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中国实验诊断学

中国实验诊断学杂志

Chinese Journal of Laboratory Diagnosis 중국실험진단학

国家级期刊
  • 主管单位: 中华人民共和国教育部
  • 主办单位: 吉林大学中日联谊医院 上海交通大学医学院附属瑞金医院
  • 影响因子: 1.27
  • 审稿时间: 1个月内
  • 国际刊号: 1007-4287
  • 国内刊号: 22-1257/R
  • 发行周期: 月刊
  • 邮发: 12-172
  • 曾用名:
  • 创刊时间: 1997
  • 语言: 英文
  • 编辑单位: 《中国实验诊断学》杂志社
  • 出版地区: 吉林
  • 主编: 孙荣武;赵吉生;王鸿利
  • 类 别: 临床医学
期刊荣誉:
  • 1例颅内动脉瘤夹闭术后肺栓塞的探讨

    作者:沈玉杰;刘玉霞;张立群

    1临床资料患者,男37岁,因突发意识障碍14 h来我院救治.CT检查示:纵裂池、鞍上池、环池高密度影,CTA示:前交通动脉瘤,急诊入院.体温37.2℃,脉搏80min-1,呼吸20min-1,血压140/90 mmHg,呈嗜睡状态,GCS评分9分,颈项强直4横指,四肢肌力5级,巴氏征阴性,克氏征阳性.

  • 针吸细胞学诊断恶性黑色素瘤乳腺转移1例

    作者:曲灿华;李升;陆景阳

    1临床资料患者,女性,38岁,因左乳腺无痛性肿块,于2004年12月10日来我院门诊普外科就诊.

  • 酶联免疫法测定全血他克莫司浓度

    作者:赵虹;孙大军;荣墨克;郎志刚

    目的酶联免疫法(ELISA)测定全血他克莫司浓度的方法学确证.方法含有他克莫司的全血样本经消化、孵育、离心,上清加入已包被的酶标板进行抗原抗体反应,检测波长450/630nm.结果方法的平均回收率为93.5%,批内批间变异系数7.6%和9.8%,检测范围30μg/L以内,稀释线性回收率95.0%-101.4%.结论该方法快速、敏感、准确,适用于测定全血他克莫司浓度.

  • 肝癌组织中c-MET基因突变的研究

    作者:王继生;周斌;徐鲁白;郑志强

    目的研究肝癌原癌基因c-MET突变和缺失.方法采用PCR-SSCP和DNA测序方法,对37例肝癌患者肿瘤组织标本的c-MET基因15-19外显子进行检测,研究c-MET基因的缺失和突变情况.结果发现5例有c-MET基因外显子15-19存在点突变,突变率为7.4%.结论 c-MET基因的突变与肝癌的发生和发展有一定的联系.

  • 血浆醛固酮、血管紧张素-Ⅱ含量与肾间质纤维化相关性研究

    作者:顾华;李艳辉;罗萍;刘树军

    目的探讨慢性肾脏疾病间质纤维化发生过程中血浆醛固酮(ALD)、血管紧张素-Ⅱ(Ang-Ⅱ)含量的变化.方法应用放射免疫分析法检测各种慢性肾脏间质纤维化患者血浆中ALD和Ang-Ⅱ含量表达.结果肾间质纤维化患者血浆中ALD和Ang-Ⅱ含量均升高,与对照组相比差异非常显著P0.01,而ALD和Ang-Ⅱ呈正相关,r=0.842.结论慢性肾脏间质纤维化与血浆ALD和Ang-Ⅱ含量有关.临床治疗慢性肾脏疾病应给予ALD和Ang-Ⅱ拮抗剂,防止肾间质纤维化的形成.

  • MIF在胃癌中的检测意义

    作者:周斌;王继生;蔡景理;王文星;陈小剑;徐鲁白

    目的探讨MIF的表达与胃癌发生发展之间的关系.方法选择正常粘膜、慢性胃炎、肠化生和胃腺癌患者,检测他们胃上皮细胞MIF的表达和外周血MIF的浓度.同时对胃腺癌患者检测HP的感染.结果胃腺癌患者患者胃上皮表达MIF和外周血MIF浓度要显著高于其他3组(P<0.05),HP(+)组胃上皮表达MIF和外周血MIF浓度要显著高于HP(-)组(P<0.05),同时胃上皮表达MIF与外周血MIF浓度呈显著正相关(r=0812,P<0.05).结论胃上皮表达的和外周血中的MIF在胃癌的4个阶段逐渐升高,MIF参与了胃癌的发生有可能是一个早期检测胃癌的有价值的标记物.

  • 动脉粥样硬化与血管细胞黏附分子-1基因表达关系的研究

    作者:秦玲;杨萍;张家颖;吴广恒;雷宇;郭明

    目的探讨动脉粥样硬化(AS)与血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)基因表达的关系.方法 16只大耳白兔随机分为常规饲料组(对照组)和胆固醇饲料组,饲养16周建立AS模式.饲养前后检测兔血清胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL)浓度.取主动脉行病理学检查.采用免疫组化(S-P法、DAB染色)和逆转录多聚酶链式反应(PCR)方法测定主动脉壁VCAM-1阳性表达百分比和mRNA的基因表达.结果 0周两组动物TC、TG、LDL差别无显著性(P>0.05),胆固醇饲料组饲养8周及16周后血清TC、LDL较0周明显升高(P<0.01),并且明显高于对照组(P<0.01).胆固醇饲料组主动脉可见动脉粥样斑块形成,病变局部VCAM-1的阳性染色百分比和mRNA的表达量均明显高于对照组,分别为(18.38±2.55)%和(2.92±0.31)%及1.116±0.017和0.684±0.006(P<0.01).结论 AS的发生伴有VCAM-1的过度表达,这种过度表达可能与AS病变的发生发展具有一定关系.

  • 血细胞分析仪白细胞分类异常警句分析及临床应用的评价

    作者:刘淑舫;刘昕鸣;于庭;汪杰

    目的探讨血细胞分析仪异常警句在临床应用的价值.方法对201例静脉血临床诊断明确的病例标本,用全自动血细胞分析仪分类出现异常警句提示与人工镜检白细胞分类结果分析.结果淋巴细胞白血病,单核细胞白血病,粒细胞白血病患者阳性符合率分别可达81.8%,75%,85.7%.结论血细胞五分类结果较人工分类更快更全面,但检验人员应结合临床诊断观察仪器的异常细胞警句提示,必要时应做人工镜检,这对防止实验室使用仪器分类计数漏检异常细胞有很好的辅助作用.

  • LHON患者线粒体基因组突变频谱分析

    作者:隋桂琴;王陆飞;王桂云

    目的探讨3个原发性点突变与LHON的关系,以了解我国LHON的发病特点,为LHON的快速诊断和产前咨询提供一个快速、经济适用的方法.方法选取83例临床诊断为LHON患者,针对其mtDNA基因组3460、11778、14484位点设计引物进行PCR,并对PCR产物进行SSCP及DNA序列分析.同时选取25例正常健康成人作为对照.结果所有83例被临床诊断为LHON先证者中,发现78例患者有线粒体基因组DNA的点突变,占94.0%(78/83).其中73例患者mtDNA存在G11778A位点突变,占88.0%(73/83);1例为G3460A位点突变,占1.2%(1/83);4例为T11448C位点突变,占4.8%(4/83).未发现有先证者携带两个以上上述突变位点.结论我国LHON患者以mtDNA的G11778A位点突变为主,但也存在部分G3460A和T14484C位点患者家系;SSCP可以应用于对LHON的辅助诊断和遗传咨询.

    关键词: LHON 线粒体 基因组
  • 子宫内膜异位症细胞增殖与凋亡探讨

    作者:王华;李春东;顾瑛;刘凡光;李荷莲

    目的探讨子宫内膜异位症的细胞增殖和细胞凋亡.方法应用免疫组化法对61例正常月经周期子宫内膜及卵巢子宫内膜异位症患者进行PCNA检测.同时用TUNEL法对其中34例标本进行凋亡检测.结果正常位置的子宫内膜分泌期及月经期凋亡细胞较多,增生期内膜及异位内膜无凋亡.PCNA蛋白在增生期含量高,分泌期低落,月经期消失,异位内膜中高于增生期(P<0.05).结论凋亡与子宫内膜脱落有关;异位子宫内膜细胞通过过度增殖且减少凋亡,延长生命周期.

  • 超声诊断急性胰腺炎56例临床分析

    作者:顾清;杨秀云;徐静;孙静

    急性胰腺炎是一种常见的疾病,病变程度轻重不等,轻者以胰腺水肿为主,少数重者的胰腺出血坏死,常继发感染,腹膜炎和休克等多种并发症,病死率高.故及早发现及诊断尤为重要.腹部B超目前已成为急性胰腺炎的常规初筛检查.在现有仪器条件下,密切结合临床和实验室检查,超声对胰腺炎的诊断符合率较高.

  • 荧光定量PCR检测粪便幽门螺旋杆菌的评价

    作者:王建华

    幽门螺旋杆菌(Helicobacter pylori Hp)感染与慢性萎缩性胃炎、十二指肠溃疡、胃黏膜相关性淋巴瘤和胃腺癌的发生有关,WHO已经将Hp列为第-类致癌因子[1],本文采用荧光定量PCR方法检测HP可疑感染者的活检组织及大便的幽门螺旋杆菌,从而评价荧光定量PCR方法检测大便HP作为人群的HP感染筛查的可行性.

  • 未成年人的脑脊液总蛋白质浓度与年龄的相关性

    作者:樊笑霞;吴飞

    目的探讨脑脊液(CSF)总蛋白质浓度在未成年人中的变化规律及意义.方法检测413例(16岁以下)无神经系统疾病及其它可引起CSF总蛋白质浓度升高疾病的脑脊液标本的总蛋白质浓度,并进行分组与比较.结果出生后CSF总蛋白质浓度高,随后迅速下降,至半岁左右浓度下降变得平缓,在青少年期有轻微增加.结论未成年人的脑脊液总蛋白质浓度与年龄有高度相关性,因此在判断未成人脑脊液总蛋白质浓度的测定结果时要有特殊性.

  • B-Flow二维血流显示在原发性下肢深静脉瓣膜功能不全中的应用

    作者:李新颖;石卫东;杨玉双

    B-Flow二维血流显示是利用数字编码超声技术来提供对血流回声直接观察的一种新的超声影像技术.在临床应用的时间较短,范围较小.本文应用B-Flow二维血流显示对原发性下肢深静脉瓣膜功能不全进行诊断,探讨B-Flow二维血流显示在原发性下肢深静脉瓣膜功能不全中的应用价值.

  • 重组人生长激素对梗阻黄疸大鼠胃黏膜损害的保护作用

    作者:刘现立;汪雁明;卫利民

    梗阻性黄疸时常发生胃黏膜的急性糜烂、出血、坏死,甚至应激性溃疡的形成,导致患者出现呕血、黑便等.对患者疾病的康复带来不利影响.探讨梗阻性黄疸时急性胃黏膜损害的发生机制,以及如何预防这种损害的发生,有着重要的临床意义.本文拟通过梗阻性黄疸大鼠模型,对梗阻性黄疸时发生急性胃黏膜损害的机制进行探讨,并观察了生长激素对胃黏膜损害的保护作用.

  • 急性一氧化碳中毒迟发性脑病35例临床分析

    作者:杨晓莲;臧秀贤

    一氧化碳中毒迟发性脑病,是指一氧化碳中毒出现所谓"假愈期",意识恢复后,相隔约2-30天突然出现神经精神症状.其易被忽视而造成严重后果.现就我院诊治35例一氧化碳中毒后迟发性脑病,报告分析如下.

  • 老年心脑血管疾病患者血清铁蛋白和β2-微球蛋白含量测定的临床价值

    作者:李晓光;于永光;王丽艳

    目的探讨老年心脑血管疾病患者血清铁蛋白(SF)和β2-微球蛋白(β2-GM)测定的临床价值.方法用电化学发光法和免疫比浊法分别对60岁以上的56例冠心病、75例高血压、38例脑梗死患者的血清测定SF、β2-GM,并同时测定尿素氮(Urea)和肌酐(Cr),与正常健康对照组进行对比.结果老年冠心病、高血压、脑梗死患者血清SF、β2-GM的含量均明显高于健康对照组,有显著性差异(P<0.01).结论 SF、β2-GM参与了老年心脑血管疾病的病理生理过程,为老年心脑血管疾病的诊断、治疗和判断预后提供了参考指标.另外β2-GM为老年心脑血管疾病早期肾损伤的敏感指标.

  • Olympus 5400模块式生化仪开机测试与数据分析

    作者:李义龙;王萌;郭健

    目的 Olympus AU5400型生化仪开机测试.测试内容包括精密度,正确性,抗交叉污染,使用配套试剂的分析系统与实验室现用非配套试剂的分析系统进行相关性比对,为探讨实验室检验结果的可溯源性提供数据.方法精密度评价参考NCCLS文件EP5-A进行;每天分2批测定样本,各批试验间隔至少在3小时以上.每批测定2个浓度样本,每个样本重复测定20次.方法学比较参考NCCLS文件EP9-A进行,连续5天每天测定(各项目室内质控结果在允许范围内)8个病人血清(测双份取平均值),进行两方法检验结果之间的比较.检测各项目质控结果与靶值比较,进行方法检测准确性分析.采用连续5天一次测定高值和三个低值血清的方法检测样品探针的携带污染.结果Olympus AU5400低值质控的批内不精密度大部分在1.0%左右,大的为ALT的2.28%,低值总不精密度大多在2.0%左右,大的不精密为3.1%;低值偏离度为大多低于2.0%;DBIL是大偏差率为4.1%.携带污染率为0.35%.使用非配套试剂与配套系统比较大部分项目相关性良好(r2>0.95).经调试检验结果偏差仍超出±5%或r2<0.95的项目,应更换符合要求的试剂.结论检测数据显示不同项目的精密度、准确性及仪器样品针的交叉污染率.通过非配套与配套试剂系统的比对,为实验室选择开放试剂及实验室数据的可溯源性提供了参考数据.

  • IgG、IgM抗-E抗体动态变化观察

    作者:林甲进;朱碎永

    Rh系统的临床意义早已为人们所重视,Rh血型系统抗体文献报道较多[1,2],而对抗体动态观察报道较少.近发现1例IgG、IgM抗-E抗体尚处于变化过程中的抗体.现报道如下.

  • 先天性手足分裂畸形一家系报告

    作者:张连波;高庆国;张广;蔡雅贤

    2003年1月我们收治了1例先天性手足分裂畸形患儿,经详细追问家族史,发现1个4代共6例先天性手足分裂畸形的家系.现介绍如下.

  • 基质金属蛋白酶2(MMP2)对血管平滑肌增生迁移的影响

    作者:王智慧;孟晓萍;崔艳;王莉;李方连;贺晓楠;侯文丽

    目的探讨MMP2表达与血管平滑肌增生迁移的影响.方法应用酶谱(SDS-page zymorgroph)及免疫组化的方法,分别检测组织中MMP2及平滑肌的增生的表达.结果在球囊损伤血管组织中MMP2表达与对照组相比分别为:3天组,174±18%,n=4,P<0.05,7天组,154±27%,n=5,P<0.05.免疫组化球囊损伤血管组织中平滑肌细胞增生与正常组织相比分别为:在内膜,3天组,17.2±3.8%,7天组,7.2±1.8%,P<0.05;在中膜,3天组,10.3±0.3%,7天组,6.24±0.2%,P<0.05.结论 MMP2促进平滑肌细胞增生和迁移.

  • 转化生长因子β1(TGF-β1)在实验性根尖周病愈合中的作用

    作者:张颖丽;胡晓春;黄洋;毕崇才

    目的探讨TGF-β1在实验性根尖周病愈合中作用,为临床治疗提供依据.方法 35只Wister大鼠上颌磨牙制成根尖周炎动物模型,用组织病理学方法观察根尖病变区组织愈合情况.结果实验组病变部位3天就可见细胞增生活跃,7 d出现骨组织修复现象,而对照组21 d出现骨组织修复现象.结论 TGF-β1在慢性根尖周炎的骨性愈合过程中发挥积极的修复作用.

  • 红细胞G6PD速率法检测及对贫血患者的诊断意义

    作者:陈晓军

    红细胞葡萄糖6磷酸脱氢酶(Glucose-6-phosphate dehydrogenises,G6PD)是人体红细胞的一种重要的酶,G6PD缺乏或活性减弱的后果是影响红细胞膜的代谢与功能,从而导致红细胞的破坏溶解而致贫血.G6PD测定方法有瓦氏呼吸器测氧压法、电位法、分光光度法和联系检测法等记载.前二者需专门仪器,分光光度法,操作繁琐、误差大.联系监测法有两点难题,一是消除6-PGD的干扰[1],二是红细胞样品前处理麻烦.我们经研究解决了这两点技术难题.建立了直接用末梢血液或抗凝血速率测定法,我们选择了一批新生儿黄疸、溶血性贫血、失血性贫血患者作为研究对象,测定他们血液中G6PD的含量,对其意义进行了分析.现报告如下.

  • 神经生长因子受体(TrkA)在下颌骨骨折愈合中的表达及意义的研究

    作者:于立明;张伟;吴亚东;王子莹

    目的探讨神经生长因子的受体-TrkA在骨折愈合过程的表达及其对骨折愈合的影响.方法本实验选用32只白兔随机分为8组(每组4只):对照组、1 d、3 d、5 d、7 d、14 d、21 d、28d.制作右下颌骨骨折模型,立即行钛夹板固定.术后实验组动物分别在1、3、5、7、14、21、28d处死.切取下颌骨脱钙后制作骨组织切片,分别行HE染色,NGFR的免疫组化染色.结果 NGFR-TrkA在未骨折组仅仅弱阳性表达,而在骨折愈合过程中表达强阳性,7 d达到高峰,到21 d组时骨折组的软骨细胞强阳性.结论 NGFR-TrkA在骨折的愈合过程中,通过与NGFR的结合,调节骨细胞的活性,对于骨折愈合过程中的修复重建起到重要作用.

  • 肺癌患者T细胞亚群、癌胚抗原检测的临床意义

    作者:宋长兴;王靖良

    1临床资料81例肺癌病人全部为本院住院及门诊病人,其中男性63人,女性18人,年龄在23-72岁,其中腺癌32例,小细胞癌22例,鳞癌16例,鳞腺癌11例,以上均经病理学确定.正常对照组30例,均为健康体检者.

  • 光学相干断层成像术在原发性慢性闭角型青光眼诊断中的应用

    作者:郑雅娟;辛华;杨力;王丹;杨凤娟

    目的探讨光学相干断层成像术(opticalcoherence tomography,OCT)检测视网膜神经纤维层(retinal nenre fiber laver,RNFL)厚度与原发性慢性闭角型青光眼(primary chronic angle-closure glaucoma,Chronic PACG)病程进展的关系,评价OCT在早期诊断青光眼中的意义.方法正常人20例(40眼)及分成早期、进展期、晚期的Chronic PACG20例(38眼),采用OCT进行视盘周围RNFL厚度检测,比较正常组及Chronic PACG组的各象限及平均RNFL厚度.结果Chronic PACG组较正常组RNFL平均厚度明显变薄(P<0.001);早期Chronic PACG表现为局限性RNFL缺损,以下方为显著(P<0.001),晚期Chronic PACG表现为弥漫性RNFL缺损;早期、进展期、晚期Chronic PACG患者RNFL厚度差异有显著性(P<0.001).结论随着Chronic PACG病情的发展,RNFL厚度逐渐减少,OCT能够反映青光眼RNFL厚度的改变,并能为临床早期诊断青光眼提供更多的信息.

  • 肿瘤标志物联合检测在肺癌诊断中的价值

    作者:戚良晨;高楠;韩振国;马庆杰

    目的探讨肿瘤标记物CEA、CA-50、CA242、CA125、NSE在肺癌诊断中的价值.方法应用时间分辨荧光免疫法测定45例肺癌、31例肺良性病变、28例经体检证明是健康人的血清肿瘤标记物水平.结果肺癌患者五项血清肿瘤标记物浓度均高于肺良性病变及健康组(P<0.01,P<0.05).敏感性分别是CEA42.4%(19/45),CA-50 40.4%(18/45),CA242 33.3%(15/45),CA125 28.9%(13/45)、NSE 26.7%(12/45),联合检测敏感性达到91.1%.结论联合检测CEA、CA-50、CA242、CA125、NSE可以显著提高肺癌血清肿瘤标记物的敏感性和特异性,为肺癌诊断提供科学的方法和依据.

  • 可溶性Fas(sFas)对乳腺癌发生发展中的影响

    作者:陈云波;王心明;姜瑛;徐立

    目的探讨sFas的产生机制及其作为乳腺癌早期诊断标志物的可行性.方法采用ELISA方法对sFas在不同乳腺疾病和正常乳腺组织中以及在不同病理类型乳腺癌中的浓度水平进行比较分析;采用ELISA方法和流式细胞技术对乳腺癌中血清sFas的浓度水平与Fas的表达和临床各病理学参数之间的关系进行比较分析.结果乳腺癌sFas浓度水平明显高于乳腺良性疾病及正常对照组,乳腺不典型增生中sFas水平又明显高于乳腺腺瘤及正常对照组,结果具有显著性差异;在不同病理类型乳腺癌中sFas水平无显著性差异;51例乳腺癌的患者的血清sFas水平在肿瘤大小、临床分期、肿瘤转移中结果有显著性差异,sFas浓度水平与Fas阳性表达呈显著负相关.结论 sFas主要来源于肿瘤细胞;其浓度变化对术前或早期诊断有重要意义.

  • 眼眶骨折致伤因素分析

    作者:岳志强

    眼眶为四边锥形的骨窝,其解剖结构和毗邻关系复杂,当在外力作用下发生眼眶骨折时,可能涉及眼科、口腔科、整形外科、神经外科、耳鼻喉科等多个学科.本文以因眼眶骨折到吉林大学第二医院眼科(东北中心城市之一的主要医疗单位眼科)就诊的病人为研究对象,探讨各种致伤因素与眼眶骨折的发生关系.

  • 实验室检查临床思维的基础

    作者:何晓烨;蔡映云

    病史采集、体格检查、实验室检查、诊断和治疗是临床工作的主要内容.随着医学科学技术的发展,临床检查项目不断增多.实验室检查项目选择的不合理、检查结果分析的不准确不仅会造成医疗资源的浪费,还可能带给病人不必要的痛苦,甚至误诊.实验室检查的临床思维是指临床医生利用基础医学和临床医学知识,在对临床资料进行综合分析和逻辑推理后,选择必须的、恰当的、经济的实验室检查项目,并对实验室检查结果进行适当的评估和分析,以达到辅助诊断与指导治疗的目的.实验室检查的临床思维包括临床思维的基础和临床思维的要点两大部分.实验室检查临床思维的基础就是临床医生在选择检查项目和分析检查结果前必须掌握的知识.

  • B型钠尿肽在心血管疾病中的应用

    作者:张华;陈华;李永兴;许叔祥

    "利钠肽家庭"是心房、心室和脉管内皮细胞分泌的一类激素,包括心房利钠肽(Atrial Natriuretic Peptides,ANP)、脑利钠肽(Brain Natriuretic Peptides,BNP)、C型利钠肽(C-type natriuretic Peptides,CNP)以及新近发现的D型利钠肽(D-type Natriuretic Peptides,DNP).ANP主要在心房表达,其分泌与心房压力相关,通过肽链内切酶或清除受体作用被排除.BNP主要在心室表达,同时也存在于脑组织,在血浆中的半衰期长于ANP.CNP主要在血管组织中表达,明确的功能尚不清楚.DNP在肾脏中产生,随尿液分泌排泄,明确的功能尚不清楚.这四种钠尿肽拥有相似的结构:它们共同拥有17个氨基酸的"戒指"样结构,通过一对二硫键组成,这17个氨基酸中有11个是相同的."戒指"样结构生理功能相同,都具有调节组织钠代谢和维持血压动态平衡作用[1].

  • 急性脊髓损伤蛋白质的双向电泳分析和质谱鉴定

    作者:赵宝林;杨小玉;朱庆三;尹飞;臧虎;孙庆;段德生

    目的建立急性脊髓损伤双向凝胶电泳图谱,初步观察急性脊髓损伤组织中蛋白质组的变化与差异表达,为进一步探讨急性脊髓损伤分子机制奠定了基础.方法采用双向凝胶电泳分离脊髓总蛋白,银染显色,Image Master图象分析系统分析,从胶中选取分离蛋白质点,基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)分析获取肽质量指纹图谱(PMF),Mascot软件搜索MSDP、SWISS-PROT数据库鉴定蛋白质.结果获得重复性和分辨率较好的脊髓双向凝胶电泳图谱.质谱分析了12个蛋白质点,获取6张肽质量指纹图谱.通过查询数据库鉴定了9个蛋白质.通过对过表达脊髓损伤中蛋白质表达谱改变的研究,鉴定出9个差异表达蛋白质,这些蛋白质包括等.这些差异蛋白质涉及基因为上调蛋白钙蛋白酶Calpain、神经丝蛋白M Neurofilament tripet α1-糖蛋白α1-Acid-glycoprotein、Oxygen regulated protein 1在脊髓损伤组下调.钙蛋白酶抑制剂Calpain inhibitor,假象蛋白-10 Hypothetical protein cgi-10在脊髓损伤组消失.并在损伤组出现新蛋白预测蛋白Hypothetical 152.1 kDa protein和核内寡聚肽酶Endooligopeptidase A reated protein.结论成功构建脊髓损伤与正常脊髓双向凝胶电泳图谱.并应用质谱技术鉴定了特异蛋白质点.在我们所鉴定的脊髓损伤过程中发生显著变化的蛋白质中,有7种蛋白具有与一致的变化趋势,其中钙蛋白酶、神经丝蛋白、神经营养素低亲合力受体(p75NTR)、α1-糖蛋白、氧调节蛋白1、钙蛋白酶抑制剂、假想蛋白-10表达上调、下调与消失变化在脊髓损伤中居极其重要地位.

  • 不同温度输液复苏对失血性休克兔神经细胞能量代谢的影响

    作者:林维彬;徐朋;王丽波

    为探讨失血性休克的液体复苏中不同温度溶液对神经细胞能量代谢的影响,本研究采用兔失血性休克及复苏模型,观察线粒体能荷、细胞COX活性变化特点.

  • 测试材料的滤波通带对言语识别率的影响

    作者:苏金霏;王宁宇;张秋航;张旭;于红玉;魏怿;张名霞;宋洪珍

    目的探讨测试材料的滤波截止频率对汉语普通话单音节词识别率的影响.方法设计滤波言语测试软件,分别选取截止频率为0.25、0.5 KHz低通和1、2、4、8 KHz的高通频带,滤波器斜率为48dB/倍频程,强度为大舒适级(maximum comfortable level,MCL),即受试者足以听到而又尚未引起不适的强度.对听力正常青年人20例40耳进行滤波后的言语识别率测试.结果截止频率为0.25、0.5 KHz低通和8 KHz高通滤波言语识别率与正常言语的识别率有显著性差异(P<0.0055).男声与女声间无明显差异(P>0.05).结论滤波因素中,0.5 KHz以上和8 KHz以下频带对言语识别有显著作用,受试者主要应用0.5 KHz以上和8 KHz以下频带信息对言语进行识别.听力正常人的滤波言语识别率不受声音材料中性别因素的影响.

  • 以人甲胎蛋白启动子控制表达HIV-1vpr基因的重组腺病毒诱导肝癌细胞G2期阻滞和细胞凋亡作用的研究

    作者:魏强;王健伟;郭丽;屈建国;赵玉琪;洪涛

    目的研究人甲胎蛋白(AFP)启动子控制表达HIV-1 vpr基因的重组腺病毒对AFP(+)肝癌细胞G2期阻滞和细胞凋亡的作用,评估以该策略利用vpr进行肿瘤特异性基因治疗的可行性.方法将以AFP启动子控制HIV-1vpr表达的重组腺病毒rvAdAFP-vpr和空白载体rvAd-null分别感染AFP(+)的肝癌细胞BEL-7402和AFP(-)的肝癌细胞SMMC-7721,利用流式细胞仪检测Vpr的特异性表达和细胞周期分布,用细胞荧光染色和线粒体膜电位检测等方法观察细胞凋亡.结果与对照病毒rvAd-null相比,重组腺病毒rvAdAFP-vpr只在AFP(+)肝癌细胞中表达HIV-1Vpr,并诱导肝癌细胞的细胞周期G2期阻滞和细胞凋亡,而在AFP(-)肝癌细胞中不明显表达Vpr,不能显著诱导肝癌细胞G2期阻滞和细胞凋亡.结论重组腺病毒rvAdAFP-vpr对于Vpr的表达是AFP表达特异性的,可有效诱导肝癌细胞G2期阻滞和细胞凋亡,有望用于AFP(+)肝癌的基因治疗研究.

  • HCMV感染致内皮细胞粘附分子表达的变化

    作者:姚磊;张征;董解菊;陈昌国;何作云

    目的探讨HCMV感染对体外培养内皮细胞粘附分子表达的影响.方法应用双抗体夹心酶联免疫分析法及细胞ELISA方法检测体外培养人脐静脉血管内皮细胞在感染HCMV后,血管内皮细胞粘附因子(VCAM-1)及可溶性细胞间粘附因子1(sICAM-1)表达的变化.结果感染组细胞培养液sICAM-1 24小时和对照组相比明显升高达10.7±2.4μg/L,而正常对照为5.7±3.1 μg/L,而后48小时、72小时均高于相应对照组(P<0.05).VCAM-1在感染12小时开始表达升高,48小时和72小时和对照组相比明显增高(P<0.05).结论体外情况下HCMV感染可上调内皮细胞粘附分子表达,这可能在HCMV致动脉粥样硬化的病理过程中发挥重要作用.

  • 间充质干细胞制备类人工真皮修复全层皮肤缺损的实验研究

    作者:谢英林;王欣

    工程组织构建的关键因素:细胞、支架、生长因子.其中鉴定和分离既能在临床上存活又能适用于组织工程的细胞是目前组织工程面临的问题之一[1].研究表明间充质干细胞(MSCs)来源于中胚层,广泛存在全身各种组织中,经诱导后具有多向分化和相互转化的潜能[2,3],本实验拟以M SCs为种子细胞经体外培养、扩增、诱导后种植于壳多糖基质网架上,用此构建人工类真皮修复皮肤损伤,为用生物学方法治疗皮肤损伤寻找一种新途径.

  • 自身抗原OGDC-E2融合蛋白的克隆表达与鉴定

    作者:周晔;姚定康;陈燕;蒋天舒;蒋延旺;吴传勇;钱(王争);邓安梅;仲人前

    目的基因工程重组表达2-氧戊二酸脱氢酶复合体E2(OGDC-E2)融合蛋白.方法用PCR方法扩增得到OGDC-E2的基因片段,插入表达载体pET28a(+),构建重组表达载体pET28a(+)-OGDC-E2,测序正确后在大肠杆菌BL21(DE3)中表达.结果获得OGDC-E2融合蛋白,经SDS-PAGE分析,相对分子质量与预期大小一致;经免疫学鉴定,重组抗原片段具有抗线粒体抗体二亚型(AMA-M2)的免疫原性.结论基因重组表达的融合蛋白将有利于原发性胆汁性肝硬化(PBC)的实验诊断.

  • EGF-PE40重组毒素的构建

    作者:刘新;魏洪涛;王国珍;杨占泉

    重组毒素是继单克隆抗体导向药物之后出现的新型导向药物[1,2],它将毒素基因和靶向基因融合,表达融合蛋白,具有识别和选择性破坏特异性受体的靶细胞的功能,它由导向部分和毒性部分二部分组成.绿脓杆菌外毒素通常作为重组毒素的毒性成分,其毒性本质是它能够催化真核细胞延伸因子-2的ADP核糖基化,阻止肽链延长中断细胞蛋白质合成而行使细胞毒作用[3].作为重组毒素的导向部分,除能够与特定靶细胞表面受体结合外,同时能够与毒素基因相融合,表达出融合蛋白,且二者不影响各自独立结构和功能.EGF不仅能够与头颈部鳞癌细胞过度表达的EGFR特异结合,而且对鳞状细胞癌的细胞分裂起抑制作用[4].本项研究的目的是通过基因工程方法将EGF基因与绿脓杆菌外毒素基因的PE40基因片段相融合,构建重组毒素EGF-PE40,并通过其表达蛋白观察EGF-PE40对头颈部鳞癌细胞的细胞毒作用,为临床治疗头颈部鳞状细胞癌提供指导.

  • 呼吸道合胞病毒多克隆抗体的制备及临床意义

    作者:范清;李洪源;田文静

    目的制备呼吸道合胞病毒(RSV)多克隆抗体,为RSV的检测提供条件.方法用RSV颗粒抗原免疫新西兰家兔3只,采用细胞病变中和实验检测RSV多克隆抗体.结果细胞病变中和实验结果显示,本研究制备的RSV多克隆抗体在1:1102的稀释度能保护50%的Hela细胞免受RSV的攻击,而阴性对照血清不能保护细胞对病毒的感染.结论 RSV颗粒抗原免疫新西兰家兔可成功制备RSV多克隆抗体,1:1102稀释的血清可保护50%的细胞不产生病变.

  • 新生大鼠骨源性间充质干细胞向多巴胺能神经元样细胞的分化

    作者:郭丽;卢日峰;尹飞;凌翎;李鹏;范洪学

    目的探讨体外培养的骨源性间充质干细胞向神经元样细胞的分化.方法采用体外骨植块法培养骨源性的间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs),传代.用含0.5mmol/LIBMX,GDNF(10 ng/ml)和IL-1β(100pg/ml),中脑神经胶质细胞条件培养基和中脑神经膜碎片诱导其向多巴胺能神经元样细胞分化,免疫细胞化学检测神经细胞的表面标志NSE、MAP-2和TH.结果原代骨源性间充质干细胞含有多种细胞形态,传代后细胞成均一的梭形.诱导前,对照组少量细胞表达NSE,不表达MAP-2和TH.诱导后间充质干细胞分化成表达NSE、MAP-2和TH的细胞.结论骨源性间充质干细胞分化成神经元样细胞,表明其可跨胚层分化,同时为细胞移植治疗中枢神经系统疾病提供一种新的细胞来源.

  • 脂质体流感疫苗免疫效果评价

    作者:戚凤春;王亚军;张雪梅;隋波;李小波;盛军

    目的对脂质体流感疫苗体液免疫和细胞免疫效果进行评价.方法血凝抑制法(HI)和ELISA法检测特异性抗体;MTT法检测小鼠淋巴细胞增殖情况;流式细胞仪测小鼠T淋巴细胞表面标记;ELISA法检测小鼠肺内溶物中细胞因子含量.结果脂质体流感抗原可激发更强的体液免疫;脾细胞增殖效率,CD4-水平和CD4/CD8比例,以及细胞因子(IL-4、IFN-γ)水平均有显著的增强作用.结论脂质体流感疫苗能够刺激机体产生较高的体液免疫,并且能够激发机体产生细胞免疫.

  • 海洛因依赖者唾液表皮生长因子水平与舌苔变化的相关探讨

    作者:萧丹;刘梦光;张玉萍

    目的研究海洛因依赖者唾液表皮生长因子(EGF)水平与舌苔变化的关系,探讨海洛因依赖者脱毒后消化系统功能紊乱的原因.方法应用放射免疫法测定92例海洛因依赖者唾液表皮生长因子(EGF)含量,结合临床观察相应的舌苔变化.结果海洛因依赖者唾液EGF水平与正常对照组比较有显著降低(P<0.01),海洛因依赖者脱毒后唾液EGF低下是其舌苔厚腻和消化系统功能紊乱的原因之一.结论 EGF水平低下是海洛因依赖者脱毒后消化系统功能紊乱的原因之一.

  • 氯丙嗪对紫杉醇协同作用的实验研究

    作者:安继红;刘锋;陈鹏;孙立群

    目的观察氯丙嗪与紫杉醇联合应用对人肺巨细胞癌株(PLA801D)增殖抑制及对其细胞周期的影响.方法采用MTT法检测不同浓度紫杉醇单独及与氯丙嗪联合使用时对PLA801D细胞的生长抑制率;应用流式细胞术分析单独及联合用药后,PLA801D细胞周期的变化和凋亡率.结果单药组诱导的凋亡率随紫杉醇剂量增加而升高,当紫杉醇浓度为24μg/ml时,诱导的凋亡率高为13.2%;而两药联用(紫杉醇剂量不变,氯丙嗪剂量为4 μg/ml),诱导的凋亡率明显高于紫杉醇单用组为55.8%,两组比较差异显著(P<0.01).同时,两药联用比单用抑瘤率亦有不同程度的提高(P<0.05),且呈时间、剂量依赖性.结论在一定浓度范围内,氯丙嗪在增强紫杉醇诱导PLA801D细胞凋亡及增殖抑制作用上具有明显的协同效应.

  • 人骨肉瘤蛋白质组双向电泳图像分析方法的建立

    作者:孙庆;杨小玉;李红群;齐飞

    目的建立和优化人骨肉瘤蛋白质组双向电泳图像分析方法.方法对第一向双向电泳的关键因素与环节(如样品处理、电泳参数和凝胶浓度等)进行一系列优化.进一步采用双向凝胶电泳分离骨肉瘤组和正常组总蛋白质,银染显色,Image Master图像分析系统分析电泳图谱.结果重复性实验结果显示同组样品在3次不同实验中所的蛋白质斑点数目相对标准差.(变异系数平均值%):骨肉瘤组和正常组分别为23.00±10.11、20.33±9.90.(变异系数范围%):骨肉瘤组和正常组分别为3.80-6.89、2.70-6.89.同一蛋白质斑点在3次实验中等电点、分子量的相对标准差分别为8.93%±1.17%,10.16%±2.02%和10.87%±3.86%.获得了优于传统实验方法的分辨率和可重复性的双向凝胶电泳图谱.结论优化的双向凝胶电泳图象分析技术适合于骨肉瘤蛋白质组研究.

  • 酵母单杂交筛选实验中的关键问题

    作者:牛永东;许丽艳;韩溟;方王楷;沈忠英;李恩民

    目的酵母单杂交系统是研究生物大分子DNA和蛋白质间相互作用的有效手段之一,酵母单杂交筛库实验是获取可以和诱饵序列相互作用的反式作用因子的关键.方法酵母单杂交诱饵质粒pHISi3NF转化YM4271;通过不同浓度3-AT实验,获得酵母单杂交用宿主细胞YM4271pHISi3NF4;大规模筛选人食管癌细胞cDNA文库.结果经筛库后续验证实验证实得到阳性克隆.结论通过准确确定3-AT的工作浓度,有效地完成了酵母单杂交的大规模筛选人食管癌细胞cDNA文库的实验.

  • 上矢状窦静脉血栓形成误诊为脑出血7例分析

    作者:杨晓莲

    颅内静脉窦血栓形成是一类少见的脑血管病,临床及GT表现均无特异性,过去常常误诊,现在虽然检查技术发展了,但是本病发病率低,大多数非专科医师对此病认识不足,加之本病临床表现复杂,误诊率依然很高.我将2000年-2005年共收治7例上矢状窦静脉血栓形成误诊为脑出血进行分析,探讨误诊漏诊的原因.

  • 附壁血栓脱落至肠、脾梗死误诊1例

    作者:张波;张延辉

    1病例介绍患者,女,56岁.因"中上腹疼痛20min伴恶心、大汗10min",于2004年10月12日15时25分在我院就诊,既往有"心脏病"史,急诊诊断:急性胃肠炎.入院查体:T36℃,P72min-1,BP110/80mmHg,一般状态差,双肺呼吸音粗,布满痰鸣音,心界向两侧扩大,节律规整,心音有力,心脏杂音被啰音掩盖,腹部平坦,肝脾不大,无压痛反跳痛,肌紧张(+).

  • 长春地区近10年肾综合征出血热死亡及误诊原因分析

    作者:潘煜;李玉香;蔡艳俊

    在我国,肾综合征出血热(HFRS)是除病毒性肝炎之外危害大的病毒性传染病,是一组以发热、出血和肾脏损害为主要临床表现的急性传染病,近年来发病率有明显的上升.由于临床表现的复杂多样化,要求临床医生具有一定专业知识水平,及时地诊断及治疗是降低HFRS病死率的关键.本文旨在通过对我地区近十年肾综合征出血热死因分析,总结出如何避免和降低其病死率的因素,提供临床医生参考.

  • 食管平滑肌瘤的误诊原因分析

    作者:韩春山;辛华;郑雅娟;韩振国;黄海波;姚树明

    食管平滑肌瘤为食管常见的良性肿瘤,其诊断有一定特点,但个别病例易与其他病变混淆[1].1995-2005年间,我科共收治食管平滑肌瘤患者89例,86例术前明确诊断,术前误诊3例,其中误诊为食管癌2例,纵隔肿瘤1例;同期还有2例术前诊断为食管平滑肌瘤,术中证实1例为降主动脉压迫,另一例为纵隔淋巴结结核.本文回顾了这5例患者的临床诊断资料,并就其误诊原因进行系统分析,报告如下.

  • 凝固酶阴性葡萄球菌致慢性细菌性前列腺炎耐药性分析

    作者:王帮勇;吴潇;陈霞;陆惠强;潘展翼

    细菌感染所致的慢性前列腺炎是男性常见的泌尿系统疾病,由于前列腺的特殊解剖结构,抗生素作用缓慢,加之近年抗生素的不合理使用,细菌耐药性逐年增强,导致大多数前列腺炎患者迁延不愈.越来越多的文献表明,凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)是致前列腺炎的重要病原微生物,且对多数抗生素耐药[1,2].本文观察了102株凝固酶阴性葡萄球菌,其结果如下.

  • 肠球菌110株耐药性测定

    作者:陈群英

    肠球菌属广泛分布在自然界,常栖居在人、动物的肠道和女性生殖道,为重要医院感染的病原菌[1],近年来不断上升的肠球菌感染率和广泛使用抗生素出现的耐药性有关,为了解其耐药性,我们对2003年1月-2005年3月间临床分离的110株肠球菌进生了药敏测定,现介绍如下.

  • 临床常见5种G-杆菌体外药敏实验结果分析

    作者:孙艳;田秀梅;齐弋枢

    抗生素广泛使用,甚至滥用,造成耐药的细菌越来越多.药敏实验的作用也就显得愈加重要,我们将2003年3月到2005年9月临床分离出的大肠埃希氏菌、肺炎克雷伯氏菌、阴沟肠杆菌对15种抗生素及铜绿假单胞菌、鲍曼氏不动杆菌对12种抗生素的体外敏感性研究结果,现报告如下.

  • 氨苄西林诱导大肠杆菌内毒素释放体外研究实验

    作者:张玲;李俐;缪晓丽;张桂荣;王丽华

    细菌内毒(Enologoxin),是革兰阴性细菌(G菌)细胞壁上的特有结构,由脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)、蛋白质和磷脂组成的复合物,结构多样,其中的类脂A(Lipid A)是脂多糖的活性部分[1].在革兰阴性细菌感染中,抗生素的应用会导致LPS的迅速释放,使机体容易进入休克期,是近几年应用抗生素治疗革兰阴性细菌感染时被重视的问题.抗生素种类不同、使用量不同、作用时间不同诱导细菌释放内毒素的机制和释放量都不相同.本实验使用氨苄西林对体外培养的大肠杆菌进行诱导内毒素释放研究,以了解抗生素对细菌内毒素释放的作用影响.

  • 2004.4-2005.4我院常见细菌分布及其耐药性分析

    作者:张淑芳;野丽丽;吴多荣

    细菌耐药性的出现和蔓延无疑在很大程度上是对抗感染治疗的大挑战.为控制耐药性的发展,监测医院微生物对抗生素的敏感性和耐药性就成为临床微生物的重要任务[1].由于不同地区、或同一地区不同时间细菌的分布及耐药情况均有差异,因此当地的不同菌群分布及其耐药状况可以指导临床感染疾病的诊断及给临床医生提供用药依据.就我院2004.4-2005.4常见细菌分布及其耐药性进行分析.

  • 2005年我院呼吸道革兰阴性杆菌耐药性研究

    作者:黄晶;张曼;张玲;张传军

    目的研究2005年我院呼吸道215株革兰阴性杆菌对各种药物的耐药情况.方法采用VITEK-2全自动细菌鉴定仪进行细菌鉴定;药敏试验用K-B纸片法,根据1999年美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)标准判断结果,应用WHONET 5软件对数据进行分析.结果 2005年本医院共收集呼吸道致病菌共215株.革兰阴性菌199株占93%:克雷伯菌居首位(25%);其次为大肠杆菌(23%);铜绿假单胞菌(19%);不动杆菌(13%);其他革兰阴性菌占20%.抗菌药物耐药率由低到高依次为亚胺培南、美罗培南6%、6%:头孢派酮/舒巴坦10.9%;派拉西林/三唑巴坦15.2%;头孢比肟22.7%;其中大肠、克雷伯菌对三代头孢的耐药率为44%;不动杆菌、铜绿假单胞菌对三代头孢耐药率达70%.结论我院2005年呼吸道感染革兰阴性杆菌耐药情况较为严重,应加强革兰阴性杆菌感染及药敏检测,掌握耐药变迁,对正确使用抗菌素具有十分重要意义.

  • PCR-SSCP在淋球菌氟喹诺酮耐药基因突变研究中的应用

    作者:刘铁梅;朱光泽;王旭东;周劲松

    目的探讨用PCR-SSCP方法检测淋球菌氟喹诺酮耐药基因突变的研究.方法自行设计gyrA基因特异性扩增引物,运用PCR-SSCP银染色方法检测基因突变.结果在30例淋球菌临床分离株中选取13例,对其gyrA基因342 bp扩增产物进行DNA序列测定,其91位和95位位点发生突变.结论通过本研究所使用PCR-SSCP的方法检测临床分离出的淋球菌是否对氟喹诺酮耐药,并通过序列分析了解到淋球菌耐药基因突变以gyrA基因编码91位及95位点的氨基酸的碱基突变为主.通过此方法可以早期、准确、快速地检测出从临床获得的淋球菌菌株是否对氟喹诺酮耐药,从而指导临床用药及治疗.

  • 铜绿假单胞菌感染患者合并四联球菌败血症1例报告

    作者:赵俊杰;孙雪飞;孙景春;王春生

    1病例摘要患者,男,80岁.因左侧肢体瘫痪伴失语2年半,咳嗽、咳淡黄色痰半月于2005年6月17日入院.既往患原发性高血压病、冠状动脉粥样硬化心脏病20余年,动脉硬化性脑病5年,脑出血1年.入院查体:体温37.8℃,脉搏72 min-1,血压150/90mmHg,慢性病容,一般状态尚可,完全性运动性失语,胸廓对称,两肺听诊呼吸音弱,未闻及干、湿啰音.

  • 用实验诊断学方法指导临床合理使用抗生素

    作者:孙荣武;孙步彤;孙淑艳

    自1929年Alexander Fleming发现青霉素以来,人类就进入使用抗生素时代.应用抗生素已成为治疗感染首选药物,使多数细菌感染得到有效地抑制.人们曾乐观地认为征服感染性疾病将成为可能,但在使用抗生素的过程中,由于使用抗生素不合理和滥用,细菌耐药同步出现和升高,且日渐突出,已成为世界医疗中存在的大问题,我国尤为严重.在大型医院使用抗生素率、术后应用抗生素和抗菌药物的处方数都明显高于欧美发达国家;使用不当率达50%-70%,手术后几乎都用抗生素,应用两种以上抗生素达70%,主要是用三代青霉素、大环酯类和Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ代头孢类抗生素,多数用静脉点滴,致使耐药菌株迅猛增加,并出现更严重和多重耐药性菌株,不仅影响治疗,也造成医院管理混乱.

  • 深圳地区非发酵革兰阴性杆菌医院感染及耐药性分析

    作者:李文青;吴伟元;吴劲松;程锦娥;卢月梅;何林

    目的了解非发酵革兰阴性杆菌引起医院感染的特点以及对抗生素耐药性的变化趋势.方法对2001-2004年分离出的1426株非发酵革兰阴性杆菌选用19种抗生素进行药敏实验,按NCCLS标准判断.结果铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌和嗜麦芽窄食单胞菌在总体分离菌中分别占13%、7%和4%.1426株非发酵革兰阴性杆菌主要来源于痰标本.铜绿假单胞菌2001-2003年对哌拉西林、哌拉西林/他唑巴坦、庆大霉素、阿米卡星、头孢吡肟、氨曲南、头孢他啶耐药率呈下降趋势,但2003-2004年除对氨曲南、头孢他啶的耐药率保持稳定外,对上述其他几种抗生素的耐药率均上升,对亚胺培南、美罗增南耐药率呈逐年下降趋势;鲍曼不动杆菌对氨苄西林/舒巴坦、亚胺培南以及美罗增南的耐药率较低;嗜麦芽窄食单胞菌对复方新诺明、环丙沙星和氯霉素的耐药率较低.结论了解非发酵革兰阴性杆菌的耐药现状,有利于为临床合理用药提供依据.

中国实验诊断学分期目录
期数
2019 01
2018 01 02 03 04 05 07 08 09 10 11 12
2017 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12
2016 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12
2015 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12
2014 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12
2013 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12
2012 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12
2011 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12
2010 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12
2009 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12
2008 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12
2007 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12
2006 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12
2005 01 02 03 04 05 06
2004 01 02 03 04 05 06
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2002 01 02 03 04 05 06
2001 01 02 03 04 05 06
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