中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae 중국실험방제학잡지
- 主管单位： 国家中医药管理局
- 主办单位： 中国中医科学院中药研究所 中华中医药学会
- 影响因子： 1.62
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1005-9903
- 国内刊号： 11-3495/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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基于Pink-1/Parkin信号通路补青颗粒含药血清对高糖诱导人晶状体上皮细胞线粒体自噬的影响
目的:探讨补青颗粒含药血清对高糖诱导的人晶状体上皮(HLE)细胞线粒体自噬的影响.方法:体外培养HLE细胞,空白组将HLE细胞在正常培养液中培养48 h,模型组在空白组培养液中添加30 mmol·L-葡萄糖,实验组在模型组基础上加入不同含药血清刺激培养48 h.采用CCK-8法检测不同含药血清对高糖诱导的HLE细胞增殖活力的影响;利用免疫荧光技术及蛋白免疫印迹(Western blot)法检测Pink-1,Parkin,p62蛋白表达.结果:CCK-8法结果显示模型组较空白组HLE细胞增殖活力增强(P＜0.01);与模型组比较,杞菊组与补青颗粒高、中、低剂量组细胞增殖活力均降低(P＜0.01);与杞菊组比较,补青颗粒中剂量组细胞增殖活力明显降低(P＜0.01);补青颗粒不同剂量组间比较,补青颗粒中剂量组细胞增殖活力显著降低(P＜0.01).细胞免疫荧光结果显示Pink-1,Parkin,p62蛋白主要在细胞胞浆表达,细胞核内亦有少量表达.Western blot结果显示与空白组比较,模型组Pink-1,Parkin表达增加(P＜0.01),p62表达降低(P＜0.01);与模型组比较,杞菊组与补青颗粒中剂量组Pink-1,Parkin表达增加(P＜0.01),p62表达降低(P＜0.01);与杞菊组比较,补青颗粒中剂量组Pink-1,Parkin表达增加(P＜0.01,P＜0.05),p62表达降低(P＜0.01).结论:补青颗粒对高糖诱导的HLE细胞线粒体自噬相关蛋白的表达有显著影响,线粒体自噬的改变可能是补青颗粒改善白内障发病的机制之一.
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归芪益元膏对重离子辐射诱发体内旁效应中Cyt-C,Bax及Bcl-2表达的影响
目的:探讨归芪益元膏对重离子辐射旁效应大鼠肺肾组织中细胞色素-C (Cyt-C)及Bax,Bcl-2基因表达的影响.方法:Wistar雄性大鼠随机分为7组,归芪益元膏组预先灌胃归芪益元膏2周(灌胃剂量为3.28 g·kg-1 ·d-1),正常组和辐射组灌胃等量生理盐水.2周后辐射组和归芪益元膏组大鼠右肺予2Gy12C6+离子束单次照射,正常组不予照射.照射后6,12,24 h处死各组大鼠,蛋白免疫印迹(Western blot),免疫组化及实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测各组大鼠右肺、左肺、左肾组织中Cyt-C,Bax,Bcl-2蛋白及mRNA表达.结果:右肺、左肺、左肾中Cyt-C,Bax mRNA表达在照射后6,12,24h均明显上调,而蛋白表达只在照射后24 h明显上调,与正常组比较,差异有统计学意义(P＜0.01);右肺中,Bcl-2蛋白及mRNA表达只在照射后24 h明显下调,而左肺、左肾中照射后6,12,24 h均明显下调,与正常组比较,差异有统计学意义(P＜0.01).右肺、左肺、左肾中,归芪益元膏组Cyt-C,Bax mRNA表达在照射后6,12,24 h较辐射各组明显下调,归芪益元膏组Cyt-C,Bax蛋白表达在照射后24 h较辐射组明显下调,差异有统计学意义(P＜0.01);右肺中,归芪益元膏组Bcl-2 mRNA及蛋白表达在照射后24 h较辐射组明显上调,左肺、左肾中,归芪益元膏组Bcl-2 mRNA及蛋白表达在照射后6,12,24 h较辐射各组明显上调,差异有统计学意义(P＜0.01).结论:重离子辐射大鼠右肺后,左、右肺和左肾组织中Cyt-C,Bax,Bcl-2基因表达异常,归芪益元膏通过延缓Bcl-2表达的下调而抑制Bax,Cyt-C表达的上调,从而起到预防肺肾细胞凋亡,发挥其对重离子辐射诱发体内旁效应损伤的防护作用.
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匙羹藤果水提液降血糖作用及其作用机制
目的:研究匙羹藤果水提液的降血糖作用,并探讨其相关的作用机制.方法:采用改良寇氏法对急性毒性进行研究,以四氧嘧啶致高血糖的糖尿病小鼠和大鼠为模型,以二甲双胍作为阳性药,以葡萄糖过氧化物酶法(GOD-POD)测定小鼠和大鼠血糖,观察匙羹果水提液高、中、低剂量组的降血糖作用,分别按照SOD活性试剂盒,总胆固醇试剂盒(COD-CE-PAP法),甘油三酯试剂盒(GPO-PAP法)检测法,GOD-POD法测定高血糖小鼠用药前后的SOD活性,高血糖大鼠给药前后总胆固醇、甘油三酯,正常小鼠糖耐量等指标,比较用药前后高血糖大鼠胰胰腺组织的病理状态,探讨匙羹藤果水提液降血糖的作用机制.结果:匙羹藤果水提液的半数致死浓度(LD50)为66.65 9·kg-,水提液能明显降低四氧嘧啶致高血糖小鼠和大鼠血糖,与正常组比较,模型组的血糖有显著性差异(P＜0.01);与模型组比较,各给药组的血糖有显著性差异(P＜0.01),提高糖尿病小鼠SOD活性,降低糖尿病大鼠甘油三酯,修复糖尿病大鼠的胰腺和增加其胰岛数量,同时不影响正常小鼠的糖代谢.结论:匙羹藤果水提液具有较好的降血糖作用,其作用机制与提高机体的抗氧化能力、调节脂代谢和糖代谢有关,为明确匙羹藤果降血糖的药效物质基础提供了科学依据.
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黄芪甲苷对复合水饮内停大鼠心脏功能的影响
目的:探讨黄芪甲苷对水饮内停大鼠心脏功能的改善作用.方法:SD大鼠采用肩胛区皮下注射异丙肾上腺素(ISO)加气管置管复合干预因素建立上焦水饮内停大鼠模型,建模成功后随机分为模型组、黄芪甲苷低、中、高剂量组及阳性药组(芪苈强心胶囊),另设立正常组作为对照,每组10只大鼠.分别给予等体积羧甲基纤维素钠(0.5％),黄芪甲苷(20,40,80 mg·kg-1·d-1),芪苈强心胶囊(1 g·kg-1·d-1)灌胃,持续给药2周,通过大鼠体重(BW),心重指数(HWI),左心室质量指数(LVWI)观察心肌肥厚程度;苏木素-伊红(HE)染色法和胶原容积分数(CVF)观察心脏组织形态学改变;大鼠超声心动图检测左心室射血分数(LVEF)及左心室短轴缩短分数(LVFS)改变;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测血浆肌酸激酶(CK)的表达水平.结果:与正常组比较,模型组大鼠BW显著降低(P＜0.01),HWI和LVWI显著增高(P＜0.01),心肌肥厚较为明显,LVEF.LVFS显著降低(P＜0.01),心肌CVF及血浆CK明显增高(P ＜0.05,P＜0.01),心肌病理损伤较为明显;给药干预后,黄芪甲苷(40,80 mg·kg-1 ·d-1)剂量组大鼠BW明显增高(P＜0.05),HWI,LVWI明显升高降低(P ＜0.05,P＜0.01),可以有效缓解心肌肥厚,且升高模型大鼠的LVEF及LVFS(P ＜0.05),改善心脏功能,模型大鼠的CK,CVF明显降低(P＜0.05),减轻心肌病理损伤.结论:黄芪甲苷可以通过抑制上焦水饮内停大鼠心肌纤维化、降低左室厚度、改善血流动力学等方面发挥保护心脏的作用.
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白芍总苷对NAFLD大鼠HMGB1,TLR4通路的干预作用
目的:探讨白芍总苷(TGP)对高脂-果糖诱导非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠肝组织中高迁移率族蛋白1(HMGB1),Toll样变体4(TLR4)信号通路的影响及其作用机制.方法:用高脂-高果糖餐诱导NAFLD大鼠模型,除设正常组外,将模型大鼠随机分为模型组,水飞蓟宾组,二甲双胍组(200 mg·kg-1 ·d-1),TGP高、低剂量组(200,100 mg·kg-1·d-1).用药6周后观察各组大鼠空腹血糖(FBG),餐后2h血糖(2 hBG),胰岛素(Fins),总胆固醇(TC),低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C),高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C),甘油三酯(TG),游离脂肪酸(FFA),丙氨酸氨基转移酶(ALT),天门冬氨酸氨基转移酶(AST)水平,计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)和肝脏指数;并以免疫蛋白印迹法(Western blot)检测肝组织中HMGB1,TLR4蛋白的表达.结果:与正常组比较,模型组转氨酶,肝脏指数,血脂,2 hBG,Fins,HOMA-IR及TLR4,HMGB1蛋白均明显升高(P ＜0.05,P＜0.01);与模型组比较,TGP高、低剂量组2 hBG,Fins,HOMA-IR,LDL-C,TG,TC,FFA,ALT,AST均明显降低(P＜0.05,P＜0.01),高、低剂量TGP在拮抗胰岛素抵抗、降糖降脂,改善肝功能有较显著的作用,TGP高、低剂量组均可下调HMGB1,TLR4蛋白的表达(P＜0.01).结论:在NAFLD病程进展中,HMGB1,TLR4是导致炎症的其中一条通路,TGP通过下调HMGB1,TLR4信号通路的表达而起到抑制大鼠NAFLD炎症发展的作用.
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改良高脂及乙醇加情绪刺激诱导大鼠肝硬化肝郁脾虚证模型的建立
目的:构建能与肝硬化肝郁脾虚证临床证候表现密切相关的、并适宜于中药活性发现和药效评价的稳定可靠的大鼠肝硬化肝郁脾虚证病证结合模型.方法:70只大鼠按体重随机分为正常组;模型Ⅰ组、水飞蓟宾葡甲胺片Ⅰ组:采用79.5％单纯玉米粉加20％猪油,0.5％胆固醇制成的高脂低蛋白饲料饲养;30％乙醇复合因素造模连续4周;改良模型Ⅱ组、水飞蓟宾葡甲胺片Ⅱ组:采用由79.5％单纯玉米粉加20％猪油,0.5％胆固醇制成的高脂低蛋白饲料饲养,10％乙醇灌胃1周,5％乙醇灌胃3周的方法造模;改良模型Ⅲ组、水飞蓟宾葡甲胺片Ⅲ组:采用由89.5％单纯玉米粉加10％猪油,0.5％胆固醇制成的高脂低蛋白饲料饲养,乙醇灌胃方法同模型Ⅱ组;水飞蓟宾葡甲胺片Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ组均按0.108 g·kg-1灌胃水飞蓟宾葡甲胺片治疗.实验期间除正常组外其余各组大鼠均给予相同程度、不可预知的情绪刺激,每日观察各组大鼠一般状态,模拟临床肝硬化肝郁脾虚证临床证候表现,分析并提出适宜于大鼠的证候表现,并每日按积分标准进行赋分,记录大鼠的体重、日食日水量,实验结束眼球取血检测大鼠血清丙氨酸转氨酶(ALT),天门冬氨酸转氨酶(AST),透明质酸(HA),Ⅲ型前胶原(PC-Ⅲ),Ⅳ型胶原(Ⅳ-C),腺苷脱氨酶(ADA),单胺氧化酶(MAO)和A/G等与肝硬化密切相关指标的水平,苏木素-伊红(HE)染色观察各组肝组织病理学变化.结果:正常组无大鼠死亡,营养状况良好;模型组大鼠饮食饮水量降低,体重增加缓慢,毛质粗糙,精神萎靡,个别老鼠趾甲易出血;其中模型Ⅰ组死亡4只,模型Ⅱ组死亡3只,模型Ⅲ组无死亡情况.与正常组比较,模型组大鼠血清ALT,AST,HA,PC-Ⅲ,Ⅳ-C,ADA,MAO水平显著升高,A/G显著降低,脏脑比例及证候积分显著升高(P＜0.01);各给药组大鼠血清ALT,AST,HA,PC-Ⅲ,Ⅳ-C,ADA,MAO水平与模型Ⅰ组相比明显降低,A/G明显升高,脏脑比例及证候积分明显降低(P＜0.05,P＜0.01),模型组肝组织形态学检查发现有假小叶形成,且汇管区出现典型的病变,阳性药组上述病变可呈现不同程度改善.结论:改良后的大鼠肝硬化肝郁脾虚证模型建立方法可提高造模成功率,降低造模导致大鼠的死亡率,具有成模时间短,与临床肝硬化肝郁脾虚证的证候吻合度高、可行性好,证候表现稳定的特点,以适宜于肝硬化肝郁脾虚证临床方证相关基础性研究和中药复方活性发现、药效评价与机制探讨.
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大鼠虚热证模型的建立与评价
目的:对热性中药致虚热证模型的复制和评价进行探究.方法:使用不同剂量热性中药附子、干姜、肉桂灌胃大鼠.每天观察大鼠的活动状态、毛发光泽、爪色、二便等一般状况,每天定时测定大鼠的肛温、粪便量、尿液量、饮水量、饮食量,并于体液消耗量出现明显差异时采集血液和相关组织器官,测定血清三碘甲状腺原氨酸(T3),甲状腺素(T4),血浆环磷酸腺苷(cAMP)及环磷酸鸟苷(cGMP)含量的变化和相关脏器指数.结果:与空白组比较,各模型组大鼠饮水量、体液消耗量大多数升高,动物出现虚热证的证候;且血清中T4含量呈增高趋势,T3/T4降低.模型低剂量组和模型中剂量组的cAMP和cGMP含量与空白组比较大多数显著升高,而模型高剂量组含量则有所降低.结论:灌胃热性中药可以复制出虚热证模型,体液消耗量的增加对虚热证模型复制有一定的指导意义.
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黄芪桂枝五物汤对CIA模型大鼠关节滑膜细胞凋亡的影响
目的:研究黄芪桂枝五物汤(HGW)对胶原诱导型关节炎(CIA)模型大鼠关节滑膜细胞凋亡的影响,并探讨其作用机制.方法:选用SD大鼠72只,随机分为正常组,模型组,HGW低、中、高剂量组,Tofacitinib(TFN)组,HGW低、中、高剂量组药物剂量分别为16,32,64 g·kg-1,相当于临床常人用量的3,6,12倍,TFN给药剂量为15 mg·kg-1,正常组、模型组每日给予10 mL· kg-蒸馏水.以牛Ⅱ型胶原加弗氏完全佐剂建立CIA大鼠模型,经HGW治疗4周后光镜下观察各组大鼠踝关节病理形态;通过流式细胞术检测白细胞介素(IL)-4,IL-10含量,免疫组化法检测B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达,DNA断裂的原位末端标记法(TUNEL)染色检测滑膜细胞的凋亡.结果:与正常组比较,模型组,HGW低、中、高剂量组,TFN组大鼠滑膜中Bcl-2蛋白表达增多(P＜0.05),模型组Bax蛋白表达减少(P＜0.05);与模型组比较,HGW高剂量组,TFN组大鼠滑膜中Bcl-2蛋白表达减少,Bax蛋白表达增多(P＜0.05).滑膜细胞凋亡可见,与正常组比较,模型组,HGW低、中、高剂量组,TFN组滑膜细胞增多,凋亡率下降(P＜0.05);与模型组比较,HGW低、中、高剂量组,TFN组大鼠滑膜细胞凋亡率上升(P＜0.05);与HGW低剂量组比较,HGW高剂量组滑膜细胞凋亡率显著上升(P＜0.01);与HGW-M组比较,HGW高剂量组滑膜细胞凋亡率上升(P＜0.05).结论:黄芪桂枝五物汤可以促进RA大鼠异常亢进的滑膜细胞凋亡.
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黄精地龙提取液对老年痴呆大鼠脑内烟碱型乙酰胆碱受体的影响
目的:探讨黄精地龙提取液(EPP)对老年痴呆大鼠脑内α3和α7烟碱型乙酰胆碱受体(α3,α7-nAChR)阳性神经元数量、蛋白及mRNA表达的影响.方法:SD大鼠40只,随机均分为正常组,模型组,脑复康(阳性药物,0.6 g·kg-1·d-1)组,EPP(相当生药量4 g·kg-1·d-1)组.给大鼠颈背部皮下注射1％D-半乳糖(5 mL·kg-1 ·d-1,连续3周)后,腹腔注射东莨菪碱(2 mg·kg-1·d-1,连续后2周)复制大鼠老年痴呆模型;造模1周后同时对脑复康组及EPP组大鼠每天灌胃给相应实验药物,正常组及模型组大鼠灌胃给生理盐水1 mL.实验结束,处死各组大鼠,取出脑组织,一半置于10％中性甲醛液浸泡固定待组织切片检查,另一半置于冰上匀浆,进行mRNA及蛋白提取;运用尼氏染色、免疫组化观察各大鼠大脑皮层第一躯体感觉区(S1Tr)和海马CA1与CA3区的阳性神经元数量;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR),蛋白质免疫印迹(Westernblot)检测各大鼠大脑内的a3和a7-nAChR mRNA及蛋白的表达.结果:与正常组比较,模型组大鼠大脑S1Tr区和海马CA1及CA3区神经元数量显著减少,大脑内α3和α7-nAChR mRNA和蛋白表达水平均降低(P＜0.01);EPP能增加痴呆大鼠大脑S1Tr区和海马CA1及CA3区神经元数量,能升高痴呆大鼠大脑内α3和a7-nAChR mRNA和蛋白的表达水平,与模型组比较差异有统计学意义(P ＜0.05,P＜0.01).结论:EPP能保护大脑认知学习记忆有关重要区的神经细胞,同时触发α3和α7-nAChR受体效应,提高中枢乙酰胆碱(ACh)含量,进而升高老年痴呆大鼠中枢胆碱能系统活性.
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丹参注射液对大鼠脊髓损伤后PI3K/Akt/mTOR信号转导通路活性及后肢运动功能的影响
目的:探讨脊髓损伤(SCI)后丹参注射液促进大鼠脊髓神经功能恢复的机制.方法:大鼠(清洁级)随机分为正常组、模型组、给药组、信号通路阻断组和空白组(n=10).除正常组外,其余各组大鼠均建立重力打击SCI模型.模型组伤后常规饲养;给药组伤后1h腹腔注射丹参注射液(1 mL·kg-1);信号通路阻断组伤后1h腹腔注射丹参注射液(1 mL·kg-1,含雷帕霉素3 mg·kg-);空白组伤后给予腹腔注射生理盐水(1 mL·kg-1).上述各组均按1次/d注射.14 d后处死动物,处死前采用联合行为评分法(CBS)评价大鼠脊髓神经功能恢复情况,并取损伤节段上下1 cm的脊髓组织.分别采用免疫组化SP法,蛋白质免疫印迹(Western blot)和逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术检测各实验组大鼠PI3K,Akt和mTOR蛋白及mRNA的表达水平.结果:与模型组、信号通路阻断组和空白组大鼠比较,给药组大鼠CBS评分显著降低(P＜0.05);与正常组比较,模型组大鼠PI3K,Akt,mTOR mRNA的含量,以及PI3K,Akt,mTOR蛋白免疫阳性细胞数和表达量均升高(P＜0.05);与模型组比较,给药组大鼠的上述指标均显著升高(P＜0.05);与给药组比较,信号通路阻断组大鼠的上述指标均显著降低(P＜0.05);上述指标在模型组与空白组大鼠之间的差异不具有统计学意义.结论:丹参注射液有助于大鼠SCI后脊髓神经功能的恢复,其机制可能与升高PI3 K/Akt/mTOR信号转导通路的活性有关.
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淫羊藿黄酮类主要成分促进骨髓间充质干细胞向成骨细胞增殖分化作用及机制的影响
目的:探讨淫羊藿黄酮类主要成分朝藿定A,朝藿定B,朝藿定C,淫羊藿苷,淫羊藿次苷对骨髓间充质干细胞(BMSCs)向成骨细胞分化的促进作用,并对其作用机制进行预测.方法:采用全骨髓细胞贴壁法分离纯化SD大鼠BMSCs做原代培养.实验分为朝藿定A+成骨诱导培养基(1 ×10-8mol·L-1)组,朝藿定B+成骨诱导培养基(1×10-8mol·L-1)组,朝藿定C+成骨诱导培养基(1 ×10-8 mol·L-1)组,淫羊藿苷+成骨诱导培养基(1×10-8 mol·L-1)组,淫羊藿次苷组+成骨诱导培养基组及成骨诱导培养基组(空白组)6组.加入药物进行干预14 d后,采用定性与定量相结合的方法,通过茜素红染色、细胞骨架染色、碱性磷酸酶定量分析,对淫羊藿5种黄酮类主要成分促进骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化作用进行药效学评价;在此基础上,基于BATMAN-TCM网络药理学研究平台,对相关靶点和通路进行预测分析,探讨其潜在作用机制.结果:BMSCs在作用浓度为1×10-8 mol·L-1的药物浓度作用下诱导14 d,通过细胞骨架染色,各给药组均可明显观察到多角形成骨细胞增多;通过茜素红染色,各给药组可明显观察到大量的矿化结节的形成;通过碱性磷酸酶含量测定,与空白组比较,各给药组碱性磷酸酶含量升高,其中朝藿定C,淫羊藿苷组有显著性差异(P＜0.05),淫羊藿次苷组具有极显著性差异(P＜0.01).同时网络药理学分析表明,5种黄酮类成分在促进增殖和分化方面共得到33个潜在作用靶点,并富集分析得到8条信号通路,其中activation of MAPK activity,estrogen signaling pathway已有实验报道.结论:淫羊藿黄酮类主要成分朝藿定A,朝藿定B,朝藿定C,淫羊藿苷,淫羊藿次苷均具有促进BMSCs向成骨方向分化的作用,其中朝藿定C,淫羊藿苷,淫羊藿次苷的作用效果显著,网络药理学分析结果从整体上阐释了多成分的作用机制,为进一步实验验证提供参考.
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消脂汤对非酒精性脂肪性肝炎小鼠肠道主要菌群的影响
目的:观察消脂汤对非酒精性脂肪性肝炎(NAFLD)小鼠模型的治疗作用及对肠道主要菌群的影响.方法:采用D12492高脂饲料诱导建立NAFLD小鼠模型,造模成功后分别给予不同剂量药物干预,检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-6(IL-6),内毒素(LPS)及相关生化指标,取肝脏行苏木素-伊红(HE)染色和油红O染色;实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测结肠内容物中普雷沃氏菌属、梭杆菌属、双歧杆菌、乳酸杆菌、大肠埃希菌等主要肠道菌群数量的变化.结果:与正常组比较,模型组血清甘油三酯(TG),总胆固醇(TC),血清丙氨酸氨基转移酶(ALT),天冬氨酸氨基转移酶(AST),空腹血糖(FBG),空腹胰岛素(FINS),胰岛素抵抗指数(HOMA-IR),LPS,TNF-oα,IL-6水平明显升高(P ＜0.05,P＜0.01);与模型组比较,治疗组FBG,FINS,HOMA-IR,TC,TG显著降低(P＜0.01),非诺贝特组血清ALT,AST无明显降低;与正常组比较,模型组小鼠结肠内梭杆菌属、普雷沃氏菌属、双歧杆菌及乳酸杆菌数量明显减少(P＜0.01),大肠埃希菌数量升高(P＜0.01);正常组与正消组比较无明显差异;与模型组比较,正消组,消脂汤高、中剂量组梭杆菌属、普雷沃氏菌属、双歧杆菌及乳酸杆菌数量明显升高(P＜0.05,P＜0.01),大肠埃希菌数量显著减少(P＜0.01);消脂汤低剂量组、非诺贝特组与模型组无明显差异.结论:消脂汤能显著改善NAFLD小鼠的胰岛素抵抗,减轻肝脏脂肪蓄积和炎症反应,可能与其调整肠道菌群,促进乳酸杆菌、双歧杆菌等优势菌群数量的增长相关.
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基于指纹图谱和OPLS-DA的越南和国产土茯苓差异性化合物探索
目的:分析越南和国产土茯苓化学成分的差异,对差异性化合物进行辨识,并对样品进行产地鉴别.方法:收集越南土茯苓7份,国产土茯苓28份.建立越南和国产土茯苓化学成分色谱指纹图谱,根据相似度评价结果比较两者的差异程度,采用HPLC-MS对指纹图谱的主要色谱峰进行归属,共鉴定21个峰.采用聚类分析对样品进行产地鉴别;结合正交信号校正偏小二乘判别分析(OPLS-DA)进行差异性化合物的筛选,选取位于S-plot图两端并且VIP＞1的点作为区分越南与国产土茯苓的差异性化合物.结果:越南和国产土茯苓主要化学成分的含量存在差异性,聚类分析可将35批土茯苓药材分为越南和国产2组,两者的差异性化合物分别为落新妇苷、异落新妇苷、新落新妇苷、黄杞苷,越南土茯苓中差异性化合物的含量显著大于国产土茯苓.结论:采用OPLS-DA分析样品的指纹图谱,既可从整体角度分析越南和国内土茯苓化学成分的异同,又可对两者差异性化合物进行辨识,为越南土茯苓入药的可能性及其质量评价提供实验数据.
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瑶族药消瘤藤的化学成分分析
目的:对瑶族药消瘤藤Pileostegia tomentella的化学成分进行研究,以期能对其化学成分进行初步的阐明,促进其深入开发与利用.方法:采用溶剂提取法、萃取法、硅胶柱色谱法、重结晶法等方法对消瘤藤95％乙醇提取物进行分离和纯化,采用红外光谱法、质谱法、核磁共振法等现代波谱学方法对分离得到的化合物进行结构分析测试并鉴定.结果:从消瘤藤的95％乙醇提取物中分离得到9个化合物,通过波谱学方法鉴定为二十四烷酸(1),蒲公英赛醇(2),β-谷甾醇(3),3β-乙酰氧基-乌苏酸(4),豆甾烷-3,6-二酮(5),7-羟基-8-甲氧基香豆素(6),茵芋苷(7),7-羟基香豆素(8),3,4-二羟基苯甲酸(9).其中7-羟基-8-甲氧基香豆素(6),茵芋苷(7),7-羟基香豆素(8)3个化合物为香豆素类成分.结论:化合物1～9均为首次在该植物中分离得到,该植物中富含多种香豆素类成分.该研究一定程度上对消瘤藤的化学物质基础进行了揭示,也能促进其定性定量质控手段的建立.
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毛细管电泳-激光诱导荧光法测定人参中铜和镉离子含量
目的:建立高效毛细管电泳-激光诱导荧光法(high performance capillary electrophoresis-laser induced fluorescence,HPCE-LIF)测定Cu2和Cd2+含量的方法,并将其应用于中药材人参重金属的检测.方法:Cu2+与Cd2+通过与荧光络合剂异硫氰酸荧光素酯-偶氮乙二胺四乙酸(fluorescein isothiocyanate isomer Ⅰ-Aminobenzyl ethylene diamiue tetraacetic acid,FITC-ABEDTA)柱前络合后,以熔融石英毛细管柱(75 μm×60.2 cm,有效长度50 cm)为分离通道,经1 mol·L-1 NaOH溶液调pH至9.3的0.1 mol·L-1硼酸溶液-0.1 mol·L-1 SDS溶液(38.5∶61.5)作为缓冲溶液,分离电压25 kV,检测波长520 nm,毛细管温度25℃,自动压力进样5 s.结果:人参样品中Cu2+,Cd2+分离效果良好,并且对两者进行了标准曲线、精密度、重复性和加样回收率试验,在1 ～ 150,2～200 μg· L-1线性关系良好(r＞0.999 2),两者精密度RSD均＜2.0％,表明精密度良好;两者重复性RSD均＜3.7％,表明重复性良好;两者加样回收率分别为103.30％,100.33％,RSD 2.5％,2.8％.结论:采用毛细管电泳-激光诱导荧光法测定中药材人参中特定重金属,方法可行,很好地解决了中药材重金属离子含量低且不易分离的问题,为中药材重金属离子的检测提供一种新的方便快捷准确的方法,并且相信经过不断探索和改进研究,HPCE-LIF法可用于中药材中更多重金属离子的同时检测.
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HPLC-PDA同时测定不同品种及产地蜈蚣中8种核苷类成分
目的:建立同时检测不同品种、不同产地蜈蚣样品中8种核苷类成分(胞嘧啶,胞苷,次黄嘌呤,黄嘌呤,尿苷,胸腺嘧啶,2'-脱氧肌苷和胸苷)含量的高效液相色谱法.方法:不同品种及产地蜈蚣提取物的分析选用Hedera ODS-2 C1s(4.6 mm×250 mm,5 μm)色谱柱,流动相为甲醇-水,梯度洗脱,流速1.0 mL· min-1,柱温30℃,检测波长254 nm,进样量5 μL.结果:8种核苷类成分分离良好;在一定质量浓度内线性关系良好(r＞0.999 9);加样回收率在95.73％～102.6％;11个批次蜈蚣样品中均含有8种核苷类成分,但含量存在差异.不同品种、不同产地的蜈蚣中核苷成分总量墨江蜈蚣含量高,多棘蜈蚣其次,少棘巨蜈蚣和黑头蜈蚣中核苷类总成分比较接近.蜈蚣中次黄嘌呤和黄嘌呤明显高于其他核苷成分,少棘巨蜈蚣中次黄嘌呤的含量要高于其他品种.结论:该文所建立的方法快速简便,重复性、准确度良好,为蜈蚣的质量控制提供依据.
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水苏糖标准样品的研制
目的:依据GB/T 15000.3-2008《标准样品工作导则(3)标准样品:定值的一般原则和统计方法》,研制水苏糖标准样品.方法:以唇形科植物银条Stachys floridana新鲜的地下茎为原料,通过提取、发酵、分离、纯化制备水苏糖.采用元素分析,UV,IR,HR-MS,NMR和X-单晶衍射进行结构鉴定.样品分装成400瓶(每瓶10 mg)后,采用高效液相色谱法-蒸发光散射检测器进行均匀性、稳定性检验和定值分析.结果:该标准样品95％置信区间范围内均匀性良好,24个月内稳定性良好,定值结果确定纯度为99.62％,扩展不确定度为0.13％,通过了国家标准化管理委员会组织的验收,达到了GB/T 15000.3系列国家标准样品的技术要求.结论:首次研制了水苏糖国家标准样品.本标准样品可用于水苏糖含量测定、检测方法评定、相关产品的检测与质量控制.
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毛梗稀莶草黄酮类化学成分分离鉴定
目的:本课题组前期对自建的江西100种中草药提取物组分库样品进行活性筛选时,发现毛梗豨莶草Siegesbeckia glabresce的乙酸乙酯萃取部位具有显著的抑制细胞程序性坏死的生理活性.为明确毛梗豨莶草的活性组分,本课题组对毛梗稀莶草乙酸乙酯萃取部位进行系统化学成分分离,以其寻找具有抑制细胞程序性坏死的目标化合物.方法:采用正相硅胶柱色谱(二氯甲烷-甲醇,20∶1 ～0∶1),反相ODS柱色谱(30％ ～ 100％甲醇),Sephadex LH-20柱色谱、重结晶等方法对毛梗豨莶草乙酸乙酯萃取部位进行分离和纯化,根据理化性质及1H-NMR,13C-NMR波谱数据进行化合物结构鉴定.结果:此次报道从毛梗豨莶草中分离并纯化的9个黄酮类化合物,分别鉴定为:3,4-二甲氧基-2',4'-二羟基查尔酮(1);7-0-(β-D-glucopyranosyl)-galactin(2);7,3',4'-三羟基黄酮(3);5,6,7,3',4',5'-六甲氧基黄酮(4);8,3',4'-三羟基-7-甲氧基二氢黄酮(5);5,4'-二羟基-7,3'-二甲氧基二氢黄酮醇(6);7,4'-二羟基-3'-甲氧基二氢黄酮(7);木犀草素(8);槲皮素(9).结论:化合物1～7为首次从该植物中分离得到.
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石草鞋化学成分分离鉴定
目的:研究石草鞋乙醇提取物的化学成分,对石草鞋全草进行分离鉴定.方法:取石草鞋全草,用90％乙醇回流提取,经低压浓缩后得石草鞋浸膏.将上述浸膏加水超声溶解后依次用石油醚、二氯甲烷和正丁醇萃取.将所得正丁醇部分萃取物过硅胶色谱柱,以石油醚-丙酮-甲醇(80∶20∶0 ～0∶20∶80)系统梯度洗脱,经过结晶、重结晶、离心分离、过硅胶和LH-20羟丙基葡聚糖凝胶(Sephadex LH-20)纯化.将二氯甲烷萃取物以石油醚-丙酮-甲醇(50∶50∶0)系统梯度洗脱,合并相同组分,再经过离心分离、硅胶和葡聚糖Sephadex LH-20等反复分离、纯化.根据ESI-MS,1H-NMR和13C-NMR等波谱数据分析鉴定结构.结果:从石草鞋乙醇提取物正丁醇部分中鉴定了7化合物,二氯甲烷部分中鉴定了8化合物.分别鉴定为对羟基苯甲醛(1),3,5-二甲氧基4-羟基苯甲酸(2),苯甲酸(3),桂皮酸(4),丹皮酚(5),槲皮素(6),6,7-二羟基香豆素(7),阿魏酸(8),对羟基苯甲酸(9),2,3-二羟基苯甲酸(10),3,4-二羟基苯甲酸(11),齐墩果酸(12),金丝桃苷(13),没食子酸(14),β-谷甾醇(15).结论:所有化合物均为首次从该植物中分离得到.
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药用大黄地上部分化学成分
目的:对蓼科Polygonaceae植物药用大黄Rheum officinale的干燥地上部分进行化学成分研究,从物质基础的角度探寻其作为药用资源的可能性.方法:取干燥药用大黄地上部分5 kg依次用95％,75％乙醇回流提取,减压回收溶剂至无醇味,分别用石油醚、乙酸乙酯萃取,采用多种色谱技术对乙酸乙酯部分及萃取后剩余的水相进行分离纯化,应用1H-NMR,13C-NMR,2D NMR,MS等现代分析技术进行结构鉴定.结果:从乙酸乙酯部分及水相中共分离鉴定了16个化合物,分别为4-methyl-6,8-dihydroxy-7H-benz[de] anthracen-7-one(1),大黄素-8-甲醚(2),emodin bianthrones B(3),emodin bianthrones A(4),6'-乙酰基-大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷(5),6'-乙酰基-大黄素甲醚-8-O-β-D-葡萄糖苷(6),二氢高良姜醇(7),rumexneposides B(8),迷人醇(9),槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(10),杨梅素-3-O-β-D-葡萄糖苷(11),2"-O-galloylvitexin(12),槲皮素-3-O-刺槐双糖(13),山柰酚-3-O-芸香糖苷(14),1-methyl-1,2,3,4-tetrahydro-f-carboline-3-carboxylic acid(15),kaempferol-3-O-[6"-O-(3-hydroxy-3-methylglutaroyl)glucoside] (16).其中6个蒽醌类化合物(2 ～6,9),7个黄酮类化合物(7,10～14,16),1个吲哚类化合物(15)及2个酚类化合物(1,8).结论:化合物1～16均为首次从大黄属中分离得到.经综合对比,发现药用大黄地上部分的化学成分与传统药用部位根及根茎相似,主要为蒽醌类、黄酮类、酚类化合物等.这为大黄地上部分药用资源的开发利用提供了一定的化学依据.
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吴茱萸UPLC指纹图谱的建立及质量评价
目的:建立吴茱萸超高效液相色谱(UPLC)指纹图谱分析方法,对不同品种、不同产地吴茱萸药材的质量进行较全面的评价.方法:采用ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱(2.1 mm ×100 mm,1.7 μm),以乙腈-0.1％甲酸水为流动相进行梯度洗脱,检测波长300,215 nm,流速0.4 mL·min-1,柱温35℃.采用相似度评价、聚类分析及偏小二乘法判别分析对37批样品的指纹图谱进行分析.结果:建立了吴茱萸药材的UPLC指纹图谱及共有模式,标定了34个共有峰,采用对照品比对,指认出17个共有峰.37批样品的相似度在0.703 ～0.973.不同来源的吴茱萸药材指纹图谱轮廓基本一致,化学成分的相对含量在较大范围内波动.聚类分析和偏小二乘判别分析结果表明,化学成分的相对含量与药材品种、产地没有明显的相关性,而与药材的千粒重在一定程度上相关;吴茱萸次碱、吴茱萸碱、新绿原酸、绿原酸、吴茱萸卡品碱、柠檬苦素是差异较大的6个成分.结论:该方法简便、快速,可有效、全面地用于吴茱萸药材的质量评价;控制吴茱萸药材质量的关键是把握“近成熟”这一采收时间环节.
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消栓通络颗粒对缺血性中风风痰瘀阻证的早期干预
目的:探讨消栓通络颗粒早期干预对缺血性中风(风痰瘀阻证)患者康复的疗效,及对炎症因子和神经因子的影响.方法:将160例患者按SAS软件生成的随机按数字表法分为对照组和观察组.两组均参照指南给予综合内科处理和康复措施.对照组给予针刺和推拿的中医康复措施,观察组在对照组基础加用消栓通络颗粒,12 9/次,3次/d,温开水冲服.两组疗程均为4周.分别于治疗前、治疗后7,14,28 d进行美国国立卫生院神经功能缺损(NIHSS)评分评价;采用功能独立性评定量表(FIM)评定日常生活活动能力,采用四肢简化Fugl-Meyer功能量表(FMA)评价肢体的功能活动,致残/病死情况采用Rankin修订量表(mRS)评价;检测治疗前后可溶性黏附分子-1(SICAM-1),高敏C反应蛋白(hs-CRP),白细胞介素-6(IL-6),肿瘤坏死因子-α(TNF-α),S100-β蛋白(S100-β),血管生成素(ANG-1)和内皮素-1(ET-1)水平.并进行安全性评价.结果:观察组疾病疗效总有效率为89.47％,优于对照组的77.03％(x2=4.182,P ＜0.05);经重复测量的方差分析,治疗后两组患者NIHSS评分均呈下降趋势(F对照=7.026,F观察=7.683,P＜0.05),治疗后14 d和28 d观察组NIHSS评分均低于对照组(P ＜0.05,P＜0.01);治疗后观察组FIM和Fugl-Meyer(上、下肢)评分及总分均高于对照组(P＜0.01);治疗后观察组PRO量表症状、心理维度评分及总分均低于对照组(P＜0.01);经秩和检验,观察组致残/病死情况轻于对照组(P＜0.05);治疗后观察组血清SICAM-1,hs-CRP,IL-6和TNF-α水平均低于对照组(P＜0.01);治疗后观察组血清S100-β,ANG-1和ET-1水平低于对照组(P＜0.01).结论:在综合治疗方案中,消栓通络颗粒能减轻致残程度和提高患者和临床疗效,并能抑制SICAM-1,hs-CRP,IL-6和TNF-α炎症因子表达,调节S100-β,ANG-1和ET-1因子,起到减轻炎症反应,保护神经细胞,促进神经功能康复的作用.
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喜炎平联合双水平正压无创通气治疗痰热壅肺型AECOPD合并呼吸衰竭与肺炎的疗效及对PCT,sTREM-1和生活质量的影响
目的:观察喜炎平注射液联合双水平正压无创通气(BiPAP)治疗痰热壅肺型慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)合并呼吸衰竭与肺炎的疗效,及对降钙素原(PCT),可溶性髓样细胞触发受体-1(sTREM-1)和生活质量的影响.方法:将150例AECOPD合并呼吸衰竭与肺炎患者按照随机数字表法分为观察组和对照组,各75例.2组均予以吸氧,抗感染,平喘,BiPAP呼吸机辅助通气等常规治疗,观察组在上述治疗基础之上,给予喜炎平注射液治疗,连续治疗10 d.结果:本研究共入选153例患者,1例自行退出,1例不能按照本方案治疗,1例因出现肺性脑病,转入重症监护室(ICU)行有创机械通气治疗,故符合本方案者150例.观察组、对照组总有效率分别为84％,69％,观察组优于对照组(P＜0.05).两组肺功能[1s用力呼气容积(FEV1),呼气峰值流速(PEF)],血气分析(pH,PaCO2,PaO2)和慢性阻塞性肺疾病评估测试(CAT)评分均较治疗前改善,观察组改善优于对照组(P＜0.05).治疗后,两组炎症相关因子sTREM-1,PCT水平下降(P＜0.05).组间比较,治疗后观察组sTREM-1,PCT血清水平低于对照组(P＜0.05).结论:BiPAP呼吸机辅助通气联合喜炎平注射液治疗痰热壅肺型AECOPD合并呼吸衰竭与肺炎疗效较好,能迅速缓解临床症状,改善呼吸衰竭,提高生活质量和运动耐力,降低血清炎症因子水平.
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小儿肺咳颗粒治疗儿童感染后咳嗽的疗效与作用机制
目的:观察小儿肺咳颗粒治疗儿童感染后咳嗽的临床疗效及对血清降钙素原基因相关肽(CGRP),半胱氨酰白三烯(CysLTs),肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-8(IL-8)水平的影响.方法:170例患儿采用随机数字表法,按就诊先后分为对照组和观察组各85例.对照组采用孟鲁司特钠咀嚼片,＜6岁者,4 mg·d-1,6 ～ 12岁剂量为5 mg·d-1,1次/d.严重咳嗽者加布地奈德气雾剂,0.5 mg/次,2次/d,雾化吸入.观察组在对照组治疗的基础加用小儿肺咳颗粒,＜4岁,3g/次,4 ～6岁,6g/次,6～12岁9g/次,3次/d.两组疗程均为2周.进行咳嗽程度评分,包括日间和夜间咳嗽情况,及咳嗽视觉模拟评分(VAS);对日间咳嗽、夜间咳嗽、痰黏稠、咯痰清稀、咽痒、神疲、纳呆、肢倦、声重等中医证候进行治疗前后评分;咳嗽生活质量采用莱塞斯特咳嗽问卷(LCQ),治疗前后各评价1次;检测治疗前后血清CGRP,CysLTs,TNF-α和IL-8水平;并进行安全性评价.结果:对照组咳嗽消失率39.42％,观察组咳嗽消失率62.5％,观察组咳嗽消失率高于对照组(x2=8.601,P＜0.01),观察组平均咳嗽消失时间短于对照组(P＜0.01);观察组中医疗效总有效率为97.5％,高于对照组的83.54％(x2=9.061,P＜0.01);治疗后观察组日间咳嗽、夜间咳嗽和咳嗽VAS评分均低于对照组(P＜0.01);治疗后观察组LCQ量表各维度(生理、心理、社会)和总分均高于对照组(P＜0.01);治疗后观察组患儿血清CGRP,CysLTs,TNF-α和IL-8水平均低于对照组(P＜0.01).治疗时未发现与小儿肺咳颗粒相关不良反应.结论:小儿肺咳颗粒治疗儿童感染后咳嗽能有效的减轻咳嗽程度,缩短咳嗽病程,提高咳嗽的消失率和中医临床疗效,并能显著提高患者生活质量,其作用机制可能与下调CGRP,CysLTs,TNF-α和IL-8水平,减轻气道炎症反应、降低气道高反应和咳嗽反射敏感性有关.
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交泰丸加减方干预心肾综合征进展期心肾功能恶化的临床观察
目的:观察交泰丸加减方对心肾综合征进展期患者心肾功能的改善作用.方法:60例心肾综合征进展期患者根据完全随机设计原则分为治疗组和对照组,在规范的西药治疗基础上,治疗组加用交泰丸加减,疗程14 d,观察气喘、水肿、尿少等主要中医症状、心功能、肾功能变化,评价药物疗效.结果:与对照组比较,治疗组患者治疗后症状总积分明显减少(P＜0.05);中医证候改善优于对照组(P＜0.05).与治疗前比较,两组治疗后纽约心脏病协会(NYHA)心功能分级显著改善(P＜0.01);治疗组疗后B型脑钠肽前体(NT-proBNP)显著下降(P＜0.01),与对照组比较,治疗组NT-proBNP下降显著(P＜0.01);与对照组比较,治疗组治疗后尿素氮(BUN)明显下降(P＜0.05).与治疗前比较,两组治疗后血胱氨酸蛋白酶抑制物-C(Cys-C)均明显下降(P＜0.05),治疗组下降显著(P＜0.01),与对照组比较,治疗组Cys-C下降明显(P＜0.05).结论:交泰丸加减方能改善心肾综合征进展期患者心肾功能恶化.
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花青素对肺癌细胞相关炎性因子信号转导通路作用的研究进展
花青素(anthocyanin)是一类广泛存在于植物中的水溶性天然色素.目前研究发现,花青素具有抗炎、抗氧化、抗衰老、抗增殖功效,能够选择性的抑制癌细胞的生长,降低心血管疾病等.花青素可通过抑制白细胞介素(IL),环氧酶-2(COX-2),核转录因子-κB(NF-κB)等的表达实现其生物功能.肺癌作为我国恶性肿瘤中发病率和死亡率高的疾病,其发生发展在一定程度上与局部的持续炎症状态有关.目前,在肺癌的综合治疗模式中,中医药能够明显增强整体的治疗疗效.炎症又被称为“癌症的第7大特征”,在炎症和肿瘤中发挥重要作用.IL-6,COX-2,肿瘤坏死因子-α(TNF-α)等炎性因子与肺癌的发生发展密切相关.在炎症与肺癌的关系中,存在着多种信号转导通路,其中与肺癌发展较为密切的主要是NF-κB和两面神激酶(Janus kinase,JAK)/信号传导及转录激活因子(STAT)通路.IL-6是一种多效性细胞因子,在信号传递过程中,丝裂原活化蛋白激酶(MAPK),STAT以及磷脂酰肌醇3激酶(PBK)等信号途径中的多种蛋白参与了IL-6在靶细胞中的信号转导,形成癌蛋白(Ras)/MAPK途径,JAK/STAT途径,PI3K等介导的信号通路而发挥其生物学功能.某些细胞内外刺激因子可使COX-2表达急剧增加,产生前列腺素类物质如前列腺素E2(PGE2)等.肿瘤细胞内PGE2合成分泌增加后,可促进细胞增殖、迁移及抑制肿瘤细胞凋亡.近年来诸多研究认为,IL-6和COX-2与花青素的功能实现有关,且IL-6和COX-2的信号传导相互影响,而这些细胞因子的详细作用机制可能为肺癌的治疗提供新方法.本文主要介绍花青素对肺癌细胞相关炎性因子信号转导通路作用的目前的研究状况.
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滇黄精研究进展及黄精研究现状
黄精Polygonati Rhizoma是百合科Liliaceae多年生草本植物,为我国传统药材,具有补气养阴,健脾,润肺,益肾的功效.迄今为止已发现40余种该属植物,我国约有31种.2010版《中华人民共和国药典》收载了3种黄精(黄精Polygonatum sibiricum,滇黄精P.kingianum和多花黄精P.cyrtonema).黄精是传统补益类中药,集药用、食用、观赏和保健于一身,具有极高的经济价值和社会效益,有着巨大的开发潜力和广阔的市场前景.黄精化学成分多样,药理活性广泛,在增强免疫力、调节机体平衡、延缓衰老等保健方面,和治疗糖尿病、动脉粥样硬化、肿瘤等疾病方面,都极具开发价值.滇黄精是中药黄精的3个基源品种之一,分布于以云南为中心的西南地区,以块大、色黄、润泽、断面透明的品质著称.近年来,市场需求不断增大,野生资源却不断萎缩,相对需求量急剧上升.为合理开发云南的滇黄精资源,本文通过查阅上1960年代以来有关黄精的研究文献,总结和阐述黄精在历史记载、植物分类、资源分布、生物学特性、生药鉴定、品质评价、化学成分、药理作用、人工栽培和产品开发等各方面的研究进展和现状,为促进滇黄精的基础研究和综合利用提供有益的参考.
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单味中药抗流感病毒研究进展
流行性病毒感冒是由流感病毒感染引起的急性呼吸道传染病.我国有着丰富的中草药资源,中医药防治流行性感冒,价格低廉,效果明显,易于普及,有着广阔的发展前景.从古至今用中药治疗普通感冒、病毒性感冒或流行性感冒及退热疗效十分显著.许多中医药学者利用现代科学技术手段,结合传统的中医药基础理论,对具有抗流感病毒的单味中药作了较为深入的研究,提供了抗流行性感冒病毒的平台,取得了丰硕的成果,已筛选出了大批对流感病毒有效的中草药及其复方制剂.鉴于中药在抗流感病毒方面的优势,本研究以查阅文献方法为主,就目前单味中药的研究状况给予总结,主要包括具有直接抗流感病毒作用和间接抗流感病毒作用的中草药;直接抗流感病毒作用的中药以板蓝根、大青叶、金银花、连翘、鱼腥草等为代表药,间接抗流感病毒作用的中药以儿茶、栀子、柴胡、甘草等为代表,总结了其抗流感病毒活性成分及相应中药部位的研究及作用机制,借鉴目前的研究成果,希望对进一步深入研究有一定的指导意义.
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栀子金花丸化学成分的UPLC-Q-TOF-MS/MS快速鉴定与分析
目的:采用超高效液相色谱串联四极杆飞行时间高分辨率质谱技术(UPLC-Q-TOF-MS/MS)对栀子金花丸整方的化学成分进行定性分析.方法:采用Waters ACQUITY BEH C18超高效液相色谱柱(2.1 mm x100 mm,1.7 μm),流动相0.1％甲酸乙腈溶液-0.1％甲酸水溶液梯度洗脱,流速0.4 mL· min-1,以正、负离子模式扫描的一级和二级质谱信息,结合文献报道,对栀子金花丸的主要色谱峰进行归属鉴别.结果:根据质谱裂解规律、保留时间及参考文献等信息,初步推测鉴定出65个化学成分,其中,20个黄酮类成分,9个环烯醚萜类成分,8个有机酸类成分,6个生物碱类成分,6个蒽醌类成分,4个甾体皂苷类成分,3个鞣质类成分,3个二萜色素类成分,3个双苯吡酮类成分,1个单萜类成分,1个二蒽酮类成分和1个柠檬苷素类成分.结论:建立的方法分离度好、灵敏度高,可同时对栀子金花丸不同类型化合物进行快速分析,有助于开展进一步的活性成分和质量控制研究.
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甘草总黄酮微海绵的制备及体外释放度评价
目的:优选甘草总黄酮微海绵的制备工艺并考察其体外释放度.方法:利用类乳剂溶媒扩散法制备甘草总黄酮微海绵,以微海绵得率、包封率及分散系数为指标,通过星点设计-效应面法考察聚乙烯醇用量、药物与乙基纤维素的比例、搅拌速度对甘草总黄酮微海绵制备工艺的影响.利用紫外分光光度法测定甘草总黄酮微海绵的包封率,检测波长335 nm;建立HPLC同时测定甘草总黄酮中甘草苷、异甘草苷、甘草素、异甘草素、甘草查尔酮A和光甘草定的含量,检测波长300 nm,流动相乙腈-甲醇-0.2％磷酸水溶液梯度洗脱;利用透析法比较甘草总黄酮及甘草总黄酮微海绵中6个成分的体外释放度.结果:甘草总黄酮微海绵的佳制备工艺为聚乙烯醇用量2.69％,药物-乙基纤维素(6∶1),搅拌速度1 100 r·min-1,搅拌时间4h.8h内甘草总黄酮中甘草苷、异甘草苷、甘草素、异甘草素、甘草查尔酮A和光甘草定的累积释放度分别为87.47％,86.83％,76.98％,78.48％,86.58％和56.58％,24 h内甘草总黄酮微海绵中这6个成分的累积释放度分别为91.45％,89.74％,77.57％,82.64％,87.74％和67.74％.结论:利用类乳剂溶媒扩散法制备的甘草总黄酮微海绵粒径大小均匀、工艺稳定且操作简便.甘草总黄酮微海绵具有明显的缓释作用.
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运用代谢组学方法探讨淫羊藿水段组分对代谢轮廓靶点的干预作用
目的:运用代谢组学方法分析淫羊藿水段组分对正常大鼠尿液中内源性物质代谢的影响,通过寻找相关代谢途径及潜在作用靶点来探究其标志物表达的差异是否会随着体液代谢的循环分布影响着机体的不同系统功能,从而产生潜在的干预作用.方法:SD大鼠分为空白组和淫羊藿水段组分给药组,每组10只,给药组每天按87.3 mg·kg-1给予淫羊藿水段组分1次,空白组给予等量生理盐水,连续灌胃20 d,于后1次给药后用代谢笼收集大鼠12h尿液,经处理供UPLC-Q-TOF/MS分析,正离子扫描模式下电喷雾离子源(ESI),毛细管电压1.3 kV,样本锥孔电压60 V;负离子扫描模式下ESI,毛细管电压1.5 kV,样本锥孔电压70 V.结果:鉴定出10个潜在生物标志物,6条主要代谢通路,发现淫羊藿水段组分可通过N,N'-双(3-氨基丙基)-1,4-丁二胺,N-(3-氨基丙基)-1,4-丁二胺的高表达起到对心脑血管疾病的保护作用,低表达的N-(ω)羟基-L-精氨酸和β-酪氨酸分别表现出不利于肿瘤和神经性疾病的预防.结论:淫羊藿水段组分对正常大鼠心脑血管疾病有显著的保护作用;对神经系统及肿瘤相关疾病存在着药效与毒性共存的特点.其作用机制与氧化胺代谢、酪氨酸代谢、鞘脂类代谢、精氨酸和脯氨酸代谢等通路有关.
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差异蛋白质组学法探索大承气汤优化方治疗便秘小鼠的生物学基础
目的:应用差异蛋白质组学方法探索大承气汤优化方治疗便秘小鼠的生物学基础.方法:实验动物分为正常组、模型组及大承气汤优化方组.模型组、大承气汤优化方组小鼠按50 mg·kg-1灌胃给予复方地芬诺酯混悬液以制备便秘模型,正常组小鼠则给予等量生理盐水.大承气汤优化方组按31 g·kg-1灌胃给予大承气汤优化方药液,正常组及模型组小鼠则给予等量生理盐水.完成药效指标检测后,处死动物,称取小鼠大肠组织,提取蛋白样品,经纳升级高效液相色谱联用线性离子阱/静电场轨道阱高分辨组合式质谱(NanoLC-LTQ Orbitrap Elite)系统分析检测,Protein Discovery软件进行蛋白质搜库,Sieve v2.1软件对所有样本蛋白进行相对定量分析.结果:与模型组相比,大承气汤优化方组小鼠的肠组织蛋白表达上调或下调且与正常组变化方向一致的有77个.经文献检索分析表明,以上蛋白生物学功能一方面集中于促进糖脂代谢、三羧酸循环、生物氧化及能量代谢等,由此增加机体对大肠蠕动的供能,另一方面表现为增强肠道平滑肌的收缩功能,以促进肠道蠕动,缓解便秘.结论:差异蛋白质组学法找出的相关蛋白靶点及其涉及的生物体调控通路极可能是大承气汤优化方治疗便秘小鼠的生物学基础.
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中药重楼全球产地生态适宜性分析
在野外调查和数据收集的基础上,结合药用植物全球产地生态适宜性分析系统(geographic information system for global medicinal plants,GMPGIS),对中药重楼全球产地生态适宜性区域进行分析和评价.以重楼药材基原物种云南重楼Paris polyphylla var.yunnanensis和七叶一枝花P.polyphylla vat.chinensis道地产区、主产区与野生分布区的采样点为依据,选取冷季平均气温、热季平均气温、年平均气温、年均降水量、年均相对湿度、年均日照强度和土壤类型7个生态指标作为主要参考因子,经过生态相似性比对分析得出云南重楼与七叶一枝花在全球范围内的生态适宜性产区和潜在种植区.结果表明云南重楼和七叶一枝花的大生态相似度区域相似,在全球范围内主要分布在中国、巴西、美国、赞比亚、刚果、缅甸、坦桑尼亚、墨西哥、安哥拉及玻利维亚等19个国家.其中,中国的大生态适宜性产区主要包括云南、四川、广西、湖南、湖北、广东、贵州、江西、福建和安徽等16个省区.该研究表明GMPGIS可以较好地应用于中药材引种及生产区划,研究结果可为重楼药材的资源保护和可持续利用提供参考依据.
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常见市售蒲公英及混伪品的果实微性状鉴别
目的:由于国内对蒲公英药材及混伪品果实的微性状鉴别研究较少,本文便对目前市场上常见的几种蒲公英药材及其混伪品药材的果实进行微性状鉴别研究.方法:采集蒲公英、碱地蒲公英、东北蒲公英、黄鹌菜、剪刀股、苦苣菜药材的果实,利用中药微性状鉴定法对蒲公英药材及混伪品的果实进行鉴别.结果:蒲公英、碱地蒲公英、东北蒲公英药材果实表面具瘤状突起,黄鹌菜、剪刀股、苦苣菜药材果实表面为小刺状突起,无瘤状突起;蒲公英、碱地蒲公英、东北蒲公英、剪刀股有喙基,黄鹌菜、苦苣菜果实无;碱地蒲公英喙上有黑褐色的茸毛,蒲公英、东北蒲公英、剪刀股无;蒲公英冠毛侧毛稀疏而较长,碱地蒲公英稀疏而短,东北蒲公英相对较密而长;黄鹌菜冠毛刺状物密集,先端尖锐,苦苣菜无明显侧枝,刺状突起短而钝,剪刀股有明显的刺样突起,稍短而密集.结论:3种蒲公英属药材及3种混伪品药材的果实微性状可以作为鉴别特征,为蒲公英药材日常检验提供参考,以期对市场上流通的蒲公英药材鉴别提供一定帮助,保证其质量,为药材的鉴别提供借鉴和临床安全用药奠定基础.
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基于主成分分析和聚类分析的栀子种质资源评价
目的:通过探讨栀子种质资源之间的理化品质差异,为新品种选育及定向育种提供理论支持.方法:对24个种质来源的栀子种苗的主要农艺性状进行测定,采用UPLC对栀子药材中栀子苷和西红花苷-Ⅰ,西红花苷-Ⅱ的含量进行测定,并采用描述性统计、主成分和聚类分析方法对栀子种质来源和品质关系进行了分析.结果:24个来源的栀子的根系长度、叶形指数、叶片数和地径4项指标未表现出差异.江西1,2,4,浙江1,3,4等6个药材质量不合格,栀子苷质量分数未达到2015年版《中国药典》的规定(1.8％).对存在差异的11项品质指标进行了主成分分析,根据主成分解释总变量和碎石图提取了4个主成分反映原来变量85.14％的信息.第1主成分主要综合了叶长、叶宽指标的信息,即种苗叶形因子;第2主成分主要综合了栀子苷,西红花苷-Ⅰ,西红花苷-Ⅱ和西红花苷类指标的信息,即药材内在品质因子;第3主成分主要综合了种苗鲜重和干重的信息,即种苗质量因子;第4主成分主要综合了苗高、苗高与根长比、叶片张开程度的含量信息,即种苗苗型因子.结合主成分分析综合评分表直观地反映出栀子品质的优良顺序;聚类分析将24个种质的栀子分为3类,聚类分析与综合评分排序表对种质资源类别的判定结果较为一致.结论:本研究表明四川1,3,4以及江西7等栀子品质较好,可作为新品种选育及定向育种的优良材料.
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基于系统药理学探索莪术有效成分的药理作用机制
目的:通过一系列系统药理学方法初步探讨了莪术有效成分的药理作用机制.方法:利用中药系统药理学分析平台(TCMSP)数据库获取莪术中有效成分;从PharmMapper Server中获得莪术有效成分的靶蛋白;UniProt数据库中获取靶标的基因名称并于CTD数据库中获取基因相对应的疾病;运用网络可视化软件,构建莪术有效成分-靶点-疾病相互作用网络;借助DAVID工具进行莪术有效成分蛋白质群的基因本位论(GO)分析和靶蛋白作用通路的富集分析.结果:文本挖掘结果表明莪术主要相关疾病有肿瘤性疾病、神经系统疾病和代谢性疾病;GO分析结果表明莪术主要通过类固醇激素介导的信号通路、从RNA聚合酶Ⅱ启动子的转录起始、凋亡过程的负调控、肽基络氨酸磷酸化、蛋白质自磷酸化、视黄酸受体信号通路、从RNA聚合酶Ⅱ启动子的转录的正调节等作用发挥生物学功能;信号通路富集结果表明莪术主要作用蛋白与癌症途径,PPAR信号通路,癌症中的蛋白多糖,非小细胞癌,PI3K-Akt信号通路等信号通路有关.结论:莪术可能主要通过调控癌症途径,PPARP,PI3K-Akt信号通路等多途径发挥其药理作用.综合运用系统药理学的方法可以实现快速而全面地分析药物的药理作用.
| 年 | 期数 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 |
| 2017 | 01 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 |
| 2015 | 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2001 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2000 | 01 02 03 04 05 06 |
