高效液相-质谱串联方法快速测定大鼠血浆中的槲皮素-3'-O-葡萄糖苷含量

建立大鼠血浆中槲皮素-3'-O-葡萄糖苷的高效液相-串联质谱(HPLC-MS/MS)检测法.生物样品中槲度素-3'-O-葡萄糖苷和卡马西平(内标)采用液-液萃取的方法提取,乙酸乙酯作为提取溶剂.HPLC-MS/MS方法采用多离子反应模式(MRM)进行检测,被测物质和内标均在3.5 min内出峰.槲皮素-3’-O-葡萄糖苷在血浆中的低定量限是10.625 ng/mL,低检测限是4.25 ng/mL,平均回收率大于66.80％,日内、日间精密度和准确度的RSD值均小于10.44％.尾静脉注射10 mg/kg槲皮素-3'-O-葡萄糖苷后,其t1/2和AUC分别是(0.02±0.01)h和(1.22±0.28)×104 μg/L·h.本法准确、稳定、灵敏度高,适用于槲皮素-3’-O-葡萄糖苷的大鼠药代动力学研究.

红球菌Rhodococcus sp.对葛根素的选择性乙酰化

在所试验的39株微生物中,发现红球菌(Rhodococcus sp.AS 4.1147)能在葛根素(1)葡萄糖基的6位上进行选择性乙酰化.通过质谱和核磁共振波谱对乙酰化产物6″-O-acetylpuerarin (2)的结构进行了确定.转化产物的分离得率为22.2％.

高效液相离子对色谱法测定糖尿病大鼠血浆中二甲双胍浓度及其药代动力学研究

本研究建立并验证了测定糖尿病大鼠血浆中二甲双胍浓度的高效液相色谱方法,以阿替洛尔为内标,加入10％高氯酸沉淀蛋白来制备血浆样品.色谱条件:AQ-C18极限色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),流动相(pH 5.05)为乙腈-水(31∶69,v/v,水相中含有0.002 M十二烷基磺酸钠,0.0125 M磷酸二氢钾,0.015 M三乙胺),流速1.0 mL/min.二甲双胍在7.5-4000ng/mL范围内具有良好的线性关系(r＞0.994),低检测限(LLOQ)为7.5 ng/mL,描述精密度的相对标准偏差(RSD)范围为1.87％-15.70％,准确度为93.98％ 106.89％.二甲双胍和内标的回收率分别为95.40％和95.31％.不同实验条件下质控样品的稳定性相对偏差范围在±9.00％之内.该方法成功地运用到糖尿病大鼠单剂量灌胃10 mg/kg二甲双胍后的药代动力学研究中,结果显示本研究采用AQ-C18极限色谱柱建立的离子对色谱法对强极性化合物如二甲双胍具有良好的分离效果.

爪哇脚骨脆中三萜类化学成分研究

从大风子科植物爪哇脚骨脆的树干中分离得到11个已知三萜类化合物,经波谱解析及与文献对照方法,分别鉴定为木栓酮-2,3-内酯(1),木栓烷(2),表木栓醇(3),木栓酮(4),2α,3α,19α-三羟基-乌苏烷-12-烯-28-羧酸(5),2α,3β,19α-三羟基-乌苏烷-12-烯-28-羧酸(6),2α,3α,23-三羟基-乌苏烷-12-烯-28-羧酸(7),2α,3α,23-三羟基—齐墩果烷-12-烯-28-羧酸(8),2α,3α,19α,23-四羟基-乌苏烷-12-烯-28-羧酸(9),2α,3α,19α,23-四羟基-乌苏烷-12-烯-28-羧酸-28-O-β-D-葡萄糖酯(10),及3β,19α-双羟基-乌苏烷-12-烯-28-羧酸3-O-α-L-阿拉伯糖苷(11).其中化合物1为大风予科植物中稀有的裂环木栓烷三萜,所有化合物皆为首次从本植物中分离得到.

栓塞用明胶微球的制备及其性质评价

本文目的是研究栓塞用明胶微球的制备及其质量评价.采用乳化-化学交联法制备明胶微球,以光学显微镜观察微球的形态、测定微球的粒径,并测定了微球的吸水率和溶胀率；采用质构仪测定了微球的抗压弹性,为测量微球经导管推注时的压力设计了一种新型装置.在线测定了不同粒径微球的推注压力,以毛细管顶空气相色谱法测定了明胶微球中残留的丙酮量.所得微球冻干后呈椭圆形,表面有褶皱,在生理盐水中吸水后形状圆整,表面光滑.干燥微球的粒径范围在100-1000 μm,平均粒径为430.5 μm;吸水后微球的粒径范围在150-1425 μm,平均粒径为601.2 μm,符合栓塞剂的粒径需要.微球大平衡吸水率为590.7％,平均溶胀率为103.0％.明胶微球的弹性良好,压缩形变到50％时,对于400-700 μm微球的压力为(0.771±0.064)N,对于700-850 μm微球的压力为(0.814±0.153)N.三组明胶微球(湿球100-450,450-700,700-940 μm)都能够以较小的压力通过导管.残余的丙酮含量低于中国药典2010版的限度.本研究制备的明胶微球体外性质良好,适于作栓塞剂使用；建立的评价明胶微球性质的方法有助于此类栓塞剂的体外评价.

丙泊酚mPEG-PLA/普朗尼克混合胶束的制备和性质

采用生物相容性聚合物胶束材料聚乙二醇-聚乳酸(mPEG-PLA和普朗尼克P105 (P105),构建了全新的混合胶束体系,用于提高难溶性麻醉药一丙泊酚的溶解度.相对于单纯由mPEG-PLA构建的载药胶束,该载药混合胶束能有效提高药物溶解度.优化处方为mPEG-PLA∶P 105∶丙泊酚=10∶4∶5 (w/w/w),粒径约为90 nm,多分散指数为0.2左右.载药混合胶束中游离药物浓度显著低于市售品脂肪乳(P＜0.05).此混合胶束于4℃条件下放置6个月,其粒径、多分散指数、游离药物浓度和载药量均无明显变化,说明4℃条件下该体系在6个月内是稳定的.混合胶束在各时间点的体外释放百分率显著高于市售品脂肪乳,这可能有利于更快发挥药效.睡眠/苏醒试验结果表明,混合胶束、单一胶束以及市售品脂肪乳的翻正反射消失时间和恢复时间没有显著性差异(P＞0.05).上述结果表明该混合胶束有望成为静脉给药系统应用于临床.

新型口服活性炭微球对链脲佐菌素诱导的糖尿病模型大鼠治疗作用的研究

制备并表征了孔径不同的活性炭微球,考察其对糖尿病模型大鼠的治疗作用.通过制备工艺的改良,制得了直径在0.2-0.3 mm的活性炭微球.通过对葡萄糖的吸附实验,筛选优的活性炭微球.采用雄性Sprague-Dawley大鼠腹腔注射链脲佐菌素诱导制得糖尿病大鼠模型.两组大鼠采用每天两次口服灌胃活性炭微球,连续给药30天.通过离体肠段外翻实验法,测定葡萄糖的跨膜透过量.与糖尿病组相比,在服药2周以后,活性炭微球治疗组的血糖水平明显降低,改善血糖耐受量.在肠粘膜侧有活性炭微球存在时,葡萄糖分子的渗透清除率显著增大,尤其是当浆膜侧的葡萄糖浓度较高时(10 mg/mL).筛选得到的活性炭微球BET比表面积为1566 m2/g,微孔含量高(0.478 cm3/g),球形良好,对葡萄糖吸附率高.作为口服微球制剂,活性炭微球对链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠有治疗作用.

小毛茛内酯的合成及抗结核活性的研究

小毛茛内酯一直被认为是猫爪草抗结核活性的有效成分.本文通过Yamaguchi酯化反应以32.7％的总收率完成了小毛莨内酯的化学合成制备,并采用直观快速药敏实验技术评价了其抗结核活性.文献报道,小毛茛内酯是通过增加外周血淋巴细胞颗粒裂解肽的表达,间接杀死结核杆菌.本文研究结果显示,小毛茛内酯在体外对分支杆菌H37Rv ATCC 27294菌株表现出了微弱的抑制活性,其抗结核杆菌作用可能与细胞因子有关.

胺甲斑蝥素对GABAc受体的影响

已有胺甲斑蝥素的抗惊厥作用的相关报道,但其作用机制不明,本实验研究了胺甲斑蝥素对GABAc受体的影响.采用青霉素诱发的大鼠癫痫模型,在注射青霉素前30分钟,对应不同分组分别给予灌胃胺甲斑蝥素88 mg/kg、22 mg/kg,丙戊酸钠154 mg/kg.应用脑电图监测大鼠痫样活动时脑电波的变化,免疫组织化学技术测定GABA和GABAc受体在海马区的水平,实时监测的聚合酶链式反应技术测定GABAc受体亚基ρ2的mNA表达水平.与对照组相比,胺甲斑蝥素组和丙戊酸钠组的痫样活动振幅和频率都明显降低,GABA和GABAc受体在海马区的水平以及GABAc受体亚基ρ2的mRNA表达水平明显增加.实验表明胺甲斑蝥素和丙戊酸钠都可抑制癫痫发作,我们认为氨甲斑蝥素的抗惊厥作用的机制可能是通过调节GABA和GABAc受体水平来实现的.

“庆祝北京大学医学部百年校庆”专利征稿启事

血液透析患者的高血压药物控制

高血压是血液透析患者心、肭血管并发症的重要危险因素.消除体内过量水分,准确评估患者干体重,抗高血压药物治疗是目前比较常用的有效控制透析患者高血压、降低心血管事件发生率和病死率的治疗手段.