中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae 중국실험방제학잡지
- 主管单位： 国家中医药管理局
- 主办单位： 中国中医科学院中药研究所 中华中医药学会
- 影响因子： 1.62
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1005-9903
- 国内刊号： 11-3495/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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天麻钩藤饮含药血清对MPP+诱导PC12细胞凋亡JNK通路的影响
目的:观察天麻钩藤饮含药血清对1-甲基-4-苯基-吡啶离子(1-methyl-4-phenyl pyridinium,MPP+)诱导的PC12细胞凋亡的影响,并且探讨其是否通过c-Jun氨基末端激酶(JNK)信号通路发挥神经保护作用.方法:将32只SD大鼠随机分为空白组、天麻钩藤饮低、中、高剂量组,每组8只.天麻钩藤饮按照5.7,11.4,22.8 g·kg-1灌胃,空白组灌胃等体积生理盐水,采血制备空白和含药血清.PC12细胞常规培养并分为空白组、模型组、天麻钩藤饮含药血清低、中、高剂量组,空白组和模型组加空白血清,其他3组加10％的天麻钩藤饮含药血清,孵育30 min后,模型组和含药血清组再加500 μmol·L-1 MPP+共孵育48 h后收集细胞,采用Cell Titer 96(R)Aoueous MTS Reagent powder(MTS法)检测细胞存活率.后续实验分为5组,即:空白组,MPP+组,MPP++含药血清高剂量组,MPP++SP600125组,MPP++含药血清高剂量+SP600125组,采用Annexin V-FITC/PI双染色法检测细胞凋亡,分光光度法检测细胞半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)活性,蛋白免疫印迹法(Westernblot)检测JNK,p-JNK,c-Jun,p-c-Jun蛋白表达水平.结果:与空白组比较,模型组细胞活力明显降低(P＜0.05);与模型组比较,10％的天麻钩藤饮低、中、高剂量含药血清组细胞活力显著增加(P＜0.05).后续试验中,与空白组比较,MPP+组细胞凋亡率,Caspase-3活性,p-JNK和p-c-Jun蛋白表达明显升高(P＜0.05).与MPP+组比较,MPP++含药血清高剂量组,MPP++SP600125组均能够使细胞凋亡率,Caspase-3活性,p-JNK和p-c-Jun蛋白表达明显降低(P＜0.05),而MPP++含药血清高剂量+ SP600125组的作用明显高于MPP++含药血清高剂量组(P＜0.05),但不高于MPP++SP600125组.JNK和c-Jun蛋白表达无明显变化.结论:天麻钩藤饮含药血清对Mpp+诱导的PC12细胞的凋亡具有保护作用,其机制可能与JNK信号通路密切相关.
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葛根芩连汤对2型糖尿病ZDF大鼠CRP,TNF-α,IL-6的影响
目的:研究葛根芩连汤(Gegen Qinlian Tang,GQT)对自发型2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)肥胖大鼠(Zucker diabetes fatty,ZDF)中相关细胞因子C反应蛋白(C reactive protein,CRP),肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α),白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)表达的影响.方法:8只雄性ZDF(fa/+)大鼠设为正常组,成模的雄性ZDF(fa/fa)大鼠24只随机分为模型组(生理盐水10 mL·kg-1),二甲双胍(300 mg·kg-1)组,葛根芩连汤(生药量13.8 g·kg-1)组.每2周测大鼠体重、空腹血糖(fasting blood-glucose,FBG),给药8周后取材,全自动生化法检测甘油三酯(triglyceride,TG),总胆固醇(total cholesterol,TC);酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测大鼠血清中CRP,空腹胰岛素(fasting insulin,FINS)的量;计算胰岛素抵抗指数(insulin resistance index,IRI),胰岛素敏感指数(insulin sensitivity index,ISI);蛋白免疫印迹法(Western blot)检测TNF-α,IL-6的表达.结果:与模型组比较,葛根芩连汤组体重,FBG,TG,TC,CRP,FINS,IRI,ISI明显改善(P＜0.05),葛根芩连汤组TNF-α,IL-6相对表达显著降低(P＜0.05).结论:葛根芩连汤能有效改善2型糖尿病ZDF大鼠胰岛素抵抗,其作用机制可能与相关低度炎症反应中细胞因子的表达有关.
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扶正抗癌方通过PTEN/PI3K/Bad通路调控肺癌A549细胞增殖与凋亡
目的:观察扶正抗癌(FZKA)方对肺癌细胞A549增殖的调控作用,探讨其作用的分子机制.方法:以非小细胞肺癌细胞A549为研究对象,以FAKA方0.8,1.2,1.6,2.0,2.4,2.8,3.2 g·L-1干预,空白组,分别孵育24,48,72 h后,设立采用噻唑蓝(MTT)比色法检测FZKA方对A549细胞活力的影响;以FAKA方1.2,1.6,2.0 g·L-1干预,设立空白组,培养24 h后,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测FZKA方对A549细胞人第10号染色体同源丢失性磷酸酶-张力蛋白(phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten,PTEN)mRNA水平的影响;孵育24 h后,采用蛋白质免疫印迹法(Western blot)分析FZKA方对PTEN,磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol-3-kinase,PI3K),磷酸化的促凋亡蛋白Bad(Phospho-Bad,p-Bad)表达的影响并探讨其相关性.结果:与空白组比较,FZKA方能明显抑制A549细胞增殖,处理24 h后,FZKA从0.8 g·L-1开始,处理48,72 h后,FZKA方从0.4 g·L-1开始,细胞存活率明显降低(P ＜0.05,P＜0.01);与空白组比较,处理24 h后,FZKA方从0.8 g·L-1开始以浓度依赖性上调PTEN mRNA和蛋白的表达(P ＜0.05,P＜0.01),FZKA方从1.6 g·L-1开始以浓度依赖性下调PI3K蛋白表达(P ＜0.05,P＜0.01),从2h开始以时间依赖性上调p-Bad蛋白的表达(P＜0.05,P＜0.01).结论:FZKA方可通过上调PTEN来调控下游PI3 K/Akt/Bad通路相关蛋白的表达进而抑制A549的增殖,促进肺癌细胞凋亡.
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黄芩苷锌对改善缺血性视神经损伤中氧化应激反应及激活血源性因子修复血神经屏障的作用和机制
目的:探讨黄芩苷锌(HBZn)改善缺血性视神经损伤模型中氧化应激损伤及修复血神经屏障(BNB)的作用及机制.方法:单侧夹闭颈总动脉法建立小鼠视神经损伤模型,随机分为缺血损伤组、假手术组、黄芩苷锌组(3.75,6.5,13 mg·kg-1),黄芩苷组及葡萄糖酸锌(zinc gluconate)组.超微电镜观察视神经细胞线粒体的结构;比色法检测缺血损伤2h后各组小鼠血浆中超氧化物歧化酶(SOD),丙二醛(MDA),髓过氧化物酶(MPO)的变化.RNA实时荧光定量PCR检测基质金属蛋白酶(MMPs)/基质金属蛋白酶组织抑制因子(TIMPs)的mRNA表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)测定视神经组织中免疫球蛋白G(IgG)(缺血后12 h),纤维蛋白原(Fibrinogen,缺血后28 h),MMP-9(缺血后2d)蛋白表达水平.结果:黄芩苷锌(6.5 mg·kg-1)组能保护缺血导致的线粒体损伤,增强机体的抗氧化应激能力,激活SOD活性,降低MDA,MPO水平.能修复血神经屏障,IgG,Fibrinogen,MMP-9等血源性因子蛋白表达量增加,调节MMPs/TIMPs的平衡.结论:黄芩苷对缺血性视神经损伤有保护作用,作用明显优于单独用药的等摩尔浓度HB组和等摩尔浓度锌的葡萄糖酸锌组,其作用机制可能与保护线粒体,抑制小鼠视神经组织中血源性因子IgG,Fibrinogen,MMP-9的激活,抑制MMPs家族的表达,调节MMPs/TIMPs的平衡和异常沉积来修复血神经屏障有关,同时证明黄芩苷和锌的络合物增强了单体抗氧化应激和缺血性损伤的能力.
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栝楼桂枝颗粒激活Nrf2信号通路减轻脑缺血再灌注损伤大鼠氧化应激损伤作用
目的:探讨栝楼桂枝颗粒对脑缺血再灌注损伤大鼠氧化应激的保护作用及分子机制.方法:建立大鼠脑缺血再灌注损伤模型,栝楼桂枝颗粒灌胃给药后,核磁共振成像(magnetic resonance imaging,MRI)检测大鼠脑梗死面积,化学荧光法测定脑组织活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平,硫代巴比妥酸法(TBA)测定丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量,水溶性四唑蓝法(WST)测定超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性,紫外法测定过氧化氢酶(catalase,CAT)和比色法测定谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)活力;蛋白免疫印迹法(Western blot)和实时荧光定量PCR法(Real-time PCR)分别检测脑组织中核转录因子-E2相关因子2(NF-E2-related factor 2,Nrf2),细胞质中血红素加氧酶-1(heme oxygenase-1,HO-1),醌氧化还原酶1[NAD (P)H:quinone oxidoreductase 1,NQ01]及Kelch样ECH联合蛋白1(Kelch-like ECH-associated protein1,Keap1)的蛋白表达和mRNA相对含量.结果:栝楼桂枝颗粒能够明显减小大鼠脑梗死面积,减少ROS和MDA的产生(P＜0.01),增加SOD,CAT和GSH-Px活力(P＜0.01).此外,栝楼桂枝颗粒能够上调脑组织中Nrf2,HO-1,NQ01及Keap1的表达.结论:栝楼桂枝颗粒可能通过上调Nrf2信号通路,从而抑制脑缺血再灌注损伤引起的氧化应激反应.
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柯里拉京对肝癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响
目的:研究柯里拉京对转移性人肝癌细胞SMMC7721,MHCC97H增殖、迁移和侵袭的影响,并探讨其作用机制.方法:分别通过四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法,划痕实验,transwell实验检测不同浓度的柯里拉京对肝癌细胞SMMC7721,MHCC97H的增殖、迁移和侵袭的作用;通过细胞免疫荧光法观察不同浓度柯里拉京对肝癌细胞SMMC7721,MHCC97H肌动蛋白纤维的分布、丝状和片状伪足形成等的影响;通过蛋白免疫印迹法(Western blot)研究柯里拉京抑制肝癌细胞增殖、迁移、侵袭的作用机制.结果:MTT实验显示,柯里拉京抑制人肝癌细胞SMMC7721,MHCC97H增殖的半数抑制浓度(IC50)分别为388.67,314.42 μmol·L-1.划痕实验显示,200 μmol·L-柯里拉京对SMMC7721细胞迁移的抑制作用强,迁移率为12.16％;120 μmol·L-1柯里拉京对MHCC97H细胞迁移的抑制作用强,迁移率为9.84％.Transwell实验显示,200 μmol·L-柯里拉京对SMMC7721细胞和MHCC97H细胞侵袭的抑制作用强,侵袭的细胞数分别为(40.44±3.01),(36.69±3.36)个.细胞免疫荧光显示,柯里拉京可使SMCC7771,MHCC97H中F-肌动蛋白(F-actin)骨架发生重塑,浓度增高,细胞边缘的丝状伪足和片状伪足形成逐渐减少、张力纤维数目逐渐增多,这种影响在SMMC7721为200 μmol·L-1时显著,MHCC97H为120 μmol·L-1明显.Western blot显示,柯里拉京能明显下调肝癌细胞SMMC7721和MHCC97H上皮-间充质转分化(EMT)的钙黏附蛋白-N (N-Cad)和波形蛋白(Vimentin)蛋白表达(P＜0.05),下调有丝分裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路的磷酸化-细胞外信号调节激酶(p-ERK)蛋白表达(P＜0.05),上调磷酸化-p38(p-p38)蛋白表达(P＜0.05).结论:柯里拉京能抑制2种人肝癌细胞SMMC7721,MHCC97H的增殖、迁移及侵袭,其作用机制可能是通过抑制EMT通路中的N-Cad,Vimentin,MAPK信号通路p-ERK蛋白表达和上调p-p38蛋白表达,从而调控细胞骨架重塑来实现的.
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天麻素对糖氧剥夺再复供皮层神经细胞NF-κB炎症级联信号通路表达的影响
目的:研究天麻素对糖氧剥夺再复供损伤原代皮层神经细胞的保护作用,以及对炎症相关信号通路表达的影响.方法:构建皮层神经细胞糖氧剥夺再复供(OGD/R)损伤模型,随机分为空白组、模型组、天麻素(80,60,40 mg·L-1)组.噻唑蓝(MTT)比色法测定皮层细胞存活率,比色法测定乳酸脱氢酶(LDH)漏出率,高通量RNA-Seq测序分析技术检测处理细胞的所有基因转录本的表达差异,通过功能注释与富集分析筛选出与OGD/R损伤或天麻素预处理保护作用相关的基因分子与代谢通路.结果:OGD/R损伤后皮层细胞活性下降,LDH释放增加,而天麻素预处理能提高细胞存活率,并显著下调LDH漏出率,转录组测序分析发现其分子机制主要涉及核转录因子-κB(NF-κB,18 gene),肿瘤坏死因子(TNF,21 gene)等信号通路的抑制调控.与模型组比较,天麻素下调了NF-κB,Toll样受体2(TLR2),肿瘤坏死因子受体1/2(TNFR1/2),白细胞介素-6(IL-6),细胞间黏附分子-1(ICAM-1),干扰素诱导蛋白-10(IP-10),CC趋化因子2(CCL2),CXC趋化因子1/2/3(CXCL1/2/3),CXC趋化因子9(CXCL9/Mig)等多种炎症相关信号分子的转录表达.结论:天麻素对OGD/R损伤皮层神经细胞具有保护作用,其机制主要与抑制TLR-NF-κB-TNF炎症级联相关信号通路表达相关.
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狼毒大戟配伍大枣对诱导肝硬化大鼠的抵抗作用及机制
目的:研究狼毒大戟配伍大枣对肝硬化腹水大鼠模型的抵抗作用.方法:采用苯巴比妥联合四氯化碳(CCl4)法建立肝硬化腹水大鼠模型,将大鼠随机分为正常组、肝硬化腹水模型组、狼毒大戟组,狼毒大戟配伍大枣组,每组各10只.观测大鼠水代谢及苏木素-伊红(HE)染色观察肝组织病理变化,用免疫组织化学法测定Ⅰ型胶原(Collagen Ⅰ),Ⅲ型胶原(Collagen Ⅲ),纤维粘连蛋白(Fibronectin,FN),层粘连蛋白(Laminin,LN),结蛋白(Desmin)在肝组织中的表达.结果:与模型组比较,狼毒大戟组及狼毒大戟配伍大枣组大鼠24 h尿量明显增多(P＜0.01),腹腔积液显著减少(P＜0.01).给狼毒大戟配伍大枣组大鼠肝脏纤维间隔及变性程度较模型组有明显改善.免疫组化结果显示,肝硬化模型组及狼毒大戟治疗组,Ⅰ,Ⅲ型胶原及纤维连接蛋白的含量均显著高于正常组(P＜0.01),模型组LN和Desmin的含量显著高于正常组(P＜0.01),狼毒大戟配伍大枣组能显著降低LN和Desmin的积分吸光度IA.结论:狼毒大戟配伍大枣可明显改善肝硬化腹水大鼠肝硬化病理进程:增加尿量,促进腹水排泄,其作用机制可能与狼毒大戟配伍大枣对Collagen Ⅰ,Collagen Ⅲ,FN,LN,Desmin的调控有关.
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香椿果抗补体活性成分
目的:研究香椿果抗补体活性成分.方法:采用溶血法进行抗补体活性筛选,然后利用溶剂萃取和多种色谱技术分离纯化,以1H-NMR,13C-NMR波谱方法,结合文献数据,鉴定化合物结构.结果:香椿果提取物具有显著抗补体活性,经溶剂萃取,其中乙酸乙酯部位为活性部位,从中分离得到14个化合物,分别鉴定为没食子酸(1),没食子酸甲酯(2),6-O-没食子酰基-葡萄糖(3),1,2,3-三-O-没食子酰基-β-D-葡萄糖(4),1,2,6-三-O-没食子酰基β-D-葡萄糖(5),1,2,3,6-四-O-没食子酰基-β-D-葡萄糖(6),1,2,3,4,6-五-O-没食子酰基-β-D-葡萄糖(7),槲皮素-3-O-α-L-鼠李糖苷(8),芦丁(9),异鼠李素-3-O-β-半乳糖苷(10),槲皮素-3-O-β-半乳糖苷(11),山柰酚-3-O-β-D-葡萄糖苷(12),山柰酚-3-O-α-L-鼠李糖苷(13),槲皮素(14).其中化合物3 ～ 14为首次从香椿果中分离得到,化合物5,10,11为首次从香椿中分离得到.化合物4～7有显著抗补体活性,半数抑制浓度(IC50)分别为88.3,76.2,13.9,9.6 μmol·L-1.结论:香椿果活性部位为乙酸乙酯萃取部位,活性成分为其中没食子酰基葡萄糖苷衍生物和黄酮苷,前者抗补体活性显著强于后者,并且其抗补体活性随着与葡萄糖羟基相连接的没食子酰基数目的增加而增强.
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GC校正因子在黄樟醚、甲基丁香酚定量分析中的应用
目的:将GC校正因子应用于细辛中黄樟醚、甲基丁香酚定量分析.方法:首先采用Agilent 6890N气相色谱仪,FID检测器,DB-WAX毛细管柱(250 μm×30 m,0.25 μm),检测器温度250℃,进样口温度230℃,载气氮气,恒压模式,进样量1μL,流速1.0 mL·min-1,氢气流速45 mL·min-1,空气流速450 mL·min-1,尾吹氮气流速35 mL·min-1,温度条件(起始温度135℃保持2 min,以5℃·min-1升至160℃保持7 min,再以20℃·min-1升至220℃保持3 min);再通过不同测定及计算方法得多个GC校正因子值;后经稳定性、重复性、加样回收率试验验证可行性,筛选校正因子值应用于黄樟醚、甲基丁香酚的定量分析.结果:各校正因子值计算稳定性、重复性试验结果RSD均＜3％;黄樟醚平均加样回收率范围为92.96％～121.35％,RSD 3.4％ ～4.8％,甲基丁香酚为88.80％ ～ 112.54％,RSD 2.0％ ～ 3.4％;终获得应用于10批细辛中黄樟醚、甲基丁香酚定量分析.结论:2个GC校正因子值定量分析10批细辛中黄樟醚、甲基丁香酚结果相差不大,多个GC校正因子值的筛选应用有利于提高实验检测结果的准确性.
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鄂西香茶菜中4个二萜类成分的含量及其对细胞增殖的影响
目的:以冬凌草甲素,毛叶香茶菜素E,毛栲利素,香茶菜素B为指标,建立HPLC同时测定鄂西香茶菜中4个二萜的质量控制方法,并对4个成分进行体外抗肿瘤活性的评价.方法:采用YMC C18反相色谱柱(4.6 mm ×250 mm,5 μm),流动相乙腈-水(38∶62),流速1.0 mL·min-1,柱温30℃,检测波长230 nm;采用噻唑蓝(MTT)比色法测定了鄂西香茶菜中4个指标性成分对HCT-116,HepG2,BGC-823,MB-231,A2780细胞的增殖抑制作用.结果:冬凌草甲素,毛叶香茶菜素E,毛栲利素,香茶菜素B分别在0.085 6 ～0.856,0.014 04 ～0.140 4,0.070 8～0.708,0.018 98 ～0.189 8 g·L-1呈良好的线性关系,平均回收率分别为101.78％,101.70％,100.23％,104.60％.4个二萜均显示了一定的细胞增殖抑制作用,其中冬凌草甲素,毛栲利素对5种细胞株的增值抑制率均＞50％.冬凌草甲素、毛栲利素对5株肿瘤细胞株的细胞毒作用均优于毛叶香茶菜素E和香茶菜素B.半数抑制浓度(IC50)分别为4.10～6.46,2.34 ～ 4.77 μmol·L-1.结论:该方法简便,灵敏,重复性好,可用于鄂西香茶菜中主要细胞增殖抑制二萜的质量控制.
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当药HPLC特征图谱的探索
目的:建立当药高效液相色谱(HPLC)特征图谱的质量评价方法.方法:采用Waters 2695-2996型高效液相色谱仪,Dionex Ultimate 3000型高效液相色谱仪,Agilent-1260型高效液相色谱仪;资生堂CAPCELL PAK C18MGⅡ色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),波士顿Green ODS色谱柱(4.6 mm ×250 mm,5μm),菲罗门Gemini 5μC18 110A色谱柱(4.6 mm×250 mm),以甲醇-乙腈-0.05 mol·L-1磷酸二氢钠溶液(0.1％磷酸溶液调节pH至3.9)(15∶5∶80)为流动相,检测波长268 nm,流速1.0 mL·min-1.采用主成分相对保留时间比较分析法,对10批不同产地的当药HPLC特征图谱进行评价.结果:建立了当药的HPLC特征图谱,共标定了5个共有峰,10批当药共有峰的相对保留时间的RSD＜2.0％.结论:该研究建立的当药特征图谱特征性和专属性强,且方法快速、简便、可靠,可用于控制当药的质量.
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UPLC-MS/MS同时测定谷红注射液中7种有效成分
目的:建立同时测定谷红注射液中乙酰谷酰胺,羟基红花黄色素A,芦丁,紫丁香苷,山柰素,山柰酚,槲皮素含量的方法.方法:采用超高效液相色谱-串联质谱法.Phenomenex Kinetex C18色谱柱(2.1 mm ×50 mm,5μm),流动相乙腈-0.1％甲酸水溶液,梯度洗脱,流速0.5 mL·min-1;质谱采用正负离子同时监测,多反应监测模式(MRM),进样量5μL.结果:谷红注射液中乙酰谷酰胺,羟基红花黄色素A,芦丁,紫丁香苷,山柰素,山柰酚,槲皮素质量浓度线性范围分别在10.36～663.0,0.500 0 ～ 32.00,0.047 8 ～3.059,0.200 0 ～ 12.80,0.032 4 ～2.074,0.675 0 ～43.20,0.142 5 ～9.120 μg·L-1线性关系良好;平均加样回收率分别为97.0％ ～ 99.2％,RSD ＜3.4％ (n =6);7种成分在3批样品中的质量浓度依次为乙酰谷酰胺28.5 ～32.4 g·L-1,羟基红花黄色素A 1.02～1.23 g·L-1,芦丁14.3 ～ 17.6 mg·L-1,紫丁香苷101 ～ 123 mg·L-1,山柰素12.1 ～14.9 μg·L-1,山柰酚0.138 ～0.155 mg·L-1,槲皮素73.4 ～95.6μg·L-1.结论:该方法简、快速、高效、准确、可靠,适用于同时测定乙酰谷酰胺,羟基红花黄色素A,芦丁,紫丁香苷,山柰素,山柰酚,槲皮素7种有效成分,为该制剂建立更全面的质量控制方法提供依据.
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基于UPLC-Q-TOF-MS的砂糖橘皮化学成分分析
目的:通过超高效液相色谱串联-四级杆-飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS)联用技术对砂糖橘果皮化学成分进行快速分析和鉴定.方法:采用Aglient Zorbax Extend C18色谱柱(4.6 mm×50mm,1.8 μm),以0.1％甲酸水(A)-乙腈(B)为流动相,梯度洗脱进行色谱分离,流速0.6 mL·min-1,柱温35℃,进样体积0.5 μL.飞行时间质谱,采用电喷雾(ESI)离子源,在正离子模式下采集数据,质量扫描范围设置为m/z 100 ～1 000,运行时间24 min,使用质谱分析软件Peak view中的目标化合物筛查法,结合保留时间、精确相对分子质量和二级质谱裂解碎片鉴定和推测成分.结果:在所设定的LC-MS条件下,结合对照品及文献报道的质谱数据对砂糖橘果皮的甲醇提取液分析,共分离鉴定了31个成分,包括5个黄酮碳苷,6个黄酮氧苷,17个多甲氧基黄酮,1个生物碱和2个多酚类化合物.结论:研究中建立的检测方法简便、准确,为快速鉴定分析化学成分提供一种有效的分析方法,并比较全面地阐明了砂糖橘果皮化学组成,这为砂糖橘果皮成为供开发利用的柑橘资源提供科学依据.
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青石止痒软膏联合消风止痒汤加减治疗神经性皮炎的疗效评价
目的:观察青石止痒软膏联合消风止痒汤加减辨证治疗神经性皮炎的临床疗效,及对瘙痒介质和炎症因子的影响.方法:将160例患者随机按数字表法分为西医组和中医组各80例.西医组外用糠酸莫米松乳膏,均匀涂于患处,每天早晚各1次;口服氯雷他定片,10 mg/次,1次/d.中医组外用青石止痒软膏,将药物轻揉于患处,每天早晚各1次;内服消风止痒汤加减,1剂/d,两组疗程均为21 d.进行治疗前后瘙痒程度采用视觉模拟评分(VAS),皮损程度采用湿疹面积及严重度指数(EASI)评分,中医证候评分,生活质量采用皮肤病生活质量(DIQL)量表评价,检测治疗前后5-羟色胺(5-HT),组胺,P物质(SP),β-内啡肽(β-EP),白细胞介素-6(IL-6),IL-8和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平.结果:中医组临床疗效总有效率为95.95％,高于西医组的84.93％(x2=5.173,P＜0.05);中医组中医证候疗效总有效率为95.95％,高于西医组的78.08％(x2=10.419,P＜0.01);治疗后中医组患者的瘙痒VAS,EASI,中医证候和DIQL评分均低于西医组(P＜0.01);治疗后中医组5-HT,组胺,SP,β-EP水平均低于西医组(P＜0.01);治疗后中医组IL-6,IL-8和TNF-α水平均低于西医组(P＜0.01).结论:与西医常规治疗方案相比较,采用消风止痒汤加减内服联合青石止痒软膏外用治疗神经性皮炎能减轻患者瘙痒,改善皮损症状,降低中医证候评分,提高患者的生活质量,能调节引起瘙痒的化学介质和免疫炎症因子,临床疗效和中医证候疗效均优于西医常规疗法.
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宫瘤消胶囊对子宫内膜异位症气滞血瘀证血管生成机制的影响
目的:探讨宫瘤消胶囊治疗子宫内膜异位症(EMs)气滞血瘀证的临床疗效及对血管内皮生长因子(VEGF),基质金属蛋白酶(MMP),碱性成纤维细胞生长因子(bFGF),转化生长因子-β1(TGF-β1)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)等促血管生成因子水平的影响.方法:将128符合EMs气滞血瘀证患者,采用SAS软件生成的,随机按数字表法分为对照组和观察组各64例.两组患者均服用孕三烯酮胶囊,2.5 mg/次,2次/周,于月经第1天开始,每周固定时间服药.观察组加服宫瘤消胶囊,4粒/次,3次/d.两组疗程均连续治疗6个月经周期.经期疼痛情况采用视觉模拟评分(VAS)评分,进行治疗前后非月经期的盆腔痛、性交疼痛、盆腔压痛、骶韧带触痛结节和气滞血瘀证评分;检测治疗前后血清癌抗原125 (CA125),CA199,VEGF,MMP-2,MMP-9,bFGF,TGF-β1和TNF-α水平.结果:观察组临床总有效率为91.67％,高于对照组的76.27％(x2=5.255,P＜0.05);观察组在第4,5,6个月经周期VAS评分均低于对照组(P＜0.01);治疗后观察组非月经期的盆腔痛、性交疼痛、盆腔压痛、骶韧带触痛结节评分均低于对照组(P＜0.01),观察组气滞血瘀证评分低于对照组(P＜0.01);观察组患者血清CA125和CA199水平均低于对照组(P＜0.01);观察组患者血清VEGF,MMP-2,MMP-9,bFGF,TGF-β1和TNF-α水平均低于对照组(P＜0.01).结论:宫瘤消胶囊治疗子宫内膜异位症气滞血瘀证患者,能显著缓解患者的疼痛相关症状,提高临床疗效,并能降低VEGF等促血管生成因子水平,从不同靶点抑制新生血管的形成,起到控制病情的作用.
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参苓白术散对老年社区获得性肺炎肺脾气虚证患者血清炎症因子及免疫功能的影响
目的:探讨参苓白术散加减联合抗生素对老年社区获得性肺炎(community-acquired pneumonia,CAP)肺脾气虚证患者临床疗效、血清炎症因子及免疫功能的影响.方法:选取天津中医药大学第一附属医院2014年1月到2016年1月符合入选标准的老年CAP肺脾气虚证患者236例,按照随机数字表法分为对照组(118例)和治疗组(118例),对照组给予抗生素治疗,治疗组在对照组的基础上给予参苓白术散加减治疗,两组患者连续治疗10 d,观察并比较两组患者临床疗效、血清炎症介质、体液免疫指标和T淋巴细胞亚群水平变化情况.结果:治疗组临床总有效率和细菌清除率均高于对照组(P＜0.05);治疗组患者临床症状恢复时间低于对照组(P＜0.05);治疗后,治疗组患者血清白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6),肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-alpha,TNF-α),降钙素原(procalcitonin,PCT),C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)水平降低,且明显低于对照组(P＜0.05);治疗组治疗后血清免疫球蛋白A(immunoglobulin A,IgA),免疫球蛋白M(immunoglobulinM,IgM),CD4+和CD4+/CD8+水平上升,且治疗组高于对照组(P＜0.05);两组患者治疗后CD8+水平下降,且治疗组低于对照组(P＜0.05).结论:参苓白术散加减联合抗生素治疗老年CAP肺脾气虚证患者的临床效果显著,对于抑制机体炎症反应和增强机体免疫功能具有重要作用.
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通络灵酊剂联合中频导入治疗痰瘀互结型类风湿关节炎的临床观察
目的:观察通络灵酊剂中频导入治疗痰瘀互结型类风湿关节炎(RA)的临床疗效及作用机制.方法:按照随机数字表法将120例痰瘀互结型RA患者分为观察组和对照组,各60例.两组患者均按照指南进行关节功能锻炼,对照组中频导入利多卡因注射液,20 min/次,1次/d;观察组中频导入通络灵酊剂,20 min/次,1次/d.观察两组患者治疗前后关节肿胀数,关节压痛数,晨僵时间,双手平均握力;记录数字疼痛分级法(NPS)评分,健康调查问答(HAQ)评分,28个关节疾病活动度(DAS28)评分;检测两组患者治疗前后血清血管内皮生长因子(VEGF),白细胞介素-10 (IL-10),肿瘤坏死因子-α(TNF-α),骨碱性磷酸酶(BAP)水平;观察两组患者不良反应情况.结果:观察组临床疗效总有效率为88.33％,对照组临床疗效总有效率为71.67％,观察组优于对照组(x2=5.208,P＜0.05);治疗后观察组关节肿胀数,关节压痛数,晨僵时间均低于对照组(P＜0.01),双手平均握力高于对照组(P＜0.01);治疗后观察组NPS评分,HAQ评分,DAS28评分均低于对照组(P＜0.01);治疗后,观察组VEGF,TNF-α,BAP水平低于对照组(P＜0.01),观察组IL-10水平高于对照组(P＜0.01);两组患者治疗期间均无明显的不良反应发生.结论:在关节功能训练的基础上,通络灵酊剂中频导入治疗痰瘀互结型类风湿关节炎临床疗效显著并且安全,其作用机制可能与降低VEGF,TNF-α,BAP水平,提高IL-10水平有关.
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通便汤治疗老年泻药性便秘临床观察及对肠道菌群的影响
目的:观察通便汤对老年泻药性便秘(STC)的临床疗效,探讨其可能机制.方法:采用多中心、随机对照、双盲的研究方法,将92例老年STC患者随机分为治疗组(通便汤)和对照组(酪酸梭菌活菌散剂),其中治疗组47例,对照组45例,分别予以药物干预4周.观察两组治疗前后便秘临床症状积分、粪便性状评分以及临床有效率;采用主成分分析(PCA)-QOL评分评价两组患者的生活质量;检测粪便中短链脂肪酸和酪酸含量,并观察两组患者停药后4,8周复发情况及不良反应.结果:治疗组临床总有效率为91.4％,对照组为80.0％,治疗组优于对照组(P＜0.05);经通便汤干预后,治疗组可显著提升泻药性便秘患者粪便中短链脂肪酸和酪酸含量(P＜0.01),改善粪便性状积分、每次排便时间积分、排便时间间隔积分、排便困难积分及PAC-QOL评分(P＜0.05);停药4,8周时治疗组患者复发率均低于对照组,用药期间均无明显不良反应发生.结论:通便汤对老年泻药性便秘临床疗效显著,值得临床推广应用,其作用机制可能与提高便秘患者结肠中短链脂肪酸和酪酸的水平从而改善结肠动力有关.
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方剂药理研究的方法与思路
方剂是中医临床用药的主要形式、中医经验的载体,其配伍规、组方原则是中医药理论的精华.方剂药理研究是现代中医药研究的重点也是难点.由于病因、病机、中药药味及其组合方式的多样性,使得方剂的研究难度很大.结合现代科学技术对其加以研究对推进中医药理论现代化、科学化、创新发展具有重要意义.在运用现代药理学技术对方剂加以研究分析时应注重,坚持以中医理论为指导,结合运用现代系统论思想,采用现代科学手段,由简到繁,由宏观到微观,促使药理学与中医理论科学结合,从而全面揭示中药方剂防病治病的理论基础与作用机制.近年来对于方剂药理研究的方法主要集中在以下几个方面:全方研究、拆方研究、同类方剂对比研究、方剂剂型研究、煎服法研究、药代动力学研究.同时将方剂药理研究与生物化学、药物化学、分子生物学、中药血清药物化学、复方代谢组学、基因组学及蛋白质组学等现代科学技术相结合,有效的推进了方剂学发展.各种研究方法各有其适用范围及优势,但有时也存在一些不足,如中医整体观念、现代技术研究脱离中医理论存在局限性,整体与局部脱节,宏观与微观脱节,体内过程与活性评价脱节等,因此通过对以上实验研究方法加以探讨总结,明确中药方剂现代化研究的思路以期促进方剂研究更加合理有效的与现代科学技术相融合,避免局限性,促进方剂药理研究创新性发展.
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黑曲霉生物转化黄酮类成分研究进展
黄酮类化合物具有多种药理活性,包括抗炎、抗氧化、抗血栓、抗菌、抗病毒、降血脂等,而黑曲霉作为世界公认的安全食用性的低等真核生物而广泛应用于微生物转化,并在黄酮类成分生物转化中发挥着重要的作用.该文综述近15年来国内外关于黑曲霉生物转化黄酮类物质及其衍生物的研究进展,以期为黑曲霉的进一步开发应用提供参考.结果表明以黑曲霉为菌种转化黄酮类化合物的主要类型包括黄酮类、黄酮苷类、二氢黄酮类、查尔酮类、多甲氧基黄酮类、异黄酮类等,主要发生羟基化、脱羟基、甲基化、脱甲基、羰基化、脱羰基、糖基化、去糖基化等反应,转化机制可能是在黑曲霉产生丰富广泛酶系的参与下,发生酶促反应后产生相应转化产物.通过黑曲霉生物转化黄酮类成分研究进展,对黑曲霉应用到黄酮类成分转化的实际生产中提供理论指导,也为微生物高效转化具有药理活性的化学成分奠定理论基础和参考.
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辽东楤木叶总皂苷的HPLC及抗肿瘤作用谱效关系分析
目的:对辽东楤木叶总皂苷进行HPLC分析并确定不同的极性部位,利用C18反相硅胶(ODS)柱分离获得不同极性部位,比较不同部位的体外抗肿瘤作用效果.方法:辽东楤木叶经70％乙醇提取后通过AB-8型大孔树脂柱,获得总皂苷,用不同体积分数甲醇经ODS柱洗脱分离获得经HPLC确定的不同部位.利用噻唑蓝(MTT)比色法测试不同部位对人肺腺癌细胞株(A549),人宫颈癌细胞株(HeLa)和人结肠癌细胞株(HT-29)的体外生长抑制作用.结果:由总皂苷HPLC的保留时间确定了5个极性部位,分别为A(保留时间20 min以前的部位,ODS柱上0～25％甲醇洗脱组分),B(保留时间20～45 min,ODS柱上30％ ～45％甲醇洗脱组分),C(保留时间50～75 min,ODS柱上50％ ～ 65％甲醇洗脱组分),D(保留时间80 ～110 min,ODS柱上70％ ～75％甲醇洗脱组分)和E(保留时间＞110 min,ODS柱上80％ ～ 100％甲醇洗脱组分).5个部位给药48 h后对3种细胞的抑制作用明显不同,A部位对3种癌细胞均无抑制作用;B部位对3种癌细胞抑制作用微弱;C,D,E部位对3种癌细胞表现出较强的抑制作用,且明显强于总皂苷,佳的D部位对A549,Hella和HT-29抑制作用的半抑制浓度分别为4.06,4.29,3.60 mg·L-1.结论:辽东楤木叶总皂苷经HPLC分析后,利用ODS柱进行分离,可获得其抗肿瘤作用的有效部位及佳部位.
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七叶一枝花和滇重楼提取物的制备、表征及其体外溶血作用分析
目的:比较七叶一枝花和滇重楼提取物体外溶血作用强弱,探讨不同结构类型重楼皂苷的溶血作用特点.方法:采用75％乙醇对七叶一枝花和滇重楼根茎进行提取,采用大孔吸附树脂对各类物质进行富集,采用快速制备色谱技术对目标组分群进行定向制备,基于对照品对照和在线紫外吸收光谱对总取物、部位和组分进行化学信息表征,采用分光光度法测定各样品的溶血率.结果:根据质量浓度-溶血率曲线计算七叶一枝花和滇重楼总提物的50％溶血浓度分别为34.97,46.52 mg·L-1.在2.5 ～ 10 mg·L-1时,七叶一枝花部位中仅有70％乙醇洗脱部位(PPC-D)显示了较强溶血作用,滇重楼部位中70％乙醇和95％乙醇洗脱部位(PPY-D和PPY-E)均显示溶血作用.5.0,10 mg·L-1时PPC-D的溶血率分别为78.00％和95.68％,PPY-D (PPY-E)的溶血率分别为31.86％和63.29％(15.82％和55.25％).在2.5 ～5.0mg·L-1时,七叶一枝花的组分呋甾皂苷和薯蓣皂苷未显示溶血作用,偏诺皂苷组分在质量浓度为2.5,5.0 mg·L-1的溶血率分别为5.89％和90.33％;滇重楼的呋甾皂苷组分同样未显示溶血作用,偏诺皂苷(薯蓣皂苷)组分在质量浓度为2.5,5.0mg·L-1的溶血率分别为0.51％和57.75％(4.29％和49.39％).结论:七叶一枝花和滇重楼均具有溶血作用,其中七叶一枝花强于滇重楼;七叶一枝花溶血成分群主要为偏诺皂苷类,滇重楼溶血成分群为偏诺皂苷和薯蓣皂苷;两者呋甾皂苷均无溶血作用;总提物溶血作用强弱主要由其中所含偏诺皂苷和薯蓣皂苷类成分的绝对含量和相对比例来决定.
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黄芩苷-盐酸小檗碱复合物的溶解度与油水分配系数测定
目的:测定黄芩苷-盐酸小檗碱复合物的平衡溶解度与油水分配系数,为相关制剂研究奠定基础.方法:建立HPLC分别测定盐酸小檗碱和黄芩苷含量,PntulipsTM BP-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相乙腈-0.2％磷酸水溶液(30∶70),检测波长230 nm,流速1 mL·min-1,柱温30℃.采用摇瓶法测定黄芩苷-盐酸小檗碱复合物在水、不同pH介质中的平衡溶解度;测定该复合物在正辛醇-水中的浓度并计算油水分配系数.结果:在pH 6.8 ～8.0的介质中,复合物中黄芩苷和盐酸小檗碱的溶解度与原药相比分别降低了50,2倍左右;复合物中黄芩苷和盐酸小檗碱的油水分配系数分别为0.109和0.399,分别较原药提高了2.37,4.69倍.结论:黄芩苷-盐酸小檗碱复合物的溶解度和油水分配系数与原药存在差异,可能会影响药物的体内行为和口服给药后的胃肠道吸收情况.
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丹参素钠-PLGA缓释微球的制备及药剂学性能评价
目的:优选丹参素钠-聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)缓释微球的处方工艺并考察其药剂学性能.方法:采用W/O/O型乳化溶剂挥发法制备丹参素钠-PLGA微球,以载药量、包封率及收率为考察指标,通过单因素试验优选处方工艺,并考察其体外释药性能.采用激光粒度分析仪、扫描电子显微镜和X射线衍射法对该微球进行表征.结果:选取内水相体积300 μL,PLGA质量浓度125 g·L-1,二氯甲烷-丙酮(3∶7),外油相为液体石蜡200 mL,加入正己烷6 mL,0.25％司盘80为乳化剂,1 400 r·min-1搅拌4h.丹参素钠-PLGA微球平均载药量(20.71±1.42)％,平均包封率(63.27±1.70)％,平均收率(99.10±0.83)％,体外累积释放率达98％需要120 h.平均粒径(71.72±1.71) μm,表面圆整光滑,内部含有蜂窝状孔洞.部分药物可能以晶体状态分散于载体材料中.结论:W/O/O型乳化溶剂挥发法成功制备了丹参素钠-PLGA微球,优选的处方工艺稳定合理,可为丹参素钠制剂的开发提供参考.
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低真空度下冷冻干燥技术在中药鲜药保存方面的应用分析
目的:研究低真空度下冷冻干燥技术在中药鲜品保存方面的可行性.方法:以含热不稳定性成分的地黄和含挥发性成分的生姜为研究对象,分别对药材进行低真空度下冷冻干燥和鼓风干燥.以干燥后药材的外观、含水量、显微结构、指标性成分含量、复水性为指标,对比2种干燥方法的效果.结果:低真空度下冷冻干燥组药材的色泽鲜明、形态完好;鼓风干燥组药材的色泽暗黑、形态皱缩.低真空度下冷冻干燥组药材的含水量低于鼓风干燥组药材.低真空度下冷冻干燥和鼓风干燥都未破坏药材显微构造,低真空度下冷冻干燥组中梓醇和6-姜辣素的保留率均显著高于鼓风干燥组,而2种干燥技术对药材中挥发性成分含量的影响无太大差异.低真空度下冷冻干燥后的地黄药材在1h内吸水增重292％,吸水达到恒重时增重300％,其具有良好的吸水性,并且感官质量较高;而鼓风干燥后的地黄药材4h吸水增重220％,随后不再增重.结论:低真空度下冷冻干燥产品外观质量好,含水量低、显微结构完整、指标性成分保留率高、复水分性良好,是一种优良的干燥技术,在中药鲜品的保存中极具应用潜力.
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基于三维响应曲面模型分析当归-红花补血功效的配伍规律
目的:应用多指标综合指数法与三维响应曲面分析法研究当归-红花(GH)补血效应的配伍规律.方法:采用注射乙酰苯肼+环磷酰胺诱导的小鼠血虚模型,将实验动物分为正常组、模型组、当归-红花不同配比(1∶0,4∶1,2∶1,3∶2,1∶1,2∶3,1∶2,1∶4,0∶1)组,按剂量0.01 mL·g-1灌胃给药,连续7d,观察小鼠血常规和脏器指数(胸腺、脾脏)的变化,建立当归和红花配伍后的三维响应曲面模型.结果:单用当归剂量为7.8 g·kg-1·d-1时,补血效果好,总效应值5.50;单用红花剂量为0.52 g·kg-1·d-1时,补血效果好,总效应值4.57.当归和红花配伍后,当归剂量在0.5～ 1.2 g·kg-1·d-1和红花剂量在0～0.5 g·kg-1·d-1时,表现为协同作用,在大部分剂量配比范围内(约50％)表现为相加作用,其次为拮抗作用.结论:当归和红花配伍后补血效应的协同作用范围较窄,强度也不是很明显,并在一定量比时还有拮抗作用.
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UPLC-MS/MS分析瓜蒌子中3,29-二苯甲酰基栝楼仁三醇在大鼠体内的组织分布情况
目的:探讨瓜蒌子的有效成分3,29-二苯甲酰基栝楼仁三醇口服给药后在大鼠体内的组织分布情况.方法:取健康SD雄性大鼠,灌胃给药后分别于时间点0.5,1,3,6h取大鼠的胃、心、肝、脾、肺、肾组织,将组织匀浆及预处理.采用ZORBAX C18色谱柱(2.1 mm×50 mm,3.5 μm),流动相含0.1％甲酸的10 mmol·L-1乙酸铵溶液(A)-甲醇(B)梯度洗脱(0～0.01 min,50％ A;0.01 ～1.0 min,50％ ～ 2％A;1.0～4.0 min,2％A;4.0～4.1 min,2％～50％A;4.1～5.0 min,50％A),流速0.5 mL～min-1,进样量10 μL,选择电喷雾离子化三重四极杆串联质谱,以多反应监测(MRM)方式进行正离子模式检测,用于定量分析二级碎片离子分别为m/z 684.7 ～ 527.6(3,29-二苯甲酰基栝楼仁三醇)和m/z 472.4 ～ 436.4(特非那定).结果:大鼠灌胃给药3,29-二苯甲酰基栝楼仁三醇后,在肺组织中0.5h时药物质量分数达峰值,在心、肝、脾、肾中1.0h时药物质量分数达峰值,而胃中在3.0h时药物质量分数达峰值.胃和肺中药物分布较大,在胃中3.0h时药物质量分数达大值(405.8±114.8) ng·g-1;药物在肺中的分布速度快,0.5h时即可达到峰值(338.8 ±85.5) ng·g-1,在心、肝、脾和肾脏的分布较低,6h时各脏器的药物质量分数已显著降低.结论:大鼠灌胃给予3,29-二苯甲酰基栝楼仁三醇后,能分布到各脏器组织,其中在胃和肺分布的浓度较高,且在3h后仍能保持较高水平,而在心、肝、脾、肾分布浓度相对较低,这可能与该成分本身性质和作用特点有关.
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白头翁皂苷B4在正常大鼠和溃疡性结肠炎大鼠体内组织分布情况的比较
目的:建立大鼠体内白头翁皂苷B4的UPLC-ESI-MS/MS,比较白头翁皂苷B4在正常大鼠和溃疡性结肠炎大鼠肝、脾、肾、心、肺组织中的分布情况,为研究白头翁汤治疗溃疡性结肠炎的作用过程和机制提供参考.方法:雄性SD大鼠等分为正常组和模型组,均按5 g·kg-1灌胃给药白头翁汤冻干粉,分别于15,45,120,360 min用5％水合氯醛麻醉正常大鼠和模型大鼠,取肝、脾、肾、心、肺组织,采用UPLC-ESI-MS/MS分析,以0.1％甲酸水溶液和0.1％甲酸乙腈溶液为流动相进行梯度洗脱,ACQUITY BEH C18色谱柱(2.1 mm×50mm,1.7 μm),柱温35℃,流速0.4 mL·min-1.结果:白头翁皂苷B4在大鼠体内存在广泛分布与代谢.在正常大鼠的肝、脾、肾、心、肺组织中,白头翁皂苷B4均在120 min时达到大质量浓度.与正常组比较,在模型组大鼠肝、心组织中白头翁皂苷B4质量浓度各时间点均明显升高(P＜0.05);在脾和肾组织中,分别于45 min和120 min时明显升高(P＜0.05);在肺组织中,于120 min时显著增加(P＜0.05).结论:溃疡性结肠炎大鼠对白头翁皂苷B4的吸收和生物利用度均优于正常组,溃疡性结肠炎的病理状态可导致白头翁汤中白头翁皂苷B4的吸收增强.
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枸橘药材的本草考证及质量分析
目的:通过对枸橘药材的研究,分析枸橘药材药用历程和质量标准,为其质量评价提供科学依据.方法:通过查阅文献与实地调查,从名称、药用历史及地理分布3方面完成对枸橘药材的本草考证;运用薄层色谱法,HPLC对枸橘、枳实及枳壳中的辛弗林、柚皮苷、橙皮苷及新橙皮苷进行定性及定量分析.辛弗林参考2015年版《中国药典》中枳实的含量测定方法,柚皮苷、橙皮苷及新橙皮苷参考2015年版《中国药典》中枳壳的含量测定方法.结果:本草考证得知,枸橘在历史上早作枳实使用,宋朝时期枸橘果实不再作为枳实与枳壳的唯一正品来源,明清时期枸橘与枳实、枳壳明确区分开来,酸橙果实成为枳实与枳壳的正品来源至今;质量分析得到,枸橘中含有辛弗林、柚皮苷、橙皮苷及新橙皮苷,但含量较枳实、枳壳低,枳实、枳壳中指标性成分均符合2015年版《中国药典》标准.结论:枸橘药材曾作为枳实和枳壳的正品来源,该研究得出枸橘具有枳实和枳壳相同的指标成分,为开发新的药用资源提供了参考依据.
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基于“蛋白质相互作用网络-分子对接技术-体外实验”三维模式分析青黛对慢性粒细胞白血病的作用机制
目的:在慢性粒细胞白血病(CML)蛋白质相互作用网络构建与分子对接技术指导体外实验模式构建下,探讨青黛干预CML K562细胞的有效分子学机制.方法:使用在线人类孟德尔遗传数据库(OMIM)筛选CML相关基因,String 10.0用于进一步文本挖掘并构建CML可视化蛋白质相互作用网络,将互作数据读入Cytoscape 3.4.0,通过插件CentiScaPe 2.1实现网络拓扑分析;青黛活性小分子物质从第三方数据库获取,Chemoffice 8.0与Sybyl 8.1对其再构建、优化,得到青黛小分子配体结构库,通过Surflex-Dock模块与受体靶点进行分子对接,打分后得到关键靶标.随后针对其进行实验验证,通过噻唑蓝(MTT)比色法检测空白组(无药血清)与试验组(10％,20％和30％含药血清)在24,48,72 h时对K562细胞的增殖抑制率,利用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测两面神激酶(JAK)2蛋白的表达情况.结果:构建了由425个节点(蛋白质)和2 799条边(相互作用)组成的蛋白质相互作用网络,分析得出关键靶标JAK2.研究表明青黛能抑制K562细胞的增殖并能降低JAK2蛋白的表达.结论:CML是一个受多基因调控的复杂疾病,JAK2很可能是其关键节点,而青黛的有效成分靛玉红可通过降低JAK2的表达来干预K562细胞增殖.
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基于网络药理学的附子-干姜药对治疗心力衰竭的作用机制分析
目的:探讨附子-干姜药对治疗心力衰竭的作用机制.方法:本研究首先构建心力衰竭相关的蛋白互作网络,然后选取附子-干姜药对含有的24个活性成分,预测其作用靶点,进而构建附子-干姜药对活性成分-预测靶点网络、构建与心力衰竭相关的附子-干姜药对活性成分-潜在靶点网络、进行基于京都基因与基因组百科全书(KEGG)的生物通路富集分析,研究附子-干姜药对治疗心力衰竭的作用机制.结果:与心力衰竭相关的附子-干姜药对活性成分-潜在靶点网络包含23个靶点,关键靶点涉及碳酸酐酶2(CA2),11-β-羟基类固醇脱氢酶1(HSD11B1),基质溶素-1(MMP-3),肽基脯氨酰顺反异构酶FKBP1A(FKBP1A),磷酸二酯酶4D(PDE4D),热休克蛋白90α(HSP90AA1)等.KEGG通路7条,主要涉及肾素-血管紧张素系统(Renin-angiotensin system)等.结论:本研究结果初步验证和预测了附子-干姜药对治疗心力衰竭的作用机制,并为进一步深入揭示其作用机制奠定了良好基础.
| 年 | 期数 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 |
| 2017 | 01 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 |
| 2015 | 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 |
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