中华泌尿外科杂志
Chinese Journal of Urology 중화필뇨외과잡지
- 主管单位: 中国科学技术协会
- 主办单位: 中华医学会
- 影响因子: 1.62
- 审稿时间: 1-3个月
- 国际刊号: 1000-6702
- 国内刊号: 11-2330/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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人类雄激素受体亚型研究进展
长期以来,人们都认为雄激素受体(AR)为单一基因编码的单一蛋白,而近年来研究已经证实多种动物体内,甚至人体内都存在不同的AR亚型,亚型之间的功能及分布存在明显差异[1-3].本文就此方面的进展作一综述.
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MTC-EPI靶向于大鼠膀胱的实验研究
目的 构建磁性靶向载体(magnetically targeted carriers,MTC),为膀胱癌靶向化疗提供实验依据.方法 选用可生物降解的壳聚糖作为骨架材料,与具有超顺磁性的Fe3O4纳米粒、丙烯酸单体及表柔比星合成磁性纳米微球,通过尾静脉注入SD大鼠体内.12只SD大鼠分为外加磁场组及未加磁场组.观察MTC-EPI在大鼠膀胱内的分布,比较2组分布差异.结果 外加磁场组大鼠膀胱壁均可见蓝染的铁离子大量分布,对照组大鼠膀胱壁未见铁离子分布.结论 MTC可以很好地实现大鼠膀胱靶向性,为膀胱癌靶向化疗提供了一种可能.
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雄激素对前列腺癌细胞内游离钙离子浓度的影响
目的 探讨5α-双氢睾酮(DHT)对前列腺癌LNCaP细胞内游离钙离子浓度([Ca2+]i)的影响及其机制.方法 应用Fura-2/乙酸甲酯(Fura-2/AM)Ca2+荧光探针法结合MiraCal荧光成像系统实时检测不同浓度的DHT刺激以及Ca2+通道阻滞剂干预后LNCaP细胞[Ca2+]i的变化.结果 DHT能快速诱导[Ca2+]i升高,在20 s~3 min升至峰值.DHT浓度为1、10、100和1000nmol/L时能诱导[Ca2+]i分别从基础值(28±5)、(29±5)、(28±4)和(28±9)nmol/L上升至峰值31±3(P>0.05)、65±9(P<0.01)、193±33(P<0.001)和(208±42)nmol/L(P<0.001).DHT浓度为100和1000 mol/L时,[Ca2+]i峰值间差异无统计学意义(P>0.05).细胞外液无Ca2+时,1000 nmol/L DHT未能诱导[Ca2+]i升高.细胞膜L-型电压门控Ca2+通道阻滞剂维拉帕米(50μmol/L)、地尔硫卓(100 μmol/L)或硝苯地平(5 mmol/L)37℃孵育细胞5 min后,能完全抑制1000nmol/L DHT诱导的[Ca2+]i升高.磷脂酶C抑制剂新霉素(1 mmol/L)37 ℃孵育细胞5 min或兰尼定受体阻滞剂普鲁卡因(50 mmol/L)37℃孵育细胞3 min后,对1000 nmol/L DHT诱导的[Ca2+]i升高没有影响.结论 DHT可快速、剂量依赖性诱导LNCaP细胞[Ca2+]i升高;DHT诱导LN-CaP细胞[Ca2+]i的升高是细胞外Ca2+经细胞膜L-型电压门控Ca2+通道流入细胞内实现的,细胞内贮钙库未释放Ca2+.
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应用SELDI-TOF-MS技术建立肾细胞癌和肾脏良性占位的血清蛋白质谱筛选模型
目的 探讨SELDI-TOF-MS技术在肾脏良恶性占位鉴别诊断中的应用. 方法 136例血清标本,分别为肾细胞癌67例,肾脏良性占位22例,健康对照47例,应用SELDI-TOF-MS技术获得IMAC-Cu2+蛋白芯片的表达图谱,分别建立肾癌与健康对照,肾癌与肾脏良性占位的血清标志物诊断模型.结果 肾癌与健康对照的鉴别诊断模型的敏感度为97.6%(41/42),特异度为95.7%(45/47),能够较好地区分肾癌和健康人,但是无法用于鉴别肾脏占位的良恶性.而用肾癌和肾脏良性占位建立的诊断模型敏感度为85.7%(36/42),特异度为95.5%(21/22),不仅能区分良恶性,同样可以很好地用于肾癌和健康人的筛查,盲法验证后的敏感度为92.0%(23/25),特异度为95.7%(45/47).结论 SELDI-TOF-MS技术的高度敏感特性为肾细胞癌的早期诊断提供了有力的途径,其中相对分子质量3887和11 079的2个蛋白峰有可能是区分肾癌、肾脏良性占位和健康人的肿瘤标记物.
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肾上腺肿瘤蛋白酪氨酸磷酸酶基因和基质金属蛋白酶2蛋白表达及其临床意义
目的 探讨蛋白酪氨酸磷酸酶基因(PTEN)和基质金属蛋白酶2(MMP-2)蛋白表达在肾上腺肿瘤临床诊断及预后评估中的价值.方法 采用免疫组织化学法对116例肾上腺肿瘤标本进行PTEN和MMP-2蛋白检测,结合临床资料进行统计学分析.结果 PTEN和MMP-2蛋白之间的表达呈负相关(r=-0.4613,P<0.05).PTEN和MMP-2蛋白表达与肾上腺肿瘤患者年龄、性别、肿瘤部位等无明显相关(P>0.05).按"-"、"+"、"++"、"+++"、"++++"划分,肾上腺皮质腺瘤和腺癌PTEN表达分别为0、0、6、15、18例和4、6、10、2、0例,前者明显高于后者(P<0.05);良、恶性嗜铬细胞瘤PTEN表达分别为0、3、8、14、10例和4、8、6、2、0例,前者明显高于后者(P<0.05).肾上腺皮质腺瘤和腺癌MMP-2表达分别为12、13、14、0、0例和0、3、9、6、4例,后者明显高于前者(P<0.05);良、恶性嗜铬细胞瘤MMP-2表达分别为13、14、7、1、0例和0、1、8、8、3例,后者明显高于前者(P<0.05).PTEN和MMP-2表达与肾上腺皮质腺癌、恶性嗜铬细胞瘤的预后均相关(P<0.05),PTEN表达越低预后越差,相反,MMP-2表达越强预后越差.结论 联合检测PTEN和MMP-2蛋白在肾上腺肿瘤中的表达,有助于临床提高对肾上腺肿瘤恶性程度的判断及预后评估.
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抗肿瘤药物对杯状细胞黏液分泌的实验研究
目的 观察抗肿瘤药物对回肠杯状细胞黏液分泌抑制的作用.方法 SD大鼠24只,随机分为生理盐水对照组、丝裂霉素给药组、比柔吡星给药组.制备在体游离回肠袢模型,分别于给药后8、16、24、32、40、48 h抽取大鼠回肠袢内肠液,测定肠液内蛋白含量,48 h后处死大鼠,取肠袢石蜡包埋行HE、阿利辛兰-过碘酸雪夫反应(AB-PAS)、黏液蛋白(MUC2)免疫组化染色,观察黏液分泌量及回肠杯状细胞的变化.结果 丝裂霉素组排放入肠袢中的黏液蛋白总量(32.09±7.12)mg与对照组(55.71±20.35)mg相比,差异有统计学意义(P<0.05);各时间点均少于对照组,以32~40h(3.11±0.31)、40~48 h(2.65±0.58)排放入肠袢中的蛋白量与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05).比柔吡星组排放入肠袢中的黏液蛋白总量(44.32±18.47)少于对照组,但无统计学意义;比柔吡星组各时间点与对照组比较差异均无统计学意义.丝裂霉素组杯状细胞数(33.97±7.61)与对照组(25.13±11.29)比较,差异有统计学意义(P<0.01),比柔吡星组杯状细胞数(28.69±9.24)与对照组比较,差异无统计学意义.黏蛋白MUC2免疫组化染色:丝裂霉素组杯状细胞数(46.60±8.94)与对照组(34.7±10.98)比较差异有统计学意义(P<0.01),比柔吡星组杯状细胞数(35.87±5.84)与对照组比较差异无统计学意义.结论 丝裂霉素可以抑制杯状细胞分泌黏液,随时间延长杯状细胞分泌黏液量逐渐减少.
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新基因BQ135232生物信息学分析及免疫原性研究
目的 研究差异表达新基因的免疫原性,探索其在肿瘤免疫学治疗中的应用价值.方法 应用生物信息学方法,对新基因BQ135232进行分析,初步了解其基本性状;构建表达载体,转染真核细胞,并提取表达产物;表达产物冲击肿瘤患者DC,活化自体淋巴细胞,然后与自体肿瘤细胞共培养,观察杀伤效果.结果 新基因BQ135232位于第12号染色体上,其上有一个开放阅读框架(ORF),编码192个氨基酸肽链--BQ-ORF,BQ-ORF上有2处特异性抗原表位.成功构建表达载体pcDNA3-BQ-ORF-GPI,转染CHO/dhfr-细胞系.经G418,MTX筛选阳性克隆细胞株,提取表达蛋白产物.以提取表达蛋白产物冲击膀胱肿瘤患者体外培养DC,活化自体淋巴细胞,在与白体膀胱肿瘤细胞共培养体系中,可观察到肿瘤细胞变性、坏死.结论 新基因BQ135232表达蛋白具备一定的免疫原性,有可能成为肿瘤生物学治疗的一个新靶点.
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存活素和血管内皮生长因子蛋白在肾上腺肿瘤中的表达及其临床意义
目的 探讨存活素(Survivin)蛋白和血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达在肾上腺肿瘤诊断及预后评估中的价值.方法 采用免疫组织化学方法检测116例肾上腺肿瘤组织标本Survivin和VEGF蛋白的表达,并结合临床资料进行统计学分析.结果 Survivin和VEGF蛋白之间的表达呈正相关(r=0.4721,P<0.05).Survivin和VEGF蛋白的表达与肾上腺肿瘤患者年龄、性别、肿瘤部位等无明显相关性(P>0.05).按"-"、"+"、"++"、"+++"、"++++"划分,肾上腺皮质腺瘤和腺癌Survivin表达分别为16、16、7、0、0例和0、2、9、7、4例,前者表达程度明显低于后者(P<0.05);良、恶性嗜铬细胞瘤Survivin表达分别为13、17、5、0、0例和0、1、9、7、3例,前者明显低于后者(P<0.05).肾上腺皮质腺瘤和腺癌VEGF表达分别为13、13、11、2、0例和0、2、4、10、6例,后者明显高于前者(P<0.05);良、恶性嗜铬细胞瘤VEGF表达分别为12、14、8、1、0例和0、1、6、10、3例,后者明显高于前者(P<0.05).Survivin和VEGF的表达与肾上腺皮质腺癌、恶性嗜铬细胞瘤预后均有关(P<0.05),Survivin和(或)VEGF表达越强预后越差.结论 联合检测Survivin和VEGF蛋白在肾上腺肿瘤中的表达,有助于提高对肾上腺肿瘤恶性程度的判断及预后评估.
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膀胱出口部分梗阻大鼠逼尿肌SOD活性变化及抗氧化剂的干预
目的 研究局部膀胱出口梗阻(BOO)后逼尿肌脂质过氧化反应的变化,探讨缺血、缺氧在逼尿肌功能障碍发病机制中的作用.方法 Wistar雌性大鼠45只分为对照组、梗阻组及抗氧化剂治疗组3组,各15只.6周后测定膀胱容量及重量,离体收缩实验观察逼尿肌肌条兴奋性的变化,黄嘌呤氧化酶法测定逼尿肌超氧化物歧化酶(SOD)活性,显微镜下观察逼尿肌形态及结构变化.结果 梗阻组逼尿肌SOD活性(80.73±12.15)U/mg蛋白,低于对照组(112.54±18.17)U/mg蛋白及治疗组(93.36±15.41)U/mg蛋白(P<0.05).与梗阻组相比,治疗组膀胱大容量减少,引起逼尿肌肌条自发收缩的张力阈值增加,而膀胱重量无显著变化.梗阻组逼尿肌细胞形状多样,排列紊乱,细胞间结缔组织增生.治疗组逼尿肌病理改变减轻.结论 BOO后逼尿肌脂质过氧化反应增加,缺血、缺氧也许参与了逼尿肌功能障碍的发生机制,抗氧化剂对BOO后逼尿肌的结构和功能有保护作用.
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逼尿肌过度活动中ATP-敏感性钾通道的变化及意义
目的 研究ATP-敏感性钾(KATP)通道在逼尿肌过度活动(DO)中的作用及表达变化,探讨DO的发生机制及KATP通道作为治疗靶点的可行性.方法 雌性Wistar大鼠建立膀胱出口部分梗阻,6周后行膀胱测压获得DO模型.离体收缩实验观察KATP通道阻断剂及开放剂对逼尿肌肌条自发收缩功能的影响,RT-PCR技术检测逼尿肌中KATP通道mRNA的表达. 结果 KATP通道阻断剂格列本脲干预后,2组肌条收缩频率及幅度无显著变化.KATP通道开放剂克罗卡林干预后,2组肌条收缩频率均下降,对照组下降率为(46.8±14.8)%,DO组为(67.9±17.1)%,DO组下降率高于对照组(P<0.05),而收缩幅度无显著变化.对照组逼尿肌中KATP通道亚型SUR2B、Kir6.2的相对含量分别为0.30±0.05、0.48±0.07,DO组分别为0.52±0.07、0.60±0.09,DO组均增加,其中SUR2B增加更明显(P<0.01).结论 KATP通道开放剂对逼尿肌的自发性收缩活性有明显的抑制作用,此作用在DO组明显增强,这也许对控制DO的肌原性活性提供了独特的作用机制.这种变化可能和DO组逼尿肌中KATP通道亚型,特别是SUR2B的mRNA表达增加有关.SUR2B也许可以作为治疗DO的较好靶点.
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人工逼尿肌装置在犬神经原性膀胱模型中的应用价值初步研究
目的 探讨人工逼尿肌装置在犬神经原性膀胱模型中的应用价值.方法 1岁龄雌性杂交犬16只,骶上组8只于L5~6水平完全锐性横断脊髓,骶下组8只在此基础上完全破坏骶髓建立脊髓损伤性犬神经原性膀胱模型;外科手术将人工逼尿肌装置植入固定于犬盆腔.模型建立及人工逼尿肌植入前后均采用Life-Tech Ⅳ型尿动力仪检测评价.结果 骶上型犬表现为储尿期逼尿肌自发或诱发性收缩反射亢进,膀胱容量减少,呈低顺应性膀胱;骶下型犬则出现逼尿肌无反射,膀胱容量增大,呈高顺应性膀胱.人工逼尿肌装置植入后2组模型犬大尿流率、平均尿流率无显著改变;骶上组剩余尿量由(174.8±24.7)ml降至(13.0±9.7)ml,骶下组由(182.2±30.0)ml降至(35.4±28.3)ml,差异均有统计学意义P<0.05.结论 人工逼尿肌装置能有效增强排尿动力,减少剩余尿量,降低膀胱内压以避免膀胱处于储尿期的长期高压状态及继发性的上尿路损害.
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自体干细胞注射治疗女性压力性尿失禁的实验研究
目的 探讨自体肌肉干细胞注射治疗女性压力性尿失禁的可行性.方法 采用双侧卵巢切除和反复阴道扩张的方法,构建雌性SD大鼠压力性尿失禁动物模型.45只大鼠分3组,正常对照组15只,尿失禁模型30只,其中模型对照组15只,细胞注射治疗组15只.细胞注射治疗组建立模型后第2个月末接受自体肌肉干细胞尿道周围注射治疗.注射治疗组治疗1个月后,测定3组大鼠腹压漏尿点压,同时取近段尿道组织,HE染色观察形态学变化.结果 尿失禁模型组腹压漏尿点压(n=12)(26.4±2.7)cm H2O、正常对照组(n=14)(78.4±3.1)cm H2O、细胞注射治疗组(n=11)(58.8±2.4)cm H2O.3组间两两比较差异均有统计学意义.细胞注射后局部尿道壁肌层增厚、肌纤维增强.结论 自体肌肉干细胞注射治疗能明显提高压力性尿失禁动物模型的腹压漏尿点压,并使注射位点尿道壁肌层得到增强.注射细胞数量和注射后对膀胱功能的远期影响需进一步研究.
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压力性尿失禁动物模型的建立
目的 模拟分娩产伤和雌激素水平下降,建立压力性尿失禁的动物模型.方法 40只SD大鼠分为4组:Ⅰ组为对照组(10只);Ⅱ组为阴道扩张组(10只),模拟产伤;Ⅲ组为卵巢切除组(10只),模拟雌激素水平下降;Ⅳ组为阴道扩张+卵巢切除组(10只).3个月后,分别对4组大鼠行尿动力学检测以证实压力性尿失禁.结果 3个月中3只大鼠死亡.Ⅰ组腹压漏尿点压(ALPP)为(77.04±3.53)cm H2O,Ⅱ组为(52.71±2.62)cm H2O,Ⅲ组为(52.87±2.69)cm H2O,Ⅳ组为(25.10±2.18)cm H2O.Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组ALPP值均低于Ⅰ组,两两相比差异有统计学意义(P<0.01);Ⅱ、Ⅲ组之间差异无统计学意义(P=0.898),Ⅱ、Ⅳ组相比差异有明显统计学意义(P<0.01),Ⅲ、Ⅳ组相比差异有统计学意义(P<0.05).结论 模拟分娩产伤和雌激素下降均能成功获得压力性尿失禁的动物模型;同时模拟2种病因,模型建立成功率更高.
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非细菌性前列腺炎动物模型的建立及环氧合酶-2测定
目的 探讨非细菌性前列腺炎的动物模型建立方法及慢性非细菌性前列腺炎(CNP)的发病机制.方法 成年雄性SD大鼠72只,随机分为3组,每组24只:实验组用大鼠膀胱穿刺抽出尿液前列腺内注射建立前列腺炎模型,对照组用无菌生理盐水前列腺内注射,假手术组大鼠前列腺仅做针刺处理.模型建立后第1、3、7天分别处死大鼠8只观察前列腺大体形态,HE染色光镜观察,免疫组织化学法检测环氧合酶-2(COX-2)在模型中的表达.结果 实验组前列腺炎症变化较对照组及及假手术组明显,第1、3、7天随着时间延长实验组前列腺内炎症程度渐好转.免疫组织化学显示实验组COX-2染色强度为87.5%,较对照组(25.0%)及假手术组(12.5%)明显增强(P<0.05);随着时间延长C0X-2染色强度有明显下降(P<0.05).结论 尿液刺激导致前列腺内COX-2升高可能与CNP的发病机制有密切关系.
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前列腺液中IL-1β、IL-8、TNF-α、PGE2浓度变化及临床意义
目的 探讨慢性前列腺炎患者前列腺液中IL-1β、IL-8、TNF-α、PGE2的浓度变化与慢性前列腺炎类型、发病机制、症状和前列腺液白细胞计数的关系.方法 以Meares-Stamey法行尿液、前列腺按摩液(EPS)细菌培养,结合前列腺液常规检查和NIH-CPSI评分,将100例慢性前列腺炎患者分为细菌组(Ⅱ型11例)、非细菌组(Ⅲa型66例)、前列腺痛组(Ⅲb型23例).放射免疫法测定患者和20例正常对照者前列腺液中IL-1β、IL-8、TNF-α、PGE2含量,比较结果并进行相关分析.结果 Ⅱ型前列腺炎患者EPS中IL-1β、IL-8、TNF-α、PGE2检测值明显高于Ⅲa型、Ⅲb型及对照组(P<0.01),Ⅲa型明显高于Ⅲb型及对照组(P<0.05),Ⅲb型与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05).前列腺炎患者IL-1β与TNF-α、PGE2水平成正相关(r=0.563,r=0.826;P<0.01).EPS中白细胞计数与IL-8水平成正相关(r=0.547,P<0.01),与IL-1β、TNF-α、PGE2水平无相关性;IL-1β、PGE2水平与NIH-CPSI疼痛不适症状评分成正相关(r=0.506,P<0.01);IL-1β、IL-8、TNF-α、PGE2水平与NIH-CPSI评分无相关性(P>0.05).结论 慢性前列腺炎患者前列腺液IL-1β、IL-8、TNF-α、PGE2表达增高,并参与前列腺的炎症反应,其水平可作为慢性前列腺炎的诊断依据之一,对慢性前列腺炎分型可能有一定临床意义.
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慢性前列腺炎患者性功能状况调查
目的 调查慢性前列腺炎(CP)患者性功能状况,探讨CP患者性功能状况及性功能障碍的发病情况.方法 随机抽查CP患者600例.问卷调查患者一般情况①年龄、职业、文化程度、婚姻、病程、EPS检查结果;②国际前列腺炎症状评分表(NIH-CPSI);③勃起功能国际指数的问卷(IIEF-5);④勃起硬度分级;⑤90项症状清单.调查CP患者NIH-CPSI、射精痛情况以及早泄(PE)、勃起功能障碍(ED)、精神症状焦虑、抑郁情况,比较各症状间的相关性,统计不同的发生率.结果 NIH-CPSI与IIEF-5相关性分析中,P值为0.005,有统计学意义.600例患者中,射精痛与ED之间P值为0.000,有统计学意义.ED患病率随患者年龄增大而明显增加.NIH-CPSI与精神症状焦虑相关性P<0.01,NIH-CPSI与精神症状抑郁相关性P<0.05,前列腺炎伴随的ED与精神症状焦虑相关性P<0.05,前列腺炎伴随的ED与精神症状抑郁情况相关性P<0.01.结论 前列腺炎的各种症状可能是其伴随的性功能障碍原因之一,CP患者的ED患病率随患者年龄增长而明显增加,CP与精神症状(焦虑、抑郁)可能存在相互影响.
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抗坏血酸盐、过氧化氢酶改善冻融人精子质量的研究
目的 探讨抗氧化剂--抗坏血酸盐、过氧化氢酶(catalase,CAT)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)对冻融人精子质量的影响.方法 30份健康可生育男性精液分别添加改良人精子冷冻保护液,依所添加的抗氧化剂及终浓度分7组:未添加者为阴性对照组,余为抗坏血酸盐300、600 μmol/L组,CAT 200、400 U/ml组,SOD 200、400 U/ml组.检测各组精液冻融前后常规参数,冻融后活性氧(reactive oxidative species,ROS)水平、线粒体膜电位(△Ψm)和早期凋亡事件(Ann+PI-%、Ann-PI-%).结果 ①冻融后各组a+b级精子均比冷冻前下降(P<0.01),但抗坏血酸盐300 μmol/L组与2种浓度的CAT组a+b级精子(43.5±10.0)%、(43.9±8.2)%、(44.3±9.4)%下降少于对照组(38.1±7.9)%,P<0.05、P<0.01、P<0.01;相对应组的精子活率复苏率分别为(67.2±14.1)%、(68.4±13.8)%、(68.8±14.8)%,也高于对照组(58.8±10.1)%,P<0.05、P<0.01、P<0.01;而这3组ROS水平(29.6±12.8)%、(30.0±11.2)%、(31.1±11.0)%则分别低于对照组(36.7±17.0)%,P值均<0.05.②2种浓度CAT组的△Ψm(34.6±12.9)%、(32.9±11.2)%均高于对照组(27.5±10.8)%,P<0.01、P<0.05;而且低浓度抗坏血酸盐组和CAT组凋亡(Ann+PI-%)的精子(15.3±3.0)%、(15.6±2.2)%,以及未出现凋亡(Ann-PI-%)的活精子(14.0±3.8)%、(13.2±2.6)%分别低于对照组(18.1±3.9)%(P值均<0.01)和高于对照组(10.1±4.0)%(P值均<0.01).余实验组的检测指标与对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05).③冻融后各实验组a+b级精子,抗坏血酸盐600 μmol/L组、2种浓度CAT组、SOD 400 U/ml组的△Ψm,以及抗坏血酸盐组、CAT 200 U/ml组、SOD 200 U/ml组的Ann-PI-%均分别与对应组的ROS水平呈负相关;而抗坏血酸盐组、CAT 200 U/ml组的Ann+PI-%则与对应组的ROS水平呈正相关,P<0.05或P<0.01.结论 在精液冷冻保护剂中添加一定浓度的抗坏血酸盐、CAT可改善冻融人精子质量.
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原子吸收光谱法检测精浆中微量元素的临床应用价值
目的 探讨单火焰原子吸收光谱法检测精浆中微量元素铜(Cu)、锌(Zn)、钙(Ca)、镁(Mg)含量的应用价值.方法 采用从空心阴极灯或光源中发射出一束特定波长的λ射光,在原子化器中待测元素的基态原子蒸汽对其产生吸收,未被吸收的部分透射过去.通过测定吸收特定波长的光量大小,测出30例精浆标本中铜、锌、钙、镁元素的含量.结果 30例平均回收率分别为铜96.7%、锌为102.4%、钙97.4%、镁96.7%.结论 原子吸收光谱法检测精浆中微量元素Cu、Zn、Ca、Mg符合实用、简便、安全、可靠的原则,检测精浆中微量元素准确、快捷、重复性好.
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转移体内迟发过敏反应检测法改进及对心脏移植大鼠免疫状态的评价
目的 初步探讨改进转移体内迟发过敏反应检测(trans-vivo delayed type hypersensi tivity assay,Trans-vivo DTH)方法,规范反应条件对器官移植受者免疫状态评估的作用.方法 C57BL/6小鼠20只,以万能工具显微镜及游标卡尺分别测量小鼠同侧后肢脚掌厚度2次,并计算重复测定误差、可重复性系数和平均变异系数;确定Trans-vivo DTH反应的适条件,包括注射细胞量、刺激蛋白量、观察时间及血小板污染的影响;建立动物模型:A:阴性对照组5只;B:假手术组20只;C:同系心脏移植组20只;D:异基因心脏移植组20只.经存活实验确定采样时间点后,分别于术后1、4、7、11 d采用改良trans-vivo DTH检测法,RT-PCR法检测受者PBMCs中IL-2 mRNA表达水平,MLC检测细胞增殖水平,评估各组大鼠免疫状态.病理学观察D组大鼠移植心肌及DTH被检小鼠脚掌组织学改变;免疫组织化学检测异基因移植心脏组织中Ki-67蛋白表达及CD3+、CD4+和CD8+ T细胞的浸润程度.结果 重复测量过程中,万能工具显微镜组的重复测定误差及平均变异系数均小于游标卡尺组,具有较优的重测信度.Trans-vivo DTH反应的适条件为10×106受体PBMCs混合10 μg供体刺激蛋白,24 h后观察结果.Trans-vivo DTH万能工具显微镜测量法于术后第4天出现阳性结果(P<0.01),较PBMCs IL-2mRNA表达水平及MLC增殖反应更早期预测排斥反应的发生.病理学检查及免疫组织化学染色可见,随术后时间延长,D组移植心肌间质出现弥漫性炎症细胞浸润,并伴有水肿、坏死;Ki-67蛋白表达上调;CD3+、CD4+和CD8+ T细胞数量明显增加.结论 规范后的trans-vivo DTH万能工具显微镜检测法可能作为评估移植受者免疫状态的可靠方法.
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转化生长因子β1及相关生物分子在移植肾纤维化中的表达
目的 研究转化生长因子β1(TGF-β1)、基质金属蛋白酶(MMP-2)、基质金属蛋白酶抑制剂(TIMP-1)、平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、纤维连接蛋白(FN)、Ⅳ型胶原、波形蛋白、细胞角蛋白(Pan)在不同分期移植肾纤维化组织中的表达及意义.方法 对21例肾移植后不同程度纤维化病变及10例正常肾组织进行TGF-β1、MMP-2、TIMP-1、α-SMA、FN、Ⅳ型胶原、波形蛋白、Keratin免疫组化检测并作图像定量分析. 结果 纤维化早期其TGF-β1、MMP-2、TIMP-1、α-SMA与Keratin免疫染色阳性强度与量均较正常肾组织明显增加;而FN、Ⅳ胶原、波形蛋白则较弱.随着纤维化进展,TGF-β1、TIMP-1、FN、Ⅳ型胶原和波形蛋白阳性强度与量增加;而MMP-2、α-SMA、Keratin免疫染色阳性减弱.结论 TGF-β1诱导产生的成肌纤维细胞可能呈启动、推进肾纤维化的关键性因素,TIMP-1活性增加是促进细胞外基质积聚形成纤维化的重要条件.
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组织工程化膀胱壁复层结构的体外构建
目的 探讨膀胱缺损组织工程修复方法.方法 机械法去除膀胱黏膜层、肌层和浆膜层,仅保留膀胱黏膜下层.经SDS、Trixon-100和三蒸水处理去除细胞结构,制备获得膀胱脱细胞基质移植物(BAMG)作为支架材料.取成年猪膀胱壁,机械法分离膀胱肌层和黏膜层.以酶消化法分别获取膀胱尿路上皮细胞和平滑肌细胞.常规细胞传代和扩增后,将膀胱平滑肌细胞和尿路上皮细胞分别接种在BAMG浆膜面和黏膜面.细胞-材料复合物体外培养4周并行组织学鉴定.结果 HE和Masson染色鉴定发现,BAMG以胶原成分为主,内部未见明显细胞残留.免疫荧光方法鉴定结果显示,膀胱尿路上皮细胞uroplakin Ⅱ阳性,膀胱平滑肌细胞α-平滑肌肌动蛋白阳性.体外培养4周后,BAMG浆膜面和黏膜面分别形成连续的复层结构尿路上皮层和膀胱平滑肌层,免疫组化显示平滑肌层α-平滑肌肌动蛋白表达阳性,尿路上皮层广谱角蛋白表达阳性.结论 以膀胱脱细胞材料作为支架,尿路上皮细胞和膀胱平滑肌细胞作为种子细胞,能够在体外构建形成包含膀胱黏膜层及平滑肌层的复层膀胱壁结构.细胞-材料复合物的体外构建将为体内膀胱缺损的组织工程修复提供实验依据.
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简易快速获得大量高纯度大鼠Leydig细胞
目的 建立一种简易快速获得高纯度睾丸间质内莱迪希(Leydig)细胞的分离方法.方法 联合应用复合胶原酶消化、400目(30 μm)不锈钢滤网过滤和差速贴壁法获得雄性Wister大鼠睾丸间质内的Leydig细胞.分离细胞经3β-羟类固醇脱氢酶(3β-HSD)特异性酶学染色、免疫细胞化学检测和流式细胞学进行细胞表型鉴定和纯度分析.将分离细胞进行原代及传代培养,部分细胞同时给予人绒毛膜促性腺激素(HCG)刺激,观察传代后细胞生长情况,并测定HCG刺激组和非刺激组各代细胞培养上清睾酮水平,评价分离细胞的增殖能力、睾酮分泌功能及对HCG的反应.有血清和无血清2种条件培养液培养原代分离细胞,倒置相差显微镜及电镜观察细胞老化和凋亡状况,优化Leydig细胞的培养条件.结果 应用差速贴壁方法每克睾丸组织(湿重)可获得Leydig细胞(1.5±0.8)×106个,3β-HSD特异性酶学染色、免疫细胞化学检测均呈阳性反应.流式细胞学检测证实3β-HSD阳性细胞率为(95.2±3.7)%.传代后未见明显的细胞增殖,但仍可检测到3β-HSD表达.原代及传代细胞均具有睾酮生成功能,HCG刺激后睾酮分泌水平均明显上升,但原代细胞一定水平的睾酮分泌可持续6 d以上,传代后细胞仅持续48 h.结论 应用差速贴壁法可以获得大量高纯度有活性的Leydig细胞,并可以进行传代培养,且传代前后短期内均可分泌睾酮.该方法简单易行,细胞得率高.
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复合细胞的膀胱黏膜下层无细胞基质替代长段输尿管的实验研究
目的 评价复合尿路平滑肌细胞和移行上皮细胞的膀胱黏膜下层无细胞基质在大动物体内替代长段输尿管后的结构、功能状况.方法 取长风杂交白猪(不包括在本实验组内)膀胱黏膜下层,洗涤后获得无细胞基质,备用.实验猪10只,切取小块膀胱组织,分离出平滑肌细胞和移行上皮细胞,培养增殖后种植于膀胱黏膜下层无细胞基质,体外共培养.以细胞-无细胞基质复合物替代自体猪一侧中段输尿管,长约5.0~5.5 cm,术后1、2周,1、3、6个月各处死2只,大体观察、组织学和组织浴槽等方法观察替代段输尿管的结构,并进行功能评价.结果 移植替代1个月可见明显肌层形成,3、6个月时已形成良好的移行上皮层和平滑肌层.大体观察见替代段输尿管管腔存在,周围有明显的纤维组织形成.替代段以上输尿管和肾盂扩张.组织浴槽研究显示,替代段输尿管存在平滑肌肌条的一般体外特性.结论 以膀胱黏膜下层无细胞基质作为细胞载体的组织工程输尿管技术在大动物体内替代长段输尿管后,可以获得具有良好组织结构的肌性管道,但其周围的严重纤维化会影响替代段输尿管的功能.
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离子色谱法同时测定24小时尿草酸和枸橼酸的应用价值
目的 评价离子色谱法同时测定24 h尿草酸、枸橼酸在实验室和临床应用中的价值.方法 收集24 h尿液用浓盐酸酸化和稀释处理,0.2 μm有机系微孔滤膜过滤注入离子色谱仪,同时检测24 h尿草酸、枸橼酸浓度.结果 离子色谱法对尿草酸、尿枸橼酸的小检测限均为0.04mg/ml,标准曲线相关系数r分别为0.99992、0.99989,批内相对标准偏差RSD分别为1.50%、0.79%,尿样回收率分别为96.9%、92.3%,此法与草酸变色酸比色法及枸橼酸比色法显著相关(P>0.05).结论 离子色谱法简单、快速、准确,适于实验室及临床24 h尿草酸、枸橼酸检验分析.
年 | 期数 |
2019 | 01 02 |
2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 z1 |
2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 z1 |
2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 z1 |
2007 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 z1 |
2006 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 z1 |
2005 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2004 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2003 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2002 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2001 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2000 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
1999 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
1998 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |