中国应用生理学杂志
Chinese Journal of Applied Physiology 중국응용생리학잡지
- 主管单位：
- 主办单位： 中国生理学会,军事医学科学院,卫生学环境医学研究所
- 影响因子： 0.80
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1000-6834
- 国内刊号： 12-1339/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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血小板生成素双体分子的融合构建、原核表达及其分子结构特性预测
目的:为了研制更稳定、高效、低毒的血小板生成素(TPO),拟设计构建TPO的双体分子(T-T)并在原核中表达,同时预测其融合蛋白的分子结构特性.方法:采用分子克隆方法分别构建TPO单体分子与双体分子的原核表达载体pET32/TPO和pET32/T-T,并在大肠杆菌中进行表达,以Western blot鉴定表达产物;用生物信息学方法DSGene1.1和ProtScale软件,对该融合蛋白的结构特征如电点、柔性、抗原性及亲水性等进行模拟分析.结果:成功构建TPO双体分子pET32/T-T的原核表达载体,并经Nco I和Not I双酶切电泳及测序证实.通过转化origamiTM(DE3)感受态菌及IPTG诱导获得高效表达,其产量在40%以上;Western blot显示表达产物能与抗TPO单克隆抗体特异性结合.对T-T双体分子融合蛋白的结构特性预测表明,其融合蛋白中的两个TPO单体分子等电点、抗原性及亲水性均无显著改变,接头处具有高柔性.与TPO的原始序列相比,T-T的一级结构中有2个氨基酸发生改变,在接头(L)后插入一段34个氨基酸的新序列(N).此序列具有一定的抗原性和亲水性,呈现β片层结构.结论:本研究所构建表达的TPO单体和T-T双体分子均可在大肠杆菌中获高效表达,T-T双体分子的结构预测符合设计要求,为进一步研究新型T-T双体分子融合蛋白的生物学特性提供了基础.
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热损伤对大鼠纹状体神经元凋亡的影响
目的:探讨热损伤对原代培养的大鼠纹状体神经元凋亡的影响.方法:对原代培养的大鼠纹状体神经元进行43℃热损伤40 min后,用共聚焦激光扫描显微镜(LSCM)观察神经元细胞内Ca2+浓度的变化、神经元线粒体膜电位的变化,TUNEL法检测热损伤前后纹状体神经元凋亡的变化.结果:热损伤使纹状体神经元内Ca2+浓度明显升高,线粒体膜电位明显降低(P＜0.01);热损伤后纹状体神经元凋亡增多.结论:热损伤可能通过增加细胞内钙离子浓度、降低细胞线粒体膜电位而诱发大鼠纹状体原代培养神经元凋亡.
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应用ESR检测探讨急性热暴露大鼠肝脏氧化还原状态的动态变化
目的:通过电子顺磁自旋共振技术(ESR)动态观察大鼠在过热条件下肝脏的氧化还原状态.方法:将52只雄性Wistar大鼠随机分成4组:①加温组:麻醉后进行整体加温到直肠温达(43.0±0.5)℃,持续15 min;②对照组:只进行麻醉处理;③,MPG预处理组:用抗氧化剂MPG预处理后,再进行与上述①同样条件的加温处理;④非MPG预处理组:在③中用生理盐水代替MPG.经过以上处理后在不同时间点取肝脏制备组织匀浆,测定ESR波谱.结果:与对照组比较,加温组热暴露处理后记录的ESR波谱振幅-时间直线斜率增大,2 h达大值.以后逐渐恢复,24 h接近对照组水平.经抗氧化剂预处理上述反应减弱.结论:过热能诱导肝脏产生活性氧,增强其氧化还原反应.
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甘草对大鼠小肠动力功能影响的实验研究
目的:初步探讨甘草对大鼠小肠动力的作用,及其作用与胃肠激素的相关性.方法:观察甘草组与空白组移行性综肌电(MMC)周期持续时间、Ⅲ相持续时间、Ⅲ相每分钟快波数(FM)和每簇的快波数(FC)的变化;采用免疫组织化学法结合显微图像定量分析扫描系统检测十二指肠、空肠嗜铬细胞及其肌间神经丛中5-羟色胺(5-HT)、P-物质(SP)、血管活性肠肽(VIP)的相对含量.结果:①甘草组与空白组比较MMCⅢ相FM和FC明显减少,MMC周期明显延长,Ⅲ相持续时间明显缩短,统计有显著性差异(P＜0.05).②甘草组十二指肠、空肠粘膜及肌间神经丛内5-HT表达明显较空白组减少,比较有显著性差异,小肠粘膜无明显SP、VIP阳性免疫反映物表达,但小肠肌间神经丛内SP含量明显减少、VIP含量明显增加,组间比较有显著性差异(P＜0.05,P＜0.01).结论:甘草对大鼠小肠动力有抑制作用,这种抑制作用与5-HT、SP、VIP分泌失调密切相关.
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细胞核CaMK和Calcineurin 对大鼠心肌肥厚发生的作用
目的:研究大鼠心肌肥厚时,钙依赖的蛋白激酶和蛋白磷酸酶在心肌细胞膜、细胞浆和细胞核的分布规律,以探讨核钙信号与核反应在心肌肥厚发生过程中的病理生理意义.方法:制备腹主动脉缩窄大鼠心肌肥厚模型,同位素32P掺入法分别测定心肌细胞核、细胞浆和细胞膜的蛋白激酶活性及用无机磷生成显色法测定其蛋白磷酸酶活性.结果:腹主动脉缩窄术后4周大鼠心肌显著肥厚,伴有明显的血液动力学异常.与正常对照组相比较,腹主动脉缩窄心肌肥厚组心肌细胞核钙调素蛋白激酶(CaMK)活性增加101.1%(P＜0.01),其膜的酶活性升高40.2%(P＜0.01),而胞浆的酶活性不变(P＞0.05);心肌细胞核钙调神经磷酸酶(Calcineurin)活性增加43.6%(P＜0.05),膜和胞浆中其活性增加无显著性(P＞0.05).正常组和腹主动脉缩窄心肌肥厚组心肌细胞CaMK和Calcineurin活性分布为核＞膜＞胞浆(P＜0.01).结论:腹主动脉缩窄心肌肥厚时核内钙依赖的CaMK和Calcineurin活性增加,提示压力超负荷时细胞核内钙调节的蛋白磷酸化和去磷酸化水平增高,可能在介导心肌肥厚的发生中起重要作用.
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高同型半胱氨酸血症促进大鼠血管钙化
目的:在大鼠血管钙化模型上,探讨高同型半胱氨酸血症对血管钙化的影响及其作用机制.方法:用维生素D3加尼古丁诱导大鼠血管钙化模型,并给以高蛋氨酸饮食六周诱导大鼠高同型半胱氨酸血症,用高效液相色谱法检测血浆总同型半胱氨酸(Hcy)水平;采用血管组织vonKossa染色、钙含量测定、碱性磷酸酶(ALP)活性和骨钙素(OC)含量测定以判断血管钙化程度,同时测定血浆脂质共轭烯(Diene键)含量反映其脂质过氧化水平.结果:钙化组大鼠血管yon Kossa染色可见大量黑色颗粒沉积,其血管的钙含量,碱性磷酸酶活性及骨钙素含量分别较对照组增加8.09倍、45.57%和2.81倍(P＜0.01).高蛋氨酸饮食的钙化组大鼠血管内钙含量较单纯钙化组增高了34.29%,而碱性磷酸酶活性及骨钙素含量则较单纯的钙化组降低29.13%和74.69%(P＜0.01).钙化组大鼠血浆脂质共轭烯含量与对照组比较无显著性差异,单纯高蛋氨酸饮食和钙化加高蛋氨酸饮食大鼠血浆脂质共轭烯含量较对照组增加了1.93和2.89倍(P＜0.01),而钙化加高蛋氨酸饮食大鼠血浆脂质共轭烯含量较单纯高蛋氨酸饮食大鼠又增加了32.90%(P＜0.01).结论:高同型半胱氨酸血症可以促进血管的钙化,可能与其所致的脂质过氧化程度增强有关.
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p38对骨髓间充质干细胞成肌分化作用的研究
目的:以5-氮杂胞苷(5-Aza-CR)诱导骨髓间充质干细胞(MSCs)成肌分化,探讨生肌调控因子中Myf5的表达及信号转导通路p38在此分化过程中的作用.方法:分离、纯化MSCs,以10 μmol/L 5-Aza-CR诱导其向成肌细胞分化,RT-PCR测定Myf5的表达,免疫组化检测肌球蛋白(myosin)的表达,Western-blot检测p38信号通路特异抑制剂SB203580作用前后磷酸化p38的变化.结果:SB203580作用后,Myf5表达由6 h延迟至9 h,诱导12 d部分MSCs表达myosin,18 d表达的数量及程度明显增加;5-Aza-CR诱导后,磷酸化p38蛋白水平较作用前增强,但在SB203580抑制后明显受抑.结论:5-Aza-CR诱导后,MSCs表达生肌调控因子并向成肌细胞分化,p38在此分化过程中起着正向信号转导作用.
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丹参注射液对庆大霉素耳中毒豚鼠耳蜗氧自由基生成的影响
目的:研究丹参注射液(SM)对庆大霉素(GM)耳中毒豚鼠耳蜗氧自由基生成的影响,探讨SM对GM耳毒性损伤的保护作用及其机制.方法:检测豚鼠耳蜗组织中超氧化物歧化酶(SOD)活力和丙二醛(MDA)含量,结合听性脑干反应(ABR)测试及透射电镜技术.结果:经GM处理的耳蜗组织中SOD活力明显下降,MDA含量则明显增加(P＜0.01),且与ABR阈值升高高度相关(|r|＞0.8,P＜0.05).同时接受SM的动物,其耳蜗组织中SOD活力明显升高(P＜0.01),MDA含量则明显减少(P＜0.05),且听功能显著改善.电镜观察显示耳蜗形态学改变与听力变化相一致.结论:氧自由基及其引发的脂质过氧化参与了GM耳中毒过程,SM可通过提高耳蜗组织中SOD活力,防止脂质过氧化,减轻GM的耳蜗毒性,改善听功能.
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顺铂诱导肾损伤过程中肾皮质脂质过氧化的变化
目的:探讨顺铂肾损伤过程中肾皮质脂质过氧化与肾小管结构改变的关系.方法:雌性Wistar大鼠随机分为生理盐水组、顺铂Ⅰ组、顺铂Ⅱ组、顺铂Ⅲ组,均为尾静脉注射给药,每天一次,连续五天.第六天取血测肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)含量,取肾皮质测丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,同时进行肾小管上皮细胞碱性磷酸酶组织化学染色和组织病理学观察.结果:顺铂组Scr、BUN明显升高,肾皮质MDA含量升高,SOD与GSH-Px活性降低,与对照组相比均有显著差异(P＜0.05),且肾皮质SOD活性、GSH-Px活性与Scr、BUN含量呈明显负相关(P＜0.05),肾皮质MDA含量与Scr、BUN含量呈明显正相关(P＜0.05).酶组化显示肾小管上皮细胞碱性磷酸酶大量丢失,病理切片结果显示肾皮质部分肾小管上皮细胞变性、坏死.结论:顺铂引起肾皮质组织的破坏与肾皮质脂质过氧化增强有关,且随剂量增加肾皮质损伤加重.
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高碳酸血症对急性肺损伤时核因子-κB和TNF-α的影响
目的:观察高碳酸血症对兔急性肺损伤(ALI)模型核因子-κB(NF-κB)和TNF-α表达的影响,探讨其对ALI的作用机制.方法:22只新西兰大白兔随机分为对照组(C组)、非高CO2通气组(N组)、高CO2(8%)通气组(H组).N组和H组通过静脉注射油酸(0.1ml/kg)复制ALI模型,观察肺组织中NF-κB的表达情况、血清和BALF中TNF-α的含量变化及肺组织病理学改变.结果:血清及BALF中TNF-α含量N组和H组高于C组(P＜0.01,P＜0.05),且N组高于H组(P＜0.05).免疫组化及蛋白印迹分析表明H组NF-κB的表达较N组减少(P＜0.05).H组气道峰压显著低于N组,动态胸肺顺应性显著高于N组.动脉血氧分压H组明显高于N组(均P＜0.05).H组病理组织学改变较N组明显减轻.结论:机械通气时吸入8%的CO2所致高碳酸血症对ALI动物模型有保护作用,其机制可能与高碳酸血症抑制NF-κB的活化,从而抑制炎症介质如TNF-α的表达有关.
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阿的平保护纹状体神经元免受热处理损伤作用的研究
目的:探讨预先使用阿的平对热处理所致的纹状体神经元损伤的保护作用及其机制,为热环境致细胞损伤的干预和药物研究提供参考.方法:采用培养的大鼠纹状体神经元,培养液中加入不同浓度的阿的平,给予43℃热处理1h.台盼蓝染色鉴定细胞坏死,活性Caspase-3免疫染色和原位末端转移酶法评价细胞凋亡.结果:热处理明显影响神经元存活,导致细胞死亡,其中主要由细胞坏死过程介导;单独的阿的平对细胞毒性作用较小,预先使用阿的平能够减少热处理引起的细胞坏死.结论:阿的平对热环境致纹状体神经元的损伤有保护作用,这种保护作用主要通过减少细胞坏死过程介导.
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Leptin受体三种亚型在大鼠垂体前叶的表达及其对大鼠生长激素细胞胞内游离钙的影响
目的:观察Leptin受体(OB-R)在雄性大鼠垂体前叶中的表达,研究Leptin对大鼠垂体生长激素细胞胞内游离钙水平的影响.方法:用RT-PCR方法检测Leptin受体几种形式在大鼠垂体前叶中的表达,用梯度离心的方法分离垂体生长激素(GH)细胞,将Leptin作用于分离的生长激素细胞,检测生长激素细胞胞内钙水平的变化.结果:用RT-PCR方法检测到在雄性大鼠垂体前叶中有Leptin受体(包括通用型OB-R,短型OB-Ra及长型OB-Rb)的表达.用Percoll梯度离心法分离出的生长激素细胞约占70%～80%,10-8mol/L Leptin作用于分离培养的生长激素细胞,可引起生长激素细胞[Ca2+]i相对水平迅速降低.结论:在雄性大鼠垂体前叶有Leptin受体三种亚型的表达,且Leptin在体外可明显降低大鼠生长激素细胞胞内游离钙的相对水平.
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大鼠肢体缺血/再灌注后肝脏 HO-1表达的变化及其意义
目的:探讨肢体缺血/再灌注(I/R)致肝脏损伤时肝组织诱导型血红素氧合酶(HO-1)表达的变化及其意义.方法:夹闭大鼠双侧股动脉根部4 h、开放2～24 h,制备肢体I/R模型.RT-PCR检测肝组织HO-1 mRNA表达的变化,免疫组化染色法观察HO-1蛋白在肝内的生成与分布.对肢体I/R大鼠应用锌原卟啉抑制其体内HO-1活性后,光镜观察其肝组织的病理变化.结果:肢体I/R后肝组织HO-1 mRNA的表达水平显著高于各对照组,再灌12 h表达至峰值,至再灌24 h仍显著高于各对照组(P＜0.01).肢体I/R组肝组织内出现大量弥散分布的HO-1阳性肝细胞,抑制HO-1活性,使肢体I/R组肝组织损伤明显加重.结论:肢体I/R损伤可诱导肝细胞HO-1基因表达上调,所诱生的HO-1对肝细胞具有保护效应.
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红花黄色素对新生鼠缺氧后一氧化氮合酶表达的影响
目的:观察红花黄色素对缺氧后脑内诱生型一氧化氮合酶(iNOS)、神经原型一氧化氮合酶(nNOS)及内皮型一氧化氮合酶(eNOS)基因表达的影响,探讨红花黄色素抗缺氧脑损伤的作用.方法:采用SD新生鼠缺氧模型,于缺氧前30 min腹腔注射红花黄色素生药7g/kg,缺氧40 min后复氧48 h,提取脑组织总RNA,应用RT-PCR技术检测三种NOS mRNA的表达量.结果:新生鼠缺氧再复氧48 h,脑内iNOS、nNOS基因表达上升(P＜0.05),预先给予红花黄色素能抑制iNOS、nNOS基因的表达(P＜0.05),但eNOS基因表达不受影响.结论:红花黄色素对缺氧脑损伤的保护作用与NOS基因表达有关.
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半胱胺盐酸盐对高温条件下泌乳后期奶牛生产性能的影响
目的:探讨夏季高温、环境温湿指数(THI)高于76条件下半胱胺盐酸盐(Lactonin)对泌乳后期奶牛产奶性能的影响.方法:96头黑白花奶牛,分为Lactonin(3000 U/d)处理(LT,n=49,泌乳中期曾接受Lactonin)和对照组(n=47),再根据高温期以前的产奶量(M)将LT组和对照组分别组分成4个产量组(G,n=12;第4组LT,n=13;对照组,n=11):G1(M＜24 kg/d),G2(24＜M＜28 kg/d),G3(28＜M＜32 kg/d),G4(M＞32kg/d).结果:与对照相比,第一产量组LT奶牛的体温降低(P＜0.05);常乳、标准乳及饲料转化效率提高(P＜0.05)、乳脂率增加(P＜0.05),乳蛋白量倾向增加;体细胞数趋于降低.所有参试LT奶牛平均乳脂率显著增加(P＜0.05),乳蛋白量倾向增加;常乳和标准乳产量趋于提高;血清中胰岛素浓度显著提高(P＜0.01),T3、T4浓度有降低趋势.结论:Lactonin有利于高温季节奶牛正常代谢的维持,改善奶产量和乳品质,提高饲料利用效率.Lactonin对奶牛的积极影响是经过胰岛素、T3、T4等内分泌激素和生长轴介导的.
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持续电刺激家兔包钦格复合体膈神经放电的观察
目的:观察长时持续电刺激家兔Botzinger复合体(Bot.C)对膈神经放电的影响.方法:采用10～50μA,40～100Hz,波宽0.3 ms的刺激参数,对30只家兔Bot.C进行15～30 s的刺激.结果:刺激期间,出现膈神经放电的抑制或"切断",即吸气相减弱或消失;随刺激强度和频率的增加,膈神经放电被抑制的程度逐渐增强;刺激Bot.C所致的吸气抑制存在"习惯化"现象,表现为一定刺激范围内,随刺激时间的延长,膈神经放电积分幅度呈"阶梯"状逐步上升;停止刺激后出现膈神经放电的"反弹",主要表现为放电幅度明显升高,而后逐渐恢复正常;膈神经放电的"习惯化"具有一定的短时记忆效应.结论:非联合性学习和记忆形式存在于Bot.C对呼吸的调节中,与Bot.C有关的神经元突触在功能上具有一定的可塑性.
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HSP90高表达细胞株的建立及细胞增殖性状的改变
目的:建立稳定高表达热休克蛋白90(HSP90)细胞株,研究其对细胞增殖的影响.方法:含人HSP90 13全长基因的重组质粒pSmycHSP经亚克隆、纯化、酶切鉴定后,用电穿孔法转染到小鼠成纤维细胞系NIH-3T3细胞内.经G418筛选、克隆分离培养,用免疫细胞化学、免疫印迹鉴定阳性克隆.以转染空质粒的NIH-3T3细胞为对照,用MTT法、流式细胞术测定,分析HSP90高表达对细胞增殖和细胞周期的影响.结果:转染pSmycHSP的NIH-3T3细胞HSP90染色增强,生长速度减慢,S期DNA含量降低.结论:己建立稳定高表达热休克蛋白90(HSP90)NIH-3T3细胞株;转染pSmycHSP的NIH-3T3细胞能够有效地表达HSP90,影响细胞周期,使细胞增殖迟滞.
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烟碱对脑钾、钠和钙通道表达的调节作用
目的:利用基因表达芯片检测反复摄取烟碱对大鼠脑内钾、钠和钙通道基因表达的调节作用.方法:大鼠每天两次皮下注射烟碱(1.2 mg/kg),连续用药两周后取全脑,提取RNA,逆转录合成cDNA,转录合成生物素化RNA,并将其片断化后与芯片杂交,对荧光信号扫描分析.结合RT-PCR方法对芯片分析结果进行验证.结果:反复摄入烟碱,大鼠脑内钾、钠和钙通道的基因表达均发生变化:电压依赖性K+通道中外向整流K+通道和Ca2+激活的K+通道表达下调,而Kv2.3r等电压依赖性K+通道表达上调;电压依赖性Na+通道中β2亚基表达增加,而α和β1亚基基因表达减少;电压依赖性Ca2+通道的β3亚基基因表达增加.结论:反复摄取烟碱诱导脑N受体失敏时,可引起相关钾、钠和钙通道基因表达发生改变.
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人eNOS复制缺陷型重组腺病毒的构建
目的:构建以巨型细胞病毒(CMV)为启动子的heNCS重组腺病毒转移载体.方法和结果:将heNOS cDNA全长亚克隆到穿梭质粒启动子CMV的下游,通过I-Ceu Ⅰ和PI-SceⅠ两个稀有酶切位点将目的基因heNOS与腺病毒质粒DNA(pAdeno-X)进行体外连接,获得重组腺病毒质粒DNA(pAdeno-heNOS),后者经限制性内切酶PacⅠ切割,利用脂质体转染法获得heNOS重组腺病毒.PCR双引物法鉴定是否成功构建heNCS重组腺病毒.结论:PCR双引物检测含有heNOS片段,表明成功构建了heNOS重组腺病毒转移载体AdhCMV-heNOS.
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高频刺激丘脑底核对帕金森病大鼠模型纹状体NOS阳性神经元的影响
目的:观察高频刺激丘脑底核对帕金森病(PD)大鼠纹状体中NOS阳性神经元的影响,以探求其作用机制.方法:应用6-OH-DA制备偏侧PD大鼠模型,丘脑底核区埋入刺激电极进行电刺激,采用组织化学方法观察纹状体中NOS阳性神经元的变化.结果:PD大鼠纹状体中NOS阳性神经元数与正常大鼠相比明显增加(P＜0.01),经电刺激后PD大鼠纹状体NOS阳性神经元数量明显减少,且与正常大鼠相比无显著性差异.结论:高频电刺激丘脑底核治疗PD的机制之一可能是与其抑制纹状体NO的过度释放有关.
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青龙木制剂对小鼠胰腺β细胞单位电活动的影响
目的:观察青龙木制剂(Ambyna preparation)对小鼠胰岛β细胞单位放电的影响,探讨青龙木制剂促进胰岛素分泌的机制.方法:以大于刺激阁以上(＞5mmol/L)的葡萄糖滴注在体小鼠胰腺上诱发胰岛β细胞电活动,用玻璃微电极记录在体小鼠胰岛β细胞的单位放电.结果:青龙木制剂和格列本脲一样加强葡萄糖诱导的胰岛β细胞电活动.结论:青龙木制剂加强葡萄糖诱导的胰岛β细胞电活动进而促进胰岛素的分泌.
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重组BHMT对高同型半胱氨酸血症大鼠的影响
目的:探讨重组BHMT对大鼠HHcy血症的防治作用.方法:用含2%蛋氨酸(methionine,Met)饲料诱发HHcy的大鼠,经尾静脉注射BHMT后,观察模型大鼠血浆中同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)浓度、LDH酶活性及HDL/LDL的影响.结果:重组BHMT能将HHey组大鼠血浆中Hcy浓度(23.70±6.75)μmol/L显著降低为(14.61±2.80)μmol/L(P＜0.05),LDH酶活性由(209.57±10.22)U/L降低为(225.04±30.47)U/L(P＜0.05),对脂蛋白HDL/LDL基本没有影响.结论:重组BHMT对高同型半胱氨酸血症有一定的治疗作用.
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Oddi括约肌收缩运动与十二指肠MMC相关性的实验研究
目的:确定Oddi括约肌收缩运动与十二指肠移行性运动综合波(migrating motor complex,MMC)的相互关系,提高对胆道机能失调性疾病的诊断或药物对Oddi括约肌影响的评价.方法:四只杂种成犬行十二指肠Thomas造瘘,微量灌流法连续测定十二指肠和Oddi括约肌收缩运动.结果:Oddi括约肌伴随十二指肠MMC呈周期性收缩运动,平均基础压、振幅和收缩频率在十二指肠MMC的1期,不受十二指肠收缩的影响,相对稳定.与2期或3期相比,差异显著(P＜0.01).结论:阐述Oddi括约肌收缩功能或研究药物对Oddi括约肌的作用时,应注意十二指肠对Oddi括约肌的影响.
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淫羊藿总黄酮对肾阳虚大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴钙调蛋白基因表达的影响
目的:从分子水平探讨肾阳虚证病理改变及淫羊藿总黄酮的作用及其机理,为开发药物的临床新用途提供理论依据.方法:用大剂量外源糖皮质激素建立肾阳虚大鼠动物模型,以实时荧光定量RT-PCR技术,测定各组大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴CaM mRNA的表达,以及淫羊藿总黄酮对其的影响.结果:肾阳虚大鼠下丘脑、肾上腺CaMmRNA水平升高,垂体组织CaM mRNA水平没有显著变化,淫羊藿总黄酮能够降低下丘脑组织CaM mRNA水平,但对肾上腺影响不显著.结论:大鼠肾阳虚证时下丘脑中CaM mRNA水平升高,淫羊藿总黄酮可使其降低.
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NO在胆红素神经毒性中的作用
目的:探讨NO的神经毒性是否能促使高胆红素血症新生兔脑损伤的形成.方法:采用新生兔制作高胆红素血症动物模型,检测脑中EAAs及NO的含量.结果:模型组脑组织中EAAs含量显著低于对照组(P＜0.01),而NO浓度显著高于对照组(P＜0.01).结论:NO可能通过介导EAAs兴奋性神经毒性及其本身对神经细胞的直接毒性作用而加重胆红素所诱导的脑损伤.
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重症急性胰腺炎大鼠血浆NO、ET、TNF-α含量与亚细胞器某些指标的变化
目的:探讨一氧化氮(NO)、内毒素(ET)、TNF-α在重症急性胰腺炎(SAP)中的作用机制.方法:采用1.5%去氧胆酸钠逆行胆胰管内注射建立SAP模型,观察血中NO、ET、TNF-a水平以及线粒体琥珀酸脱氢酶(SDH)活性、溶酶体酸性磷酸酶(ACP)释放率、微粒体细胞色素P450的变化,并进行相关分析.结果:与对照组比较,模型组NO、ET、TNF-α和ACP释放率明显升高,SDH活性和细胞色素R450则显著降低;相关分析显示NO、ET、TNF-α与ACP释放率、SDH、细胞色素P450具有相关性.结论:NO、ET、TNF-a可直接破坏胰腺细胞亚细胞器结构,引起胰腺损伤.
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bax转录调控pGL3-Basic荧光素酶报告基因载体的构建
目的:构建能用来检测bax转录调控作用的报导基因载体.方法:采用PCR方法克隆出bax 5'UTD基因,构建载体后利用酶切与测序进行鉴定.然后将该基因亚克隆至pGL3-Basic报告基因载体上.结果:克隆基因产物酶切结果与理论预测值一致,测序未出现一个碱基突变.PCR鉴定发现,bax5'UTD正确连接到了pGL3-Basic报告基因载体上,构建了pGL3-Basic-Baxregular载体.结论:bax 5'UTD报导基因载体的构建为进一步研究bax转录调控作用提供了载体资源.
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可视化动缘探测系统检测心肌细胞舒缩功能
目的:分离成年大鼠心室肌细胞,利用可视化动缘探测系统检测其收缩/舒张功能.方法:常规酶解法分离制备钙耐受心肌细胞;用Ca2+荧光探剂fura-2/AM(0.5μmol/L)负载心肌细胞30 min(25℃)后,以含氧台氏液灌流并予电场刺激(0.5 Hz,5 ms),采用动缘探测系统检测心肌细胞收缩/舒张功能及细胞内荧光信号变化.结果:可视化动缘探测系统可实时同步观察和记录心肌细胞机械功能和细胞内钙瞬变变化,并可计算得到细胞收缩/舒张和钙瞬变的变化幅度、时程及速率等一系列指标,从而直接反映细胞水平的心肌功能改变.结论:可视化动缘探测系统为人们提供了一个在单心肌细胞水平探讨心肌肌源性功能及其改变的新方法,是当今心血管研究的一项重要技术.
| 年 | 期数 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2012 | 06 |
| 2011 | 01 02 03 04 |
| 2010 | 01 |
| 2009 | 01 02 03 04 |
| 2008 | 01 02 |
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