中华麻醉学杂志
Chinese Journal of Anesthesiology 중화마취학잡지
- 主管单位: 中国科学技术协会
- 主办单位: 中华医学会
- 影响因子: 1.23
- 审稿时间: 1-3个月
- 国际刊号: 0254-1416
- 国内刊号: 13-1073/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
-
PTD4-Cu,Zn-SOD原核重组表达载体的构建
目的 构建蛋白质转导结构域4-铜锌超氧化物歧化酶(PTD4-Cu,Zn-SOD)原核重组表达载体.方法 利用基因重组技术,设计Cu,Zn-SOD特异性引物和PTD4寡核苷酸序列,Cu,Zn-SOD基因进行PCR反应,产物进行鉴定、回收和纯化,以pET16b为载体,经Xho Ⅰ和BamH Ⅰ双酶切反应、连接反应和质粒转化,构建pET16b-Cu,Zn-SOD原核重组表达载体,再分别将PTD4基因和pET16b-Cu,Zn-SOD载体经Nde Ⅰ和Xho Ⅰ双酶切反应、连接反应和质粒转化,构建pET16b-PTD4-Cu,Zn-SOD原核重组表达载体,并进行限制性内切酶谱分析和基因测序.结果 成功构建了长度为6 207 bp的pET16b-PTD4-Cu,Zn-SOD原核重组表达载体,用Nde Ⅰ和BamH Ⅰ双酶切,得到约5.7 kb的载体片段和约510 bp的PTD4-Cu,Zn-SOD基因片段,与预期结果一致.pET16b-PTD4-Cu,Zn-SOD原核重组表达载体基因测序结果与预期的基因序列相比,碱基序列均正确.结论 成功构建了PTD4-Cu,Zn-SOD原核重组表达载体.
-
TREK-1在七氟醚预处理减轻小鼠脑缺血再灌注损伤中的作用
目的 评价TREK-1在七氟醚预处理减轻小鼠脑缺血再灌注损伤中的作用.方法 雄性昆明小鼠60只,8周龄,体重21~29 g,采用随机数字表法分为5组(n=12):假手术组(S组)、脑缺血再灌注组(I/R组)、七氟醚预处理组(SP组)、TREK-1短发夹RNA(shRNA)慢病毒+七氟醚预处理组(TSP组)和阴性对照shRNA(NCshRNA)慢病毒+七氟醚预处理组(NSP组).S组、I/R组和SP组以1 μl/min的速率侧脑室注射生理盐水15μl,TSP组和NSP组以1μl/min的速率分别侧脑室注射TREK-1 shRNA慢病毒和NCshRNA慢病毒15μl;14 d后S组和I/R组吸入100%纯氧60 min,SP组、TSP组和NSP组吸入2.4%七氟醚60 min,纯氧洗脱15 min,然后采用结扎右颈内动脉的方法制备脑缺血再灌注损伤模型,缺血2h后恢复灌注.再灌注24 h时进行神经功能缺陷评分;神经功能缺陷评分完成后,处死小鼠,取脑组织,测定脑梗死体积、海马组织caspase-3表达和细胞凋亡指数.结果 与S组比较,I/R组、SP组、TSP组和NSP组神经功能缺陷评分、脑梗死体积百分比和细胞凋亡指数升高,海马组织caspase-3表达上调(P<0.05);与I/R组比较,SP组、TSP组和NSP组神经功能缺陷评分、脑梗死体积百分比和细胞凋亡指数降低,海马组织caspase-3表达下调(P<0.05);与SP组比较,TSP组神经功能缺陷评分、脑梗死体积百分比和细胞凋亡指数升高,海马组织caspase-3表达上调(P<0.05),NSP组神经功能缺陷评分、脑梗死体积百分比、海马组织caspase-3表达和细胞凋亡指数差异无统计学意义(P>0.05).结论 七氟醚预处理通过激活TREK-1,抑制神经元凋亡,从而减轻小鼠脑缺血再灌注损伤.
-
感染性休克后期血管加压素分泌能力预测患者转归的准确性
目的 评价感染性休克后期血管加压素分泌能力预测患者转归的准确性,探讨其与感染性休克预后的关系.方法 选取入住本院重症监护病房(ICU)的感染性休克后期患者55例,年龄20 ~ 64岁,性别不限,测定其血管加压素分泌能力.测定方法:静脉输注3%氯化钠600 ml,输注时间2h,测定输注前后血清钠(mmol/L)及血清血管加压素(VP,ng/L)的浓度,以其差值的比值(△VP/△Na)反映其分泌能力.根据△VP/△Na水平,将患者分为VP分泌能力异常组(△VP/△Na≤0.5ng/mmol)及正常组(△VP/△Na>0.5 ng/mmol),在测试VP分泌能力前即刻,取静脉血样,测定血清乳酸及C反应蛋白(CRP)浓度,记录入选时血管活性药物用量及28 d病死率.结果 异常组30例(54%),正常组25例(46%).与正常组比较,异常组血清乳酸、CRP浓度、多巴胺或去甲肾上腺素用量明显升高、28 d病死率明显升高(40%比67%,P<0.01或0.05).ROC曲线分析显示,以△VP/△Na0.5 ng/mmol作为判定预后的标准时,其灵敏度66.7%,特异度64.0%,曲线下面积0.828.结论 感染性休克后期血管加压素分泌能力可明显影响患者的预后.
-
TAT-血红素氧合酶-1融合蛋白对原位肝移植术大鼠肝损伤的影响
目的 评价TAT-血红素氧合酶-1(TAT-HO-1)融合蛋白对原位肝移植术大鼠肝损伤的影响.方法 选择健康成年雄性近交系Lewis大鼠为供体,BN大鼠为受体,8~10周龄,体重180~230 g.采用随机数字表法,将受体大鼠分为2组(n=6):肝移植组(OLT组)和TAT-HO-1融合蛋白组(TAT-HO-1组).采用改良Kamada二袖套法建立原位肝移植术模型.TAT-HO-1组植入经含TAT-HO-1融合蛋白50μg/ml的HTK液冷保存6h的肝脏.于移植后7d,经腹主动脉采血样2 ml,测定血清ALT和AST的活性.取肝脏,HE染色,光镜下观察肝组织病理学结果,计算排斥活动指数.采用ELISA法检测肝组织转化生长因子-β1(TGF-β1)及IL-6的含量.分离Kupffer细胞培养,测定培养液TGF-β1及IL-6的水平.结果 与OLT组比较,TAT-HO-1组血清ALT及AST的活性、排斥活动指数、肝组织和Kupffer细胞培养液TGF-β1及IL-6的水平降低(P<0.05),肝组织病理学损伤减轻.结论 在供肝冷保存期间,应用TAT-HO-1融合蛋白可减轻原位肝移植术大鼠肝损伤.
-
右美托咪定对内毒素血症大鼠急性肾损伤的影响
目的 探讨右美托咪定对内毒素血症大鼠急性肾损伤的影响.方法 健康雄性清洁级SD大鼠30只,4~6月龄,体重180 ~ 220 g,采用随机数字表法分为3组(n=10):对照组(C组)、脂多糖(LPS)组(L组)和右美托咪定组(D组).L组静脉注射LPS 5 mg/kg制备内毒素血症模型.D组静脉注射LPS 5 mg/kg后,静脉注射右美托咪定负荷量7μg/kg,15 min后以5μg· kg-1·h-1的速率静脉输注6 h,L组和C组给予等容量生理盐水.LPS给药结束后6h时取股静脉血样,检测血清Cr、BUN、TNF-α和IL-6的浓度.LPS给药结束后24 h时处死动物,取肾组织,观察病理学结果,采用Western blot法测定紧密连接蛋白ZO-1和occludin的表达水平.结果 与C组比较,L组和D组血清Cr、BUN、TNF-α和IL-6的浓度升高,肾组织ZO-1和occludin的表达下调(P<0.05);与L组比较,D组血清Cr、BUN、TNF-α和IL-6的浓度降低,肾组织ZO-1和occludin的表达上调(P<0.05).D组肾组织病理学损伤较L组减轻.结论 右美托咪定可减轻内毒素血症大鼠急性肾损伤.
-
异丙酚对内毒素诱导大鼠肾小球血管内皮细胞VEGF受体2表达的影响
目的 探讨异丙酚对内毒素诱导大鼠肾小球血管内皮细胞血管内皮生长因子(VEGF)受体2表达的影响.方法 原代培养SD大鼠肾小球血管内皮细胞,以1×106/个ml的密度接种于24孔培养板(200μl/孔),采用随机数字表法,将其分为6组(n=35),正常对照组(C组):不做任何处理;脂肪乳对照组(Ⅰ组):加入10%脂肪乳,终浓度为4μg/ml;异丙酚组(P组):加入异丙酚,终浓度为4 μg/ml;脂多糖(LPS)组(L组):加入LPS,终浓度为10 μg/ml;LPS+脂肪乳组(L+I组):加入LPS前30 min加入10%脂肪乳,终浓度分别为10μg/ml和4μg/ml;LPS+异丙酚组(L+P组):加入LPS前30 min加入异丙酚,终浓度分别为10 μg/ml和4μg/ml.各组孵育6h后,测定细胞通透性,采用RT-PCR法测定VEGF受体2 mRNA的表达水平,采用Western bolt法测定VEGF受体2蛋白的表达水平,采用免疫荧光法标记,在共聚焦显微镜下观察细胞纤维状肌动蛋白(F-actin)形态.结果 与C组比较,L组、L+I组和L+P组VEGF受体2 mRNA及蛋白表达上调,细胞通透性升高(P<0.05),I组和P组上述指标差异无统计学意义(P>0.05).与L组比较,L+P组VEGF受体2mRNA及蛋白表达下调,细胞通透性降低(P<0.05),L+I组上述指标差异无统计学意义(P>0.05).C组、I组和P组细胞间F-actin紧密联接,形成致密的周围束状带;而L组和L+I组F-actin解聚,周围束状带明显断裂,细胞收缩成团;L+P组细胞间F-actin规律链接,细胞骨架基本完整.结论 异丙酚可能通过下调VEGF受体2的表达,抑制内毒素诱导的大鼠肾小球血管内皮细胞通透性升高.
-
不同浓度和时间应用羟乙基淀粉130/0.4对人肾小管上皮细胞损伤的影响
目的 评价不同浓度和时间应用羟乙基淀粉130/0.4(HES 130/0.4)对人肾小管上皮细胞损伤的影响.方法 人肾小管上皮细胞HK-2细胞培养至对数生长期时,以1×105个/ml密度接种于96孔培养板(0.1 ml/孔)、培养瓶(5 ml/瓶)或培养皿(5 ml/皿),采用随机数字表法,将其分为4组(n=49),正常对照组(C组)加入等容量磷酸盐缓冲液,0.3%、1.5%、3.0% HES 130/0.4组(H1组、H2组和H3组)分别采用相应终浓度的HES 130/0.4孵育.分别于孵育1、3、5和7d时测定细胞活力,于孵育3、5和7d时测定细胞凋亡率,于孵育7d时进行甲苯胺蓝特殊染色,光镜下观察细胞内HES沉积情况,透射电镜下观察细胞病理学结果.结果 与C组比较,H3组孵育5、7d时细胞活力降低,孵育3、5、7d时细胞凋亡率升高(P<0.05),H1组和H2组上述指标差异无统计学意义(P>0.05);光镜和电镜下H2组和H3组细胞内有HES沉积,H3组病理学损伤明显,且有凋亡细胞.结论 高浓度长时间应用HES 130/0.4可导致人肾小管上皮细胞损伤,而高浓度及低浓度短时间应用对其无影响.
-
异丙酚对大鼠脑缺血再灌注时神经元线粒体DNA缺失的影响
目的 评价异丙酚对大鼠脑缺血再灌注时神经元线粒体DNA缺失的影响.方法 雄性SD大鼠54只,3月龄,体重250~300 g,采用随机数字表法分为3组(n=18):假手术组(S组)、脑缺血再灌注组(I/R组)和异丙酚组(P组).采用夹闭双侧颈总动脉联合低血压的方法建立大鼠脑缺血再灌注损伤模型.P组股静脉输注异丙酚1.0 mg·kg-1·min-11h,然后制备脑缺血再灌注损伤模型.分别于再灌注6、24和48 h时,每组处死6只大鼠,取脑组织,光镜下观察病理学结果;分离海马组织,提取神经元线粒体DNA,采用RT-PCR法检测线粒体DNA缺失率.结果 与S组比较,I/R组再灌注6、24和48 h时线粒体DNA缺失率升高,P组再灌注48 h时线粒体DNA缺失率升高(P<0.05);与I/R组比较,P组再灌注6、24和48 h时线粒体DNA缺失率降低(P<0.05),脑组织病理学损伤减轻.结论 异丙酚减轻大鼠脑缺血再灌注损伤的机制与减少神经元线粒体DNA缺失有关.
-
高乌甲素对大鼠肾缺血再灌注损伤的影响
目的 评价高乌甲素对大鼠肾缺血再灌注损伤的影响.方法 清洁级健康成年雄性Wistar大鼠36只,体重180~220 g,采用随机数字表法分为假手术组(S组)、肾缺血再灌注组(I/R组)和高乌甲素组(LA组),每组12只.I/R组和LA组采用游离左肾肾蒂,无损伤动脉夹夹闭左肾动脉45 min,松开左肾动脉夹后切除右肾的方法建立肾缺血再灌注损伤模型.LA组于再灌注前30min时腹腔注射高乌甲素4 mg/kg,S组和I/R组于同时点腹腔注射生理盐水2 ml.分别于再灌注5和24 h时采集下腔静脉血样,测定Cr和BUN的浓度;取肾组织,光镜下观察病理学结果,采用免疫组化法检测肾组织环氧合酶2(COX-2)和基质金属蛋白酶2(MMP-2)的表达.结果 与S组比较,I/R组和LA组再灌注5和24 h时血清Cr和BUN浓度升高,肾组织COX-2和MMP-2表达上调(P<0.05);与I/R组比较,LA组再灌注5和24 h时血清Cr和BUN浓度降低,肾组织COX-2和MMP-2表达下调(P<0.05),病理学损伤减轻.结论 高乌甲素可减轻大鼠肾缺血再灌注损伤,其机制与抑制COX-2和MMP-2的表达有关.
-
p38MAPK信号通路在电针减轻内毒素休克诱发兔急性肺损伤中的作用:与Nrf2的关系
目的 评价p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)信号通路在电针减轻内毒素休克诱发兔急性肺损伤中的作用及其与核因子E2相关因子2(Nrf2)的关系.方法 健康雄性新西兰大白兔70只,2月龄,体重1.5 ~ 2.5 kg,采用随机数字表法分为7组(n=10):对照组(C组)、内毒素休克诱发急性肺损伤模型组(A组)、p38MAPK抑制剂组(SB组)、模型+p38MAPK抑制剂组(A-SB组)、模型+电针组(A-EA组)、模型+电针非穴位组(A-NEA组)和模型+电针穴位+p38MAPK抑制剂组(A-EA-SB组).模型制备前1~4d及模型制备过程中,A-EA组和A-EA-SB组电针刺激穴位,采用疏密波2/100 Hz,强度以出现轻微肌颤为宜,30 min/次,1次/d,A-NEA组采用同样的频率以及强度电针刺激穴位旁开0.5 cm处,A组、A-SB组、A-EA组、A-NEA组和A-EA-SB组静脉注射内毒素5 mg/kg,C组和SB组给予等容量生理盐水.模型制备成功后SB组、A-SB组和A-EA-SB组静脉注射p38MAPK抑制剂5μmol/kg,C组给予等容量生理盐水,其余各组给予等容量无水乙醇.静脉注射内毒素或生理盐水后6h,取颈动脉血样行血气分析后放血处死动物,取肺组织行病理学观察并进行肺损伤评分,计算肺湿重/干重(W/D)比值,测定肺组织MDA含量及SOD活性,检测磷酸化p38MAPK(p-p38MAPK)及Nrf2表达水平.结果 与C组比较,A组、A-SB组、A-EA组、A-NEA组和A-EA-SB组肺损伤评分、W/D比值、肺组织MDA含量、p-p38MAPK及Nrf2表达水平升高,SOD活性降低(P<0.05);与A组比较,A-EA组和A-EA-SB组肺损伤评分、W/D比值、肺组织MDA含量降低,SOD活性、p-p38MAPK及Nrf2表达水平升高(P<0.05);与A-EA组比较,A-EA-SB组肺损伤评分、W/D比值、肺组织MDA含量升高,SOD活性、p-p38MAPK及Nrf2表达水平降低(P<0.05).结论 p38MAPK信号通路介导了电针减轻内毒素休克诱发兔急性肺损伤,其机制与其上调Nrf2表达有关.
-
氢气对脓毒症小鼠肠组织Rho/ROCK信号通路的影响
目的 评价氢气对脓毒症小鼠肠组织Ras同源基因(Rho)/Rho相关螺旋卷曲蛋白激酶(ROCK)信号通路的影响.方法 雄性ICR小鼠64只,体重20~ 25 g,6周龄,采用随机数字表法,将其分为4组(n=16):假手术组(SH组)、氢气组(H2组)、脓毒症组(S组)和脓毒症+氢气组(S+H2组).采用盲肠结扎穿孔(CLP)法制备脓毒症模型.于CLP术后1和6h时H2组和S+H2组分别吸入2%氢气1h.于CLP术后20 h时取8只小鼠,向胃内灌注异硫氰酸荧光素标记的右旋糖酐(FITC-右旋糖酐),4h后心脏穿刺取血样,测定血清FITC-右旋糖酐的浓度.于CLP术后24 h时取8只小鼠,取血液、肝脏、脾脏和肾脏进行细菌培养,观察菌群移位情况;取小肠组织,透射电镜下观察肠上皮细胞超微结构,光镜下观察肠组织病理学改变并进行评分,采用Western blot法测定肠组织Rho、ROCK1和ROCK2的表达水平.结果 与SH组比较,S组和S+H2组血清FITC-右旋糖酐浓度和肠损伤评分升高,血液、肝脏、脾脏和肾脏的菌群移位增加,肠组织Rho、ROCK1和ROCK2的表达上调(P<0.05),H2组上述各指标差异无统计学意义(P>0.05);与S组比较,S+H2组血清FITC-右旋糖酐浓度和肠损伤评分降低,血液、肝脏、脾脏和肾脏的菌群移位减少,肠组织Rho、ROCK1和ROCK2的表达下调(P<0.05),肠组织病理学损伤减轻.结论 氢气减轻脓毒症小鼠肠损伤的机制与抑制Rho/ROCK信号通路激活有关.
-
低温联合右美托咪定对兔心肌单相动作电位的影响
目的 探讨低温联合右美托咪定对兔心肌单相动作电位的影响.方法 成年家兔,体重2.0~ 2.5 kg,制备Langendorff离体心脏灌注模型,取模型制备成功的心脏18个,采用随机数字表法分为3组(n=6):正常对照组(C组)、低温组(H组)和低温+右美托咪定组(HD组).C组继续灌注37℃K-H液60 min,H组灌注32℃K-H液60 min,HD组灌注含右美托咪定25 ng/ml的32℃K-H液60 min.于平衡灌注末、灌注K-H液15、30和60 min时记录HR和3层心肌单相动作电位,计算单相动作电位复极50%的时程(MAPD50)、单相动作电位复极90%的时程(MAPD90)、单向动作电位振幅(MAPA)和大去极化速度(Vmax).结果 与C组比较,H组及HD组灌注K-H液各时点HR减慢,MAPD50、MAPD90延长(P<0.05).H组及HD组各时点HR、MAPD50和MAPD90比较差异无统计学意义(P>0.05).3组各时点MAPA和V…比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 低温联合右美托咪定可延长兔心肌复极时程,且右美托咪定对低温导致的兔心肌单相动作电位改变无影响.
-
内质网应激在大鼠肺缺血再灌注损伤中的作用
目的 评价内质网应激在大鼠肺缺血再灌注损伤中的作用.方法 健康成年雄性SD大鼠56只,体重250~320 g,采用随机数字表法分为2组:假手术组(S组,n=16)和肺缺血再灌注组(I/R组,n=40).采用阻断左肺门60 min再灌注的方法建立大鼠原位肺缺血再灌注损伤模型.于缺血前、再灌注即刻、1、2和4h时取动脉血样,测定PaO2和PaCO2;处死大鼠,取肺组织,观察病理学结果,计算湿重/干重(W/D)比值,分别采用Western blot法和RT-PCR法测定内质网分子伴侣葡萄糖调节蛋白78(GRP78)和C/EBP同源蛋白(CHOP)蛋白及其mRNA的表达水平.结果 与S组比较,I/R组再灌注期间PaO2降低,PaCO2升高,W/D比值升高,肺组织GRP78和CHOP蛋白及其mRNA表达上调(P<0.01),肺组织发生病理学损伤.随再灌注时间延长,I/R组肺损伤逐渐加重,同时肺组织GRP78和CHOP蛋白及其mRNA表达逐渐上调(P<0.05).结论 过度的内质网应激可能是大鼠肺缺血再灌损伤的病理生理机制之一.
-
缺氧预处理骨髓间充质干细胞对大鼠脊髓缺血再灌注时血红素氧合酶-1表达的影响
目的 评价缺氧预处理骨髓间充质干细胞(BMSC)对大鼠脊髓缺血再灌注时血红素氧合酶-1(HO-1)表达的影响.方法 健康清洁级SD雄性大鼠30只,6~8周龄,体重200~ 250 g,采用随机数字表法,将其分为5组(n=6):假手术组(S组)、缺血再灌注组(I/R组)、PBS组、BMSC移植组(BMSC组)和缺氧预处理组(HP).HP组BMSC置于3%O2-5% CO2-92%N2的培养箱中培养24 h,进行缺氧预处理.PBS组、BMSC组和HP组分别鞘内注射PBS、BMSC和缺氧预处理的BMSC,60 min后采用主动脉阻断法建立大鼠脊髓缺血再灌注损伤模型.分别于再灌注6、12、24、48 h和7d时行神经功能评分.于再灌注7d时,处死大鼠,取脊髓组织,采用Western blot法测定HO-1蛋白表达水平,采用RT-PCR法测定HO-1 mRNA表达水平.结果 与S组比较,其余各组再灌注各时点神经功能评分降低,脊髓组织HO-1 mRNA及其蛋白表达上调(P<0.05);与I/R组比较,BMSC组和HP组再灌注各时点神经功能评分升高,脊髓组织HO-1 mRNA及其蛋白表达上调(P<0.05),PBS组再灌注各时点神经功能评分、脊髓组织HO-1 mRNA及其蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05);与BMSC组比较,HP组再灌注各时点神经功能评分升高,脊髓组织HO-1 mRNA及其蛋白表达上调(P<0.05).结论 缺氧预处理增强BMSC移植减轻大鼠脊髓缺血再灌注损伤作用的机制可能与HO-1表达进一步上调有关.
-
HIF-1α在七氟醚预处理减轻大鼠皮质神经元凋亡中的作用:与Bid、Bim和Puma的关系
目的 评价缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)在七氟醚预处理减轻大鼠皮质神经元凋亡中的作用.方法 新生SD大鼠,培养原代皮质神经元,以1×106个/ml的密度接种于6孔板(2 ml/孔),采用随机数字表法,分为4组(n=15):正常对照组(C组)、缺氧复氧组(A/R组)、七氟醚预处理组(SP组)和HIF-1α抑制剂2-甲氧基雌二醇组(H组).采用氧糖缺失90 min,复氧复糖24 h的方法制备皮质神经元缺氧复氧损伤模型;SP组通人2.0%七氟醚2h,随后采用PBS洗涤3次,每次5 min,结束后立即制备缺氧复氧损伤模型;H组加入5 μmol/L2-甲氧基雌二醇孵育72 h时进行七氟醚预处理.采用膜联蛋白V/碘化丙啶双染流式细胞术检测神经元凋亡情况,采用免疫蛋白印迹法测定神经元Bid、Bim、Puma和活化的caspase-3的表达水平.结果 与C组比较,A/R组神经元凋亡率升高,Bid、Bim、Puma和活化的caspase-3表达上调(P<0.05);与A/R组比较,SP组和H组神经元凋亡率降低,SP组Bid、Bim、Puma和活化的caspase-3表达下调(P<0.05);与SP组比较,H组神经元凋亡率升高,Bid、Bim、Puma和活化的caspase-3表达上调(P<0.05).结论 HIF-1α介导了七氟醚预处理减轻大鼠神经元凋亡的过程,其机制与下调Bid、Bim和Puma表达有关.
-
术侧肺间断机械通气对肺切除术后病人复张性肺水肿的预防效果
目的 评价术侧肺间断机械通气对肺切除术后病人复张性肺水肿的预防效果.方法 择期胸腔镜辅助下行肺切除术病人40例,性别不限,年龄16~32岁,体重指数18~ 25 kg/m2,ASA分级Ⅰ或Ⅱ级,采用随机数字表法,将其分为2组(n=20):对照组(C组)和术侧肺间断机械通气组(Ⅴ组).麻醉诱导后行气管插管,机械通气,采用纤维支气管镜定位准确后即改为单肺通气.C组术中常规单肺通气;Ⅴ组单肺通气期间对术侧肺行间断机械通气,潮气量2 ml/kg,通气频率20次/min,通气30 s后停止,支气管导管开口于大气中,10 min后重复上述操作,直至病变组织切除完毕.于病变组织取出后取其周边正常肺组织,检测肺组织水通道蛋白1(AQP-1)和AQP-5的表达水平;记录术后24 h内肺不张、低氧血症和复张性肺水肿的发生情况.结果 与C组比较,Ⅴ组肺组织AQP-1和AQP-5表达上调,术后24 h内肺不张和复张性肺水肿的发生率降低(P<0.05),低氧血症发生率差异无统计学意义(P>0.05).结论 肺切除术病人单肺通气期间,术侧肺行间断机械通气可有效地预防术后复张性肺水肿的发生.
-
脑脊液Aβ-42与tau浓度比值预测老年患者发生术后认知功能障碍的准确性
目的 评价脑脊液β淀粉样蛋白42与tau浓度比值(Aβ-42/tau)预测老年患者发生术后认知功能障碍(POCD)的准确性.方法 拟在脊椎-硬膜外联合麻醉下行全髋或膝关节置换术患者80例,性别不限,年龄65 ~ 85岁,ASA分级Ⅱ或Ⅲ级,经L34间隙穿刺,蛛网膜下腔穿刺成功后取2 ml脑脊液,检测Aβ-42和tau的浓度(单位为pg/ml),计算二者比值.于术前1 d和术后7d进行神经心理学测验,采用Z计分法确定POCD,根据是否发生POCD,分为非POCD组和POCD组.利用ROC曲线确定区分POCD患者与非POCD患者的截断值.结果 32例患者发生了POCD,发生率为40%,非POCD组和POCD组脑脊液Aβ-42/tau分别为2.6±0.3、1.7±0.4,POCD组低于非POCD组(P<0.01).以脑脊液Aβ-42/tau预测发生POCD的灵敏度为91.7%,特异度为81.2%,约登指数为0.7.ROC曲线区分POCD患者与非POCD患者脑脊液Aβ-42/tau的截断值为2.0.结论 脑脊液Aβ-42/tau可准确地预测老年患者POCD发生.
-
布托啡诺复合右美托咪定对瑞芬太尼诱发术后痛觉过敏的影响
目的 评价布托啡诺复合右美托咪定对瑞芬太尼诱发术后痛觉过敏的影响.方法 择期行妇科腹腔镜手术患者120例,ASA分级Ⅰ或Ⅱ级,年龄20 ~ 64岁,体重45~ 88 kg,采用随机数字表法分为4组(n=30):对照组(C组)、布托啡诺组(B组)、右美托咪定组(D组)和右美托咪定+布托啡诺组(B+D组).C组切皮前即刻给予等容量生理盐水;D组于麻醉诱导前10 min时静脉输注右美托咪定1.0 μg/kg,然后以0.7 μg·kg-1·h-1的速率静脉输注至术毕;B组切皮前即刻静脉注射布托啡诺20 μg/kg;B+D组于麻醉诱导前10 min时静脉输注右美托咪定0.5 μg/kg,然后以0.5 ug· kg-1·h-1的速率静脉输注至术毕,切皮前即刻静脉注射布托啡诺15 μg/kg.静脉注射咪达唑仑、舒芬太尼、罗库溴铵和异丙酚诱导麻醉,气管插管后行机械通气,维持PETCO2 35~45 mmHg.静脉输注瑞芬太尼0.3 μg· kg-1·min-1和异丙酚4~6 mg·kg-1·h-1,间断静脉注射罗库溴铵维持麻醉,术中维持BIS值40~60.术后采用舒芬太尼行PCIA,维持VAS评分≤3分.分别于术后30和60 min、6、12、24和48 h时,记录舒芬太尼用量;记录术中心动过缓、低血压和术后恶心呕吐、眩晕、嗜睡的发生情况.结果 与C组比较,B组、D组和B+D组术后各时段舒芬太尼用量降低,恶心呕吐发生率均降低,B组眩晕和嗜睡的发生率升高,D组低血压和心动过缓的发生率升高(P<0.05);B组、D组和B+D组组间术后各时段舒芬太尼用量比较差异无统计学意义(P>0.05);与B组比较,B+D组眩晕和嗜睡的发生率降低(P<0.05);与D组比较,B+D组低血压、心动过缓和嗜睡的发生率降低(P<0.05).结论 布托啡诺复合右美托咪定减轻瑞芬太尼诱发术后痛觉过敏的效果优于两者单独应用.
-
钙蛋白酶在七氟醚麻醉诱发老龄大鼠海马神经元凋亡中的作用
目的 评价钙蛋白酶在七氟醚麻醉诱发老龄大鼠海马神经元凋亡中的作用.方法 健康雌性SD大鼠54只,18月龄,体重450~ 550 g,采用随机数字表法,将其分为3组(n=18):对照组(C组)、七氟醚组(Sev组)和钙蛋白酶抑制剂MDL28170组(M组).C组吸入50%O2-50%N2混合气体3 h;Sev组吸入3%七氟醚3 h;M组尾静脉注射MDL28170 10 mg/kg,30 min后吸入3%七氟醚3h,同时尾静脉输注MDL28170 3.33 mg·kg-1·h-1.每组取9只大鼠,分别于麻醉前30 min和麻醉后1~5d时采用Morris水迷宫实验评价认知功能,记录逃避潜伏期和穿越原平台次数;分别于麻醉前30 min和麻醉后1、5d水迷宫测试结束后,每组处死3只大鼠,取海马组织,采用流式细胞术测定神经元凋亡率和胞浆钙离子浓度.结果 与C组比较,Sev组和M组麻醉后1d时逃避潜伏期延长,穿越原平台次数减少,神经元凋亡率和胞浆钙离子浓度升高(P<0.05);与Sev组比较,M组麻醉后1d时逃避潜伏期缩短,穿越原平台次数增多,神经元凋亡率降低(P<0.05),胞浆钙离子浓度差异无统计学意义(P>0.05).结论 钙蛋白酶激活参与了七氟醚麻醉诱发老龄大鼠海马神经元凋亡.
-
海马单核细胞趋化因子1及其受体与老龄大鼠术后认知功能障碍的关系
目的 评价海马单核细胞趋化因子1(MCP-1)及其受体(CCR2)与老龄大鼠术后认知功能障碍的关系.方法 健康雄性SD大鼠48只,20 ~ 22月龄,体重480~ 550 g,采用随机数字表法,将其分为2组(n=24):对照组(C组)和术后认知功能障碍组(POCD组).POCD组吸入2.0%异氟醚麻醉,并行脾切除术.分别于术前、术后1、3和7d时行Morris水迷宫实验测定认知功能,记录逃避潜伏期和游泳距离.分别于术后1、3和7d水迷宫实验结束后处死8只大鼠,取海马组织,采用Western blot法测定MCP-1和CCR2的表达水平.结果 与C组比较,POCD组术后1、3和7d时逃避潜伏期和游泳距离延长,海马组织MCP-1和CCR2表达上调(P<0.05).结论 老龄大鼠术后认知功能障碍发生的机制可能与海马MCP-1和CCR2表达上调有关.
-
胸科手术患者术中低体温的危险因素
目的 筛选胸科手术患者术中低体温的危险因素.方法 择期行胸科手术患者120例,性别不限,年龄23 ~ 83岁,体重43~ 92 kg,ASA分级Ⅰ或Ⅱ级,预计手术时间>2h,术前核心体温36.0~ 37.5℃.入室后测量核心体温.术中鼻咽温度低于36℃定义为低体温.根据术中是否发生低体温将患者分为低体温组和非低体温组.记录患者一般情况各指标、术中液体总入量(含输血量)、麻醉时间和方式、手术时间和方式.采用logistic回归分析法筛选术中低体温的危险因素.结果 有94例患者术中发生低体温,低体温发生率为78.3%.体温低为33.6℃.2组患者年龄、麻醉时间、液体总入量和入室体温比较差异有统计学意义(P<0.05).logistic回归分析显示,液体总入量>2 000 ml(OR值3.499,P<0.05)和入室体温较低(OR值0.074,P<0.05)是胸科手术患者术中低体温的独立危险因素.结论 液体总入量>2 000 ml和入室体温较低是胸科手术患者术中低体温的独立危险因素.
-
海马mTOR信号通路在大鼠炎性痛中的作用
目的 评价海马哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路在大鼠炎性痛中的作用.方法 健康成年雄性SD大鼠60只,体重180~ 240 g,采用随机数字表法分为4组(n=6):对照组(C组)、炎性痛组(IP组)、二甲基亚砜组(DMSO组)和mTOR抑制剂雷帕霉素组(R组).采用左侧后肢足底皮下注射蜜蜂毒溶液50μl的方法制备炎性痛模型.C组左侧后肢足底皮下注射生理盐水;D组给予2%二甲基亚砜灌胃3d,1 ml/d,于第3天灌胃后1h时制备炎性痛模型;R组给予雷帕霉素10 mg/kg(溶于2%二甲基亚砜中)灌胃3d,1 ml/d,于第3天灌胃后1h时制备炎性痛模型.于造模后2h时,测定机械缩足反应阈(MWT)和热缩足潜伏期(TWL).痛阈测定结束后,处死大鼠,取海马组织,采用Western blot法测定mTOR、磷酸化mTOR(p-mTOR)、核糖体S6激酶(S6K)和磷酸化S6K(p-S6K)的表达水平.结果 与C组比较,IP组和DMSO组MWT降低,TWL缩短,海马组织p-mTOR和p-S6K的表达上调(P<0.05或0.01),mTOR和S6K的表达差异无统计学意义,R组MWT、TWL和海马组织p-mTOR、mTOR、p-S6K和S6K的表达差异无统计学意义(P>0.05);与IP组比较,DMSO组MWT、TWL和海马组织p-mTOR、mTOR、p-S6K和S6K的表达差异无统计学意义(P>0.05),R组MWT升高,TWL延长,海马组织p-mTOR和p-S6K的表达下调(P<0.05或0.01),mTOR和S6K的表达差异无统计学意义(P>0.05).结论 海马mTOR信号通路参与了大鼠炎性痛的形成.
-
富氢液对神经病理性痛大鼠坐骨神经及脊髓炎性反应的影响
目的 评价富氢液对神经病理性痛大鼠坐骨神经及脊髓炎性反应的影响.方法 健康成年雄性SD大鼠90只,体重180~220 g,采用随机数字表法分为3组(n=30):假手术组(S组)、神经病理性痛组(NP组)和富氢液组(H组).采用结扎坐骨神经的方法制备大鼠神经病理性痛模型.H组于结扎坐骨神经后腹腔注射富氢液(0.6 mmol/L)10 ml/kg,2次/d,共7d,S组和NP组给予等容量生理盐水.分别于结扎坐骨神经后7、10和14 d时测定机械痛阈和热痛阈,随后处死大鼠取脊髓和结扎侧坐骨神经,采用ELISA法检测TNF-α、IL-1β和高迁移率族蛋白1(HMGB1)的含量.结果 与S组比较,NP组和H组各时点机械痛阈和热痛阈降低,坐骨神经和脊髓TNF-α、IL-1β和HMGB1含量升高(P<0.05);与NP组比较,H组各时点机械痛阈和热痛阈升高,坐骨神经和脊髓TNF-α、IL-1β和HMGB1含量降低(P<0.05).结论 富氢液通过抑制坐骨神经及脊髓炎性反应,减轻大鼠神经病理性痛.
-
酒精依赖因素对大鼠脊髓神经元K+-Cl-共转运体2表达的影响
目的 探讨酒精依赖因素对大鼠脊髓神经元K+-Cl共转运体2(KCC2)表达的影响.方法 健康雄性SD大鼠48只,体重200~ 250 g,采用随机数字表法,将其分为2组(n=24):对照组(C组)和酒精依赖组(AD组).采用经口插管灌胃的方法给予酒精.第1、2、3周酒精浓度分别为5%、10%、20%,第4周及以后浓度为35%,灌胃量为10 ml·kg-1·d-1,总时程为8周.C组采用同样方法经口灌注不含酒精的饮用水10 ml·kg-1·d-1.2组大鼠均于后一次灌胃前行高架十字迷宫实验.灌胃结束后建立大鼠切口痛模型.于术后2、6、24和48 h时测定机械痛阈和热痛阈.于术后48 h时处死大鼠,取脊髓组织,采用免疫荧光法和Western blot法测定脊髓KCC2的表达水平.结果 与C组比较采,AD组开放臂进入次数减少,开放臂停留时间缩短,闭合臂进入次数增多,闭合臂停留时间延长,术后各时点机械痛阈和热痛阈降低,脊髓KCC2表达下调(P<0.05).结论 酒精依赖大鼠痛觉过敏的机制与脊髓神经元KCC2表达下调有关.
-
七氟醚对低氧诱导小鼠肺癌细胞侵袭和迁移能力的影响
目的 探讨七氟醚对低氧诱导小鼠肺癌细胞侵袭和迁移能力的影响.方法 小鼠Lewis肺癌细胞接种于培养板,培养24 h后,采用随机数字表法,将其随机分为3组(n=18):对照组(C组)和低氧组(H组)、低氧组+2%七氟醚(HS组).C组为正常培养组,H组采用94% N2-5% CO2-1%O2(2 L/min)孵育4h,HS组采用2%七氟醚和94% N2(2 L/min)孵育4h.采用Transwell法检测侵袭细胞数,细胞划痕法检测细胞迁移率;采用Western blot检测Beclin 1和LC3Ⅱ的表达水平.结果 与C组比较,H组和HS组侵袭细胞和细胞迁移率升高,Beclin 1和LC3Ⅱ表达上调(P<0.05);与H组比较,HS组侵袭细胞数和细胞迁移率降低,Beclin 1和LC3Ⅱ表达下调(P<0.05).结论 七氟醚可抑制低氧诱导的小鼠肺癌细胞侵袭和迁移能力,其机制与抑制自噬有关.
-
异丙酚对人胃癌细胞RhoA/ROCK1信号通路的影响
目的 初步评价Ras同源基因(Rho)/Rho相关螺旋卷曲蛋白激酶(ROCK)信号通路在异丙酚抑制人胃癌细胞转移能力中的作用.方法 体外培养人胃癌MKN-45细胞浓度为1.0× 106个/ml,接种培养板后按照随机数字表法,将细胞培养板孔分为4组:C组不给予任何药物;P组给予异丙酚,终浓度16 μg/ml;L组给予溶血磷脂酸,终浓度1 μmol/L;PL组给予异丙酚和溶血磷脂酸,终浓度分别为16 μg/ml、1μmol/L,均孵育24 h.采用细胞划痕实验确定细胞迁移率,Transwell法检测侵袭细胞数,Western blot法检测基质金属蛋白酶(MMP-2)、MMP-9、RhoA及ROCK1的蛋白表达水平.结果 与C组比较,L组细胞迁移率和侵袭细胞数升高,MMP-2、MMP-9、RhoA及ROCK1的蛋白表达上调(P<0.05),P组细胞迁移率和侵袭细胞数降低,MMP-2、MMP-9、RhoA及ROCK1的蛋白表达下调(P<0.05);与L组比较,PL组细胞迁移率和侵袭细胞数降低,MMP-2、MMP-9、RhoA及ROCK1的蛋白表达下调(P<0.05).结论 异丙酚降低人胃癌细胞转移能力的机制与抑制RhoA/ROCK1信号通路有关.
-
生物节律紊乱对大鼠异丙酚镇静效应的影响
目的 评价生物节律紊乱对大鼠异丙酚镇静效应的影响.方法 成年雄性SD大鼠32只,体重180~220 g,采用随机数字表法,将其分为4组(n=8):近日节律夜间给药组(CN组)、近日节律日间给药组(CD组)、生物节律紊乱夜间给药组(BN组)和生物节律紊乱日间给药组(BD组).CN组和CD组于12h光照(7:00-19:00)/12 h黑暗(19:00-7:00)交替的实验箱饲养2周;BN组和BD组于24 h光照的实验箱中饲养2周.CN组和BN组分别于14:00时腹腔注射异丙酚75mg/kg;CD组和BD组分别于22:00时腹腔注射异丙酚75 mg/kg.记录翻正反射消失的持续时间,并于翻正反射恢复后20 min时,测定认知功能,分别于学习训练后6、12、24和48 h时,记录被动回避潜伏期.结果 与CN组比较,CD组翻正反射消失持续时间缩短,学习训练后12 h时被动回避潜伏期延长,BN组翻正反射消失持续时间、学习训练后12和24 h时被动回避潜伏期均缩短(P<0.05或0.01);与CD组比较,BD组翻正反射消失持续时间差异无统计学意义(P>0.05),学习训练后24 h时被动回避潜伏期缩短(P<0.05);BN组与BD组间翻正反射消失持续时间和被动回避潜伏期比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 生物节律紊乱可抵消近日节律对异丙酚镇静效应的影响.
-
目标导向液体治疗对胃肠道肿瘤手术老年患者术后康复的影响
目的 探讨目标导向液体治疗对胃肠道肿瘤手术老年患者术后康复的影响.方法 择期行胃肠道肿瘤根治术的患者100例,年龄65 ~ 90岁,性别不限,体重40~ 80 kg,ASA分级Ⅱ或Ⅲ级,采用随机数字表法分为2组(n=50):目标导向液体治疗组(G组)和常规液体治疗组(C组).术中连续监测HR、MAP、CVP、SpO2和PETCO2.G组同时采用FloTrac/Vigileo监测系统监测心输出量(CO)、心脏指数(CI)、每搏量(SV)、每搏量指数(SVI)和每搏量变异度(SVV).C组维持MAP 60~110 mmHg,CVP 6~ 12 cmH2O;G组维持CI 2.5~4.0 L· min-1·m-2,SVV 2%~13%,MAP 65 ~ 110mmHg,SVI 35~47 ml/m2.晶体液为复方电解质液,胶体液为130/0.4羟乙基淀粉溶液.记录术中晶体量和胶体量用量、总输液量、尿量、术中血管活性药物使用情况.记录气管拔管时间、术后首次排气时间、术后住院时间、总住院时间和总医疗费用.记录术后手术相关并发症、术中和术后心血管和肺部并发症、术后少尿、无尿和肾功能不全的发生情况.结果 与C组比较,G组术中晶体液用量、胶体液用量、总输液量和尿量减少,血管活性药物使用率升高,术后住院时间、总住院时间和首次排气时间缩短,总医疗费用降低,术后手术相关并发症、肺部并发症及心血管并发症的发生率降低(P<0.05或0.01).结论 基于FloTrac/Vigileo监测系统的目标导向液体治疗可显著促进胃肠道手术老年患者术后康复,具有一定的临床价值.
-
甘露醇用于颅脑外科手术患者液体反应性试验的可靠性
目的 评价甘露醇用于颅脑外科手术患者液体反应性试验的可靠性.方法 择期行颅脑外科手术患者62例,性别不限,年龄18~64岁,ASA分级Ⅰ或Ⅱ级,体重指数18~25 kg/m2,麻醉诱导后行机械通气,行中心静脉和桡动脉穿刺置管术,连接FloTracTM/VigileoTM监测系统,用于监测每搏量变异度.输注甘露醇前根据每搏量变异度确定有效循环血容量水平.液体反应性试验:颅骨钻孔时开始静脉输注20%甘露醇,经20 min输注250 ml,记录输注甘露醇结束时液体反应性试验情况.结果 液体反应性试验的灵敏度和特异度分别为43%和44%.结论 甘露醇不适用于颅脑外科手术患者液体反应性试验.
-
气管导管远端采样用于新生儿监测PETCO2的可靠性
目的 评价气管导管远端采样用于新生儿监测PETCO2的可靠性.方法 择期全麻下行腹部手术的足月新生儿50例,年龄1~28 d,体重2.55~4.00 kg,ASA分级Ⅰ或Ⅱ级,采用随机数字表法分为2组(n=25):气管导管近端采样组(P组)和气管导管远端采样组(D组).利用外径为1 mm的硬膜外导管,一端连接二氧化碳采样管,另一端伸入气管导管至其远端侧孔处.机械通气15 min时采集桡动脉血样,记录PETCO2,行血气分析,记录PaCO2;PETCO2与PaCO2作一致性检验.结果 2组PETCO2低于PaCO2(P<0.01);2组间PaCO2比较差异无统计学意义(P>0.05);D组PETCO2高于P组(P<0.01).D组Kappa值高于P组(P<0.01).结论 与气管导管近端采样相比,气管导管远端采样监测新生儿PETCO2更可靠.
-
每搏量变异度监测腹腔镜手术患者血容量变化的准确性
目的 评价每搏量变异度(SVV)监测腹腔镜手术患者血容量变化的准确性.方法 择期行腹腔镜手术患者40例,性别不限,年龄40 ~ 64岁,体重指数20~ 25 kg/m2,ASA分级Ⅰ或Ⅱ级.全麻后建立气腹,行容量负荷试验:静脉输注6%羟乙基淀粉130/0.4氯化钠注射液500 ml,输注时间30 min.于气腹前(T1)、气腹后3 min(T2)、容量负荷前即刻(T3)、容量负荷后3 min(T4)时记录心输出量(CO)、心脏指数(CI)、每搏量(SV)、每搏量指数(SVI)和SVV.以△CI≥15%为容量负荷试验阳性标准,绘制SVV判断容量变化的ROC曲线,计算曲线下面积及95%可信区间.结果 与T1时比较,T2时SVV降低(P<0.05);与T3时比较,T4时CO、CI、SV、SVI升高,SVV降低(P<0.05).ROC曲线分析结果示:SVV监测血容量变化的阈值为9.2%时,灵敏度为61%,特异度为50%,曲线下面积(95%可信区间)为0.567(0.378~0.757).结论 SVV不适于作为监测腹腔镜手术患者血容量变化的指标.
-
不同方法监测患者异丙酚镇静深度的准确性:BIS、 Narcotrend指数、意识指数与听觉诱发电位指数的比较
目的 比较BIS、Narcotrend指数(NI)、意识指数(IoC)与听觉诱发电位指数(AAI)监测患者异丙酚镇静深度的准确性.方法 全麻下行择期手术患者60例,性别不限,年龄41 ~ 64岁,体重指数20~ 30 kg/m2,ASA分级Ⅰ或Ⅱ级.采用Marsh药代动力学参数TCI异丙酚,设定初始Ce为0.8 μg/ml,待Ce稳定后以0.1 μg/ml为梯度递增,并行OAA/S评分.TCI异丙酚前分别记录BIS值、NI值、IoC值和AAI值,此时OAA/S评分为5分,异丙酚TCI期间记录OAA/S评分依次达4分、3分、2分、1分时异丙酚Ce,采用随机数字表法确定BIS值、NI值、IoC值及AAI值的测定顺序,待数值稳定后记录5 s,取平均值.BIS值、NI值、IoC值及AAI值分别与异丙酚Ce进行Pearson相关分析.结果 BIS值、NI值、IoC值及AAI值与Ce的相关系数分别为rBIs-Ce=-0.829、rNI-Ce=-0.886、rIoC-Ce=-0.881、rAAI-Ce=-0.791 (P<0.05).rBIS-Ce、rNI-Ce、rIoC.Ce及rAAI-Ce之间比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 中年患者非伤害性刺激条件下,BIS、NI、IoC及AAI监测异丙酚镇静深度的优势无差异.
年 | 期数 |
2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 |
2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 z1 |
2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 z1 |
2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2007 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2006 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2005 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2004 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2003 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2002 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2001 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2000 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
1999 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
1998 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |