中国防痨杂志
Chinese Journal of Antituberculosis 중국방잡지
- 主管单位： 中国科学技术协会
- 主办单位： 中国防痨协会
- 影响因子： 2.52
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1000-6621
- 国内刊号： 11-2761/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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结核分枝杆菌Ag85B-ESAT-6融合蛋白重组耻垢分枝杆菌对小鼠的免疫原性研究
目的 评价表达Mtb Ag85B ESAT-6融合蛋白的莺组耻垢分枝杆菌(Ag85B-ESAT-6-rM.s)在小鼠中的免疫原性.方法 6周龄BALB/c小鼠经背部皮下注射1×106 CFU(colony-forming unit,菌落形成单位)的Ag85B-ESAT-6-rM.s,同时设M.s免疫组(10只)、B[CG免疫组(10只)、Ag85B-ESAT-6融合蛋白免疫组(10只)和生理盐水组(10只).接种免疫后1～6周,尾静脉采血,检测小鼠外周血CD4+和CD8+T细胞所占百分比；免疫后6周,MTS[ 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-5-(3-carboxymethoxyphenyl)-2-(4-sulfophenyl )-2 H-tetrazolium,inner salt]法检测小鼠脾淋巴细胞增殖和酶联免疫斑点检测(enzyme-linked immunospot assay,ELISPOT)检测脾淋巴细胞分泌γ干扰素(interferon γ,IFN-γ)、白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2)和白细胞介素-4(interleukin-4,IL-4)等细胞因子的水平.结果 Ag85B-ESAT-6-rM.s免疫小鼠后能够明显刺激小鼠外周血CD4+和CD8+T细胞的产生,其所占百分比[(59.6±1.5)％]明显高于BCG免疫组[(48.8±2.3)％](t=12.252,P＜0.05)和原始M.s免疫组[(45.7±1.6)％](t=20.166,P＜0.05).Ag85B- ESAT-6-rM.s免疫小鼠的脾淋巴细胞增殖指数(3.23±0.31)与BCG免疫刺激的增殖指数(2.95±0.36)相当(t=1.864,P＞0.05),但其诱生IFN-γ的能力[斑点形成细胞(spot forming cells,SFC)][(167.5±36.6)SFC/106]明显高于BCG[(98.5±26.9)SFC/106](t=4.804,P＜0.05).结论 Ag85B-ESAT-6融合蛋白在耻垢分枝杆菌中的表达能够明显提高M.s的免疫原性,并能够刺激小鼠机体产生有利于抗Mtb感染的免疫反应,作为TB新型候选疫苗具有一定的研究前景.
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结核分枝杆菌ESAT6-RpfE亚单位疫苗的构建与免疫原性研究
目的 构建Mtb ESAT6-RpfE(早期分泌抗原靶6-复活促进因子E)的原核表达载体,表达和纯化融合蛋白,并对其免疫原性进行研究.方法 分别以Mtb H37Rv及临床株的基因组为模板,PCR扩增esat6、rpfE基因,依次插入pET30a质粒并在大肠埃希菌BL21中表达纯化ESAT6-RpfE蛋白.采用完全随机的方法将C57BL/6小鼠分组,每组6只,共进行了两次实验,第一次实验分为ESAT6、RpfE、ESAT6-RpfE、PBS、BCG五组,佐剂为二甲基三十六烷基胺(dimethyl-dioctyldecyl ammonium bromide,DDA)；第二次实验有ESAT6-RpfE、PBS、BCG三组,佐剂为DPG[DDA+ poly(I:C)+明胶].分别于0、3、6周皮下免疫C57BL/6小鼠.末次免疫8周后,用特异性抗原ESAT6及RpfE刺激,检测其分泌IFN-γ的水平；ELISA检测血清特异性抗体IgG2b、IgG1.结果 PCR扩增的esat6、rp/E基因序列与GenBank报道一致；融合蛋白主要以包涵体形式表达；亚单位疫苗免疫动物能够分泌RpfE特异性IFN-γ的脾淋巴细胞数量[(427.13±100.46)]显著高于PBS组(26.13±22.34;q=7.924,P＜0.001)；分泌ESAT6刺激特异性IFN-γ的脾淋巴细胞数量[(506.50±140.40)]明显高于PBS组(19.25±14.75；q=11.36,P＜0.001)和BCG组(125.5±46.41；q=8.882,P＜0.001).FSAT6-RpfE免疫组能诱导产生特异性抗体.结论 成功构建并表达ESAT6-RpfE融合蛋白.此融合蛋白可在C57BL/6小鼠中诱导抗原特异性的免疫应答,可作为新型结核亚单位疫苗的候选疫苗予以进一步研究.
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广西卫生行政部门和结核病防治机构对结核病防治“三位一体”新型服务模式的接受意愿调查分析
目的 了解广西卫生行政部门和结核病防治(简称“结防”)机构对推行结核病防治“三位一体”新型服务模式的接受意愿,为分析在广西推行该新型服务模式的可行性及进一步完善医疗卫生机构与结核病防治所合作(简称“医防合作”)管理规范提供参考依据.方法 采用方便抽样法,分别对广西14个地级市及其所辖27个县的卫生行政部门和结防机构的1位关键人物(即卫生局分管局长、结防机构分管领导和结防科长)进行现场问卷调查.结果 大部分卫生局分管局长、结防机构分管领导和结防科长赞成推行结核病防治“三位一体”新型服务模式,赞成率分别为73.7％(28/38)、75.0％(30/40)和66.7％(26/39).赞成的主要理由是该模式能更好地发挥各部门优势,有效利用医疗资源,有利于患者的诊治；不赞成的主要理由是目前综合医疗机构的公共卫生服务资源不足.结论 在广西推行结核病防治“三位一体”新型服务模式是可行的,但该模式需在完善现行相关规章制度的基础上因地制宜地逐步推行.
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第五轮中国全球基金结核病项目随州市Mtb与HIV双重感染防治效果评价
目的 对第五轮中国全球基金结核病项目随州市Mtb与HIV双重感染防治项目效果进行评价研究.方法 收集随州市CDC结核病防治所(简称“结防所”)2006年第4季度至2010年第4季度的季报表、年报表、专题调查等资料,建立数据库,进行统计分析.结果 项目期间,共登记活动性TB患者4077例(其中HIV感染者与AIDS患者开展TB筛查发现活动性TB患者21例),TB患者开展HIV抗体检测4056例,检测率达100.00％(4056/4056)；HIV阳性检出率为0.15％(6/4056).可随访的HIV感染者及AIDS患者1521例,接受TB筛查率达92.64％(1409/1521)；TB患者发现率为1.49％(21/1409),是TB患者检出 HIV阳性率(0.15％)的9.93倍.共登记Mtb与HIV双重感染者27例,抗结核治疗27例,治愈或完成疗程81.48％(22/27),失败3.70％(1/27),死亡11.11％ (3/27).HIV感染者及AIDS患者中TB检出率5年中由5.17％(12/232)下降到0.67％(2/300),差异有统计学意义(x2=13.267,P=0.000).结论 Mtb与HIV双重感染防治工作重点在于及时发现和治疗HIV感染者及AIDS人群中的TB患者.TB和AIDS双向筛查,以及对Mtb与HIV感染或患者进行抗结核治疗对于控制TB和AIDS的流行有重要意义,应长期开展.
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卡介菌CpG DNA复合佐剂-02系统(BC-C02)有效性与安全性评价
目的 对卡介菌(BCG) CpG DNA复合佐剂-02系统(BC-C02)的有效性及安全性进行评价,为其应用提供研究基础.方法 以流式细胞法检测经CpG DNA与细胞体外共培养后B细胞内TLR-9,巨噬细胞内IL-12、TLR-9表达,以酶联免疫斑点法检测人外周血单个核细胞(PBMC)经CpG DNA刺激后IL-12的分泌.单纯H1N1抗原低、中、高三个剂量组及三个剂量抗原添加CpG DNA后免疫小鼠,每组20只动物,免疫后测定其抗体效价及H1N1病毒感染后死亡率.经Mtb感染后豚鼠,以Ag85B+ BC-C02疫苗低、中、高组与BC-C02及生理盐水(NS)进行免疫治疗,每组10只豚鼠,观察动物脏器结核病变指数.同时分别检测CpG DNA注射小鼠后IgE产生和复合佐剂BC-C02注射豚鼠后全身过敏毒性.结果 BC-C02中的生物佐剂可刺激B细胞增殖[佐剂组CD19+％为41％,培养基对照组(NCS)组为27％；t=-4.40,P＜0.05]；促进B细胞内TLR-9表达(佐剂组CD19+ TLR-9+％为2.8％,NCS组为1.1％;t=-5.92,P＜0.05)；上调巨噬细胞表面MHC-Ⅱ类分子表达(佐剂组F4/80+I-A/I-E+％为82％,NCS组为31％;t=-4.32,P＜0.05)；可促进巨噬细胞内TLR-9和IL-12的分泌(佐剂组F4/80+ I-A/I-E+TLR-9+ IL-12+％为2.1％,NCS组为0.1％；t=4.80 P＜0.05).BC-C02中的生物佐剂作为H1N1疫苗佐剂,在检测时间内(5、7、14、28 d),PBS组4个时间点血凝抑制(HI)抗体滴度均＜10; H1N1低剂量组滴度＜中剂量组滴度＜高剂量组滴度,抗原复合CpG组均高于单纯抗原组,且佐剂可促进抗原特异性IgG2a的提高.H1N1保护力实验中,PBS组、H1N1低剂量组、H1N1低剂量+CpG DNA组、H1N1高剂量组、H1N1高剂量+CpG DNA组存活率分别为30％、50％、90％、100％、100％,显示佐剂可提高40％动物存活率.Mtb潜伏感染动物经疫苗治疗后,对照组动物100％病变,疫苗组完全转阴的动物达到30％,而且病变指数＜30的动物达到60％～70％.佐剂注射小鼠后IgE抗体与NS无区别,豚鼠过敏毒性试验显示佐剂不会引起动物全身过敏反应.结论 BC-C02既能诱导细胞免疫反应,也能诱导体液免疫反应,并能提高疫苗保护效力,可作为一种新型疫苗用佐利的候选佐剂.
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结核病新疫苗的免疫毒理学评价方法研究
目的 建立疫苗评价用豚鼠免疫毒理学评价方法,并应用建立的评价指标对结核病新疫苗(耻垢疫苗)的免疫毒性进行初步评价.方法 制备豚鼠过敏模型30只,阴性对照15只.建立豚鼠血清总IgG1抗体检测和外周血嗜碱粒细胞体外刺激培养上清、支气管肺泡灌洗液上清,以及腹腔灌洗液中肥大细胞体外刺激培养上清中的过敏性介质(组胺和白三烯)含量的检测方法.将豚鼠分成3组,分别为过敏模型组、耻垢疫苗组和阴性对照组,每组6只,应用已建立的以上几种评价指标初步进行了结核病新疫苗(耻垢疫苗)的免疫毒性评价.结果 以6 μg/ml羊抗豚鼠IgG1抗体包被,待测血清稀释1∶105,以及辣根过氧化物酶(HRP)标记的羊抗豚鼠IgG1抗体稀释1 ∶ 20 000的实验条件为豚鼠血清总IgG1抗体的佳检测方法.外周血嗜碱粒细胞体外刺激培养上清中,豚鼠过敏模型组和对照组中组胺含量分别为(99.37±15.34) nmol/L和(29.94±5.86) nmol/L;白三烯含量分别为(13.09±3.87) pg/ml和(2.22±0.53)pg/ml.支气管肺泡灌洗液上清组胺含量分别为(73.42±18.60) nmol/L和(31.00±12.09)nmol/L,白三烯含量分别为(123.20±16.57) pg/ml和(39.05±16.94) pg/ml.腹腔灌洗液中肥大细胞体外刺激培养上清中组胺含量分别为(39.59±12.94) nmol/L和(14.35±5.85) nmol/L,白三烯含量分别为(6.79±2.58)pg/ml和(3.09±1.18) pg/ml.以上3种不同组织来源的样本中,过敏模型组的组胺和白三烯含量与对照组相比差异均有统计学意义(组胺:t=12.60,t=5.41,t=5.20,P＜0.05;白三烯:t=8.46,t=9.15,t=3.85,P＜0.05).应用以上方法评价结核病新疫苗未见免疫学毒理学异常反应.结论 实验初步建立了免疫毒理学评价方法,以该方法评价耻垢疫苗未见免疫毒理学异常反应.
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我国卡介苗保护力评价参考体系建立的探讨
目的 探讨我国结核病新疫苗评价用卡介苗参考体系对豚鼠的保护力.方法 采用我国卡介苗(D2 PB 302)菌株制备的疫苗,以1/10人用剂量(0.005mg/0.2ml)经皮下注射免疫豚鼠,对照组等体积注射生理盐水.共进行4个实验,免疫与感染间隔分别为:实验Ⅰ与Ⅱ免疫后进行Mtb感染的时间间隔为5周(其中实验Ⅱ为实验Ⅰ的重复实验,实验Ⅰ中BCG组和对照组均入组8只豚鼠；实验Ⅱ中BCG组入组6只豚鼠,对照组入组8只豚鼠),实验Ⅲ为28周(BCG组入组5只豚鼠,对照组入组6只豚鼠),实验Ⅳ为60周(BCG组和对照组均入组8只豚鼠),感染剂量为每只豚鼠2×(102～103) CFU Mtb/ml,注射0.5ml,感染途径为皮下注射,感染后6周,进行豚鼠解剖,观察豚鼠肝脾肺的病变程度并进行脾脏Mtb的分离,计算脾脏Mtb分离数和对数值.结果 (1) BCG免疫5周组,豚鼠的肝脾肺综合病变指数为10.0±3.8,较对照组(46.9±4.8)差异有显著统计学意义(t=-0.63,P＜0.01)；脾脏Mtb分离数的对数值(lg)为0.49±0.49,较对照组(5.41±0.18)差异有显著统计学意义(t=-9.43,P＜0.01).(2)BCG免疫5周重复实验组,豚鼠的肝脾肺综合病变指数为6.7±2.1,较对照组(36.3±6.0)差异有显著统计学意义(t=-4.63,P＜0.01)；脾脏Mtb分离数的对数值(lg)为0.38±0.38,较对照组(5.11±0.19)差异有显著统计学意义(t=-11.22,P＜0.01).(3)BCG免疫28周组,豚鼠的肝脾肺综合病变指数为10.0±4.5,较对照组(57.5±6.2)差异有显著统计学意义(t=-6.24,P＜0.01)；脾脏Mtb分离数的对数值(lg)为2.16±0.93,较对照组(5.44±0.27)差异有统计学意义(t=-3.39,P＜0.05).(4)BCG免疫60周组,豚鼠的肝脾肺综合病变指数为14.4±4.8,较对照组(56.9±5.0)差异有显著统计学意义(t=-6.16,P＜0.01)；脾脏Mtb分离数的对数值(lg)为1.46±0.69,较对照组(5.43±0.20)差异有显著统计学意义(t=-5.55,P＜0.01).结论 卡介苗保护力评价参考体系可靠稳定,我国临床应用卡介苗在该体系呈现优良保护效果.
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中试生产的结核DNA疫苗免疫效能研究
目的 以300L发酵罐中试规模生产的冻干Mtb Ag85A质粒DNA疫苗为基础免疫小鼠,对该疫苗的免疫效能进行研究.方法 将4～6周龄的BALB/c小鼠20只通过数字表法随机分为2组,一组免疫MtbAg85A质粒DNA疫苗(结核DNA疫苗免疫组),另一组免疫PBS作为阴性对照(PBS对照组)；于免疫前采血,肌内注射免疫3次.在第3次免疫后3周摘眼球处死小鼠,收集血清,进行血清特异性抗体检测和细胞因子(IFN-γ、IL-4)检测；同时对每只小鼠取脾细胞进行特异性γ干扰素(IFN-γ)分泌检测和脾细胞CD4+、CD8+百分率检测.结果 (1)免疫前后免疫组与对照组抗体水平吸光度A值均小于0.2.(2)结核DNA疫苗免疫组血清细胞因子IL-4水平[(146.2±34.3) pg/ml]低于PBS对照组[(177.7±28.1)pg/ml],差异有统计学意义(t=2.244,P=0.038),而IFN-γ水平[(129.6±159.0) pg/ml]虽然高于PBS对照组[(76.5±21.5) pg/ml],但差异无统计学意义(t=-1.047,P=0.309).(3)酶联免疫斑点检测结果表明结核DNA疫苗免疫组脾细胞特异性IFN-γ分泌水平(分泌IFN-γ细胞个数)(103.60±112.14)高于PBS对照组(5.78±5.83),差异有统计学意义(t=36.538,P=0.018).(4)结核DNA疫苗免疫组CD4+细胞百分率均值(21.57％)高于PBS对照组(12.17％),差异有统计学意义(t=3.043,P=0.038)；CD8+细胞百分率均值(13.70％)与PBS对照组(10.57％)相比,差异无统计学意义(t=0.847,P=0.445).结论 Mtb Ag85A质粒DNA疫苗主要刺激机体Th1型细胞免疫,而对诱导机体产生Th2型细胞免疫应答没有显著的促进作用.
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江苏省泰州市结核病防治规划(2001-2010年)实施效果评价
江苏省泰州市是结核病流行较为严重的地区之一.2000年泰州市结核病流行病学调查结果显示,泰州市活动性肺结核发病率为482/10万,传染性肺结核患病率为241/10万[1].笔者旨在评价我市《结核病防治规划(2001-2010)》(简称《规划》)的执行情况和终期目标的实现程度,总结《规划》实施过程中的成功经验,分析存在问题,提出改进意见,更好地促进我市结核病防治(简称"结防")工作的开展.
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兰州市某看守所2004-2009年羁押人群肺结核患者发现情况分析
肺结核是传染性强、危害性大的传染病.随着结核病防治(简称"结防")工作的不断深入开展,监狱系统在押犯人——这一特殊人群的结防工作已越来越受到各级政府和专业机构的莺视和关注[1].为保障监狱劳教人员和管教干部的身体健康,维护监狱正常的秩序,掌握监区结核病的传播流行及潜伏结核病感染情况,本研究就兰州市七里河区CDC结防科对兰州市某看守所羁押人员2004-2009年的结核病筛查的情况进行总结.
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强直性脊柱炎误诊关节结核一例
患者,男,18岁.左踝疼痛3年,加重6个月,伴行走困难.患者于2007年6月无明显诱因出现左踝部疼痛,在私人诊所就诊给予口服止痛药物(药名不详)、局部按摩等处理,效果不佳,并相继出现对侧踝关节、双膝、双髋、双肩关节疼痛,未行进一步检查及正规治疗,自服止痛药以缓解症状.
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卡介苗免疫治疗应用基础与临床研究进展
自从Robert Koch使用Mtb培养滤液疫苗(旧结核菌素)治疗人类结核病出现"郭霍现象"( Koch phenomenon)、许多患者临床表现恶化、少数患者死亡之后,结核病疫苗治疗研究受到重创,直到化疗药物的出现人们仍然未找到有效的免疫治疗方法.化疗药物的治疗效果和结核病控制策略的成功曾经使人们欣喜若狂,但20世纪80年代后结核病低流行率的西方国家结核病重新抬头和上升,随后全球耐多药结核病和广泛耐药结核病流行形势严峻[1],人们发现,化疗和管理还不能解决结核病治疗的全部问题,结核病的免疫治疗再次成为人们研究的热点[ 2].卡介苗(BCG)曾在人类抗结核病的斗争中发挥了重要的免疫保护作用,至今仍是我国预防儿童结核病的重要武器之一.由于BCG在结核病预防中的肯定作用[1-4],笔者从1988年以来一直致力于结核病化疗同时加用BCG免疫治疗研究.
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卡介苗初次免疫-增强免疫策略抗结核病的研究进展
据WHO统计,全球TB的发病率和新发患者数在近几年来均呈现下降趋势.2010年全球报告病例约880万,145万例死亡[1],这受益于各国对TB防治的重视和新技术在TB防治上的应用.但要实现TB的有效控制和WHO提出的2050年消除TB对全球公共卫生的影响的目标,仍面临着几个重大的问题:全球约1/3的人口感染了Mtb成为潜伏感染者(latent TB infection,LTBI),且5％～10％的LTBI一生中可能经内源性感染发展成为活动性TB患者[1];耐多药结核病(MDR-TB)在TB高负担国家流行[2],广泛耐药结核病(XDR-TB)甚至完全耐药结核病(TDR-TB)等已经出现[3-5];与HIV共感染,TB患者的病死率增加[6].这些都对TB的防治提出了更高的要求.
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新型结核病疫苗的研究现状与发展趋势
目前结核病依然是全球感染性疾病的第一"杀手",Mtb耐药问题越来越严重,艾滋病、移民和贫困等社会问题使得结核病在一些发达国家开始回升.我国的结核病疫情和耐药情况都较严重,2011年全国第五次结核病流行病学抽样调查结果显示,我国结核病年发病人数约为130万,占全球发病的14.3％,位居全球第2位.结核病疫情未能获得控制,究其根本原因是缺乏有效的疫苗预防结核病的发生.新型结核病疫苗的研究已成为国内外结核病研究的热点之一,比尔·盖茨专门成立全球结核病疫苗基金会(Aeras Global TB Vaccine Foudation,简称AERAS);我国重大传染病专项均支持结核疫苗的研究.
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对《结核病诊断细菌学检验规程》的一点看法
中国防痨协会在1995年制定并于2006年再版修订但至今仍作为实验室常规操作标准的《结核病诊断细菌学检验规程》(简称"规程")[1],体现了实验室的细菌学检查对结核病诊断和流行病学预防的重要性.在规程中,国际公认的55种分枝杆菌中有致病性的36种分枝杆菌的生物化学要点被罗列了出来,其中把对硝基苯甲酸(PNB)作为区别Mtb与非结核分枝杆菌(NTM)的惟一实验标准,为实验室进行分枝杆菌分型鉴定制定了一套较为完善的鉴定程序.但在实验室的日常常规工作中笔者却发现规程存有值得商榷之处.
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结核分枝杆菌Ag85A DNA疫苗抗结核作用的研究
结核病是由Mtb引起的一种呼吸道传染病,全球结核病疫情仍然十分严峻,而卡介苗预防结核病的效果并不理想,研究新型结核病疫苗已成为国内外结核病研究的热点之一.将本课题组自1998年至今研究MtbAg85A DNA疫苗的免疫原性、治疗效果进行综合与概述,结果表明Mtb Ag85A DNA疫苗可诱导小鼠体液免疫和Th1型细胞免疫应答,可减少小鼠组织中的Mtb尤其是耐多药Mtb的数目,该疫苗与常规化疗联合不仅可提高机体免疫力,并可有效地杀灭或抑制Mtb,从而提高化疗效果.
| 年 | 期数 |
| 2019 | 01 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 z1 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 z1 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 z1 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 z1 |
| 2001 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2000 | 01 02 03 04 |
