宫内感染乙型肝炎病毒免疫失败儿童1型和2型细胞因子研究

目的从外周血单个核细胞(PBMC)在特异性和非特异性刺激下1型和2型细胞因子的反应探讨宫内感染乙型肝炎病毒(HBV)导致免疫失败的机制.方法采用体外细胞培养和ELISA技术对29例宫内感染免疫失败儿童、9例宫内感染有效儿童及25名正常儿童PBMC在丝裂原(植物血凝素和细菌脂多糖)、酵母重组乙型肝炎表面抗原(HBsAg)及无刺激物时干扰素(IFN)-γ、白细胞介素(IL)-4和IL-12P70的分泌进行检测.结果丝裂原刺激时IFN-γ分泌和IFN-γ自发分泌在免疫失败组有增高趋势.和自发分泌比较,在HBsAg刺激时,对照组、有效组和免疫失败组均表现为分泌增加,但免疫失败组增加值显著性低于对照组.在各种刺激时IL-4和IL-12分泌低于可检测水平.丝裂原刺激时IFN-γ分泌和血清丙氨酸转氨酶水平正相关.结论特异性刺激时1型细胞因子分泌不足可能是宫内感染HBV导致乙肝疫苗免疫失败的原因之一,1型细胞因子非特异性反应增强可能与肝细胞损伤有关.

噬血细胞综合征的克隆性研究

目的探讨噬血细胞综合征是否存在着克隆性即恶性肿瘤性增生.方法 9例均为女性,年龄1.8～9岁,均符合噬血细胞综合征的诊断标准,利用莱昂原理每例患儿取骨髓2 ml,用贴壁方法和流式细胞仪提取巨噬细胞中的DNA,以人类雄激素受体基因(HUMARA基因)位点进行酶切及PCR扩增,然后进行限制性片段长度多态性分析.结果 9例噬血细胞综合征患儿,2例显示出克隆性增生条带(单一条带),且她们的自体阴性对照标本(口腔粘膜脱落上皮细胞中DNA)均出现两条扩增带.另7例患儿的骨髓标本与自体阴性对照标本均出现两条扩增带.阳性对照标本(1例单核细胞白血病患儿骨髓单核细胞DNA)出现一条扩增带.结论噬血细胞综合征一直被认为是一种反应性疾病,但临床上许多病例常呈恶性爆发性病程,有较高的病死率.研究的结果表明,该病中实际存在着克隆性(即恶性)增生,并非都是反应性,因而有相差悬殊的临床预后.

FasL基因转移诱导同种异体反应性T细胞凋亡的实验研究

目的研究FasL基因转染鼠骨髓单个核细胞(BMMNC)后,诱导同种异体反应性T淋巴细胞凋亡的效率.方法采用脂质体法将mFasL-cDNA转入Balb/C小鼠造血细胞,Western-Blot检测其是否表达,然后将转染mFasL-cDNA的BMMNC与BAC鼠(Balb/C×C57BL/6,H-2d×b,F1)脾单核细胞(SMNC)混合培养,通过混合淋巴细胞反应(MLR)及流式细胞仪(FCM)检测SMNC的凋亡效率.结果基因转移后Western-Blot分析Balb/C鼠BMNC显示明显抗FasL抗体识别的条带(约40 000),未转基因的BMMNC无阳性条带发现;转基因组进行MLR其每分钟脉冲数(CPM)值为5 628±186,明显低于对照组(9 674±78)(t=44.86, P＜0.001);FCM检测转基因组诱导SMNC凋亡率为(14.8±0.4)%,明显高于对照组[(1.8±0.4)%](t=3.01,P＜0.01).结论采用脂质体法能将mFasL-cDNA转入鼠BMMNC,并能有效表达,转基因后的BMMNC有诱导同种异基因反应性T淋巴细胞凋亡的作用.

贵阳地区重症β-地中海贫血患儿及双亲基因突变型的分析

目的对15例贵阳地区重症β-地中海贫血患儿及其双亲进行基因突变分析,以探讨其突变基因的类型和频率的特点,为诊断和预防重症胎儿的出生提供线索.方法采用一管法进行红细胞渗透休克实验测定红细胞渗透脆性、一分钟碱变性法测定抗碱血红蛋白(HbF)和醋酸纤维薄膜电泳洗脱比色法测定血红蛋白A2(HbA2)、氰化高铁血红蛋白法测定Hb等进行β-地中海贫血血液学检查.用常规法抽提外周血白细胞DNA,用聚合酶链反应-反向点杂交法(PCR-RDB)扩增目的基因片段和分析其基因类型.结果 15例重症β-地中海贫血患儿及其双亲共45例标本中检出中国人常见的11种基因突变中的5种:CD41-42(-TTCT)、IVS Ⅱnt654(C→T)、CD17(A→T)、βE (G→A)和Nt-28(A→G)的基因突变类型,前3种占总数的89.99 %.结论采用PCR-RDB法进行基因诊断,具有操作简单、快速准确,仅需一次杂交就可确定样品中是否存在11种中国人常见的β-地中海贫血突变基因型,提高了基因诊断率,这对防止重症β-地中海贫血患儿的出生、提高人口素质具有重要意义.

神经母细胞瘤脂类提取物对NKT细胞激活作用的实验研究

目的研究神经母细胞瘤脂类提取物对健康儿童自然杀伤T(NKT)细胞增殖程度和对NKT细胞介导的对自身肿瘤细胞的细胞毒作用的影响.方法甲醇/氯仿法提取神经母细胞瘤脂类提取物作为刺激物,采集健康儿童外周血单核细胞,培养出成熟的树突细胞,采集并分离同一个体外周血T细胞与树突细胞共同培养,分别加入脂类提取物或(和)白细胞介素15(IL-15)和粒-单系细胞集落刺激因子(GM-CSF).测定各组T细胞的增殖程度的变化,流式细胞仪测定NKT细胞占T细胞的比例(NKT/T)并分选出NKT细胞,测定各组NKT细胞对神经母细胞瘤细胞毒作用.结果肿瘤脂类提取物刺激组T细胞增殖程度、NKT/T比例、NKT细胞毒作用高于对照组(P=0.043; P=0.020;P=0.032).共刺激组(肿瘤脂类提取物+IL-15+GM-CSF)T细胞增殖程度、NKT/T比例、NKT细胞毒作用高于对照组(P=0.001;P=0.001;P=0.020),肿瘤脂类提取物刺激组(P=0.004; P=0.030; P=0.010)和细胞因子刺激组(P=0.044; P=0.049; P=0.048).结论神经母细胞瘤脂类提取物可以有效激活NKT细胞,发挥对自身肿瘤细胞的细胞毒作用.细胞因子IL-15和GM-CSF可以增强脂类提取物的激活作用.

儿童重症全胃肠道克罗恩病一例

患儿,女, 13岁.因发热、中上腹痛、纳差、消瘦3 个月,恶心、呕吐 3 d入院.既往体健.查体: T 38℃,营养差,皮肤巩膜无黄染,浅表淋巴结无肿大.心肺阴性.舟状腹,中上腹压痛,肝未扪及,脾肋下 2 cm,移动性浊音阳性.血 WBC 6.2× 109/L,分类正常, RBC 3.84× 1012/L, Hb 114g/L, PLT 110×109/L.肝功能轻度异常,肾功能正常.心电图及胸部 X线检查正常.

X-连锁低丙种球蛋白血症一例

患儿男,5岁,因"左膝关节肿痛半年"入院.半年前患儿出现左膝关节疼痛,不肿,影响活动,夜间疼痛重,不伴有发热、皮疹及其他关节疼痛.

先天性麻疹一例

患儿男,生后30 min.孕2产2,孕40周+5天自然分娩,产程顺利,Apgar评分:1 min8分,5 min10分,羊水清.生后体检发现患儿面部,躯干及四肢布满粟粒大小红色皮疹.转入儿科治疗.

内源性血管弹性蛋白酶及其抑制剂与肺动脉高压的关系

肺动脉高压(pulmonary hypertension,PH)是一种以肺血管重构(pulmonary remodeling)为主要病理改变的肺血管增生性疾病,其病因复杂,治疗上缺乏有效手段.近年来国内外研究表明,内源性血管弹性蛋白酶(endogenous vascular elastase,EVE)与肺动脉高压时的肺血管重构密切相关,在肺动脉高压的发生及发展过程中起重要作用;而其抑制剂可阻止实验性肺动脉高压的进展,有望为肺动脉高压的治疗提供一种新的选择.下面就EVE及其抑制剂与肺动脉高压的关系作一综述.

小儿呼吸道卡他莫拉菌感染的临床调查

卡他莫拉菌是上呼吸道的一种寄居菌,在慢性肺部病变或机体免疫力低下时,该菌可侵入下呼吸道引起呼吸系统急性炎症.临床诊断呼吸道卡他莫拉菌感染需具备以下条件:细菌是从下呼吸道标本(痰标本)中获得,并且痰标本中可见大量脓细胞;痰培养卡他莫拉菌量在(++)以上,呈优势生长[1].国外有关卡他莫拉菌引起的呼吸系统及其他组织炎症报道较多[2,3],国内未见相关报道.为此我们对78例已明确为呼吸道卡他莫拉菌感染患儿进行临床调查,并进行卡他莫拉菌β-内酰胺酶测定.

川崎病冠状动脉病变九年的回顾分析

川崎病是儿科常见的后天性心血管病之一,因其对心脏的损害,受到了普遍的关注.其中冠状动脉病变为严重,多发生在疾病的急性期.我们回顾了1992年1月～2000年12月在我院住院的川崎病患儿875例,其中313例发现有川崎病患儿急性期冠状动脉病变,初步分析如下.

血小板特异性抗体测定与儿童特发性血小板减少性紫癜的关系

特发性血小板减少性紫癜(ITP)发生的主要原因是抗血小板自身抗体引起的血小板破坏,因而血小板自身抗体的检测对ITP的诊断及发病机理的研究有重要价值.本研究用改良的血小板抗原单抗特异性固相化法(monoclonal antibody specific immobolization of platelet antigens, MAIPA)测定了ITP患儿和非免疫性血小板减少症患儿血清中的抗GPIIb/IIIa和抗GPIb/Ix自身抗体,并同时测定这些患儿的血小板表面相关抗体(PAIgG)作为比较,以试图评价血小板膜糖蛋白特异性抗体测定在ITP患儿中的诊断价值.

伴房间隔缺损或卵圆孔未闭的肺动脉瓣狭窄99例分析

1984年4月～1999年 5月,我院共收治年龄≤18岁的伴房间隔缺损(ASD)或卵圆孔未闭(PFO)的肺动脉瓣狭窄(PS) 99例,其中所有PFO均存在房水平的分流.完成其根治术95例,半根治术3例,因右心发育不良未行手术治疗1例.我们总结术前发生心功能不全的相关因素及手术时机的选择,并介绍我院手术治疗的临床经验.

不合理使用抗生素增加不良反应

随着抗生素的研制开发和广泛应用,也出现了抗生素的不合理应用,以及随之而来的药物不良反应(adverse drug reaction,ADR)和耐药菌的新课题,特别是药物不良反应给患者、家庭和社会带来的不良后果,必须引起临床医务人员高度重视和予以防范.

我国不合理用药的现状及对策

用药是指始于正确诊断,对症下药,正确开方(医嘱),妥善调配,患者遵嘱,随访负责,灵活调整治疗方案的一体化过程.此过程以完整的用药系统为依托,该系统是医、药、护、技、管理者、患者或其监护人在职责范围内参与合理用药(rational use of drugs,RUD)的完整流程,形成体系,以达到药疗的佳效果.RUD的生物医学标准(WHO与美国卫生科学管理中心-MSH,1997)是:药物无误;指征适宜;疗效、安全性、使用、价格对患者适宜;剂量、用法、疗程妥当;用药对象适当;无禁忌证,不良反应小;药品调配与提供用药信息无误;患者遵从医嘱.这7项标准以安全、有效、经济为基本目的.

要重视细菌抗生素耐药机制研究

细菌耐药分为:(1)天然或突变产生的耐药性,即染色体遗传基因介导的耐药性.属于此种耐药性者如克雷伯菌可产生由染色体介导的青霉素酶,而对氨苄西林和羧苄西林耐药;金葡菌甲氧西林耐药株(MRSA);肺炎链球菌中耐青霉素菌株等.(2)细菌因获得了由质粒或转座子等携带的外来DNA片段,导致细菌产生耐药性,即质粒介导的耐药性,所带耐药基因易于传播,在临床上占有重要地位.

关注对动物使用抗生素与细菌耐药的问题

抗生素在农业、畜牧业的广泛应用,也是细菌耐药的重要原因.

制定与推广抗生素合理使用指南 控制细菌耐药

中华医学会儿科学分会呼吸学组和中华儿科杂志编委会于世纪之交制定了"小儿急性呼吸道感染抗生素合理使用指南"(以下简称指南),引起全国同道的广泛反响.现就制定指南必要性、目的、指南方案的部分剖析和指南的推广等方面作一概述.

抗生素的合理使用

随着临床致病菌的变迁和耐药性的显著增长,合理应用抗生素对及时控制细菌感染、缩短病程和改善预后起着重要作用.因此必须按以下的基本原则用药.

耐药菌院内感染及其防治

近年来,有些院内感染呈难治性感染,尤其在ICU.这是大量应用广谱抗生素造成院内感染的耐药株不断增加所致,且为多重耐药.

氟喹喏酮类抗生素的耐药机制及其耐药现状

在过去的20年中,某些地区由于用药不当导致某些菌属,特别是革兰阳性菌,对氟喹喏酮类耐药很快上升.20世纪90年代末,三代、四代氟喹喏酮类,如格帕沙星、司帕沙星、莫西沙星、加替沙星、克林沙星问世.这些新药对革兰阳性菌(特别是肺炎链球菌)、厌氧菌、支原体、衣原体的抗菌活性增强,并保持对革兰阴性菌的活性.随着它们在临床的应用,耐药问题也引起人们的关注.

β-内酰胺酶导致的革兰阴性菌耐药

由于头孢菌素类、碳青霉烯类和单环类抗生素的广泛使用,20世纪90年代世界各地有大量的文献报告革兰阴性杆菌产生染色体或质粒介导的β-内酰胺酶水解这些广谱或超广谱抗生素,代表酶为头孢菌素酶和超广谱β-内酰胺酶[1].

中华医学会儿科学分会内分泌遗传代谢学组会议纪要

B族链球菌的红霉素耐药基因研究

目的比较不同地区B族链球菌(GBS)对红霉素耐药性的差异及耐药基因谱特点.方法用琼脂稀释法,测定红霉素、克林霉素对不同地区(北京,广州,俄罗斯圣彼得堡)的113株GBS的低抑菌浓度(MIC),同时用PCR和核酸杂交的方法,检测红霉素耐药基因mreA、mefA、ermA、ermB、ermC在该批菌株中的出现规律及其与红霉素耐药性的关系.结果 (1)北京、广州两地GBS菌株总耐药率为46%,与克林霉素耐药性的一致率为93.8%;所有ermA基因均来自北京菌株,而广州菌株不含该基因.(2)含ermA和(或)ermB基因的GBS占所有菌株的30.09%,其耐药率高达97.06%,在已检测的GBS菌株中未发现ermC基因.(3)分别有53株和18株含mreA和mefA的GBS以及1株含ermA的菌株仍对红霉素敏感.2株GBS不含上述任何一种基因,但仍对红霉素耐药.结论 (1)北京、广州两地GBS对红霉素普遍具有较高的耐药率,且与大环内酯-林可霉素-链阳性霉素B类抗生素之间存在较严重的交叉耐药,临床使用抗生素时应尽量避免重复选择此类抗生素;(2) ermA和ermB是决定我国北京、广州GBS对红霉素耐药的重要基因;(3)GBS的耐药性还有其他分子生物学机制参与.

四地儿童肺炎链球菌、流感嗜血杆菌抗生素敏感性监测(2000～2001年)

目的了解当前我国儿科呼吸道感染常见病原肺炎链球菌和流感嗜血杆菌对常用抗生素的敏感性,以便有效指导临床合理用药和预防.方法连续两年对北京、上海、广州三家儿童医院和西安西京医院儿科(仅2001年)就诊的上呼吸道感染儿童鼻咽分泌物进行培养、分离肺炎链球菌和流感嗜血杆菌;采用纸片扩散法及E-test方法对分离株进行常用抗生素敏感性检测.结果四地2年从呼吸道感染儿童鼻咽部分离肺炎链球菌共654株,流感嗜血杆菌669株.肺炎链球菌对青霉素不敏感(PRSP)率范围在14%～60%,2001年各地区发生率依次为上海55.0%、广州50.0%、西安45.0%、北京42.3%;与2000年相比,2001年部分地区如北京、上海青霉素中度敏感株明显增多.PRSP对β-内酰胺类、红霉素、复方磺胺甲基异唑耐药率明显高于青霉素敏感株(PSSP),且多重耐药率高达90%以上.北京、上海、西安地区分离株对阿莫西林/克拉维酸、头孢曲松仍具有很好的敏感性(96.6%～98.9%),而对头孢呋辛敏感性有不同程度下降,广州地区敏感率仅为59%,上海71%,而北京地区为92.3%,明显高于广州地区.2001年四地区分离株对头孢克洛总耐药率:广州地区耐药率高(56%),上海、西安次之(15%、13%),北京低(4.8%).四地分离株对红霉素耐药率高达75%～96%,其中以高度耐药(≥256 mg/L)为主,占80%～99%;2001年北京地区分离株红霉素耐药率87.9%,高于上海(80%)、广州(78%).肺炎链球菌四环素耐药情况与红霉素相近(60%～96%);复方磺胺甲基异唑耐药也很突出(68%～88%);而对氯霉素仍保持较低水平耐药(20%～30%).各地区流感嗜血杆菌对氨苄青霉素、氯霉素耐药保持较低水平(5%～16%),多数地区对其他β-内酰胺类抗生素有较好的敏感性(96%～100%) ,但2001年北京和广州对头孢克洛耐药已达12.7%和20% .对四环素、复方磺胺甲基异唑耐药率范围分别为11.3%～26.5%、37.5%～77.1%,各地区间耐药率略有差异.结论 四地区儿童上呼吸道感染肺炎链球菌和流感嗜血杆菌耐药形势严峻, PRSP已达中等水平,有逐年上升的趋势,并以红霉素、四环素、复方磺胺甲基异唑等多重耐药为主要特点.

重庆医科大学儿童医院1996～2001年抗生素使用情况分析

目的了解1996～2001年重庆医科大学儿童医院抗生素使用情况.方法收集3～5年间药品收入占全院业务收入比例、抗生素收入占药品收入比例、前13位畅销药等数据;另抽1 d调查门诊抗生素使用数量及途径、细菌学检查比例等情况.结果药品收入在全院总收入中所占份额持续维持在高水平,2001年有所下降;抗生素仍为医院使用多的药物:门诊处方中约62.3%含有抗生素,诊断为普通感冒的患儿62.0%左右接受抗生素治疗,几乎所有使用抗生素者均未进行细菌学检查.结论医院药品使用总体上虽有下降趋势,但抗生素滥用现象仍十分严重,从管理、宣传、学术等多方面着手遏制抗生素滥用势在必行.