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中国中药

中国中药杂志

China Journal of Chinese Materia Medica 중국중약잡지

CSCD核心期刊
  • 主管单位: 中药通报
  • 主办单位: 中国科学技术协会
  • 影响因子: 1.71
  • 审稿时间: 1-3个月
  • 国际刊号: 11-2272/R
  • 国内刊号: 李禾
  • 发行周期: 半月刊
  • 邮发: cjcmm2006@188.com,
  • 曾用名: 中药通报
  • 创刊时间: 1955
  • 语言: 英文
  • 编辑单位: 中国药学会
  • 出版地区: 北京
  • 主编: 中国中药杂志编辑部
  • 类 别: 中药学
期刊荣誉:
  • 黄芪甲苷的生物样品稳定性考察及在大鼠体外肠菌中代谢转化研究

    作者:孙桂霞;赵园园;苗培培;杨晓燕;苗青;李静;薛宝娟;苏谨;张玉杰

    为明确黄芪甲苷(AST)在生物样品中的稳定性和在大鼠体外肠菌代谢转化产物及代谢途径.本实验采用体外的方法对AST在人工胃液、人工肠液及大鼠肝匀浆中的稳定性以及大鼠离体肠道菌群中的代谢产物进行探讨.采用HPLC法测定AST在生物样本中的含量,计算AST在生物样本中的剩余百分率.采用TLC,HPLC和LC-MS/MS相结合的分析手段,鉴定代谢产物.结果发现,AST在人工胃液、人工肠液及肝脏中均较稳定,不易代谢;AST肠道菌群的代谢是通过脱糖基逐级进行的.首先,失去3位木糖基转化成次生代谢产物环黄芪醇-6-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(CMG).然后,失去6位葡萄糖基得到极性更小的皂苷元环黄芪醇(CAG).研究结果表明AST在体内主要在肠道代谢,发生糖基水解作用.即肠道菌群的水解作用是AST代谢的主要原因.

  • 赤芝孢子粉和子实体主要化学成分变异规律研究

    作者:李静静;胡晓琴;张新凤;刘京晶;曹隆枢

    目的:揭示产地、品种、采收部位和潮次、破壁技术对赤芝孢子粉和子实体中总三萜、总多糖、总蛋白含量的影响.方法:收集龙芝1号、沪农1号、市售赤芝孢子粉和子实体,分别采用硫酸-蒽酮比色法、香草醛-冰醋酸比色法和Lowry法测定其中总多糖、总三萜、总蛋白的含量.结果:全国6个主产区的破壁孢子粉总多糖为0.40%~2.25%,总三萜为1.36%~3.15%,总蛋白为0.74% ~1:91%;浙江主栽赤芝品种子实体总多糖、总三萜、总蛋白质量分数分别为0.25% ~ 1.42%,0.44% ~ 1.42%,1.82% ~ 3.67%,未破壁孢子粉分别为0.41% ~0.91%,0.09% ~0.12%,0.78% ~0.90%,破壁孢子粉分别为1.03 ~2.25%,1.89% ~3.15%,0.96%~1.04%.结论:全国不同主产区的灵芝破壁孢子粉化学成分含量存在显著差异,浙江产区总多糖和总三萜含量较高,福建产区总蛋白含量较高;浙江主栽赤芝品种龙芝1号总三萜含量较高,沪农1号总多糖含量较高;破壁孢子粉中总三萜与总多糖含量高于子实体,子实体菌柄中总多糖含量大多高于菌盖,菌盖中总三萜含量显著高于菌柄;2潮采收的菌盖和菌柄中总多糖含量高于1潮相应的部位,但总三萜含量大多低于1潮;孢子粉破壁可显著提高总三萜和总多糖的提取和溶出率.

  • 3种不同基原藏药沙棘的1H-NMR代谢组学研究

    作者:苏永文;谭尔;张静;游佳莉;刘悦;刘川;周向东;张艺

    运用1H-NMR代谢组学方法,建立藏药沙棘的氢核磁共振指纹图谱,明确不同基原之间的整体代谢物差异,为其质量评价提供新方法.利用核磁共振仪测定不同基原的沙棘药材,将所得自由衰减信号导入MestReNova软件进行分段积分,数据归一化后进行主成分(PCA)分析和偏小二乘法(PLS-DA)分析,结果显示3种不同品种沙棘能够明显分开,L-白雀木醇、苹果酸和部分未鉴定的糖类成分是引起3个品种分类的差异代谢物.该研究鉴定出25个代谢产物,包括黄酮类、三萜类、氨基酸类、糖类、脂肪酸类等成分.1 H-NMR分析方法具有整体性的特征,并且样品制备简单、分析快速、重复性好,建立的指纹图可以为藏药沙棘药材的质量控制与评价提供参考依据.

  • 茉莉酸甲酯对高山红景天愈伤组织中红景天苷和多糖积累的影响

    作者:李阳;廉美兰;邵春绘;金婵;朴炫春

    目的:探明茉莉酸甲酯(MeJA)对高山红景天愈伤组织生物量及有效物质积累的影响,旨在为其产品生产提供一种新的材料来源.方法:在3L气球型气升式生物反应器内培养高山红景天愈伤组织20 d后添加MeJA,研究了MeJA处理时间及浓度对愈伤组织生物量、红景天苷和多糖积累及超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化物酶(POD)活性的影响.结果:用125 μmol·L-1的MeJA处理时发现0~6d愈伤组织生物量无明显变化,但超过6d后显著减少,MeJA处理4d时红景天苷和多糖的含量及生产量高,同时SOD和POD活性达大.MeJA浓度对愈伤组织生物量和活性物质积累影响很大,浓度超过125 μmol·L-时愈伤组织生物量明显减少;红景天苷和多糖的大积累量分别出现在225,275 μmol·L-1的MeJA浓度处理.对SOD和POD活性测定结果发现,在MeJA 225 μmol·L-1处理中出现峰值.对高山红景天愈伤组织中红景天苷及多糖含量与野生植株进行比较的结果,愈伤组织中红景天苷和多糖含量显著高于植株的根和茎叶,愈伤组织中红景天苷的含量分别是根、茎叶的1.1倍、2.4倍;多糖含量分别是根、茎叶的3.6,8.0倍.结论:高山红景天愈伤组织在气球型气升式生物反应内培养20 d后加入225 μmol·L-1的茉莉酸甲酯后继续培养4d有利于红景天苷及多糖的积累,且这两种活性物质的含量明显高于野生植株.因此,通过生物反应器培养愈伤组织是一种获得大量高山红景天活性物质的有效方法,可作为高山红景天产品生产的另一原材料来源.

  • 红大戟中的蒽醌和三萜类化学成分

    作者:洪一郎;马丽;王垣芳;孙居锋;侯桂革;赵峰;韩景田;王春华

    运用硅胶、MCI、Sephadex LH-20柱色谱及半制备型HPLC等色谱方法,从红大戟95%乙醇提取物中分离得到9个化合物,通过理化性质和NMR、MS等波谱数据鉴定化合物的结构为1,3-二羟基-2-羧基-9,10-蒽醌(1),1-甲氧基-3,6-二羟基-2-羟甲基-9,10-蒽醌(2),1,2,3-三羟基-9,10-蒽醌(3),阿江榄仁酸(4),2α,3β,24-三羟基齐墩果-12-烯-28-酸(5),2α,3β,19α,24-四羟基乌苏-12-烯-28-酸(6),2α,3β,24-三羟基乌苏酸(7),2α,3β,23-三羟基乌苏-12-烯-28-酸(8)和胡萝卜苷(9).化合物1~9均为首次从该属植物中分离得到.

  • 杜仲雄花中三萜类化学成分研究

    作者:丁艳霞;王腾宇;张耀文;黄玉梅;马琳;李冬冬;窦德强;李钦

    该研究采用正相硅胶柱色谱,反相柱色谱(RP-18),凝胶色谱(Sephadex LH-20)以及重结晶等多种分离纯化手段,从杜仲雄花中分离得到9个化合物,通过化合物的理化性质和光谱数据鉴定其结构分别为:3-oxo-12-en-ursane-28-O-α-L-arabinofuranosyl(1→6)-β-D-glucopyranoside(1),2α,3β-dihydroxyurs-12-en-28-oic acid(28→1)-β-D-glucopyranosyl ester(2),熊果酸(3),α-香树脂醇(4),熊果醇(5),3-O-乙酰基熊果酸乙酸酯(6),3-O-乙酰基齐墩果酸(7),白桦脂酸(8),白桦脂醇(9).其中化合物1为新化合物,化合物2,4~7为首次从该科植物中分离得到.采用MTT法对所分离的9个化合物进行抗肿瘤活性测试,结果表明仅有化合物3对K562和HepG2细胞显示出一定的抗肿瘤活性,其余化合物对所选的2种细胞均无明显活性.

  • 穿心莲UPLC-PDA指纹图谱研究及4种内酯类成分含量测定

    作者:黄竞怡;刘小琳;周水平;佟玲;丁黎

    分析研究不同部位及产地穿心莲药材,为穿心莲相关制剂工艺提供依据.以穿心莲内酯峰为参照,确定了27个共有指纹峰,建立了23批穿心莲药材的UPLC-PDA数字化定量指纹图谱,特征提取后对其进行主成分分析(PCA);采用外标法测定23批穿心莲药材中穿心莲内酯、新穿心莲内酯、去氧穿心莲内酯、脱水穿心莲内酯成分含量,并采用Plackett-Burman试验设计结合pareto图研究耐用性因素对方法的影响.结果发现,穿心莲药材部位比产地对药材质量的影响更显著;药材不同部位4种内酯含量差异大;流动相pH是影响方法耐用性较大的因素.

  • 生物样品前处理的研究进展

    作者:冯健男;杜守颖;白洁;陆洋;刘慧敏

    合适的生物样品前处理技术可以真实地反映被测组分在机体内的作用规律,将为药物在体内的代谢过程、药效物质基础、作用机制、药理、毒理学等研究提供实验依据.生物样品包括血样、尿液、头发、泪液等,样品处理方法也很多,有直接的沉淀蛋白、液液萃取、固相萃取等,可以单独使用,也可以结合起来使用.

  • 中药饮片体内过程分析研究进展

    作者:陈建红;刘慧;姚蓝;陈影;麻印莲;顾雪竹;张村

    中药饮片位居中药产业链的核心,它直接影响中成药和临床配方饮片的临床疗效和安全性.通过研究中药饮片炮制前后体内有效成分的变化,进而阐明中药饮片药效物质及其饮片炮制原理的科学内涵是中药炮制发展的重中之重.传统的研究方法对中药饮片研究主要集中在饮片炮制过程中体外化学物质的变化规律,并不能深入揭示中药饮片功效变化的整体性和复杂性,因此研究中药饮片药效物质在体内的变化过程是今后研究的重点.该文简述了中药药效物质基础研究、中药饮片药效物质体外研究现状,并对中药饮片体内动态变化过程的分析方法如血清化学、药代动力学、代谢组学等方面进行了系统地讨论分析,指出了中药饮片效应物质在体内过程分析研究的进展与相关问题,为深入阐释中药饮片炮制机制提供了研究思路和方法.

  • 雷公藤抗炎免疫调节活性单体的研究进展

    作者:李春杏;李太生;朱珠;谢静;吕玮

    雷公藤化学成分复杂,为调研和概述雷公藤中主要已知单体成分的抗炎免疫调节活性和毒性以及药动学研究进展.作者检索了国内外近30年来关于雷公藤及雷公藤中单体成分药理学、毒理学和药代动力学研究的相关文献.研究证明雷公藤甲素等10多个成分具有抗炎和免疫调节作用.雷醇内酯、雷公藤碱戊、雷公藤内酯酮、去甲泽拉木醛更具有进一步药理学和毒理学研究的价值.

  • 常用辛香料的化学成分和药理活性研究进展

    作者:孙超男;朱源;徐希明;余江南

    辛香料植物的应用历史悠久,遍布世界各地.除之于食品烹调的调味作用外,其药用价值也常为人们津津乐道.辛香料的化学成分十分复杂,现有研究显示其在抗氧化、抑菌、抗肿瘤及调节消化系统和心血管系统等方面均具有重要作用.针对目前国内外辛香料个体研究日益增多,而其化学成分和药理活性(尤其是其作用机制)的系统研究仍不多见的现状,该研究对近几年常用辛香料的化学成分和上述药理活性方面所涉及的系统研究成果和有代表性的个体作用机制研究成果进行综述,并从中归纳出具有药用前景的辛香料类化合物,如胡椒碱、姜黄素、京尼平苷、桂皮醛、桂皮酸、芳樟醇、甲基胡椒酚、紫苏醛、丁香酸和藏红花素等,为进一步地开发和利用该类植物提供依据.

  • 桑黄抗肿瘤及其作用机制的研究进展

    作者:高雯雯;张娜;俞淑文

    桑黄(phellinus)作为一种名贵的真菌类药材,具有抗肿瘤、抗肝纤维化、抗氧化等多种生理功能.桑黄含有多糖类、甾体类、萜类、黄酮类、吡喃酮类、呋喃类、生物碱类等物质.其中多糖类提取物具有明显抗肿瘤作用,成为当前抗癌药物研究的热点;桑黄的其他提取物如乙酸乙酯提取物等也表现出抗癌活性.该文综述桑黄不同提取物的抗肿瘤作用,着重介绍其抗肿瘤机制的研究进展,为进一步开发桑黄奠定基础.

  • 丹参类贝壳杉烯氧化酶(SmKOL)基因全长克隆及其生物信息学分析

    作者:胡雅婷;高伟;刘雨佳;程琪庆;苏平;刘玉忠;陈敏

    根据丹参转录组数据提供的基因片段设计特异引物,采用RACE方法克隆类贝壳杉烯氧化酶(SmKOL)全长cDNA,并进行生物信息学分析;采用实时定量PCR检测茉莉酸甲酯(MeJA)诱导丹参毛状根不同时期的SmKOL表达水平.克隆得到的SmKOL全长cDNA由1 884个核苷酸组成,具有完整编码框,编码519个氨基酸,蛋白相对分子质量约为58.88 kDa,等电点pI 7.62;实时定量PCR结果表明该基因受MeJA诱导后,表达水平在36 h时达到大值.从丹参毛状根中克隆得到1条SmKOL全长cDNA,为进一步研究该基因的功能和丹参次生代谢调控机制提供了靶基因.

  • 基于表型性状和药材品质的8个贵州太子参品系的筛选与评价

    作者:熊厚溪;周涛;江维克;陈敏;宦翠翠;康传志;杨昌贵;肖承鸿;廖明武

    目的:运用单株选育法,对目标太子参单株进行株系比较试验,为太子参新品种的选育提供种质材料.方法:以施秉SB-4号种源的8个太子参单株为选育对象,观测植株的27个表型性状、8个产量性状,UV分光光度计检测各株系的多糖含量.对观测结果运用因子分析法进行比较和筛选,单因素方差分析对其药材中多糖含量进行评价.结果:因子分析将27个表型性状归属于7个主因子,其中ZT-01,ZT-02,ZT-06,ZT-07株系的综合表型性状较好;8个产量性状可简化为新的3个主因子,以ZT-01,ZT-02,ZT-03,ZT-07株系的综合产量性状较好;单因素方差分析显示,ZT-01,ZT-02,ZT-05,ZT-08株系的多糖含量显著高于ZT-03,ZT-04,ZT-06,ZT-07株系.结论:从表型性状,产量性状和品质性状综合考虑,ZT-01,ZT-02,ZT-03,ZT-06,ZT-07表现优良,其中ZT-01,ZT-02株系可作为重点扩繁株系进一步选育;ZT-06,ZT-07株系的株型,主茎节数等表型性状好,可以作为观赏品种选育;ZT-03株系的抗性好,产量高,可以作为抗性品种进行选育研究;ZT-05株系的多糖含量高,翌年继续进行单株筛选.

  • 药用牡丹种子质量检验方法的研究

    作者:曹亚悦;朱再标;郭巧生;刘丽;王长林

    该文参考国际植物种子检验规程和农作物种子检验规程的方法,测定了不同产地药用牡丹种子质量,探索药用牡丹种子质量检验方法,为制定药用牡丹种子检验规程和质量标准提供依据.初步建立了药用牡丹种子质量检验方法,药用牡丹种子净度分析送检样本少7 000 g,试验本少700 g;真实性鉴定采用种子外观形态比较;千粒重测定采用百粒法;含水量测定采用低恒温烘干法10h;室温清水浸泡24h,黑暗条件下昼夜变温层积(20℃,12 h和25℃,12 h)60 d后,用300 mg·L-1 GA3浸泡种子24 h,以砂中作为发芽床,在15℃光照条件下萌发,发芽首末次计数时间为12 ~60 d;生活力测定采用TTC染色法.

  • 分离培养方法结合PCR-SSCP技术分析六神曲中的真菌类群

    作者:陈娟;焦晓林;杨春勇;宋美芳;高微微

    目的:采用传统分离培养方法结合PCR-SSCP技术对六神曲中的真菌类群进行分析,为全面了解六神曲中的功能菌群奠定基础.方法:采用直接分离法获得六神曲中的可培养真菌,根据形态学及DNA序列特征对得到的真菌进行鉴定;同时提取六神曲中真菌的总DNA,采用基于β-tubulin基因片段的聚合酶链式反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)技术分析其中所包含的真菌种类.结果:采用传统分离培养的方法,从生神曲中只得到黄曲霉Aspergillus flavus和米根霉Rhizopus oryzae;从焦神曲中得到黄曲霉A.flavus和黑曲霉A.niger.PCR-SSCP分析结果显示生神曲中含有3属5种真菌,其中A.ambiguus 以及A.ivoriensis占优势,相对多度分别为57%,35%,与培养方法共有的种类为A.flaw,相对多度仅为4%;但未从焦神曲中获得阳性克隆.结论:在六神曲中的真菌多样性分析中,通过PCR-SSCP分析技术能从DNA水平上发现传统分离培养方法无法获得的真菌种类,结合2种方法可以更全面地解析参与六神曲发酵的功能真菌.

  • 铁皮石斛附生树种对多糖含量的影响

    作者:郭英英;诸燕;斯金平;刘京晶;吴呈勇;李晖

    为了揭示附生树种对铁皮石斛多糖含量的影响,通过采集野外与设施地不同树种上附生的铁皮石斛,并用苯酚-硫酸法测定铁皮石斛多糖含量.结果表明,不同附生树种铁皮石斛多糖含量差异极显著,但多糖含量与附生树种树皮形态、树皮中的营养相关性不显著,而与附生树种上铁皮石斛接受的光强有关.树种通过对光照调控的生物特性对其附生的铁皮石斛多糖含量产生的影响.

  • 欧李种子质量检验规程及分级标准研究

    作者:文浩;任广喜;高雅;罗隽;刘春生;李卫东

    欧李作为郁李仁的重要基原之一,到目前为止,其种子质量检验规程和分级标准仍未建立.该研究通过对欧李种子进行扦样、净度、千粒重、含水量、生活力和发芽率等指标测定条件的研究,建立了适合欧李种子自身特点的检验规程.用建立的检验规程对50份取自不同欧李主产区的欧李种子进行检验,通过聚类分析制定了欧李种子的质量分级标准.终将欧李种子分成3个等级:1级种子的发芽率≥68%,千粒重≥383 g,净度≥94%,含水量≤5%;2级种子发芽率≥26%,千粒重≥266 g,净度≥73%,含水量≤9%;3级种子发芽率≥10%,千粒重≥208 g,净度≥50%,含水量≤13%.

  • Pb2+胁迫对冬凌草种子萌发和幼苗生长的影响

    作者:孔四新;苏贺;詹延廷;李海奎;崔旭盛;郭玉海

    以冬凌草种子为材料,研究铅(Pb2+)溶液(0,135,270,540,1080mg·L-1)对冬凌草种子萌发和幼苗生长的影响.结果表明:①低浓度Pb对冬凌草种子萌发无显著影响,Pb质量浓度135 mg·L-1条件下的种子发芽势高于对照,发芽速度快于对照,但差异均不显著;中高质量浓度Pb (270 ~1 080 mg·L-1)对种子萌发有显著的抑制效应,随着Pb浓度的升高,种子发芽率、发芽势和发芽指数呈递减趋势,均显著低于对照(P<0.05),发芽率比对照低23.97% ~ 55.37%.②低质量浓度Pb(135 mg·L-1)条件下,冬凌草幼苗生长活力指数低于对照,但差异不显著;中高质量浓度Pb (270 ~1 080 mg·L-1)对幼苗生长有显著抑制效应(P<0.05),胚根长、胚芽长、生物量、生长活力指数均显著低于对照;胚芽和胚根生长受Pb胁迫,其中胚根生长受抑制程度大于胚芽,胚根长比对照低43.09% ~ 100%.③冬凌草Pb富集系数为0.76 ~2.59,随Pb浓度增高而增大;Pb生物富集是抑制幼苗生长的主要原因.④经拟合模型预测分析,比对照发芽率和生物量鲜重降低10%的Pb临界质量浓度分别为195.18,101.65 mg· L-1.

  • 滴水珠原生质体的分离纯化与植株再生

    作者:杨仙;马丹丹;蒋福升;陈铌铍;丁滨;金丽霞;钱朝东;丁志山

    以滴水珠的幼嫩叶片为材料,对影响原生质体分离纯化、培养及植株再生的因素进行了研究.结果表明:适合滴水珠叶片的酶解体系为13% CPW(细胞原生质体洗液)+1.0%纤维素酶+0.1%果胶酶,pH 6.0,适宜酶解温度为25 ~28℃,酶解时间为4h;滴水珠叶肉原生质体纯化以上浮法蔗糖梯度离心效果佳,以25%的蔗糖做梯度材料,500 r·min-1离心10 min;用于培养滴水珠原生质体的培养基为MS +0.5 mg·L-1 6-BA +0.25 mg·L-1NAA 13%甘露醇,培养3d有细胞分裂启动迹象,30 d左右形成愈伤组织,转移至MS +0.5 mg.L-16-BA+0.25 mg· L-1NAA固体培养基上增殖培养,并继代数次,5~6个月后愈伤组织可分化出芽并再生植株.

  • 黄连须根浸提液对土壤微生物及酶活性的影响

    作者:李阳波;何林卫;张薇;吴叶宽;袁玲;黄建国

    黄连Coptis chinensis是大量使用的中药材,连作障碍严重.试验在供试土壤中加入不同浓度的黄连须根浸提液(REC),研究了它们对土壤微生物和酶活性的影响.结果表明,在加入REC的土壤中,微生物碳氮量显著降低,细菌和放线菌比对照降低约60%,但真菌增加3倍左右.自生固氮菌、磷细菌、钾细菌、硝化细菌和氨化细菌均显著减少,说明土壤固(供)氮、溶磷、解钾、促生等功能受到抑制.REC对土壤酶活性的影响表现出多样性,提高转化酶活性,降低脲酶活性,对脱氢酶活性无显著影响,妨碍了土壤生物化学反应的有序进行.此外,REC减少微生物标记性磷脂脂肪酸(PLFAs)种类,降低PLFAs总量,提高真菌/细菌PL FAs比值,说明REC在抑制细菌繁殖生长的同时,相对的增加了真菌数量,致使后续作物容易发生真菌病害.REC还显著降低土壤微生物群落的多样性和均匀度指数,说明加入REC恶化了土壤生态环境,使微生物种群减少,密度降低.因此,在黄连生长过程中,根系分泌的化感物质可能改变土壤微生物种群结构,造成连作障碍.

    关键词: 黄连 土壤 微生物
  • 基于ITS2序列鉴别前胡和紫花前胡药材及其混伪品

    作者:侯典云;宋经元;杨培;周红;辛天怡;姚辉

    为应用ITS2序列对前胡、紫花前胡药材及其混伪品进行DNA条形码鉴定研究,该文依据国家药典委员会公布的《中药材DNA条形码分子鉴定指导原则》,PCR扩增前胡、紫花前胡及其混伪品的ITS2序列并进行双向测序.经Codon-Code Aligner V 3.7.1对测序峰图进行校对拼接,采用MEGA5.0软件分析相关数据.结果表明:前胡药材的ITS2序列长度为229 ~230 bp,种内变异较小,平均K2P遗传距离为0.005.紫花前胡药材的ITS2序列长度为227 bp,种内无变异.前胡、紫花前胡药材与其混伪品的种间平均K2P遗传距离分别为0.044,0.065.紫花前胡的种间小K2P遗传距离明显大于其种内的大K2P遗传距离.小距离法和NJ树鉴定结果表明前胡、紫花前胡均能与其混伪品明显区分.因此,ITS2序列可有效鉴别前胡、紫花前胡药材及其混伪品.

  • 多元统计分析在中药质量控制中的应用和思考

    作者:刘娜;李军;李宝国

    中药质量控制的研究一直是中医药发展的热点和难点,也是制约中药走向现代化和国际化的关键问题之一.多元统计分析是适合中医药特点的分析方法,在中药质量控制研究中得到了广泛的应用.运用多元统计分析对中药质量控制研究中出现的多指标、多变量且彼此之间存在着一定相关性的数据进行分析,可发现隐藏在其中的规律或数据间的关系,从而服务于决策,以实现中药质量的有效评价.该文就多元统计分析在中药质量控制中的应用进行了综述,为其进一步研究提供了依据.

  • 基于组分结构的中成药二次开发组方研究技术体系构建

    作者:成旭东;封亮;顾俊菲;张明华;贾晓斌

    处方是中医药临床辨证施治的智慧结晶,同时也是中成药二次开发的基础.对处方进行深入研究有助于了解其药效物质基础、药理作用机制,是中药现代化的重要保障.目前,尚未有关于中成药二次开发中处方基础研究的方法与体系的系统论述.该文围绕如何构建有效的组方研究技术体系,以中药“组分结构理论”为基本指导思想,提出“处方分析、物质基础筛选、物质基础解析以及物质基础优化与验证”4步处方研究技术体系,系统分析了中药组方饮片、组分、成分3个层次上符合整体药效的物质基础的研究方法,并引入了组方优化、重构的理念.该技术体系是在已有研究基础上结合新的技术与方法探寻符合中医药整体观的组方物质基础、处方重构研究思路,为中药复方二次开发以及产业提升提供参考.

  • 澳大利亚登记(列册)药物申请和评估流程及对中药新药研究的启示

    作者:任建勋;刘建勋

    中药新药研究现代化、国际化是当前中医药发展的主要趋势.在澳大利亚中药新药多指替代药物,主要以列册药品的形式申请注册上市.澳大利亚登记(列册)药物申请资料主要涵盖药物成分的详细说明、药理学和毒理学研究、治疗声明、药品剂型和副作用.针对每部分都有详尽的规范和说明,保证申请人准确理解登记(列册)药品的申请要求,这同时也对国内中药新药的研究和发展有非常重要的借鉴作用.

  • 对实验性肾脏病动物模型的再认识

    作者:万毅刚;黄燕如;孙伟;毛志敏;史喜苗;姚建

    肾脏病动物模型一般分为二类,一类是通过施加人为操作而模拟人类肾脏病的模型,这类经典的动物模型包括抗肾小球基底膜抗体肾炎、Heymann肾炎、抗Thy1.1抗体肾炎、BSA肾炎以及嘌呤霉素肾病等;另一类动物模型是“自然发病模型”,也就是让动物自然出现近似人类肾脏病的病理特征,它们包括HIGA小鼠IgA肾病和NZB/WF1小鼠、MRL/1 pr小鼠狼疮性肾炎模型.另外,借助基因敲除、siRNA转染等现代分子生物学技术也可以制作出转基因动物模型.对于肾脏病领域的中药药效学、药理学研究而言,首要的是,正确认识各种肾脏病动物模型的特点,针对实验的具体目的而选择合适的模型;其次的是,需要病证结合动物模型的支撑.因此,建立具有中医证候特征的肾脏病动物模型是今后的发展方向.

    关键词: 肾脏病 动物模型
  • 大黄酸调控mTOR信号通路活性抑制肾小管上皮细胞自噬蛋白表达的分子机制

    作者:涂玥;孙伟;顾刘宝;万毅刚;胡浩;刘红

    目的:探讨大黄酸抑制饥饿诱导的肾小管上皮(NRK-52E)细胞自噬蛋白的作用和分子机制.方法:用Hank's平衡盐溶液(Hank's balanced salt solution,HBSS)诱导NRK-52E细胞产生饥饿状态,在干预后的各时间点(0,0.5,1,2,6 h),首先,检测细胞自噬标志性蛋白——哺乳动物同族物微管相关蛋白1轻链3 (microtubule-associated protein 1 light chain 3,LC3)Ⅰ/Ⅱ的表达水平;其次,检测细胞哺乳动物类雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)表达及其磷酸化水平(phos-phorylated-mTOR Ser2448,p-mTOR S2448);然后,以大黄酸(5 mg· L-1)、HBSS(1 mL)以及mTOR抑制剂雷帕霉素(100 nmol·L-1)单独或联合干预,分别检测其LC3 Ⅰ/Ⅱ,mTOR,p-mTOR S2448蛋白表达水平的变化.结果:HBSS诱导NRK-52E细胞LC3Ⅱ蛋白高表达、p-mTOR S2448蛋白低表达;大黄酸与HBSS联合干预可以逆转HBSS诱导的NRK-52E细胞LC3 Ⅱ和p-mTORS2448蛋白表达水平;雷帕霉素与大黄酸、HBSS联合干预可以恢复HBSS诱导的NRK-52E细胞LC3 Ⅱ蛋白表达水平.结论:HBSS抑制mTOR信号通路活性而诱导肾小管上皮细胞发生自噬;大黄酸调控mTOR信号通路活性而抑制肾小管上皮细胞白噬蛋白的表达,这可能就是其干预细胞自噬的作用和分子机制.

  • 黄葵胶囊抑制糖尿病肾病肾组织氧化应激和p38MAPK信号通路活性改善肾纤维化的作用和机制

    作者:毛志敏;万毅刚;孙伟;陈好利;黄燕如;史喜苗;姚建

    目的:探讨黄葵胶囊(Huangkui capsule,HKC)改善糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)模型鼠肾纤维化的作用和机制.方法:将大鼠随机分为5组,假手术组5只,模型组、HKC低剂量(L-HKC)组、HKC高剂量(H-HKC)组、硫辛酸(lipoic acid,LA)组各7只.采用单侧肾切除联合2次腹腔注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)建立DN模型.造模成功后,HKC组、硫辛酸组大鼠分别经灌胃给予HKC悬浊液(0.75,2g· kg-1)或硫辛酸(60mg· kg-1),模型组大鼠也同时经灌胃给予2 mL蒸馏水,每天1次,连续8周.各组大鼠自给药开始计时,第8周末处死,采集血液和肾组织,观察HKC对尿白蛋白、肾功能、肾纤维化形态特征以及氧化应激(oxidative stress,OS)相关指标、p38丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)信号通路关键信号分子、致纤维化细胞因子以及炎症因子蛋白表达水平的影响.结果:HKC改善模型鼠一般情况、体重、尿白蛋白(urinary albumin,UAlb)、血清尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)、尿酸(uric acid,UA)、白蛋白(albumin,Alb),其效果与硫辛酸相仿;HKC改善模型鼠肾纤维化,以高剂量HKC效果为显著,而且,其抗纤维化作用优于硫辛酸;HKC改善模型鼠肾组织OS主要指标,其效果与硫辛酸相似;HKC下调模型鼠肾组织磷酸化p38MAPK(phosphorylated-p38MAPK,p-p38MAPK)蛋白表达水平,降低转化生长因子(transforming growth factor,TGF)-β1、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α蛋白表达水平,而硫辛酸只能抑制肾组织TNF-α蛋白表达水平.结论:对于DN模型鼠,HKC和硫辛酸一样,在体内具有拮抗肾组织OS损伤的作用;HKC与硫辛酸不一样,通过抑制肾组织p38MAPK信号通路活性以及致纤维化细胞因子、炎症因子蛋白表达水平,改善肾纤维化.

  • 虫草素调控eIF2α/TGF-β/Smad信号通路改善肾间质纤维化的机制

    作者:顾刘宝;卞茸文;涂玥;胡浩;万毅刚;孙伟

    目的:观察冬虫夏草主要有效成分——虫草素(cordycepin)对肾间质纤维化及其eIF2α/TGF-β/Smad信号通路的干预作用和机制.方法:将15只C57BL/6小鼠随机分为对照组、模型组和虫草素组,建立小鼠单侧输尿管结扎(unilateralureteral obstruction,UUO)肾间质纤维化模型,虫草素组小鼠经皮下注射虫草素(5 mg·kg-1·d-1),同时,以生理盐水干预对照组和模型组,共5d.实验结束后,取小鼠结扎侧的肾脏,观察肾间质纤维化病理特征,并测定肾组织Ⅰ型胶原(collagen typeⅠ,Col Ⅰ)和α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)核酸表达(Northern blot);另外,在体外培养大鼠肾小管上皮细胞(NRK-52E细胞),在转化生长因子(transforming growth factor,TGF)-β联合或不联合虫草素干预后,观察Ⅰ型胶原、Ⅳ型胶原(collagen type Ⅳ,Col Ⅳ)核酸表达的变化(Northern blot),并检测eIF2α、磷酸化eIF2α(phosphorylated eIF2α,p-eIF2α)以及Smad2/3、磷酸化Smad2/3(phosphorylated Smad2/3,p-Smad2/3)蛋白表达的变化(Western blot).结果:虫草素在体内改善模型鼠肾间质纤维化,包括纤维化的病理特征以及Ⅰ型胶原、α-SMA核酸的表达;虫草素在体外促进NRK-52E细胞p-eIF2α的高表达,抑制TGF-β诱导的p-Smad2/3以及Ⅰ型、Ⅳ型胶原的表达水平.结论:虫草素在体内有改善肾间质纤维化的作用,它可能是通过诱导eIF2α磷酸化,抑制TGF-β/Smad信号通路中的关键信号分子——p-Smad2/3表达,减少肾组织胶原和α-SMA表达等途径而改善肾间质纤维化.

  • 雷公藤多苷调节肾组织p38MAPK信号通路改善糖尿病肾病肾小球炎症性损伤的作用和机制

    作者:黄燕如;万毅刚;孙伟;毛志敏;赵青;史喜苗;姚建

    目的:探讨雷公藤多苷(multi-glycoside of Tripterygium wilfordii,GTW)在体内改善糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)模型鼠肾小球炎症性损伤的作用和机制.方法:采用单侧肾切除联合腹腔注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)建立DN模型.将大鼠随机分为3组:假手术组、对照组、GTW组,各5只.大鼠在造模成功后分别经灌胃给予蒸馏水(2 mL)或GTW悬浊液(50mg·kg-1 ·d-1),每日1次,连续8周.各组大鼠自给药开始计时,第8周末处死.采集血液、尿液样本和肾组织,观察各组大鼠尿白蛋白、肾功能、肾小球形态特征、巨噬细胞(ED1+细胞)浸润以及肾组织肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α,白介素(intcrleukin,IL)-1β,p38丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK),磷酸化p38MAPK(phosphorylated p38,p-p38MAPK),转化生长因子(transforming growth factor,TGF)-β1的蛋白表达水平.结果:GTW能改善DN模型鼠一般情况、体重,减少尿白蛋白,减轻肾小球硬化,抑制肾小球ED1+细胞浸润,下调肾组织TNF-α,IL-1β,p-p38MAPK,TGF-β1蛋白表达水平.结论:GTW在体内具有抑制炎症细胞浸润和炎症因子表达,减轻肾组织炎症性损伤的作用;GTW通过下调肾组织p38MAPK信号通路中关键信号分子——p-p38MAPK蛋白表达水平,抑制炎症信号通路活性,减少TGF-β1表达,从而,改善肾组织炎症性损伤.

  • 芪附汤调节ERK1/2信号通路改善UUO阳虚证模型肾间质纤维化的作用和机制

    作者:孙伟;尹雪皎;涂玥;万毅刚;刘红;胡浩

    目的:探讨芪附汤改善阳虚证模型鼠肾间质纤维化(RIF)的作用和机制.方法:将大鼠随机分为假手术组(A组)、模型组(B组)、芪附汤组(C组)、依那普利组(D组).通过腺嘌呤灌胃联合单侧输尿管接扎术(UUO)的方法而建立RIF模型.造模成功后,C,D组大鼠分别经灌胃给予芪附汤水煎液或依那普利悬浊液;其余2组大鼠经灌胃给予蒸馏水,共干预3周.各在药物和蒸馏水干预前和干预后第1,2,3周末,分别称量大鼠体重,并检测24h尿蛋白排泄量(Upro)、尿β2-微球蛋白(Uβ2-MG)、尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷(NAG)酶.药物干预第3周末,处死全部大鼠,抽取血液,摘除左肾,称重,并留取相应标本,观察肾脏外观和肾小管/间质形态;检测血清环磷酸腺苷(cAMP)、环磷酸鸟苷(cGMP)、肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)和尿酸(UA);检测肾组织中上皮型黏钙蛋白(E-cadherin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、结缔组织生长因子(CTGF)、细胞外调节激酶(ERK1/2)和磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)蛋白相对表达量.结果:芪附汤可以改善模型鼠血清中降低的cAMP和cAMP/cGMP;减少模型鼠升高的Uβ2-MG、尿NAG酶,改善肾间质细胞外基质及其胶原沉积,上调肾组织E-cadherin蛋白表达,下调肾组织α-SMA,TGF-β1,CTGF,p-ERK1/2蛋白表达;但是,对Scr,BUN,UA没有影响.芪附汤改善RIF的作用优于依那普利.结论:芪附汤可以改善模型鼠阳虚证指标以及尿β2-MG、尿NAG酶排泄,它可能是通过上调肾组织E-cadherin蛋白表达,下调肾组织α-SMA,TGF-β1,CTGF以及ERK1/2信号通路中关键信号分子——p-ERK1/2蛋白表达,改善肾小管EMT,从而减轻RIF.

  • 茯苓不同药用部位中三萜酸类成分HPLC指纹图谱研究

    作者:李红娟;李家春;胡军华;刘威;毕宇安;王振中;萧伟

    目的:建立并比较茯苓不同药用部位中三萜酸类成分的HPLC特征指纹图谱,为完善茯苓的质量控制方法提供依据.方法:采用HPLC测定,Waters Symmetry C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相乙腈-0.1%磷酸溶液,梯度洗脱;检测波长210 nm;体积流量1.0mL·min-1;柱温30℃;采用SPSS 15.0进行聚类分析.结果:建立了茯苓不同药用部位中三萜酸类成分的指纹图谱;22批茯苓药材指纹图谱中标示出16个共有峰,方法学考察结果符合指纹图谱技术要求;相似度和聚类分析结果表明,白茯苓、茯神与赤茯苓中三萜酸成分存在显著差异,赤茯苓中茯苓酸的含量高.药材的质量产地间无显著差异.结论:该方法稳定可靠,重复性好,所建立的指纹图谱能有效的评价茯苓药材的质量.

  • 桂枝茯苓胶囊对乳腺增生大鼠性激素水平和乳腺组织的影响

    作者:常秀娟;周军;张帅;陈健;陈春苗;王振中;萧伟

    目的:研究桂枝茯苓胶囊对乳腺增生大鼠的血清性激素水平及乳腺组织形态学的影响.方法:采用苯甲酸雌二醇注射液对SD雌性未孕大鼠按0.5 mg·kg-1肌肉注射制作乳腺增生模型,观察受试药桂枝茯苓胶囊2.0,1.0,0.5 g· kg-1和阳性对照药乳癖消0.5 g·kg-1灌胃给药5周后对乳腺增生模型大鼠乳头直径、高度,乳腺组织形态学的变化和性激素水平变化.结果:桂枝茯苓胶囊可改善大鼠乳头肿胀度,减轻乳腺组织的病变,降低血清雌二醇(E2)和升高孕酮(P)水平.结论:桂枝茯苓胶囊改善乳腺病理变化,调节大鼠性激素水平可能是治疗乳腺增生疾病的重要机制.

  • DART-Q-TOF-MS快速鉴别桂枝茯苓胶囊中6种化学成分

    作者:张伟;王雪;秦建平;李艳静;毕宇安;王振中;萧伟

    该文建立了一种快速鉴别桂枝茯苓胶囊中苦杏仁苷、丹皮酚、芍药苷、肉桂酸、没食子酸以及苯甲酸的方法,该方法采用直接实时分析(DART)离子源串联四级杆-飞行时间质谱(Q-TOF),DART离子源以氦气为载气,温度450℃,样品传输速度0.2 mm·s-1;Agilent 6538 Q-TOF质谱毛细管电压1000V,干燥气温度350℃,气流速3.5 L·min-1,扫描模式为Tar-get MS/MS扫描,扫描范围m/z 50 ~1 000.通过对照品与样品的一级、二级质谱图对比,快速鉴别出3批桂枝茯苓胶囊中的6种化学成分,该方法样品前处理简单,准确,快速,专属性强,能够广泛应用于中药复杂体系多成分的快速鉴别.

  • 桂枝茯苓胶囊及药材中多元素ICP-MS测定方法的建立

    作者:王金玲;李家春;胡军华;黄文哲;王振中;萧伟

    该文采用微波消解法对桂枝茯苓胶囊及5味药材(桂枝、茯苓、白芍、桃仁、牡丹皮)进行消解、电感耦合等离子体质谱仪建立了铅(Pb)、铜(Cu)、砷(As)、镉(Cd)、汞(Hg)、镁(Mg)、锰(Mn)、镍(Ni)、铊(T1)等多元素同时检测的方法,以内标法进行定量以改善基体效应和干扰.实验结果表明各元素的线性关系良好,相关系数R2≥0.999 3;方法检出限为0.016 ~4.593 μg· L-1,实验重复性良好;加样回收率在75.84% ~ 118.9%.该方法灵敏度高,专属性好,为控制桂枝茯苓胶囊中有害元素提供依据,也为监控及制订中药材中有害元素的限量提供参考.

  • 中药对照制剂自身对照法用于桂枝茯苓胶囊的质量评价

    作者:耿婷;张在娟;李艳静;丁岗;毕宇安;王振中;萧伟

    以桂枝茯苓胶囊(GZFL)为例,提出以中药对照制剂作为标准物质随行生成指纹图谱代替对照指纹图谱对中药复方制剂进行质量评价,消除因仪器和色谱柱等实验条件不同引入的误差,同时解决无对照指纹图谱不能拟合的问题.采用2010年版《中国药典》收录的GZFL质量标准(指纹图谱和多成分含量测定)对所制成的对照制剂进行质量合格性评价;在不同仪器、色谱柱等实验条件下,分别以对照制剂随行生成指纹图谱和对照指纹图谱为指标对多批出厂检验合格的GZFL样品进行质量评价对比研究,考察对照制剂评价复方药物的可行性;以稳定性试验考察结果为参考,确定GZFL对照制剂作为标准物质的包装和保质期.结果发现,以GZFL对照制剂随行生成指纹图谱评价样品较对照指纹图谱评价可消除因仪器和色谱柱等实验条件不同引入的误差;0 ~6月的加速和长期稳定性实验研究结果显示,对照制剂在双层铝塑包装条件下质量稳定,说明对照制剂可采用该包装条件进行储存.研究表明,GZFL对照制剂可以作为标准物质代替刘照指纹图谱随行生成指纹图谱对GZFL进行质量评价.

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