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中国实验血液学

中国实验血液学杂志

Journal of Experimental Hematology 중국실험혈액학잡지

统计源期刊
  • 主管单位: 实验血液学杂志
  • 主办单位: 中国科学技术协会
  • 影响因子: 0.98
  • 审稿时间: 1-3个月
  • 国际刊号: 11-4423/R
  • 国内刊号: 陈潮
  • 发行周期: 双月刊
  • 邮发: jexphema@263.net
  • 曾用名: 实验血液学杂志
  • 创刊时间: 1993
  • 语言: 英文
  • 编辑单位: 中国病理生理学会
  • 出版地区: 北京
  • 主编: 中国实验血液学杂志编辑部
  • 类 别: 心血管系统疾病
期刊荣誉:
  • 淋巴芯片技术及其应用研究进展

    作者:陈喜林;张伟京

    淋巴芯片是在基因芯片技术基础上发展起来的专门用于研究恶性淋巴瘤的生物芯片.本文简要介绍了淋巴芯片的基本原理、制备的技术流程和不同类型,并着重介绍了淋巴芯片技术在恶性淋巴瘤诊断、分型及探讨发病机制等应用方面取得的进展及存在的问题.

  • 急性髓性白血病膜糖蛋白介导的多药耐药

    作者:苏丽萍

    急性白血病治疗中存在的主要问题是白血病细胞对化疗药物产生耐药性.这种现象由多种耐药机制所致,包括细胞对化疗药物反应所经历的凋亡失败或药物到达及(或)影响细胞内目标的失败.本综述重点讨论后一种机制,特别是细胞内药物转运耐药机制.有报道ATP结合盒(ABC)转运体P-糖蛋白(P-gp)与急性髓性白血病预后相关.另外更引人瞩目的是ABC转运体多药耐药蛋白(MRP)和穹隆转运体肺耐药蛋白(LRP)的表达在AML也与预后有关.

  • 急性髓系白血病干细胞的研究进展

    作者:崔久嵬;张学敏;王冠军

    急性髓系白血病(AML)细胞群是由不同分化阶段的白血病细胞组成,其中原始的细胞为白血病干细胞(leukemia stem cell, LSC).虽然LSC所占比例极少,但仅其具有维持白血病细胞克隆的作用.AML的恶性转化发生在干细胞水平,这种发生恶性转化的干细胞的细胞和分子遗传学改变决定了白血病细胞克隆的分化特点,从而形成不同亚型的AML. LSC与正常造血干细胞(hematopoietic stem cell, HSC)有许多相似之处,它具有自我更新能力和有限的分化潜能,同时又具有其自身独特的特征.LSC具有某些特殊的细胞表面标志,如CD90-, CD117-, CD123+.与正常的HSC相比,肿瘤抑制性蛋白-死亡相关蛋白激酶和干扰素调节因子1在LSC中高表达.与相对分化的白血病细胞相比,LSC主要处于G0期, 其对常规化疗药物无效,因此LSC是白血病复发的根源.虽然LSC具有耐药的特点,但经合适的刺激如蛋白酶体抑制剂MG-132的处理,LSC比正常HSC更易于凋亡.本文将近年来对LSC的细胞和分子生物学方面研究的进展进行综述,为白血病发病机制及治疗策略的探讨提供新的思路.

  • 唯酶红细胞抗体的血型血清学特性的研究

    作者:马曙轩;刘景汉;欧阳锡林;李锡金;于洋;马晓敏;赖凤雷

    本研究的目的是探讨唯酶抗体的血型血清学特性及在临床输血中的意义,为安全输血提供依据.采用含唯酶抗体的病人血清在多种介质中与ABO同型献血者红细胞、谱细胞和自身细胞进行反应,并通过吸收释放试验来判断唯酶抗体的血型血清学特性.结果表明,该唯酶抗体仅在木瓜蛋白酶介质中与献血者红细胞和谱细胞反应呈阳性结果,且自身对照亦呈阳性反应,而在其它介质中均呈阴性反应.吸收实验后抗体效价降低,采用乙醚放散,放散液中未测出抗体.该病人输注ABO及Rh同型献血者红细胞600 ml后无任何不良反应.结论:该例唯酶抗体仅在木瓜蛋白酶介质体外检测中表现出凝集,不会引起溶血性输血反应.

  • 不同保存时间红细胞对三种方法抗-D抗体鉴定结果的影响

    作者:肖瑞卿;林武存;许聃;曾杰;吴建君;赵树铭

    为了检测红细胞在不同保存时间抗体鉴定对试验的影响,采用三种不同方法,即木瓜蛋白酶法、博唯优(BioVue)配血卡(柱凝集技术试验法)和戴安娜(DianaGel)配血卡(微柱凝胶试验法),检测7批不同保存时间(0-9个月)的Rh(D)阳性红细胞,用Rh血型抗-D抗体效价进行了比较.结果表明,微柱凝胶试验法较柱凝集技术效价能高出1管,且凝集强度较柱凝集技术好; 保存9个月的红细胞,用微柱凝胶试验法可检测到256; 而木瓜蛋白酶法,保存9个月的红细胞,同样的抗血清效价只能检测到2.结论:微柱凝胶试验法与柱凝集技术试验结果差别不大,木瓜蛋白酶法检测效价低.

  • 4℃延期保存红细胞超微结构的动态变化

    作者:任素萍;马恩普;刘秀珍;韩颖;刘安;靳鹏

    为了探讨SOD保养液延期保存过程中红细胞超微结构的动态变化,应用透射电镜对SOD保养液4℃保存全血于保存第0,42,75及85天动态观察红细胞的形态学变化.以GMA液同期保存的标本作为对照,应用SAS软件对数据进行具有重复测量的三因素设计方差分析.结果表明,保存第42,75及85天3个时间点下,SOD保养液组红细胞形变率均低于GMA组(P<0.01).SOD保养液组42,75和85天的红细胞形变率与GMA液保存42天的红细胞形变率无显著性差别,甚至更低.结论:SOD保养液在4℃延期保存条件下有利于维持红细胞的正常形态.

  • 两份脐血联合移植治疗成人慢性粒细胞性白血病一例

    作者:何静松;黄河;蔡真;李黎;叶琇锦;张洁;胡晓蓉;金爱云;林茂芳

    为了探讨两份非亲缘供者脐血联合移植治疗成人血液系恶性肿瘤患者的造血重建及移植相关性并发症,对1例成人慢性粒细胞性白血病患者进行两份非亲缘供者脐血联合移植.预处理采用白消安/环磷酰胺(Bu/Cy)方案.移植物抗宿主病(GVHD)的预防采用霉酚酸酯(MMF)联合环孢霉素(CsA)和短程氨甲喋呤(MTX)方案.移植总单个核细胞数为4.63×107/kg,CD34+细胞数为8.34×105/kg.采用PCR法测定患者外周血细胞短串重复序列(STR)获取植入证据. 结果表明:患者于移植后23天外周血中性粒细胞绝对值>0.5×109/L,移植后33天外周血血小板>20×109/L,移植后47天血小板>50×109/L.移植后,患者Ph染色体转阴性,bcr/abl融合基因阴性.移植后31天,46天及71天查外周血STR显示其中1份脐血完全植入.患者于移植后13天出现Ⅱ度急性GVHD,经治疗后消失. 结论:脐血联合移植可用于成人恶性血液病的治疗,多份脐血联合移植可能是解决单个核细胞数偏低问题的途径之一.

  • 体外转染mFasL-cDNA小鼠骨髓细胞预防移植物抗宿主病的实验研究

    作者:徐之良;邹萍;刘凌波;李爱香;马艳萍

    为了探讨通过Fas-FasL途径清除骨髓移植物中T细胞后,预防移植物抗宿主病(GVHD)的可能性,采用脂质体转移法将FasL-cDNA转染雌性BALB/c小鼠骨髓细胞,证实其获得表达后,体外与雄性BAC (BALB/c×C57BL/6) 小鼠骨髓移植物混合培养后输注给经致死照射的BALB/c鼠,然后观察受体鼠GVHD的表现、死亡率,进行组织病理学检查,骨髓细胞Y染色体及CFU-S检测.结果表明:实验组10只小鼠,60天死亡2只,4只有GVHD改变;对照组10只, 60天死亡7只,10只均有GVHD改变;两组骨髓细胞Y染色体分析显示均有供体鼠来源的骨髓细胞植入;CFU-S检测表明实验组动物体内10天即有CFU-S形成,移植后第20天即达正常水平.结论:转染mFasL-cDNA小鼠骨髓细胞能有效地预防GVHD的发生,并能使受体造血功能获得重建.

  • 实时定量PCR监测多发性骨髓瘤患者自体造血干细胞移植后微小残留病

    作者:林法迎;侯健;谭龙益;丁思奇;王皓;王东星

    为了探讨应用实时定量PCR方法在监测多发性骨髓瘤患者造血干细胞移植后微小残留病(minimal residual disease, MRD)中的作用,利用SYBR Green Ⅰ荧光染料,采用实时定量PCR方法,以IgH为标志,对8例多发性骨髓瘤和1例Waldenstrm巨球蛋白血症患者自体外周血干细胞移植(autologous peripheral blood stem cell transplantation, APBSCT)前后的IgH(immunoglobulin heavy chain, IgH)基因重排进行定量分析.结果发现,IgH基因重排拷贝数在APBSCT前后分别为3108±1043,594±660,两者差异有显著性(P<0.05),与患者骨髓浆细胞比值和外周血M蛋白量成正相关(r=0.86,P<0.05),并对1例复发患者进行连续检测,结果与临床相符.结论:实时定量PCR方法对IgH基因重排定量分析,可以作为判断多发性骨髓瘤治疗疗效的一种检测方法,并对患者的预后判断也有意义.

  • 异基因外周血造血干细胞移植治疗恶性血液病

    作者:白海;欧英贤;王存邦;魏亚明;欧建峰;徐淑芬;潘耀柱;闵芬玲

    为观察异基因外周血造血干细胞移植(allo-PBSCT)治疗急慢性白血病的疗效,从1997年3月至2003年1月共进行了21例急慢性白血病的Allo-PBSCT.21例的供者中19例为HLA-Ⅰ/Ⅱ抗原完全相合的同胞,1例慢性粒细胞白血病急粒变患者的供者为HLA半相合母亲,1例女性急性淋巴细胞白血病患者的供者为1个B位点不合的胞妹.21名供者均用rhG-CSF动员,第5天起用CS 3000plus分离外周血单个核细胞1-3次,预处理方案采用常用的TBI与联合化疗方案.所有病人均采用环胞菌素A和短程MTX进行移植物抗宿主病的预防.结果表明,移植后粒细胞恢复至≥0.5×109/L平均为12天,血小板恢复至≥20×109/L为15天.17例患者中发生急性GVHD 8例(47%),其中1例为子母间移植;慢性GVHD 12例(70%);4例存活的女性患者,包括1例1个B位点不合的ALL患者,均无急、慢性GVHD发生.100天移植相关死亡3例(14%),复发2例(9.5%),均为移植时未缓解患者.至报告时无病存活11例(52.4%),存活时间平均40(15-70)个月.结论: Allo-PBSCT后造血恢复较快、白血病复发率相对较低,急性和重度GVHD的发生并无明显增加,但慢性GVHD发生率明显增高,并成为影响患者生存的主要并发症.

  • 急性早幼粒细胞白血病患者中TCR Vβ T细胞体内外克隆性增殖的比较

    作者:杨力建;李扬秋;陈少华;韩素芳;陈盛亭;张学利;张涛

    为了解急性早幼粒细胞白血病(APL)患者T细胞在体内或体外经诱导后TCR Vβ亚家族的分布和克隆性增殖特点,利用T淋巴细胞液体培养法,在rhIL-2和抗CD3单抗条件下诱导扩增APL患者单个核细胞,并应用RT-PCR分别扩增培养前后患者T细胞的TCR Vβ 24个亚家族基因的互补决定区3(CDR3)片段,了解各Vβ亚家族的表达情况;对阳性的PCR产物进一步经荧光素标记和基因扫描分析产物的CDR3长度,了解T细胞克隆性.结果发现,APL患者T细胞仅表达部分Vβ亚家族,但经体外培养后可检测到部分新增TCR Vβ亚家族T细胞.全部患者存在某些TCR Vβ亚家族的克隆性增殖T细胞.2例患者均出现相似的Vβ1,Vβ3,Vβ7,Vβ16和Vβ20 T细胞的克隆性增殖情况.结论:T细胞的体外培养可诱导某些Vβ亚家族的表达.在T细胞培养不同时间中,呈持续克隆性增殖的TCR Vβ亚家族T细胞可能是患者T细胞对APL白血病细胞相关抗原的特异性免疫应答.

  • 小鼠胎肝和骨髓细胞基因表达差异的比较研究

    作者:任爱辉;张咏;赵彦林;赵蕾;刘新宇;赵士富

    造血发育经历了从卵黄囊到胎肝、胎脾并终定位于骨髓的复杂过程.虽然已有部分研究发现决定这一迁移过程的重要因素是造血微环境,但缺乏对不同造血器官微环境差别的系统性比较研究.为了探讨胎肝与成年骨髓造血微环境差别的分子基础,对小鼠胎肝和骨髓细胞RNA进行cDNA微阵列(cDNA microarray)杂交,以生物信息学方法分析杂交结果,并以RT-PCR和Northern blot对杂交结果进行进一步验证.结果表明,在588种具有重要功能的已知基因中,二者相比,骨髓高表达的基因有65种,胎肝高表达的基因有131种.进一步分析发现骨髓高表达的基因中与造血相关的基因有39种,胎肝高表达的基因中与造血相关的有71种,分别占差异基因群的60%和54%.RT-PCR和Northern blot验证的结果表明,CD18、CD44及PSGL-1基因在骨髓中高表达而在胎肝中低表达或不表达,此结果与微阵列杂交结果相符.同时还发现,CD18和CD44基因在胎肝中的表达水平随胎龄增加呈下调趋势.结论:胎肝与骨髓细胞的基因表达谱显著不同,其中某些基因的表达随发育阶段不同而变化.这些基因的差异性表达,尤其是与造血细胞发育、迁移、植入等密切相关基因的差别性表达,可能是胎肝造血兴衰、不同组织造血干细胞性能差别及影响不同造血组织来源的造血干细胞在骨髓植入的分子基础.

  • Jurkat细胞转染外源HCAP1基因后的增殖抑制

    作者:吴向华;王嵘;杜均样;牧启田;郭列平;郑佩娥;万大方;顾建人

    HCAP1基因系人类染色体17p13.3区带克隆的新肝癌相关基因.已发现人类多种肿瘤存在此区带的杂合性缺失.本研究应用脂质体介导法将HCAP1基因转染T淋巴瘤Jurkat细胞系,经G418筛选,获得稳定表达外源HCAP1基因的细胞.用台盼蓝拒染试验计数活细胞,绘制生长曲线,进行软琼脂集落形成试验.结果显示:与转染空载体质粒pBK/CMV的细胞比较,转染外源HCAP1基因的Jurkat细胞增殖速率明显减慢,细胞倍增时间延长,在软琼脂上的集落形成能力下降(P<0.01).结论:外源HCAP1基因产物对Jurkat细胞的增殖有明显的抑制作用.

  • 人端粒酶逆转录酶基因反义核酸对CEM细胞系端粒酶活性的影响

    作者:李文瑜;张洹;何冬梅

    为了探讨人端粒酶逆转录酶(human telomerase reverse transcriptase, hTERT)基因的全硫代修饰反义寡核苷酸(antisense phosphorothioate oligodeoxynucleotide, ASODN)对CEM细胞端粒酶活性的影响,采用端粒酶聚合酶链反应-酶联免疫测定法检测CEM细胞的端粒酶活性,采用逆转录-聚合酶链反应方法检测hTERT基因mRNA的表达水平,以间接免疫荧光标记法通过流式细胞仪检测hTERT蛋白表达含量的变化.结果显示: hTERT ASODN作用于CEM细胞后, hTERT mRNA表达水平明显降低; ASODN与CEM细胞共同孵育48小时,hTERT蛋白表达阳性率降为(40.43±2.07)%, 72小时hTERT蛋白表达阳性率降为(15.26±2.74)%,而hTERT正义核酸作用CEM细胞24,48,72小时,对hTERT mRNA及蛋白表达水平均无影响; hTERT基因ASODN作用于CEM细胞48,72小时,其端粒酶活性明显降低,分别与正义寡核苷酸组、空白对照组相比有显著性差异(P<0.05).结论:hTERT基因反义寡核苷酸能特异性地抑制CEM细胞的端粒酶活性.

  • 巯嘌呤甲基转移酶基因多态性分析方法探讨

    作者:马晓莉;朱平;胡亚美;吴敏媛;李志刚;卜定方

    建立以PCR为基础的位点特异性PCR、限制性内切酶消化、变性高效液相色谱分析和SNaPshot定点的序列分析等方法,并结合DNA直接测序检测巯嘌呤甲基转移酶(TPMT)基因的5个单核苷酸多态性(SNP)位点的多态性频率.在实验过程中还探讨基因多态性检测的方法学,比较几种方法的可信度、可行性及其优劣.研究结果显示,限制性内切酶消化法能准确地检测TPMT基因外显子区的SNP,变性高效液相色谱分析技术能快速筛选出TPMT第5和第10外显子区的SNP,但不能检测出第7外显子的SNP;位点特异性PCR不能检测出TPMT基因外显子区的SNP, SNaPshot定点的序列分析检测TPMT基因外显子和启动子区的SNP准确率高.通过比较几种SNP检测方法后获得的结论是,TPMT基因SNP位点的检测应根据标本量和实验条件首选限制性酶切消化法、DNA测序或SNaPshot定点序列分析,有时一种技术不能完全满足检测的需要,必须几种方法的相互补充.

  • 白血病患者血浆白细胞介素18的水平及其临床意义

    作者:张鲁勤;姜岩;郭玉琳;赵惠仁

    本研究探讨白血病患者血浆白细胞介素-18(IL-18)水平与白血病发病、预后及治疗的相关临床意义.采用酶联免疫吸附测定法,对37例白血病患者在初诊时及化疗后2周分别采集静脉血,测定其血浆IL-18水平,以18名献血员为正常对照组.结果显示,白血病患者血浆IL-18水平治疗前略高于正常水平,但差异无显著性.其中急性淋巴细胞白血病患者血浆IL-18水平升高显著(173.27±34.24 pg/ml),慢性粒细胞性白血病患者IL-18水平(111.82±50.56 pg/ml)低于正常对照组(135.82±47.00 pg/ml).化疗后,白血病各组患者血浆IL-18水平均明显低于正常对照组(P<0.001).结论:白血病患者血浆IL-18水平是不均一性的,而其化疗后血浆IL-18水平均明显减低.这一点预示着白血病患者化疗后的免疫功能低下与其血浆IL-18水平下降,以致其相关联的一系列细胞因子的相应减少有关.

  • CD30+间变性大细胞淋巴瘤细胞系的建立及其生物学特性

    作者:姜华;侯健;傅卫军;丁思奇;张波

    由1例非霍奇金淋巴瘤患者的胸水标本通过液体培养法建立了1株CD30+间变性大细胞淋巴瘤细胞系,并对其生物学特性进行研究.所建立的细胞系可以在含10%小牛血清的RPMI 1640培养液中持久增殖,倍增时间约为36小时,目前已传代120余次,生长良好,暂命名为SH-1.光镜下细胞形态与典型的CD30+间变性大细胞淋巴瘤(anaplastic large cell lymphoma, ALCL)细胞的形态十分类似,电镜下可观察到胞浆内存在较多病毒颗粒.细胞组织化学染色:光镜下过氧化物酶POX阴性,糖原染色PAS阳性,酸性磷酸酶(ACP)呈强阳性;电镜下髓过氧化物酶(MPO)阴性,血小板过氧化物酶(PPO)阴性.EB病毒核心抗原-1(EBNA-1)呈阳性.细胞免疫表型为CD30+、CD45+、HLA-DR+,而EMA、CD34、CD38、CD2、CD3、CD4、CD7、CD8、CD10、CD15、CD19、CD20均呈阴性.染色体分析示SH-1细胞系核型为二倍体或四倍体核型,并具有明显的结构和数量异常,但未见典型t(2;5).结论:所建立的细胞系为CD30+ALCL细胞系.

  • 人成纤维样基质细胞系对HL-60细胞增殖和VEGF表达的影响

    作者:梁蓉;黄高昇;陈协群;王哲;冯骥良;张伟平;郭英;杨国嵘

    为了观察正常人骨髓成纤维样细胞系(HFCL)对白血病细胞系HL-60细胞增殖和血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响,用免疫组织化学对HFCL细胞进行组织学鉴定;建立HL-60细胞和HFCL细胞共培养体系,台盼蓝拒染法测定生长曲线;HE染色和瑞-姬姆萨染色后进行分裂指数(MI)测定;流式细胞术检测细胞周期的变化;Western blot检测增殖细胞核抗原(PCNA)表达; ELISA双抗体夹心法检测HL-60细胞表达VEGF水平.结果发现,与HFCL细胞共培养后HL-60细胞生长受抑,且与HFCL细胞直接接触组的抑制作用大于用跨室共培养组,其分裂指数表现为单独HL-60细胞组大于用跨室共培养组,更大于与HFCL细胞直接接触组.同时发现HL-60细胞与HFCL细胞共培养后G1期细胞增多,S期细胞减少,且PCNA表达下调,以直接接触组为甚.HL-60细胞与HFCL细胞共培养后,培养上清的VEGF水平减低,直接接触组和跨室共培养组下降程度一样,而与HL-60细胞共培养,HFCL细胞增殖无明显变化.结论:正常人骨髓成纤维样细胞能抑制白血病细胞系HL-60的增殖,抑制细胞周期,降低VEGF因子的表达.

  • 四硫化四砷治疗急性早幼粒细胞白血病过程中PML/PML-RARα蛋白的变化

    作者:王景枝;刘艳荣;秦亚溱;江浩;王锋容;鲍立;陆道培

    为了研究四硫化四砷(As4S4)对急性早幼粒细胞白血病(APL)患者白血病细胞中PML/PML-RARα蛋白的作用,在患者治疗前和治疗后不同时间多次留取骨髓或外周血标本,用抗PML蛋白单抗对APL细胞进行间接免疫荧光染色,并在荧光显微镜下观察荧光信号的演变规律.结果显示:治疗前APL细胞表现为细胞核内弥漫分布的大量微颗粒荧光信号.As4S4治疗后,早于第2天即可出现荧光分布的改变,表现为微荧光颗粒消失,出现数个大荧光颗粒,并出现核周荧光,终大荧光颗粒也消失.当As4S4合用全反式维甲酸(ATRA)时,PML蛋白荧光信号变化规律与单用As4S4基本相同.但单独应用ATRA治疗后,PML蛋白荧光信号的改变与前两组明显不同,主要差别为微荧光颗粒不会很快消失,而是在微荧光颗粒逐渐减少的基础上,出现越来越多的大荧光颗粒,终微荧光颗粒消失,而大荧光颗粒始终存在. 结论:As4S4使患者体内APL细胞的PML/PML-RARα蛋白发生重新分布,与ATRA治疗后完全不同.

  • 蛋白酶体抑制剂可增加足叶乙甙对白血病细胞系M-07e和TF-1的凋亡诱导效应

    作者:兰雨;张学敏;杨平地;沈倍奋

    近年来的研究显示泛素-蛋白酶体通路在细胞凋亡调控中发挥了重要的作用.本实验就蛋白酶体抑制剂Z-LLL-CHO与经典的凋亡诱导剂足叶乙甙(VP16)对白血病细胞系M-07e及TF-1的联合效应进行了初步研究.应用MTT法及台盼蓝拒染法显示Z-LLL-CHO及VP16联合作用于M-07e及TF-1细胞,可增强两种药物单独的细胞杀伤效应.流式细胞术检测提示单独应用Z-LLL-CHO及VP16均可使S+G2/M期细胞比例增加,两者联合应用导致细胞凋亡峰比例的显著增高.通过对M-07e细胞裂解物做免疫印迹检测,发现在Z-LLL-CHO及VP16单独作用中均导致Bcl-2蛋白被酶解为22 kD的片段,而联合作用时Bcl-2的酶解现象具有叠加效应.结论: Z-LLL-CHO与VP16联合作用较单独作用有更强的细胞杀伤及诱导细胞凋亡活性,细胞周期S+G2/M期比例的增加及Bcl-2酶解片段的增加是导致蛋白酶体抑制剂Z-LLL-CHO及VP16对白血病细胞系联合效应的可能机制.

  • 六亚甲基二乙酰胺对HL-60细胞细胞周期及其调节蛋白表达的影响

    作者:王钦红;谢毅;范华骅;高砾;刘燕

    六亚甲基二乙酰胺(hexamethylene bisacetamide, HMBA)是一种极性诱导分化剂,已应用于临床治疗急性髓系白血病和骨髓增生异常综合征(MDS),但其诱导髓系白血病细胞分化的机制尚不清楚.本研究观察了HMBA对HL-60白血病细胞细胞周期及其调节蛋白表达的影响,以探讨其药理机制.用流式细胞术检测HMBA对HL-60细胞细胞周期分布和细胞周期蛋白D、 E及p27表达的影响,用RT-PCR研究HMBA对细胞周期负性调控分子CKI p15, p16, p27基因mRNA表达的影响.结果表明,HMBA主要使HL-60细胞阻滞于G0/G1期,经HMBA处理后HL-60 细胞胞浆内细胞周期蛋白E蛋白表达显著降低,而细胞周期蛋白D和p27蛋白表达则显著增高;未经HMBA处理的HL-60细胞p15, p16 mRNA均无表达; 3 mmol/L HMBA处理24小时后p15 mRNA出现弱阳性条带,48小时和72小时后出现强阳性条带, p16 mRNA则在48小时后出现弱阳性条带,72小时后出现强阳性条带; p27 mRNA在未经处理和处理后24,48和72小时后均出现强阳性条带,阳性程度无明显差异.结论: HMBA的药理机制之一可能是通过下调细胞周期蛋白E,上调p27蛋白的表达,同时使得p15, p16基因mRNA重获表达,阻滞HL-60细胞周期于G1期,从而发挥其抗增殖作用.

  • 肺耐药蛋白基因和多药耐药相关蛋白基因在急性白血病骨髓细胞中的表达及临床意义

    作者:迟作华;刘振;孙晨;赵洪国;刘金兰

    为了研究肺耐药蛋白基因和多药耐药相关蛋白基因在急性白血病骨髓细胞中的表达及其临床意义,采用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测初治急性白血病、复发难治白血病及正常对照骨髓细胞肺耐药蛋白基因(lung resistance protein, LRP)及多药耐药相关蛋白基因(multidrug resistance protein, MRP)的表达.结果显示,正常对照骨髓细胞LRP表达阴性,初治急性髓细胞白血病(AML)组及复发难治组LRP表达水平与正常对照组相比明显升高,增高的LRP mRNA水平与对初次化疗不敏感及预后差有关,LRP表达阳性患者的完全缓解率明显低于表达阴性者.经直线相关分析发现,LRP表达与MRP表达水平成正相关.结论: LRP可能是一项新的耐药指标,其高表达与急性髓细胞白血病的疗效及预后密切相关,同时检测LRP和MRP的表达可以指导治疗,估计预后.

  • 11例急性早幼粒细胞白血病患者并发维甲酸综合征的临床分析

    作者:王智;冯金萍;郝淼旺;郑引索;田昱平;姚亚洲;白秀琴

    为了探讨急性早幼粒细胞白血病(APL)并发的维甲酸综合征(RAS)的临床特点、发病危险因素及治疗,对11例APL并发RAS病人的临床和实验室检查资料进行了回顾性分析.结果表明:RAS较多见且较早出现,其临床症状为呼吸困难(11/11)、发热(10/11)和胸腔积液(6/11)等.全反式维甲酸(ATRA)治疗中白细胞数增高(≥15.0×109/L)者易发生RAS(9/11).在继续应用ATRA的同时静脉滴注地塞米松治疗的有10例缓解,1例死于弥散性血管内凝血.结论:早期识别RAS症状和应用地塞米松治疗是取得较好临床效果的关键,继续应用ATRA不影响其疗效.

  • 蛋白酶活化受体1与4在血小板活化中的作用机制

    作者:韩悦;Jean-max Pasquet;Alan Nurden;阮长耿

    为了比较蛋白酶活化受体1和4(PAR1, PAR4)合成肽对血小板膜表面糖蛋白GPIbα表达及细胞骨架的影响,揭示蛋白酶活化受体在血小板信号传递中的作用,选择25 μmol/L PAR1与250 μmol/L PAR4两类合成肽分别在不同时间段(0-60分钟)活化血小板,应用流式细胞仪测定血小板膜糖蛋白GPIbα及P-选择蛋白的表达,并结合SDS-PAGE与转移电泳技术比较血小板活化前后细胞骨架GPIbα、肌动蛋白、肌球蛋白的变化,同时对膜骨架成分进行GPIbα免疫沉淀分析. 结果显示,PAR1与PAR4两类合成肽均可促使血小板活化,其P-选择蛋白水平显著升高,GPIbα表达进行性减少又出现逐渐回升的可逆性变化,各时间段引起的GPIbα改变在两者之间都具有显著差异(P<0.05) ,其中PAR1首先发生作用,但PAR4维持时间更长.细胞骨架蛋白分析显示肌动蛋白与肌球蛋白协同GPIbα呈现先增加后减少的动态变化.免疫印迹也表明与GPIbα相连的肌动蛋白及肌球蛋白出现可逆性改变.结论: PAR1与PAR4在血小板信号传递过程中发挥了重要作用,它们能各自独立地介导血小板活化,并导致GPIbα逆转,这与细胞骨架的积极参与相关.PAR1起效较快,PAR4维持作用更长久.

  • 人骨髓间充质干细胞原位冷冻保存方法的改进

    作者:李秀森;范海涛;原野;侯春梅;毛宁

    本研究的目的是分离纯化、大量扩增人骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells, MSC).在细胞原位冻存后通过鉴定其生物学特性有无变化,以探讨这种原位冻存方法的可行性.采用常规方法体外分离培养并扩增骨髓MSC,将培养扩增的细胞用含10%二甲亚砜、30%胎牛血清、DMEM-LG的细胞冻存体系,以不同的细胞贴壁密度在细胞培养瓶内原位冻存于-70℃冰箱内.冻存后第4,8和12周在38℃至40℃的水浴中复苏冻存的贴壁细胞,通过细胞周期分析并检测其多向分化功能以鉴定该方法的可行性.结果表明,MSC不经消化,直接在培养瓶内原位冻存于-70℃低温冰箱,3个月内细胞生物学特性没有明显改变,细胞仍具有向成骨、脂肪和成软骨细胞多向分化的能力.结论:体外培养的骨髓MSC原位贴壁冻存于-70℃,至少在12周内不影响其生物学功能,此种短期冷冻保存是一种可行的方法.

  • 单细胞电泳法检测肿瘤患者化疗后淋巴细胞DNA损伤

    作者:程绍辉;马晓慧;卜黎明;刘宁;孙殿军

    应用单细胞电泳(SCGE)检测肿瘤患者环磷酰胺化疗后外周血T淋巴细胞DNA损伤.在标准SCGE条件下应用彗星图象分析系统定量分析人T淋巴细胞DNA的损伤程度.彗星图象分析研究结果显示,肿瘤患者外周血T淋巴细胞DNA损伤明显强于正常对照组,肿瘤患者外周血T淋巴细胞拖尾动量为10.42±1.98,正常人群为1.26±0.77;两者差异极显著(P<0.01).肿瘤患者化疗后T淋巴细胞的拖尾长度为33.69±7.56 μm,DNA损伤的百分比为31.5±5.46%;正常人群T淋巴细胞的拖尾长度和DNA损伤的百分比分别为16.2±1.5 μm和7.46±1.15%;两组数据相比差异极显著(P<0.01).结论:单细胞电泳可快速灵敏地检测细胞DNA损伤,能用于肿瘤化疗患者的流行病学观察.对于指导临床用药和预后也有指导意义.

  • 小鼠骨骼肌源间充质干细胞的分离与培养

    作者:张明伟;郭子宽;刘晓丹;吴英;侯春梅;毛宁

    为观察成体小鼠肌肉组织中是否含有间充质干细胞(mesenchymal stem cells, MSC),将分离胶原酶消化的肌肉单个核细胞,在含10%胎牛血清的α-MEM/F12培养液中培养,观察培养细胞的形态、细胞化学及增殖特性特征,用流式细胞术分析细胞表型,并观察细胞体外向成骨细胞分化能力.结果显示,从小鼠肌肉组织中分离和培养获得的细胞具有良好的增殖特性,CD34及CD45阴性,CD29及Sca-1阳性率在90%以上.细胞化学染色显示,细胞非特异性酯酶和酸性磷酸酶为阳性,碱性磷酸酶阴性,糖原为弱阳性.细胞经维生素C,β-磷酸甘油及地塞米松诱导后,碱性磷酸酶活性明显增强,阳性率达到94%以上.结论:成体小鼠肌肉组织中含有间充质干细胞,是肌肉干细胞群体中的重要组成部分.

  • 156例SARS患者血清抗SARS冠状病毒抗体的观测

    作者:王海宝;刘景汉;欧阳锡林;于洋;马曙轩;李锡金;吕留彩;田亚平;刘红鹰;许红民;姚伟

    本研究的目的是观察严重急性呼吸综合征(severe acute respiratory syndrome, SARS)患者抗SARS-冠状病毒(SARS-CoV)抗体IgG和IgM的产生及抗体效价变化特征,探索采集SARS痊愈患者抗血清的时机.应用ELISA方法对随机抽取的156名SARS患者血清标本进行抗SARS-CoV抗体IgG和IgM抗体效价测定.结果表明, 156名SARS患者于病后3至9周期间,IgG抗体阳性率为75.6%, IgM抗体阳性率为41.7%, IgG和IgM抗体均阳性为41%, IgG和IgM抗体均阴性为23.7%; IgG抗体阳性患者中抗体效价为18.23±24.72, IgM抗体阴性患者抗体效价为2.18±1.13; IgG和IgM抗体效价与SARS患者的性别、年龄、病程、体温正常天数无显著相关性.结论: 并非所有SARS患者都能产生抗SARS-CoV抗体,即使产生抗体,其效价的个体差异也较大,并不能通过性别、年龄、病程及体温正常天数等因素较准确地评估抗体的效价.因此,在SARS抗血清采集前,应重新进行抗体效价测定,遴选具有高效价抗SARS-CoV抗体的SARS痊愈患者进行抗血清的采集,才能提高所采集的抗血清在临床的治疗效果,同时又可为患者抗体输注提供量化指标.

中国实验血液学分期目录
期数
2019 01
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