中国微生态学杂志
Chinese Journal of Microecology 중국미생태학잡지
- 主管单位： 中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会
- 主办单位： 中华预防医学会 大连医科大学
- 影响因子： 1.11
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1005-376X
- 国内刊号： 21-1326/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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革兰阴性菌在儿科重症监护病房的分布及耐药性分析
目的 分析儿科重症监护病房(PICU)常见革兰阴性(G)菌的分布特点及其对常用抗菌药物的耐药性情况,为合理使用抗生素提供参考.方法 回顾性分析重庆医科大学附属儿童医院重症医学科2013年1月至2015年2月临床分离的213株G-菌进行耐药性分析.结果 经培养共分离出的213株G-菌,以呼吸道来源为主,占64.8％.常见G-菌为铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、鲍曼不动杆菌、肺炎克雷伯菌、阴沟肠杆菌、嗜麦芽黄单胞菌.药敏结果显示细菌耐药性明显增强,阴沟肠杆菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌肺炎亚种对美洛培南、亚胺培南敏感率为100.0％,对环丙沙星、左旋氧氟沙星、阿米卡星敏感性在70.3％以上;超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)菌株检出率在76.7％以上.铜绿假单胞菌仅对环丙沙星、左旋氧氟沙星、庆大霉素、阿米卡星、多粘菌素敏高度感度,敏感度在87.0％以上.鲍曼不动杆菌对美洛培南、亚胺培南、环丙沙星、左旋氧氟沙星、庆大霉素、阿米卡星、头孢吡肟、头孢他啶相对敏感,敏感度在53.3％～73.3％;ESBLs检出率为76.7％.嗜麦芽黄单胞菌仅对左旋氧氟沙星、环丙沙星、复方新诺明相对敏感,敏感度在53.3％～73.3％,对美洛培南、亚胺培南100.0％耐药.结论 G-菌耐药日趋严重,多为多重耐药.为避免耐药率上升,临床应合理使用抗生素.
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肠杆菌科细菌碳青霉烯酶基因的检测
目的 了解余姚地区耐碳青霉烯类药物肠杆菌科细菌的耐药情况和碳青霉烯酶耐药基因类型.方法 收集2014年3月至12月耐亚胺培南和厄他培南的肠杆菌科细菌18株,进行Hodge试验确认.对于阳性试验菌株采用PCR法检测blaKPC、blaNDM-1、blaMH、blaGEs、blasME、blaNmcA和blasHv-38七种基因.结果 18株耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌经改良Hodge试验确认阳性11株,占61.1％.经PCR检测显示11株均携带有blaKPc基因,其中肺炎克雷伯菌6株,大肠埃希菌3株,阴沟肠杆菌2株.结论 余姚地区耐碳青霉烯类药物肠杆菌科细菌的耐药机制主要是blaKPC型碳青霉烯酶.
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2012-2013年浙江省手足口病流行病学和病原学特征分析
目的 了解2012-2013年浙江省手足口病流行特征和病原构成,为手足口病防控工作提供参考.方法 收集2012-2013年浙江省手足口病疑似患者粪便、咽拭子、疱疹液标本,采用实时荧光RT-PCR对收集样本进行HFMD病原体检测.结果 2012-2013年共采集样本1 792例,患者以5岁以下散居儿童为主;浙江省手足口病发病高峰期在5～6月份,9月份出现发病次高峰;肠道病毒总检出率为72.9％,其中2012年浙江省手足口病优势病原体为EV71 (40.3％),其次为CoxA16 (31.3％),2013年浙江省手足口病优势病原体为其他肠道病毒(77.2％)(非EV71和CoxA16),以CoxA6为主(51.3％).不同样本类型中,肠道病毒检出率依次为疱疹液(100.0％)、粪便(76.2％)和咽拭子(65.1％).结论 手足口病的流行具有季节性和人群性,不同年份引起手足口病的优势病原体存在变化,持续地病原监测有助于预防和控制手足口病的流行暴发.
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降钙素原在鉴别诊断新生儿凝固酶阴性葡萄球菌血流感染与污染的应用价值
目的 探讨血清降钙素原(PCT)对新生儿凝固酶阴性葡萄球菌(CoNS)血流感染与污染的临床鉴别诊断价值.方法 回顾性分析东南大学附属中大医院2012年2月至2015年2月血培养CoNS阳性新生儿的临床资料,比较血流感染组和污染组患儿病例的一般人口学特征、PCT、C-反应蛋白(CRP)和血培养阳性报警时间(TTP)等结果,并根据ROC曲线分析PCT和CRP对两者的鉴别诊断价值.结果 共112例CoNS阳性患儿纳入研究,其中血流感染组52例和污染组60例,两组患儿胎龄和性别差异均无统计学意义(P＞0.05);血流感染组患儿PCT和CRP水平明显高于污染组(Z=-7.135,P=0.000和Z=-3.065,P=0.002),血流感染组TTP平均值低于污染组(Z=-6.899,P=0.000);早发型败血症患儿人数明显多于晚发型败血症患儿(P=0.04);CoNS阳性血流感染组和污染组各菌种分布之间无统计学差异(P＞0.05);以PCT＞0.52 ng/mL作为鉴别新生儿CoNS阳性血流感染及污染的佳截断值时,其敏感性、特异度、阳性预期值和阴性预期值分别为84.9％、88.5％、86.5％和90.0％,ROC曲线下面积(AUC)为0.893[95％CI (0.82,0.95)];以CRP＞8.0 mg/mL作为鉴别诊断新生儿CoNS阳性血流感染与污染的临界值时,其准确度较低.结论 PCT不失为一项值得推荐的鉴别诊断新生儿CoNS血流感染与污染的指标.综合分析新生儿PCT和其他临床特征,将有助于更好地指导临床医生合理使用抗菌药物.
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新生儿凝固酶阴性葡萄球菌败血症血降钙素原、C反应蛋白、白细胞及血小板计数变化及其意义
目的 观察新生儿凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)败血症患儿血降钙素原(PCT)、C反应蛋白(CRP)、白细胞(WBC)及血小板(PLT)水平的变化,探讨其与新生儿CNS败血症的关系.方法 选择2013年至2014年住院的新生儿CNS败血症患儿38例作为观察组,另选同时期收住无感染症状的32例新生儿为对照组,比较两组患儿入院后血PCT、CRP、WBC及PLT水平和阳性率的差异,并观察这些指标诊断新生儿CNS败血症灵敏度和特异度.结果 观察组PCT水平、阳性率显著高于对照组(P＜0.05),两组患儿CRP、WBC、PLT水平及阳性率比较差异无统计学意义(P＞0.05),PCT诊断新生儿CNS败血症灵敏度高于CRP、WBC及PLT,但特异度低于后三者.结论 新生儿CNS败血症无特异性实验室检查方法,PCT对新生儿CNS败血症早期诊断有一定的价值,联合检测PCT、CRP、WBC及PLT能提高诊断的准确率,血培养阳性仍是诊断新生儿CNS败血症的金标准.
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幽门螺杆菌感染对冠心病患者冠状动脉病变程度与血清Ghrelin/obestatin比值的影响
目的 探讨幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)感染与冠心病患者冠状动脉病变程度和血清Ghrelin/obestatin比值之间的关系.方法 选取2013年1月至2014年10月行冠状动脉造影确诊冠心病患者116例作为冠心病组,选取同期健康体检人员80例作为对照组.对所有患者的冠状动脉病变程度进行Gensini评分,运用14C尿素呼气试验方法测定H.pylori感染情况,测定血清Ghrelin和obestatin水平,分析H.pylori感染与冠状动脉病变程度、血清Ghrelin/obestatin比值之间的关系.结果 冠心病组H.pylori感染阳性率明显高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).H.pylori感染阳性组Gensini积分明显高于H.pylori感染阴性组,差异有统计学意义(P＜0.05);H.pylori感染阳性组Ghrelin/obestatin比值明显低于H.pylori感染阴性组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 H.pylori感染能够加重冠心病患者冠状动脉病变程度,引起Ghrelin/obestatin比值异常升降低.H.pylori感染与冠心病发生发展密切相关.
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血液中肺炎克雷伯菌碳青霉烯类耐药危险因素的调查
目的 探讨血液中分离的肺炎克雷伯菌耐碳青霉烯类抗菌药物的危险因素,为临床治疗提供理论依据.方法 回顾性收集2009年6月至2012年12月期间血液中分离出肺炎克雷伯菌的住院患者的临床资料,采用病例对照研究,单因素分析和多因素Logistic回归分析血液感染肺炎克雷伯菌耐碳青霉烯类抗菌药物的危险因素.结果 泌尿道插管、血型(A型)、使用氨基糖苷类及抗真菌类抗菌药物是血液感染肺炎克雷伯菌耐碳青霉烯类抗菌药物的独立危险因素.结论 临床治疗过程中,需要特别注意的环节是:泌尿道插管;氨基糖苷类和抗真菌类抗菌药物的合理使用.
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杭州地区2009-2014年非结核分枝杆菌流行状况分析
目的 研究近6年杭州市非结核分枝杆菌(Nontuberculous m ycobacteria,NTM)的流行状况.方法 采用基因芯片和16S rRNA测序法鉴定2009年1月至2014年12月本院微生物实验室结核菌培养阳性的分离,并对相关资料进行总结分析.结果 6年间,从789例患者标本中分离798株分枝杆菌(剔除重复菌株),NTM分离株171株,占21.4％,从2009年的11.9％上升到2014年的25.8％,MTB的构成比例降低和NTM比例升高的趋势有统计学意义(P=0.014).NTM种群分布达18种,常见的是胞内分支杆菌、鸟分支杆菌和脓肿分支杆菌,分别占30.4％、26.3％和20.5％.NTM阳性患者中,男性占66.3％,女性占33.7％,45～74岁年龄段合计占65.5％.抗酸杆菌涂片检查阳性的病例中NTM检出率由2009年的8.0％上升到2014年的22.0％,趋势分析P=0.014.结论 杭州地区分枝杆菌中NTM构成比例持续升高,2014年已达25.8％,以胞内分支杆菌、鸟分支杆菌和脓肿分支杆菌为主.开展NTM菌种鉴定,对鉴别诊断和有效治疗有重要意义.
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糖尿病性肾病患者泌尿系感染的菌群分布及耐药性
目的 探讨糖尿病性肾病患者泌尿系感染的菌群分布及耐药性.方法 选取在温岭市第一人民医院就诊的糖尿病性肾病合并泌尿系感染患者共109例,所有患者均收集清洁中段尿进行尿培养及药物敏感试验,分析糖尿病性肾病合并泌尿系感染患者的病原菌分布特点及耐药情况.结果 糖尿病性肾病泌尿道感染患者109例共检测出152株病原菌,G-菌104株,常见的3种为大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和变形杆菌;G+菌43株,常见的3种为金黄色葡萄球菌、肠球菌和表皮葡萄球菌;真菌5株,均为白色念珠菌.主要G菌对万古霉素、亚胺培南及阿米卡星的耐药率较低,主要G+菌对万古霉素、哌拉西林/他唑巴坦、阿莫西林/克拉维酸钾的耐药率较低,真菌对两性霉素B耐药率较低.结论 糖尿病性肾病泌尿系感染以G菌为主,常规抗生素耐药率高,临床医师应根据耐药性检查及安全性选择合适的抗生素.
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参苓固肠颗粒联合金双歧治疗腹泻型肠易激综合征脾胃虚弱的临床疗效观察
目的 观察参苓固肠颗粒联合金双歧治疗腹泻型肠易激综合征脾胃虚弱证临床疗效.方法 符合纳入标准患者60例,随机分为参苓固肠颗粒组、益生菌组、联合用药组,每组20例,分别予参苓固肠颗粒、双歧杆菌三联活菌片、参苓固肠颗粒+双歧杆菌三联活菌片口服治疗,疗程4周,比较三组治疗前后中医症候总积分、单项症状积分及总有效率.结果 参苓固肠颗粒组、益生菌组、联合用药组总有效率分别为90％、80％、95％,联合用药组疗效优于参苓固肠颗粒组和益生菌组(P＜0.05);三组证候总积分分别为(8.20±4.77)、(9.00±4.34)、(5.05±4.66),联合用药组症状改善较单药组明显(P＜0.05);三组对腹泻、腹痛、肠鸣等大多数症状都有明显改善,其中联合用药组在改善腹胀和食欲不振方面疗效优于参苓固肠颗粒组和益生菌组(P＜0.05).结论 参苓固肠颗粒联合金双歧治疗腹泻型肠易激综合征脾胃虚弱证临床疗效确切,优于单用参苓固肠颗粒和金双歧单药,特别在改善患者的临床症状,尤以腹胀不适和食欲不振方面疗效突出.
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肺癌患者铂类药物化疗后肠道菌群变化的临床研究
目的 应用聚合酶链式反应-变性梯度凝胶电泳(PCR-DGGE)和实时荧光定量PCR (RT-PCR)法研究肺癌患者铂类药物化疗后肠道菌群的变化,为临床提供理论基础.方法 收集接受铂类药物治疗的肺癌患者化疗前后的粪便,通过PCR-DGGE所得图谱分析菌群丰富度、多样性并对差异条带测序;利用RT-PCR法比较化疗前后两种优势菌群的变化.结果 肺癌患者铂类药物化疗后肠道菌群的丰富度和多样性下降,菌群构成发生改变,乳酸杆菌及双歧杆菌数量均减少,差异有统计学意义.结论 肺癌患者接受铂类药物化疗后益生菌减少,条件致病菌增加,如何调整肠道菌群失调以减轻化疗相关副作用,值得进一步探究.
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拟态弧菌VMH蛋白的原核表达及其多克隆抗体制备
目的 实现拟态弧菌热不稳定性溶血素(VMH)的原核表达,制备兔抗VMH蛋白的多克隆抗体.方法 根据GenBank上已有的拟态弧菌vmh基因序列,设计并合成引物,通过PCR方法扩增vmh基因.PCR纯化产物酶切后,定向插入到PET-32a表达载体构建重组表达质粒PET-32a-vmh.重组表达质粒转化至E.coli Rosetta感受态细胞,在IPTG诱导下进行VMH蛋白表达.SDS-PAGE分析重组VMH蛋白(rVMH)的表达形式,并分别采用兔血平板扩散法和Western blot检测其溶血活性和免疫反应性.用纯化的rVMH蛋白免疫新西兰大白兔,3次免疫后采集免疫血清,采用饱和硫酸铵分级沉淀结合亲和层析法纯化多克隆抗体,并检测其纯度与效价.结果 重组表达质粒PET-32a-vmh诱导表达后,经SDS-PAGE分析发现分子量约为77.8 kDa的rVMH蛋白主要以包涵体形式表达,该蛋白经变性复性后具有溶血活性和免疫反应性.兔抗rVMH蛋白的多克隆抗体经纯化后,其纯度达95％,ELISA效价为1∶26843545600,琼扩效价为1∶32.结论 成功制备了rVMH蛋白及其多克隆抗体,为进一步采用噬菌体肽库筛选技术鉴定VMH蛋白表位提供了物质基础.
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耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌金属β-内酰胺酶和基因捕获元件基因检测及同源性分析
目的 了解大连地区分离的耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌的金属p-内酰胺酶、整合子Ⅰ和ISCR1的分布情况,并分析其基因多态性特征.方法 收集临床分离的89株耐亚胺培南铜绿假单胞菌,PCR检测金属酶、整合子Ⅰ、ISCR1耐药基因.脉冲场凝胶电泳(PFGE)进行细菌基因分型.结果 89株亚胺培南耐药的铜绿假单胞菌中,ISCR1基因阳性菌25株(25/89,28％),其中84％ (21/25)为多重耐药,5类及以上药物耐药的菌株占64％ (16/25),金属酶基因阳性为11株(11/89,12％),其中有8株携带IMP-1基因,3株携带VIM-2,整合子Ⅰ基因阳性43株(43/89,48％).但携带金属酶的菌株整合子Ⅰ、ISCR1基因扩增均为阴性;PFGE分型结果显示:89株耐亚胺培南的铜绿假单胞菌分为15个基因型(A～O),其中A型46株、B型16株、C型4株、D型5株、E型4株、F型3株、G型2株、H型2株,Ⅰ型～O型各有1株.基因型集中的A型～G型,各型中的菌株来源于不同医院,呈多态性,每群均存在克隆株.结论 基因捕获元件整合子Ⅰ基因及ISCR1广泛分布在大连地区耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌中,并与细菌的多重耐药、泛耐药显著相关,特别是ISCR1基因;大连地区整合子Ⅰ、ISCR1并未携带金属酶基因盒.PFGE结果提示本地区铜绿假单胞菌具有基因多态性,但仍存在高度同源性的流行优势基因型.
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一株与中草药五倍子协同抑菌的芽孢杆菌筛选及体外益生效果评价
目的 利用分子生物学方法对从猪肠道食糜分离的芽孢杆菌进行鉴定,并通过体外法评价其益生效果.方法 实验从健康猪肠道食糜中筛选到l株能抑制大肠埃希菌、副伤寒沙门菌、金黄色葡萄球菌和巴氏杆菌生长,并与中草药五倍子具有协同抑菌作用的芽孢杆菌AP139.结果 经16S rDNA同源性序列分析,结合形态和生理生化特点,鉴定为枯草芽孢杆菌(B.subtilis).芽孢杆菌AP139联合中草药五倍子发酵结果表明:5％组对4种致病菌的抑菌圈直径分别扩大了1.20、14.45、23.54和6.09 mm,其抑菌效果优于未发酵,对巴氏杆菌PM2010和猪大肠埃希菌抑菌圈极显著提高(P＜0.01),对金黄色葡萄球菌抑菌圈有显著提高(P＜0.05).经体外益生效果评价得知,AP139菌株在pH=5.0～8.0的条件下活菌数均较高,NaC1浓度为1％时生长较好,0.3％胆盐和人工肠液分别处理3h后存活率分别达84.26％和89.35％.结论 芽孢杆菌AP139具有良好的协同抑菌作用,并具有益生菌的耐酸、耐胆盐、耐胃肠液等特性,可适应动物胃肠道内环境.
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益生菌及人体肠道菌群对低聚甘露糖的降解
目的 研究益生菌及肠道菌群对低聚甘露糖的降解情况.方法 (1)将5名志愿者粪便样品,13株纯菌以及7种微生态制剂接种到VI-MO液体培养基中,37℃厌氧培养24或72 h,取样并采用TLC(薄层层析)检测降解情况;(2)选取7种微生态制剂中降解能力较强的乐塞益生菌胶囊(LS)中的益生菌作为筛选源,采用VI-MO固体培养基分离纯化低聚甘露糖的单一降解菌;(3)将B.uniformis L8和L.plantarum LS1A同时接种到VI-MO液体培养基中,37℃厌氧培养72 h,取样并采用TLC检测降解情况.结果 (1)不同人体肠道菌群和微生态制剂对低聚甘露糖的利用情况存在较大差异,B.uni formis L8和B.xylanisolvens C5可利用大聚合度低聚甘露糖;(2)从微生态制剂中分离得到的L.plantarum LS1A可利用小聚合度低聚甘露糖;(3)B.uniformis L8利用MO产生的小寡糖能被L.plantarumLS1A利用.结论 低聚甘露糖被拟杆菌降解释放出的小聚合度寡糖可以被乳酸菌利用,作为益生元很有可能改善肠道菌群的结构.
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四联活菌制剂对危重症患者肠屏障功能障碍的影响及疗效观察
目的 探讨双歧杆菌、嗜热链球菌、保加利亚乳杆菌和嗜酸乳杆菌四联活菌制剂对危重症患者肠道屏障功能的影响及疗效观察.方法 选择新疆维吾尔自治区人民医院重症监护室2014年5月至2015年2月收治的危重症患者中64例肠道屏障功能障碍的患者,按照随机数字表法随机分为观察组和对照组.两组患者均给予基础治疗加营养治疗.在营养治疗方面,对照组给予常规营养治疗,观察组在常规营养治疗的基础上加用四联活菌制剂,800 mL/d.观察两组患者在治疗前及治疗后7、14d外周血二胺氧化酶(DAO),血浆D-乳酸,血清内毒素的变化;观察两组患者腹泻治疗情况.结果 两组患者治疗后7、14 d肠黏膜屏障功能3项指标有明显降低,观察组治疗14d后肠黏膜屏障功能3项指标较对照组降低幅度更大,差异有统计学意义(P＜0.01).患者治疗腹泻总有效率观察组为96.7％,对照组为70.0％,两组间比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 四联活菌制剂可以明显改善危重症患者肠道通透性,同时改善肠道微生态平衡,修复肠黏膜屏障功能,对危重症患者腹泻有显著的治疗作用,进而改善患者的预后,提高临床疗效,应在临床上推广应用.
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凝结芽孢杆菌活菌片联合甲硝唑栓治疗细菌性阴道病的临床观察
目的 观察凝结芽孢杆菌活菌片(商品名:爽舒宝)联合甲硝唑栓治疗细菌性阴道病的临床疗效.方法 选取细菌性阴道病患者108例随机分为观察组和对照组,每组54例.两组患者均以甲硝唑栓放入阴道治疗,观察组在此基础上,口服凝结芽孢杆菌活菌片,首次6片,以后3片/次,3次/d,连用14d.观察两组患者用药后的临床疗效及不良反应,并比较治疗后随访半年内的复发率.结果 观察组患者临床总有效率(90.7％)明显高于对照组(74.1％)(P＜0.05),治疗期间均未见明显的药物不良反应.治疗后随访半年,观察组的复发率(14.3％)明显低于对照组(32.5％)(P＜0.05).结论 凝结芽孢杆菌活菌片联合甲硝唑栓治疗细菌性阴道病疗效显著,能降低复发率,值得临床推广应用.
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甲硝唑治疗细菌性阴道病前后阴道菌群的结构变化及其预后相关性
目的 研究经甲硝唑规范治疗的细菌性阴道病患者在用药后6～8 d随访时的菌群结构与治疗前以及治疗结局之间的关系,探讨治愈人群与治疗失败人群在6～8 d这一观察点的阴道菌群多样性的差异,从而为实现细菌性阴道病治疗结局的预测提供理论依据.方法 选取2012年9月至2013年7月在北京大学第一医院妇产科门诊诊断为细菌性阴道病的育龄期女性为研究对象,规范使用甲硝唑凝胶治疗,分别采集患者用药前、用药后6～8 d、用药后1个月的阴道分泌物,提取细菌组DNA,进行454焦磷酸测序,分析阴道微生物菌群的多样性和丰度差异,探讨细菌性阴道病患者阴道菌群的构成差异与预后之间的相关性.结果 共61名患者完成了2次随访,共计183份阴道分泌物样品.对所有采集的标本进行454焦磷酸测序分析,共发现192种细菌.用药后6～8 d的革兰染色涂片结果显示所有患者的阴道菌群镜下可分为三种情况:正常菌群、菌群抑制、异常菌群.镜检涂片为正常菌群的治愈率高,其次是菌群抑制,异常菌群的治愈率低.454焦磷酸测序分析显示甲硝唑治疗前后菌群的多样性和丰度发生了一定程度的变化,乳杆菌和球菌的含量未受明显影响,而细菌性阴道病致病菌的含量明显减少.结论 甲硝唑可以有效减少细菌性阴道病致病菌的数量而不影响乳杆菌的含量,但是对以球菌为主的患者治疗效果差.对高通量测序结果和革兰染色涂片结果的综合分析显示甲硝唑用药后6～8 d的阴道菌群对细菌性阴道病1个月后的治疗结局具有预测价值.
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建立转酮酶酶活测定方法及应用
目的 转酮酶是非氧化磷酸化戊糖途径中的关键酶.5-磷酸木酮糖是分析测定转酮酶酶活性的底物,然而因该底物难以化学合成,生产成本高,从而导致厂家停止生产,目前市场上无法得到.因此有必要建立起新的转酮酶酶活测定方法.方法 (1)将酿酒酵母的木酮糖激酶基因(XKS1)克隆于pET30a载体.(2)纯化木酮糖激酶.(3)建立酶偶联反应,以木酮糖为底物,将其转化为5-磷酸木酮糖,用于转酮酶酶活的测定.结果 (1)成功地将XKSI基因克隆于pET 30a得到质粒pXZ-X004.(2)质粒pXZ-X004诱导表达产生C端His-tag标签的XK,用Ni柱分离得到纯化的木酮糖激酶(XK).(3)纯化的XK活性为21.0 U/mg protein,当用12.5％的甘油保存于-80℃环境1个月,仍有74％的活性.(4)用纯化的XK建立了转酮酶(TK)酶活测定新方法,当TK酶活低至0.008 75 U时仍能够利用新方法检测.结论 本实验通过克隆和表达XKS1基因,成功地建立了TK酶活性测定的新方法,并应用于木糖代谢工程菌株TK酶活的测定,为医学和生态学领域中TK酶活的分析奠定了基础.
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冻干前处理对双歧杆菌存活率影响的探讨
目的 探索提高双歧杆菌菌体存活率的方法.方法 分别考察冻干前处理的三种因素(菌泥暴露于空气中的时间、保护剂的温度以及混合时间)对青春双歧杆菌菌体存活率的影响.结果 菌泥直接暴露于空气中,对双歧杆菌的存活有较大的影响,生产过程应尽量缩短暴露于空气中的时间;预先冷却到5～10℃的保护剂比常温的保护剂的保护效果更好;适当延长保护剂的混合时间,让保护剂充分渗入菌体内,能显著提高双歧杆菌的冻干存活率.结论 冻干前处理对青春双歧杆菌存活有显著影响,缩短菌泥暴露于空气中的时间、保护剂预先冷却、适当延长混合时间可以有效保持菌体的存活率.
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SYBR GREEN实时荧光定量分析牙龈卟啉单胞菌在初次感染和再感染根管内的定植
目的 采用SYBR GREEN实时荧光定量PCR分析和比较牙龈卟啉单胞菌(Porph yromonas gingivalis,P.gingivalis)在初次治疗和再治疗感染根管中的定植情况.方法 选择2013年9月至2014年10月于首都医科大学附属北京口腔医院牙体牙髓科就诊的慢性根尖周炎患者的120颗单根管患牙为研究对象,按初次治疗和再治疗分为2组,每组60人.采用SYBR GREEN实时荧光定量PCR(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)比较P.gingivalis在两种感染根管内的检出率和DNA表达水平.结果 RTFQ-PCR结果发现P.gingivalis在初次治疗的感染根管内检出率为45.0％,再治疗感染根管的检出率为41.7％,两者间差异无统计学意义(P=0.713);P.gingivalis在初次治疗的感染根管内的DNA相对表达量(0.197±0.380)和再感染根管内相对表达量(0.449±0.150)比较差异无统计学意义(P=0.301).结论 P.gingivalis与两种感染根管关系均密切,提示其在初次感染和再感染根尖周炎的发病过程中都发挥致病作用.
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设计性实验课中卡氏肺孢子菌的动物模型建立与教学改革之探讨
目的 探索设计性实验课在病原生物学实验教学改革中的模式.方法 通过卡氏肺孢子菌的动物模型建立,设计免疫功能低下的小鼠感染卡氏肺孢子菌及相关免疫低下指标的检测,使学生通过课堂指导,课后自己查找资料设计相关实验.结果 拓展学生知识面,提高分析问题、解决问题的能力,激发学生创新意识.结论 该设计性实验为病原生物学实验的教学改革做出了初步探索.
| 年 | 期数 |
| 2019 | 01 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2001 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2000 | 01 02 03 04 05 06 |
| 1999 | 01 02 03 04 05 06 |
