中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae 중국실험방제학잡지
- 主管单位： 国家中医药管理局
- 主办单位： 中国中医科学院中药研究所 中华中医药学会
- 影响因子： 1.62
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1005-9903
- 国内刊号： 11-3495/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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积雪草醇提物对2型糖尿病ZDF大鼠肝脏胰岛素抵抗的影响
目的:探讨积雪草醇提物对2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM) ZDF(Zucker diabetic fatty)大鼠肝脏胰岛素抵抗的作用机制.方法:6只雄性ZDF(fa/+)大鼠设为正常组,成模的雄性ZDF(fa/fa)大鼠18只根据体重及随机血糖分层随机分为3组,模型组(生理盐水10 mL·kg-1),二甲双胍(二甲双胍片0.18 g·kg-1·d-1)组,积雪草(积雪草醇提物0.1g·kg-1·d-1)组.每2周监测大鼠体重,随机血糖(random blood glucose,RBG),空腹血糖(fasting blood glucose,FBG);给药6周后取材,检测大鼠空腹血糖及空腹血清胰岛素(fasting serum insulin,FINS),并计算胰岛素抵抗指数(homeostasis model of assessment for insulin resistence index,HOMA-IR).采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time polymerase chain reaction, Real-time PCR)法检测各组大鼠肝脏组织中胰岛素受体2(insulin receptor substrate 2,IRS2),3-磷酸肌醇依赖性蛋白激酶1(3-phosphoinositide-dependent protein kinasel,PDKl)及葡萄糖转运蛋白2(glucose transporter 2,GLUT2)mRNA的表达情况;免疫组化法观察肝脏中PDK1,IRS2蛋白表达情况.结果:与模型组比较,积雪草组及二甲双胍组均可显著改善ZDF大鼠体重,RBG,FBG水平及HOMA-IR(P ＜0.01);积雪草组IRS2,PDK1及GLUT2 mRNA相对表达量及PDK1,IRS2蛋白表达水平显著增加(P＜0.01).结论:积雪草醇提物能有效改善2型糖尿病ZDF大鼠肝脏胰岛素抵抗,其作用机制可能与胰岛素信号传导通路中IRS2,PDK1的表达及葡萄糖转运中GLUT2的表达相关.
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柴越汤对抑郁症大鼠HPA轴的调节作用
目的:探讨柴越汤对慢性应激抑郁模型大鼠下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴的作用及可能的机制,为临床用药提供理论依据.方法:将筛选合格的60只雄性Wistar大鼠适应性饲养1周后,随机分成正常组、抑郁模型组、阳性组、中药治疗组(包括柴越汤组、小柴胡汤组和越鞠丸组).除正常组外,其余各组接受孤养结合慢性轻度不可预见性不同应激源的刺激21d制备抑郁模型.造模后按临床等效剂量给予药物干预,持续给药21 d,给药期间,各造模组大鼠均继续给与刺激.通过体重变化、糖水消耗和敞箱实验进行行为学评价,海马组织形态学变化、大鼠血浆促肾上腺皮质激素(ACTH),皮质酮(CORT)的变化,脑内海马糖皮质激素受体(GR)和盐皮质激素受体(MR)蛋白表达的变化,探讨柴越汤的抗抑郁作用机制.结果:与模型组比较,各给药组均可显著提高大鼠体重、增加大鼠糖水消耗比率和行为学得分(P＜0.05),逆转抑郁模型大鼠过高的血浆ACTH和CORT水平,上调大鼠的海马GR蛋白的表达,而对MR蛋白无影响,在中药组中以柴越汤效果更好.结论:柴越汤对抑郁症具有良好的疗效,拆方后小柴胡汤组、越鞠丸治疗抑郁症疗效较柴越汤略有下降.其作用机制可能通过增强海马GR蛋白的表达,降低血浆ACTH含量和血清CORT含量而起到抗抑郁作用.
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参莲提取物对LPS诱导的巨噬细胞炎症反应的影响
目的:探讨参莲(SL)提取物在炎症调节中发挥的治疗性作用及其机制.方法:分别以小鼠巨噬细胞Raw264.7和小鼠腹腔巨噬细胞为实验对象,利用脂多糖(LPS)诱导炎症模型,SL提取物低、中、高剂量(5,10,20 mg·L-1)药物处理24 h,另设空白组,使用酶联免疫吸附测定(ELISA)法及实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测小鼠Raw264.7及腹腔巨噬细胞肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-1β(IL-1β)含量及mRNA表达;使用蛋白质免疫印迹法(Western blot)对小鼠Raw264.7核转录因子-κB(NF-κB)信号通路中的p65及磷酸化p65(p-p65)蛋白表达情况进行检测,采用免疫荧光法对小鼠Raw264.7及腹腔巨噬细胞NF-κB p65分子进行亚细胞定位观察SL提取物是否能够影响其入核.结果:与空白组比较,模型组小鼠Raw264.7及腹腔巨噬细胞TNF-α,IL-1ββ含量及mRNA表达均显著升高,小鼠Raw264.7 p-p65/p65蛋白表达显著升高(P＜0.01),免疫荧光观察显示模型组Raw264.7及腹腔巨噬细胞均可见明显入核行为;与模型组比较,SL提取物低、中、高剂量组明显降低小鼠Raw264.7及腹腔巨噬细胞TNF-α,IL-1β含量及mRNA表达(P ＜0.05,P＜0.01),显著降低小鼠Raw264.7及p-p65蛋白(P＜0.01),SL提取物中剂量组可明显减弱Raw264.7及腹腔巨噬细胞入核行为.结论:SL提取物能够抑制巨噬细胞的炎症反应,其机制可能与影响巨噬细胞炎性因子的分泌及NF-κB信号通路有关.
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双黄调脂方及其有效成分发挥降脂作用的探讨
目的:通过体内外实验研究双黄调脂方的降脂作用,探讨其降脂机制.方法:昆明种小鼠随机分为正常组、模型组、阳性药组(血脂康,0.6 g·kg-1)和双黄调脂高、低剂量组(22.5,7.5 g·kg-1),观察双黄调脂方对Trtion-WR1339诱导的高血脂模型的影响.基于整体实验,体外实验观察了双黄调脂主要有效成分姜黄素、黄连素、葛根素对油酸(oleic acid,OA)诱导的HepG2细胞模型胆固醇(CHO),甘油三酯(TG),3-羟基-3-甲基戊二酰CoA(HMG-CoA)还原酶,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C),低密度脂蛋白受体(LDL-R),胆固醇7α-羟化酶(CYP7 A1)和脂蛋白脂酶(LPL)含量的影响,探讨其可能降脂途径.结果:与正常组比较,模型组小鼠血清CHO和TG含量显著升高(P＜0.01);与模型组比较,双黄调脂方高剂量组能显著降低模型小鼠血清的CHO,TG水平(P ＜0.05,P＜0.01).体外实验中,与空白组比较,模型组细胞CHO,TG和HMG-CoA还原酶含量显著升高(P ＜0.05,P＜0.01),HDL-C,LDL-R,CYP7A1和LPL含量显著降低(P＜0.05);与模型组比较,姜黄素高剂量组(10 mg-L-1)能显著升高模型细胞HDL-C,LDL-R和LPL含量(P ＜0.05,P＜0.01),降低TG和HMG-CoA含量(P ＜0.05,P＜0.01);黄连素高剂量组(40 mg·L-1)能显著升高模型细胞CHO,HDL-C,LDL-R和CYP7A1含量(P ＜0.05,P＜0.01);葛根素高剂量组(300 mg·L-1)能显著升高模型细胞HDL-C,LDL-R,CYP7A1和LPL含量(P ＜0.05,P＜0.01),降低CHO,TG和HMG-CoA含量(P＜0.05,P＜0.01).结论:双黄调脂方可通过抑制内源性胆固醇合成、促进胆固醇逆转运(RCT)途径和低密度脂蛋白(LDL)受体途径、促进胆固醇转化以及促进甘油三酯降解等多个途径来发挥降脂作用.
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熊果酸对RAW264.7巨噬细胞源性泡沫细胞胆固醇逆转运及对PPAR-γ的基因及蛋白表达的影响
目的:观察不同质量浓度熊果酸(UA)对RAW264.7巨噬细胞源性泡沫细胞促进胆固醇流出的影响及过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(PPA R-γ)转运蛋白的表达,探讨可能作用机制.方法:体外培养RAW264.7巨噬细胞,用20 mg·L-1的氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)孵育48 h诱导成泡沫细胞,采用油红0染色,光镜下鉴定泡沫细胞形态变化,液体闪烁计数仪检测胆固醇的流出率,并用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)及酶联免疫吸附(ELISA)测定PPAR-γ的基因及蛋白表达.结果:巨噬细胞经ox-LDL诱48 h后转化为泡沫细胞,与空白组比较,10,15,20,25 mg·L-1质量浓度UA干预组泡沫细胞的胆固醇流出率上升(P ＜0.01);10,15,20,25 mg·L-1质量浓度UA干预组泡沫细胞内PPAR-γ的基因表达上调(P＜0.01),在一定质量浓度范围内呈剂量依赖性;10,15,20,25 mg·L-1质量浓度UA干预组泡沫细胞内PPAR-γ的蛋白表达增加(P＜0.01),差异有统计学意义.结论:经20 mg·L-1 ox-LDL的诱导后,巨噬细胞分化为泡沫细胞,细胞内脂质大量增加,UA促进巨噬细胞内胆固醇流出,可能与上调细胞内PPAR-γ的表达有关.
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汉防己甲素对人多发性骨髓瘤干细胞增殖、凋亡的影响及机制
目的:研究汉防己甲素对人多发性骨髓瘤干细胞CD138-B细胞增殖、凋亡的影响及作用机制.方法:利用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)比色法检测汉防己甲素对CD138-B细胞增殖的影响;应用流式细胞仪检测汉防己甲素对CD138-B细胞周期的影响以及药物诱导细胞凋亡的作用;应用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测汉防己甲素对CD138-B细胞中裂解的半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶(cleaved-Caspase)-3,cleaved-Caspase-9蛋白表达的影响.结果:与空白组及溶剂组比较,10,20,30,40 μmol·L-汉防己甲素处理6,12,24 h对CD138-B细胞的增殖均具有显著的抑制作用(P＜0.01);与空白组及溶剂组比较,汉防己甲素30,40μmol·L-1时,G0/G1期细胞显著增多(P＜0.01),S期细胞明显减少(P ＜0.05,P＜0.01),汉防己甲素10,20,30,40 μμmol·L-1时,细胞凋亡率显著增加(P＜0.01);与空白组及溶剂组比较,20,30,40μmol·L-1汉防己甲素处理后,cleaved-Caspase-3,cleaved-Caspase-9蛋白表达显著升高(P＜0.01),10 μmol ·L-1汉防己甲素处理时,cleaved-Caspase-3蛋白表达明显增高(P＜0.05).结论:汉防己甲素通过阻滞细胞周期在G0/G1期抑制CD138-B细胞的增殖,通过活化细胞内与凋亡相关蛋白cleaved-Caspase-3,cleaved-Caspase-9促进细胞凋亡.
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珍宝类藏族药珍珠丸系列品种中挥发性成分的GC特征图谱
目的:建立藏族药珍珠丸系列品种(二十五味珍珠丸、七十味珍珠丸)中挥发性成分的特征图谱,对其部分成分归属进行初步判定,为其全面质量评价提供依据.方法:Agilent DB-1毛细管柱(0.25 mm ×30 m,0.25 μm),进样口温度200℃,FID检测器温度320℃;柱温初始温度为60℃,保留1 min,以4℃·min-1的速率升至90℃,保留1 min,再以2℃·min-1的速率升至110℃,保留10 min,再以2.5℃·min-1的速率升至200℃,保留5 min,后以5℃·min-1的速率升至280℃,保留8 min;载气氮气,流速3 mL·min-1,进样量2μL,分流比为5:1.结果:GC特征图谱中标定的共有峰,精密度、稳定性、重复性均达到了要求(RSD＜5.0％),相似度分析中,不同厂家、不同批次的样品各成分的种类差异不大,但成分的比例和量上差异较大.结论:建立的气相特征图谱中,各共有峰分离较好,可为藏族药珍珠丸系列品种的质量评价提供借鉴.
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附子理中丸中制附子的6种生物碱成分含量测定
目的:建立高效液相色谱-三重四级杆串联质谱(HPLC-QQQ-MS)法同时测定附子理中丸中制附子6种生物碱成分含量的方法.方法:采用Thermo Accucore RP-MS色谱柱(2.1 mm×100 mm,2.6μm),以0.1％甲酸水-0.1％甲酸乙腈为流动相,流速0.3 mL·min-1,柱温30℃.质谱条件:采用电喷雾电离源(ESI),正离子检测模式,扫描方式为多反应离子监测模式(MRM),定量分析离子分别为苯甲酰新乌头碱m/z 105.0,苯甲酰乌头碱m/z 105.0,苯甲酰次乌头碱m/z 542.3,新乌头碱m/z572.3,乌头碱m/z 586.3,次乌头碱m/z 556.3.结果:苯甲酰新乌头碱、苯甲酰乌头碱、苯甲酰次乌头碱、新乌头碱、乌头碱、次乌头碱线性范围分别在0.184 80 ～1.848 ng(r =0.999 6),0.035 36 ～0.353 6 ng(r =0.999 6),0.129 60～ 1.296 ng(r =0.999 8),0.011 65 ～0.116 5ng(r =0.999 8),0.002 95 ～0.029 5ng(r =0.999 8),0.036 96 ～0.369 6 ng(r =0.999 8),6种生物碱的含量在一定范围内线性关系良好(r ＞0.999 6).加样回收率在91.93％ ～ 106.70％,RSD均＜6.00％.结论:该方法简单、准确、灵敏、重复性好,可用于附子理中丸中制附子生物碱成分的含量测定.
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首乌藤配方颗粒的HPLC指纹图谱
目的:建立首乌藤配方颗粒的HPLC指纹图谱,并对其主要的共有峰进行成分归属,为其质量控制提供科学依据.方法:采用HPLC方法,测定了不同厂家的15批首乌藤配方颗粒的HPLC指纹图谱,色谱条件:Waters XBridgeTM shield RP18 C18色谱柱,流动相乙腈-0.1％乙酸水溶液,流速1.0 mL·min-1,柱温30℃,检测波长271 nm,进样量15μL.结果:建立了首乌藤配方颗粒的指纹图谱,采用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”计算处理,通过HPLC指纹图谱分析,确定了首乌藤配方颗粒8个共有峰,并确认6个特征峰,分别为没食子酸,原儿茶酸,儿茶素,2,3,5,4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷,大黄素,大黄素甲醚.对照指纹图谱色谱峰丰富,分离度高,匹配确定了主要特征峰,15批首乌藤配方颗粒样品指纹图谱与对照指纹图谱相似度均＞0.86,相似度高,可实现首乌藤配方颗粒化学成分全面和整体的评价,能较好控制首乌藤配方颗粒的质量.结论:该方法简单、准确、重复性好,可以为首乌藤配方颗粒质量控制和评价提供参考.
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液质联用技术评估汞接触污染蟾蜍泌酥中蟾蜍甾烯水平
目的:运用液质联用技术研究重金属汞皮肤接触中华大蟾蜍后生理状态及泌酥中蟾蜍甾烯水平变化,为中药蟾酥品质评价提供参考.方法:配制不同质量浓度的氯化汞溶液(0.5,0.75,1.0 g·L-1)对蟾蜍进行半静水式处理,观察其生理状态,且在30 d后收集蟾蜍耳后腺分泌液,进一步采用液相-质谱联用技术测定蟾蜍泌酥中游离型蟾蜍甾烯的水平,结合HemI热图软件进行数据分析.结果:氯化汞接触明显影响蟾蜍泌酥中蟾蜍甾烯水平,和正常组比较,低质量浓度(0.5 g·L-1)汞污染组有20种蟾蜍甾烯水平明显上调,其中有12个物质发生1.5倍变化.而中质量浓度(0.75 g·L-1),高质量浓度(1.0 g·L-1)污染组分别有15,13种物质发生下调,且大部分为中低脂溶性蟾蜍甾烯(异沙蟾毒精、去乙酰华蟾毒精等).结论:重金属汞污染对蟾蜍甾烯水平有潜在影响,且随着浓度的升高呈现明显降低趋势.
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基于UPLC及一测多评法同时测定苁蓉总苷胶囊中的活性成分
目的:采用“一测多评”(QAMS)技术建立超高效液相法(UPLC)同时测定苁蓉总苷胶囊中6种成分的分析方法,并与标准曲线法进行比较,评价一测多评法用于苁蓉总苷胶囊质量控制的技术适应性和应用可行性.方法:以苁蓉总苷胶囊为研究对象,有机酸类成分以绿原酸为内参物,建立其与咖啡酸的相对校正因子;苯乙醇苷类成分以毛蕊花糖苷为内参物,建立其与管花苷A,异毛蕊花糖苷,松果菊苷间的相对校正因子,同时考察了各相对校正因子的耐用性,并比较该方法与标准曲线法测定结果的差异,以验证一测多评法的准确性和可行性.结果:有机酚酸类成分绿原酸与咖啡酸的相对校正因子为0.538,苯乙醇苷类成分毛蕊花糖苷与管花苷A,异毛蕊花糖苷,松果菊苷间的相对校正因子分别为1.346,1.266和1.135,各相对校正因子的耐用性较好,10批样品QAMS法的计算结果与标准曲线法的测定结果无显著性差异,实验所得的相对校正因子可信.结论:QAMS法可以作为一种简便可靠的质量评价模式用于苁蓉总苷胶囊多种成分的定量测定方法.
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基于扶阳思想探讨益肺宣肺汤对慢性阻塞性肺疾病的影响
目的:基于扶阳思想观察益肺宣肺汤对慢性阻塞性肺疾病急性发作期炎症因子的影响,并探讨其作用机制.方法:随机将2015年1月-2016年6月收治的慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者分为对照组与治疗组,各60例,对照组采用常规抗感染、化痰平喘等对证治疗,治疗组在此基础上加用益肺宣肺汤,检测治疗前后两组患者肺活量(forced vital capacity,FVC),1 s用力呼气量占预计值％(forced expiratory volume in 1 second,FEV1％),FEV1/FVC,超敏C反应蛋白(hypersensitive C reactive protein,hs-CRP),血沉(equivalent series resistance,ESR),白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6),白细胞介素-8(interleukin-8,IL-8),白细胞介素-17(interleukin-17,IL-17),肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)水平,中医证候评分,复发率.结果:两组患者有效率比较差异无统计学意义.与治疗前比较,治疗后两组患者FEV1,FEV1/FVC均明显降低(P＜0.05),两组患者比较差异无统计学意义.与治疗前比较,治疗后两组患者hs-CRP,ESR,IL-6,IL-8,IL-17,TNF-α,中医证候积分均明显降低(P＜0.05),治疗后治疗组上述指标均明显低于对照组(P＜0.05).结论:益肺宣肺汤通过下调炎症因子,提高疾病证候评分,降低复发率,临床疗效以及远期疗效可观.
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肾康宁胶囊对显性糖尿病肾病脾肾气虚证病情进展的延缓作用
目的:探讨肾康宁胶囊对显性糖尿病肾病(DKD)脾肾气虚证患者的临床疗效及对血清核转录因子-κB(NF-κB),转化生长因子-β1(TGF-β1)和血小板源性生长因子(PDGF)水平的影响.方法:将138例患者采用区组随机,按数字表法分为对照组和观察组各69例.对照组口服替米沙坦片,1片/d,和口服阿托伐他汀钙片,10 mg·d-1.观察组西药使用同对照组,并服用肾康宁胶囊,4粒/次,3次/d.两组疗程均为连续治疗24周或至Ⅴ期,并进行24周随访.记录治疗期和随访期病情进展至Ⅴ期的患者数量,或肌酐(SCr)翻版倍等终点事件发生情况;检测治疗前后空腹血糖(FBG),糖化血红蛋白(HbAlc),尿素氮(BUN),血肌酐(SCr),血红蛋白(Hb),血浆白蛋白(ALB),24 h尿蛋白定量(24 h Upr),胆固醇(TC),甘油三酯(TG),高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)检测;进行治疗前后脾肾气虚证评分;检测治疗前后TGF-β1,NF-κB和PDGF水平.结果:观察组临床疗效有效率为78.26％,对照组为57.97％,观察组高于对照组(x2=6.539,P＜0.05);观察组中医证候评分有效率为85.51％,对照组为65.22％,观察组中医证候评分高于对照组(x2=7.649,P＜0.01);观察组终点事件发生率为15.94％,对照组为33.33％,观察组终点事件发生率低于对照组(x2=5.619,P＜0.05);治疗后观察组HbAlc,24 h Upr,BUN和SCr水平均低于对照组(P＜0.01);治疗后观察组Hb,ALB和HDL-C水平均高于对照组(P＜0.01),LDL-C水平低于对照组(P＜0.01),TC和TG组间比较差异无统计学意义;治疗后观察组TGF-β1,NF-κB和PDG水平均低于对照组(P＜0.01).结论:在西医常规治疗的基础上,采用肾康宁胶囊内服治疗DKDⅣ期患者,能改善脾肾气虚证症状、减轻蛋白尿,能调节糖、脂代谢,改善患者营养状况,从而降低终点事件的发生率,对DKD病情起到延缓作用,其作用机制可能通过下调血清TGF-β1,PDGF,NF-κB等细胞因子来实现的.
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清瘟败毒饮合凉隔散加减辅助血必净注射液治疗脓毒症热毒炽盛证的多靶点效应
目的:观察清瘟败毒饮合凉隔散辨证内服辅助治疗对脓毒症热毒炽盛证患者炎症反应、肠屏障功能、凝血功能和血液流变学的影响,以探讨中药对脓毒症患者预后的作用.方法:将118例患者采用区组、分层随机分为对照组和观察组.对照组采用早期目标导向的液体复苏,抗感染,机械通气,营养支持治疗,控制血糖,预防应激性溃疡,抑制毛细血管微栓形成、纠正电解质紊乱、酸碱失衡等综合干预措施.观察组在对照组治疗的基础上采用血必净注射液,100 mg/次,溶于5％的葡萄糖注射液250 mL,静脉滴注,2次/d;和清瘟败毒饮合凉隔散辨证,1剂/d,内服或胃管给药;两组疗程均为7d.预后评估指标采用急性生理及慢性健康评分(APACHEⅡ),感染相关器官功能衰竭估计(SOFA)和血清降钙素原(PCT)3个指标;检测治疗前后肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-6(IL-6),白细胞介素-10(IL-10),白细胞介素-1β(IL-1β)炎症因子;检测治疗前后凝血酶原时间(PT),血浆凝血酶时间(TT),部分凝血酶原时间(APTT),D-二聚体(D-D),血小板(PLT),纤维蛋白(FIB)和血液流变学指标;肠屏障功能指标采用包括血清D-乳酸和内毒素;进行治疗前后热毒炽盛证评分.结果:观察组中医证候疗效总有效率为77.97％,高于对照组的42.37％(x2=15.594,P＜0.01);两组在治疗后APACHEⅡ和SOFA评分呈下降趋势(F对照=6.73,F观察=7.412,P＜0.05),经配对t检验,观察组在治疗第3天和第7天的APACHEⅡ和SOFA评分均低于对照组(P＜0.01);在第7天,观察组血清TNF-α,IL-1β,IL-6水平均低于对照组,IL-10水平高于对照组(P＜0.01);观察组血清D-乳酸、内毒素和PCT水平均低于对照组(P＜0.01);观察组全血高切黏度、全血低切黏度、血浆黏度、红细胞聚集指数、红细胞变性指数改善均优于对照组(P＜0.01);观察组患者FIB,D-D和PLT水平均低于对照组(P＜0.01).结论:在西医综合干预措施的基础上,加用血必净注射液静脉滴注、清瘟败毒饮合凉隔散辨证治疗脓毒症热毒炽盛证患者,能抑制早期炎症反应,控制细菌和毒素移位,能改善凝血功能紊乱状态和机体微循环,降低APACHEⅡ,SOFA评分和血清PCT水平,减轻了病情,起到改善预后的作用.
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大蒜多糖近10年在化学、工艺质量、药理及应用方面的总结
目的:大蒜作为传统的调味品,同时具有良好的药用价值,属药食两用中药.传统上,大蒜主要用于消肿、解毒、杀虫;现代研究表明,大蒜在防治肿瘤、缓解三高、降低胆固醇以及延缓衰老等方面都有良好的药理活性,受到了众多学者青睐.大蒜主要含有蒜氨酸、大蒜辣素[其不稳定,分解生成小分子硫化物,主要包括二丙烯三硫化物(DATS),二烯丙基二硫化物(DADS),二烯丙基硫化物(DAS)等,这些成分也是大蒜油的主要成分],蒜氨酸酶、大蒜挥发油、大蒜皂苷、大蒜多糖、微量元素等;其中,大蒜多糖是大蒜中一类重要的化学成分,它也是大蒜药效的物质基础之一.大蒜多糖相对分子质量在9～10 kDa,属于小分子杂多糖,水解发现其主要含有果糖、葡萄糖等,质量控制主要为检测总多糖和多糖分解后的单糖含量;大蒜中大蒜多糖的含量在70％以上;提取方法主要有回流提取法、超声提取法、酶法等.大蒜多糖具有增强免疫、抗氧化、抗病毒、保肝、保护心肌、防止心肌纤维化等多种生物活性,可开发成药品与保健品;除此之外,它还可以作为食品原辅料,用于食品生产.因此,大蒜多糖具有重要的研究价值和开发利用前景.本文就近10年对大蒜多糖的组成、提取纯化方法、含量测定、药理活性、应用等内容进行了全面归纳总结,为其深入研究开发利用提供一定的参考.
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基于数据挖掘技术的中医学隐性知识显性化分析
隐性知识是知识的核心,中医学隐性知识是中医学的重要组成部分.中医学隐性知识显性化是实现中医学知识有效交流与共享的必要条件,是促进中医学发展与创新的重要保障,但中医学隐性知识显性化过程会受诸多因素的影响.数据挖掘技术能够从大量的、不完全的、模糊的、随机的实际应用数据中,提取隐含在其中的、事先未知的、潜在的、有用的信息和知识.基于数据挖掘技术提取隐性知识的优势,本文围绕关联规则分析、复杂系统熵聚类分析、决策树分析、因子分析、贝叶斯网络分析等数据挖掘技术支持下的中医学隐性知识显性化进行了研究.通过文献分析与整理,以具体数据挖掘技术为分类标准和主线,研究对象涉及单个医家、古代医学典籍及现代临床研究等,研究内容涉及中医病因病机、治则治法、辨证规律、方剂使用规律、药对组方规律及其相关性等多个层面的中医学隐性知识.结果表明,针对研究内容的特点,选取针对性的数据挖掘技术能够实现中医学隐性知识的显性化,这有利于拓展中医学隐性知识显性化的渠道,有利于提高中医学隐性知识显性化的程度,有利于大限度的实现中医学隐性知识显性化与共享.基于数据挖掘技术在中医学隐性知识显性化过程中的积极作用,具有中医特色的数据挖掘传承平台应加以推广、整合与优化,促进中医学的传承与创新.
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基于成分敲出策略辨识四制香附抗痛经的主要效应成分
目的:基于成分敲出策略对四制香附抗痛经的主要药效成分进行初步辨识,为该药材的后续研究提供参考.方法:采用硅胶柱色谱技术结合制备高效液相色谱法(HPLC)对四制香附石油醚部位中具有抗痛经作用的活性成分α-香附酮(A),香附烯酮(B)和sugeonol(C)分别按照敲出A,B,C,AB,AC,BC,ABC的方法不断敲出,从而得到各目标敲出成分A+,B+,C+,AB+,AC+,BC+,ABC+及其相应的阴性样品A-,B-,C-,AB-,AC-,BC-,ABC-,利用HPLC对各目标敲出成分及其阴性样品进行检测,通过小鼠离体子宫平滑肌收缩试验,探究各敲出目标成分及其对应阴性样品、石油醚部位对小鼠离体子宫平滑肌的影响.结果:α-香附酮、香附烯酮和sugeonol这3种成分分别组合敲出的目标成分的抗痛经作用比单独敲出的目标成分强;与石油醚部位比较,阴性样品A-,B-,C-抗痛经作用明显下降;目标成分AB+的抗痛经作用强于敲出目标成分后的阴性样品AB-;阴性样品ABC-仍具有抗痛经作用;各敲出目标成分与其阴性样品的平均抑制率之和均比石油醚部位的平均抑制率大.结论:在中药整体水平上,证明α-香附酮、香附烯酮和sugeonol这3种成分都是香附抗痛经作用的活性成分,并且三者之间可能存在着协同作用,其中α-香附酮与香附烯酮是香附抗痛经作用的主要药效物质,除了目标成分α-香附酮、香附烯酮和sugeonol外,香附中还存在着其他的抗痛经活性成分,各敲出目标成分与其阴性样品(其他成分的混合物)之间均可能存在着拮抗作用.
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栀子微波炮制过程中指标成分及粉末颜色变化的关联性分析
目的:研究栀子微波炮制过程中的指标成分含量变化及其与粉末颜色变化的相关性,为栀子微波炮制品的质量评价提供科学依据.方法:利用HPLC测定栀子微波炮制过程中京尼平-1-β-D-龙胆双糖苷,京尼平苷,西红花苷-Ⅰ,西红花苷-Ⅱ和西红花苷-Ⅲ的含量变化,流动相乙腈-0.2％磷酸水溶液梯度洗脱,流速1 mL·min-1,进样量5 μL,柱温30℃,检测波长238,440 nm.利用紫外分光度法于760 nm处测定总鞣质的含量,分析各指标成分含量变化与颜色量化参数L,a,b的相关性.结果:随着微波炮制时间的延长,温度逐渐升高,京尼平苷、西红花苷-Ⅰ和西红花苷-Ⅱ含量逐渐降低.京尼平-1-β-D-龙胆双糖苷和西红花苷-Ⅲ在初期略有升高,当温度＞ 200℃后基本处于逐渐降低的趋势;总鞣质含量先随温度升高而逐渐升高,并在5 min时达高值,之后迅速降低.京平尼苷含量与L呈正相关;西红花苷-Ⅰ含量与a,b呈正相关.结论:栀子微波炮制品粉末颜色与成分含量之间具有一定相关性,能够作为微波炮制过程中监测炮制品质量评价的依据.
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关黄柏醇提部位化学拆分组分分析及其对热证大鼠的影响
目的:探讨关黄柏醇提部位化学成分拆分的合理性及各拆分组分对热证大鼠的作用.方法:选用95％乙醇提取,结合乙酸乙酯萃取、大孔吸附树脂和阳离子交换树脂等处理对关黄柏醇提部位化学组分进行拆分,拆分组分采用UPLC-Q-TOF/MS分析并进行主成分分析;采用左甲状腺素钠片诱导大鼠热证模型,观察各拆分组分对热证大鼠中枢神经递质及能量代谢相关物质含量的影响.结果:关黄柏经过95％乙醇提取、乙酸乙酯萃取、大孔树脂和阳离子交换树脂处理得到生物碱组分、非生物碱组分和乙酸乙酯组分,产率分别为0.65％,4.70％,2.50％;主成分分析各拆分组分分布集中在非常明显的不同区域上,各组分在成分组成上存在非常明显的差别,各拆分组分间主要药效成分基本无交叉;关黄柏醇提部位各拆分组分可在不同程度上降低热证大鼠血清及肝脏中与中枢神经递质及能量代谢相关的递质、激素、酶类的含量,改善热证大鼠中枢神经递质释放和能量代谢.结论:关黄柏醇提部位发挥“寒”药性的药效物质基础主要为生物碱组分和乙酸乙酯组分.
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聚维酮联用轻质碳酸钙用于槲皮素固体分散体的制备及评价
目的:为提高槲皮素的稳定性及溶出度,以聚乙烯吡咯烷酮(PVP)联用轻质碳酸钙(PCC)为载体制备槲皮素固体分散体.方法:采用溶剂法制备固体分散体,以电子扫描显微镜法、差示扫描量热法对槲皮素固体分散体微观结构、物理特征等进行表征分析,利用小杯法考察槲皮素固体分散体的体外溶出行为,通过稳定性影响因素试验考察其稳定性.结果:固体分散体中槲皮素在载体中以无定形状态分散;在15 min时,槲皮素固体分散体[药质比1∶3,PVP-PCC(2∶1)]的药物累积释放率＞90％;稳定性影响因素试验表明固体分散体中药物不受强光、高湿、高温条件的影响.结论:PVP联用PCC作为混合载体所制备的槲皮素固体分散体具有速释效果,能显著改善槲皮素的溶出行为,且稳定性良好.
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不同处理参数对丹参干制效率及活性成分含量的影响
目的:研究不同根径及切片厚度对丹参干制效率及有效成分含量的影响.方法:对不同根径、不同厚度的丹参进行干制,利用HPLC测定不同干制条件下丹参中有效成分的含量,脂溶性成分的色谱条件为流动相乙腈-0.2％乙酸水溶液,检测波长270 nm;水溶性成分的色谱条件为流动相乙腈-0.2％甲酸水溶液,检测波长286 nm.结果:同一直径的丹参,切片厚度越小干制效率越高.在水溶性成分中,当迷迭香酸含量高时,丹参根径0.3 ～0.4 cm,切片厚度0.2～0.3 cm;当丹酚酸B含量高时,丹参根径处于0.4～0.5 cm,切片厚度0.2～0.3 cm.在脂溶性成分中,当二氢丹参酮含量高时,丹参根径0.4～0.5 cm,切片厚度0.1 ～0.2 cm;当隐丹参酮含量高时,丹参根径0.3 ～0.4 cm,切片厚度0.1～0.2 cm;当丹参酮Ⅰ和丹参酮ⅡA含量高时,丹参根径0.4～0.5 cm,切面厚度0.2～0.3 cm.结论:选用直径0.4～0.5 cm和切片厚度0.2～0.3 cm的丹参切片进行干制,能大程度地保证药材品质,为丹参饮片的批量生产和干制工艺的优化提供了理论依据.
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PLA-α-细辛脑纳米粒的制备、表征及其对鼻黏膜的毒性
目的:表征聚乳酸-α-细辛脑(PLA-α-细辛脑)纳米粒,评价其鼻腔给药后鼻黏膜毒性,为其通过鼻腔给药方式用于体内的研究提供基础.方法:采用有机溶剂挥发法将α-细辛脑制备成PLA-α-细辛脑纳米粒,通过粒径分布、载药量和包封率评价纳米粒的工艺条件;红外光谱,差示扫描量热分析,X射线衍射分析及体外溶出试验分析药物在纳米粒中的分布状态;鼻纤毛毒性及鼻黏膜病理切片研究PLA-α-细辛脑纳米粒混悬液鼻腔给药后的鼻黏膜毒性.结果:α-细辛脑纳米粒平均粒径265.4 nm,多分散系数(PDI)0.038,载药量12.40％,包封率55.86％,α-细辛脑以分子状态分散或非晶型状态存在于PLA载体中,体外释放包括速释和缓释,呈双相动态,PLA-α-细辛脑纳米粒混悬液鼻腔给药后对鼻黏膜组织无明显的毒性作用.结论:有机溶剂挥发法制备的PLA-α-细辛脑纳米粒表征与鼻黏膜毒性试验结果表明该制剂适合于鼻腔给药.
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参苓白术散加减对比西药治疗溃疡性结肠炎的疗效和安全性Meta分析
通过探讨参苓白术散加减治疗溃疡性结肠炎(UC)的有效性和安全性,为临床推广提供科学依据.计算机检索CNKI,CBM,万方,维普等数据库,纳入参苓白术散加减对比单用西药治疗溃疡性结肠炎的随机对照试验文献(randomized control trials,RCTs),用Cochrane评价方法进行风险偏倚评估;收集纳入研究的有效率、主要症状(腹泻、腹痛、便脓血、发热)的改善时间和肠镜下黏膜疗效,并进行Meta分析.本研究共纳入13篇RCTs,总例数1 285例,参苓白术散组659例,单用西药组598例.对比单用西药,参苓白术散加减有较高临床疗效(RR=1.17,95％CI[1.13,1.22],P＜0.001),能明显缩短腹泻、腹痛、便脓血、发热症状的改善时间,其合并效应量分别为(RR=-12.32,95％ CI[-14.27,-10.37],P＜0.001),(RR=-8.06,95％CI[-9.88,-6.24],P＜0.001),(RR=-9.89,95％CI[-10.77,-9.00],P＜0.001),(RR=-8.29,95％CI[-9.59,-6.98],P＜0.001),减少不良反应事件的发生(RR =0.06,95％CI[0.01,0.40],P=0.004).参苓白术散加减治疗UC的肠镜下黏膜疗效比较没有统计学意义.对比单用西药,参苓白术散加减治疗溃疡性结肠炎有更好的疗效和安全性,适合临床推广使用,但由于纳入文献数目较少,质量较低,需要高质量的大样本双盲随机对照试验的支持.
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纪立金教授治疗肠易激综合征医案的用药规律探究
目的:总结纪立金教授在临证时治疗肠易激综合征的用药规律,以便更好地指导临床,传承纪教授临证思路.方法:收集纪立金教授2015-2016年2年间的临床诊疗医案167人次,共382诊次,构建纪教授医案数据库,应用MedcaseV3.2,运用加强关联规则运算模型、药物聚类分析模型等运算方法对纪立金教授医案进行分析总结,探讨纪立金教授在遣方用药时的思想.结果:数据专库中纳入临证医案382诊次,涉及中药158味,单处方药均数为13次;高频药物依次为柴胡、黄芩、半夏、党参、苍术、厚朴、陈皮、黄连等药物;关联规则分析发现常用的药物搭配多以小柴胡汤、平胃散、半夏泻心汤为治疗基本方.涉及药性类别前8类依次为化湿、补虚、理气、解表、清热、收涩药等.结论:纪立金教授在治疗肠易激综合征时,遣方用药多以和解少阳枢机健脾燥湿、调畅气机为主,兼顾热邪、湿邪、痰邪、气滞、食滞等病理因素合理用药,用药平和而不伤正气.
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金银花、连翘对甲型H1N1流感免疫调节通路影响的生物信息学分析
目的:基于生物信息学方法分析金银花、连翘对甲型H1N1流感免疫调节通路的影响.方法:在台湾中医药资料库,PubChem及Gene公众网络平台数据库查找金银花、连翘的靶蛋白及甲型H1N1流感相关基因,运用生物信息软件对检索到的数据集进行分析,解读金银花、连翘单用和连用对甲型H1N1流感相关的免疫调节生物通路的影响.结果:金银花相关靶蛋白共16个,连翘相关靶蛋白共8个,甲型H1N1流感相关基因32个;生物信息分析发现金银花和连翘有各自作用的特异性的免疫调节通路;对于巨噬细胞中白介素-12信号的生成通路和白介素-8信号通路,二者作为药对使用后,代表药物靶蛋白与生物通路相联性的-log P大于单独使用金银花或连翘;金属蛋白酶家族(MMPs)参与了多数金银花特异性作用的通路,蛋白激酶C-α(PRKCA)参与了连翘特异作用的通路.结论:对于甲型H1N1流感相关的免疫通路,金银花和连翘有各自的调节特点,作为药对使用对对巨噬细胞中白介素-12信号的生成通路和白介素-8信号通路调节更有优势,MMPs和PRKCA可能是金银花和连翘分别作用于免疫通路的关键蛋白.
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基于关联规则和熵聚类的中医经方治疗抑郁症用药规律
目的:基于中医传承辅助平台(V2.5)软件,探讨中医经方治疗抑郁症的用药规律.方法:收集中国期刊全文数据库(CNKI),中文科技期刊数据库(VIP)和万方数据库发表的中医经方及其化裁治疗抑郁症的文献资料,时间设定为1986年1月至2016年12月,将所得数据规范完成后,输入中医传承辅助平台(V2.5)软件,建立数据库,运用中医传承辅助系统中的关联规则、改进的互信息法以及复杂系统熵聚类等无监督数据挖掘方法,分析治疗抑郁症经方中常用的药物、核心组合及发现新方.结果:筛选出符合条件的运用中医经方治疗抑郁症的发表文献共461篇,其中包含119首方剂,涉及中药155味,对其进行分析,发现方剂中出现有35味中药高频应用,频次前5位的中药为炙甘草、大枣、柴胡、半夏、白芍.通过关联规则挖掘出核心组合25个,通过聚类分析得到新方3个.结论:通过中医传承辅助平台(V2.5)对治疗抑郁症的中医经方进行分析,发现运用中医经方治疗抑郁症用药频次较高的中药,大多为辛甘温之品,归经于心、脾胃、肝、肾经的药物频率明显较高,其中尤以人心经为多,这些高频中药大多有益气健脾、宁心安神、行气解郁的功效.经方治疗抑郁症注重通阳气、养心气、疏肝气、健脾气,为临床辨治抑郁症提供了参考.
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基于生物信息学的桂枝芍药知母汤治疗RA的作用机制
目的:运用生物信息学分析方法探究桂枝芍药知母汤(GZSYZMT)治疗类风湿性关节炎(RA)的潜在作用机制.方法:利用中药综合数据库(TCMID),草药成分靶点数据库(HIT),台湾中药数据库(TCM Database@Taiwan)查找GZSYZMT中每味中药的活性成分及其靶蛋白,从国家生物技术信息中心(NCBI)获取RA的相关靶点基因;将上述数据集导入装载ReactomeFIViz app 5插件的Cystoscape 3.2.1软件,分别构建GZSYZMT分子相互作用网络和RA靶点相互作用网络,分析其生物学过程和生物学功能;对比分析两者的分子网络和主要生物学过程,结合相关生物学信息探讨GZSYZMT治疗RA的作用机制.结果:GZSYZMT和RA的生物学过程和功能均与免疫反应、炎症反应、细胞信号转导、细胞增殖与凋亡相关;共同交联靶分子包括IL-2,HRAS,IL-6,CD14,CD40,PRKCB,BTK等37个,共同生物学通路包括toll-like receptor signaling pathway,NF-κB signaling pathway,MAPK signaling pathway,TNF signaling pathway,NOD-like receptor signaling pathway等35对.结论:基于生物信息学的分析方法可预测GZSYZMT治疗RA的作用机制;GZSYZMT可能通过调控IL-2,HRAS,IL-6,CD14,CD40等多个靶点,TLR-NF-κB信号通路,TLR-MAPKs信号通路,TNF信号通路,NLR信号通路等多个途径发挥治疗RA的作用.
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均匀设计-效应面法优化萆薢分清直肠凝胶剂处方及其药代动力学考察
目的:采用均匀设计-效应面法优化草薢分清直肠凝胶剂的处方,对比该复方口服和直肠给药后在家兔体内的药动学过程,为该复方的现代制剂开发提供参考.方法:以外观、均匀度、黏稠度及pH为综合考察指标,以卡波姆940用量、丙三醇与丙二醇的用量比和NaOH用量为考察因素,采用均匀设计-效应面法优化萆薢分清直肠凝胶的处方.采用HPLC检测口服和直肠给药后血浆中甘草次酸的浓度,以3P97软件计算药动学参数,评价口服和直肠给药后的体内药动学过程.结果:优处方为1.5％卡波姆940,8％丙三醇,2％丙二醇,1％ NaOH,0.03％尼泊金乙酯.直肠给药的药动学参数为药峰浓度(Cmax) (35.144 7 ±5.272 4) mg·L-1,达峰时间(Tmax) (27.114 6±13.358 7) min,药时曲线下面积(AUC0-6 h)(5 125.468 5±368.745 9)mg·min·L-1.结论:均匀设计-效应面法适用于萆薢分清直肠凝胶剂的处方优化,建立的数学模型具有较好的预测性,所得凝胶外观细腻、黏度适宜.萆薢分清直肠凝胶剂直肠给药后主要成分在体内吸收迅速、生物利用度较高.
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基于柴胡皂苷抗溃疡药效成分的药动药效相关性
目的:明确柴胡皂苷发挥治疗胃溃疡作用的化学成分,开展柴胡皂苷治疗胃溃疡药动药效相关性研究,为探讨其药效物质及作用机制提供前期实验基础.方法:采用高分辨质谱,一、二级质谱解析方式解析柴胡皂苷化学成分,同时取SD大鼠灌胃柴胡皂苷提取液(300 mg·kg-1)后不同时间点采血,采用高效液相色谱法对其入血成分柴胡皂苷B2,柴胡皂苷D进行血药浓度测定;分别对柴胡皂苷B2,柴胡皂苷D血药浓度与人体胃黏膜上皮细胞体外增殖率,超氧化物歧化酶(SOD),丙二醛(MDA)进行时效相关性分析,评价柴胡皂苷作用特点及可能机制.结果:柴胡皂苷抗溃疡化学成分主要为柴胡皂苷A,D,B2,I,E,prosaikogenin D,F,G;柴胡皂苷含药血浆与损伤的人体胃黏膜上皮细胞增殖率具有良好的相关性,其吸收也与血中MDA,SOD水平呈一定的时效关系.结论:该研究明确了柴胡皂苷发挥治疗胃溃疡作用的化学成分,探讨了入血成分与药效相关性,其作用机制可能与MDA,SOD蛋白调控有关.
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多茎滇重楼地上叶和茎中主要次生代谢产物的积累
目的:探讨不同居群多茎滇重楼叶和茎中主要次生代谢产物的积累规律.方法:采用HPLC测定不同居群多茎滇重楼叶和茎中主要活性成分重楼皂苷Ⅰ,Ⅱ,Ⅵ,Ⅶ的含量,流动相水(A)-乙腈(B)梯度洗脱(0～40 min,30％ ～60％ B;40～50 min,60％ ～ 30％ B),检测波长203 nm,运用单因素方差分析、聚类分析和HPLC图谱分析探讨其次生代谢产物的积累规律.结果:不同居群多茎滇重楼叶中重楼皂苷Ⅱ,Ⅵ,Ⅶ含量及总含量具有显著差异;除个别居群外,不同居群多茎滇重楼茎中重楼皂苷Ⅶ含量差异较小.叶中主要检测到重楼皂苷Ⅱ和Ⅶ,茎中只检测到重楼皂苷Ⅶ.多茎滇重楼和滇重楼比较的地上部分叶和茎HPLC图谱相似度均较低,6个居群叶中重楼皂苷Ⅰ,Ⅱ,Ⅵ,Ⅶ总质量分数达到了2015年版《中国药典》规定的限量标准.结论:多茎滇重楼与滇重楼地上部分叶和茎存在一定差异,但多茎滇重楼叶中有效物质成分较高,该研究为多茎滇重楼地上部分叶和茎的开发利用提供了一定的参考依据.
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二陈汤加味对COPD急性期患者CC16,SP-D及HAT/HDAC的影响
目的:观察二陈汤加味对COPD急性期加重期(acute exacerbation period of COPD,AECOPD)患者血浆、呼气冷凝液(exhale breath condensat,EBC)中克拉拉细胞蛋白(Clara cell protein,CC16),肺表面活性蛋白-D(pulmonary surfactant associated protein-D,SP-D)含量及外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)中组蛋白乙酰基转移酶(histone acetyl transferase,HAT)及组蛋白去乙酰基酶(histone deacetylase,HDAC)活性的影响,评价二陈汤加味对AECOPD的作用及机制.方法:选取符合纳入标准AECOPD患者200例,随机分成对照组和治疗组,每组100例.两组均在西医常规治疗的基础上,对照组给予安慰剂,治疗组接受二陈汤加味治疗,疗程14 d.检测肺功能,酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定血浆,EBC中白细胞介素-17(interleukin-17,IL-17),C反应蛋白(C-reactive protein,CRP),CC16,SP-D及PBMC中HDAC1,HDAC2浓度.酶联免疫荧光法测定PBMC中HAT及HDAC活性.结果:与对照组治疗后比较,治疗组血浆及EBC中CRP,IL-17,CC16和SP-D水平均明显降低(P ＜0.05,P＜0.01),PBMC中HAT活性明显降低(P＜0.05),HDAC活性,HDAC2含量均明显增高(P＜0.05).结论:二陈汤加味可能调整HAT/HDAC的平衡,发挥抗炎作用,保护气道和肺的结构与功能.
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二陈汤加味对COPD大鼠转化生长因子-β1,组蛋白去乙酰化酶2基因表达的影响
目的:观察二陈汤加味对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠肺组织中转化生长因子-β1(TGF-β1)及其受体(TGF-βRⅡ)基因表达,外周血单个核细胞(PBMCs)中组蛋白去乙酰化酶2(HDAC2)基因表达及活性的影响.方法:采用烟熏加脂多糖方法制备COPD大鼠模型.随机分为正常组、模型组、二陈汤加味高、中、低剂量组(20,10,5 g-kg-1).正常组、模型组灌胃生理盐水(10 g·kg-1),二陈汤加味高、中、低剂量组分别灌胃,连续14 d.荧光酶联免疫法测定PBMCs中HDAC2活性,酶联免疫吸附测定(ELISA)法测定肺组织匀浆中TGF-β1及PBMCs中HDAC2含量;实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测肺组织匀浆中TGF-β1 mRNA及PBMCs中HDAC2 mRNA表达;免疫组化检测TGF-β1与TGF-βRⅡ蛋白在肺组织的原位表达,光镜观察组织结构.结果:与正常组比较,模型组大鼠肺组织匀浆中TGF-1含量升高(P＜0.05);肺组织中TGF-β1 mRNA,TGF-β1与TGF-βRⅡ蛋白表达均显著增强(P＜0.01);模型组大鼠PBMCs中HDAC2 mRNA表达、含量及其活性均明显减低(P＜0.05,P＜0.01),差异均有统计学意义.与模型组比较,二陈汤加味高、中剂量组肺组织匀浆中TGF-β1 mRNA表达(P＜0.01)和TGF-β1蛋白含量均显著降低(P＜0.05,P＜0.01),免疫组化检测肺组织中TGF-β1与TGF-βRⅡ蛋白表达均显著弱于模型组(P＜0.01),PBMCs中HDAC2 mRNA表达、含量及其活性均升高(P ＜0.05,P＜0.01),肺组织结构明显改善.结论:二陈汤加味对COPD有抗炎作用.其机制可能与增强PBMCs中HDAC2基因表达,提高HDAC2活性,抑制TGF-β1及其受体基因的表达有关.
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二陈汤加味对慢性阻塞性肺疾病大鼠信号转导蛋白Smad3,4,6,7基因表达的影响
目的:观察二陈汤加味对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠肺组织中信号转导蛋白Smads的影响,探讨二陈汤加味对COPD作用的机制.方法:将50只SD大鼠随机分5组,每组10只动物,包括正常组、模型组、二陈汤加味低、中、高剂量(5,10,20 g·kg-1 ·d-1)组.以烟熏加气管滴注脂多糖(LPS)的方法制备COPD大鼠模型.建模后,治疗组灌胃给药,正常组及模型组灌胃等量生理盐水.评价肺功能,实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测肺组织中Smad3,Smad4,Smad6和Smad7mRNA表达,免疫组织化学检测大鼠肺组织中Smad3,Smad4,Smad6,Smad7蛋白表达.结果:与正常组比较,模型组用力肺活量(forced vital capacity,FVC),第1秒末时间肺活量(FEV1)和FEV1/FVC均显著降低(P＜0.01);模型组肺组织Smad3和Smad4 mRNA的表达量升高(P＜0.05),Smad6和Smad7 mRNA表达均降低(P＜0.05);Smad3和Smad4蛋白的表达显著增强(P＜0.01),Smad6和Smad7蛋白的表达显著减弱(P＜0.01).与模型组比较,二陈汤加味中、高剂量组FVC,FEV1和FEV1/FVC均显著提高(P＜0.01);Smad3和Smad4 mRNA的表达量均下降(P＜0.05),Smad6和Smad7 mRNA的表达量升高(P＜0.05);Smad3,Smad4蛋白的表达显著减弱(P＜0.01),Smad6,Smad7蛋白的表达显著增强(P＜0.01).结论:二陈汤加味能有效抑制细支气管结构重塑作用.其机制可能是通过降低Smad3,提高Smad6和Smad7,协调Smad4基因表达,抑制细支气管及肺组织结构重塑.
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二陈汤加味对COPD患者缺氧诱导因子-1α及沉默信息调节因子1的影响
目的:观察二陈汤加味对慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者的肺功能、氧化应激、缺氧诱导因子-1α(Hif-1α)及沉默信息调节因子1(Sirt1)的影响,评价二陈汤加味对COPD患者抗氧化损伤及抗炎的作用与机制.方法:选取符合纳入标准的急性加重期和稳定期COPD患者各120例,各期分成对照组和治疗组.各组均在西药治疗的基础上,治疗组给予二陈汤加味,疗程14 d.检测肺功能,测定血液酸碱度(pH),氧分压(PaO2),二氧化碳分压(PCO2),氧饱和度(SaO2).紫外分光光度计检测血清还原型谷胱甘肽(GSH),超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量,酶联免疫吸附法(ELISA)测定血浆白细胞介素(interleukin)-6,IL-1β,肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和C反应蛋白(CRP)含量,实时荧光定量PCR检测外周血单个核细胞(PBMCs)中Hif-1α和Sirt1 mRNA表达,ELISA法测定PBMCs中HIf-1α和Sirt1含量,荧光酶联免疫吸附法测定PBMCs中Sirt1活性.结果:急性加重期和稳定期治疗后,与对照组比较,治疗组1 s用力呼气容积(FEV1),1 s用力呼气量/用力肺活量(FVC)均显著增大(P＜0.01),治疗组总有效率明显高于对照组(P＜0.05),治疗组PaO2,SaO2均显著增加,PCO2显著降低(P＜0.01),SOD,GSH-Px活性均显著升高(P＜0.01),MDA含量显著降低(P＜0.01),治疗组PBMCs中Sirt1 mRNA表达,Sirt1含量及其活性均明显增加(P＜0.05,P＜0.01),IL-1β,IL-6,TNF-α,CRP,Hif-1α含量,Hif-1α mRNA表达均明显降低(P＜0.05).结论:二陈汤加味对COPD有抗氧化损伤、抗炎作用.其机制可能为增强Sirt1基因的表达,提高Sirt1活性,抑制Hif-1α mRNA表达,减少IL-1β,IL-6,TNF-α,CRP合成与释放,以保护肺组织、改善肺功能.
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二陈汤加味对慢性阻塞性肺疾病急性加重期老年患者免疫功能及CCL18,CC16,IL-8和sICAM-1的影响
目的:观察二陈汤加味对慢性阻塞性肺疾病急性加重期(acute exacerbation period of COPD,AECOPD)患者肺功能、细胞和体液免疫功能,细胞趋化因子18(chemoattractant cytokine 18,CCL18),白细胞介素-8(interleukin-8,IL-8),Clara细胞蛋白(Clara cell protein,CC16)和可溶性细胞间黏附分子-1(soluble intercellular adhesion molecular-1,sICAM-1)的影响.方法:选取符合纳入标准的老年AECOPD患者120例,分为治疗组与对照组,每组60例.两组均在常规治疗的基础上,治疗组给予二陈汤加味,每日2次,疗程14 d.14 d后评价两组患者临床疗效,检测肺功能、免疫球蛋白、外周血淋巴细胞亚群,酶联免疫吸附试验(ELISA)测定患者血浆和呼气冷凝液(exhale breath condensat,EBC)中CCL18,CC16,IL-8,sICAM-1浓度.结果:与对照组治疗后比较,治疗组总有效率高于对照组(P＜0.05);治疗组1 s用力呼气容积(FEV1),1 s用力呼气量/用力肺活量(FVC)均增大(P＜0.01);炎细胞总数、中性粒细胞数、单核细胞和淋巴细胞均减少(P＜0.05).与本组治疗前比较,IgG,IgA,IgM无明显差异;CD3+,CD4+,CD4 +/CD8+均增加,CD8+降低(P＜0.05);血浆CCL18,CC16,IL-8,sICAM-1均降低(P＜0.05),EBC中CCL18,CC16均降低(P＜0.05).结论:二陈汤加味可调节T淋巴细胞亚群功能,增强细胞免疫,降低老年AECOPD患者血浆,EBC中CCL18,CC16,IL-8,sICAM-1水平,对老年AECOPD有一定的抗炎作用.
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