人牙髓细胞内Smad 2、3在转化生长因子β1信号转导中的作用

目的探讨人牙髓细胞内Smad 2、3在转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)信号转导过程中的作用.方法原代培养人牙髓细胞,用激光共聚焦显微镜观察TGF-β1刺激初期牙髓细胞内Smad 2、3由胞质向胞核转位的现象,同时采用Western blot方法检测刺激后期Smad 2、3蛋白表达的变化.结果TGF-β1刺激2 h内,Smad 2、3在胞质中表达渐弱,在胞核内表达渐强,呈现由胞质向胞核逐步转位的趋势.Smad 2蛋白总量在TGF-β1刺激前后几乎无变化,而Smad 3在刺激后24 h表达量明显下降,48 h后表达十分微弱.结论Smad 2、3可能是人牙髓细胞内TGF-β1的信号转导分子.TGF-β1刺激初期Smad 2、3通过发生转位参与转导TGF-β1信号至核内,刺激后期Smad 3表达水平的下调可能与TGF-β1负反馈调节自身的信号有关.

全反式维甲酸提高HSV-TK/GCV系统治疗舌鳞癌旁观者效应的研究

目的探讨全反式维甲酸(all-trans retinoic acid,ATRA)对单纯疱疹病毒胸苷酸激酶(herpes simplex virus thymidine kinase,HSV-TK)/丙氧鸟苷(ganciclovir, GCV)系统治疗舌鳞癌旁观者效应的增强作用及机制.方法应用免疫细胞化学、流式细胞仪等技术,对ATRA诱导舌鳞癌细胞系(Tca8113)细胞间隙连接蛋白基因Cx43的表达进行分析;采用析因分析法分析ATRA对HSV-TK/GCV系统旁观者效应的影响.结果舌鳞癌细胞经10-7mol/L～10-5mol/L ATRA处理后Cx43蛋白的表达明显提高;阳性细胞计数率由处理前的5.17%上升至30.53%(10-5 mol/L ATRA),经t检验处理组与非处理组间差异有显著性(P<0.01);舌鳞癌细胞经ATRA处理后增强了HSV-TK/GCV系统的旁观者效应,两者间存在交互作用(P<0.05).结论ATRA可显著提高HSV-TK/GCV系统的旁观者效应,该作用可能通过诱导Cx43蛋白的表达而实现.

三氧化二砷诱导口腔鳞癌细胞凋亡的机制探讨

目的探讨三氧化二砷诱导口腔鳞癌细胞凋亡的机制.方法通过对两种舌鳞癌细胞系OSC-19,Tca8113经三氧化二砷作用后电镜下形态学改变、流式细胞仪测得的细胞周期变化、线粒体跨膜电位改变、凋亡相关蛋白BCL-2、 p16、 p53、 Caspase-3及 PARP变化;初步探讨三氧化二砷诱导舌鳞癌细胞系凋亡的机制.结果①三氧化二砷抑制口腔鳞癌细胞生长通过毒性损伤和诱导凋亡双重途径来实现;②经三氧化二砷作用后,western blot 检测bcl-2、p53、 p16基因表达蛋白无变化,而caspase-3,PARP发生改变; ③经三氧化二砷作用后,两类舌鳞癌细胞系线粒体跨膜电位明显下降, 细胞周期G2-M期阻滞,且与凋亡产生同步.结论①线粒体和微管可能是三氧化二砷的主要作用位点,为三氧化二砷发挥凋亡诱导效应的启动因素;② Caspase-3 途径的激活可能为三氧化二砷诱导口腔鳞癌细胞凋亡的关键途径之一.

线性(牙合)总义齿固位稳定性的研究

目的通过对线性(牙合)总义齿固位的定量检测及患者的主观评判,验证线性(牙合)总义齿的(牙合)型设计在静态及动态下对义齿固位与稳定性的影响.方法利用Hz-1型固位力测试仪对25例线性(牙合)总义齿修复患者进行上、下颌总义齿静态固位力的测试,同时针对功能状态下的主观固位感觉进行问卷调查.结果线性(牙合)上颌总义齿在两种状态下均具有良好的固位;剩余牙槽嵴骨吸收严重的线性下颌总义齿修复患者的静态固位力值低,但主观感觉固位良好;患者戴用线性(牙合)总义齿的主观固位感觉明显优于原解剖式(牙合)总义齿.结论对于剩余牙槽嵴骨吸收严重的患者,线性(牙合)总义齿在功能状态下可获得良好的义齿固位和稳定性,有利于义齿功能的发挥.

nm23-H1基因对BcaCD885细胞侵袭、粘附和运动力影响的研究

目的通过nm23-H1的转化及导入BcaCD885细胞株,建立稳定、高效、低毒的转染方法,观察nm23-H1对BcaCD885细胞株侵袭转移能力的影响.方法①利用基因转化技术,制备高纯度的nm23-H1真核表达质粒;②利用阳离子脂质体介导的转染技术,完成转染方法的建立;③利用免疫组化技术,检测转染前后的NDPKA的表达;④利用transwell小室和冲刷实验,观察转染前后细胞的侵袭、粘附、趋化运动能力的变化.结果①使用重组的pCMV-Neo-Bam的真核表达载体,将nm23-H1转染口腔癌细胞,并获得稳定表达;②发现BcaCD885细胞株nm23-H1基因的转染前后表达水平有明显差异;③转染后的BcaCD885细胞侵袭、粘附、趋化运动能力均显著降低.结论nm23-H1对BcaCD885细胞的侵袭转移能力具有显著抑制作用.

肿瘤术后颌骨缺损的功能重建

目的肿瘤术后造成的颌骨缺损使患者丧失咀嚼、语言等功能,并导致颜面畸形.采用植骨种植功能颌重建,以提高患者的生存质量.方法本组64例肿瘤术后颌骨缺损(上颌10例,下颌54例)所用3种方法:①下颌骨部分或全部缺损,采用血管化或非血管化骨移植延期(同期)牙种植,完成种植义齿修复;②一侧上颌骨缺损,健侧缺牙或无牙,采用健侧牙种植完成赝复修复;③双侧上颌骨缺损,采用颧骨种植,通过磁附着固位完成义颌赝复修复.结果64例所用3种方法均达到恢复外形与功能理想的效果.观察时间长12年,短5年,其中6枚种植体未实现骨结合.上颌缺损修复的种植体存留率为97.5 %;下颌骨缺损血管化植骨种植为97.1%;非血管化植骨种植为97.7%.结论上颌骨缺损采用种植赝复修复可行,若颧骨较薄,应先植骨;植骨-种植是下颌骨功能重建理想的方法.血管化植骨种植适用于植骨床血运差的患者;非血管化植骨种植方法简单,易于推广.因缩短了移植骨的离体时间,骨细胞仍有活性,与血管化骨移植效果一致.证实了自体骨植骨块兼有骨形成、骨诱导及骨传导作用.

无牙颌患者自然头位的研究

目的了解无牙颌患者相对于有牙个体自然头位(natural head posture,NHP)的差异,以及义齿戴入即刻和戴用后短期NHP的变化.方法分别选取20例无牙颌患者和22名有牙对照组个体,采用视线标记的头颅定位侧位片记录NHP.无牙颌患者拍摄义齿戴前、义齿戴入即刻和戴用3个月后3张X线片.有牙对照组拍摄一张X线片.选取6项角度测量值评价NHP,3项角度测量值和2项线距测量值评价下颌骨的位置.比较无牙颌患者义齿戴前与有牙对照组上述指标的差异,以及义齿戴入即刻和戴用3个月后的变化.结果无牙颌患者与有牙对照组相比,颅颈角增大、颈椎曲度减小,但头位测量值的差异无显著性.下颌骨垂直向明显上移(P<0.05).义齿戴入即刻,颈椎曲度显著增加(P<0.05).义齿戴用3个月后,颅颈角显著减小(P<0.05).结论无牙颌患者在义齿戴入即刻和戴入后短期,自然头位出现一定程度的改变;与不戴义齿的头位相比较,调整至一个新的更接近正常的平衡状态.

舌体鳞癌cN0患者颈淋巴转移相关因素分析及其处理

目的探讨舌体鳞癌cN0患者的颈部处理.方法舌体鳞状细胞癌共185例,男性102例,女性83例,年龄28～88岁.所有病例均行原发灶手术切除+颈淋巴清扫术.原发灶及颈淋巴结全部术后病理证实.结果Ⅰ～Ⅱ期和Ⅲ～Ⅳ期患者颈淋巴结转移率分别为16.66%和38.05%;148例cN0患者鳞癌Ⅰ级和Ⅱ级颈淋巴结转移率分别为17.42%和37.50%;原发灶侵及粘膜下层、肌层和神经者,其颈淋巴结转移率分别为9.00%、31.37%和55.55%.185例患者5年生存率为72.43%,其中颈淋巴有转移和无转移者5年生存率分别为44.44%、83.96%.148例cN0患者颈淋巴结阳性者29例,其转移区:下颌下+颏下(Ⅰ)占22.64%,颈深上(Ⅱ)占35.84%,颈深中(Ⅲ)占26.40%,颈深下(Ⅳ)为15.09%,颈后(Ⅴ)为0%.选择性颈淋巴清扫术5年生存率为85.13%,治疗性为21.62%(χ2=29.73,P<0.01).选择性颈淋巴清扫术病例中,有淋巴结转移5年生存率为68.96%,未见淋巴结转移者5年生存率为89.07%.选择性颈淋巴清扫术有淋巴结转移5年生存率为68.96%,而治疗性有淋巴结转移5年生存率仅20.0%(P<0.01).结论①cN0患者除早期(Ⅰ期)可行颈部观察,Ⅱ～Ⅳ期须行选择性颈淋巴清扫术;②cN0颈淋巴清扫术式,T2肩胛舌骨肌上清扫(Ⅰ～Ⅲ清扫),T3～4功能性颈清术;③临床分期、病理分级及肿瘤浸润深度与颈淋巴结转移有相关性(P<0.05);可以作为颈淋巴结转移的预测指标.

伴放线放线杆菌菌落生长形态变化的观察

目的观察伴放线放线杆菌(Actinobacillus actinomycetemcomitans, Aa)从粗糙型到光滑型的转变过程,识别Aa在实验室传代过程中出现的不同生长形态.方法从牙周炎患者龈下菌斑中分离出的原代菌株8株,应用固体及液体培养基连续传代,液体培养每次传代的同时接种固体培养基观察相应的菌落形态.结果液体培养获得3株光滑型转变株.菌落的变化从粘附的小菌落到沉淀的大菌落到完全的均匀生长,转化过程大约需要7～8代.在这一过程中相应传至固体培养基上生长的Aa从粘附的半透明的小菌落变大、不透明并失去粘附的特性,又随着边缘的扩散变为扁平,透明度也增加;与此同时内部的星形结构逐渐变简单、变小,后消失.固体培养未获得典型的转变株.结论Aa从粗糙型到光滑型的转变是一个菌落湿度逐渐增加,体积逐渐增大,并逐渐失去内部结构的过程.这一过程至少可以看到半透明突起的粗糙型、不透明突起的光滑型和近乎透明的扁平光滑型3种菌落形态.

牙龈卟啉单胞菌prtH基因克隆及其多态性的研究

目的建立牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,P.g)prtH全基因序列的克隆株,分析5株不同P.g菌株中prtH基因多态性.方法利用PCR技术获得prtH全基因序列,克隆至载体pGEM-T;设计3 对引物,用PCR的方法扩增prtH基因的不同区域;以生物素标记prtH基因序列为特异性探针,用斑点杂交和Southern印迹杂交进一步分析prtH基因的多态性.结果酶切分析和DNA测序证实重组质粒pGEM-T-prtH的插入片段为prtH基因序列;核酸分子杂交显示菌株W 381和ATCC 33277杂交类型一致,菌株ATCC 49417和菌株14-3-2呈现各自不同的杂交条带,而菌株47A-1中未检测到prtH基因.结论不同P.g菌株中prtH基因序列存在差别,这种基因多态性提示不同P.g菌株毒力大小可能存在差异.所建立的PCR扩增技术可以敏感地检测prtH 基因的存在.

用Bolton指数指导矫治下颌个别牙先天缺失症

目的探索用Bolton指数指导矫治下颌个别牙先天缺失症.方法临床选择26例(男10,女16)安氏Ⅰ类和Ⅱ类错患者,以Bolton指数前牙比公式为依据,实施方丝弓矫治技术结合邻面去釉、下颌个别牙义齿修复及拔牙矫治等方法进行治疗.结果根据不同的适应证,分别采用上述4种不同的矫治方法,使后的矫治结果Bolton指数前牙比均达到正常值,临床矫治效果满意.结论依据Bolton指数能很好地指导矫治个别下切牙缺失症的患者.

正角化牙源性囊肿的临床病理及免疫组化研究

目的探讨一组正角化牙源性囊肿(orthokeratinized odontogenic cyst, OOC)的临床病理及免疫组化特点.方法以OOC的名称报告20例,观察其组织学和免疫组化特点,并与牙源性角化囊肿(odontogenic keratocyst, OKC)病变进行比较.结果本组病例约占同期所有OKC的9.9%(20/202),其中男性14例,女性6例,就诊平均年龄39.1岁;随访资料显示:15例患者行囊肿刮治后无复发;组织学和免疫组化比较发现:OOC和OKC之间差异有显著性,OOC上皮不表现OKC上皮的形态分化特点,细胞增殖活性较低.结论OOC可能代表一组有别于牙源性角化囊肿的颌骨病损.

成釉细胞瘤临床病理类型与预后

我们将342例经病理证实的成釉细胞瘤分为一般型(classic type)和低复发型(lower recurrence type)进行回顾性研究,旨在为临床治疗及预后评估提供参考.

口腔鳞癌中血管内皮生长因子表达和微血管密度与预后关系的研究

为研究口腔癌中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达和微血管密度(microvessel density, MVD)及其与临床病理因素及预后的关系,我们对该肿瘤中VEGF表达和MVD定量进行了研究.

局部应用骨形成蛋白与透明质酸钠复合物对放疗后纯钛种植体骨整合作用的影响

1.实验目的:①观察放疗对狗下颌种植体周围骨形成蛋白(bone morphogenic protein, BMP)分布与活性的影响;②观察局部应用BMP与透明质酸钠复合物对放疗后纯钛种植体骨整合作用的影响.

在大肠杆菌中表达和提取纯化变形链球菌GTF-Ⅰ

葡糖基转移酶是变形链球菌(S. mutans)的重要致龋毒力因子,其中gtfB基因编码的GTF-Ⅰ能够催化水不溶性葡聚糖的合成,介导变链菌与牙面的蔗糖依赖性粘附,在龋病的发生和发展中起重要作用.目前我们已研制了针对变链菌的表面蛋白PAc和GTF的融合防龋DNA疫苗[1],为了进一步鉴定和加强其免疫效果,我们以金属螯合亲和层析法从大肠杆菌中表达、提取和纯化了重组葡糖基转移酶GTF-Ⅰ.

全国第六届口腔病理学术会议在青岛召开

全国第七次口腔正畸学术会议征文

全国第四届口腔修复学学术会议介绍

中华口腔医学网成立编委会

全国第五届儿童口腔医学学术会议征文

我国口腔颌面肿瘤的诊治和研究现状

新世纪第一年时中华口腔医学会口腔颌面外科专业委员会的口腔颌面肿瘤学组在成都正式成立,并同时召开了学术研讨会.这是继世纪之交在上海举行的"2000年国际暨全国第六届头颈肿瘤外科学术会议"后对我国口腔颌面肿瘤的诊治和研究现状的又一次检阅和学术交流.连续两年的学术交流均显示我国口腔颌面肿瘤的诊治及研究水平均处于高水平持续发展之中;它主要反映在以下几方面:

全国第一届口腔颌面肿瘤学术会议纪要

2001年10月21～24日,由中华口腔医学会口腔颌面外科专业委员会主办、中国抗癌协会头颈肿瘤外科专业委员会协办、四川大学华西口腔医学院承办的全国第一届口腔颌面部肿瘤学术会议在成都召开.来自全国各地的专家、代表254人参加了本次大会.开幕式上宣布了中华腔医学会口腔颌面外科专业委员会口腔颌面肿瘤学组成立,四川大学华西口腔医学院温玉明教授当选为该学组组长.

口腔癌的综合治疗

口腔癌是头颈部常见的恶性肿瘤,病理分级多属中、高分化癌,区域性淋巴转移率高,而全身远位转移率较低,对放、化疗敏感性差,原发灶的失控是导致患者死亡的主要原因,各期平均5年生存率在50%～60%之间[1,2],故探讨有效的治疗方法是临床面临的重大课题.近年来恶性肿瘤综合治疗的相关研究和所取得的临床效果,为口腔癌治疗方法的确定提供了重要依据.

口腔癌癌周淋巴管变化与颈淋巴道转移

肿瘤转移的发生和程度受癌细胞本身的生物学特性和宿主等方面因素的影响和制约.关于癌细胞的生物学特性和宿主方面的某些因素已有不同程度的研究,有关淋巴道转移的过程和机制仍不十分清楚.目前已公认肿瘤原发灶内不含淋巴管,肿瘤细胞是通过侵入癌周的淋巴管而产生淋巴道转移的,癌周淋巴管的结构、形态、分布特点是影响恶性肿瘤淋巴道转移的重要因素.因此,我们复习了大量国内外文献并结合近些年的研究成果[1-12],就口腔癌癌周淋巴管变化特点及其与颈淋巴道转移的关系进行深入探讨和阐述.

著名口腔医学专家朱宣智教授逝世

新型超声工作尖与牙周病龈下治疗

牙本质磷蛋白诱导矿化作用的研究

目的探讨牙本质磷蛋白(dentin phosphoprotein,DPP)诱导矿化的作用.方法在体外矿化系统中利用人DPP与EAH-Sepharose 4B凝胶颗粒结合进行诱导矿化实验,通过扫描电镜观察生成物的形貌变化,X线衍射及等离子发射光谱分析生成物的组分和结构.结果结合有人DPP的凝胶颗粒表面有矿化物形成,该矿化物钙磷比约为1.33,其X线衍射结果与羟基磷灰石更为相似.结论人DPP与一定的支持物紧密结合后具有诱导矿化的作用.

微量元素矿化液再矿化效果的体内研究

目的选择体外实验证实具有较强的促进釉质早期龋再矿化作用的微量元素矿化液,评价其在体内的脱矿及再矿化效果.方法制备含2 mm×2 mm正常和人工龋釉质块的可摘口内装置,将其置于受试者口内,采用激光共聚焦技术观察罗丹明B荧光染料渗透进入多孔釉质荧光量的多少,量化受试者在使用不同矿化液前后的再矿化效果, 用ΔZa、ΔZb及ΔZ(Zb与ΔZa的差值)来表示,具体包括测釉质块荧光量的面积(Area of the fluorescent lesion,A)、总的荧光量(total fluorescence,TF)及病损的平均荧光量(average fluorescent,AF)3个共聚焦参数.结果受试者口内装置经含氟矿化液和微量元素矿化液处理后脱矿釉质块的共聚焦参数ΔZa与处理前的ΔZb相比差异有显著性(P<0.05),尤以微量元素组明显.其激光共聚焦结果为,ΔZ:A=(-50.4±8.1)μm2,TF=-27.8±3.8,AF=-91.5±8.9,说明微量元素矿化液在体内仍能获得比单纯含氟矿化液更好的促进早期龋再矿化的效果.结论微量元素矿化液有完善现有含氟矿化液防治早期龋的潜力,为临床的进一步应用奠定基础,为脱矿和再矿化研究提供了新方法.

超高分子量聚DL乳酸对成骨细胞活性及新骨生成的影响

目的研究超高分子量聚DL乳酸材料对成骨细胞活性及其在骨创愈合过程中对新骨生成的影响.方法①体外实验:在超高分子量聚DL乳酸材料浸提液和标准培养基中培养乳鼠成骨细胞, 采用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法检测成骨细胞的活性和功能.②体内实验:在犬下颌骨体部制造人工骨折模型,用聚DL乳酸制作的夹板螺钉固定骨折处,在扫描电子显微镜下观察骨折线处的新骨沉积情况.结果①超高分子量聚 DL 乳酸对成骨细胞在 3 d 时毒性为 3% ,在1 周、2 周时均为 0 ;实验组和对照组的A值在 3 d 、1 周、3 周时差异均无显著性.②术后3 个月时,电镜下可见聚 DL 乳酸材料与骨组织之间有大量新骨形成.结论超高分子量聚 DL 乳酸对成骨细胞的活性及新骨生成均无影响,可作为体内植入物及骨组织工程的载体材料.

人骨髓间充质干细胞分离培养及向软骨细胞定向分化的实验研究

目的探讨人骨髓间充质干细胞体外分离培养和向软骨细胞定向分化的条件,为髁突软骨组织工程提供种子细胞.方法采用 Percoll 分离液,根据细胞密度梯度原理,从健康人骨髓组织中分离骨髓间充质干细胞,对所获得的细胞进行体外培养和表面标志的流式细胞仪分析.对经过鉴定证实的骨髓间充质干细胞用含胰岛素、转铁蛋白、丙酮酸、地塞米松和 TGF-β的诱导培养基处理7～14 d.对诱导细胞进行蕃红花 O-亮绿染色和Ⅱ型胶原染色,鉴定诱导后细胞的软骨细胞表型.结果培养的人骨髓间充质干细胞均一表达 CD29、CD44,而 CD34、CD45 和 HLA-DR 呈阴性.细胞经过诱导液作用 14 d 后,蕃红花O-亮绿染色和Ⅱ型胶原染色阳性.结论采用比重为1073 g/L 的 Percoll能分离获得高纯度的人骨髓间充质干细胞 (纯度大于95%).该细胞经诱导液作用,可定向分化为软骨细胞.

牛成牙骨质细胞在体内形成牙骨质样组织的初步研究

目的培养成牙骨质细胞(cementoblasts,CBs),观察以CBs自身作为组织工程支架在裸鼠体内形成牙骨质的可行性. 方法在矿化培养液中培养新生牛的成牙骨质细胞,使其形成多层CBs作为载体(CBs-made carrier)与CBs混合,植入裸鼠皮下.以CBs与胶原膜载体(collagen carrier)复合体作为对照.7周后取材并做HE、von Kossa、茜素红及牙骨质附着蛋白单克隆抗体免疫组化染色. 结果CBs在体内可形成牙骨质样矿化组织,中心矿化程度较高,四周有尚未钙化的类牙骨质及CBs包绕,并有牙骨质细胞埋入矿化组织.以CBs自身作为载体所形成的牙骨质较以胶原膜作为载体所形成的牙骨质样组织多.结论本组分离培养的CBs在体内可形成牙骨质样矿化组织;以多层细胞自身作为载体是一种较理想的生物支架材料.

发扬传统 面向未来