中国实验血液学杂志
Journal of Experimental Hematology 중국실험혈액학잡지
- 主管单位: 实验血液学杂志
- 主办单位: 中国科学技术协会
- 影响因子: 0.98
- 审稿时间: 1-3个月
- 国际刊号: 11-4423/R
- 国内刊号: 陈潮
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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异基因造血干细胞移植后早期和成熟T细胞亚群的恢复
对21例异基因造血干细胞移植病人移植后3个月内外周血T细胞CD3 CD5+和CD3+CD5+亚群的百分比进行了测定.CD3 CD5+细胞作为早期胸腺细胞的标志,在移植后3个月内均低于正常对照,CD3+CD5+细胞作为成熟T细胞的标志,在移植后2-3个月开始恢复,说明移植后早期(3个月内)T细胞数量的恢复主要依靠成熟T细胞的扩增.CD3+CD5+细胞在发生急性移植物抗宿主病的病人中明显升高.
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粒生素与惠尔血(rhG-CSF)对血液肿瘤患者化疗后粒细胞减少症的疗效比较
本研究采用多中心开放对照方法,观察了国产重组人粒细胞生长因子(粒生素)对血液系统恶性肿瘤化疗后引起的粒细胞减少症的治疗效果及不良反应,并与进口同类产品(惠尔血)进行比较,结果显示粒生素组和惠尔血组的总有效率相似,分别为98.8%和100%,且治疗后两组间外周血WBC,ANC计数的变化曲线相似,均在用药后第12天达到高峰,ANC计数恢复至正常所需的时间分别为7天和8天,无明显差异,表明在促进化疗后粒细胞减少症的恢复上,粒生素的疗效完全可以达到与惠尔血相同的水平.
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成人慢性髓性白血病细胞β1整合素功能障碍的研究
为了探讨Ph(+)慢性髓性白血病(CML)骨髓细胞是否存在β1整合素活化障碍,我们以10例正常及12例CML骨髓单个核细胞(NBMMNC及CMLBMMNC)为研究对象,用β1整合素活化抗体8A2和粒巨噬系集落刺激因子(GM-CSF)作活化剂,用流式细胞术测定上述细胞与可溶性纤连蛋白(FN)的结合能力及其β1整合素跨膜区9EG7表位的表达,并观察了ABL激酶抑制剂CGP57148B预处理对上述细胞β1整合素活化的影响.实验结果表明:CMLBMMNC之9EG7表达率及FN结合率与NBMMNC组相比均无显著差别(P>0.05);8A2对CMLBMMNC 9EG7表达率及FN结合率的增加作用显著低于对NBMMNC的作用(P<0.05);GM-CSF及G-CSF均可显著增加NBMMNC的9EG7表达率及FN结合率,而不增加CMLBMMNC的上述指标;0.1μmol/LCGP57148B预处理30分钟可明显增加CMLBMMNC β1整合素的活化潜能(可活化性),而对NBMMNC无显著影响.本实验结果提示:Ph(+)CML细胞存在β1整合素活化障碍是其与FN粘附功能缺陷的主要发生机制;ABL激酶抑制剂CGP57148B对β1整合素无直接活化作用,但可增强活化剂的作用.
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骨髓的巨大瘤细胞及其意义
我们在7例患者的骨髓中发现了巨大瘤细胞及其变种,按不同的形态人为地将其分为5种,以瑞氏染色、组化染色、免疫组化染色、流式细胞仪检查、电镜观察及病理学观察均说明这些细胞类似淋巴样-单核细胞样-巨噬细胞样细胞,有骨髓增生亢进和明显病态造血现象.2例按病理观察诊断为恶性淋巴瘤.所有病例无淋巴结、肝-脾肿大或任何局部瘤块.关于预后,2例患者分别于病程8个月和17个月死亡,1例在病程10个月时病情危重,其余4例的病程为2.5至24个月,但病情相对稳定.这些患者可能为一组少见的恶性淋巴-单核-巨噬细胞增生性疾病.
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白血病细胞Bcl-2和P53基因蛋白表达与化疗的关系
为研究人白血病细胞Bcl-2和P53基因蛋白表达以及它们的表达与化疗的关系,用ABC免疫组织化学方法检测白血病细胞Bcl-2和P53蛋白.结果表明,52例患者白血病细胞Bcl-2和P53蛋白表达阳性率分别为67%和41%,其中急性淋巴细胞白血病细胞P53蛋白表达较急性非淋巴细胞白血病低(P<0.05),Bcl-2蛋白表达在二者间无差异(P>0.05);慢性粒细胞白血病随着向急性期转化Bcl-2和P53蛋白表达率明显增高;复发难治组Bcl-2和P53蛋白阳性率比初发组明显增高,并且骨髓缓解率低,容易再次复发.Bcl-2和P53蛋白表达可作为白血病临床治疗效果以及预后判断的指标,慢性粒细胞白血病二者高表达可能提示其向急性期转变.
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几种不同方式诱导Jurkat细胞凋亡过程中TFAR19的表达
为探讨一个新的细胞凋亡相关基因--TFAR19所参与的凋亡途径,我们研究了几种不同方式诱导白血病细胞株Jurkat细胞凋亡过程中TFAR19表达的变化.采用去除血清,VP-16作用及Fas单抗活化受体等方法诱导Jurkat细胞凋亡后,以RT-PCR方法检测mRNA水平TFAR19的表达,用流式细胞术及Western印迹检测蛋白水平TFAR19的表达.实验结果显示,Jurkat细胞在去除血清12小时,VP-16作用2小时,以及Fas单抗诱导细胞凋亡2小时后,在mRNA及蛋白水平TFAR19的表达都呈增高趋势.结论提示,TFAR19参与了去除血清、DNA损伤及死亡受体激活所诱导的细胞凋亡过程,它在细胞凋亡过程的早期开始发挥作用,TFAR19是细胞凋亡途径中的"终末共同通路"的参与者.
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IL-12基因转导EL-4细胞对C57BL/6小鼠的肿瘤疫苗作用
应用逆转录病毒构建了IL-12表达载体,以研究IL-12基因修饰的肿瘤细胞的肿瘤疫苗作用,将其转染EL-4胸腺瘤细胞并研究了该基因导入细胞的抗肿瘤免疫效果.当接种了EL-4/IL-12转染细胞后,在C57BL/6同系鼠中其基因导入细胞的致瘤性比EL-4/Wt和EL-4/Neo组明显减少(P<0.01),在EL-4/IL-12被排斥后,体内试验中实验动物诱发了抗EL-4/Wt的系统性、保护性免疫,51Cr释放测定中,获得一个较强的抗EL-4/Wt和一个较弱的抗同系Lewis肿瘤细胞的CTL活性,体内淋巴细胞消除分析的结果提示减少的致瘤性主要依赖于CD4+,CD8+和NK细胞.这一研究结果提示应用IL-12进行血液肿瘤的治疗是有效的,在未来人类癌症的治疗中IL-12亦可有一定的应用前景.
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PML-RARα转基因小鼠发生急性早幼粒细胞白血病
为了从整体水平上研究PML-RARα融合蛋白的致白血病作用,建立了仅在髓系细胞中表达PML-RARα融合基因的转基因小鼠.通过表型分析发现一个单系的3只hCG-PML-RARα转基因小鼠在1-5个月时发生急性早幼粒细胞白血病,从而说明PML-RARα融合基因的表达在白血病的发生中起着极为重要的作用.
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逆转录病毒介导p16基因转移引起K562白血病细胞系的增殖抑制
为探讨p16基因对白血病细胞增殖的影响,为白血病发生机理的研究和p16的基因治疗提供实验依据,我们构建了p16的逆转录病毒载体pLMSN,新型双嗜性包装细胞PT67和单嗜性包装细胞ψ包装后,体外转导p16基因缺失的K562细胞.用RT-PCR与荧光免疫法检测外源性P16蛋白的表达,流式细胞术测定细胞周期,活细胞计数观察细胞增殖情况,进行软琼脂集落形成实验.结果表明,转导后K562-p16细胞中可检测到P16蛋白的表达,细胞生长曲线显示细胞增殖明显减慢,G0-G1细胞数增多,RB蛋白去磷酸化,细胞在软琼脂中形成集落能力下降.以上结果提示p16编码序列体外可以抑制白血病细胞的增殖,抑制作用是通过Rb抑制途径实现的.逆转录病毒介导的p16基因转移对白血病的基因治疗具有一定意义.
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多表位BCR-ABL融合基因的合成、克隆及表达研究
慢性粒细胞白血病(CML)的免疫治疗是清除白血病微小残留病并终根治CML的方向之一,包含BCR-ABL融合区的多肽具有良好的免疫原性,在体内、外可诱发BCR-ABL特异的T细胞克隆.以BCR-ABL融合肽瘤苗激发特异性T细胞应答抗CML免疫治疗有希望成为根治CML残留白血病的有效手段.本实验通过基因工程技术,设计一个280 bp的融合抗原基因片段,包含HLA-A2,HLA-A3,HLA-DR11等3个限制性BCR-ABL抗原表位,以及破伤风类毒素和霍乱毒素B亚单位的外源T细胞刺激表位.该融合抗原基因已在大肠杆菌中获得高效表达,所纯化的融合蛋白具有良好的活性及抗原性,为进一步实验奠定了基础.
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粒生素对肿瘤病人化疗后白细胞减少和感染的疗效观察
本研究观察粒生素(rhG-CSF)对肿瘤病人化疗后促进WBC和ANC减少的恢复作用,以及控制感染和对口腔溃疡的疗效.20例肿瘤病人化疗后WBC<2.5×109/L,ANC<1.5×109/L时每日皮下注射粒生素150μg,一般应用5天,或连续注射至WBC,ANC恢复到正常水平.对照组WBC,ANC也降到同样水平,不用任何细胞因子,但骨髓严重受抑时可给予成分输血.在观察期内隔日查血象,注意体温,口腔粘膜及肺部体征等.粒生素组病人化疗后WBC,ANC恢复速度明显快于对照组,两者均有非常显著性差异(P<0.01),发热时间缩短,口腔溃疡愈合快(P<0.05).观察结果表明,小剂量短疗程粒生素对肿瘤病人化疗后能有效地升高WBC与ANC水平,缩短发热时间,加快口腔溃疡愈合速度,还能减少支持治疗.
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人骨髓间充质干细胞支持体外造血
体内的稳态造血依赖于复杂而完整的骨髓造血微环境系统,其中的细胞成分是该系统的关键.存在于骨髓中的间充质干细胞(MSCs)是成纤维细胞、内皮细胞、成骨细胞、脂肪细胞等多种骨髓基质细胞的前体细胞,在造血调控中可能具有一定的作用.本研究首先建立了成人骨髓MSCs的分离及体外培养的方法,并应用长期骨髓细胞培养体系,观察了MSCs滋养层体外维持长期培养启动细胞(LTC-IC)的能力及其促进造血细胞分化的功能.结果显示:①脐带血来源的CD34+细胞粘附于滋养层上形成造血灶,表明MSCs可形成与骨髓基质细胞相似的体外造血微环境;②共培养5周后造血细胞仍具有体外集落形成能力,说明MSCs具有维系LTC-IC的能力;③流式细胞术分析显示,体外培养5周后约1%悬浮细胞表达CD34,15%细胞CD41a阳性,提示MSCs促进造血细胞向巨核系细胞分化.研究证明MSCs可能是造血微环境中的重要细胞成分.
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PCR定点诱变方法构建BCR-ABL cDNA竞争性PCR内参照物
本实验通过合成与原有下游引物(B)相似的一条新引物(B'),经聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)扩增出比原BCR-ABL cDNA序列减少了4个碱基的参照物,达到定点诱变的目的.经酶切分析证明,两型BCR-ABL mRNA均可通过此方法得到相应的cDNA参照物.参照物和待测模板的共扩增产物可通过毛细管电泳达到基线分离,证明了其可行性.该参照物可用于慢性粒细胞白血病BCR-ABL融合基因的竞争性PCR,对此基因进行定量检测.
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重组人白细胞介素11对卡铂致猕猴血小板减少症的治疗作用
观察国产重组人白细胞介素11(rhIL-11)对卡铂致猕猴血小板减少症的影响.成年猕猴每天静脉注射卡铂(15 mg/kg),连续3天.第3次注射卡铂后18小时内开始皮下注射rhIL-11(每天为50或100μg/kg),连续用药14天.给药后定期检测外周血白细胞计数、网织血小板计数、血小板聚集功能和骨髓的集落形成和病理组织学变化等.结果发现,rhIL-11能明显提高注射卡铂猕猴的血小板计数低值和缩短血小板计数少于50%药前值的持续时间,对白细胞和网织红细胞数的恢复也有一定程度的作用.给予rhIL-11后可见外周血网织血小板计数明显升高,但ADP诱导的血小板聚集功能无明显变化.rhIL-11组骨髓巨核系祖细胞和红系祖细胞集落形成增多,光镜下显示骨髓腔中粒系及红系细胞丰富和密集,巨核系细胞明显增多.上述结果表明,rhIL-11对卡铂致猕猴血小板减少症有明显的治疗作用,有助于化疗后促进多系造血功能的恢复.
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凝血因子Ⅷ基因内二核苷酸重复序列在云南省傣、彝和汉族人群中的多态性研究
研究云南省傣、彝和汉族人凝血因子Ⅷ基因内含子22(CA)n二核苷酸重复序列的多态性,获取高多态信息量的分子遗传标志.应用聚合酶链反应(PCR)和DNA序列分析技术及聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)对该位点的基因频率及多态信息量进行调查.结果发现,傣族和彝族中至少有(CA)n拷贝数为24,25和26的3种等位基因片段,两民族中的频率分布分别为1.2%-57.5%和16.43%-63.00%;汉族人群中至少有5种等位基因片段,(CA)n拷贝数分别为24,25,26,27和28,频率分布在8.97%-32.00%.在上述三种民族人群中均未发现FⅧ基因内含子22二核苷酸重复序列的杂合子.本研究的结果提示,目前至少可认为该位点不宜作为云南省傣、彝和汉族人群的DNA遗传标志.
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人多药耐药基因-1及二氢叶酸还原酶基因共转导小鼠造血细胞
耐药基因转导骨髓细胞对化疗病人造血系统的保护作用已受到人们的重视.本研究利用多药耐药基因-1(mdr-1)及二氢叶酸还原酶(dhfr)双基因转染小鼠骨髓细胞,观察造血细胞对两种耐药谱化疗药物的抵抗能力.结果表明,所用逆转录病毒载体转染率达到15%左右,转基因骨髓细胞CFU-GM对taxo1及MTX的耐药能力明显增强,说明外源基因在造血祖细胞中的正确表达;转基因骨髓细胞回输给同系小鼠7个月后,FCM技术仍可检测到外周血白细胞gp170的表达,且其基因组DNA中可检测到mdr-1及dhfr基因特异序列,表明两种基因可能已稳定整合至造血干/祖细胞中.上述结果为以骨髓细胞为靶体的耐药基因治疗提供了有用的实验室资料.
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供者淋巴细胞输注治疗异基因骨髓移植后血液恶性肿瘤复发的研究进展
异基因骨髓移植因复发危险性高而在临床应用上受到限制.原供者淋巴细胞输注(donor1ymphocyte infusion,DLI)能有效地再次诱导一些异基因骨髓移植后的慢性粒细胞白血病(CML)等复发患者的长期缓解.输注的异基因T细胞被患者抗原呈递细胞呈递的白血病特异性抗原激活,在细胞因子和共刺激分子辅助下产生移植物抗白血病效应,从而特异性地清除肿瘤细胞.移植物抗宿主病和骨髓抑制为DLI常见并发症,选择性T细胞输注和含干细胞输注能为DLI技术带来广阔的应用前景.
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胚胎期造血干细胞来源及其调控
胚胎干细胞是体内各种组织包括造血组织干细胞的来源,在胚胎干细胞向造血干细胞的分化及造血干细胞自身的发育过程中有着复杂的基因调控.原始造血产生于卵黄囊已被普遍认可,但永久造血产生于何处仍有争论.目前认为,至少有两个独立的部位与永久造血有关,即卵黄囊和胚内的PAS/AGM区.对胚胎期造血及其调控的研究不仅有助于探明某些血液病的发病机制,而且在基因治疗和造血干细胞工程方面也将具有重大作用.
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全身照射小鼠脾脏T细胞NF-κB活性的改变
核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)作为重要的核转录因子,可与多种基因的启动子或增强子特定区域结合而广泛参与多种基因表达的调控[1].全身照射(total body irradi-ation,TBI)是骨髓移植前预处理的方案之一.本研究以8.0Gy全身照射小鼠为骨髓移植前放疗预处理模型,观察脾脏T细胞内NF-κB的活性改变,从核因子水平阐明TBI对脾脏T细胞的影响.
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骨髓增生异常综合征外周血活化T细胞的研究
目前认为免疫功能在骨髓增生异常综合征(MDS)发病、发展及向白血病的转变中,可能起重要作用[1].本实验通过流式细胞术和双标记技术来检测20例MDS患者外周血活化T细胞的变化,以探讨MDS的发病机制,以期为预防及治疗提供理论依据.
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血复康对K562细胞增殖的影响
血复康是我院研制的治疗白血病的中药复方制剂.经临床长期应用证实血复康治疗慢性粒细胞白血病(CML)有良好疗效[1].为进一步探讨血复康治疗CML的作用机理,我们观察了血复康对K562细胞的增殖、抑制和诱导凋亡作用.
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羟基喜树碱治疗慢性粒细胞白血病疗效分析
自1991年3月至1998年10月我院使用羟基喜树碱(10-hydroxycamptothecine)治疗慢性粒细胞白血病14例,进行了28例次静脉点滴治疗,总有效率64%,其副作用轻微,疗效肯定,现报告如下.
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骨髓细胞学检查诊断组织胞浆菌病二例
组织胞浆菌病是稀有病种,常易被误诊或漏诊.为提高本病的诊治水平,把我院近两年发现的2例病人病史资料结合文献报道进行探讨.
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第四届中国病理生理学会实验血液学专业委员会组成名单
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第二届全国脐带血干细胞临床移植与基础学术会议征文通知
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