中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae 중국실험방제학잡지
- 主管单位： 国家中医药管理局
- 主办单位： 中国中医科学院中药研究所 中华中医药学会
- 影响因子： 1.62
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1005-9903
- 国内刊号： 11-3495/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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黄芩苷对幽门螺杆菌诱导人胃黏膜上皮GES-1细胞损伤的保护作用及机制
目的:探讨黄芩苷(baicalin)对幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)诱导人胃黏膜上皮GES-1细胞(human gastricepithelial GES-1 cells)损伤的保护作用及机制研究.方法:采用Hp感染GES-1细胞,加入baicalin(15,30,60 mg·L-1)和p38分裂原激活蛋白激酶(p38 mitogen-activated protein kinase,p38 MAPK)抑制剂SB203580 20 μmol·L-1共培养.噻唑蓝(MTT)比色法测细胞增殖、流式细胞术测细胞凋亡、酶联免疫吸附法(ELISA)测细胞白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)及IL-8水平、比色法测细胞乳酸脱氢酶(lactic dehydrogenase,LDH)活性、蛋白免疫印迹法(Western blot)测细胞B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)相关X蛋白(Bax),Bcl-2,p-p38 MAPK及total-p38 MAPK(T-p38 MAPK)蛋白表达.结果:与空白组比较,Hp可抑制GES-1细胞增殖,促进GES-1细胞凋亡,诱导GES-1细胞分泌IL-1β及IL-8并增加LDH活性,增加GES-1细胞内p-p38 MAPK,Bax蛋白表达并降低Bcl-2蛋白表达(P＜0.01);与Hp感染组比较,中、高浓度baicalin组可促进GES-1细胞增殖,减少GES-1细胞凋亡,减少GES-1细胞分泌IL-1β及IL-8水平并降低LDH活性,降低GES-1细胞内p-p38 MAPK,Bax蛋白表达并增加Bcl-2蛋白表达(P＜0.01);与高浓度baicalin组比较,SB203580可进一步促进GES-1细胞增殖,减少GES-1细胞凋亡,减少GES-1细胞分泌IL-1β及IL-8水平并降低LDH活性,降低GES-1细胞内p-p38 MAPK,Bax蛋白表达并增加Bcl-2蛋白表达(P ＜0.05,P＜0.01).结论:baicalin可通过抗炎、促增殖并抗凋亡减轻Hp诱导的GES-1细胞损伤,其机制可能与抑制p38 MAPK通路有关.
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松花粉对H2O2诱导HepG2细胞氧化损伤的保护作用
目的:探讨松花粉对过氧化氢(H2O2)诱导人肝癌HepG2细胞应激性氧化损伤的保护作用.方法:将HepG2细胞分为正常组,H2O2模型组和样品干预组.样品干预组用不同浓度的松花粉预处理HepG2细胞12 h,H2O2模型组和样品干预组用400 μmol·L-1过氧化氢氧化损伤细胞2h,产生氧化应激损伤.采用噻唑蓝(MTT)比色法检测HepG2细胞活力;微板法检测细胞内活性氧(ROS),超氧化物歧化酶(SOD),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,乳酸脱氢酶(LDH)及丙二醛(MDA)含量;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测抗氧化通路中关键基因核因子E2相关因子2(Nrf2),Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1(Keap1),谷氨酸半胱氨酸连接酶(GCL)和血红素氧合酶-1(HO-1)蛋白的表达水平,以评价松花粉对HepG2细胞氧化应激损伤的保护作用.结果:MTT结果显示,与正常组比较,松花粉(80,40,20,10,5 mg·L-1)对HepG2细胞没有毒性;H202模型组中ROS,LDH及MDA的水平显著升高(P＜0.01),SOD和GSH-Px的活性显著降低(P＜0.01).与H2O2模型组比较,松花粉干预组中ROS,LDH及MDA的水平显著降低(P ＜0.05,P＜0.01),SOD和GSH-Px的活性显著升高(P ＜0.05,P＜0.01).Western blot结果显示,松花粉显著上调Nrf2,HO-1和GCL的蛋白表达,并下调Keap1的蛋白表达.结论:质量浓度5～ 20 mg·L-1松花粉可有效保护400 μmol·L-1 H2O2对HepG2细胞应激性氧化损伤.其机制可能与调节SOD,GSH-Px活性,ROS,LDH,MDA水平有关,同时与调控抗氧化通路中关键基因Nrf2,Keap 1,HO-1,GCL蛋白的表达水平有关.
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补阳还五汤含药血清对骨髓间充质干细胞增殖及细胞周期的影响
目的:研究补阳还五汤含药血清对骨髓间充质干细胞(BMSCs)增殖及细胞周期的影响.方法:以6.5,13,26 g·kg-补阳还五汤和等量蒸馏水连续灌胃SD大鼠1周,制备3种补阳还五汤含药血清和空白血清.将BMSCs分为补阳还五汤6.5 g·kg-1组(用含10％ 6.5 g·kg-1生药制备的血清培养),补阳还五汤13 g·kg-1组(用含10％ 13 g·kg-1生药制备的血清培养),补阳还五汤26 g·kg-1组(用含10％ 26 g·kg-1生药制备的血清培养),空白组(用含10％空白血清培养).采用噻唑蓝(MTT)比色法检测各组BMSCs的增殖活性,流式细胞术检测细胞周期,蛋白免疫印迹(Western blot)法检测磷脂酰肌醇-3羟基激酶(PI3K)和磷酸化丝(苏)氨酸蛋白酶(p-Akt)(Ser473)蛋白的表达.结果:13,26 g·kg-1生药制备的补阳还五汤含药血清作用BMSCs 48,72 h后,细胞增殖活性较空白组明显升高(P＜0.05);3种补阳还五汤含药血清作用48 h后,BMSCs在S期的细胞比率随着药物浓度的升高而升高,与空白组比较有统计学意义(P ＜0.05);13,26 g·kg-1生药制备的补阳还五汤含药血清作用48 h后,PI3K和p-Akt(Ser473)蛋白表达较空白组显著增强(P＜0.01).结论:13,26 g·kg-1生药制备的补阳还五汤含药血清可能通过活化PI3 K/Akt信号通路促使细胞进入S期,增强BMSCs增殖活性.
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三七总皂苷对衰老大鼠肝脏内质网应激介导炎症反应的影响
目的:研究三七总皂苷(PNS)对自然衰老模型大鼠肝脏内质网应激相关因子葡萄糖调节蛋白78 (GRP78),磷酸化真核翻译起始因子2α (p-eIF2α),磷酸化PKR样内质网调节激酶(p-PERK)以及炎症相关因子磷酸化核转录因子-κB(p-NF-κB),肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-1β(IL-1β)调节作用,探索PNS对衰老大鼠肝脏内质网应激介导炎症反应的保护机制.方法:将50只SPF级SD大鼠随机10只1组,分为5组.分别为青年组(9月龄),自然衰老组(24月龄),PNS低、中、高剂量组.从18月龄起,PNS组大鼠按低、中、高剂量分别灌胃给予10,30,60 mg·kg-1的PNS,每周灌胃6日,停灌1日,直至24月龄.末次给药后禁食不禁水12 h,将老鼠处死,迅速取出肝脏,过液氮后置于-80℃冰箱保存.苏木素-伊红(HE)染色法观察不同组肝组织形态变化,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肝脏组织中内质网应激相关因子GRP78,p-eIF2α,p-PERK及炎症相关因子p-NF-κB,TNF-α,IL-1β的蛋白变化.结果:自然衰老大鼠肝脏与青年组相比内质网应激相关因子GRP78,p-eIF2α,p-PERK及炎症相关因子p-NF-κB,TNF-α,IL-1β蛋白含量有所上升(P＜0.01),低剂量PNS灌胃大鼠肝脏变化不明显,中、高剂量PNS显著降低衰老大鼠肝脏内质网应激相关因子及炎症相关因子的蛋白表达(P＜0.05,P＜0.01).结论:PNS有保护自然衰老大鼠肝脏内质网应激导致炎症的作用.
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连豆清脉颗粒对日本大耳白兔AS斑块的干预作用及对PARP-1的影响
目的:研究连豆清脉颗粒对日本大耳白兔动脉粥样硬化(AS)斑块的干预作用及多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶-1(poly adenosine diphosphate ribose polymerase-1,PARP-1)的影响.方法:取健康清洁级雄性日本大耳白兔40只,随机抽取8只日本大耳白兔为空白组,以标准饲料喂养.其余32只日本大耳白兔采用高脂饲料喂养及牛血清白蛋白静脉注射建立AS斑块模型,成功建模的兔按照随机数字表,随机分成高脂组11只(实验过程中死亡2只)、连豆清脉方组8只,辛伐他汀组8只,分别予以高脂、连豆清脉方药物、辛伐他汀药物饲料喂养,给药剂量为辛伐他汀1 mg·kg-1·d-1,连豆清脉方3.7 g·kg-1·d-1,8周后,检测兔AS斑块面积,PARP-1阳性表达及Toll样受体-4(Toll like receptor-4,TLR-4) mRNA,核转录因子-κB(nuclear factorkappa-B,NF-κB),血清白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)水平.结果:空白组没有出现AS斑块,连豆清脉方组AS斑块明显,但是明显低于高脂组;与空白组比较,连豆清脉方组主动脉AS斑块面积比例,组织PARP-1阳性细胞表达率,TLR-4 mRNA表达,NF-κB及IL-6水平均显著升高(P＜0.01).与高脂组比较,连豆清脉方组主动脉AS斑块面积比例,组织PARP-1阳性细胞表达率,TLR-4 mRNA表达,NF-κB及IL-6水平显著下降(P＜0.01).结论:连豆清脉方可抑制AS斑块的增生;其机制可能与抑制PARP-1表达等炎症反应有关.
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玉竹高异黄酮抑制人肺癌细胞A549增殖的作用及机制
目的:以人肺癌A549细胞为研究对象,探讨玉竹中提取的高异黄酮对A549细胞增殖的抑制作用及其作用机制.方法:从玉竹中提取高异黄酮,作用于肺癌细胞A549;噻唑蓝(MTT)比色法观察高异黄酮12.5,25,50,100 mg·L-1作用于A549细胞6,12,24 h对细胞存活率的影响.通过流式细胞仪检测细胞凋亡及周期变化,并通过蛋白免疫印迹法(Westernblot)分析与细胞凋亡相关半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3),B细胞淋巴瘤(白血病)-2(Bcl-2),Bcl-2对抗杀伤性蛋白(Bak)和与细胞周期相关的磷酸化周期素依赖激酶2(p-Cdc 2),细胞周期蛋白依赖性激酶2(Cdc 2)及p38蛋白表达.结果:与空白组比较,高异黄酮呈剂量和时间依赖性抑制A549细胞的增殖(P＜0.05,P＜0.01),高异黄酮对A549细胞处理12 h后,细胞周期阻滞于G2/M期(P＜0.05);与空白组比较,25,50,100 mg·L-1高异黄酮可显著促进凋亡蛋白Caspase-3和Bak表达,抑制Bcl-2表达(P＜0.01),可显著促进细胞周期蛋白p-Cdc 2和p38表达,抑制Cdc 2表达(P＜0.01).结论:玉竹中提取的高异黄酮对A549细胞增殖具有抑制作用,能使A549细胞阻滞于细胞周期G2/M期,其机制与线粒体介导的细胞凋亡和p38 MAPK通路相关.
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鳖甲提取物对抑制TGF-β诱导的大鼠肝星状细胞活化的影响
目的:研究鳖甲提取物相对分子质量＜6 kDa肽段(P6)对转化生长因子]β(transforming growth factor-β,TGF-β)诱导的大鼠肝星状细胞HSC-T6的活化增殖与肝纤维化(hepatic fibrosis,HF)相关基因表达的影响,初步探究其抗肝纤维化的作用机制.方法:应用透析法得到P6;细胞增殖与活性检测(CCK8)法检测P6对HSC-T6细胞增殖的影响;实时荧光定量聚合酶反应(Real-time PCR)检测HSC-T6细胞内α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA),Ⅰ型胶原(collagen type Ⅰ,ColI),基质金属蛋白酶抑制因子-1(tissue inhibitor of metalloproteinase-1,TIMP-1)以及基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)的mRNA表达水平;蛋白免疫印迹法(Western blot)分析HSC-T6细胞内α-SMA与Col Ⅰ蛋白的表达.结果:与空白组比较,P6对HSC-T6细胞存活率无明显影响,但却能显著抑制TGF-β诱导的HSC-T6细胞的增殖(P＜0.05).与TGF-β组比较,P6各浓度均能显著降低HSC-T6细胞中α-SMA,Col Ⅰ,TIMP-1 mRNA的表达,增加MMP-2 mRNA的表达(P ＜0.05,P＜0.01),明显降低α-SMA与Col Ⅰ蛋白的表达.结论:P6能抑制TGF-β诱导的HSC-T6细胞的活化增殖,减少细胞外基质(extracellular matrix,ECM)生成,促进其降解,发挥抗肝纤维化作用.
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两色金鸡菊提取物对大鼠肾小球系膜细胞增殖及纤维化因子表达的影响
目的:本研究通过高糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞建立糖尿病肾病的体外模型,观察两色金鸡菊乙酸乙酯提取物(ethyl acetate extract of Coreopsis tinctoria,AC)对模型中细胞增殖及纤维化因子表达的影响.方法:采用AC对高糖诱导大鼠肾小球系膜细胞进行干预,将细胞分为正常组,模组组,AC不同质量浓度(25,50,100,150 mg·L-1)组.采用噻唑蓝(MTT)比色法,细胞增殖与活性检测(CCK8)法检测AC不同质量浓度对高糖诱导大鼠肾小球系膜细胞增殖的抑制作用;采用实时荧光定量PCR(Real-time PCR),蛋白免疫印迹法(Western blot)进一步观察AC不同质量浓度对肾脏纤维化蛋白转化生长因子-β1(TGF-β1),胶原蛋白Ⅳ(Collagen Ⅳ),纤维连接蛋白(FN)表达的影响.结果:AC 50,100,150 mg·L-1组均能抑制高糖诱导大鼠肾小球系膜细胞的增殖(P＜0.01);AC 25,100,150 mg·L-1质量浓度组显著降低细胞中TGF-β1的mRNA与蛋白表达水平(P＜0.01);AC 100,150 mg·L-1质量浓度组显著抑制细胞中CollagenⅣmRNA与蛋白的表达水平(P ＜0.01);AC 50,100,150 mg·L-1质量浓度组显著抑制细胞中FN mRNA与蛋白的表达水平(P＜0.01).结论:两色金鸡菊乙酸乙酯提取物可能通过抑制大鼠肾小球系膜细胞增殖及纤维化因子表达发挥其对糖尿病肾病肾脏保护作用.
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坤泰胶囊化学成分的LC-ESI-MS/MS分析
目的:建立坤泰胶囊中化学成分的高效液相色谱-电喷雾质谱联用技术(HPLC-ESI-MS/MS)并对其化学成分进行初步鉴定.方法:采用LC-ESI-MS/MS对坤泰胶囊进行成分分析与鉴定,选用C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm),以乙腈-0.1％甲酸水溶液为流动相梯度洗脱,流速1.0 mL·min-,柱温30℃.质谱使用电喷雾(ESI)离子源,正离子模式采集数据.质量扫描范围为m/z 50～1 500.对各色谱峰质谱图进行分析,根据准分子离子峰判断相对分子质量,进一步根据各主要碎片离子、紫外光谱、保留时间等信息,与文献数据进行比较推测化合物的结构.结果:从坤泰胶囊中鉴定了21个化合物,主要为黄酮类化合物和生物碱类化合物,并对化合物的药材来源进行了归属.其中,主要有来自黄芩的黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素等,来自黄连的巴马汀、小檗碱、黄连碱、药根碱、非洲防己碱、木兰花碱等,来自白芍的芍药苷等.结论:采用LC-ESI-MS/MS能够对坤泰胶囊中主要成分进行快速分析与鉴定,为坤泰胶囊进一步开展指纹图谱、质量控制、药物代谢研究和谱效关系研究奠定了基础.
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基于静电场轨道阱质谱技术对绞股蓝总皂苷提取物化学成分的分析
目的:通过UPLC-ESI-Orbitrap-MS技术对绞股蓝总皂苷提取物的主要化学成分进行分析.方法:采用Thermo QExactive四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱-色谱联用系统分析,以Hypersil Gold C18色谱柱(2.1 mm×150mm,1.9 μm)为固定相,流动相0.1％甲酸水溶液(A)-乙腈(B)梯度洗脱(0 ～2 min,5％ B;2 ～ 15 min,5％ ～95％ B;15 ～17 min,95％ B),流速0.3 mL·min-1,柱温40℃;质谱条件采用电喷雾离子化(ESI)方式,在负离子模式下,以Full Scan/Targeted-ddMS2扫描模式检测,研究绞股蓝总皂苷提取物的主要皂苷类化学成分.结果:通过与对照品比对、结合参考文献,分析多级质谱数据,根据化学成分的质谱碎片,推测色谱峰对应的化学结构,共归属8种具有原人参二醇型母核结构的绞股蓝皂苷,分别是绞股蓝皂苷Ⅲ,Ⅳ,Ⅷ,Ⅻ,Rg3,Rb2,Rc,Rf.结论:该研究采用的方法简单、快速、灵敏,对绞股蓝总皂苷提取物中具有原人参二醇型母核结构的主要皂苷类进行了高分辨质谱分析,这一方法可以从定性分析的角度,对市售绞股蓝总皂苷提取物的质量进行初步快速鉴别.
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沼生忍冬藤化学成分及3种成分的含量测定
目的:研究沼生忍冬藤的化学成分并建立HPLC同时测定沼生忍冬不同药用部位中绿原酸,3,5二咖啡酰奎宁酸和4,5二咖啡酰奎宁酸含量的方法.方法:采用硅胶、反相硅胶、大孔树脂和LH-20羟丙基葡聚糖凝胶等多种色谱技术进行分离纯化,并通过理化性质及波谱数据鉴定化合物的结构.采用HPLC-UV法测定含量,色谱条件:Phenomenex C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相乙腈(A)-0.2％磷酸水溶液(B)梯度洗脱(0 ～ 13 min,12％ A;13 ～ 25 min,12％ ～ 22％A;25 ～ 45 min,22％ A),流速1.0 mL·min-1,检测波长327 nm,柱温30℃,进样量10 μL.结果:从沼生忍冬藤中分离得到10个化合物,分别鉴定为:3,7-二甲基槲皮素(1),3,3'-二甲基槲皮素(2),槲皮素(3),乌苏酸(4),马钱子苷(5),绿原酸(6),槲皮素5-O-β-D-葡萄糖苷(7),3,4-二咖啡酰奎宁酸(8),3,5-二咖啡酰奎宁酸(9)和4,5-二咖啡酰奎宁酸(10).6,9和10三种成分均能达到基线分离,且线性关系良好,平均加样回收率分别为100.15％,99.68％和99.52％.沼生忍冬中3种成分的含量为花高(3.99％,1.77％,2.33％),叶次之(2.62％,1.73％,0.90％),藤低(0.74％,0.25％,0.15％).结论:化合物1,2和7为首次从忍冬属植物中分离得到,其余化合物均为首次从该植物中分离得到;含量测定方法准确,简便,分离效果好,可用于沼生忍冬中绿原酸,3,5二咖啡酰奎宁酸和4,5二咖啡酰奎宁酸含量的测定.
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基于XRD,NIR及拉曼光谱技术快速鉴别白矾、枯矾真伪
目的:分析白矾、枯矾及其伪品的X射线衍射(X-ray diffraction,XRD),拉曼和近红外(Near Infrared,NIR)光谱特征与差异,建立快速鉴别白矾、枯矾和常见伪品的新方法.方法:从不同药材市场购得白矾9批,枯矾5批,自制枯矾2批.采集以上样品的XRD,NIR和拉曼光谱,归纳其光谱特征,分析光谱明显差异.结果:明矾和其伪品铵明矾的XRD,NIR及拉曼光谱具有明显差异.在XRD图谱中,铵明矾在2θ=14.56°处有1小峰,正品白矾没有此峰;在NIR光谱中,铵明矾在4 650 cm-1处有1特征峰,而正品白矾无此峰;在拉曼光谱中,正品白矾在990 cm-1处的强峰发生分裂,974 cm-处产生1中等强度尖峰,而铵明矾无974 cm-峰,以上差异可用于二者快速鉴别.此外,正品枯矾XRD图谱具有9个明显特征峰(2θ=11.18°,21.88°,24.58°,31.42°,33.76°,38.25°,39.94°,50.24°,50.99°),NIR光谱在7 000 cm-和5 150 cm-1处有2个较为平缓的吸收峰,可作为鉴别枯矾真伪的特征峰.结论:XRD,NIR和拉曼光谱特征可共同用于白矾、枯矾及其伪品的准确鉴别;NIR结合拉曼光谱技术能够为白矾及其炮制品的质控和快检提供快速准确的新方法.
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沉香化气丸的UPLC指纹图谱与化学模式识别
目的:建立沉香化气丸的超高效液相色谱(UPLC)指纹图谱,为评价该制剂的整体质量提供参考依据.方法:采用Phenomenex Kinetex C18色谱柱(4.6 mm×100 mm,2.7 μm),流动相乙腈(A)-0.1％磷酸水溶液(B)梯度洗脱(0～7 min,12％～16％ A;7～14 min,16％ ～ 19％ A;14～16 min,19％ ～25％ A;16 ～ 19 min,25％ ～ 28％ A;19～22 min,28％ ～42％ A;22～27 min,42％～46％A;27～33 min,46％ ～48％A;33～37 min,48％ ～72％A;37～39 min,72％ ～90％A;39～42 min,90％ A),分段变波长测定(0～3 min,285 nm;3～ 20 min,210 nm;20 ～ 24 min,254 nm;24 ～ 42 min,210 nm),进样量2μL,流速调整至0.8 mL·min-1;根据相似度评价,结合化学计量学方法对沉香化气丸进行质量评价.结果:建立了20批沉香化气丸的UPLC指纹图谱,标定了27个共有峰,通过对照品指认了12个共有峰,20批样品指纹图谱的相似度均＞0.98.通过聚类分析可将样品聚为3类,结合主成分分析、正交偏小二乘法-判别分析发现7个成分是造成不同批次样品差异性的主要标记物.结论:指纹图谱的构建与化学模式识别可为沉香化气丸的质量控制提供更为全面的信息参考.建立的UPLC指纹图谱方法稳定可行.
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香瓜茄的化学成分分析
目的:对茄科Solanaceae植物甘肃武威香瓜茄Solanum muicatum成熟果实的化学成分进行分离纯化研究,并对分离得到的化合物进行化学成分鉴定.方法:采用95％的乙醇对香瓜茄干果进行加热提取,并依次用石油醚,乙酸乙酯,正丁醇进行萃取,然后采用薄层色谱法,正相硅胶柱色谱法,LH-20羟丙基葡聚糖凝胶色谱法和制备高效液相色谱法等方法对香瓜茄95％乙醇提取物的乙酸乙酯萃取部位进行分离纯化,并依据化合物的理化性质并通过核磁共振、质谱等现代波谱技术对化合物的化学结构进行鉴定.结果:终从香瓜茄中分离纯化得到7个化合物,其中3个生物碱皂苷类化合物,2个黄酮类化合物及2个有机酸类化合物,分别鉴定为澳洲茄碱(solasonine 1),澳洲茄边碱(solamargine 2),澳洲茄胺(solasodine 3),槲皮素(quercetin 4),柚皮素(naringenin 5),阿魏酸(ferulic acid 6),熊果酸(ursone 7).结论:以上7种化合物均为首次从该植物果实中分离纯化得到,该研究为综合开发及寻找天然植物性抗炎、抗肿瘤活性物质提供一定的化学依据和基础.
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参附养荣汤加味对病毒性心肌炎慢性期阴阳两虚证炎症因子的影响
目的:探讨参附养荣汤加昧治疗病毒性心肌炎(VMC)慢性期的疗效及对患者血清中白细胞介素(IL)-17,IL-27,IL-6,IL-9和核转录因子(NF)-κB水平的影响.方法:将140例VMC患者随机按数字表法分为对照组和观察组各70例.对照组给予西医综合干预措施.观察组在对照组治疗的基础上给予参附养荣汤加味,1剂/d,早晚2次内服;两组患者连续治疗8周.比较两组患者阴阳两虚证症状评分、血清中心型游离脂肪酸结合蛋白(H-FABP)和肌钙蛋白I(cTnI)水平、总体疗效及不良反应发生.检测两组患者血清中IL-17,IL-27,IL-6,IL-9和NF-κB水平.结果:治疗后观察组阴阳两虚证症状(心悸、气短、肢冷畏寒、烦躁、喘促、汗多、浮肿)评分、血清中H-FABP和cTnI水平均明显低于对照组(P＜0.01);观察组的临床总有效率为91.18％,明显高于对照组76.12％ (P ＜0.05);观察组患者的头痛等不良反应发生率均少于对照组,其中恶心呕吐和腹泻明显少于对照组(P＜0.05);观察组治疗后血清中IL-17,IL-6,IL-9和NF-κB水平均明显低于对照组,IL-27高于对照组(P＜0.01).结论:在西医常规治疗的基础上,参附养荣汤加昧对VMC慢性期患者发挥了良好疗效,且安全性好,调节血清IL-17,IL-27,IL-6,IL-9和NF-κB水平变化可能是其作用机制之一.
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运脾逐湿汤治疗湿热困脾型高血压代谢综合征
目的:探讨运脾逐湿汤治疗湿热困脾型代谢综合征(MS)高血压患者的疗效及对血清中脂联素(ADP),高敏C反应蛋白(hs-CRP),同型半胱氨酸(HCY),内皮素(ET)和血管性血友病因子(vWF)水平的影响.方法:本研究将纳入的MS高血压患者118例随机分为对照组和治疗组各59例.对照组口服替米沙坦片,40 mg/次,1次/d.治疗组在对照组治疗的基础上给予运脾逐湿汤内服,1剂/d,分早晚2次服用.两组连续治疗3个月.比较两组血压变异性、形体学指标、血脂水平和血糖相关指标.检测两组患者血清中ADP,hs-CRP,HCY,ET和vWF水平.结果:治疗后,两组患者治疗后24 h舒张压标准差(24 hDSD),夜间舒张压标准差(nDSD),白天收缩压标准差(dSSD)及白天舒张压标准差(dDSD)均比治疗前明显下降(P＜0.01),但两组间比较差异无统计学意义.治疗后治疗组患者的形态学指标、血脂水平和血糖水平均明显下降,且均明显低于对照组(P＜0.01).治疗组治疗后血清中ADP明显高于对照组,hs-CRP,HCY,ET和vWF水平明显低于对照组,比较差异有统计学意义(P＜0.01).结论:在西医治疗的基础上,加服运脾逐湿汤治疗湿热困脾型MS高血压疗效明显,且可提高患者血清中ADP水平和降低hs-CRP,HCY,ET和vWF水平.
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益髓补肾方改善恶性淋巴瘤化疗患者相关性贫血及对免疫功能的影响
目的:探讨益髓补肾方改善恶性淋巴瘤化疗患者相关性贫血临床疗效,观察其对免疫功能的影响.方法:选取河北省中医院血液病科2010年1月-2015年12月收治的恶性淋巴瘤化疗相关性贫血患者110例,按随机数字表法分为对照组和治疗组,各55例,对照组常规化疗;治疗组在常规化疗基础上予以益髓补肾方(1剂/d)口服治疗,治疗15 d为1疗程,共治疗2个疗程.两组采血测定血常规,记录生活质量,同时比较临床疗效及并发症.结果:对照组总有效率为69.09％,治疗组有效率为89.09％,治疗组优于对照组(P＜0.05);与治疗前比较,两组治疗后血红蛋白(Hb),血细胞比容(Hct),红细胞计数(RBC)含量升高(P＜0.05),促红细胞生成素(EPO)含量降低(P＜0.05);治疗后躯体、角色、社会、情绪等指标评分升高(P＜0.05);治疗后与对照组比较,治疗组治疗后Hb,Hct,RBC含量较高,EPO含量降低,治疗后躯体、角色、社会、情绪等评分升高(P＜0.05);治疗组T淋巴细胞亚群CD3+,CD4+,CD4 +/CD8+水平升高,CD8+细胞水平下降(P＜0.05);对照组不良反应发生率为12.73％,治疗组不良反应发生率为7.27％,治疗组低于对照组(P＜0.05).结论:益髓补肾方治疗恶性淋巴瘤化疗相关性贫血疗效确切,可提高生活质量及患者免疫功能,具有较好的增效减毒作用.
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醒脑静注射液治疗急性脑出血患者临床疗效及对血清炎症因子、氧化应激的影响
目的:观察醒脑静注射液治疗急性脑出血的临床疗效,探讨其对患者血清炎症因子、氧化应激指标的影响.方法:选取本院2015年1月-2016年1月收治的108例急性脑出血患者作为研究对象,采取随机数字表将其分成两组患者,每组54例.两组患者均给予常规治疗,观察组联合给予醒脑静注射液治疗,比较两组患者临床疗效及治疗前后血清炎症因子、氧化应激指标水平变化情况.结果:治疗后,观察组总有效率为96.30％,较对照组(85.19％)明显上升(P＜0.05).与治疗前比较,两组患者治疗后美国国立卫生院卒中量表(NIHSS)评分明显下降,格拉斯哥昏迷量表(GCS)评分明显升高(P＜0.05),观察组改善效果明显优于对照组(P＜0.05).与治疗前比较,两组患者治疗后血清白细胞介素-6(IL-6),高敏C反应蛋白(hs-CRP),肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平明显下降(P＜0.05),治疗后观察组血清IL-6,hs-CRP,TNF-α水平均明显低于对照组(P＜0.05).与治疗前比较,两组患者治疗后血清丙二醛(MDA)水平明显下降,超氧歧化酶(SOD)水乎明显上升(P＜0.05),观察组改善更明显(P＜0.05).治疗后,与治疗前比较,两组患者中医证候积分均明显改善(P＜0.05);观察组中医证候积分低于对照组(P＜0.05).两组患者不良反应比较,差异无统计学意义.结论:醒脑静注射液治疗急性脑出血能有效缓解机体内炎症反应及氧化应激反应,减轻神经功能缺损,改善意识状态,疗效确切.
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中药治疗阴道病研究进展
阴道病又名阴道炎症,是妇科门诊多见和频繁发生的病症,具体指阴道黏膜及黏膜下相关组织的炎症.细菌性阴道病(bacterial vaginosis,BV)和假丝酵母菌性阴道病(candidal vaginitis,CV)是2种常见的阴道疾病,对女性的日常生活和学习造成了极大的影响.目前,对于BV和CV的治疗方法有了一定的改进和提升,从原来的西药或者抗生素治疗变为如今的完全中药方剂及中西药结合方剂治疗,并且在预防BV和CV方面也有了不错的发展.与西药或抗生素相比,中药可辨证论治,疗效稳定且较好、副作用极少,患者易接受.恢复正常的阴道微生物生态环境是治愈阴道病的根本,中药对阴道病的治疗恰好从这个目的出发,但可用于治疗BV和CV的中药材种类繁多且治疗机制复杂,本文通过查阅近年来的权威数据库中中英文文献,对BV和CV的发病机制、用于治疗BV和CV的常见中药以及中药治疗BV和CV的治疗机制进行阐述,以期为反复发作的BV和CV的治疗和新药研发提供新的思路.文章总结了BV的3种发病机制和CV发病机制的5个过程.通过统计,能够治疗BV的主要中药有123种,能够治疗CV的主要中药有133种,能够治疗这两种病的主要中药有84种,且治疗BV和CV的主要药用成分有生物碱、苷类、酚类、挥发油、绿原酸、黄酮类、色素、香豆素等.中药治疗BV和CV的机制:体外抑菌实验、其他抗菌药物渗透率增加、细胞内溶物外漏、机体免疫力提高、中西医结合治疗.文章后对中药治疗BV和CV过程中存在的问题提出了相应的可行性建议.
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中药联合干细胞疗法治疗缺血性脑卒中的研究进展
脑卒中是全球致死和致残的主要疾病之一,其中缺血性脑卒中是常见的卒中类型.近年来,随着再生医学领域的发展,国内外对于细胞疗法的研究不断深入.研究证实,干细胞疗法,包括激活内源性神经干细胞和外源性干细胞移植,可以促进内源性神经和血管再生,修复神经损伤,从而改善神经功能,在缺血性脑卒中治疗领域具有广阔的应用前景.然而,该疗法存在细胞存活、迁移及分化率较低的问题,目前尚无有效解决方案.中医药治疗中风已有数千年历史,积累了丰富的临床经验,传统中药用于治疗缺血性脑损伤的疗效已得到肯定.近年来又有研究发现,中药对体内外多种干细胞的增殖、分化等生理活动有促进作用,中药联合干细胞疗法已用于多种疾病的治疗.进一步的研究发现,中药可激活缺血损伤脑组织内源性神经干细胞,促进神经自我修复,并对移植干细胞在体内的一系列生物活动有协同作用.笔者对近几年缺血性脑卒中治疗的研究进行整理、归纳、总结,从干细胞疗法角度对中药复方、单昧药以及有效成分在缺血性脑卒中方面的研究进展进行综述,以期为中医药的研究提供新思路,并为中药的进一步深入开发应用提供参考.
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2015年版《中国药典》新增药用辅料滑石粉的研究现状
滑石粉作为2015年版《中国药典》的新增药用辅料,已被广泛应用于现代制剂.通过查阅国内外文献,对滑石粉在制剂中的应用情况进行分析,具体包括用作分散剂、崩解剂、润滑剂、抗黏剂、包粉衣层、助滤剂、提高药物临界相对湿度以及抑制或促进药物释放等.与此同时,总结了滑石粉在目前应用过程中存在的问题,例如滑石粉对主药晶型的影响、中成药中使用滑石粉作为辅料的争议性、滑石粉与卵巢癌的相关性.在此过程中发现滑石粉作为药用辅料具有优良的应用前景,为滑石粉的后期研究与应用提供理论支持.
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黄连饮片标准汤剂的制备及质量标准分析
目的:制备黄连饮片标准汤剂并建立其质量标准,为黄连配方颗粒的制备及其质量标准的建立提供参考.方法:根据中药饮片标准汤剂制备原则制备黄连饮片标准汤剂,计算表小檗碱、盐酸黄连碱、盐酸巴马汀和盐酸小檗碱的转移率和饮片出膏率,建立黄连饮片标准汤剂的质量标准.流动相乙腈-0.05 mol·L-磷酸二氢钾溶液(50:50)(每100 mL中加十二烷基硫酸钠0.4g,以磷酸调节pH 3.0),柱温30℃,流速1 mL· min-,检测波长225 nm.结果:黄连饮片中表小檗碱、盐酸黄连碱、盐酸巴马汀和盐酸小檗碱的转移率范围分别为79.3％～111.9％,54.6％ ～76.2％,45.7％ ～70.7％和43.5％ ～64.4％,出膏率范围17.1％ ～22.3％,14批黄连饮片标准汤剂特征图谱中有7个共有峰,其相似度均＞0.999.结论:该研究建立的质量评价方法精密度和重复性良好,指纹图谱相似度高,适用于黄连饮片标准汤剂的质量评价.
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不同方法炮制的熟地黄的补血作用比较
目的:比较不同方法加工炮制的熟地黄饮片的补血作用.方法:采用环磷酰胺和盐酸苯肼结合法进行血虚模型的建立,分别设立空白组、模型组、阿胶补血口服液组、传统酒炖组和产地加工饮片炮制一体化组,每组给药体积均为0.02 mL·g-1,后三者的给药剂量分别为10 mL·kg-1,3.75,3.75 g·kg-1.以全血外周血象、脏器指数和血清中促红细胞生成素(EPO)含量为指标对不同方法加工的熟地黄的补血作用进行综合评价.结果:与模型组相比,各给药组红细胞数目均较显著性升高(P＜0.01);产地加工饮片炮制一体化组较显著性升高白细胞和血红蛋白(P＜0.01),EPO(P ＜0.01)恢复至正常水平;传统酒炖组显著升高白细胞(P＜0.05),EPO(P ＜0.05)恢复至正常水平;产地加工饮片炮制一体化组显著升高了胸腺指数(P＜0.01),传统酒炖组明显升高了胸腺指数(P＜0.05).与空白组相比,模型组小鼠各指标均呈现显著性差异;与阿胶补血口服液组相比,产地加工饮片炮制一体化组明显升高了血红蛋白(P＜0.05);与传统酒炖组相比,产地加工饮片炮制一体化组血红蛋白较显著性升高(P＜0.01).结论:不同方法加工的熟地黄饮片均有一定的补血作用,产地加工饮片炮制一体化组的熟地黄饮片略优于传统酒炖组,且该加工工艺具有一定的可行性.
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气相色谱-质谱联用技术分析炮制对蔓荆子挥发性成分的影响
目的:研究蔓荆子生品及炮制品中挥发性成分的差异,探讨该药材的炮制机制.方法:以索氏提取器提取21批蔓荆子生品及炮制品中的挥发性成分,采用GC-MS对其挥发性成分进行分析与鉴定,使用相似度评价软件分别对生品及炮制品组内相似度进行分析;在此基础上,选取相似度＞0.922的生品及其炮制品进行组间比较,通过主成分分析(pCA)等化学计量学方法分析炮制对蔓荆子中挥发性成分的影响,并确定组间主要的差异化合物.结果:蔓荆子生品和炮制品中挥发性成分的种类基本一致,初步鉴定了60个化合物;基于所鉴定的成分,进行无监督的PCA,得分图显示生品、炮制品挥发性成分整体表达上具有一定差异;进一步通过有监督的偏小二乘判别分析对二者进行建模区分,通过模型判别贡献值及t检验确定了12个炮制前后具有显著差异的化合物.结论:炮制会影响蔓荆子中挥发性成分的含量,但对成分的种类无影响,这将为蔓荆子饮片及其炮制工艺考察的质控指标选择提供参考.
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开心散乙醇提取物中远志皂苷的人血成分及体内代谢产物分析
目的:鉴定开心散60％乙醇提取物(KXS-60％ E)及其血中移行成分中的远志皂苷类成分,分析大鼠体内远志皂苷类成分的代谢产物.方法:应用UPLC-TOF-MS技术,分析TOF-MS/MS给出的二级离子信息,结合液质联用工作站MassLynx v4.1分析软件及现有的文献数据库,鉴定KXS-60％E中远志皂苷类成分、灌服KXS-60％E后血清中的远志皂苷类成分及其代谢产物.结果:鉴定了KXS-60％E中14个远志皂苷类成分,主要为三萜型皂苷;鉴定了大鼠口服KXS-60％E后血中的5个原型皂苷类成分及4个代谢产物.结论:远志皂苷类成分及4个代谢产物可能是KXS-60％E潜在的活性成分及直接药效物质基础,这将有助于阐明开心散防治阿尔兹海默症的有效成分及作用机制.
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UPLC-MS考察西洋红参皂苷类成分对大鼠脑内神经化学物质的影响
目的:考察西洋红参皂苷组分Ⅰ和Ⅱ对大鼠大脑皮层及海马中17种神经化学物质水平的影响.方法:将西洋红参总皂苷经D101型大孔吸附树脂分离纯化制备得到组分Ⅰ和Ⅱ,采用超高效液相色谱-线性离子阱质谱法(UPLC-LIT-MS)测定组分中皂苷单体的组成.采用超高效液相色谱-三重四级杆质谱法(UPLC-QQQ-MS)测定大鼠大脑皮层及海马中17种神经化学物质含量变化情况.结果:在与空白组比较,给予皂苷组分Ⅰ后,大鼠大脑皮层及海马中谷氨酸,天冬氨酸,牛磺酸,乙酰胆碱,酪氨酸,多巴胺,去甲肾上腺的含量升高,与给药剂量成正相关趋势;在给予皂苷组分Ⅱ后,y-氨基丁酸,色氨酸,5-羟色胺,5-羟吲哚乙酸,褪黑素,丝氨酸,甘氨酸,组胺的含量升高,且与给药剂量成正相关趋势.通过分析皂苷组成与脑内神经化学物质含量变化之间的内在联系,发现组分Ⅰ可提高大脑皮层及海马中兴奋性神经化学物质含量,组分Ⅱ可提高大鼠大脑皮层及海马中抑制性神经化学物质含量.结论:西洋红参中皂苷组分具有神经活性,皂苷类成分的极性与其对兴奋性和抑制性神经化学物质的影响具有相关性.
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吴茱萸粉末醋调敷日本大耳兔足心的药代动力学分析
目的:研究吴茱萸粉末醋调敷日本大耳兔足心后吴茱萸碱(EVO)和吴茱萸次碱(RUT)的药代动力学特征,探讨吴茱萸穴位贴敷疗法的药动学基础.方法:吴茱萸粉末(1.0 g·kg-1)醋调敷雄性日本大耳兔足心12 h,于不同时间点(0,1,2,3,4,5,6,8,10,12,24 h)心脏取血,血浆样品用乙腈萃取并沉淀蛋白,采用LC-MS检测血浆中EVO和RUT的血药浓度,采用Phenomenex Gemini C18色谱柱(4.6mm×150mm,5μm),流动相乙腈-5 mmol·L-1甲酸铵水溶液(62:38),流速0.4 mL· min-1,柱温25℃,以色胺酮(TRY)为内标,采用电喷雾离子化(ESI)和正离子多离子反应监测(MRM)模式检测.采用PKSolver 2.0软件的非房室模型拟合药动学参数.结果:EVO和RUT的主要药动学参数半衰期(t1/2)分别为(18.55 4±7.98),(20.15±1.06)h;达峰时间(Tmax)分别为5,4h;药峰浓度(Cmax)分别为(4.68 4±0.34),(9.764±1.05).μg· L-1;药时曲线下面积AUC0-1分别为(58.18 4±5.46),(155.38±13.91) iμg·L-1·h,AUC0-∞分别为(101.46 4±23.34),(300.32 4±36.22) μg· L-1 ·h;平均驻留时间(MRT0-∞)分别为(27.63 4±9.34),(31.254±1.47)h.结论:吴茱萸粉末醋调敷日本大耳兔足心后,EVO和RUT均可透皮吸收入血,且撤药后24 h内仍能维持血药浓度,为吴茱萸穴位贴敷给药提供了实验依据.
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施钾对当归苯酞类成分含量动态的影响
目的:研究施钾量对不同生长期当归根系中藁本内酯,洋川芎内酯A,洋川芎内酯H,洋川芎内酯Ⅰ,阿魏酸松柏酯,丁烯基苯酞及欧当归内酯A等苯酞类成分含量动态的影响,为合理制定当归施用钾肥方案提供科学依据.方法:在大田试验条件下,研究施K20量为0 kg·hm-2 (K0),150 kg.hm-2(K1),300 kg· hm-2(K2),450 kg·hm-2(K3),600 kg.hm-2 (K4)和750 kg·hm-2(K5)对当归苯酞类成分动态含量的影响,采用HPLC测定不同生长期当归根中上述7种成分含量.结果:施钾并不改变当归根中苯酞类成分含量随生长期变化而变化的趋势;不同施钾量对当归苯酞类成分含量有显著影响(P＜0.05).在本试验条件下,K2O以450 kg·hm-2处理对增加当归根中苯酞类成分含量的效果好.结论:施钾能提高当归根中苯酞类成分含量,但施钾不会改变整个生育期内当归根中苯酞类成分含量的总体变化趋势.
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槟榔在不同储藏条件下的药效组分变化
目的:以总酚、总黄酮、多糖、槟榔碱、槟榔次碱和去甲基槟榔次碱4类药效组分为评价指标,基于紫外分光光度法、超高效液相色谱-二极管阵列检测法(UPLC-PDA),外观性状变化和水分含量检查联合探讨不同储藏环境和包装材料对槟榔质量的影响.方法:分别采用福林-酚法、三氯化铝显色法和苯酚-硫酸法显色,在775,510,489 nm波长下利用紫外分光光度法测定槟榔中总酚、总黄酮和多糖含量;三氯甲烷-甲醇(4:1)超声提取,以BEH HILIC色谱柱(2.1 mm×100 mm,2.7μm),乙腈-10 mmol· L-1乙酸铵水梯度洗脱,利用UPLC-PDA法在215 nm波长下定量3种指标性生物碱含量.结果:不同储藏环境和包装材料下贮藏1年,槟榔外观颜色加深,水分含量增加,上述4类药效组分含量均随储藏时间延长而降低,其中,高温高湿(P＜0.01)和常温常湿(P＜0.01),编织袋(P＜0.01)和牛皮纸(P＜0.01)因素影响显著,低温低湿和自封袋(P＜0.05)储藏条件对药效组分的含量影响较小.结论:建议可将槟榔用自封袋包装储存在低温低湿环境中,以延长槟榔储藏时间,保证槟榔质量.
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中药名与其基源植物中文名称及学名的分析整理
目的:探讨2015年版《中国药典》中药名、基源植物中名及学名与其基源植物在《中国植物志》和《Flora of China》的中名及学名.方法:对我国2015年版《中国药典》的某些中药名及基源植物的中名、学名与其在《中国植物志》和《Flora of China》基源植物的中名及学名进行归纳、分析、总结.结果:2015年版《中国药典》某些中药名及其基源植物的中名与其在《中国植物志》及《Flora of China》植物中名存在混淆和交叉混淆,及其学名不一致的4种情况:一是《中国药典》部分中药的基源植物中名与其在《中国植物志》的植物中名不一致;二是《中国药典》的部分中药基源植物的学名与其在《中国植物志》植物的学名不一致;三是《中国药典》部分中药的基源植物中名及学名与《中国植物志》或《Flora of China》上植物中名和学名不一致;四是《中国药典》某些中药名与《中国植物志》其他植物中名相同.结论:《中国药典》的中药名、基源植物的中名及学名与《中国植物志》及《Flora of China》的中名及学名应保持一致性,才有利于人们进行中药种植、采购、销售、生产、研究,同时也将有利于我国中药在国际上交流活动.
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麻黄的“破癥坚积聚”功效分析
结合古今文献研究,分析麻黄“破癥坚积聚”的功效机制,为拓展麻黄治疗妇科疾病的应用范围提供文献依据.通过梳理古今麻黄相关文献,筛选麻黄的特殊用法资料,并结合临床应用,归纳麻黄在阳和汤及麻黄细辛附子汤中治疗癥瘕的临床和配伍特点.麻黄消癥瘕的机制在于温经散寒、散邪外出、宣通气机、振奋肾阳.临床应用麻黄消癥瘕主要体现在阳和汤及麻黄细辛附子汤中.中医辨证治疗癥瘕有很大的应用前景,麻黄灵活配伍治疗癥瘕,疗效显著,扩大了麻黄在妇科疾病中的应用范围.
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血塞通调节miRNA-146影响内皮细胞凋亡的干预作用
目的:探讨血塞通(XST)对过氧化氢诱导人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)凋亡的影响及作用机制.方法:体外培养HUVEC,H2O2作为氧化剂作用于HUVEC制作氧化应激模型.通过血塞通干预,观察H2O2诱导的HUVEC细胞凋亡的变化,从表观遗传学微小RNA(microRNA,miRNA)角度探讨血塞通对HUVEC的保护作用及其作用机制.将体外培养的HUVEC分为空白组,H2O2模型组,H2O2模型+XST(30 mg·L-1,处理24 h)组.通过细胞计数试剂盒-8(CCK8)法检测细胞活力,Annexin V/碘化丙啶(PI)测定细胞凋亡,实时荧光定量核酸扩增检测系统(Real-time PCR detecting system,Real-time PCR)检测miRNA-146和miRNA-199表达水平.结果:HUVEC经过i00 μmol·L-1 H2O2处理之后,细胞晚期凋亡和早期凋亡都有明显升高(P＜0.05).用质量浓度从1 ～ 100 mg·L-1XST HUVEC细胞进行预处理后,发现用10 mg·L-1XST预处理可以明显地改善细胞增殖情况.Annexin V/PI双染细胞凋亡检测发现HUVEC经过100 μmol·L-1H2O2处理之后,细胞PI阳性率R3(晚期凋亡)和Annexin V阳性率R5(早期凋亡)都有明显升高(P＜0.05).H2O2模型经过30 mg·L-1XST处理之后,可以明显降低细胞PI阳性率R3(晚期凋亡)和Annexin V阳性率R5(早期凋亡)(P＜0.05).100 μmol-1·L-1H2O2处理可以明显升高hsa-miR-146b-5p和hsa-miR-199a-5p表达(P＜0.05).与单纯的H2O2处理比较,经过30 mg·L-1的血塞通处理之后,可以明显降低hsa-miR-146b-5p表达(P＜0.05).结论:血塞通可以明显抵抗H2O2诱导的HUVEC细胞氧化损伤,可能是通过抑制hsa-miR-146b-5p的升高发挥保护作用.
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血塞通对冠心病不稳定型心绞痛血瘀证患者microRNA的干预作用
目的:观察血塞通(XST)治疗及干预冠心病不稳定型心绞痛血瘀证临床疗效及患者外周血hsa-miR-199a-5p,hsa-miR-146b-5p,KIR3DS1,HLA-DPB1,TP53SESN2,NCR1,PRF1表达的影响,阐述XST治疗冠心病血瘀证可能的分子机制.方法:选取心绞痛分级Ⅰ～Ⅲ级的冠心病不稳定型心绞痛血瘀证患者80例,随机分为对照组和治疗组,各40例.对照组给予常规西药治疗+安慰剂,治疗组在常规西药治疗基础上加用血塞通软胶囊,治疗4周.观察治疗前后患者缺血总负荷、西雅图心绞痛质量评分,血流动力学和血脂指标变化,评估XST治疗冠心病血瘀证的临床疗效.实时荧光定量聚合酶链反应(Real-time polymerase chain reaction,Real-time PCR)检测外周血hsa-miR-199a-5p,hsa-miR-146b-5p,KIR3DS1,HLA-DPB1,TP53,SESN2,NCR1,PRF1等基因表达变化.结果:治疗后与对照组比较,治疗组缺血总负荷降低(P＜0.05);治疗后与对照组比较,治疗组全血黏度、血浆黏度和红细胞刚性指数下降(P＜0.05);治疗后与对照组比较,治疗组甘油三酯(TG),总胆固醇(TC),低密度脂蛋白-胆固醇(LDL-C)降低(P＜0.05);治疗后与对照组比较,治疗组KIR3DS1,TP53,SESN2,PRF1上调,hsa-miR-199a-5p,hsa-miR-146b-5p下调(P＜0.05)结论:XST可有效改善冠心病不稳定型心绞痛血瘀证患者症状,其机制可能与调控hsa-miR-199a-5p,hsa-miR-146b-5p相关.
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冠心病不稳定性心绞痛血瘀证患者IL-6基因甲基化研究及方法探讨
目的:研究冠心病不稳定性心绞痛(unstable angina,UA)患者外周血细胞中白细胞介素-6(IL-6)基因启动子区甲基化状态与中医血瘀证的关系.方法:选取6例2015年2月-2015年5月中国中医科学院广安门医院心血管科住院或门诊UA血瘀证患者作为试验组,另选取6例中国中医科学院广安门医院心内科住院或门诊UA非血瘀证患者作为对照组,采用重亚硫酸盐处理检测两组IL-6基因启动子区甲基化状态并进行组间比较,分析血瘀证与基因启动子区甲基化相关性.结果:IL-6基因转录起始位点前-1 118 bp至-826 bp序列中7个位点CpG位点甲基化程度血瘀证组存在高于非血瘀证组的趋势,但差异尚无统计学意义.IL-6基因转录起始位点前-1 47 1 bp至-1 184 bp序列4个CpG位点甲基化程度血瘀证组与非血瘀证组之间的差异尚不明显.结论:UA血瘀证患者IL-6基因启动子甲基化水平存在高于非血瘀证组的趋势,一定程度反映了UA血瘀证本质.
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冠心病血瘀证转录组学研究——病证结合生物标志物研究思路与方法
中医证候的生物学基础研究是影响中医学发展与创新的重大科学问题,证候相关生物标志物及中药干预调控网络的研究对于在证候标准规范的基础上进一步提高诊断效能和临床疗效具有重要意义.因此,在前期冠心病证候标准规范研究的基础上,本项目组以冠心病心绞痛血瘀证为切入点,从分子生物水平对证候进行了深入研究.第一,通过采集累计312例患者外周血基因信息,运用差异显示法、实时定量聚合酶链式反应(Real-time polymerase chain reaction,Real-time PCR),斑点杂交法,高通量芯片,测序等方法,确立了冠心病血瘀证长链非编码核糖核酸-微小核糖核酸-信使核糖核酸(long noncoding ribonucleic acid-micro ribonucleic acid-messenger ribonucleic acid,lncRNA-miRNA-mRNA)3个层面的潜在生物标志物.第二,在前期筛选出的差异基因的基础上,运用生物信息学分析结合细胞功能学验证的方法,构建了冠心病血瘀证基因miRNA-mRNA以及IncRNA-miRNA-mRNA 2个水平的调控网络.第三,基于血瘀证差异基因及调控网络,通过累计202例活血化瘀中药干预冠心病心绞痛血瘀证患者的随机对照试验,治疗前后共计400余人次的基因检测,以及活血化瘀中药处理相关细胞模型的体外实验,从基因-蛋白-功能3个层面研究中药作用机制,从分子水平揭示了活血化瘀中药干预冠心病血瘀证的基因调控网络机制.本研究将相关的分子生物学技术及生物信息学方法引入证候的生物学基础研究,建立了一套证候相关生物标志物的研究方法,为证候实质的研究提供了新思路.
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丹参多酚酸盐干预非ST段抬高心肌梗死患者microRNA与靶基因
目的:高通量检测非ST段抬高性心肌梗死(NSTEMI)患者药物干预前后的微小RNA(microRNA)表达谱,对比中西药物治疗前后microRNA表达变化,分析活血化瘀药物干预靶标与机制.方法:选取符合西医疾病诊断标准和中医证侯诊断标准的患者,分为2组,包括NSTEMI中药治疗组,NSTEMI西药组,每组纳入35例,抽取外周血,分离外周血单核细胞(PBMC),提取总RNA.根据各组差异表达的microRNA和基因的通路和网络分析结果,确定各组中起关键调控作用的microRNA及其靶基因.结果:在microRNA表达谱中,中药治疗组治疗前后、中药治疗组与西药组两组治疗后比较均存在差异;中药治疗组治疗后hsa-miR-92a,hsa-miR-363,hsa-miR-499,hsa-miR-30b,hsa-miR-454-3p,hsa-miR-933表达下调,hsa-miR-144,hsa-miR-451,hsa-miR-494,hsa-miR-320表达上调.表明这10个microRNA是丹参多酚酸盐干预NSTEMI的靶标.实时荧光定量PCR(Real-time PCR)验证,与西药组比较,中药治疗组治疗后hsa-miR-92a,hsa-miR-30b,hsa-miR-499,hsa-miR-454表达下调;中药治疗组治疗后hsa-miR-494的表达上调(P＜0.05).结论:NSTEMI患者治疗前后,中药治疗组与西药组microRNA的表达谱均存在差异,筛选的miRNA可能是活血化瘀药物干预的靶标.
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高通量测序筛选冠心病血瘀证相关lncRNA-miRNA-mRNA调控网络
目的:筛选冠心病血瘀证相关差异表达非编码RNA(lncRNA),微小RNA(microRNA,miRNA),信使RNA(mRNA),构建基因间调控网络,从转录组层面研究冠心病血瘀证物质基础和病理机制.方法:使用高通量测序技术,分别检测冠心病血瘀证、冠心病非血瘀证和正常(各5例)lncRNA,miRNA和mRNA表达情况,通过交联分析筛选冠心病血瘀证相关的差异基因表达谱.对获得的差异基因进行功能通路分析,根据基因间Pearson相关分析和starBase靶基因预测平台,构建基因间调控网络,通过网络拓扑分析,筛选其中的关键基因.在另一匹配队列中(每组各15例)对基因调控网络中的关键节点进行实时荧光定量PCR(Real-time PCR)验证.结果:39个lncRNA,229个miRNA和221个mRNA与冠心病血瘀证密切相关.功能与通路分析结果显示,冠心病血瘀证差异表达基因主要与免疫和炎症相关.共有9个lncRNA(均为下调),31个mRNA(11个上调,20个下调)和24个miRNA(14个上调,10个下调)构成共调控网络,包括76个基因间调控关系.CTA-384D8.35,CTB-114C7.4,RP11-567M16.6和hsa-miR-3158-3p是冠心病血瘀证基因调控网络中的关键节点.Real-time PCR结果验证了上述结果.结论:冠心病血瘀证存在lncRNA-miRNA-mRNA差异表达基因谱,其与免疫和炎症密切相关;差异表达基因间存在相互调控关系,并可依此构建冠心病血瘀证相关lncRNA-miRNA-mRNA调控网络.对冠心病血瘀证的物质基础进行深度挖掘,可为从转录组层面开展中医证型相关研究提供了一定的科学基础.
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市场导向下的药企间仿制药一致性评价横向合作的现状分析及对策
中国仿制药占上市化学药品的绝大部分,由于仿制药的质量参差不齐,直接影响到人民群众用药的安全性和有效性.现阶段,我国提出要全面提高仿制药质量,将仿制药分期分批与被仿制药进行质量一致性评价,对于整个医药行业是一次重要的战略机遇.在市场导向下,以企业作为主体通过横向合作的方式,引导企业参与生物等效性(BE)研究平台的建设,通过企业联合建立仿制药一致性评价的参比制剂及研究信息共享机制;同时通过政府引导资源配置,适度倾斜照顾中西部地区企业,解决中西部地区药企面临的实际问题,实现医药行业的区域均衡发展,使之成为促进医药行业的供给侧结构改革的重要抓手.
| 年 | 期数 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 |
| 2017 | 01 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 |
| 2015 | 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2001 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2000 | 01 02 03 04 05 06 |
