中华检验医学杂志
Chinese Journal of Laboratory Medicine 중화검험의학잡지
- 主管单位： 中华医学检验杂志
- 主办单位： 中国科学技术协会
- 影响因子： 1.40
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 11-4452/R
- 国内刊号： 韩锟
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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扩展流式细胞术的临床应用范围提高应用水平
随着多参数、高通量等分析技术的不断改进,FCM作为表型分析的重要技术平台已逐渐扩展到蛋白质功能分析,针吸活检细胞、脑脊髓液、循环肿瘤细胞以及微生物的检测等临床应用领域.目前,流式标本处理、仪器设置以及数据分析等是制约FCM在临床检验常规应用的主要问题,因此应制定规范统一的流式项目标准操作流程,并建立地区性的流式共享平台,使FCM更好地服务于临床检验.
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HIV-1病毒载量测定技术的新进展
HIV-1病毒载量是指机体内游离病毒的含量.它是一个计数单位,表示每毫升血浆中含多少拷贝数的HIV-1RNA,是反映HIV-1患者疾病进展的关键指标之一[1].通过对HIV-1病毒载量的测定,不仅可以帮助判断HIV-1感染者的状况,还可以用于判断抗病毒治疗的效果,当患者出现耐药性时,也能很快地给出结果从而指导治疗的优化[2].相对于CD4的测定,病毒载量的测定能够提供较早的参考信息.
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儿童艾滋病诊断与治疗现状及挑战
据估计,截至2008年底,全球有210万15岁以下儿童感染HIV.母婴阻断策略的实施是目前为有效的控制婴幼儿感染的方式,通过成功的干预,母婴传播的风险可以降至2%以内,但是这样的干预在大多数资源有限的国家仍未广泛普及甚至不可及.尽管在过去的十年中,婴幼儿及儿童HIV感染的诊断和治疗方面取得了巨大的进展,但是全球每天仍有1 150例15岁以下的新感染者发生,其中90%,发生在发展中国家.
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副流感嗜血杆菌致小儿化脓性结膜炎二例
例1 患儿女,33 d.因"右眼发现结膜囊内大量黄色分泌物20余天,伴流泪等症状",自购妥布霉素滴眼液点眼治疗无效,于2010年5月就诊于山西省眼科医院眼科门诊.例2 患儿男,5个月.因"左眼发现黄色分泌物5 d",于2010年5月就诊于我院眼科门诊.2例患儿就诊时均发现结膜高度水肿、充血,结膜囊内大量黄白色分泌物涌出,角膜尚清,眼科检查排除泪道和泪囊发育异常等先天性疾病.2例患儿均做结膜囊分泌物细菌培养及抗生素敏感试验.
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颗粒性急性淋巴细胞白血病误诊为急性嗜碱粒细胞白血病一例
G-ALL是一种少见的急性淋巴细胞白血病亚型,胞质中可见到较多的粗大颗粒.我院诊断1例G-ALL,以胞质中含有粗大嗜天青颗粒的幼稚淋巴细胞为主,少数颗粒覆盖核上,形态似嗜碱粒细胞,在外院误诊为嗜碱粒细胞白血病.我院通过电子显微镜超微结构显示这些胞质颗粒实质类似多泡体 (瑞氏染色为嗜天青颗粒)或高尔基体.如此高比例的颗粒淋巴细胞形态学上容易误诊为其他类型白细胞,现报道如下,以进一步加深对本病的认识.
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21三体综合征合并染色体平衡易位t(5;8)一例
染色体是遗传物质基因的载体.人类有3～4万个基因,分别位于23对染色体上,组成24个基因连锁群[1],如果染色体数目或结构发生异常,则会导致基因群的增减或位置转移,扰乱遗传物质或基因间的平衡,而产生多种畸形或异常综合征.现已发现人类染色体数目异常和结构畸变有1万多种,已确定或报道的染色体综合征100多种.近,我们发现1例罕见的染色体异常核型,现报告如下.
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急性肾损伤
急性肾衰竭(acute renal failure,ARF)是一组以肾小球滤过率迅速下降为特点的临床综合征[1].临床检验指标为血肌酐、尿素的水平快速升高.重要的临床表现与容量超负荷、高血钾、酸中毒等代谢废物的潴留有关.少尿(尿量少于400 ml/d)或无尿(尿量少于100 ml/d)仅见于约半数的患者,并且常出现于病情进展期,如果等出现少尿或无尿才考虑.ARF的诊断,往往已经延误了早期防治病变进展的宝贵时机.近年来,趋向于以AKI取代ARF的称谓,目的是提高临床医师的警觉,尽大可能对这一临床综合征做到早期发现、早期诊断、早期治疗.
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天津地区耐甲氧西林金黄色葡萄球菌基因分型研究
MRSA已成为引起感染的主要病原菌,可导致各种感染.但是近年来MRSA出现了快速的进化演变,其感染不仅限于医院感染,且开始出现在社区感染中,称之为社区获得性MRSA(CA-MRSA).它的不断出现以及所引起的致死性疾病严重威胁人类健康.目前MRSA耐药严重,呈多重耐药性,特别是近年来出现万古霉素中介(VISA)或耐药(VRSA)的金黄色葡萄球菌,MRSA的感染已成为伞球公共卫生问题之一.因此,掌握MRSA的分子特征对于有效控制感染及鉴别菌株的相关性十分重要.为此本研究采用葡萄球菌盒式基因(SCCmec)多重PCR分型技术和多位点序列分型(MLST)技术,对天津地区4所医院分离出的104株MRSA菌株进行基因分型研究,以了解这些菌株的基因分型特征.
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2009年中国13家教学医院院内感染病原菌的抗生素耐药性监测
目的 监测2009年我国不同地区13家教学医院院内获得病原菌的分布和体外药物敏感性.方法 收集来自13家医院院内BSI、HAP和IAI患者标本的病原菌.菌株经中心实验室复核后,采用琼脂稀释法测定替加环素等抗菌药物的MIC值,数据输入WHONET5.6软件进行耐药性分析.结果 共收集到2 502株病原菌.引起BSI的前3位病原菌分别为大肠埃希菌[27.1%(285/1 052)]、凝固酶阴性葡萄球菌[12.6%(133/1 052)]和肺炎克雷伯菌[10.8%(114/1 052)];引起HAP的前3位病原菌分别为鲍曼不动杆菌[28.8%(226/785)]、铜绿假单胞菌[16.1%(126/785)]和肺炎克雷伯菌[14.6%(115/785)];而IAI的主要病原菌为大肠埃希菌[31.0%(206/665)]、肺炎克雷伯菌[11.3%(75/665)]和屎肠球菌[10.8%(72/665)].对于大肠埃希菌和克雷伯菌,敏感率大于80%的药物包括亚胺培南和美罗培南(98.1%～100%)、替加环素(95.3%～100%)、哌拉西林-三唑巴坦(88.6%～97.1%)和阿米卡星(88.3%～92.5%).对于肠杆菌属、柠檬酸杆菌属和沙雷菌属,替加环素的敏感率为93.5%～100%,亚胺培南和美罗培南的敏感率为92.9%～100%,敏感率较高的抗萧药物还包括阿米卡星(85.2%～96.7%)、哌拉西林-三唑巴坦(82.4%～96.4%)、头孢吡肟(79.6%～96.7%)和头孢哌酮-舒巴坦(78.7%～90.0%).铜绿假单胞菌对多黏菌素B的敏感率高(100%),其次为阿米卡星和哌拉西林-三唑巴坦(81.9%和80.1%).鲍曼不动杆菌对多黏菌素B的敏感率高(98.8%),其次为替加环素(90.1%)和米诺环素(72.O%).CRAB的发生率为60.1%.金黄色葡萄球菌中MRSA的发生率为60.2%,凝固酶阴性葡萄球菌中MRSCoN的发生率为84.2%.所有葡萄球菌对替加环素、万占霉素和利奈唑胺敏感,仅有1株溶血葡萄球菌对替考拉宁中介.本次监测发现2株利奈唑胺中介的粪肠球菌和1株万古霉素和替考拉宁耐药的屎肠球菌,替加环素对这3株肠球菌的MIC值范围为0.032～0.064μg/ml.结论 替加环素、碳青霉烯类、哌拉西林-三唑巴坦、阿米卡星和头孢吡肟对医院分离的肠杆菌科菌保持了较高的抗菌活性;多黏菌素B对铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌体现出高抗菌活性,替加环素对鲍曼不动杆菌抗菌活性较高;替加环素、万古霉素和替考拉宁、利奈唑胺对院内获得革兰阳性球菌保持了较高的抗菌活性.
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噬菌体生物扩增法检测痰液结核分枝杆菌的临床应用
结核病的细菌学检查是发现传染源的主要途径和手段,是结核病诊断和化疗的重要依据,也是考核、评价治疗效果的可靠标准[1].然而,传统的结核分枝杆菌分离培养方法需时较长(2～8周),涂片敏感度和特异度不高,涂片中菌体数要达到104～103个/m]时,才可检出[2].随着耐药结核病尤其是MDR-TB迅速增加[3],现有的细菌学实验方法远不能满足临床要求.近年来分枝杆菌噬菌体法在结核病实验研究中取得巨大进展,其中引人注目的是PhaB[4]检测结核分枝杆菌,但其检测的实际意义、影响因素,尤其在判断疗效的作用报道不多.本研究对前期的实验结果进行分析,评价检验结果的一致性,并与其他细菌学检测结果结合,评估动态检测在疗效评价中的作用.
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临床分离肠球菌属耐药性及耐药基因的研究
肠球菌属是医院感染的重要病原菌,可造成泌尿系统感染、伤口感染、腹膜炎、心内膜炎和败血症等.据中国全国医院感染监控网及美国医院感染监测系统(No socomial Infections Surveillauce System,NISS)监测显示,肠球菌属已成为医院感染的重要病原菌,在中国是革兰阳性菌感染中除葡萄球菌属外的第二大菌属.
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深圳社区感染沙门菌耐药基因调查与同源性分析
目的 调查深圳社区感染沙门菌耐药特点和分子机制,并进行同源性分析.方法 收集深圳市人民医院2002——2007年临床分离沙门菌共93株,PCR和DNA测序分析沙门菌gyrA、gyrB、parC和parE基因QRDR的突变,PCR检测质粒介导喹诺酮耐药基因qnr和aac(6')-Ib-cr,β内酰胺酶基因blaTEM、blaSHV、blaOXA和blaCTX-M基因,以及Ⅰ类整合子,PFGE对沙门菌进行分子分型.结果 伤寒沙门菌和甲型副伤寒沙门菌对氨苄西林、氯霉素、复方磺胺甲噁唑、头孢曲松和环丙沙尾敏感率为96%～100%;52%(13/25)伤寒沙门菌和95%(61/64)甲型副伤寒沙门菌对萘啶酸耐药.24%(6/25)萘啶酸耐药伤寒沙门菌和94%(60/64)萘啶酸耐药甲型副伤寒沙门菌对环丙沙星敏感性降低(MIC 0.125～μg/ml).75株萘啶酸耐药环丙沙星敏感沙门菌仅GyrA的QRDR均存在第83位或87位单个氨基酸替代,其中Ser83Phe突变占91%(68/75).2株环丙沙星耐药沙门菌在QRDR中均携带GyrA上2个点突变和parC上1个点突变.93株沙门菌均未发现质粒介导的qnr和aac(6')-Ib-cr 基因.1株头孢曲松耐药甲型副伤寒沙门菌检测到blaCTX-M-14基因,且该基因上游存在插入序列ISEcpl.3株多重耐药沙门菌均存在一个1 900 bp的Ⅰ类整合子,其基因盒均为dhfrⅫ-orfF-aadA2,同时携带blaTEM-1或blaOXA-30基因.25株伤寒沙门菌共有22种不同的PFGE带型,64株甲型副伤寒沙门菌的PFGE带型平均相似性为91%.90例患者均系社区感染,6例甲型副伤寒患者发病前30天内曾前往外地旅行.结论 深圳社区感染伤寒和甲型副伤寒沙门菌对萘啶酸耐药率较高,沙门菌GyrA的QRDR点突变是萘啶酸耐药的重要机制,甲型副伤寒沙门菌菌株间遗传同源性极高,来自同一克隆.
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南京地区急性呼吸道感染患儿人博卡病毒的检出与分析
目的 了解南京地区急性呼吸道感染患儿HBoV的检出情况,并探讨HBoV与临床特征的关系.方法 收集2009年7月至2010年6月南京医科大学附属南京儿童医院呼吸科收治的397例急性呼吸道感染住院患儿为病例组,对照组为50例无呼吸道感染症状的儿童.应用实时荧光定量PCR法检测鼻咽分泌物标本HBoV.对HBoV阳性标本,应用实时荧光定量PCR法检测MP和CT,直接免疫荧光法检测RSV、ADV、IVA、IVB、PIV-1、PIV-2、PIV-3和hMPV.随机选取5份HBoV阳性标本扩增HBoV NP-1片段后进行核苷酸序列测定,结果与GenBank中已知序列进行比对,绘制系统进化树.结合HBoV阳性患儿临床资料,分析HBoV的流行病学特点、临床表现和终临床诊断.结果 实时荧光定量PCR法检出HBoV DNA阳性率为8.3%(33/397),其中有57.6%(19/33)混合其他病原体感染.与HBoV混合感染的前3位病原体依次为MP(27.3%,9/33)、RSV(24.2%,8/33)和PIV.3(12.1%,4/33).7～36个月龄感染HBoV患儿有25例,占HBoV DNA阳性患儿的75.8%(25/33).5份标本HBoV NP-1基因序列均一致,与st1、st2和WHL-1等序列同源性为99%～100%.结论 HBoV是南京地区急性呼吸道感染患儿的病原之一.HBoV NP-1基因高度保守,在不同地区和不同时期的流行株间变异较小,可作为实时荧光定量PCR等方法的检测标记.
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两种HBV DNA检测试剂的比较
目的 分析两种试剂在HBV DNA定量检测中的相关性,评价其在不同病毒载量时的检测性能.方法 用人AB型血清将WHO第2代HBV DNA国际标准品(编号:97/750)配制成不同浓度的10份样本,10份样本的浓度分别为1×106、5×106、1×105、5×104、1×104、5×103、1×103、5×102、1×102、1×101 kIU/L.采用深圳匹基生物工程股份有限公司生产的HBV DNA荧光定量PCR检测试剂(PG试剂)和美国罗氏公司生产的定量PCR试剂(罗氏试剂)检测78份HBV感染者血清、30份健康献血者血清和10份不同浓度范围的WHO标准品中HBV DNA含量.对两种试剂检测HBV DNA结果相关性进行分析;对试剂在不同病毒载量时的检测性能进行评价;并对漏检情况进行分析.两种试剂每批检测均设有阴性质控、弱阳性质控和强阳性质控.结果 两种试剂对WHO HBV DNA标准物质稀释血清均能正确检出,罗氏试剂能检出高稀释度样本浓度为2.00(kIU/L,lg),PG试剂能检出高稀释度样本浓度为3.00(kIU/L,lg);两种试剂检测结果存在线性相关(R2=0.938 7,P<0.01),罗氏试剂检测上限与理论值相符,大于检测上限的标本经稀释重复测定,罗氏试剂检测结果[(8.35±0.20)kIU/L,lg]高于PG试剂检测结果[(7.73±0.42)klU/L,lg],差异有统计学意义(t=3.776,P<0.05).两种试剂检测108份血清标本中HBV DNA含量,罗氏试剂检测值[(5.88±1.64)kIU/L,lg]高于PG试剂检测值[(5.25±1.55)kIU/L,lg],差异有统计学意义(t=12.297,P<0.01);检测高HBV病毒载量[(>5.00～≤7.00)kIU/L,lg和(>7.00～≤9.00)kIU/L,lg]组,两种试剂的相关性较高(R2分别为0.779 7、0.603 7,P均<0.01);对低HBV病毒载量(>3.00～≤5.00 kIU/L,lg)组,两种试剂的相关性较低(R2=0.417 3,P<0.01);病毒载量为>3.00～≤4.00 kIU/L,lg组,PG试剂的漏检率为33.3%(5/15);病毒载量为>1.08～≤3.00 kIU/L,lg组,PG试剂未检出.结论 PG试剂与岁氏试剂检测结果虽存在一定差距,但相关性较好.两种试剂低病毒载量标本的相关性要低于高病毒载量标本,PG试剂检测HBV DNA的线性范围较窄.
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家族性高胆固醇血症患者二例的LDLR基因复合杂合新突变分析
目的 探讨2例临床确诊的湖北籍FH患者的LDLR基因突变状况,为FH的基因诊断提供依据.方法 收集2例临床确诊的FH患者及其父母血脂检测指标等临床资料,通过PCR扩增LDLR基因的1～18个外显子和内含子区域,再将扩增产物进行正、反双向核苷酸序列分析,并与GenBank中LDLR基因的正常序列对比找出突变后,结合FH先证者的临床表型证实致病突变的类型.结果 氧化酶法测定1号、2号FH先证者血浆TC,分别为12.79、11.98 mmol/L;经核苷酸序列分析,其ApoB100基因涵盖的3 500～3 531区域均未见突变;LDLR基因均为复合杂合突变,1号FH先证者LDLR基因第4外显子的665位碱基G>T为杂合错义突变,且该突变为新的点突变,第9内含子的1 358+32位碱基C>T突变也为新的点突变,并均由其父母遗传.2号先证者第9外显子1 257位碱基C>A突变导致终止密码子提前出现,但其核苷酸改变与比利时报道的C>G不同,第13外显子检测到1 879位碱基G>A杂合错义突变,且分别来源于其父母.结论 2例FH先证者均存在LDLR基因复合杂合突变,1号FH先证者的第4外显子665位碱基G>T和第9内含子1 358+32位碱基C>T、2号FH先证者的第9外显子1 257位碱基C>A突变均为新突变,这可能是导致FH的分子机制.
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肝素及低分子肝素对脑血管病患者血中妊娠相关血浆蛋白A浓度的影响
目的 探讨临床脑血管疾病治疗中应用的肝素和低分子肝素对血清学标志物PAPP.A浓度的影响,为进一步准确评价PAPP-A的临床意义提供依据.方法 选取山东大学齐鲁医院2009年11月至2010年5月收入院的40例脑血管病患者,分别采集药物注射前后的血标本.按照治疗方法及肝素和低分子肝素的用药情况分成4组:A组,10例皮下注射低分子肝素抗凝患者,注射前、治疗第1天、第2天和第7天注射后3 h以及末次注射后24 h分别抽取静脉血.B组,10例未用低分子肝素抗凝患者,入院时、入院第1天、第2天和第7天抽取静脉血.C组,10名肝素抗凝支架治疗患者,造影前、注射肝素前、注射肝素后第3、5、15、40和100分钟从动脉鞘管抽取动脉血.D组,10例未用肝素抗凝造影患者,造影前和造影完成后分别从动脉鞘管抽取动脉血.用ELISA方法检测各组标本中PAPP-A浓度,分析不同处理组组间差异及组内各时间点间的差异.结果 A组患者PAPP-A 浓度呈时间依赖性,随着给药天数的增加逐渐从注射前的12.36(9.90～14.32)mIU/L升高至第7天21.80(23.50～19.73)mIU/L,差异有统计学意义(M=38.72,P<0.01).C组患者静脉注射肝素后PAPP-A浓度5 min内由12.86(9.67～14.05)mIU/L升高至51.56(44.20～66.00)mIU/L,差异有统计学意义(M=46.06,P<0.01).皮下注射低分子肝素1周后A组PAPP-A的浓度为21.80(23.50～19.73)mIU/L,高于B组的11.81(9.21～12.89)mIU/L,差异有统计学意义(U<0.001,P<0.01).C组静脉注射肝素15 min时PAPP-A的浓度为43.70(37.70～54.30)mIU/L,高于D组造影后的14.18(11.25～15.86)mIU/L,差异有统计学意义(U<0.001,P<0.01).皮下注射低分子肝素后血中PAPP-A的峰值比静脉注射肝素的峰值低,A组与C组分别为21.80(23.50～19.73)、51.56(44.20～66.00)mIU/L,差异有统计学意义(U=0.999,P<0.01).结论 脑血管疾病临床治疗中应用肝素和低分子肝素会导致血中PAPP-A浓度的升高,选用PAPP-A作为评价指标时应考虑药物的影响.
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儿童肥胖持续时间与血锌、血糖及胰岛素含量关系的探讨
儿童肥胖不仅对生长发育过程造成严重威胁,而且还是成年期肥胖、糖尿病、动脉粥样硬化等疾病发生的重要危险因素.肥胖症已成为严重威胁儿童健康的一种常见病[1].锌(Zn)是人体重要的微量元素,不仅对含锌酶的活性起着关键作用,而且在分子水平上参与调节DNA、RNA和蛋白质的生物合成,对维持儿童止常的生长发育至关重要[2].近年来,国内外研究结果证实了肥胖儿童体内存在着Zn代谢的异常[3-6],且与糖代谢的改变密切相关[7].而本研究则是对持续肥胖半年至13年的78例单纯性肥胖儿童的血Zn、空腹血糖(fasting plasma glucose,FPG)、空腹胰岛素(fasting insulin,FINS)含量及稳态模型的胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)4项指标进行检测,以期对持续肥胖儿童体内Zn、FPG、FINS代谢变化的规律及其发生机制进行探索,为进一步指导临床干顸疾病奠定基础.
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不同流式细胞分析系统对外周血淋巴细胞亚群分析结果的影响
目的 探讨部分临床实验室FCM淋巴细胞亚群分析参考范围应用的合理性及不同生产厂家的流式细胞仪和试剂组合对淋巴细胞亚群分析结果的影响.方法 根据国内临床实验室常用的3个流式细胞仪型号(Beckman Coulter Epics XL、Beckman Coulter Cytomics FC500、BD FACS Calibur),分别选取3家北京地区临床流式细胞室(A、B、c室),按照各室的实际检测方案分别测定50份健康人静脉血标本,以验证各室淋巴细胞亚群分析参考范围是否合理.调查3家实验室室内全血质控品使用情况,并将商品化全血质控品分发各室,按照各自的实际实验方案在20个工作日内与常规标本平行处理、检测和分析.针对不同生产厂家的试剂,在同一流式细胞仪(型号为Beckman Coulter Epics XL)上用a、b、c、d 4种不同的试剂组合对20份患者标本进行检测,其中试剂组合a为美国Beckman Coulter公司同厂配套试剂和仪器,试剂组合b、c、d的检测结果分别与试剂组合a比较,计算b、c、d试剂组合偏倚>10%的概率.采用相同试剂和溶血素(美国Beckman Coulter公司)对24份患者标本进行前处理,分别在2台不同厂家和型号的流式细胞仪(型号为Beckman Coulter Epics XL和BD FACS Calibur)上检测,比较相同试剂处理标本后不同仪器对淋巴细胞亚群分析结果的影响.采用同厂配套试剂和仪器,比较Beckman Coulter Epics XL和BD FACS Calibur两个流式细胞检测系统对20份患者标本检测结果的影响.结果 A室的自然杀伤(NK)细胞及CD+4 T淋巴细胞/CD+8 T淋巴细胞(T4/T8),B、c两室的T4均有大于10%的结果落在相应的参考范围之外,超出相应参考范围的概率分别为16%(9/50)、24%(12/50)、22%(11/50)、12%(6/50).3家实验室20个工作日内的室内质控均在参考范围内.与试剂组合a比较,试剂组合b、c的所有项目偏倚均较大,其中偏倚>10%的概率低为试剂组合b的T8,为70%(14/20);高为试剂组合b、c的T淋巴细胞(T3)、T4,均达到100%(20/20).试剂组合d的T3、T8和B淋巴细胞(B)偏倚较大,偏倚>10%的概率分别为35%(7/20)、85%(17/20)、75%(15/20).不同生产厂家的试剂、仪器处理和分析标本的结果,与采用同一生产厂家的试剂、仪器处理和分析的结果相比,T3、T4、T8、B、NK均存在较大偏倚,偏倚>10%的概率分别为71%(17/24)、80%(19/24)、38%(9/24)、33%(8/24)、92%(22/24).Beckman Coulter Epics XL和BD FACS Calibur两个流式细胞检测系统相比较,T8、NK和B的偏倚均较大,偏倚>10%的概率分别为55%(11/20)、70%(14/20)、55%(11/20).结论 流式细胞实验室需要建立自己的参考范围并定期验证,以便合理进行调整.建议定期采用全血质控品,并累计质控数据.各实验室应选择同厂配套试剂处理标本.
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一种新的血小板活化释放试验监测阿司匹林的治疗反应
目的 建立一种新的血小板活化释放试验用于监测阿司匹林的治疗反应.方法 采用ARA活化抗凝全血中血小板,应用血细胞分析仪检测MPC的变化.抽取5名健康志愿者外周血标本,取血后迅速混匀,用于MPC、LTAARA和血小板CD62P表达的检测,以优化检测条件,包括ARA活化浓度(分别为0、0.5、1.0、1.5、5.0、10.0 mmol/L)的选择和ARA活化血小板时间的选择(37℃水浴中5、10、20、30、40、50、60、70、80、90 min);评价该方法的稳定性(取血后0、1、2、3 h分别检测)、重复性(MPC、LTAARA、血小板CD62P表达的检测分别重复测定10次,计算批内及批间CV);并通过体外乙酰水杨酸试验验证该方法监测阿司匹林治疗反应的可行性.ARA活化血小板后用CD61-PerCP和CD62P-PE标记,流式细胞仪测定CD62P表达阳性的血小板百分率,对MPC与CD62P的相关性进行分析.选择口服阿司匹林至少7 d的患者为服药组,共93例;选择未口服或停止口服阿司匹林7 d以上的患者为对照组,共100例.用该方法检测服药组与对照组患者ARA(终浓度0.5 mmol/L)活化前后MPC的变化,并与LTAARA方法进行比较,评价该方法的准确性.结果 ARA终浓度为0.5 mmol/L时,血小板活化充分,MPC与血小板膜表面CD62P呈负相关(r=-0.755,P<0.01).37℃水浴活化30 min后MPC达到稳定,取血后室温3 h内MPC保持稳定,新鲜全血MPC的批内CV为1.35%,固定质控全血批间CV为0.71%和0.74%.随着全血中乙酰水杨酸浓度升高(0～6.95 μmol/L),ARA活化血小板后MPC逐渐升高,CD62P逐渐减低,二者呈负相关(r＝-0.765,P<0.01).服药组MPC差值为(8.2±8.6)g/L,MPC变化率为(3.4±3.6)%,对照组分别为(37.4±10.3)g/L、(15.7±4.0)%,差异均有统计学意义(t=21.522、22.409,P均<0.01).MPC变化率ROC曲线下面积为0.992,当临界值为8.7%时,其监测阿司匹林治疗反应的敏感度为96.8%,特异度为99.0%.MPC变化率与LTAARA具有很好的相关性(r=0.720,P<0.01).结论 本研究建立了一种新的监测阿司匹林治疗反应的血小板活化释放试验,可以替代LTAARA用于临床常规检测.
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单管10色流式细胞术分类计数外周血白细胞
目的 应用"单管10色"流式细胞术分类计数外周血白细胞,并探讨其临床应用价值.方法 通过多种单克隆抗体的选择和多重逻辑设门的研究,确定了10色流式细胞术与12种单克隆抗体组合的单管免洗外周血白细胞分类方法(简称"单管10色"方法).选取142份外周血标本,以血涂片显微镜法分类技术为参考方法,同时用Beckman Cotdter LH750全自动血细胞分析仪和"单管10色"方法分类计数白细胞,计算"单管10色"方法的临床诊断效率,并统计分析两种方法与显微镜法分类计数白细胞的相关性.以BD FACS Calibur流式细胞仪免疫分型结果为标准,计算"单管10色"流式细胞术检出原始细胞的诊断效率.结果 "单管10色"流式细胞术与显微镜法分类计数外周血白细胞除嗜碱粒细胞外均具有良好的相关性(r均>0.700,P均<0.01),其中对检出中性粒细胞、淋巴细胞、未成熟粒细胞和原始细胞的相关性较高(r＝0.972、0.951、0.801、0.912,P均<0.01).以显微镜法分类计数外周血未成熟粒细胞1%为临界值,"单管10色"流式细胞术检出未成熟粒细胞敏感度为92%(57/62),特异度为79%(63/80).以显微镜法检出外周血原始细胞0.5%为临界值,"单管10色"流式细胞术检出原始细胞敏感度为99%(67/68),特异度为92%(68/74).以BD FACSCalibur流式细胞仪免疫分型结果为标准,"单管10色"流式细胞术对原始细胞检出的敏感度为100%(40/40),特异度为91%(10/11),阳性预测值为98%(40/41),阴性预测值为100%(10/10),准确性为98%(50/51).结论 "单管10色"流式细胞术分类计数外周血白细胞与显微镜法具有良好的相关性,有望用于全血细胞计数异常时的后续检验.
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维吾尔族宫颈癌患者外周血中CD+4CD+25CDlow/-127调节性T淋巴细胞与细胞因子的临床意义
宫颈癌是位居妇科肿瘤第一的恶性疾病[1].如何有效预防和治疗宫颈癌,提高患者生存质量是目前的研究热点.CD+4 CD+25 Treg在维持自身耐受和免疫稳定的同时,也抑制着免疫系统对肿瘤的免疫应答[2].经TGF-β和IL-10处理的细胞可获得明显的抑制效应性T淋巴细胞增殖的作用,炎症因子IFN-γ则与Treg起相反的作用[3].维吾尔族是宫颈癌高发民族,死亡率高[4].本研究通过流式细胞术检测维吾尔族宫颈癌患者外周血CD+4 CD+25 CDlow/-127 Treg细胞含量,采用ELISA检测血清中细胞因子TGF-β、IL-10及IFN-γ的水平,以便有针对性地开展新疆地区宫颈癌防治工作.
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流式细胞术表型分析的质量控制
FCM表型分析已经从外周血淋巴细胞的双参数定量测定发展到当今对血液细胞病理学包括骨髓、淋巴结分析的5个或更多参数的定性测定,其中白血病和淋巴瘤的免疫表型分析在血液淋巴系统恶性疾病诊断、分类及病情监测上都是对形态学检验的一种重要补充.FCM 5个或更多参数分析的复杂性以及数据的解释依赖于仪器、试剂、程序的标准化及校准.此外,在美国的流式细胞学实验室还必须保留有关水平测试、样品制备、方法学的准确性、特异性、灵敏度和精密度的相关资料.CLSI和UCCC建议每个流式细胞学实验室需要对定性和定量检测程序进行验证.本文对美国临床流式细胞学实验室FCM检验的相关验证、室内与室间质量控制措施进行介绍.
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不连续通电的红细胞电泳——血红蛋白释放实验
包头医学院秦文斌教授所领导的血红蛋白研究室近期建立了一种新的活态红细胞血红蛋白电泳释放实验(hemoglobin release test,HRT),并发现β-地中海贫血患者血红蛋白释放量明显高于健康人.
| 年 | 期数 |
| 2019 | 02 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2001 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2000 | 01 02 03 04 05 06 |
| 1999 | 01 02 03 04 05 06 |
| 1998 | 01 02 03 04 05 06 |
