异基因造血干细胞移植治疗儿童血液病的临床研究

目的评估异基因造血干细胞移植治疗儿童血液病的疗效及合并症.方法脐血移植(UCBT)治疗9例重症β地中海贫血(β-thal)、1例慢性特发性溶血性贫血(CIHA)、3例急性髓性白血病(AML-M3b、M2a、M5)及1例急性淋巴细胞白血病(ALL)合并中枢神经系统白血病;异基因外周血干细胞移植(allo-PBSCT)治疗5例β-thal及1例慢性粒细胞性白血病慢性期(CML-CP)患儿.同胞UCBT 8例中5例HLA相合(6/6),5/6为1例,3/6为2例.6例非血缘相关脐血移植(UD-UCBT)中4例为6/6,1例5/6,双份脐血混合者为5/6和6/6.allo-PBSCT中5例均为血缘相关,HLA相合同胞及1例5/6父亲供者.输入脐血(UCB)有核细胞数(NC)为7.5(3.4～19.4)×107/kg,外周血NC为9.39(2.5～14.4)×108/kg.结果血缘相关脐血移植(RD-UCBT) 8例中植入6例,其中排斥1例,死于肝静脉闭塞病(HVOD)1例,恢复地中海贫血状态2例;UD-UCBT中2例β-thal及2例AML均植入,1例AML-M5复发,AML-M3b自体恢复造血并完全缓解,1例AML-M2a死于巨细胞病毒间质性肺炎,1例ALL未植入,死于败血症.急性移植物抗宿主病(aGVHD)8例(80%),III度以上2例,广泛慢性移植物抗宿主病(cGVHD 2)例.β-thal总生存率为90%,无病存活率(EFS)为60%,平均生存时间为21个月(2～42个月).allo-PBSCT病例全部植入,cGVHD5例,III°以上者2例,广泛cGVHD 3例,死于HVOD 1例.EFS 5例,中位生存时间10个月(3～26个月).结论 UCBT及allo-PBSCT是治疗儿童血液病的有效方法,UD-UCBT首次成功治疗β-thal.

营养、肾病和糖皮质激素对大鼠肾脏IGF-1和IGFBPs mRNA表达的影响

目的探讨营养不良、肾病本身和糖皮质激素对大鼠肾脏IGF-1和IGFBPs mRNA表达的影响,阐明靶器官IGF-1和IGFBPs分泌紊乱与肾病综合征大鼠生长障碍的关系.方法 24只周龄相同体重相近的雄性SD大鼠被随机分成正常组、食物对照组、阿霉素(5 mg/kg)肾病组(肾病组)和地塞米松[1.8 mg/(kg*d)]治疗的阿霉素肾病组(激素治疗组).血清GH和IGF-1浓度测定用放射免疫法,肾脏IGF-1和IGFBPs mRNA表达采用RT-PCR法检测.肾脏GHR和IGF-1R检测采用放射性受体测定法(RRA).结果 (1)四组大鼠实验末时的鼻-尾长度及体重的增长按正常组、食物对照组、肾病组和激素治疗组依次减慢.(2)食物对照组大鼠血清GH浓度显著高于正常组,肾病组与正常组差异无显著意义,激素治疗组较肾病组显著下降.食物对照组和肾病组大鼠血清IGF-1较正常组明显下降,激素治疗组较肾病组进一步降低.(3)食物对照组大鼠肾脏IGF-1A mRNA表达(0.560±0.035)高于正常组(0.218±0.022),肾病组(0.376±0.027)也增高但却低于食物对照组,激素治疗组(0.188±0.023)较肾病组明显降低.食物对照组大鼠肾脏IGFBP-2 mRNA表达(0.478±0.019)与正常组(0.438±0.038)差异无显著意义,肾病组(0.316±0.032)减低,激素治疗组(0.186±0.009)较肾病组进一步下降.除激素治疗组肾脏IGFBP-3 mRNA表达明显外,余三组未见表达.(4)食物对照组、肾病组和激素治疗组肾脏GHR表达均低于正常组,但三组间差异无显著意义.肾脏IGF-1R表达四组间差异无显著意义.(5)血清GH浓度与肾脏IGF-1 mRNA表达、血清IGF-1浓度与肾脏IGFBP -2 mRNA表达,肾脏GHR表达与大鼠鼻-尾长度和体重均呈正相关.结论营养、肾病和糖皮质激素均能影响大鼠肾脏IGF-1和IGFBP3 mRNA表达,而靶器官肾脏IGF-1和IGFBPs分泌功能紊乱是肾病综合征生长障碍的重要发病机制之一.

儿童肺炎衣原体肺炎病原学检测及其临床应用

目的了解儿童肺炎衣原体(C.pn)肺炎的发病情况,探讨套式聚合酶链反应(nPCR)及微量免疫荧光(MIF)检测肺炎衣原体肺炎的临床意义.方法联合应用nPCR及MIF检测300例肺炎患儿及130例健康儿童,结果进行统计学分析,并随机选取2例nPCR阳性标本,进行DNA测序.结果检测300例肺炎中,nPCR阳性且MIF符合急性感染标准者30例,即确诊为肺炎衣原体肺炎,占肺炎总数的10.0%.nPCR阳性者42例占14.0%,MIF符合急性感染标准者31例,占10.3%,在年龄分布上,120例≤3岁者有16例nPCR阳性,阳性率13.3%,8例MIF符合急性感染标准,阳性率6.7%;180例>3岁患儿中26例nPCR阳性,阳性率14.4%,23例MIF符合急性感染标准,阳性率12.8%.130例健康对照组儿童中,nPCR均呈阴性,虽有24例MIF IgG≥1∶16(IgG滴度分别为1∶16～1∶128),但无一例符合急性感染标准.2例nPCR阳性标本nPCR产物之DNA序列与C.pn标准株(CWL-29)完全一致.结论肺炎衣原体是儿童肺炎重要的病原,nPCR诊断肺炎衣原体感染快速、简便、敏感、特异性高,联合应用nPCR及MIF可以提高诊断的敏感性和特异性.

我国六省(区)小儿脑性瘫痪患病率及临床类型的调查分析

目的调查我国1～6岁小儿脑性瘫痪(简称脑瘫)患病率及临床各种类型的分布状况. 方法 1997年5月～1998年8月,对我国黑龙江、河北、甘肃、江苏、四川省及广西壮族自治区进行调查,以乡(镇)为单位进行整体抽样,对抽样乡(镇)全部1～6岁小儿进行调查.在现场工作开始之前对所有参加调查的工作者进行统一培训,经考试合格后参加现场工作.资料经双重录入和统一清理后,在Pentium 133微机上用SAS 6.11 for Window软件 ,进行统计分析.结果共调查1～6岁小儿1 047 327人,其中脑瘫患儿2 009人,患病率为1 .92‰.在脑瘫各种类型中,痉挛型脑瘫多见,占53.56%;以下依次为肌张力低下型(13 .3 9%)、共济失调型(10.00%)、手足徐动型(4.63%)、震颤型(0.85%)、强直型(0.55%)、混合型 (12.44%)、分类不详(4.58%).2 009例脑瘫中,男1 266例,女743例,男∶女＝1.70 ∶1.结论本次调查结果大致能反映我国大陆地区小儿脑瘫的患病率为1.92‰.脑瘫的各种类型中以痉挛型多见.

异基因造血干细胞移植与异基因骨髓移植的比较

目的探讨异基因外周血造血干细胞移植的功效及并发症。方法自1991年2月-2000年2月，所有接受同胞或近亲异基因移植的患儿，分为外周血造血干细胞移植（ PBSCT)和骨髓移植（BMT）两组，纳入观察并进行比较。结果25例PBSCT与64例BMT的平均年龄无明显差异，PBSCT组的供者为一个位点不合的同胞或父母，占44%（11/25），较BMT组［ 只占9.4%（6/64）］ 为多（P<0.01）。PBSCT组的植入有核细胞数较BMT组高（11.7108/KG\7.05108/KG,P<0.01），而粒细胞植入速度亦较快（ 16.3D、19.4D,P=0.03），但血小板植入速度差异无显著性（均为3D ）。度或以上的急性移植物抗宿主病（GVHD）差异无显著性（32%、29.7%，P=0.83）。PBSCT组的慢性GVHD较BMT组为高（32.8%和9.6%），但如只限于人类白细胞抗原（HLA）全相合同胞移植，PBSCT组并未出现慢性GVHD。随访显示，两组的二年无病生存率差异无显著性（ 55%、73%，P=0.33 ）。白血病复发为其主要的死亡原因。结论 PBSCT的白细胞植入较快，且未增加急性或慢性GVHD，而无病生存率与BMT相近，HLA相合同胞可考虑作PBSCT移植。

免疫毒素去除脐血T细胞的效率及对免疫功能重建的影响

目的比较不同亚型抗体免疫毒素(IT)体外去除脐血T细胞的效率及其对髓系和淋巴系造血祖细胞增殖反应的影响.方法 (1)间接免疫荧光法测定脐血、外周血及富集干细胞的正常供者外周血中CD+2 、CD+3、CD+4、CD+5、CD+7、CD+8 T亚群细胞的含量;(2)直接免疫荧光法测定脐血CD-3CD+5T亚群细胞含量;(3)噻唑蓝(MTT)比色法分别观察三组抗人白细胞分化抗原的单克隆抗体(CD+2、CD+4、CD+7)与完整蓖麻毒素(ricin)耦联制备的三组免疫毒素(CD2ricin、CD4ricin、CD7ricin)对脐血T淋巴细胞转化功能的影响;(4)用造血祖细胞培养的方法分别观察三组免疫毒素对脐血粒单系造血祖细胞(CFU-GM)和T淋巴系祖细胞(CFU-TL)增殖反应的影响.结果 (1)脐血中含有一定比例的CD+2、CD+3、CD+4、CD+5、CD+7、CD+8 T亚群细胞,同时可检测到低比例的CD-3CD+5早期T细胞;(2)CD2ricin在10-10～10-8 mol/L,CD4ricin在10-8～10-7 mol/L,CD7ricin在10-9～10-8 mol/L均能有效抑制脐血T淋巴细胞的转化功能;(3)CD2ricin和CD7ricin在10-10～10-9 mol/L,CD4ricin在10-9～10-7 mol/L范围内对CFU-GM的增殖反应无显著影响;CD2ricin在10-10～10-9 mol/L,CD4ricin在10-8～10-7 mol/L浓度范围内对CFU-TL 的增殖有轻度的抑制作用; CD7ricin在10-10～10-8 mol/L 范围对CFU-TL的增殖有显著的抑制作用,不能作为去除T细胞的免疫毒素;(4)三组免疫毒素对CFU-TL的抑制作用均高于对CFU-GM的抑制作用.结论 CD2ricin、CD4ricin两种免疫毒素在一定浓度范围内可去除不同亚型的T细胞, 并且不影响其造血的恢复,但对免疫功能重建可能会产生一定的影响.

骨髓增生异常综合症-慢性粒、单核细胞白血病转化为急性淋巴细胞白血病一例

患儿男,8岁.因皮肤粘膜苍白,全身淋巴结肿大2个月于2000年4月入院.体检:体温:36 .5℃ ,慢性病容,精神差,皮肤苍白,无明显出血点.颈部、腹股沟浅表淋巴结肿大,约2 cm× 2 cm,活动可,无压痛.心音有力,心率84次/min,律齐,无杂音;两肺听诊无异常.腹部隆起,肝在右肋锁骨中线下3 cm,质中,无结节;脾肿大脐下5 cm,甲丙线2 cm,丁戊线3 cm,表面光滑,右侧边缘可触及切迹.四肢无畸形.血常规:Hb 56 g/L,RBC 2.76×10 12/L,WBC 4.7×109/L,分类 L 0.34,N 0.46,M 0.18(原单 0.10).骨髓象:有核细胞增生活跃,粒系0.51,红系0.15,单核细胞增生明显为0.20,其中原单0. 15,幼单0.05,红系各阶段细胞均可见巨幼样变,粒系分叶核多见Pelger huet畸形.巨核细胞及血小板少见,PAS(+);核型46XY.拟诊:骨髓增生异常综合征-慢性粒、单核细胞白血病(MDS-CMMoL),予以全反顺式维甲酸(ATRA)诱导治疗,剂量30 mg/d.1个月后复诊,皮肤散在出血点,肝、脾淋巴结肿大同前.血象:Hb 54 g/L,RBC 1.89×1 012/L,PLT 29×109/L,WBC 3.7×109/L,分类:N 0.42,L 0.39;原、幼淋 0.18、0.01.骨髓象:粒系 0.35,中幼至杆状核阶段0.24,红系占0.08,部分巨幼样变,淋巴细胞比例为0.66,其中原、幼淋占0.38,胞体大小不一致,核染质呈颗粒状 ,胞浆嗜碱性,偶见空泡;巨核细胞、血小板少见;组织化学染色:POX阴性,氯乙酸酯酶染色(CE)阴性,酸性酯酶(ANA E)阴性.遂更正诊断为ALL,给予DA(柔红霉素即DNR;阿糖胞苷即Ara-C)方案化疗,DNR 20 mg/d,Ara-C 150 mg/d,期间配合促红细胞生成素(EPO)和粒细胞集落刺激因子(G-CSF ),经2疗程强化治疗,骨髓象完全缓解,但外周血持续可见幼稚细胞,血常规不能恢复正常,临 床评判为部分缓解(PR).

t(15;17)小儿急性淋巴细胞白血病一例

患儿女,3岁.入院前3个月无明原因前额出现一黄豆大小的包块,突出表皮,表面青紫,质硬,无压痛.在当地医院行包块切除术,在我院病理科诊断为急性淋巴细胞白血病,淋巴母细胞性淋巴瘤侵犯入我院.体检:前额有一约2 cm长的瘢痕,双腹股沟可触及数个黄豆大小的淋巴结,肝右肋缘下3 cm,质中,脾左肋缘下1 cm,质中.双膝关节压痛.血常规:WBC 8.9×109/L,淋巴细胞0.73,幼稚细胞0.12,原始粒细胞0.04,中性分叶核细胞0.05,中性杆状核细胞0.01,成熟单核细胞0.03,中幼红细胞0.02,网织红细胞0.002;RBC 2.98×1012/L,Hb 89 g/L;PLT 82×109/L.

脐血的采集和分离及有核细胞的富集

脐血中富含造血干/祖细胞,是骨髓和外周血后的第三种造血干细胞的来源[1].脐血的采集、分离和保存方式对单个核细胞(MNC)和CD+34细胞的回收有一定的影响.分析不同性别、胎龄、胎次和体重的胎儿脐血量、MNC数,以及脐血采集后处理方式对MNC和CD+34 细胞的影响,有助于脐血临床移植和建立脐血库.

同胞脐血移植治疗儿童急性白血病二例报告

异基因骨髓移植是儿童高危白血病有效的治疗方法.目前,由于家庭的缩小,同胞骨髓移植受到一定的限制,脐血中含有大量的造血干细胞,且具有来源广泛、采集方便、移植物抗宿主反应轻及污染率低等优点[1],越来越受到人们的重视.我们应用人类白细胞抗原(H LA)相合的同胞脐血移植治疗1例急性单核细胞白血病及1例恶性淋巴瘤Ⅳ期患儿,报道如下 .病例和方法1. 病例 :例1男,9岁.1997年11月因发热、咽痛伴进行性苍白、乏力10 d入院,经骨髓检查确诊为AML-M5b.住院后经DA(柔红霉素、阿糖胞苷)方案化疗1个疗程后缓解.脐血移植前已完全缓解20个月,移植前1周采集自体骨髓备用.移植前体重31 kg,浅表淋巴结不肿大; 心、肺正常,肝脾不大;外周血、骨髓及脑脊液检查均示完全缓解(CR).例2男,11岁, 体重50 kg.1998年10月经淋巴结活检确诊为恶性淋巴瘤Ⅳ期(B细胞来源,伴骨髓侵犯,原幼淋占98%).经VDLP(长春新碱、柔红霉素、左旋门冬酰氨酶、泼尼松)方案诱导,第14 天复查骨髓完全缓解,第21天出现蒽环类药物所致的心肌损害,用地高辛维持4个月.曾进行颅脑放疗(18 Gy).脐血移植前骨髓完全缓解已17个月.

胚胎干细胞及细胞工程研究的新进展

干细胞是指具有自我更新、高度增殖和多向分化潜能的一类细胞,它所产生的子代细胞与其具有相同的基因型和表现型.作为"种子细胞”的干细胞可以通过细胞工程的方法在体外发育为各种特异性的细胞供移植和细胞替代所需,并可作为基因疗法的靶细胞用于治疗和研究.由于干细胞有广泛的应用前景,它已成为近年来医学和生物学领域研究的热点.20世纪90年代以来,随着细胞生物学技术的发展及体外分离、培养人胚胎干细胞的成功,干细胞经适当诱导分化可发育为不同类型的细胞、组织和器官,成为移植供体的新来源,由此掀起了干细胞研究的新一轮热潮.

大型室间隔缺损合并肺动脉高压术后远期疗效的随访

先天性心脏病(简称先心病)左向右分流合并重度肺动脉高压术后可复性问题一直是临床关注的焦点.手术矫正心内畸形后,如肺动脉高压不能恢复,甚至加重则失去了外科治疗的意义.有关手术的疗效和手术适应证的选择,国内外均有些报道,但缺乏肺动脉高压血流动力学长期随访的资料.我们通过对24例大型室间隔缺损合并重度肺动脉高压(全肺阻力增高)患儿进行术前及术后长期血流动力学的随访,旨在了解手术对这些患儿肺动脉高压的远期疗效.

免疫干预在实验性自身免疫性甲状腺炎发病中的作用

近年来自身免疫性甲状腺炎（AIT）发病有增高的趋势。由于AIT的危害较大，目前无有效的治疗方法。故我们观察了联合应用小剂量的环孢菌素A（CSA）和1,25(OH)2D3进行免疫干预，对实验性自身免疫性甲状腺炎（EAT）的作用。报告如下。材料和方法

人类白细胞抗原1个位点不合无关供者脐血移植治疗急性髓性白血病一例

2000年5月,我们应用广州脐血库提供的一份人类白细胞抗原(HLA)1个位点不合无关供者脐血进行移植,治疗1例急性髓性白血病(AML)患儿,现无病存活.报告如下.

儿童脐血造血干细胞移植的进展和对策

1988年Gluckman等首先成功地以人类白细胞抗原（HLA）……

第103例--反复咳嗽、咯血三年余

病历介绍患儿男,4岁,因反复咯血3年余入院.3年多前,患儿9个月,游玩时突然剧烈咳嗽,咯泡沫样鲜血一口,次日在当地住院,胸X线片显示:右侧中等量胸腔积液,右下肺模糊片影,肺门不宽,心影不大.胸腔穿刺为血性胸水,胸水普通细菌培养阴性,结核菌培养阴性,未找到肿瘤细胞.患儿一般情况好,无发热,经持续闭式引流,并给予止血敏,抗生素治疗20 d,咯血停止,胸腔积液消失,胸X线片复查右下肺片影有所吸收.出院后曾于剧烈活动或咳嗽后咯血丝4～5次,每次发作持续1～3 d,无其他伴随症状,曾于外院行气管镜检查未成功.此次于7 d前追跑后咯泡沫样鲜血40 ml,以咯血原因待查收住北京儿童医院.既往无咯血史及类似家族遗传病史.

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婴幼儿重症肺炎可以发生心力衰竭

婴幼儿重症肺炎(简称肺炎)确实可并发心力衰竭(简称心衰),这是经全国广大儿科工作者近40年的临床、实验室检测和病理学检查所证实的.远在1958年麻疹肺炎在我国北方流行,据记载病死率达30%左右.分析死因时则知,危重患儿眼睑及下肢有水肿,尿少.经尸检发现有肝大、肺水肿、心脏增大,证实有急性心衰.从此以后临床上对此类患儿给予快速洋地黄制剂治疗,患儿呼吸困难减轻,心率减慢,肝脏缩小…….自此国内儿科界对肺炎并发心衰有了初步认识.经毛地黄类强心药物治疗使肺炎并发心衰患儿的病死率明显下降,其后在1964年第六届全国儿科学术会议上得到了与会代表的共识,并在会议上首次制定了肺炎并发心衰的诊断标准,填补了以前教科书、杂志以及医学论文有关肺炎并发心衰的空白.该诊断标准经多年临床应用又几经修改,在1985年全国儿科会议修订后制定了<关于婴幼儿肺炎并发心力衰竭的诊断标准>,并沿用至今.可以认为肺炎并发心衰是我国儿科工作者在小儿肺炎诊治领域内的再认识与发展.

我对杨思源教授观点的意见

杨思源教授撰文之意是坚持"婴幼儿重症肺炎并无心衰”的观点.此话题在国内儿科,尤其小儿心血管及呼吸专业,争论已由来已久,各持己见,莫衷一是.并于多次专业组学术会议上,开展辩论.应该说:国内儿科界,包括临床医生和专家,大多数赞成"有”,仅少数坚持"非”.本人意见如下:1. 并非所有国外文献均无肺炎心衰的报道.如Rosanelli等[1]认为婴幼儿肺炎可引起急性肺源性心脏病和心力衰竭.前苏联学者Мампееве在观察133例各类型肺炎患儿心电图和电解质改变时,注意到21例有右心衰竭,14例有左、右心衰竭.Navarro等[2]分析71例婴幼儿重症肺炎的死因,有6例死于心力衰竭.Angel等[3]曾观察到3只患肺炎的小牛出现右心衰.Mishera等[4]研究100例婴幼儿重症肺炎,认为心力衰竭是常见的并发症,由Henry、Kempe等所著的(1987年第9版)一书中,在描述细菌性肺炎合并症时,也提到了心衰.

再说肺炎心衰

1."心衰是在有足够的回心血量的条件下,由于心脏本身的原因心搏出量不足所致”.回心血量既然足够而搏出量减少,心腔内必有超常的积余,心脏于是增大,舒张末期压必高.临床上先心病、风心病、冠心病、肺心病、高血压性心脏病等衰竭时心脏都大,独有肺炎心衰时心脏不大,令人难以置信.肝大为心衰的表现,但这必须有心大为前提.肺炎时肝静脉回右房并无梗阻,如无心大,表明右心能将回心血有效泵出,没有积余,何衰之有?20世纪70年代北美亦曾流行腺病毒肺炎,Ladisch等[1]报道的3例肝大尸检结果表明,有一些死亡者肝病变在镜下宛如Reye综合征;心肌亦有病变,但心脏不大,生前死后都未提有心衰.至于心率快伴肝大并不能诊断合并心衰,婴儿心率时变,Garson见一脓毒血症窦性心动过速超过250次/min,亦不诊有心衰.

关于支气管肺炎患儿心功能状态的一点看法

支气管肺炎是婴幼儿时期的常见病和多发病,严重危害着小儿的身心健康.我国提出心力衰竭是重症支气管肺炎合并症的概念已有几十年的历史,但是关于重症支气管肺炎是否合并心力衰竭,多年来在国内外学术界存在着许多争议.一些学者认为重症肺炎时,并不存在真正的心力衰竭,病人所出现的心率增快、烦躁、水肿及肝脏肿大等一系列表现是由循环系统充血所致.另一些学者则认为上述症状是重症肺炎并发心力衰竭的表现,并认为重症肺炎时心功能受损的主要原因与心肌的缺氧、肺动脉高压及心肌炎等因素有关.从理论上讲,心力衰竭是指在静脉回流正常的情况下,心脏收缩和舒张功能受损,虽经发挥代偿能力后,仍不能维持足够的心排血量,导致静脉回流受阻,体内水分潴留、脏器淤血,产生一系列的临床症状和体征的综合征.针对重症婴