中成药杂志
Chinese Traditional Patent Medicine 중성약
- 主管单位: 上海市卫生局
- 主办单位: 国家食品药品监督管理局,信息中心中成药信息站,上海中药行业协会
- 影响因子: 1.21
- 审稿时间: 1-3个月
- 国际刊号: 1001-1528
- 国内刊号: 31-1368/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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星点设计-效应面法优化夏枯草总黄酮的富集纯化工艺
目的 采用星点设计-效应面法优化夏枯草总黄酮的富集纯化工艺.方法 夏枯草70%乙醇提取液用聚酰胺吸附,水洗除杂,加在大孔吸附树脂柱顶部.以上样液总黄酮质量浓度、乙醇用量、乙醇体积分数为影响因素,总黄酮含有量为评价指标,通过星点设计-效应面法优化工艺.结果 佳条件为上样液总黄酮质量浓度2.19 mg/mL,乙醇用量4.5 BV,体积分数75%,总黄酮含有量19.08%,与预测值(19.84%)相当.结论 该方法稳定简便,预测性好,可用于富集纯化夏枯草总黄酮.
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苍术苷A对小鼠CYP450主要亚型表达的影响
目的 研究苍术苷A对细胞色素P450 (CYP450)主要亚型mRNA及蛋白表达水平的影响.方法 将C57BL/6小鼠随机分为3组,正常对照组按体质量灌胃给予相当量0.9%的生理盐水、苍术苷A组(4 mg/kg)和苯巴比妥组(80 mg/kg)按相应剂量灌胃给药,每24h1次,连续2周.提取肝脏总RNA,实时荧光定量PCR (RT-PCR)检测苍术苷A对CYP450主要亚型mRNA表达的影响;制备肝微粒体,蛋白免疫印迹(Western blot)法检测苍术苷A对C57BL/6小鼠肝脏CYP450主要亚型蛋白表达的影响.结果 RT-PCR结果显示,苍术苷A对小鼠Cyp1a2的mRNA表达有显著上调作用.Western blot结果显示,苍术苷A对CYP1A2、CYP2C和CYP2E1蛋白表达有显著诱导作用.结论 苍术苷A能显著诱导小鼠Cyp1a2的mRNA表达,和CYP1 A2、CYP2C和CYP2E1蛋白表达.
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市售食品用农药残留快检试剂盒及仪器对18种中药材适用性验证
目的 验证市售食品用农药残留快检试剂盒及快检仪器在中药材农药残留快检中的适应性.方法采用GC-MS方法 与市售食品用农药残留快检试剂盒和快检仪器测定中药材中的农药残留量,对比传统仪器法及快检方法测定的结果,分析不同试剂盒及快检仪器的适用性.结果 通过对107批药材中农药残留量的检测,3个不同厂家的农药残留速测卡速检测结果与GC-MS测定结果比较,基本相符占82%.2个型号的快检仪器测定结果与GC-MS测定结果比较,结果基本一致.结论 市售食品用农药残留快检试剂盒与快检仪器基本可用于中药材中的农药残留的快速检测.
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矿物药青礞石对AECOPD痰热证大鼠肺组织NF-κB表达及血清中相关因子的干预作用
目的 研究矿物药青礞石对慢性阻塞性肺疾病急性加重(AECOPD)痰热证模型大鼠肺组织核因子-κB(NF-KB)表达及血清基质金属蛋白酶-9 (MMP-9)、基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)等因子的影响.方法 采用烟熏复合细菌感染及风热刺激的方法制备AECOPD痰热证大鼠模型,分别给予青礞石药材、水煎液及水煎液药渣连续治疗15 d.苏木素-伊红(HE)染色病理切片评价大鼠肺部病理情况.免疫组化法检测肺组织中NF-κB蛋白表达,酶联免疫吸附法测定血清中白细胞三烯B4 (LTB4)、MMP-9、TIMP-1的水平.结果 青礞石药材高剂量、水煎液高剂量及药渣高剂量均能显著降低模型组大鼠血清中LTB4、MMP-9、TIMP-1水平及肺组织中NF-κB蛋白的表达,青礞石药材高剂量能显著降低血清中MMP-9/TIMP-1值.结论 青礞石药材、水煎液、水煎药渣均能抑制AECOPD痰热证大鼠体内多种炎症因子的表达,促进气道修复,终起到良好的干预作用.
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星点设计-效应面法优化复方肠泰颗粒成型工艺
目的 通过星点设计-效应面法优化复方肠泰颗粒的成型工艺.方法 以成型率、流动性、溶化性、吸湿性、脆碎度的“总评OD值”为评价指标,辅料配比(可溶性淀粉-糊精)、辅料用量、乙醇体积分数为影响因素,星点设计-效应面法优化成型工艺.结果 佳条件为辅料配比0.9:1,辅料用量1倍,乙醇体积分数80%,总评OD值为0.826 8,与预测值(0.798 6)相当.结论 该方法预测性强,重复性好,可用于复方肠泰颗粒的成型工艺.
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归脾颗粒对厌食大鼠的改善作用及机制研究
目的 观察归脾颗粒对幼龄厌食大鼠的调节作用,探讨其药效学机理.方法 采用病因模拟法建立幼龄厌食大鼠模型,用归脾颗粒治疗,观察不同组别的大鼠摄食量、体质量等情况,酶联免疫吸附法(ELISA)检测不同组别大鼠血浆中胃肠激素β-内啡肽、胃动素(MTL)、胃泌素(GAS)的含有量.结果 归脾颗粒高、低剂量组和归脾丸组与模型组比较,可促进大鼠的排空作用;归脾颗粒高、中、低剂量组和归脾丸组与模型组比,对大鼠β-内啡肽、胃动素、胃泌素有明显的调节作用.结论 归脾颗粒可调节幼龄厌食大鼠胃动素、胃泌素和β-内啡肽的分泌与释放,促进胃排空,对幼龄厌食大鼠具有改善调节的作用.
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乙酰紫草素对人结肠癌HCT116细胞增殖、凋亡及上皮间充质转化的影响
目的 探讨乙酰紫草素对人结肠癌HCT116细胞增殖、凋亡及上皮间充质转化(EMT)的影响.方法 HCT116细胞经终浓度为0、3、6、12、24 μmol/L的乙酰紫草素处理后,分别采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测增殖抑制率,流式细胞术检测凋亡率,Hoechst染色法检测凋亡指数,实时定量PCR法检测E-钙黏蛋白、N-钙黏蛋白及波形蛋白mRNA表达,酶联免疫吸附(ELISA)法检测纤维连接蛋白表达.结果 乙酰紫草素可呈剂量和时间依赖的方式提高HCT116细胞增殖抑制率;乙酰紫草素也可使HCT116细胞早、晚期凋亡率及总凋亡率,细胞凋亡指数升高;同时,乙酰紫草素可以增加E-钙黏蛋白mRNA的表达,降低N-钙黏蛋白和波形蛋白mRNA及纤维连接蛋白的表达.结论 乙酰紫草素具有抑制人结肠癌HCT116细胞增殖、诱导其凋亡及抑制EMT进程的作用.
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首乌藤低聚糖的分离纯化及其对免疫抑制小鼠免疫功能的影响
目的 从首乌藤中提取、分离低聚糖并评价其对免疫抑制小鼠免疫功能的影响.方法 用80%乙醇从首乌藤中提取低聚糖,首乌藤低聚糖依次过D-101大孔吸附树脂、透析袋透析、过Sephadex G-25凝胶树脂柱,得到PMCO-a(首乌藤低聚糖a组份)、PMCO-b(首乌藤低聚糖b组份);评价PMCO-a、PMCO-b对环磷酰胺抑制小鼠免疫低下模型腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响及溶血素和溶血空斑形成的影响.结果 PMCO-a、PMCO-b纯度达到97.7%以上;与空白对照组相比,PMCO-a、PMCO-b均可极显著提高免疫抑制小鼠腹腔巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬百分率和吞噬指数,50 mg/kg剂量组的PMCO-a、PMCO-b可显著促进溶血素和溶血空斑的形成,其他剂量组可极显著促进溶血素和溶血空斑的形成.结论 首乌藤低聚糖PMCO-a、PMCO-b对环磷酰胺致免疫抑制小鼠的非特异性免疫具有明显的免疫增强作用.
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Box-behnken响应面法优化爵床中2种成分的提取工艺
目的 通过Box-behnken响应面法优化爵床中6'-羟基-爵床定B和爵床定B的提取工艺.方法 在单因素试验基础上,以乙醇体积分数、液料比、提取时间、提取次数为影响因素,6'-羟基-爵床定B和爵床定B总提取率为评价指标,Box-behnken响应面法优化工艺.结果 佳条件为乙醇体积分数70%,料液比1:50,提取时间1h,提取次数2次,6'-羟基-爵床定B和爵床定B总提取率0.926 8mg/g,与预测值(0.912 3mg/g)相当.结论 该方法稳定可行,可用于提取爵床中6'-羟基-爵床定B和爵床定B.
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甘草酸在肝炎患者和肝癌患者肠道菌群参与下代谢差异研究
目的 比较不同病理状态下(肝炎患者与肝癌患者)肠道菌群对甘草酸代谢处置的差异,探究同一制剂在不同患病人群的药效学差异因素.方法 分别采集肝炎患者与肝癌患者的新鲜粪便,称重稀释后取上清与甘草酸进行厌氧共培养,采用UPLC-Q-TOF/MS技术对甘草酸分别与肝炎患者和肝癌患者肠道菌群共孵育后的代谢产物进行分析与鉴定.结果 从肝炎患者和肝癌患者肠道菌群的含药孵育液中鉴定出甘草酸单糖水解产物、苷元、脱氢苷元、脱羧基苷元等6种相同的代谢产物,在肝炎患者肠道菌群的含药孵育液中还鉴定出2种脱羟基苷元,而在肝癌患者肠道菌群孵育液中未检测到甘草酸脱羟基产物.结论 肝炎患者与肝癌患者肠道菌群对甘草酸的代谢处置有所不同,从代谢途径为甘草酸制剂在不同人群中的药效学差异提供解释途径.
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柿叶总黄酮固体分散体的制备
目的 制备柿叶总黄酮固体分散体.方法 采用熔融法和溶剂法,以PEG4000、PEG6000、F68、PVPK30为载体制备固体分散体.体外溶出度试验考察佳载体及其用量,扫描电镜法观察固体分散体表面结构,差示扫描量热法分析药物存在状态,红外光谱法分析柿叶总黄酮与载体间的相互作用.结果 以PVPK30为载体,柿叶总黄酮-载体比例1:3制备的固体分散体增溶效果佳.药物以分子或者无定形方式分布在载体中,两者可能以分子间氢键形式结合.结论 以PVPK30为载体材料制备柿叶总黄酮固体分散体时,能明显提高药物的体外溶出度.
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黔产野生水芹总黄酮提取工艺优化及含量测定
目的 优化黔产野生水芹Oenanthe javanica(BL.) DC.总黄酮提取工艺,并测定其含有量.方法 在单因素试验基础上,以乙醇体积分数、提取时间、提取温度、料液比为影响因素,总黄酮含有量为评价指标,正交试验优化提取工艺.再采用亚硝酸钠-硝酸铝显色法测定总黄酮含有量.结果 佳条件为乙醇体积分数65%,提取时间40 min,提取温度60℃,料液比1:50.8个地区样品总黄酮含有量高的是安顺,为14.52%,而黔东南(凯里)低,为2.75%.3个季节其含有量依次是秋季>夏季>春季,并在叶中高,茎次之,根低.结论 秋季采摘的黔产野生水芹叶片中总黄酮含有量高,更具有开发价值.
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2种制备工艺对复方芪术颗粒成型性的影响
目的 考察湿法制粒和流化床制粒对复方芪术颗粒成型性的影响.方法 以外观、粒径分布、休止角、堆密度、吸湿性、溶化时间、橙皮苷含有量为评价指标,考察2种制备工艺对颗粒质量的影响.结果 湿法制粒和流化床制粒所得颗粒的休止角分别为(40.3±0.7).和(34.5±1.3).,堆密度分别为(372.4±2.5)mg/mL和(319.9±2.4) mg/mL,临界相对湿度分别为78%和69%,溶化时间分别为(70±2)s和(31±1)s,橙皮苷含有量分别为(2.17±0.02)mg/g和(2.41±0.03) mg/g.结论 流化床制粒所制得的复方芪术颗粒外观疏松,粒度均匀,流动性好,溶化快,橙皮苷含有量高,均优于湿法制粒.
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跌打活血散稳定性评价
目的 对跌打活血散(红花、当归、冰片等)进行稳定性评价.方法 采用GC法测定该制剂中龙脑、异龙脑、樟脑的含有量,其乙酸乙酯提取液的分析采用HP-5ms毛细管柱(30 m×0.25 mm,0.25 μm);FID检测器;分流比5:1;进样口温度220℃;检测器温度280℃.通过高温加速试验评价其稳定性,60℃下放置0、5、10 d后测定3种成分含有量的变化,观察冰片是否转化为樟脑.结果 在7个厂家14批样品中,仅有1批龙脑含有量达到要求(不低于3.81 mg/g),4批樟脑含有量不符合要求(不超过0.035 mg/g).以冰片每日服用量折算,所有样品樟脑含有量均低于相关限度.高温下放置5、10 d后,三者含有量均显著下降(P<0.01),但樟脑占比无明显变化,即冰片未向樟脑转化.结论 跌打活血散中冰片的含有量较低,应加强控制,并且包装条件有待进一步改进.
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PHPLC法同时分离纯化红花中2种成分
目的 建立制备型高效液相色谱(PHPLC)法分离纯化红花Carthamus tinctoriusL.中羟基红花黄色素A和脱水红花黄色素B.方法 红花水提液用大孔吸附树脂初步纯化后,PHPLC法制备.采用Agilent ZORBAX SB-C18色谱柱(9.4 mm×250 mm,5μm);柱温25℃;流动相乙腈-0.02%三氟乙酸,梯度洗脱;体积流量4.2 mL/min;检测波长403 nm,收集相应流份,经真空冷冻干燥得单体.结果 羟基红花黄色素A和脱水红花黄色素B的转移率分别为70.08%和70.33%,纯度均大于98%.结论 该方法操作简单,高效快速,产物纯度高,适合实验室小规模制备.
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HPLC法同时测定右归丸中3种成分
目的 建立HPLC法同时测定右归丸(熟地黄、肉桂、山药等)中3种成分的含有量.方法 该药物甲醇提取液的分析采用Agilent C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);以乙腈句.3%磷酸为流动相,梯度洗脱;体积流量1 mL/min;柱温35℃;检测波长240 nm(莫诺苷和马钱苷)和218 nm(山茱萸新苷).结果 莫诺苷、马钱苷和山茱萸新苷分别在0.032 4~0.485 5 μg(r=0.999 7)、0.033 9~0.508 5μg(r=0.999 7)、0.007 8 ~0.116 3 μg (r=0.999 9)范围内线性关系良好,平均加样回收率分别为97.75%、99.49%、97.69%,RSD (n=6)分别为1.10%、1.38%、1.34%.结论 该方法简便、准确、可靠,可用于右归丸的质量控制.
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麻杏乳膏质量标准的研究
目的 建立麻杏乳膏(炙麻黄、苦杏仁、细辛等)的质量标准.方法 TLC法对黄芪、炙麻黄、防风进行定性鉴别,HPLC定量测定盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱、绿原酸含有量.结果 TLC斑点清晰,阴性无干扰.盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱、绿原酸分别在0.049 2~0.246 mg/mL(r=0.999 7)、0.026 ~0.13 mg/mL(r=0.999 3)、0.12~1.20 mg/mL(r=o.9994)范围内线性关系良好,平均加样回收率分别为96.83%、98.90%、97.30%,RSD分别为1.18%、1.12%、1.8696.结论 该方法准确快速,稳定可靠,可用于麻杏乳膏的质量控制.
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HPLC法同时测定益心血脂康胶囊中3种成分
目的 建立HPLC法同时测定益心血脂康胶囊(黄芪、三七、川芎)中3种成分的含有量.方法 该药物甲醇提取液的分析采用Agilent C18色谱柱(250 mm ×4.6 mm,5μm);以乙腈旬.2%甲酸为流动相,梯度洗脱;体积流量1 mL/min;检测波长260 nm(毛蕊异黄酮葡萄糖苷和芒柄花素)和321 nm(阿魏酸);柱温35℃.结果 毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花素、阿魏酸分别在0.084 4 ~0.844 0μg(r=0.9998)、0.0520~0.5200 μg(r=0.999 1)、0.043 4 ~0.434 0μg(r=0.999 2)范围内线性关系良好,平均加样回收率(RSD,n=6)分别为99.96%(2.65%)、96.30% (2.31%)、98.50% (2.46%).结论 该方法简便准确,重复性好,可用于益心血脂康胶囊的质量控制.
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HPLC法同时测定复方元胡止痛片中6种成分
目的 建立HPLC法同时测定复方元胡止痛片(延胡索、香附、川楝子、徐长卿)中6种成分的含有量.方法 该药物70%乙醇提取液的分析采用依利特C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm);以[甲醇-乙腈(1∶1)]m.1%冰醋酸为流动相,梯度洗脱;体积流量1.2 mL/min;检测波长280 nm(原阿片碱、延胡索乙素、去氢紫堇碱、紫堇碱、四氢小檗碱)和242 nm(α-香附酮).结果 原阿片碱、延胡索乙素、去氢紫堇碱、紫堇碱、四氢小檗碱、α-香附酮分别在2.15 ~41.00 μg/mL (r=0.999 9)、2.74 ~ 54.80 μg/mL(r=0.999 8)、3.36~67.20 μg/mL(r=0.999 6)、2.67~53.40 μg/mL(r=0.999 5)、1.99~39.80 μg/mL(r=0.999 7)、5.13~102.60 μg/mL(r=0.999 8)范围内线性关系良好,平均加样回收率(RSD)分别为97.98% (1.13%)、99.12% (1.58%)、98.33%(0.83%)、99.05% (1.72%)、97.83% (1.42%)、98.64% (0.70%).结论 该方法准确可靠,专属性强,可用于复方元胡止痛片的质量控制.
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白及非多糖组分对大鼠血小板活化及血液流变学的影响
目的 探讨白及非多糖组分(白及95%乙醇提取物经D101大孔树脂柱层析水洗脱去除水溶性成分后再用80%乙醇洗脱的组分,BS-80EE)对血小板活化及血液流变学的作用.方法 观察不同浓度的BS-80EE给大鼠灌胃后,对大鼠血小板膜糖蛋白CD62P、血小板计数(PLT)、血小板平均体积(MPV)、血小板压积(PCT)和血小板分布宽度(PDW)的影响,并采用扫描电镜观察大鼠血小板的形态变化;同时检测BS-80EE对大鼠血液流变学中各项指标的影响.结果 BS-80EE可剂量依赖性地增加CD62P的活化率;减少PLT、PCT值,对MPV、PDW没有明显作用;各剂量组血小板均伸出长长的伪足,并聚集成团;BS-80EE可使大鼠全血黏度、全血还原黏度、血浆黏度、红细胞聚集指数(EAI)、刚性指数(ERI)及电泳指数(EEI)均增加,变形指数(EDI)降低,对红细胞压积、血沉无显著影响.结论 BS-80EE可通过促进血小板发生活化、形变、聚集,增加血液黏度而发挥止血作用.
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盐巴戟对肾阳虚大鼠下丘脑-垂体-甲状腺轴的调节作用
目的 研究盐巴戟补肾壮阳作用增强的药效机制.方法 采用甲巯咪唑灌胃给药的方法复制阳虚内寒证大鼠模型,以右归丸为阳性对照,分别给予模型大鼠巴戟肉、盐巴戟的高、中、低剂量的水煎液.测定大鼠血清游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、血清游离四碘甲状腺原氨酸(FT4)、血清促甲状腺素(TSH)、下丘脑促甲状腺素释放激素(TRH)、血清一氧化氮(NO)、血浆环磷酸腺苷(cAMP)、血浆环磷酸鸟苷(cGMP)和cAMP/cGMP值,并作甲状腺病理学检查.结果 巴戟肉和盐巴戟均可以改善大鼠甲状腺功能低下的症状,其中盐巴戟的治疗效果为显著,较相同剂量的巴戟肉好.结论 推测巴戟天补肾壮阳作用可能与调节大鼠的下丘脑-垂体-甲状腺轴功能有关.
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银杏酮酯速释微丸和缓释微丸对脑缺血再灌注大鼠缺氧损伤的影响
目的 探讨银杏酮酯(Ginkgo biloba extract)缓释微丸和速释微丸对大鼠大脑中动脉栓塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)所致缺血损伤的神经保护作用及释药速度对药效的影响.方法 36只雄性SD大鼠分为速释微丸组、缓释微丸组、模型对照组及假手术组.除假手术组,其他组大鼠采用插线法制备MCAO.灌胃7d后,采用5分行为指标评分,记录脑质量,采用TTC染色测定脑梗死范围.取脑组织测定一氧化氮(NO)、一氧化氮合成酶(NOS)、乳酸(LD)及乳酸脱氢酶(LDH)的含有量及活性.结果 速释微丸组大鼠的行为指标评分、脑指数、NO含有量与模型组相比有显著性差异,LD含有量具有极显著性差异;而缓释微丸组与模型组相比,其NO含有量,诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、总一氧化氮合酶(TNOS)、LDH活性具有显著性差异,行为指标评分、脑指数和LD含有量具有极显著性差异.缓释微丸组和速释微丸比较,脑梗死率具有显著性差异,缓释微丸相比速释微丸组效果更好.结论 对于脑缺血再灌注的防治,银杏酮酯可能制备成缓释制剂效果更理想.
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山核桃叶总黄酮对H9c2细胞氧化损伤的保护作用
目的 研究山核桃叶(Carya cathayensis)总黄酮对H2O2诱导的H9c2大鼠心肌细胞氧化损伤的保护作用及其与PI3 K/Akt(磷脂酰肌醇3-激酶/丝苏氨酸蛋白激酶B)信号通路的关系.方法 使用MTS(溴化噻唑蓝四氮唑)检测H2O2诱导氧化应激损伤的H9c2细胞存活率,Hoechst 33342染色观察其凋亡,Western blot技术检测p-AKT和AKT表达量,并用PI3 K/Akt通路抑制剂LY294002进行验证.结果 山核桃叶总黄酮可显著的提高氧化应激损伤细胞的存活率,减少细胞凋亡,增加细胞中p-AKT的表达,但其作用可被PI3Ks抑制剂LY294002抵消肖.结论 山核桃叶总黄酮激活PI3 K/Akt信号通路来有效抑制H9c2细胞的氧化损伤.
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左归丸及右归丸对卵巢早衰小鼠卵巢衰老的预防作用
目的 研究左归丸及右归丸对卵巢早衰小鼠卵巢功能及卵巢沉默调节蛋白(SIRTs)表达的影响.方法 48只C57BL/6小鼠随机分为正常组、模型组(给予生理盐水)、左归丸及右归丸4组,除正常组外,其余3组动物腹腔注射环磷酰胺建立卵巢早衰模型.给药8周后,采用卵泡计数和血清黄体生成素(LH)、基础卵泡刺激素(FSH)、抗苗勒管激素(AMH)、基础抑制素B(INHB)评价卵巢功能.RT-PCR法和Western blot法测定卵巢组织SIRTs mRNA和蛋白的表达.结果 模型组小鼠卵巢卵泡计数、SIRT1、SIRT3及血清AMH、INHB显著低于正常组;血清LH、FSH显著高于正常组.左归丸和右归丸组卵泡计数、SIRT1及血清AMH、INHB显著高于模型组;血清LH、FSH显著低于模型组.右归丸组原始卵泡数显著高于左归丸组.结论 左归丸和右归丸具有显著的抗卵巢衰老作用,其作用机制与对卵巢SIRT1表达的上调作用有关.
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新疆阿魏乙酸乙酯部位体内外对CT-26.WT细胞的影响
目的 研究新疆阿魏(Ferula sinkiangensisK.M.Shen)乙酸乙酯部位体内外对鼠源性结肠癌细胞(CT-26.WT)的影响.方法 采用Cell Counting Kit-8(CCK-8试剂盒)法检测新疆阿魏乙酸乙酯部位体外对CT-26.WT细胞的抗肿瘤活性,计算细胞增殖抑制率、半数抑制浓度(IC50);采用流式细胞术检测新疆阿魏对CT-26.WT细胞的总凋亡率;建立小鼠CT-26.WT实体瘤模型,随机分为正常对照组,肿瘤模型组,阿魏低、中、高剂量组,顺铂组,给药10 d后观察小鼠脏器指数、体质量、肿瘤病理切片,计算肿瘤抑制率.结果 新疆阿魏乙酸乙酯部位对体外CT-26.WT肿瘤细胞的IC50为28.23 μg/mL,而顺铂为4.81 μg/mL;低、中、高剂量新疆阿魏乙酸乙酯部位对CT-26.WT细胞具有促凋亡作用;对小鼠肿瘤抑制率分别为(38.26±7.82)%、(48.60±9.09)%和(66.54±12.02)%,而顺铂的抑制率为(95.18±3.02)%,新疆阿魏乙酸乙酯部位中、高剂量组脾指数均明显升高,与正常对照组相比差异有统计学意义,与模型组相比差异有统计学意义.胸腺指数和体质量与正常对照组比较无明显变化.结论 新疆阿魏乙酸乙酯部位在体内外对CT-26.WT肿瘤生长具有一定的抑制作用.
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Box-Behnken响应面法优化川芎水提液纳滤工艺
目的 通过Box-Behnken响应面法优化川芎Ligusticum chuanxiong Hort.水提液纳滤工艺.方法 在单因素试验基础上,以纳滤膜截留分子量、提取液质量浓度、pH值为影响因素,阿魏酸截留率为评价指标,Box-Behnken响应面法优化工艺.结果 佳条件为纳滤膜截留分子量100 Da,提取液质量浓度20.58 μg/mL,pH值7.69,阿魏酸截留率达93.00%,与实测值(91.23%)接近.结论 该方法合理可行,可用于纳滤川芎水提液.
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强筋健骨方回流提取工艺的优化
目的 优化强筋健骨方回流提取工艺.方法 HPLC法测定淫羊藿苷和柚皮苷含有量.在单因素试验基础上,以提取时间、提取次数、60%乙醇加入量为影响因素,淫羊藿苷和柚皮苷转移率为评价指标,正交试验优化提取工艺.结果 佳条件为提取时间3h,提取次数2次,60%乙醇加入量10倍,淫羊藿苷转移率92.56%,柚皮苷转移率66.74%.结论 该方法稳定可行,可用于回流提取强筋健骨方.
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延胡索乙素胃漂浮缓释微球的制备
目的 制备延胡索乙素胃漂浮缓释微球.方法 乳化-溶剂挥发法制备微球.在单因素试验基础上,以乙基纤维素质量浓度、药辅比(延胡索乙素/乙基纤维素)、聚乙烯醇质量浓度为影响因素,载药量、产率、释放度、包封率为评价指标,正交试验优化制备工艺,再进行体外评价.结果 佳条件为乙基纤维素质量浓度4 mg/mL,药辅比3:4,聚乙烯醇质量浓度0.5 mg/mL.所得微球圆整均匀,无黏连现象,平均粒径518.5μμm,产率(79.84±4.46)%,包封率(94.06±0.52)%,载药量(40.31±0.22)%,并均能立即起漂,持续12 h.缓释12 h时,其释药量达90%.粉末休止角23.66.,堆密度0.452 g,/mL,显示出良好的流动性.结论 该方法简单稳定,所制备的延胡索乙素胃漂浮缓释微球载药量和包封率均较高,漂浮和缓释性能较好.
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大孔吸附树脂富集纯化雪松松针总黄酮工艺的优化
目的 优化大孔吸附树脂富集纯化雪松Cedrus deodara(Roxb.) Loud.松针总黄酮工艺.方法 40%乙醇回流提取总黄酮,紫外分光光度法测定其含有量.考察12种大孔吸附树脂(D-101、NKA-9、HPD100、AB-8、D4020、ADS-17、HPD826、HPD450、DM130、XAD-16、HPD722、HP-20)对总黄酮的吸附解吸能力;以上样液质量浓度、上样液pH值、上样量为影响因素考察佳树脂吸附能力;以乙醇体积分数、除杂溶剂、乙醇洗脱用量为影响因素,考察佳树脂解吸能力,优化富集纯化工艺.结果 HPD722大孔吸附树脂纯化效果好,佳条件为上样液质量浓度3.85 mg/mL,上样液pH值4.0,上样量4 BV,乙醇体积分数70%,除杂溶剂4 BV水,乙醇洗脱用量2 BV,总黄酮纯度达到54.28%.结论 该方法合理可行,可用于富集纯化雪松松针总黄酮.
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IL13修饰雷公藤红素/人参总皂苷脂质体的制备及其抑制BT325细胞作用
目的 制备白介素13 (IL13)修饰雷公藤红素/人参总皂苷脂质体,并评价其对人脑胶质瘤细胞BT325的抑制作用.方法 薄膜分散法制备脂质体,1-(3-二.甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC) /N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)水相缩合法将IL13锚定在粒子表面,考察其形态、粒径、Zeta电位、IL13修饰密度的质量分数、包封率、体外释放.以药脂比(雷公藤红素/卵磷脂)、胆脂比、水合时间、IL13投料比为影响因素,粒径、Zeta电位、聚合物分散性指数(PDI)为评价指标,正交试验优化制备工艺.荧光定性和胞内药物定量法评价BT325细胞摄取行为,MTT法和流式细胞仪法分别测定脂质体抗肿瘤和诱导细胞凋亡作用.结果 佳条件为药脂比1∶20,胆脂比1∶4,水合时间45 min,IL13投料比0.6%.所得脂质体均一圆整,粒径分布较窄,平均粒径(118.3±3.2) nm,Zeta电位(-38.3±3.4)mV,IL13修饰密度的质量分数0.3%,雷公藤红素和人参总皂苷包封率分别为(82.3±2.9)%和(71.2±3.2)%,24 h累计释放度分别为(42.5±4.9)%和(24.3±2.1)%.它可显著促进BT325细胞摄取,IC50为(2.8±0.3)μg/mL(以雷公藤红素计),低于IL13未修饰脂质体和物理混合物(雷公藤红素-人参总皂苷).当雷公藤红素质量浓度为10 μg/mL时,它还能诱导84.3%的BT325细胞发生凋亡.结论 IL13修饰雷公藤红素/人参总皂苷脂质体在体外表现出明显的人脑胶质瘤细胞BT325靶向性和体外抗肿瘤作用.
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正交试验优化猴头菌菌丝体中猴头菌素A的超声提取工艺
目的 通过正交试验优化猴头菌Hericium erinaceus菌丝体中猴头菌素A的超声提取工艺.方法 HPLC法测定猴头菌素A含有量.以超声时间、甲醇体积分数、超声功率、超声温度为影响因素,猴头菌素A提取率为评价指标,正交试验法优化提取工艺,并比较了超声提取与甲醇浸提的提取效果.结果 佳条件为超声时间45 min,甲醇体积分数80%,超声功率18 kHz,超声温度50℃.超声提取下猴头菌素A提取率为1.144 0 mg/g,明显高于甲醇浸提下(0.459 4 mg/g).结论 该方法简便节能,溶剂消耗少,提取效率高,可用于超声提取猴头菌菌丝体中猴头菌素A.
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10个采收期青钱柳HPLC指纹图谱建立及4种成分测定
目的 建立10个采收期(3月末、5月初、7月初、8月末、9月初、9月末、10月初、10月末、11月初、11月中)青钱柳Cyclocarya paliurus (Batal) Iljinsk的HPLC指纹图谱,并测定4种成分含有量.方法 青钱柳80%甲醇提取液的分析采用Agilent C18色谱柱(5μm,250 mm×4.6 mm);乙腈卫.1%磷酸为流动相,梯度洗脱;检测波长365nm(指纹图谱)和254 nm(含有量测定);体积流量1.0 mL/min;柱温35℃.再对指纹图谱中的共有峰进行主成分分析.结果 10批样品指纹图谱中有15个共有峰,相似度0.920 ~0.981,4个主成分累计贡献率达92.82%,峰1、2(绿原酸)、12、14的权重值较大.绿原酸、异槲皮苷、槲皮素、山柰酚分别在0.008 492~0.566 1、0.004 370 ~0.291 3、0.000551 5 ~0.036 77、0.001 287~0.085 77 mg/mL范围内线性关系良好,平均加样回收率分别为98.2%、97.5%、96.3%、97.0%,RSD分别为1.35%、1.14%、2.21%、1.74%.各采收期样品中4种成分含有量差异明显,其中绿原酸与异槲皮苷在7月初高,而槲皮素和山柰酚分别在8月末和9月初高.结论 该方法可用于青钱柳的质量控制,并为筛选其佳采收期提供依据.
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玉屏风散化学成分的研究
目的 研究玉屏风散(黄芪、白术、防风)化学成分.方法 玉屏风散微波水提液的乙酸乙酯部位通过MCI、Sephadex LH-20、C18柱进行分离纯化,根据波谱数据对所得化合物结构进行鉴定.结果 从中分离出12个化合物,分别鉴定为补骨脂素(1)、5-甲氧基补骨脂素(2)、8-甲氧基补骨脂素(3)、5,8-二甲氧基补骨脂素(4)、芒柄花素(5)、芒柄花苷(6)、毛蕊异黄酮(7)、毛蕊异黄酮-7-O-β-D-葡萄糖苷(8)、升麻素(9)、5-O-甲基维斯阿米醇苷(10)、7,2'-二羟基-3',4'-二甲氧基异黄烷(11)、(6aR,11aR)-9,10-二甲氧基紫檀烷-3-O-β-D-葡萄糖苷(12).结论 所有化合物均为首次从玉屏风散中分离得到.
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宾川獐牙菜碳苷类成分的研究
目的 研究宾川獐牙菜Swertia binchuanensis T.N.Ho et S.W.Liu碳苷类成分.方法 宾川獐牙菜95%乙醇提取物的乙酸乙酯和正丁醇部位通过硅胶、大孔吸附树脂、Sephadex LH-20、MCI柱进行分离纯化,根据理化性质和波谱数据鉴定所得化合物的结构.结果 从中分离出6个化合物,分别鉴定为6-C-β-D-吡喃葡萄糖-4',5-二羟基-7-甲氧基黄酮(1)、6-C-β-D-吡喃葡萄糖-4',5,7-三羟基黄酮(2)、6-C-β-D-吡喃葡萄糖-5,7,3',4'-四羟基黄酮(3)、2-C-β-D-吡喃葡萄糖-1,3,6,7-四羟基口山酮(4)、5,7,3',4'-四羟基黄酮(5)、3,5,7,3',4'-五羟基黄酮(6).结论 所有化合物均为首次从该植物中分离得到.
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三叶木通化学成分及其抗氧化活性
目的 研究三叶木通Akebia trifoliata(Thunb.) Koidaz化学成分及其抗氧化活性.方法 DPPH法筛选三叶木通95%乙醇提取物的抗氧化活性部位,通过硅胶、Sephadex LH-20、制备柱进行分离纯化,根据理化性质和波谱数据鉴定所得化合物的结构,再评价其抗氧化活性.结果 乙酸乙酯部位抗氧化活性显著,从中分离出8个化合物,分别鉴定为齐墩果酸(1)、6,7,10-三羟基-8-十八烯酸(2)、正三十四烷(3)、2,6-二氧甲基-1,4-苯醌(4)、β-谷甾醇(5)、香草酸(6)、咖啡酸(7)、秦皮乙素(8).化合物7和8对DPPH自由基的清除能力较强,IC50分别为14.939 μg/mL和15.631 μg/mL.结论 化合物3、4、6为首次从木通属植物中分离得到,而且化合物7和8抗氧化活性较好.
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HPLC法测定五味子果梗中6种木脂素
目的 通过HPLC法测定五味子Schisandra chinensis(Turcz.)Baill.果梗中五味子醇甲、五味子醇乙、五味子酯甲、五味子甲素、五味子乙素、五味子丙素的含有量.方法 果梗甲醇提取液的分析采用Agilent TC-C18色谱柱(4.6 mm ×250 mm,5μm);流动相甲醇-乙腈-水,梯度洗脱;检测波长220 nm;柱温35℃;体积流量0.9 mL/min.结果 6种木脂素在各自范围内均呈良好的线性关系,平均加样回收率98.61%~99.92%,RSD 0.12%~1.68%.五味子醇甲在67批样品中平均含有量高,而五味子酯甲低.栽培样品中五味子醇甲、五味子醇乙、五味子甲素含有量均高于野生样品,而五味子酯甲、五味子乙素、五味子丙素含有量恰好相反.小兴安岭样品中各成分含有量高,长白山次之,辽宁省东部山区低.结论 五味子果梗中的五味子丙素具有一定药用价值,应加以关注.
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乌骨藤化学成分及其抗肿瘤活性
目的 研究乌骨藤Marsdenia tenacissima化学成分及其抗肿瘤活性.方法 乌骨藤80%乙醇提取物的氯仿、乙酸乙酯、正丁醇部位通过硅胶、大孔吸附树脂、Sephadex LH-20、ODS色谱柱进行分离纯化,根据波谱数据对所得化合物结构进行鉴定,再通过MTT法评价其抗肿瘤活性.结果 从中分离出10个化合物,分别鉴定为白桦脂酸(1)、乌骨藤苷H(2)、乌骨藤苷G(3)、乌骨藤苷I(4)、绿原酸(5)、野黄芩素四甲醚(6)、山柰酚4'-甲醚(7)、山柰酚(8)、β-谷甾醇(9)、胡萝卜苷(10).化合物8对胃癌细胞MKN-45和SGC-7901有较显著的抑制作用,IC50分别为48.87 μg/mL和54.71μg/mL.结论 化合物6~8为首次从该植物中分离得到,而且化合物8的抗肿瘤活性较强.
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野马追化学成分及其抗炎活性
目的 研究野马追Eupatorium lindleyanum DC.化学成分及其抗炎活性.方法 野马追水提物通过大孔吸附树脂精制后的乙酸乙酯萃取部位,采用硅胶、C18柱、重结晶进行分离纯化,根据波谱数据对所得化合物结构进行鉴定,再采用ELISA法评价其抗炎活性.结果 从中分离出9个化合物,分别鉴定为浙贝素(1)、梣皮树脂醇(2)、salici-foliol (3)、5-羟基-3,4-二甲基-5-戊基-2(5H)-呋喃酮(4)、3-(2-羟基-4-甲基丁基)-4-甲氧基苯乙酮(5)、松柏醇(6)、对羟基苯甲醛(7)、3-(羟甲基)-1,14,15-三羟基-7,11,15-三甲基-2,6,10-十六碳共轭三烯-13-乙酸酯(8)、3-羟甲基-1,13,15-三羟基-7,11,15-三甲基-2,6,10-十六碳共轭三烯-14-乙酸酯(9).化合物1~3在40 μmol/L浓度时可抑制IL-6生成,抑制率分别为41.6%、74.7%、35.0%,其中化合物2的IC50值为1.17 μmol/L.结论 化合物1~7为首次从泽兰属植物中分离得到,而且化合物1~3具有抗炎活性,并以2强.
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假黄皮化学成分及药理作用研究进展
假黄皮Clausena excavata Burm.f.为芸香科黄皮属植物,广泛分布于我国云南南部、海南、广东、广西、福建、台湾以及东南亚地区.目前,已从中分离得到香豆素、萜类、生物碱、挥发油等化学成分.现代药理研究表明,假黄皮具有抗癌、抗HIV病毒、抗菌等作用.本文综述了假黄皮化学成分及药理活性的研究进展,为其药效物质基础、作用机制的研究及开发利用提供理论依据.
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柳兰化学成分与生物活性研究进展
柳兰作为我国民间常用中药,药效活性多样,化学成分主要含有酚酸、黄酮、鞣质等成分,具有抗炎、抗菌、抗焦虑、抗氧化、抑制前列腺细胞增殖、免疫调节等药理作用.本文以国内外相关文献为基础,对柳兰化学成分及药理活性方面进行总结,以期为柳兰的进一步研究开发提供参考.
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彝药剂型的起源与发展
彝医药是中华传统医学的重要组成部分,而彝药剂型集中体现了彝医几千年来临床用药的特点.其起源与发展主要从4个方面的文献资料进行考证,从彝族创世史诗中搜寻彝药剂型的起源及传统剂型,从彝族毕摩经典中挖掘关于彝药剂型的积淀,从彝医药古籍专著中总结归纳彝药剂型的种类及其发展,在其他史料的客观记载中追溯彝药剂型的久远历史.同时,结合目前国内彝成药的发展情况,提出了其可能的发展方向.
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中药蜈蚣抗肿瘤作用的研究进展
蜈蚣具有良好的抗肿瘤作用,众多医家将其配伍应用于肿瘤的临床治疗,具有广泛的实践基础.本文从临床应用及药理毒理研究方面阐述蜈蚣抗肿瘤作用的研究现状及进展,为进一步的应用及新药研发提供参考.
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八宝丹的临床应用研究进展
回顾分析了八宝丹近年来的临床应用及发展.八宝丹是国家中药保密以及保护品种,临床传统应用为治疗传染性病毒性肝炎、急性胆囊炎、急性泌尿系感染等.近年来,围绕其清热利湿、活血止痛、抗炎止痛的功效,现代医家不断探讨与实践,该方应用范围逐渐扩大.除肝胆、泌尿系统疾病外,在恶性肿瘤、自身免疫性疾病等其他疑难杂症的治疗方面也取得了良好的效果.
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复方夏天无片在关节镜肩袖损伤修复术后应用的疗效分析
目的 探讨复方夏天无片(麝香、全蝎、蕲蛇等)应用于肩袖损伤修复术后的临床疗效.方法 收集2013年7月至2016年2月于我院接受关节镜肩袖损伤修复患者65例作为研究对象,术后将所有患者随机分组,将接受复方夏天无治疗的患者32例作为观察组,另外33例单纯接受康复指导的肩袖损伤患者为对照组,比较术后两组患者视觉模拟疼痛评分(VAS)、ASES(美国肩肘外科协会)评分的改善情况,同时对药物不良反应的发生情况做了记录.结果 观察组疼痛评分低于对照组,其肩关节功能评分高于对照组,观察组无严重药物不良反应发生.结论 在肩袖损伤患者术后综合治疗过程中应用复方夏天无片,治疗效果佳,不良反应发生率低,患者疼痛评分低,肩关节功能恢复程度优,是值得临床选择的药物之一.
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1例补铁丸辨治胃癌化疗后缺铁性贫血带来的思考
目的 观察分析本院制剂补铁丸(禹余粮、红参、白术等)对1例胃癌化疗后所致缺铁性贫血(IDA)的治疗作用.方法 对导师结合病症具体辨证,运用辨治兼容性,圆机活法联合老药新用对疗效显著的病例进行回顾性梳理.结果 补铁丸可迅速有效改善胃癌化疗后脾肾亏虚、气血生化不足所致IDA,缓解该病及其诸多症状.结论 补铁丸对胃癌化疗后机体所致IDA疗效显著稳定,无不良反应.为消化道肿瘤患者化疗后不同程度IDA的病证结合治疗,提供新的用药选择与治法借鉴.
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咽喉清口含片治疗急性咽炎外感风热证的Ⅲ期临床试验
目的 咽喉清口含片(金银花、桔梗、射干,等)治疗急性咽炎外感风热证Ⅲ期临床的有效性和安全性.方法 采用随机、双盲、单模拟、安慰剂平行对照、多中心临床试验设计,将480例急性咽炎外感风热证患者分为试验组和安慰剂对照组.以咽痛或吞咽痛、咽干灼热、中医证候、咽部体征等分析为有效性评价指标,观察生命体征、实验室检查指标、不良事件的安全性评价指标.结果 各有效性评价指标差异均有统计学意义.两组均无严重不良事件发生,一般不良事件和不良反应发生率比较,差异均无统计学意义.结论 咽喉清口含片治疗急性咽炎外感风热证安全、有效.
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益气舒心丸对急性冠脉综合征患者预后的影响
目的 探讨益气舒心丸(党参、白术、黄芪,等)对急性冠脉综合征(acute coronary syndrome,ACS)患者经皮冠状动脉介入治疗(percutaneous coronary intervention,PCI)术后预后的影响.方法 将符合纳入标准的96例ACS患者随机均分为试验组和对照组.PCI术后2组均按照冠心病的二级预防给药,试验组加用益气舒心丸,治疗周期为12个月.比较2组间主要症状积分、次要症状积分、可溶性ST2(soluble ST2,sST2)水平、中医疗效、心电图疗效的差异和主要心脏不良事件(major adverse cardiovascular events,MACE)发生率的差异.结果 试验组中医疗效、心电图疗效均优于对照组,差异具有显著性.治疗6个月和12个月时试验组、对照组主要症状积分、次要症状积分、sST2较术后24h内均下降,且试验组下降较对照组更明显,差异具有显著性.试验组心脏不良事件的发生率低于对照组,差异具有显著性.结论 益气舒心丸治疗PCI术后的ACS患者疗效显著,改善预后,可作冠心病二级预防的辅助用药.
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参苓白术散辅助治疗结直肠癌患者术后化疗的临床观察
目的 探讨参苓白术散(党参、白术、茯苓,等)对结直肠癌患者术后FOLFOX化疗的减毒增效及增强免疫力方面的影响.方法 将89例结直肠癌术后化疗的患者按随机数字表随机分为治疗组(45例加服参苓白术散)和对照组(44例仅化疗).12周后,观察2组患者治疗后的临床疗效,评估证候积分,行为状况积分,检测免疫功能,毒副反应.结果 治疗结束后,2组的近期疗效差异未见明显统计学意义.患者中医(TCM)证候治疗组总有效率为88.9%,对照组总有效率为70.5%,2组差异具有统计学意义.2组患者治疗后的卡氏功能状态评分(KPS评分)较治疗前均有提高,且治疗组优于对照组治疗后.治疗后治疗组的主要症状(恶心呕吐、便溏、脘腹痞满、神疲乏力)积分以及化疗引起的毒副反应(白细胞减少、中性粒细胞减少、恶心呕吐、腹痛腹泻)较对照组明显改善,治疗组治疗后CD;、CD;/CD;均较治疗前明显升高,CD;较治疗前降低,与对照组治疗后比较差异具有统计学意义.结论 参苓白术散能减轻结肠癌患者术后化疗的毒副反应,增强机体免疫力.
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双向电泳分析水蛭酒炙前后差异蛋白表达
目的 采用双向电泳分析水蛭(Hirudo)酒炙前后差异蛋白表达.方法 分别采用饱和硫酸铵沉淀法、三氯乙酸/丙酮沉淀法、直接裂解液法提取生水蛭和酒炙水蛭蛋白,十二烷基硫酸钠-丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)对这3种方法进行筛选,建立双向电泳体系.分析水蛭酒炙前后蛋白表达谱,寻找相关差异蛋白.结果 直接裂解液法所得条带数量多,分布连贯清晰.水蛭酒炙前后蛋白含有量有显著性差异(P<0.01),共发现19个差异蛋白点,其中下调蛋白8个,上调蛋白11个.结论 双向电泳所得差异蛋白可作为蛋白标志物以规范水蛭炮制工艺,并确保其稳定性.
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曼地亚红豆杉枝叶中紫杉醇含量动态变化分析
目的 分析曼地亚红豆杉Taxus media枝叶中紫杉醇含有量的动态变化.方法 HPLC法测定不同枝龄(1年生和2年生)、月份(1 ~12月)枝叶中紫杉醇含有量,分析其动态变化情况.结果 紫杉醇含有量在4月1年生枝叶中高(0.052%),并随月份增加而逐渐下降,而在各月份2年生枝叶中较稳定(0.018%~0.023%).到8月后,1、2年生枝叶中该成分含有量相当.结论 考虑到枝条生物量及紫杉醇含有量,曼地亚红豆杉佳采集时间和采摘部位为6月份1年生枝条.
年 | 期数 |
2019 | 01 02 |
2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2007 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2006 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2005 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2004 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 z1 |
2003 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2002 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2001 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2000 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |