例组织形态学不能确诊的患者中,荧光定量PCR检测出7例阳性;对照组20例非骨关节结核患者中,荧光定量PCR检测的特异度为100.0％(20/20).病例组中,组织形态学检测的敏感度为79.5％(31/39),抗酸染色检测的敏感度为48.7％(19/39),均低于荧光定量PCR检测,差异有统计学意义(x2=25.39,P=0.000),荧光定量PCR检测敏感度高于组织形态学检测和抗酸染色检测(荧光定量PCR与组织形态学比较,x2=4.52,P=0.033;荧光定量PCR与抗酸染色比较,x2=23.52,P=0.000).对照组中,组织形态学检测的特异度为100.0％(20/20),抗酸染色检测的特异度为100.0％(20/20),与荧光定量PCR检测的特异度比较,差异无统计学意义(x2 =0.00,P=1.000).结论 荧光定量PCR技术较组织形态学及抗酸染色技术具有更高的敏感度,有助于骨关节结核的诊断.
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应用反向斑点杂交技术快速检测结核分枝杆菌耐药性
全国第五次结核病流行病学抽样调查资料显示,我国15岁以上人群活动性、涂阳和菌阳肺结核的患病率分别为459/10万、66/10万和119/10万,Mtb耐多药率为6.8％[1].近年来,流动人口的增加、诊断治疗的延误和抗结核药物的滥用等原因导致耐药菌株的增加,造成耐多药结核病(MDR-TB)的流行[2].多重耐药Mtb的出现、临床缺乏有效的耐药菌株检测手段和尚无新的抗结核药物出现等原因,使患者错过了佳的治疗时机,增加了耐药菌株的传染机会.因此,对Mtb的快速诊断及寻找有效的耐药检测方法成为了迫切的需求.
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活动性肺结核密切接触者发病影响因素的Meta分析
结核病仍属全球重要的公共卫生问题.WHO的一项研究显示,全世界罹患结核病的患者共有900万例,150万例死于结核病[1].我国是结核病高流行地区,是全球22个结核病高负担国家之一.据WHO评估,目前我国结核病年发病例数约为130万例,位居全球第2位[2].结核病密切接触者是结核病的一个高危人群,与普通人相比具有更高的感染率和发病率.肺结核患者的密切接触者中,结核分枝杆菌阳性检出率可达到0.5％～15％,其中1％～2％的接触感染者迅速发展为活动性结核病[3].分析活动性肺结核密切接触者发病的影响因素,对提高患者发现和阻断传播有着重要的价值和意义.近年来,国内外学者对影响肺结核密切接触者发病的因素展开了大量的研究,但研究内容欠全面,研究结果存在差异.本研究拟采用Meta分析方法综合分析活动性肺结核密切接触者发病的影响因素,为今后的防治工作提供依据.
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2010-2014年郑州市非结核病防治机构报告疑似肺结核患者到位情况
2004年1月启动的疾病监测信息报告管理系统(简称"直报系统")及2005年1月启用的结核病管理信息系统(简称"专报系统"),给全国结核病防治工作的开展提供了重要的信息平台.郑州市非结核病防治机构(简称"非结防机构")均利用网络直报系统报告转诊疑似肺结核患者情况,非结防机构仍是肺结核患者就诊的首选场所[1].促使非结防机构诊断的疑似肺结核患者转诊到结核病防治机构(简称"结防机构"),是提高肺结核患者发现水平的一项有效措施[2].郑州市通过采取综合干预措施,规范疑似肺结核患者转诊报告和追踪流程,提高了疑似肺结核患者的总体到位率.现将郑州市2010-2014年疑似肺结核患者转诊、转诊到位、追踪到位、总体到位情况分析如下.
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淋巴结球孢子菌病误诊为淋巴结结核一例
球孢子菌病(coccidioidomycosis,CM)是一种由粗球孢子菌引起的真菌感染性疾病,其自身组成单一疾病谱,可以表现为一种温和的、自限的全身性多脏器受累的系统性疾病,也可表现为严重的发热性疾病,甚则表现为危及生命的严重感染;而结核病是由Mtb感染引起的一种慢性传染病,可累及人体全身各种器官(主要感染肺和淋巴系统).由于球孢子菌病在我国很少见,且二者有着相似的临床表现和肺部影像学特征,故在临床诊断过程中极易漏诊、误诊.2015年3月9日解放军第三○九医院收治了1例淋巴结球孢子菌病误诊为淋巴结结核的患者.现将临床诊治情况报道如下.
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CT与MRI对颅内结核分型诊断研究进展
CT与MRI在颅内结核的诊断、分型、疗效评估及随访观察中起着举足轻重的作用.笔者系统地回顾了CT与MRI应用于颅内结核研究的历史沿革,分析了现代影像学研究对于神经系统结核命名的影响,提出了颅内结核分型研究的必要性及颅内结核基础研究的方向.
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分子线性探针测定法在结核病诊断中的研究进展
耐药Mtb的日益增多和常规诊断技术的迟滞是结核病诊断延迟和预后不佳的重要原因.分子线性探针测定法是近年来兴起的一种PCR技术,包括比利时Innogenetics公司分子线性探针法(INNO-LPA)、Geno-type MTBDR分子线性探针法、自身免疫性诊断Mtb耐药分子线性探针法(the autoimmun diagnostika TB resistance line probe assay,AID-LPA)和反向杂交Mtb耐药分子线性探针法(the REBA MTB-rifa(R) assay,REBA-LPA).分子线性探针测定法既可以快速、准确诊断结核病,又可检测出常见耐药基因,而且其敏感度及特异度也很高.作者就近几年来分子线性探针技术的研究进展进行综述.
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代谢组学在结核病诊疗和病原学研究中的应用
代谢组学作为对机体的动态代谢状态进行定量测定的技术,可用于对代谢谱和代谢通路动态的分析、寻找疾病相关的生物标志物、测定机体内药物引起的代谢改变、探寻疾病发病机制.近年来,代谢组学已开始被应用于结核病的诊断、治疗、病原学、发病机制等方面的研究中.因此,作者对代谢组学在结核病诊疗和病原学研究领域的进展进行综述,并初步探讨其在临床应用和研究中的重要意义.
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蛋白质组学在结核性胸腔积液诊断中的现状及进展
蛋白质组学的快速发展,为研究更快速、准确、简单的诊断结核性胸腔积液(tuberculous pleural effusion,TPE)的方法提供了技术及理论基础.作者回顾了当前主流的蛋白质组学相关技术及近年来结核病及结核性胸腔积液相关蛋白质组学的研究.指出,目前仅在结核性胸腔积液中表达的特异性蛋白尚未确定,但从结核病患者血清、胸腔积液等体液中能分析出较非结核性疾病患者体液的差异性蛋白,有望通过蛋白质谱的比较分析,寻找到结核性相关特异性蛋白,进而发现新型结核性胸膜炎诊断标志物.
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精准医学在结核病防治领域的应用与展望
2015年1月20日,美国总统奥巴马在国情咨文演讲中提出了"精准医疗计划"(precision medicine initiative),并受到全世界的广泛关注.精准医学本质上是通过基因组、蛋白质组等组学技术和医学前沿技术,对于大样本人群与特定疾病类型进行生物标志物的分析与鉴定、验证与应用,从而精确寻找到疾病产生的原因和治疗的靶点,终实现对疾病和特定患者进行个性化精确治疗的目的[1].精准医学理念的深入标志着医学步入了一个新的时代.
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精准医学与结核病临床诊治
结核分枝杆菌无疑是达尔文进化论的成功实践者,其在千万年的适应性进化过程中获得了独特的生存能力.至今,人类尚无能力在世界范围内消灭结核病.为了达到消灭结核病的目的,需要从更深层次来认识我们的老对手."精准医学"的出现给我们提供了机遇.精准医学意味着我们对疾病的认识已经从"群体共性"进化到"个体特性"的水平,它依靠的科学背景包括人类基因组学、数据科学、计算机信息技术等.由此,我们能从更宏观和更微观的角度来了解结核分枝杆菌的发病模式、结核分枝杆菌与人类基因的相互关系,以及结核分枝杆菌菌株的突变耐药机制.笔者对精准医学在结核病诊治领域的应用做初步探讨.
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流行病学和统计学方法在结核病防治与管理中的应用
流行病学和生物统计学是对健康(疾病)群体现象进行定量分析的方法,被广泛地应用在结核病防治与管理中,主要涉及描述、分析、干预和评估4个方面.近年来,流行病学和生物统计学基本原理和方法有了很大丰富和发展,本专栏是为结核病防治工作人员介绍各种具体的"流行病学与统计学方法"而设,旨在详述不同方法的内容、特点、优势和局限,以针对性提高读者流行病学和卫生统计学专业素养.
| 年 | 期数 |
| 2019 | 01 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
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| 2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 z1 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 z1 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 z1 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 z1 |
| 2001 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2000 | 01 02 03 04 |
