中华检验医学杂志
Chinese Journal of Laboratory Medicine 중화검험의학잡지
- 主管单位： 中华医学检验杂志
- 主办单位： 中国科学技术协会
- 影响因子： 1.40
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 11-4452/R
- 国内刊号： 韩锟
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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双平台流式细胞术检测外周血淋巴细胞亚群生物学变异的研究
目的 探讨双平台流式细胞术(FCM)检测正常人群淋巴细胞亚群八项指标绝对计数的生物学变异.方法 2013年9月在北京协和医院募集20名健康志愿者,于研究的第1天、第3天及第5天的上午8:00、中午12:00及下午16:00采集志愿者静脉血,进行双平台流式细胞术淋巴细胞亚群八项指标绝对计数的检测.采用标准化的分析前处理流程,使用规范校准的血液分析仪和流式细胞仪进行检测,研究期间均使用同一批号试剂进行样本的前处理和检测.采用SPSS 13.0软件中的巢式方差分析计算八项指标百分含量和绝对计数的个体内变异、个体间变异,采用Excel 2003计算分析变异、个体指数和参考变化值.各指标的日内和日间差异采用One-Way ANOVA检验及方差分析进行比较,两组间的比较采用独立样本t检验.结果 T细胞(CD3+)、辅助性T细胞(CD3+ CD4+CD8-)、抑制性T细胞(CD3+ CD4-CD8+)、B细胞(CD3-CD19+)百分含量的个体内变异和个体间变异与文献报道相近,各指标的个体内变异分别为0.03、0.06、0.05、0.14,个体间变异分别为0.12、0.16、0.23、0.31.以上4项指标百分含量的个体指数和95％的参考变化值与文献差异较大,个体指数分别为0.26、0.40、0.22、0.44,95％的参考变化值分别为8.77、16.86、14.93、39.69.所研究的淋巴细胞亚群八项指标绝对计数的个体内变异、个体间变异及分析变异均比其相应的百分含量变异大.含量低的三类细胞亚群(CD3+ CD4-CD8-、CD3+ CD4+ CD8+、CD3+ CD16+ CD56+)的个体内变异、个体间变异及分析变异相对较大,其中CD3+ CD4-CD8-的个体内变异、个体间变异及分析变异分别为0.12、0.49、0.16,CD3+ CD4+ CD8+的分别为0.40、0.93、0.55,CD3+ CD16+ CD56+的分别为0.28、1.11、0.16.结论 通过研究淋巴细胞亚群绝对计数的个体内变异、个体间变异及分析变异可以计算个体指数和参考变化值,从而能够确定相应指标参考区间的实用性和判断连续检测结果之间的差异是否有显著性.
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不同流式细胞分析仪检测淋巴细胞亚群的比较研究
目的 通过对淋巴细胞亚群百分比及绝对计数的检测,对比3种流式细胞仪(BriCyteE6、BD FACSCanto Ⅱ、Beckman Coulter FC 500)在淋巴细胞亚群检测中的一致性和精密度.方法 按照方法学对比的要求,将BriCyte E6与2种临床常用的流式细胞仪进行比对.2015年7月连续5d随机收集上海交通大学医学院附属新华医院检验科抽取的新鲜肝素抗凝外周全血标本73份,其中来自男性40例,女性33例,4h内荧光抗体染色分析各淋巴细胞亚群的百分比及绝对计数值.结果 在进行淋巴细胞亚群百分比(％)检测时,3种仪器之间均具有较好的一致性(R2＞0.95,R2值0.969 5～0.992 4);在进行淋巴细胞亚群绝对计数(#)检测时,3种仪器之间亦均具有较好的一致性(R2＞0.95,R2值0.969 1 ～0.993 3);评估精密度时发现,在CD8％、T#、CD4+T#和CD8+T#检测时,BriCyte E6的CV％更小,与BD FACSCanto Ⅱ和Beckman Coulter FC 500进行比较,差异有统计学意义(Friedman统计值分别为16.720、11.840、15.760、15.430,相应的P值分别为0.0002、0.027、0.0004、0.000 4),而在检测T％、CD4％、NK％、B％、NK#、B#时,在3种仪器间CV％差异无统计学意义(Friedman统计值分别为4.242、3.916、0.852、2.595、1.835、0.578,P值分别为0.119 9、0.141 2、0.653 2、0.273 3、0.399 6、0.749 0),精密度具有一致性.结论3种仪器在淋巴细胞亚群检测时具有较好的一致性,BriCyteE6流式细胞仪或许可以作为现有流式细胞仪的替代或补充.
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全国常规化学室间质评不合格项目原因调查分析
目的 调查分析全国常规化学室间质量评价不合格项目的原因,为针对性采取纠正和预防措施提供依据.方法 通过室间质量评价网络系统,针对2013年全国常规化学室间质量评价第一轮活动中的不合格项目,对其原因进行调查.并从笔误、方法问题、设备问题、技术问题、质评样本问题、评价方法问题、无法解释共7个方面进行分析.结果 按要求上报项目不合格原因的实验室比例为33.3％～ 80.0％.主要不合格原因分别为:笔误6.5％(小数点位置错误70.1％、单位不正确20.8％、仪器或方法编码不正确8.1％);方法问题45.1％(校准54.2％、试剂38.0％、室间质评物7.8％);设备问题28.5％(未定期维护98.0％、管路2.0％);技术问题8.2％(未遵循操作规程80.4％、质评物复溶错误10.6％、在设备上放置的顺序不正确9.0％);无法解释11.7％(系统误差68.2％、随机误差31.8％);无质评样本及评价方法的问题.对钠、氯、磷、直接胆红素、总铁结合力、铜、锌7个不合格项目分析系统进行分组统计,多数项目配套系统不合格的比例低于非配套系统.结论 实验室应进一步加强质量控制工作,使用高质量的试剂,改进操作技术,增强责任心,以保证检测结果的可靠性.
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重组人中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白线性多表位抗原肽的构建及鉴定
目的 探讨应用生物信息学技术对人中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)分子进行B细胞表位的预测的可行性,筛选出具有诊断价值的线性表位分子,构建并表达重组线性多表位抗原肽并进行免疫原性鉴定.方法 2015年7月南京医科大学第二附属医院检验科查询GenBank中NGAL氨基酸序列,利用Predicted、ABCpred、BepiPred、BcePred及Lasergene软件进行B细胞线性表位预测,构建、原核表达预测出的可能表位,通过免疫印迹实验筛选出可与现有NGAL多克隆抗体反应的单表位抗原,后将获得的单表位抗原构建、表达出多表位抗原肽,并对其进行免疫反应性鉴定.结果 综合预测得出了8个可能的表位,通过构建pET32a-N1～N8原核表达载体,经表达、纯化、免疫印迹筛选,获得了3条具有较强抗原性的表位,随后构建出的多表位原核表达载体pET22b-Ngal_MEP1,获得了可溶性表达的融合蛋白,通过Ni2+亲和柱纯化,成功纯化出了融合蛋白.免疫印迹试验表明,该重组融合蛋白具有较强抗原性.结论构建的NGAL多表位线性抗原肽在原核表达系统中能获得高效可溶性表达,并具有较强免疫反应性,可用于后续抗体制备.
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纤溶酶原Ala601Thr突变导致的遗传性异常纤溶酶原血症表型与基因型分析
目的 对1个遗传性异常纤溶酶原血症家系进行表型及基因突变检测,寻找其致病基因.方法 2015年5月10日温州医科大学附属第一医院神经内科门诊,收治1例因“半月前无明显诱因出现头痛,两侧颞部胀痛,伴呕吐,复视,睡眠差”的25岁男性患者,入院诊断“上矢状窦静脉血栓形成”.采集先证者及其家系成员(共3代14人)外周静脉血标本,在全自动血凝仪上检测其凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TTr)、纤维蛋白原(FIB)、D-二聚体(D-D)及纤维蛋白原降解产物(FDP);采用发色底物法和免疫火箭电泳法分别检测纤溶酶原活性(PLG:A)和纤溶酶原抗原(PLG:Ag).PCR扩增纤溶酶原(PLG)基因19个外显子及其5'和3'侧翼区.用DNA直接测序法分析扩增产物,并通过反向测序验证突变位点.采用生物信息学预测软件(SIFI,PolyPhen-2和MutationTaster)分析突变对蛋白质功能的影响.采用Swiss-PdbViewer软件对突变位点进行模型分析.结果 先证者及6位家庭成员PLG:A降低约50％,PLG:Ag正常.先证者及其奶奶、父亲的D-D和FDP值轻度升高.DNA测序结果表明,先证者及这6位成员PLG基因15号外显子g.38829G＞A杂合错义突变,导致p.Ala601Thr.生物信息学软件预测结果表明此突变可影响蛋白质的功能.蛋白质模型分析显示突变改变了氨基酸之间的疏水作用力和氢键,从而影响了蛋白质的稳定性.且所有家系成员5'非翻译区均存在g.2501C＞A杂合SNP.结论 在该遗传性异常纤溶酶原血症家系中发现的PLG基因p.Ala601Thr杂合突变与纤溶酶原活性水平降低有关.异常纤溶酶原血症及该突变位点均为国内首次报道.
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流式细胞术检测骨髓增生异常综合征免疫表型分析及临床应用前景
骨髓增生异常综合征(MDS)是一组复杂的造血干细胞克隆性疾病,当无典型形态、细胞遗传学证据时,传统MDS的诊断方法将遇到极大的挑战.流式细胞术(FCM)在检测髓系异常造血的高灵敏性使其在鉴别诊断各种原因引起的血细胞减少方面具有独特的应用价值.但由于MDS分型具有异质性,尚未发现MDS特异性的抗原标志或标志组合,这使得流式细胞术MDS免疫分型尚存在一定的难度.本文将结合国内外共识着重对如何采用流式细胞术进行MDS免疫表型分析以及流式细胞术在MDS诊断、预后判断、治疗监测等方面的临床应用前景进行阐述.
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我国临床流式细胞术的应用现状和展望
目前流式细胞术(FCM)是先进的细胞定量分析技术之一,FCM在医学及其他科学领域有着广泛和深入的应用,涵盖了从基础研究到临床诊断的多个方面.随着科学技术的快速发展,近年来我国FCM的临床研究与应用取得了显著进展.
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中性粒细胞CD64在感染性疾病诊治中的应用
严重感染致死率高,其早期诊断至关重要.感染性疾病的传统诊断指标,包括降钙素原、白细胞计数、CRP等,虽然这些指标有一定的敏感性和特异性,但仍不能实现感染的早期诊断.近来,中性粒细胞CD64因为其在细菌感染早期诊断方面较高的敏感性和特异性而受到广泛关注.中性粒细胞CD64表达的流式细胞检测可用于细菌感染所引起的感染性疾病的早期诊断,如呼吸道感染、败血症、新生儿重症感染、烧伤和术后感染等.若将中性粒细胞CD64联合其他反应炎症的指标联合检测,则可以进一步提高感染性疾病诊断的敏感性和特异性.流式细胞术检测中性粒细胞CD64将在感染性疾病诊断、病情监测、预后判断、疗效评估等多个方面发挥重要作用.
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流式细胞术在肿瘤诊断中的应用
肿瘤疾病的早期往往缺乏客观明确的诊断指标,给治疗工作带来很大困扰.如何在癌变的早期发现一些有价值的标志物或者特征性变化,是医学专家们亟需解决的重点难题.随着流式细胞术(FCM)的不断进步,FCM在肿瘤的癌前病变筛查、早期癌变的检出、化疗指导以及预后评估等各个方面发挥着越来越重要的作用.在个体化医疗及精准医疗的时代背景下,FCM在肿瘤标志物的检测、肿瘤干细胞(CSCs)分离筛选、循环肿瘤细胞(CTCs)的分离鉴定等方面的应用尤其值得期待.
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流式细胞术在外周血白细胞分类计数中的应用
人工显微镜分类法作为白细胞分类计数的传统方法,面临流式细胞术分类法的挑战.流式细胞术分类计数白细胞是以细胞表面的免疫标志为基础,对白细胞进行分类计数.同人工显微镜分类法相比,该法灵敏度、特异性高,重复性好且更加客观.多项研究显示流式细胞术分类法与人工显微镜法的相关很好,且对原始细胞和幼稚细胞有较高的诊断效率.同时流式细胞术分类法能够提供更多的白细胞分类信息如淋巴细胞亚群、促炎性单核细胞,在多种疾病如急性白血病原始细胞监测、成熟B淋巴细胞增殖性疾病以及感染性疾病中均有一定应用价值.随着流式细胞术分类法的发展和完善,很可能成为白细胞分类计数的候选参考方法并逐渐应用于日常工作中.
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CD154基因单核苷酸多态性及其血清水平与缺血性脑卒中的相关性研究
缺血性脑卒中(ischemic stroke,IS)是多种因素综合作用所致的复杂疾病,其病因和发病机制至今尚未完全阐明.近年来,IS相关基因的识别和定位及血液生物标志成为研究热点.CD154是肿瘤坏死因子超家族的成员,主要表达于活化的CI4+T细胞和血小板表面,炎症条件下,在活化的单核细胞、巨噬细胞、NK细胞和嗜碱性粒细胞等细胞表面均有表达[1].CD154通过与其受体CD40结合广泛参与机体的免疫和炎症反应[1],与急性冠脉综合征的发病[2]、血管内血栓形成[3]及动脉粥样硬化斑块的形成、发展和破裂的整个过程密切相关[4].CD154基因多态性及其血清水平是否与IS发病相关,目前国内外尚未见文献报道.本研究采用单碱基延伸PCR技术和ELISA法研究CD154基因rs1126535 T/C、rs7050168 A/G、rs3092921 G/A、rs3092923 A/G、rs3092929A/C和rs3092933G/A单核苷酸多态性及其血清水平与IS发病的关系,为阐明IS的病因和发病机制提供实验依据.
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2011至2015年《中华检验医学杂志》刊载的基金资助论文分析
应用文献计量学方法对《中华检验医学杂志》2011至2015年60期刊载的基金资助论文包括基金论文比(率)、基金来源、基金数量、基金论文作者合著率与合作度等文献计量指标进行统计分析,评价该刊基金论文的在医学领域的整体水平.
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涂片检查在临床微生物检验中的应用意义
涂片检查是病原学诊断的经典方法,也是直接、简便、快速的鉴定方法;认真、规范的标本直接涂片检查不仅能够有效判断标本质量、菌群比例,还可以快速发现可疑病原菌,为临床有效诊治提供重要信息;此外,形态学检查还可以成为现代化先进设备的验证、校准及有效补充;微生物室工作人员应重视涂片检查的重要价值.
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流式细胞术分析外周血淋巴细胞亚群在儿科的临床应用共识
使用流式细胞术(flow cytometry,FCM)进行淋巴细胞亚群分析已广泛应用于临床,在免疫功能评估上起到不可或缺的作用.由于FCM淋巴细胞亚群分析涉及多个参数,且各参数间关系复杂,如何有效解读、判断分析结果,并指导临床疾病诊断、治疗,目前还缺乏统一的指导原则.为了科学、合理地将FCM淋巴细胞亚群分析应用于临床疾病的诊断、疗效监测、预后评估等环节,中国医师协会儿科医师分会风湿免疫专委会、中国医师协会儿科医师分会过敏专委会及中华医学会儿科分会免疫学组共同制定FCM分析淋巴细胞亚群临床应用建议.
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精准医疗大背景下iPOCT发展趋势
“精准医疗”作为新型的医学概念与医疗模式,其核心是个性化,更重视“患者”的深度特征和“用药”的高度精准性;是在对患者和药物深度认识的基础上完成的更有针对性的个体化的诊断和治疗.以“精准化、自动化、云端化”为主要特征的“智慧即时检测”(Intelligent Point of Care Testing,iPOCT)新概念正是在“精准医疗”的大背景下,与大检验医学新理念相结合,对POCT个体化发展和应用的诠释.2014年9月,科技部成立了“即时检测与健康监测物联网产业创新联盟”,在“十三五”科研项目讨论会中诸位专家达成共识,一致认为2015年即时检测产业迈入了iPOCT时代.
关键词：
| 年 | 期数 |
| 2019 | 02 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2001 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2000 | 01 02 03 04 05 06 |
| 1999 | 01 02 03 04 05 06 |
| 1998 | 01 02 03 04 05 06 |
