中华检验医学杂志
Chinese Journal of Laboratory Medicine 중화검험의학잡지
- 主管单位： 中华医学检验杂志
- 主办单位： 中国科学技术协会
- 影响因子： 1.40
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 11-4452/R
- 国内刊号： 韩锟
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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获得性血友病A一例
患者男,70岁,无明显诱因出现皮肤瘀斑1个月余,双侧膝关节肿痛1周,于2010年12月4日入住河北省衡水市哈励逊国际和平医院,既往无出血性疾病史及家族史.查体:体温36.5℃,脉搏74次/分,血压142/85 mm Hg(1 mmHg=0.133 kPa),四肢可见片状瘀斑,腹部散在出血点,压之不褪色.膝关节肿胀,皮温略高,皮色无著变,活动时疼痛,双下肢指凹性水肿.腹部、泌尿系B超及胸透检查均未见异常.
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唐氏综合征产前筛查模式的发展
21世纪初以来,国外通过完成一系列的多中心、大样本、前瞻性的研究来评价中孕期及早孕期各种不同筛查模式,为临床医生及孕妇选择为适宜的产前筛查模式提供确实的依据.其中为重要的临床验证研究包括SURUSS( theSerum,Urine and Ultrasound Screening Study)[1-2]、FASTER ( the First and Second Trimester Evaluation of Risks Trial)[3]以及BUN (Serum Biochemistry and Fetal Nuchal Translucency Screening)[4].SURUSS研究以寻找为有效、安全和效能比高的唐氏综合征产前筛查模式为目标,在25个筛查中心开展前瞻性研究,终入组47 053例筛查病例,其中包括101例唐氏综合征患儿.
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第四届东北三省临床检验学术会议圆满召开
由吉林省医学会、辽宁省医学会、黑龙江省医学会联合举办,吉林省医学会检验分会承办,吉林大学第一医院检验科协办的第四届东北三省临床检验学术会议于2011年9月7-9日在吉林省吉林市隆重召开.开幕式由吉林省医学会检验分会主任委员、吉林大学第一医院检验科主任续薇教授主持.中华医学会检验分会主任委员尚红教授、吉林市人民政府陈波副秘书长、吉林省卫生厅侯明山副厅长、吉林省医学会琴钢秘书长、吉林市卫生局邵明宇副局长出席了开幕式.
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美罗培南联合舒巴坦对鲍曼不动杆菌外抗菌活性的研究
目的 探讨美罗培南联合舒巴坦对美罗培南敏感和耐药鲍曼不动杆菌体外抗菌活性的作用及其联合用药的佳比例.方法 用联合药敏棋盘法对美罗培南敏感和耐药鲍曼不动杆菌各40株进行美罗培南与舒巴坦体外联合药物敏感性测定,通过计算FIC值确定美罗培南与舒巴坦联合效应；并进一步测定不同配比的美罗培南舒巴坦联合制剂对鲍曼不动杆菌的协同作用.结果 用联合药敏棋盘法检测美罗培南敏感菌株的协同作用为25％ (10/40),部分协同为67.5％ (28/40),相加作用为7.5％(3/40),无关与拮抗作用均为0；而美罗培南耐药菌株的协同作用为27.5％(11/40),部分协同为40％ (16/40),相加作用为25％ (10/40),无关为7.5％(3/40),无菌株存在拮抗作用；将美罗培南与舒巴坦以4∶1、2∶1、1∶1、1∶2配比后,测量联合作用具协同效应的11株美罗培南耐药菌株MIC值,其MIC90分别为64∶16、64∶32、32∶32、32∶64 μg/ml.结论 美罗培南联合舒巴坦对于鲍曼不动杆菌主要表现为协同和部分协同作用；美罗培南和舒巴坦临床使用比例可能以1∶1合适.
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联合使用抗菌药物对产KPC-2酶肺炎克雷伯菌的影响
目的 探讨联合使用抗菌药物对产KPC-2酶肺炎克雷伯菌的体外抗菌效应,寻找有效的组合方案.方法 收集2008 -2009年分离自浙江大学医学院附属第一医院,宁波李惠利医院、浙江省人民医院、杭州市第三医院、绍兴市第二医院、杭州市第一医院、复旦大学附属华山医院、南京军区总医院等8家医院确证产KPC-2酶的24株肺炎克雷伯菌,采用MLST技术分型,琼脂稀释法测定阿米卡星、米诺环素、亚胺培南、阿莫西林/克拉维酸、头孢他啶、美罗培南、庆大霉素、头孢西丁、头孢吡肟、利福平、多黏菌素B、环丙沙星对24株菌株的MIC值,Etest测定替加环素、哌拉西林/三唑巴坦的MIC值.采用棋盘琼脂稀释法测定头孢吡肟联合阿莫西林/克拉维酸、头孢吡肟联合阿米卡星、环丙沙星联合阿米卡星、环丙沙星联合头孢吡肟、亚胺培南联合阿米卡星、亚胺培南联合环丙沙星、亚胺培南联合多黏菌素B、亚胺培南联合米诺环素、多黏菌素B联合利福平、头孢他啶联合阿莫西林/克拉维酸对菌株的抑菌效果.结果 24株产KPC-2酶肺炎克雷伯菌分为5个ST型,其中ST11型是主要的克隆群(15株).菌株对多黏菌素B、替加环素均敏感,对米诺环素耐药率为4.2％.佳组合方案为头孢吡肟联合阿莫西林/克拉维酸,出现协同作用有19株；其次为亚胺培南联合阿米卡星、头孢他啶联合阿莫西林/克拉维酸,出现协同作用均为13株.结论 产KPC-2酶肺炎克雷伯菌对替加环素、多黏菌素B、米诺环素较敏感,头孢吡肟联合阿莫西林/克拉维酸、亚胺培南联合阿米卡星、头孢他啶联合阿莫西林/克拉维酸在体外以协同作用为主,其疗效值得临床进一步观察.
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应用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱鉴定常见细菌和酵母菌
目的 应用MALDI-TOF MS鉴定临床常见病原菌.方法 复苏560株临床分离株,其中革兰阳性细菌(G+ )260株、革兰阴性细菌(G-)180株、酵母菌60株、肠道致病菌60株.MALDI-TOF MS鉴定结果与Vitek2 Compact全自动微生物鉴定系统比对,结果差异菌株采用16S rDNA测序验证.结果 MALDI-TOF MS与Vitek2 Compact鉴定结果比较,G+细菌鉴定符合率为94.6％( 246/260),G-细菌鉴定符合率为96.7％ (174/180),酵母菌鉴定符合率为95.0％ (57/60),肠道致病菌鉴定符合率为93.3％( 56/60).15株鉴定结果不符的菌株经16S rDNA测序确认,结果与Vitek2Compact和MALDI-TOF MS鉴定符合率分别为26.7％ (4/15)和66.7％( 10/15).结论 MALDI-TOF MS可用于常见病原微生物鉴定,其快速、低成本的特点具有推广价值.
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UF-1000i自动尿液分析仪细菌计数对尿路感染的诊断价值
目前,尿路感染的诊断仍必须根据中段尿的细菌定量培养结果作为临床的诊断依据[1].然而,1份尿标本从采集、培养到获取报告需要3d,且临床怀疑尿路感染送检的尿液标本中,绝大部分都是细菌培养结果阴性,造成治疗的延误和实验室资源的浪费.本研究以细菌定量培养结果为金标准,应用UF1000i自动尿液分析仪对292份清洁中段尿标本进行了细菌定量计数,以期找到一个灵敏度与特异度均佳的细菌值区间,为临床早期诊断尿路感染提供更准确的信息.
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凝血因子ⅨArg327Ile突变蛋白功能缺陷机制研究
目的 研究FⅨArg327Ile (R327I)及Arg327 Ala(R327A)突变蛋白功能,探讨R327I突变导致血友病B的分子发病机制.方法 采用潮霉素筛选稳定表达细胞株,ELISA法筛选高效表达FⅨ重组蛋白细胞株,采用快流速Q琼脂糖凝胶和离子交换两步法分离纯化重组蛋白.ELISA和SDS-PAGE电泳分别检测重组蛋白含量和纯度.FⅦa/TF/Ca2+和FⅪa/Ca2+活化野生型及R327I和R327A突变FⅨ蛋白,用WB法分别检测不同时间内活化生成的FⅨa.野生型及两种突变FⅨa在不同FⅧa浓度下活化激活FX,以此计算野生型及两种突变FⅨa与FⅧa的解离常数；在含或不含FⅧa的条件下,检测野生型及两种突变FⅨa对不同浓度FX的激活能力,以此计算其催化效率.结果 表达分离纯化野生型、R327I和R327A FⅨ重组蛋白总量分别为450、210和64 μg,SDS-PAGE电泳结果显示重组蛋白纯度符合要求.两种突变蛋白均能被FⅦa/TF/Ca2+和FⅪa/Ca2+正常激活.R327I与R327A两种FⅨa突变蛋白与FⅧa的结合力分别为野生型的1/4和1/5.在含FⅧa条件下,R327I和R327I突变FⅨa对FX催化效率分别为野生型的1/6和1/8.而不含FⅧa条件下,催化效率分别为野生型的1/3和1/7.4.结论 R327I和R327A两种突变FⅨa与FⅧa结合异常,R327位点参与FⅧa结合,同时也与底物活化相关.R327I突变与FⅧa结合力降低导致重型血友病B的发生.
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中国结核分枝杆菌寡核苷酸基因分型及其耐药性分析
目的 选用间隔区寡核苷酸分型方法对有中国代表性的菌株进行基因分型,研究不同基因型在中国的流行情况,并分析基因型与耐药表型的关系.方法 中国疾病预防控制中心于2007-2008年,按照流行病学抽样的原则从中国31个省收集涂片阳性的结核病患者的临床分离株4 017株,采用比例法进行药物敏感性实验,选用寡核苷酸分型方法对菌株进行基因分型.基因型检出率差异比较采用x2检验.结果 在4017株结核分枝杆菌临床分离株中,北京基因型菌株包括2 500株(62.2％).北方地区来源菌株北京基因型检出率达76.5％(1 913株),高于南方地区检出率(53.2％,1 330株),差异有统计学意义(x2=219.69,P＜0.05).南方地区T1型检出率达13.3％(332株),高于北方地区检出率(4.3％,108株),差异有统计学意义(x2=88.07,P＜0.05).北京基因型在耐利福平(21.7％)、耐氧氟沙星(4.9％)和MDR( 11.3％)的比例都高于非北京基因型的相应菌株比例18.4％、2.4％和7.4％,差异有统计学意义(x2值分别为22.10、14.42和14.83,P均＜0.05).结论 北京基因型目前仍然是中国主要流行基因型,并且比例呈现出地域差别,北方地区显著高于南方地区.北京基因型菌株与耐利福平、耐氧氟沙星和MDR有关.
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应用基因芯片快速检测临床常见细菌
目的 应用基因芯片对临床常见的8种致病细菌进行检测.方法 选取8种临床常见的致病细菌,包括金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯菌、大肠杆菌、奇异变形杆菌、产气肠杆菌、荧光假单胞菌、宋内志贺菌.以16S rRNA基因为目的基因,白行设计通用引物系列扩增目的片段,针对高变区域设计探针,建立基因芯片检测体系,并对所选细菌进行检测.收集来自武汉大学中南医院的待检标本50份,包括血液6份、痰液32份、粪便9份、纤维支气管镜检测物3份,提取DNA后利用建立的基因芯片进行检测.结果 自行设计的通用引物能很好地扩增目的片段,针对8种细菌进行多批次重复检测,结果显示所选用的探针具有很好的检测效果.对临床50份标本进行检测,其中47份得到准确的检测结果,3份未得到结果的原因为芯片未包含菌种.通过优化检测过程,可在8h内报告检测结果.探针信号随时间的衰减程度观察表明,60d后探针信号虽有衰减,但其衰减程度对检测结果判断无影响.结论 本研究设计的基因芯片检测体系能准确而快速地对临床常见细菌做出检测,为基因芯片技术应用于临床奠定基础.
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PCR-RFLP技术用于脓肿分枝杆菌群鉴定的初步研究
目的 探讨PCR-RFLP分子鉴定技术对脓肿分枝杆菌群鉴定的应用价值.方法 收集2009-2010年在福建省肺科医院、北京市朝阳区疾病预防控制中心、北京解放军总医院抗酸染色阳性菌株46株.根据2004年分枝杆菌检验手册临床检验常分离菌鉴定程序,用DNA直接测序方法为对照,以hsp65(441 bp)和rpoB(380 bp)基因的特异片段为分子标识,采用PCR-RFLP对脓肿分枝杆菌群临床分离菌株进行菌种鉴定.结果 接种L-J、PNB和TCH培养基,鉴定为结核分枝杆菌30株,非结核分枝杆菌16株.其中10株非结核分枝杆菌的培养特性和主要生化反应同脓肿分枝杆菌( ATCC 19977)结果一致.经hsp65 PCR-RFLP鉴定,9株菌株的指纹图谱为235和200 bp( BstEⅡ)/145、70、60、55、50和40 bp(HaeⅢ),1株菌株的指纹图谱为235和200 bp(BstEⅡ)/200、70、60和50 bp(HaeⅢ).经rpoB PCR-RFLP鉴定,10株临床菌株的指纹图谱是105、95和80 bp(MspⅠ)/130、100 bp和90 bp( HaeⅢ).DNA测序分析,9株分离株与脓肿分枝杆菌群脓肿亚种hsp65和rpoB基因序列匹配度均为100％；1株分离株与脓肿分枝杆菌群马赛分枝杆菌亚种hsp65和rpoB基因序列匹配度均为100％.结论 PCR-RFLP是一种快速、有效鉴定脓肿分枝杆菌的方法,且hsp65 PCR-RFLP的鉴定效果优于rpoB PCR-RFLP.
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用2-DE和MALDI-TOF-MS筛选多发性骨髓瘤患者骨髓上清液中标志物
目的 运用2-DE和MALDI-TOF-MS研究MM患者骨髓上清液中差异表达蛋白,以寻找对MM发病机制研究和诊断或鉴别诊断的特异性蛋白质标志物.方法 收集14例MM患者、5例其他血液系统恶性肿瘤患者及5名健康对照者骨髓上清液标本.除去标本中白蛋白和免疫球蛋白G(IgG)后,用2-DE分离3组骨髓上清液标本.用ImageMaster 2D platinum 5.0图像分析软件分析比较3组2-DE凝胶图像,以差异倍数在3倍以上的蛋白点作为候选差异表达蛋白.然后,用MALDI-TOF-MS对重复性较好的候选差异表达蛋白做PMF和二级质谱鉴定.将得到的肽片段质量进行NCBInr 数据库检索,以鉴定出相应的差异表达蛋白.结果 用图像分析软件对3组骨髓上清液2-DE凝胶进行分析比较,从MM组与健康对照组中筛选出47个差异蛋白点,从MM组与疾病对照组中筛选出58个差异蛋白点.从MM组选取41个差异点进行质谱分析并鉴定,发现MM组与其他2组相比,5种高表达蛋白为免疫球蛋白J链、κ轻链、λ轻链、前病毒遗传的Gag多聚蛋白和与半抗原结合的含成熟氧(末)端的催化抗体；3种低表达蛋白为血红蛋白、结合珠蛋白(Hp2)、锌-α2-糖蛋白.这些差异蛋白部分与MM的临床表现相关,部分与MM的发生发展及临床治疗相关.结论 应用2-DE和MALDI-TOF-MS技术从MM患者骨髓上清液标本中筛出与MM疾病相关的8种差异表达蛋白,为进一步研究MM发生发展机制,完善MM诊断、鉴别诊断指标提供了参考依据.
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基于半胱氨酸蛋白酶抑制素C建立的肾小球滤过率预测公式的适用性研究
目的 探讨基于Cys C建立的GFR预测公式在我国CKD患者及其分期中的适用性.方法 选择2007年9月至2009年7月我国不同区域(北京、上海、大连、长沙)4家三级甲等医院就诊的CKD患者176例,其中男90例,女86例.通过双血浆法99mTc-二乙三胺五乙酸(99mTc-DTPA)血浆清除率测定入选对象rGFR.应用PETIA和PENIA两种方法检测血浆Cys C浓度,分别将Larsson公式、Grubb公式、Hoek公式、Filler公式、Rule公式、Stevens公式和Hojs公式的eGFR与rGFR进行一致性、偏差、精确度、准确度和分期正确性比较.结果 176例CKD患者rGFR水平为[40.70 (19.09～86.49)] ml·min-1·(1.73 m2)-1.同一公式采用不同Cys C检测方法计算的eGFR结果差异有统计学意义(P均＜0.01).各公式的eGFR与rGFR存在相关,组内相关系数(ICC)在0.874～0.938之间.所有预测公式应用两种方法检测eGFR的30％准确性均低于60％；CKD各期正确分期百分比不理想,2～4期正确分期百分比低于65％.在CKD1期,由PENIA法建立的预测公式低估GFR水平；在CKD5期,由两种方法建立的公式均高估GFR水平.结论 本研究验证的8个基于Cys C建立的GFR预测公式不是我国CKD人群GFR预测的理想公式,不能直接应用于我国CKD患者,需综合种群及年龄等多方面因素进一步修正基于Cys C的GFR预测公式.
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北京地区儿童末梢血5种微量元素检测结果分析
目的 了解北京地区儿童钙、铜、锌、铁、镁5种微量元素含量的分布和变化规律,为防治儿童缺乏微量元素提供参考依据.方法 采用原子吸收光谱仪对2010-2011年在北京儿童医院体检的7 972名儿童末梢血的钙、铜、锌、铁、镁5种微量元素进行检测.受检儿童均为北京城区常住人口,将其分为5个年龄组:婴儿组(1 ～ 12个月,1506名),幼儿组(1～2岁,2766名),学龄前组(3～6岁,1918名),学龄期组(7～11岁,1576名),青春发育期组(12～18岁,206例),每组按性别又分成男、女2组.对不同年龄段和不同性别间儿童5种微量元素分布情况进行分析.结果 末梢血微量元素钙和铜的含量随年龄增长呈下降趋势,而锌和铁的含量呈上升趋势,血镁的含量较稳定.婴儿期男性和女性组铜的含量分别为(21.90±2.89)和(21.25±2.80) μmol/L,幼儿期分别为(21.76±2.78)和(21.29±2.69) μmol/L,学龄前期分别为(21.32±2.83)和(20.88±2.84) μmol/L,学龄期分别为(20.81±3.02)和(20.36±3.37) μmol/L,不同性别儿童间的差异均有统计学意义(t值分别为4.640、4.475、3.290、2.894,P均＜0.01),而青春发育期分别为(19.53±2.91)和(20.30±2.90) μmol/L,差异无统计学意义(t=-1.796,P＞0.05)；钙、锌、铁、镁含量在相同年龄段不同性别间差异均无统计学意义.5种微量元素中锌、铁的缺乏在不同年龄段都较为常见,总的缺乏率分别为58.9％和19.2％,婴儿期锌和铁的缺乏率分别达67.7％和42.3％.结论 北京地区儿童末梢血钙、铜、镁分布水平趋于合理,铁和锌存在不同情况的缺乏,应加强对铁和锌缺乏的保健指导.
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尘螨变应原SPT与血清sIgE诊断螨过敏症的相关性
目的 分析研究屋尘螨和粉尘螨变应原SPT与血清sIgE水平在诊断IgE介导的螨过敏症中的相关性.方法 按患者就诊顺序选取北京同仁医院、沈阳军区总医院和广州呼吸疾病研究所变态反应科门诊的屋尘螨与粉尘螨血清sIgE为阳性的变应性疾病患者166例,以屋尘螨和粉尘螨变应原皮肤点刺液进行SPT.同时,按照1∶1比例配对选取sIgE为阴性的健康人190名为对照组.比较评价屋尘螨、粉尘螨皮肤点刺液SPT诊断螨过敏症的敏感度和特异度,并用直线相关法分析SPT与sIgE结果间的相关性.结果 变应性疾病患者组中,屋尘螨、粉尘螨SPT检测阳性率分别为98.80％ (164/166)和95.18％ (158/166),健康对照组中,屋尘螨、粉尘螨SPT检测阳性率分别为2.11％ (4/190)和1.58％ (3/190),变应性疾病组与健康对照组的屋尘螨、粉尘螨SPT之间的差异有统计学意义(x2 =285.5、386.3,P均＜0.01).屋尘螨SPT的敏感度为98.80％ (164/166)、特异度为97.89％ (186/190)；粉尘螨SPT的敏感度为95.18％(158/166)、特异度为98.42％(187/190).屋尘螨与粉尘螨SPT皮肤风团直径与血清sIgE的水平呈显著正相关(r分别为0.737、0.708,P均＜0.01).结论 屋尘螨与粉尘螨变应原SPT具有高敏感度和特异度,并与血清sIgE水平呈显著正相关,是一种诊断相关性好、操作简便、结果获取迅速的临床检测方法.
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检测健康体检者中糖抗原19-9的意义
糖抗原19-9( CA19-9)是一种低聚糖肿瘤相关抗原,在以胰腺癌为主的多种肿瘤患者中升高,但CA19-9的合成并非肿瘤细胞所特有,正常组织,如胰腺、胆管、胃、肠、子宫内膜和唾液腺的上皮细胞均可合成和分泌[1-3].除恶性肿瘤外,血清CA19-9升高也见于消化系统的多种良性疾病[4-7].目前,CA19-9作为肿瘤标志被广泛用于健康体检,但国内对其在健康体检者中的临床应用价值缺乏有效评估.
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生物素-链霉亲和素ELISA检测血清CTGF方法的建立及其初步应用
目的 建立生物素-链霉亲和素ELISA检测血清CTGF的方法(简称“系统ELISA血清CTGF法”),初步评估CTGF在诊断慢性肝炎(CHB)患者肝纤维化的临床价值.方法 用生物素化抗CTGF单克隆抗体和多克隆抗体建立生物素-链霉亲和素ELISA方法,测定CHB患者血清CTGF水平.264例CHB患者根据肝穿刺病理诊断结果分为无或轻度肝纤维化组(S0 ～ S1,108例)和明显纤维化组(S2～S4,156例).用ROC曲线分析CTGF诊断CHB纤维化的敏感度、特异度及符合率,并与肝纤维化标志物HA、PCⅢ、CⅣ、LN、APRI比较；多组间比较用方差分析和秩和检验,多个样本间的两两比较分别采用t检验或Mann-Whitney U检验,不同肝纤维化分期比较采用Spearman相关分析.结果 自建系统ELISA血清CTGF法测定CTGF的灵敏度为0.2 μg/L,检测范围为0～64 μg/L.用该法检测高、低浓度2份不同CTGF标准品的批内CV分别为4.5％、9.8％；批间CV分别为10.1％、12.8％.S0 ～ S1组、S2～S4组CTGF血清浓度分别为6.7(3.1 ～10.1)、16.1(11.8 ～27.2) μg/L,两组间差异有统计学意义(U=1 217,P＜0.001)；且与肝纤维化分期明显相关(r=0.689,P＜0.001).其区分CHB明显纤维化和轻度纤维化的ROC曲线下面积(AUC)为0.841 (95％ CI:0.762 ～0.920),CTGF在临界值为10.3 μg/L时,其敏感度、特异度分别为70.5％、82.4％.CTGF平行联合APRI诊断CHB肝纤维化的敏感度为96.1％,高于单项HA( 75.6％)、PCⅢ(70.5％)、CⅣ(63.6％)、LN(79.5％)、APRI( 86.3％).其特异度为65.5％,低于单项HA( 72.5％)、PCⅢ(76.5％)、CⅣ(78.4％)；CTGF系列联合PCⅢ的特异度为95.9％,高于单项HA、PCⅢ、CⅣ、LN(64.7％)、APRI(66.1％),但其敏感度为67.7％,低于单项HA、PCⅢ、LN(64.7％)、APRI (66.1％)的敏感度.结论 建立的系统ELISA血清CTGF法具有较高的敏感度、特异度和灵敏度.血清CTGF与肝纤维化分期明显相关,血清CTGF可能是预测肝纤维化分期一个较好的指标,CTGF平行联合APRI可用于CHB纤维化的筛查,CTGF系列联合可作为CHB纤维化的诊断指标.
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梅毒螺旋体IgG和IgM抗体国家一级血清标准物质的研制
目的 研制国内用于TP的IgG和IgM抗体检测的国家一级标准物质,以促进临床实验室TP抗体检测的室内质量控制、试剂方法评价,实验室能力验证及量值溯源等.方法 筛选2份TP抗体强阳性血浆,分别用阴性的血浆稀释至约1 IU/ml( 200851)和20 mlU/ml( 200852),分装,真空干燥后,研究制备物不同温度(- 70、37、-20、2～8℃,室温和反复冻融)和时间(3d,1、2、3、4周等)的长期稳定性和短期稳定性.然后,从分装后样本中抽取20份进行均匀性研究.并采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)、免疫印迹、甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)和TP明胶凝集试验( TPPA)法,分别与国际标准物质(NIBSC编号:05/132和05/122)同时检测比对定值.后进行不确定度分析.结果 制备物长期保存稳定性良好,37℃可稳定4周,室温可稳定8周,2～8℃可稳定16周,-20℃可稳定32周.比较2种制备物的1～20号样本和混合样本检测结果的组间方差和组内方差,制备物200851与200852的F值均小于F0.01(1.38)=7.35,其均匀性良好.ELISA、免疫印迹、TRUST和TPPA 4种检测方法的定值结果相同,经不确定度分析,200851和200852定值结果可分别表示为( 1.27±0.26) IU/ml和(19.4±4.4) mlU/ml.结论 制备物稳定性和均匀性结果均符合国家一级标准物质的要求.这2种制备物可分别作为国内不同方法检测TP的IgG和IgM抗体的血清标准物质.
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常用肌酐检测系统的准确度评估
目的 评估常用Cr检测系统的准确度,观察系统间Cr测量值的相对变异及所带来的eGFR差异.方法 参照CLSI EP14-A2实验方案,在10套酶法和1套苦味酸法Cr检测系统上验证CAP LN24的互通性.LN24共6个浓度,分别为68.1、126.9、185.7、244.5、303.2和361.9 μmol/L,Cr定值基于NIST-IDMS方法.以LN24定值为靶值,评估各检测系统的准确度,分析各系统间变异.eGFR采用基于苦味酸法Cr的MDRD公式和基于酶法Cr的CKD-EPI公式进行计算.结果 LN24在11套Cr检测系统间具有互通性.4套系统在各浓度的偏倚均＜4.4 μmol/L,2套系统在各浓度的偏倚均＞4.4 μmol/L,1套系统存在较固定偏倚[(-4.2±0.7)μmol/L],其余系统在各浓度均有不同程度的偏倚.Cr在68.1 μmol/L时,eGFR偏差高可达14.9ml· min-1·(1.73 m2)-1.系统间SD随Cr浓度升高而升高(2.6 ～6.1 μmol/L)；系统间CV随Cr浓度升高而下降(4.0％ ～1.7％).去除负偏倚显著的2套系统,系统间变异及eGFR偏差均明显下降.测量新鲜血发现,各酶法系统间Cr差异大部分＜ 10 μmol/L；苦味酸法与酶法的差异离散度大,差异范围- 15～20 μmol/L.Cr＜100 μmol/L时,MDRD公式和CKD-EPI公式计算出的eGFR可相差-18～40ml·min-1·(1.73m2)-1.结论 部分酶法Cr检测系统具有良好的准确度；各酶法系统间的差异较为固定,可通过数学校正达到统一.苦味酸法和酶法肌酐测量结果间存在较大差异,用数学公式不能校正.低浓度时,肌酐测量偏倚和采用不同公式计算eGFR均可导致较大的eGFR偏差.建议临床实验室重视低浓度下Cr测量的准确度和一致性,并采用统一的公式计算eGFR.
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微流控芯片与常规玻片法在细胞培养和蛋白检测中的比较性研究
近年来,微流控芯片以其多种分析优势被广泛应用于生物医学领域,特别是在细胞及细胞内组分检测方面具有潜在的发展空间[1-2],借助其基本特征和优势,该技术亦可用于肺癌的耐药性研究.研究发现,糖调节蛋白78( GRP78)为细胞内应激蛋白,与肺癌耐药性密切相关[3].目前对其机制的研究主要以常规玻片为平台,该平台难以将细胞培养与蛋白检测集成到同一平片上,检测的便捷性和连续性均不足.
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环孢菌素A对NK细胞免疫球蛋白样转录子4的表达和杀伤功能的影响
目的 探讨CsA对NK细胞抑制性受体ILT4的表达及NK细胞杀伤功能的影响.方法 以10 mg/L CsA分别处理NK细胞12、24、36 h作为3个实验组,以DMSO分别作用NK细胞12、24、36 h作为3个对照组.通过RT-qPCR和流式细胞术分别检测各组中NK细胞ILT4 mRNA和蛋白表达变化,同时测定人胃癌细胞株BGC-823、绒毛膜癌细胞株JEG-3 HLA-G的表达,采用MTT法检测NK细胞经CsA处理36 h前后对肿瘤细胞杀伤活性的变化.用药处理不同时间段ILT4表达数据比较先使用单因素方差分析,再进行各均数间两两比较Dunnett t检验,而JEG-3、BGC-823细胞HLA-G的表达差异及NK细胞对JEG-3、BGC-823细胞的杀伤活性比较采用t检验.结果 用RT-qPCR检测经CsA处理12、24、36 h组的NK细胞ILT4 mRNA相对表达水平依次为0.99±0.27、1.79±0.29、6.79±0.64,经DMSO处理的对照组分别为0.86±0.11、0.94±0.12、1.06±0.17；CsA处理NK细胞24、36 h组的ILT4表达较对照组明显增加(t值分别为4.69、14.99,P均＜0.05),而作用12 h前后组间的差异无统计学意义(t=0.78,P＞0.05).用流式细胞术检测经CsA处理12、24、36 h组的NK细胞ILT4蛋白表达阳性率分别为(5.16±0.42)％、(6.23±0.48)％、(23.8±1.5)％,分别高于经DMSO处理12、24、36 h组[(3.08±0.19)％、(3.35±0.12)％、(3.36±0.21)％],且不同处理组在不同处理时间的阳性率比较差异有统计学意义(t值分别为7.70、10.06、20.72,P均＜0.01)；CsA处理NK细胞36 h组的ILT4 mRNA和蛋白表达均显著高于处理12 h和24h组(t值分别为16.38、14.12、21.81、20.56；P均＜0.01).同时,当经CsA处理前后且效靶比为10∶1时,NK细胞对低表达HLA-G的肿瘤细胞BGC-823的杀伤率分别为(81.96±2.80)％、(60.23±1.57)％,CsA对NK细胞杀伤活性的抑制率为(26.48±2.42)％；而NK细胞对高表达HLA-G的JEG-3细胞的杀伤率分别是(53.46±2.21)％、(28.30±1.85)％,抑制率为(47.10±1.59)％.经CsA处理前后NK细胞对肿瘤细胞杀伤活性的变化表明CsA可抑制NK细胞对BGC-823和JEG-3细胞的杀伤(t值分别为11.74、15.16,P均＜0.01),对JEG-3细胞杀伤抑制率显著高于对BGC-823细胞的杀伤抑制率(t=12.31,P＜0.01).结论 CsA可上调NK细胞抑制性受体ILT4的表达,并通过ILT4与HLA-G相互作用影响NK对肿瘤细胞的杀伤.
| 年 | 期数 |
| 2019 | 02 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2001 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2000 | 01 02 03 04 05 06 |
| 1999 | 01 02 03 04 05 06 |
| 1998 | 01 02 03 04 05 06 |
