低氧时一氧化碳对PASMC增殖的影响及机制探讨

目的和方法:应用MTT比色、原位杂交、免疫细胞化学技术检测内源性或外源性CO对低氧状态下PASMC增殖的作用以及对PDGF-B和原癌基因bcl-2、突变型p53表达的影响,探讨CO抑制低氧状态下PASMC增殖的机制.结果:各组PASMC中PDGF-B mRNA 原位杂交和PDGF-B蛋白的免疫细胞化学染色均为阴性,单纯低氧组较正常对照组Bcl-2和突变型P53蛋白表达增强(P<0.01),Hemin和CO干预组Bcl-2和突变型P53蛋白表达低于单纯低氧组,而Hb干预组则高于单纯低氧组(P<0.01).结论:低氧时CO可能通过抑制Bcl-2和突变型P53的表达而抑制PASMC的增殖.

一氧化碳在低氧性肺血管收缩反应中的作用

目的和方法:观察外源性一氧化碳(CO)对大鼠离体肺动脉环低氧性收缩反应(HPV)的影响,并通过观察血红素氧化酶抑制剂ZnPPIX对HPV的影响,探讨内源性一氧化碳在HPV中的作用及机制.结果:低氧可使苯肾上腺素(PE)预收缩的肺动脉环出现明显的收缩反应,肺动脉cGMP含量下降;用ZnPPIX孵育后,低氧后的肺动脉cGMP含量增加,低氧性肺血管收缩反应(HPV)受抑;外源性CO可明显增加肺动脉cGMP含量,HPV明显受抑.结论:外源性CO及ZnPPIX可增加低氧后的肺动脉cGMP含量,抑制HPV,内源性CO减少导致cGMP含量下降可能是HPV的原因之一.

人肝细胞生长因子基因表达质粒的构建及其活性研究

目的:构建一种携带人肝细胞生长因子(HGF)基因的表达质粒(pUDKH),并对其体外活性进行研究,为其体内应用提供依据.方法:从人胎盘cDNA文库用PCR方法克隆人HGF基因,并将其克隆至自行构建的真核表达载体pUDK上,获得表达质粒pUDKH.将pUDKH体外转染原代培养的骨骼肌细胞,分析其转染效率及表达上清中HGF、血管内皮生长因子(VEGF)的表达水平,并采用MTT法分析不同剂量HGF表达产物对人脐静脉内皮细胞的作用.结果:所克隆构建的携带人HGF基因的质粒pUDKH可有效转染原代培养的骨骼肌细胞(0.057%),并表达HGF(16～18 ng/4×105 cells)和VEGF,其表达产物对人脐静脉内皮细胞具有明显的增殖刺激活性(P<0.05),而且有剂量效应关系.结论:初步证实本研究构建的质粒pUDKH具有体内治疗缺血性疾病的应用潜力.

半胱胺对鹅胰液分泌及胰酶活性的影响

目的:研究半胱胺对鹅胰液分泌及胰酶活性的影响.方法:12只装有胰腺～十二指肠长久性瘘管的成年鹅.试验采用自身对照,试验期在日粮中一次性添加半胱胺(100 mg/kg bw).连续收集计量胰液并测定胰酶活性.结果:①半胱胺使鹅胰液的分泌速率较对照期显著上升(240.16%,P<0.01),其中白天升高234.45 %,夜间增高了253.70 %.②试验期单位容积胰蛋白酶的活性较对照期升高了49.05 %(P<0.01),而胰脂肪酶和胰淀粉酶的活性却较对照期分别降低了25.44 %和21.95 %,且变化幅度具有昼夜的差别.③试验期胰腺每小时分泌胰蛋白酶、胰脂肪酶和胰淀粉酶的总活性较对照期分别升高406.88%(P<0.01)、153.58 % (P<0.01)和166.59 %(P<0.01),白天增加的幅度较夜晚大.结论:半胱胺能促进鹅胰液的分泌,增加胰液中蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶分泌的总量,从而提高鹅对饲料的消化能力,适应机体生长对营养的需求.

刺激迷走神经引起的鲫鱼Mauthner细胞顺向激活

目的:研究迷走神经感觉传入信息对Mauthner细胞(M细胞)兴奋性的影响.方法:刺激鲫鱼迷走神经,并运用微电极穿刺技术记录鲫鱼M细胞胞内电位变化.结果:在M细胞胞内记录到分级的、复合的兴奋性突触后电位(EPSP),分为第一成分和第二成分.随着刺激强度的增大,EPSP的幅度增大,反应持续时间延长. 当刺激强度足够大时,在第一成分或第二成分的基础上可爆发动作电位. 结论:①刺激迷走神经可引起M细胞顺向激活,这与以往的观点不同;②从迷走神经到M细胞的感觉传入通路可能由含有兴奋性和抑制性成分的不同种类的神经链构成,M细胞的兴奋性取决于兴奋和抑制之间的相互关系.

海马脑片锥体神经元钙离子通道的盲法膜片钳研究

目的和方法:采用大鼠海马脑片盲法膜片钳全细胞记录技术研究CA1区锥体神经元电压门控性Ca2+通道的动力学特征.结果:大鼠海马脑片CA1区锥体神经元电压门控性Ca2+通道电流具有如下特点:①激活的阈电位偏低,为(-49.3±8.6) mV,范围为-65～-30 mV(n=23).②衰减时间常数τ值较大,且变化范围大(100～700 ms)(n=12),并且衰减具有Ca2+电流幅值的依赖性,③稳态失活呈现电压依赖性,半失活电压为(-55.4±9.7) mV,斜率因子为(5.3±0.9)mV(n=10).④当细胞外Ca2+浓度为2.5 mmol/L时,Ca2+通道的反转电位为(55±13) mV(n=10).⑤尾电流成分较为单一,不表现电压依赖性.另外,Ca2+电流对戊脉胺及双氢吡啶类化合物硝苯地平均不敏感.结论:根据上述Ca2+电流特征,海马脑片CA1区锥体神经元上的Ca2+通道主要以N型为主.

游离脂肪酸对大鼠胰岛细胞胰岛素信号转导蛋白表达的影响

目的:探讨游离脂肪酸是否对大鼠胰岛细胞某些胰岛素信号转导蛋白的表达产生一定的影响.方法:分离、培养新生SD 大鼠胰岛细胞,分别与软脂酸(0.25 mmol/L)或油酸(0.125 mmol/L)孵育12、24、36 h,提取蛋白后用Western印迹法检测胰岛素信号转导蛋白(cPKCα、Grb2、ERK2)的水平.结果:软脂酸和油酸孵育12 h后,大鼠胰岛细胞cPKCα、Grb2和ERK2的蛋白水平同对照组相比均未发生显著变化(P>0.05);孵育24 h后胰岛细胞Grb2的蛋白水平同对照组相比未发生显著变化(P>0.05);cPKCα的蛋白水平同孵育12h后相比显著上调(P<0.05);ERK2的蛋白水平同对照组相比明显下降(P<0.05). 软脂酸和油酸孵育36 h后大鼠胰岛细胞cPKCα的蛋白水平同对照组及孵育12 h后相比显著上调(P<0.05);而Grb2和ERK2的蛋白水平同对照组及孵育12 h后相比均明显下降(P<0.05).结论:游离脂肪酸可通过上调cPKCα和降低Grb2和ERK2的蛋白水平来阻滞胰岛素的信号转导,这可能是游离脂肪酸引起胰岛素抵抗的机制之一.

柴胡对癫痫模型电活动的调制

目的:研究柴胡对癫痫发作的影响.方法: 以家兔和大鼠为实验对象,用毛果芸香碱致痫,采用脑电图和细胞外玻璃微电极记录技术,观察柴胡对癫痫模型大脑皮层放电及海马脑片场电位的影响.结果:腹腔注射柴胡后可使癫痫发作次数及发作持续时间显著减少,发作间隔时间显著延长,(P<0.05),脑片旁滴注柴胡后使致痫大鼠海马脑片诱发场电位幅度平均降低20.41%,恢复时间平均为6.86 min,(P<0.01).结论:柴胡注射液能明显抑制癫痫模型电活动,提示柴胡具有抗痫作用.

大、小动脉内皮细胞乙酰胆碱作用靶标药理学特性的比较

目的:比较大、小动脉内皮细胞乙酰胆碱作用靶标药理学特性的差异.方法:采用大鼠尾动脉螺旋状血管条和主动脉离体血管环两种组织,对比观察乙酰胆碱(ACh)诱发大、小动脉内皮依赖性舒张反应特征的差异,从而进一步研究小动脉内皮细胞乙酰胆碱作用靶标的药理学特性.结果:氯化钾(60 mmol/L)预致血管收缩的尾动脉和主动脉对不同浓度ACh (10-8～10-4mol/L)产生内皮依赖性舒张反应,且呈剂量依赖性.L-Nω-硝基精氨酸甲酯(L-NAME:10-4mol/L)或美蓝(MB:10-5mol/L)与吲哚美辛(Indo:10-4mol/L)联用仅可部分地阻断ACh诱发尾动脉内皮依赖性舒张反应;而L-NAME或MB可完全阻断ACh诱发主动脉内皮依赖性舒张反应.结论: ACh激活大、小动脉上内皮细胞乙酰胆碱作用靶标诱发内皮依赖性舒张反应的药理学性质不同,在小动脉上,除了NO和PGI2介导外,还有一种非NO和非PGI2的舒血管因子参与;在大动脉上,内皮依赖性舒张反应主要由NO介导.

缺氧/复氧对培养的大鼠海马神经元Fos、Jun表达和神经元凋亡的影响

目的:观察缺氧/复氧对体外培养的海马神经元Fos和Jun 表达和神经元凋亡的影响.方法: 取培养12 d的海马神经元,置于2 000 cm3的恒温(36℃)密闭容器内,连续充以无氧气体(90%N2、10%CO2), 在缺氧条件下继续培养 2、4 h 后取出,置含10% CO2和空气的培养箱内复氧培养24 h和72 h.于不同时间取出, 观察神经元存活数, 分别用抗Fos和抗Jun抗血清进行免疫组织化学染色,计数Fos 和Jun表达阳性神经元百分率,并用原位末端标记(TUNEL)法和流式细胞术分别观察和测定缺氧/复氧对体外培养海马神经元凋亡的影响.结果:缺氧/复氧后Fos和Jun表达阳性神经元百分率和凋亡神经元百分率均显著增加.结论:缺氧/复氧后即早反应基因fos 在神经元中的持续表达可引起神经元凋亡, 原癌基因jun的表达与神经元凋亡的发生有关.

吗啡对新生鼠尾核神经元钾离子通道电流的作用

目的:研究吗啡对新生鼠尾核神经元钾离子通道电流的作用.方法:应用全细胞膜片钳技术在培养的尾核神经元上,观察吗啡急性与慢性处理对尾核神经元电压门控钾离子通道电流的影响.结果:吗啡急性处理尾核神经元诱发钾离子通道电流增大,电流从加吗啡前的(2.6±0.4)nA增高到(3.3±0.5)nA,加纳洛酮后电流下降为(2.4±0.4)nA;吗啡慢性处理尾核神经元的钾离子通道电流从对照组的(2.6±0.4)nA增高到(3.1±0.5)nA,加纳洛酮后电流下降为(2.4±0.4)nA.结论:在吗啡急性或慢性处理尾核神经元后,吗啡经μ受体介导,诱发尾核神经元钾离子通道电流增大,使神经元处于超极化状态,导致神经元活动的抑制.

下丘脑背内侧核在缰核兴奋诱发的心血管反应及腓深神经抑制中的作用

目的:阐明下丘脑背内侧核(DMH)在缰核(Hb)兴奋诱发的心血管反应中的作用及DMH在腓深神经(DPN)传入冲动调节Hb兴奋诱发的心血管活动中的作用及机制.方法:脲酯和氯醛糖混合静脉麻醉的家兔,电刺激Hb、腓深神经,记录股动脉血压及心外膜电图,DMH内微量注射受体拮抗剂.结果:同侧DMH微量注射谷氨酸受体阻断剂Kynurenic acid ,部分取消了电刺激Hb兴奋诱发的升压反应及缺血性心电变化反应.同侧DMH微量注射纳洛酮对腓深神经传入冲动抑制Hb兴奋诱发的上述反应有削弱作用.结论:DMH及其中的谷氨酸受体参与电刺激缰核兴奋诱发的心血管反应,DMH及其中的阿片受体参与了DPN传入冲动对上述心血管反应的抑制作用.

化学刺激或电刺激大鼠穹窿下器官诱发的饮水行为和脑内c-fos表达

目的:对化学刺激和电刺激穹窿下器官(subfornical organ, SFO)诱发的饮水量和脑内c-fos表达的结果是否不同进行比较. 方法:向大鼠SFO内微量注射L-谷氨酸作为化学刺激,用恒流刺激SFO作为电刺激,记录诱发的1 h内饮水量,用免疫组化方法检测脑内Fos蛋白表达.结果:电刺激和化学刺激SFO均能诱导相似的饮水行为,其诱饮率分别为75%和85.7%,1 h平均饮水量分别为(0.28±0.22) ml 和(0.31±0.15) ml ,明显高于各自的对照组(P<0.05),并均能使前脑的 11个脑区(终板血管器官, 正中视前核,室旁核,视上核,下丘脑外侧区,丘脑室旁核,联合核和中央内侧核,终纹床核,穹窿周背区和无名质)和后脑的4个脑区(后区,孤束核,臂旁外侧核和中缝背核)相似的Fos蛋白表达.结论:刺激SFO所诱导的饮水行为和脑内Fos蛋白表达是激活其神经元胞体的结果.

白细胞介素-2受体在乳腺癌MCF-7细胞的表达

目的:观察乳腺癌MCF-7细胞上白细胞介素-2受体(IL-2R)α、β和γ链的表达、IL-2对MCF-7细胞增殖的作用及雌激素对三条链表达的影响.方法:使用特异性IL-2R多克隆抗体以免疫细胞化学方法和流式免疫荧光法检测MCF-7细胞上IL-2R的表达,以MTT法及3H-TdR掺入法检测细胞增殖情况.结果:MCF-7细胞上存在IL-2Rα、β、γ的免疫阳性物质,其中IL-2Rγ的表达要强于IL-2Rα、β的表达;10-6 mol/L浓度的雌二醇可促进IL-2Rα、β的阳性细胞数及IL-2Rγ的免疫阳性物质的含量;IL-2在100 U/ml至1 000 U/ml的浓度范围内可显著促进MCF-7细胞的增殖.结论: MCF-7细胞上存在IL-2R且其表达受雌二醇的调节,IL-2可能通过IL-2R影响MCF-7细胞的增殖.

强直电刺激右侧尾壳核对大鼠海马、中部颞叶新皮质电图的影响

目的:探讨尾壳核(caudate-putamen, CPu)-海马(hippocampus,HPC)-中部颞叶新皮质(Medial temporal lobe neocortex, MTNC)通路在癫痫相关性病理神经网络重建中的作用.方法:45只SD大鼠.用不锈钢双极同芯电极记录右侧HPC、右侧MTNC、左、右侧HPC、右侧HPC和右侧MTNC深部电图,重复强直电刺激(60 Hz,2 s,0.4～0.6 mA)大鼠右侧CPu 10次,每次刺激间隔时间约10 min,观察上述脑区深部电图的改变.结果:强直电刺激右侧CPu可以诱发植入电极同侧或双侧HPC出现原发性后放和继发性电图癫痫样点燃效应,也可以表现为HPC深部电图脑电波出现压抑-反弹-癫痫样点燃发作;诱发同侧HPC与MTNC出现部分同步性阵发癫痫样电活动;腹腔注射东莨菪碱(0.05 mg/kg)后,重复上述电刺激右侧CPu实验,可以诱发双侧HPC电图出现3 Hz慢波电振荡长时程增强现象,也可以诱发同侧HPC与MTNC出现完全同步的阵发性癫痫样电活动.结论:过度激活CPu功能可以促进CPu-HPC-MTNC通路癫痫相关性病理生理性神经网络重新的建立,该效应累及对侧大脑半球,有利于颞叶癫痫的发生.

用心率变异功率谱研究出生后心率变慢的机理

目的:探讨神经机制及心源性因素在出生后心率变慢中的作用.方法: 运用心率变异性的频域和时域分析方法,主要为功率谱分析方法,以不同年龄组的人和家兔为实验对象,对出生后心脏的自主神经调控进行初步探讨;并通过观察不同年龄组离体灌流兔心 (无神经体液因素影响)自律性的变化,探讨心脏本身因素是否参与出生后心率变慢的调控.结果:人和家兔迷走交感对心率的调控作用比在各年龄组之间有显著差异,且随年龄增长逐渐升高;家兔离体心脏的自主心率在各年龄组之间有显著差异,且随年龄增长逐渐降低.结论:出生后心率减慢与神经机制有关,也有心脏本身因素的参与.

大强度训练及恢复后大鼠红细胞变形能力和红细胞膜蛋白的变化

目的:探讨运动对红细胞变形性和红细胞膜蛋白的影响及其相互关系.方法:设计不同强度的训练方案,用激光衍射法测定红细胞变形能力,用SDS-PAGE方法测定一定体积大鼠红细胞膜中的重要蛋白带3蛋白(band-3)和肌动蛋白(actin)的含量,研究运动即刻和恢复后红细胞变形性及膜蛋白的变化.结果:长期的运动训练会促进大鼠红细胞变形能力的改善和红细胞膜band-3蛋白和actin的良好发展,一次大强度训练会引起红细胞膜band-3蛋白和actin含量的减少,大鼠红细胞变形能力降低,一周和二周的大强度训练会提高恢复期大鼠红细胞的变形能力和红细胞膜band-3蛋白和actin含量.结论: 运动训练造成的红细胞膜蛋白含量的变化,导致了红细胞膜结构的改变,从而影响红细胞变形能力,可能是训练对红细胞变形能力的作用机制之一.

血小板源生长因子-AA对高血压血管平滑肌细胞钙信号的影响

目的:明确自发性高血压大鼠血管平滑肌细胞(SHR-VSMC)增殖与血小板源生长因子-AA(PDGF-AA)、PDGF-α受体表达的关系及钙信号在其中的作用.方法:在培养的血管平滑肌细胞模型中,采用免疫印迹 (Western blot)、3H-TdR及3H-Leu掺入、荧光探针标记测定单细胞内钙浓度等方法,观察不同来源大鼠(SHR/WKY)VSMC,PDGF-AA、PDGF-α受体和PDGF-β受体表达的差异性以及在PDGF-AA刺激下,VSMC增殖肥大反应、胞内[Ca2+]i变化和钙离子阻断剂(nimodipine)对其的影响.结果:与WKY-VSMC相比SHR-VSMC 中PDGF-AA、PDGF-α受体蛋白表达明显增加,而PDGF-β受体蛋白表达在SHR-VSMC与WKY-VSMC无明显变化.在PDGF-AA刺激下,增殖细胞核抗原(PCNA)、3H掺入率及胞内[Ca2+]i浓度在SHR-VSMC明显增强;钙离子阻断剂(nimodipine)明显抑制PCNA表达及3H掺入,胞内[Ca2+]i浓度明显下降.结论:自发性高血压大鼠VSMC PDGF-A链及其α受体的自发性增高,可能是导致SHR-VSMC异常增殖、肥大,从而触发血管反应性和血管构型变化的重要原因之一;细胞膜钙通道在调控VSMC的钙内流时起主要作用.

苦瓜皂甙对衰老动物内分泌功能的影响

目的:探讨苦瓜皂甙对衰老动物内分泌功能的调节作用.方法:15月龄雌性老年昆明小鼠,随机分为老年对照组、实验1组和实验2组三组,同时准备4月龄雌性昆明小鼠作青年对照组,其中两对照组饮水为普通水,两个实验组饮水分别含有100 mg/L及200 mg/L苦瓜皂甙,饲养5周后取血清标本待测.同时,取12月龄大鼠胸腺细胞培养,检测不同浓度苦瓜皂甙对雌激素受体蛋白表达的影响.结果:与青年对照组相比,衰老小鼠血清ACTH、雌二醇水平显著降低.与老年对照组相比,两实验组血清雌二醇水平均明显升高,ACTH水平有升高趋势,但只有高剂量组有显著性;两组之间所有指标均没有显著性差异.体外实验发现,苦瓜皂甙明显促进雌激素受体蛋白的表达,却不影响其mRNA水平.结论:苦瓜皂甙可通过调节ACTH分泌及雌激素受体表达来改善衰老机体内分泌功能.

pH改变对心肌细胞内Ca2+浓度和细胞长度的影响

目的:探讨细胞内pH(pHi)改变对心肌细胞内Ca2+浓度([Ca2+]i)和细胞长度的影响.方法:心肌细胞内分别灌注20 mmol/L 丙酸钠和15 mmol/L NH4Cl,建立细胞内酸碱中毒模型.荧光指示剂indo-1和SNARF-1载入大鼠心肌细胞内,用荧光显微镜同时测定心肌[Ca2+]i、pHi和细胞长度.结果:细胞内酸中毒早期,收缩期和舒张期[Ca2+]i轻度增加,细胞缩短 (CS)降低,细胞长度增加,心肌纤维对Ca2+的敏感性和CS/[Ca2+]i降低(P<0.01);碱中毒时,收缩期和舒张期[Ca2+]i均较对照组降低,CS增加,细胞长度变短,心肌纤维对Ca2+的敏感性和CS/[Ca2+]i增加(P<0.01).结论:酸中毒早期[Ca2+]i和细胞长度增加,碱中毒时[Ca2+]i和细胞长度降低.酸、碱中毒对Ca2+敏感性的影响并非线性关系,即单位pHi变化时酸中毒对敏感性的影响较碱中毒小.

川芎嗪对大鼠胸主动脉平滑肌电压依赖性Cl-通道的影响

川芎嗪(即四甲基吡嗪tetramethylpyrazine)是从具有活血化淤兼有理气功用中药川芎中分离得到的一种生物碱,现已广泛应用临床,对治疗缺血性脑血管疾病、缺血性肢体血管疾病、部分泌尿系统疾病等有明显的疗效,安全而无明显的毒副作用.有作者报道川芎嗪有明显抑制α1-肾上腺受体激动所引起持续血管收缩,而使血管舒张作用,可能与其有类似的"钙通道阻断剂"作用有关.目前认为血管平滑肌的张力与钙、钾和氯通道有关,川芎嗪与钾和氯通道的关系目前未见报道.1 材料与方法(1)药物川芎嗪,无锡市第七制药厂生产;DMEM,DIDS,HEPES,胰蛋白酶,EGTA,硝苯地平(nifedipine),苯肾上腺素(简称PHE)均为 Sigma公司出品,其余试剂均为市场销售的分析纯试剂.均为美国Sigma公司产品;其余的试剂均为国产分析纯.

大鼠生后不同时期心肌NGF mRNA水平的变化

低剂量甘丙肽拮抗剂M40在中枢的兴奋剂作用

甘丙肽是1983年发现的由29个氨基酸残基组成的多肽,其N和C端分别为甘氨酸和丙氨酸残基.甘丙肽广泛分布于中枢和外周组织,有调节胃肠平滑肌收缩、抑制胰岛素分泌、加强吗啡镇痛效应和参与记忆等重要作用.近年发现甘丙肽浓度异常与Alzheimer病(AD)的发生和发展有关,因而日益受到神经学界重视.甘丙肽拮抗剂M40[甘丙肽(1-13)-脯-脯-丙-亮-丙酰胺]是研究甘丙肽受体的重要工具药,可用于AD治疗.放射配基结合实验显示,M40在胰腺和脊髓有高、低亲和力两种受体.在高位神经中枢该药物是否存在不同效应,不同效应是否产生于同一细胞,迄今未见报道.我们以PrV为受试对象,运用全细胞膜片钳技术,对不同剂量M40的中枢作用进行了探索.

电离辐射对3T3细胞膜钙依赖性钾通道的影响及康复新的作用

肉芽组织增生是创伤愈合的中心环节,成纤维细胞不仅是这一环节的重要组成部分,而且还分泌一些细胞因子促进肉芽组织增生、调节伤口愈合.放射损伤使伤口愈合延迟与其抑制成纤维细胞的分化、增殖与分泌功能密切相关,但对其机理的深入研究的文献报道较少.近年来,细胞膜离子流的作用日益受到人们的重视,因为它与细胞的分化、增殖及细胞内大分子物质的合成与分泌等功能均有密切关系.本文研究6Gy照射对3T3 成纤维细胞株钙依赖性钾离子通道活动的影响及促进伤口愈合药物康复新的作用,以期从离子通道角度探讨放射损伤后创伤愈合延迟及康复新促愈作用的机理.

rhIL-11 和rhTPO对猕猴血小板数量、质量和全血凝血功能的影响

国外在对rhIL-11(重组人白介素-11)和rhTPO(重组人血小板生成素)促血小板效果肯定的同时,也对其对血小板功能或全血凝固状态的影响给予了必要的重视.为了给国内rhIL-11和rhTPO的合理应用提供实验依据,本文观察了rhIL-11或rhTPO对猕猴血小板数、聚集功能和全血凝固活性的影响.1 材料和方法(1)实验动物及分组成年正常猕猴,体重(5.36±1.06)kg,雌、雄各半.实验分为赋型剂对照组和rhTPO 2 μg/(kg*d)组; rhIL-11分为120 μg/(kg*d)和1 080 μg/(kg*d)及赋型剂三个组.每组动物4～5只. (2)药品、给药剂量、时间和途径 rhTPO纯度大于98%,比活性为2.5×105IU/mg蛋白.rhIL-11比活性7.3×107 u/mg.rhTPO剂量为2 μg/(kg*d),皮下注射,每天一次,连续给20 d.rhIL-11剂量为120和1080 μg/(kg*d),皮下注射,每天一次,连续给49 d.对照组给相同体积赋型剂.

急性缺氧对冠状动脉内皮细胞释放ET-1、NO、PGI2的影响

冠状动脉内皮细胞能分泌多种血管收缩和舒张物质.其中缩血管物质以内皮素的缩血管作用强,且作用持久.内皮源性舒张因子主要为NO和花生四烯酸代谢产物PGI2.三种内皮源性血管活性因子均通过旁分泌方式作用于血管内皮下的平滑肌细胞,调节局部血管紧张度和血流量.在体研究表明缺氧可引起内皮素-1、NO、PGI2合成分泌改变.但在体研究时血浆及组织匀浆中ET-1、NO、PGI2的浓度改变难以反映其在血管内皮细胞形成和释放的状况.国外有关缺氧对离体冠状动脉内皮细胞合成和释放ET-1、NO、PGI2影响的研究也才刚起步,缺氧时间短暂,时相点少.国内尚未见报道.因此我们建立了离体内皮细胞缺氧模型,观察了多个时间点缺氧对冠状动脉内皮细胞释放ET-1、NO、PGI2的影响.

小鼠哮喘模型通气功能检测实验器材的改进

通气功能检测可直接反映支气管痉挛等所造成的气道阻力等的改变,是判定支气管哮喘动物模型的可靠指标,目前国外小鼠支气管哮喘模型多采用此项检测,但国内尚未见报道.它的部分实验器材在国内很难仿制,哈佛动物呼吸器造价昂贵,我们对其器材进行改进,并作以简要报道.

光学方法同步记录成群前庭神经节细胞膜电位

目的:采用电压敏感染料和多位点光学成像系统研究前庭神经节细胞(vestibular ganglion cells,VGCs)电生理特性.方法:自新生小鼠内耳分离并培养的VGCs,用吸光性电压敏感染料RH155染色后,多个或成群VGCs被同时成像于16×16 记录单元 Photodiode arrays ( PDA)光学成像系统.结果:用高钾溶液灌流刺激时发现当VGCs膜电位变化时,膜表面的光吸收增强,光吸收度为0.23 %±0.08 %.并且所记录的光学反应具有波长特性.另外,在本实验条件下,光损伤和染料的药毒性副作用不明显或者可忽略不计.结论:光学记录可以同步观测多个和成群VGCs膜电位变化,是电生理研究的新方法.