c9,t11-CLA-PTX与t10,c12-CLA-PTX对MCF-7细胞的体内外抗肿瘤作用

在前期研究中,CLA-mixture-PTX展现出了对黑色素瘤与脑胶质瘤一定的抗肿瘤作用.本研究旨在探索c9,t11-CLA-PTX与t10,c12-CLA-PTX对人源乳腺癌MCF-7细胞的体内外抗肿瘤作用.研究中考察了c9,t11-CLA-PTX与t10,c12-CLA-PTX的体外细胞摄取、细胞毒、细胞凋亡,以及细胞周期作用.用荷瘤BALB/c裸鼠研究了c9,t11-CLA-PTX与t10,c12-CLA-PTX的体内抗肿瘤作用.体外细胞毒研究结果表明:t10,c12-CLA-PTX的IC50为(0.17±0.02) μM,显著优于CLA-mixture-PTX(1.08±0.15) μM (P＜0.01),后者显著优于c9,t11-CLA-PTX (6.50±1.20)μM (P＜0.01).与空白对照组相比,c9,t11-CLA-PTX与t10,c12-CLA-PTX均可使细胞总凋亡比例增加(P＜0.01);和CLA-mixture-PTX组相比,t10,c 12-CLA-PTX可使细胞总凋亡比例增加(P＜0.01),c9,t11-CLA-PTX则使细胞总凋亡比例降低(P＜0.01).与空白对照组相比,c9,t11-CLA-PTX与t10,c12-CLA-PTX均将细胞周期阻滞于S期与G2-M,与CLA-mixture-PTX相同.t10,c12-CLA-PTX的细胞摄取量显著高于CLA-mixture-PTX (P＜0.01),后者的细胞摄取量显著高于c9,t11-CLA-PTX (P＜0.01).体内抗肿瘤药效研究结果显示,t10,c12-CLA-PTX的抗肿瘤活性显著高于空白对照组和CLA-mixture-PTX组(P＜0.01),而c9,t11-CLA-PTX的抗肿瘤活性仅高于空白对照组(P＜0.01).上述结果表明,t10,c12-CLA-PTX对MCF-7细胞有显著体内外抗肿瘤作用,可以作为CLA-mixture-PTX的替代药物进行后续研究.

应用shRNA慢病毒技术抑制MCF7/MX100细胞中乳腺癌耐药蛋白的表达和功能

乳腺癌耐药蛋白(BCRP)在肿瘤细胞中的过表达可能导致肿瘤耐药性.RNA干扰是一种选择性抑制目的基因表达的实用技术.本研究旨在应用RNA干扰技术调控BCRP的表达和功能.首先在过表达BCRP的耐药细胞MCF-7/MX100中,评价了三种靶向于BCRP的siRNAs (si-BCRP1,si-BCRP2和si-BCRP3).研究发现si-BCRP2和si-BCRP3对BCRP的mRNA和蛋白的抑制率分别超过90％和70％,进而导致MCF-7/MX100细胞中米托蒽醌的积聚显著上升.进一步的研究将生成si-BCRP2和si-BCRP3的shRNA序列克隆至慢病毒表达载体pTRIPZ中,并采用慢病毒介导的转基因体系建立了稳定表达siRNA的MCF-7/MX100细胞.在该细胞系中,si-BCRP2和si-BCRP3对BCRP的mRNA的抑制率分别达到72％和56％,对其蛋白的抑制率分别为70％和53％.在进一步的研究中,该细胞系被用于中药活性成分的筛选,以评价BCRP的底物和抑制剂.结果显示,BCRP低表达的MCF-7/MX 100细胞可能作为良好的细胞模型被用于临床前研究.

一个新合成的新木脂素类化合物W007B的抗血栓作用

W007B是一个新合成的新木脂素类衍生物.本研究利用不同的体内、体外模型观察它对血小板聚集和血栓形成的作用.用ADP、凝血酶、花生四烯酸和胶原为诱导剂,进行体外血小板聚集实验.分别用动静脉旁路血栓模型、电刺激颈总动脉血栓形成模型、急性肺栓塞模型和尾出血实验评价W007B对动脉血栓形成的作用.实验结果显示:W007B对ADP、凝血酶、胶原、花生四烯酸诱导的血小板聚集均有抑制作用,IC50分别是899.5 μM,212.9μM,266.0 μM,52.5 μM;W007B (2-10 mg/kg,ig)单次给药可明显减轻大鼠动静脉旁路血栓重量;显著延长大鼠电刺激颈总动脉血栓形成时间.W007B (2.8-14 mg/kg,ig)单次给药明显降低ADP诱导的小鼠急性肺栓塞的死亡率;显著延长小鼠尾出血时间.这些结果表明:W007B对多种诱导剂诱导的血小板聚集均有抑制作用,其中对花生四烯酸诱导的血小板聚集抑制作用强;W007B在多种动脉血栓形成模型上都有较强的抗血栓作用,可作为新的抗血栓候选药进一步研发.

岗梅叶的化学成分研究

研究冬青属植物岗梅叶的化学成分,通过硅胶柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱、反相硅胶柱色谱、制备高效液相色谱等色谱方法分离纯化得到1 1个化合物,经多种波谱方法鉴定及与文献对照,其结构分别为kaempferol-3-O-β-D-6"-acetylglucopyranoside (1),kaempferol-4'-methylether (2),quercetin (3),quercetin-3-O-glucopyranoside (4),tormentoside (5),suavissimoside R1(6),3β,19α-dihydroxyolean-12-ene-24,28-dioicacid-28-O-β-D-glucopyranoside (7),3-O-β-sulfooxy-19-hydroxyurs-12-ene-28-oic acid (8),coniferin (9),adenoside (10),1'-O-benzyl-α-L-rhamnopyranosyl-(1"→6')-β-D-glucopyranoside (11).其中化合物1,2,5,9-11为首次从冬青属植物中分离得到,化合物3,4,6-8为首次从岗梅叶中分离得到.

通过碳碳双键连接的吲哚-2-酮与喹唑啉-4(3H)-酮杂合物的合成与抗肿瘤活性评价

通过2-甲基-4-氧代喹唑啉-6-甲醛与不同的吲哚-2-酮的缩合反应,制备了一系列吲哚-2-酮与喹唑啉-4(3H)-酮的杂合物5a-j. MTT法测试结果表明,只有化合物5e对人肿瘤细胞A549、MCF-7、HeLa、HT-29和HCT-116表现出一定的细胞毒活性,50μM浓度下的抑制率为32.0％-62.3％.

藏药镰形棘豆和轮叶棘豆的高效液相色谱指纹图谱分析

本文首次建立了藏药“俄大夏”的两种基源药材一镰形棘豆和轮叶棘豆的一种简单、灵敏、可靠的高效液相色谱指纹图谱分析方法,并对不同产地以及不同时间采集的药材进行了分析,结果显示镰形棘豆有19个共有指纹峰,轮叶棘豆有24个共有指纹峰,镰形棘豆和轮叶棘豆有11个共有指纹峰.通过对照品对照指认了两种药材中共有的7个指纹峰以及轮叶棘豆特有的1个指纹峰的化合物结构.研究结果表明两种药材尽管在化学成分上存在一定差异,但是其主要成分基本相同,因此从化学成分的角度上为两种药材均作为“俄大夏”入药提供了科学依据,同时也提示为了保证临床用药的疗效和一致性,有必要对这两种药材的化学和生物活性区别进行深入细致的研究.

氯化钆对PKC的激活可促进成纤维细胞NIH3T3的存活及细胞周期的推进

本研究以氯化钆为代表性含稀土元素的化合物,对其在小鼠胚胎成纤维细胞NIH3T3中对蛋白激酶C家族蛋白的激活进行了研究.利用活细胞成像和共聚焦激光扫描技术可以观察到,在血清饥饿的条件下,50 μM的氯化钆可以通过增强细胞粘附和细胞骨架重组促进细胞存活.使用蛋白质印迹技术发现蛋白激酶C家族蛋白在氯化钆作用不同时间后可以发生磷酸化,表明蛋白激酶C被激活.此外,双吲哚马来酰亚胺(bisindolylmaleimide,一种PKCpan的抑制剂)可以有效降低PKCpan磷酸化的水平(βIISer660),同时也可以降低氯化钆引起的ERK的激活.以上结果表明,氯化钆激活的蛋白激酶C可以通过介导MAPK/ERK信号通路的激活,继而推动细胞周期和细胞存活.

Formulation and characterization of extruded and spheronized pellets using pectin and crosslinking agents

年龄、性别及2型糖尿病对于胃癌发生的风险:一项单一机构的回顾性分析

糖尿病与多种肿瘤的发生发展有关.然而,与胃癌发生相关的潜在风险因素,包括合并2型糖尿病(T2DM)是否与胃癌发生相关,仍不清楚.本研究搜集了2010年1月～2012年12月我院收治的1320例胃癌患者(胃癌组)和1252个甲状腺结节的患者(对照组)的基本信息,采用病例对照研究方法分析.应用Logistic回归分析评估合并T2DM情况、性别、年龄、身体质量指数(BMI)等对胃癌发生的影响.结果表明,胃癌组中416例T2DM占31.5％,对照组120例T2DM占9.6％,两组间具有极其显著差异(P=0.000).与对照组相比,Logistic回归分析显示男性患者以及老年人群(年龄大于65岁)有较高发生胃癌的风险.此外,T2DM人群发生胃癌的风险也更高.年龄、T2DM、性别和体重指数的OR值分别为16.951,15.130,2.658和0.224.本研究表明年龄、性别和2型糖尿病是胃癌发生的危险因素之一,即患有2型糖尿病且年龄在65岁以上的男性患者是胃癌的高发人群,在这三个危险因素中,患有2型糖尿病的风险值仅次于年龄,也有可能是这些因素之间的共同作用导致胃癌的发生.